Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Propolisul Si Extractele Propolisului PDF
Propolisul Si Extractele Propolisului PDF
Introducere
68
Propolisul i extractele de propolis
I. Noiuni generale despre propolis
69
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Cercettorii care au studiat albina Apis indica, Apis florea i Apis dorsata,
afirm c acestea nu propolizeaz. Acelai lucru se afirm i despre albina african.
n lucrarea sa intitulat n cutarea celor mai bune sue de albine: cltorii
concludente,[2] clugrul ADAM de la Mnstirea St. Mary, Buckfast, South
Devon, Anglia, arat c anumite rase de albine i n particular cele din zona Asiei
Mici manifest o tendin foarte puternic de propolizare.
De fapt, acesta vorbete de o albin galben frecvent ntlnit n regiunea
munilor Atlas i Sahara, cunoscut sub denumirea de Apis sahariensis. El
presupune c aceast albin a fost adus n Orientul Mijlociu de ctre evreii
emigrani. Vorbind despre albina autohton din Anatolia Central n Asia Mic,
unde iernile sunt foarte aspre, clugrul Adam spune c aceast albin, cunoscut
sub denumirea de Apis mellifera var. anatolica utilizeaz propolisul pentru
protecie la fel ca toate celelalte specii care fac acest lucru n zonele cu climat
foarte aspru. Tot el este cel care spune c :nu se poate spune c n Egipt albinele
nu propolizeaz. La Fayum unde se cresc albine italiene, am vzut interiorul
70
Propolisul i extractele de propolis
71
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
72
Propolisul i extractele de propolis
73
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
74
Propolisul i extractele de propolis
75
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
2. Compoziia chimic a propolisului
Tabel nr.1
Flavonoizi din propolis
Denumirea comun Denumirea biochimic
Flavone
Crizin 5,7-dihidroxiflavon
Tectocrizin 5-hidroxi-7-metoxiflavon
Galangin 3,5,7-trihidroxiflavon
Galangin-3-metil eter 5,7-dihidroxi-3-metoxiflavon
Acacetin 5,7-dihidroxi-4-metoxiflavon
Isalpinin 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavon
Kaempferol 3,5,7,4-tetrahidroxiflavon
Luteolin 5,7,3,4-tetrahidroxiflavon
Kaempferid (kaempferol-kaempferol-7,4-dimetil eter)
Rhamnocitrin 3,4,5-trihidroxi-7-metoxiflavon
Ermanin 5,7-dihidroxi-3,4-dimetoxiflavon
Pectolinarigenin 5,7-dihidroxi-4,6-dimetoxiflavon
Quercetin 3,5,7,3,4-pentahidroxiflavon
Quercetin-3,3-dimetil eter
Quercetin-3,7-dimetil eter
Betuletol
Apigenin 5,7,4-trihidroxiflavon
Apigenin-7-metil eter
Rhamnazin
Rhamnetin
Isorhamnetin
Alnusin
Fisetin
Flavanone
Alpinetin
Alnustinol
Pinocembrin
Pinostrobin
Pinobanksin
3-acetil-pinobanksin
pinobanksin-3-butirat
pinobanksin-3-hexanoate
pinobanksin-3-metil eter
sakuranetin
isosakuranetin 5,7-dihidroxi-4-metoxiflavanon
naringenin 5,7,4-trihidroxiflavanon
78
Propolisul i extractele de propolis
Conform studiilor lui PAPAY i col., (1985)[17] i DONADIEU (1994)
[18] flavonoizii din propolis pot fi clasai n:
Flavone:
acacetin
crizin
tectocrizin
apigenin
pectolinarigenin etc.
Flavonoli:
galangin
galangin-3-metil eter
isalpinin
kaempferid
kaempferol
quercetin
quercetin-3,3-dimetileter
rhamnocitrin
rhamnetin
isorhamnetin
Flavonone:
pinostrobin
sakuranetin
Flavononoli:
pinobanksin etc.
