Sunteți pe pagina 1din 11

Crioconcervarea

ovocitelor la mamifere
Dumitrescu Paul
B.A.

Crioconservare ovocitului este un


proces n care sunt extrase ovule
de la o femel, congelate i
stocate. Mai trziu pot fi
decongelate, fertilizate , i
transferate n uter ca embrioni.

Istoric
Din 2500 BC primele civizaii foloseau
frigul n scopuri medicinale
Crioconservarea de celulue i esuturi
ns nu a devenit realitate dect la
mijlocul secolului 20
Prima crioconservare a spermei n 1953
i de embrioni treizeci de ani mai trziu
n 1986 apare prima sarcin din lume
folosind ovocite congelate anterior.

Principiul metodei
expunerea iniial la ageni
crioprotectori
rcire la temperaturi sub zero
depozitare
decongelare
diluarea i eliminarea CPA
revenire la mediul fiziologic

Congelarea lent
ntrerupt
Const ntr-o rat de rcire iniial
controlat lent, la temperaturi sub
zero, urmat de rcirea rapid
scufundnd proba n azot lichid (LN2)
pentru depozitare

Vitrificarea
Vitrificara, crioconservarea fr formare
de ghea, este un proces de conversie
a unei soluii ntr-o stare solid amorf
ca de sticl liber de orice structuri
cristaline. Acest lucru poate fi realizat
prin utilizarea unei rate ridicate de
rcire cu concentraii ridicate de ACP.
Astfel de concentraii mari ACP poate fi
n detrimentul ovocitei, provocnd att
modificri biochimice i a prejudiciului

strategii pentru a
contracararea toxicitii
(1)utilizarea unei combinaii de substane dizolvate
APC, fiecare dintre acestea fiind sub o concentraie
toxic, dar n combinaie ar permite vitrificarea;
(2) adugarea de ACP impermeabile, cum ar fi
dizaharide (zaharoz sau trehaloz) sau molecule cu
mas molecular mare (Ficoll, polivinilalcool,
polivinilpirolidon)
poate
reduce
semnificativ
cantitatea de ACP permeabil necesar,
(3) utilizarea unor compui care contracareaz
toxicitatea altor ageni (de exemplu acetamid cu
DMSO;
(4) reducerea timpului in care i / sau temperatura la
care embrionii sunt expui la CPA.

Vitrificarea ultrarapid
Reducerea concentraiilor de solutii, n
combinaie cu rate de rcire mai mari
este o strategie eficient pentru a realiza
vitrificarea ovocitelor. Pentru a realiza
rate foarte ridicate de rcire, volumul
soluiei de vitrificare ar fi minimizate prin
utilizarea recipientelor special concepute:
paiete, reelele de cupru prin microscopie
electronica, crio-bucle, criotopi i prin
vitrificare solid de suprafa

Criterii pentru a evalua


calitatea ovocitelor
dezgheate

Prezena sau absena degenerrii


Daunele membranei
Examinarea axul meiotic
Producerea urmai viabili

Bibliobrafie:

1. https://en.wikipedia.org/wiki/Oocyte_
cryopreservation
2. http://www.usab-tm.ro/utilizatori/Z
OOTEHNIE/file/REVISTA%202011/vol%20
44/1/biotehnologii/Cean%202.pdf
3. https://szie.hu//file/tti/archivum/Jun_L
iu_ert.pdf
4. http://www.socrei.org/uploadedFiles
/ASRM_Content/News_and_Publications
/Practice_Guidelines/Committee_Opin