Facultatea tiina i Ingineria Alimentelor Laborator Igiena

A AP PR RE EC CIIE ER RE EA AG GR RA AD DU UL LU UII D DE EC CO ON NT TA AM MIIN NA AR RE EM MIIC CR RO OB BIIA AN N A A S SU UP PR RA AF FE E E EL LO OR RD DE EL LU UC CR RU U

Consideraii generale Controlul eficienei dezinfeciilor se bazeaz pe stabilirea prezenei sau absenei unor microorganisme. Pentru controlul eficienei dezinfeciei suprafeelor se utilizeaz dou procedee de control bacteriologic, care mai sunt numite i teste de sanitaie: testul bacteriilor coliforme i testul stafilococilor. n ultimii ani au aprut numeroase propuneri de teste simplificate i mai rapide pentru aprecierea gradului de contaminare a suprafeelor: Hygicult (Enterobacteriaceae; Yeast & Fungi; Total Bacterial Count); Hycheck; Petrifilm (E. coli Count Plates; Coliform Count Plates), Chromocult Coliformen Agar, Envirocheck Rodac, TMT etc. (Sala, 2000). Hygicult se prezint sub form de lamele, din material plastic, acoperite pe o parte cu mediu de cretere i nchise ntr-o fiol. Petrifilmul este o pelicul din material plastic acoperit cu un mediu de cultur deshidratat i un agent de gelificare care este solubil n ap rece. Se poate utiliza pentru determinarea numrului total de microorganisme aerobe mezofile, a bacteriilor coliforme i a E. coli din lapte, produse lactate, dar i de pe suprafee. Petrifilmele pentru determinarea bacteriilor coliforme conine sruri biliare, rou violet, lactoz. Este destinat pentru determinarea numrului total de microorganisme, a enterobacteriaceelor, drojdiilor i a mucegaiurilor). Citirea rezultatelor se face prin compararea cu o scar etalonat. n ultimii ani au fost realizate mai multe tipuri de aparate pentru detecia prezenei microorganismelor pe suprafeele controlate. Dintre acestea sunt utilizate mai ales trusa LIGHTNING (Ehrenfeld, 1997) i trusa HY LITE (Merck), care se bazeaz pe fenomenul de bioluminescen. Bioluminescena permite evaluarea indirect a cantitii de ATP n prezena unei enzime substrat specifice i anume sistemul luciferin luciferaz. Luciferina reacioneaz cu ATP n prezena ionilor de Mg2+ i a luciferazei. n urma reaciei rezult o emisie luminoas proporional cu concentraia n ATP. Metoda este eficient, dar extrem de costisitoare, fiind recomandat pentru industria farmaceutic i unele sectoare de industrie alimentar. Pentru aprecierea strii de igien a suprafeelor de lucru, ustensilelor, ambalajelor, etc., se folosete examenul microbiologic aplicnd tehnici de lucru bazate pe recoltri fcute prin metoda tamponului, Hygiene SwabCheck i nsmnri n medii nutritive.

Facultatea tiina i Ingineria Alimentelor Laborator Igiena M Ma atte er riia alle en ne ec ce es sa ar re e Tampon de vat Tamponul de vat se pregtete nfurnd o bucat de vat pe o lungime de 2 cm, la captul unei tije metalice cu lungimea de 20 25 cm ca n figur.

Tampon pentru recoltare Suprafaa delimitat de ablon (sgeile indic direcia de tergere)

Tija se poate confeciona din srm, lemn i material plastic. Tamponul se sterilizeaz ntr-o eprubet. abloane Se confecioneaz din tabl cu partea decupat sub form de ptrat de cu latura de 5 cm. abloanele se sterilizeaz mpachetate n hrtie, sau n anumite situaii cnd se fac recoltri de multe probe i nu se dispune de multe abloane, acestea pot fi refolosite n urma unei sterilizri efectuate atent direct la flacr. Medii de cultur Ca medii de cultur se folosesc PCA (Plate Count Agar) pentru cultivarea bacteriilor i MEA (Malt Extract Agar) pentru drojdii i mucegaiuri. M Mo od du ull d de e llu uc cr ru u Se umezete tamponul de vat n lichid de umectare steril, ndeprtnd excesul prin presarea tamponului pe peretele eprubetei. Apoi dup ce ablonul a fost aezat pe suprafaa luat n analiz, se terge cu tamponul suprafaa delimitat de ablon att pe direcie longitudinal ct i transversal. n acelai timp tamponul se rsucete astfel ca recoltarea s se fac pe toate feele acestuia. Dup recoltarea probei, se introduce tamponul n ser fiziologic i se agit pentru a se favoriza trecerea celulelor microbiene n lichid. Apoi se pot face inoculri, prin metoda ncorporrii microorganismelor n medii nutritive. Dup o termostatare corespunztoare, se numr coloniile dezvoltate n cutiile Petri i se stabilete numrul de microorganisme pe 1 cm2 suprafaa luat n analiz. Rezultatul obinut se interpreteaz n raport cu normele n vigoare. O suprafa bine splat i dezinfectat n condiiile unei fabrici nu trebuie s prezinte mai mult de 1 microorganism/cm2.

Facultatea tiina i Ingineria Alimentelor Laborator Igiena Teste de sanitaie - Hygiene SwabCheck Sunt compuse din beior de recoltare si tub cu mediu special cu indicator de culoare, totul in ambalaj individual steril. Dup recoltare de pe suprafaa de cercetat, beiorul se introduce in tub si se termostateaz dup prescripia fiecruia (2448 ore). Chiar si o singura bacterie este suficienta pentru a provoca schimbarea culorii mediului (asta nseamn ca SwabCheck-urile sunt aproape de 1000 de ori mai sensibile dect metoda convenionala ATP). Sunt uor de utilizat. Testele arat o evidenta schimbare de culoare de la rou la galben. Timpul scurs pentru aceasta schimbare este o indicaie a nivelului de contaminare. Aceasta metod trebuie utilizata adiional. Testul rapid de igiena este un test rapid care va detecta contaminarea grosiera cu bacterii si fungi a suprafeelor de lucru, echipamentelor si a altor locuri de unde se iau probe. Similar exista teste specifice pentru Listeria, E. coli, Numr Total Microorganisme, Drojdii si Mucegaiuri. Se incubeaz si acestea dar timpul este mai scurt dect determinarea cantitativa clasica, informaia se poate percepe mai repede dect 24-48 ore (timp prevzut pentru fiecare tip de test).

Facultatea tiina i Ingineria Alimentelor Laborator Igiena

ANEXA

x Rezultatele unei operaii corecte de splare i dezinfecie a unui echipament

x Rezultatele unei operaii incorecte de splare i dezinfecie a unui echipament