Datele din care rezult c flavonoidele din propolis sunt bine reprezentate
cantitativ, iar sub acest aspect ele capt importana unor componente principale,
cu proporii de 15-20%, au fost publicate abia recent (POLINICENCU i col.,
1981)[19]. Astfel de concentraii flavonoidice au fost determinate de autori i n
mostre reprezentative de propolis din Ungaria i Uruguay.
Crizina sau 5,7-dihidroxiflavona sau 5,7-dihidroxi-2-fenilcromona a fost
fost descoperit n 1927 de G.T.JAUBERT[20] att n propolis ct i n mugurii de
plop, ea fiind prezent, de asemenea, n miere i n cear. Cu toate c nu este
singurul flavonoid de culoare galben din amestecul prezent n propolis, cear,
miere fiind din punct de vedere cantitativ componenta majoritar a fost la
nceputuri singura semnalat i astfel culoarea galben a cerii de albine i a mierii
se atribuia numai crizinei.
Tectocrizina sau tectogenina, a crei prezen n propolis a fost semnalat
de G.T.JAUBERT [20] este 7-metil-eterul crizinei. n studiile ulterioare efectuate
79
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
asupra acestui compus au demonstrat proprietile sale diuretice, pentru care s-a
eliberat un brevet de invenie SUA din 1964, al firmei Laroche Navarron, autor
PERRAULT (1976) [21].
Galangina este flavonolul crizinei, adic 3-hidroxicrizina. Concentraia sa
n propolis o plaseaz alturi de crizin, ntre bioflavonoizii bine reprezentai
cantitativ. Ea a fost evideniat de VILLANUEVA i col., (1964) [22] iar n
mugurii de plop diferite specii de EGGER i col., (1969) [23].
Izalpinina a fost prima dat evideniat n propolis de VILLANUEVA i
col., n 1964 [22].
Pinocembrina i datoreaz numele descoperirii sale n mugurii speciei
Pinus cembra (Pinaceae) de ctre ERDTMAN (1946)[24]. Ca i crizina,
pinocembrina este prezent ntre componentele rinii de pe mugurii de plop. Ca
structur este flavanona corespunztoare crizinei.
Pinostrobina, descoperit n 1946 n mugurii speciei Pinus strobus apoi
separat i din specia Prunus avium (Rosaceae).
Pinobanksina este 3-hidroxi-pinocembrina, adic un flavanonol din seria
flavonoidelor specifice din propolis, caracterizate prin lipsa oricrei funciuni
fenolice pe inelul B. A fost descoperit n compoziia unor specii de Pinus ntre
care Pinus banksiana. Abia n 1979, SCHNEIDEWIND i col.,[25] o citeaz n
propolis.
3-acetatul de pinobanksin este la rndul su identificat n totalul
flavonoidic al propolisului i pare s nu fi fost identificat n vreo plant.
Exist opinia conform creia principiile active cel mai bine reprezentate
cantitativ i ntotdeauna prezente n propolis, implicit susceptibile de a da cele mai
constante i mai caracteristice efecte farmacologice ale acestui produs, sunt
bioflavonoidele care au ca particulariti de structur starea liber, de compui de
neglicozidai, precum i lipsa vreunei funcii fenolice n inelul B.
Este poate important de menionat faptul c toate aceste componente
menionate, fr excepie, se regsesc n compoziia chimic a multor specii de
Pinus, rspndite n cele mai ndeprtate i variate regiuni de pe glob i mai ales n
mugurii de pin, la rndul lor utilizai pretutindeni pentru proprieti terapeutice bine
cunoscute. Pe de alt parte, este cunoscut i utilizarea rinii unor muguri, ca cei
ai speciilor Populus, Prunus, ca materie prim pe care albinele o asociaz unor
ceruri i altor componente, la elaborarea propolisului. Este de asemenea e adugat
c i mugurii de plop sunt medicinali i mpreun cu mugurii de prun i de
Zingiberaceae sunt depozite de astfel de bioflavonoizi.
