Diagnosticul faringitelor streptococice i non streptococice Examenul microbiologic uzual al tamponului faringian vizeaz depistarea i identificarea streptococilor Beta

hemolitici i a altor bacterii patogene Exudat nazo faringian Prelevarea exudatului faringian se face dimineaa, pe nemncate si fara toaleta prealabila a gurii, pe tampoane sterile, insistand asupra zonelor de eritem, punctelor de puroi, pseudomembranelor. e recolteaz cel puin doua tampoane din fiecare zona si, in caz de suspiciune de difterie, trei tampoane. Probele se lucreaz in maximum ! ore de la recolta. "xamenul bacteriologic cuprinde urmtoarele etape #identice pentru exudatul nazal si cel faringian$% - se descarc un tampon pe un frotiu ce se va colora &ram - se insamanteaza un alt tampon pe urmtoarele medii% - geloza sange - cel mai indicat - mediu Pic' cu cristal violet #inhiba creterea tafilococilor ( pentru diagnosticarea treptococului ) hemolitic$ - mediu *hapmann pentru tafilococ - la indicaii speciale se descarc tamponul si pe mediul +.+.B.,.-., pentru Enterobacteriaceae + doua zi se face testul coagulazei pentru tafilococ, identificarea de grup a treptococilor prin latexaglutinare. in cazul prezentei de bacili gram (-), se face identificarea prin teste biochimice. /dentificarea pneumococului se realizeaz prin testul cu optochin. ,ot a doua zi se efectueaza antibiograma difuzimetrica standard. Pentru izolarea fungilor patogeni sau oportunisti se face insamantare pe geloza abourand la 01 o 23h. +spectul coloniilor, ca si testul filamentarii sunt suficiente pentru un diagnostic pozitiv prezumtiv de *andida albicans. - Incubarea culturilor ( aerob, peste noapte la 01 o*, cu prelungire pn la 23 ore dac la prima citire lipsesc coloniile beta hemolitice. - Citirea culturilor: Pentru izolarea Streptococului beta hemolitic de grup A se iau 4n considerare coloniile mici #5,6-7mm diametru$, transparente sau opace, 4ncon8urate de o zon clar de beta hemoliz. e verific pe frotiul colorat &ram dac coloniile luate 4n considerare sunt streptococi #coci gram pozitivi, dispui 4n lanuri$. 9iferenierea prezumtiv 4n streptococi de grup + sau non + se face prin testul sensibilitii la bacitracin. +ntibiograma nu este indicat 4n mod uzual, datorit meninerii nealterate a sensibilitii la Penicilin. /zolarea predominant i 4n cantitate mare de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa sau a tulpinilor de Enterobacteriaceae reflect disbioza oro-faringian a unor pacieni spitalizai, eventual sub antibioticoterapie, ori vrstnici i nu are 4n mod necesar samnificaie clinic. unt comunicate medicului curant. e efectueaza teste de identificare a germenilor izolati% coagularea plasmei, fermentarea manitei, teste biochimice pentru bacili gram negativi. e efectueaza antibiograma Teste biochimice i de patogenitate pentru stafilococ: Pigmentogene a Producerea hemoli ei ! se observ pe mediul geloz snge Coagularea plasmei: - pe lam, cu plasm proaspat, nediluat "ermentarea manitei: -

- pe mediul *hapman solid ( virarea culorii mediului de la roz la galben Determinarea catala ei: - soluie 0; peroxid de hidrogen - se prepar 4n 7-! ml ap o suspensie dens din cultura organismului testat. e adaug 7-! picturi din soluia 0; de ap oxigenat. e observ imediat i dup 6 minute apariia bulelor de gaz #reacie pozitiv$. : Testul de sensibilitate la #o$obiocin%: - 9ifereniaz Staphylococcus saprophyticus de ali stafilococi coagulzonegativi #Staphylococcus saprophyticus este rezistent la <ovobiocin$ Procedura: - se nsmneaz cu tamponul, ca pentru antibiograma difuzimetric, pe mediul Muller Hinton suspensia tulpinii testate ajustat la densitatea etalonului 0.5 Mc Farland - e depune n mijlocul ariei nsmnate un disc cu !o"obiocin - e incubeaz plcile peste noapte, la #$o% Citire i interpretare: - ensibilitate& zon de in'ibiie n jurul discului cu !o"obiocin ( )* - +ezisten& zon de in'ibiie n jurul discului cu !o"obiocin ,- )* : 6.3.3 Teste biochimice i de patogenitate pentru Streptococ: Testul de sensibilitate la Bacitracin: - pentru depistarea treptococului beta 'emolitic grup .. treptococul beta 'emolitic grup . este sensibil la /acitracin. Procedura: - se prele" cu ansa #01 colonii beta 'emolitice - e etaleaz inoculul pe 2 de plac cu geloz snge n striuri strnse 3i suprapuse n trei direcii - e plaseaz n centrul ariei nsmnate un disc de bacitracin - e incubeaz peste noapte, la #50#$o% Citire i interpretare : - discuri de bacitracin de 0,05 4g5disc6 test poziti" - zona in'ibiie (7 mm - discuri de bacitracin de 0,01 85disc6 test poziti" 0 orice zon de in'ibiie din jurul discului - discuri de bacitracin de 0,) 85disc test poziti" 0 o zon de in'ibiie ()) mm Testul de sensibilitate la Optochin: - pentru diferenierea pneumococului de ali streptococi, pneumococcul fiind sensibil la optoc'in - se folosesc discuri de 5 4g5 ml Procedura: - e nsmneaz n striuri dense, suprapuse n trei direcii pe cte un cadran al plcii cu agar0snge, 90# colonii din cultura prele"atelor monomicrobiene sau o singur colonie alfa0'emolitic din cea a prele"atelor polimicrobiene - e depune un disc de optoc'in n centrul fiecrei arii nsmnate - e incubeaz peste noapte la #$o% n atmosfer cu 5:%;9

Citire i interpretare& - Test negativ - absena in'ibiiei cre3terii - Test po itiv - zona de in'ibiie a cre3terii (-)1 mm Comunicarea re ultatului e!udatului ( se exprim 4n% Prezent streptococ Beta hemolitic, prezumtiv grup A sau non A, sau Absent streptococ Beta hemolitic.