Ali compui flavonoidici prezeni n propolis n cantiti mai mici sunt:
- acacetina sau linarigenina izolat de POPRAVKO (1975) [12];
- 7-metil-eterul-acacetinei, separat din mugurii de Betula verrucosa;
80
Propolisul i extractele de propolis
- campferida izomer de poziie al rhamnocitrinei identificat de
POPRAVKO (1969) [26];
- pectolinarigenina sau 6-metoxi-acacetina sau 6-metoxi-linarigenina,
- 4-metil-eterul-sakuranetinei o flavanon a crei origine i structur
se afl n pinostrobin de la care deriv prin metoxilare a fost
semnalat n propolis de ctre METZNER i col., (1975) [27].
Toate aceste flavonoide semnalate frecvent n propolis sunt prezente sub
form de agliconi i care au ca specificitate prezena de funciuni fenolice libere,
reactive, grefate pe inelul B.
Cvercetina (quercetina) agliconul rutozidei i al mai multor alte
glicozide flavonoidice este foarte rspndit n regnul vegetal. A fost descoperit n
stare pur de PERKIN i HUMMEL n 1896 [28] n hamei Humulus lupulus i n
cojile de ceap (Allium cepa). Este utilizat n terapie, alturi de alte bioflavonoide,
ca substan activ pentru meninerea strii normale a vaselor sanguine prin
descreterea permeabilitii i fragilitii capilarelor BUDAVARI (1989) [29]
Alte grupe de compui prezente n propolis sunt chalconele i
dehidrochalconele, acizi alifatici i esterii lor, uleiuri volatile cu caten scurt
i esteri ai acestora, acizi aromatici i esteri ai acestora, acid benzoic i derivai
ai acestuia, aldehide, alcooli, acid cinnamic i derivaii acestora, ali acizi i
derivai, cetone, fenoli i ompui heteroaromatici, terpene, alcooli
sesquiterpenici i derivai ai acestora, terpenoizi i ali compui, hidrocarburi
sesquiterpenice i triterpenice, compui volatili, hidrocarburi (C21-C33),
hidrocarburi alifatice, steroli i hidrocarburi steroidice, zaharuri, lactone,
aminoacizi, derivai de acizi nucleici, vitamine, minerale, transhidrogenaze
anaerobe, substane donoare de H.
ntre chalcone i dehidrochalcone GREENAWAY i col.,(1990) [14] se
pot meniona:
- chalcona alpinetinei
- chalcona pinostrobinei
- chalcona pinocembrinei
- chalcona pinobanksin-3-acetatului
- chalcona sakuranetinei
- 2,6 dihidroxi-4-metoxi dihidrochalcona
81
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
82
Propolisul i extractele de propolis
Aldehide:
- benzaldehid
- aldehid protocatechic
- p-hidroxibenzaldehid
- vanilin
- izovanilin
- aldehid caproic
Alcooli:
- alcool cinnamic
- alcool benzilic
- hidroquinon
- alcool prenilic
- izobutenol
- alcool fenetilic
- alfa-glicerofosfat
- beta-glicerofosfat
- glicerol
83
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Alcooli terpenici, sesquiterpenici i derivai:
- geraniol
- nerolidol
- guaiol
- farnesol
- dihidroeudesmol
- beta-bisabolol
- alfa-acetoxibetulenol
Hidrocarburi alifatice:
- eicosan, eicosin, heneicosan
- 1-octadecen
- tricosan
- pentacosan
Steroli i hidrocarburi steroidice:
- cholestrilen
- cholinasterol
- stigmasterol
- beta-dihidrofucosterol
- lanosterol
- colesterol
Zaharuri:
- d-ribofuranoz
- d-fructoz
- d-glucitol
84
Propolisul i extractele de propolis
- d-guloz
- taloz
- zaharoz
- d-glucoz
- polizaharide
Aminoacizii determinai cantitativ 16 (KARDAKOV, 1980) [30] sau 24
(GABRYS, 1986) [31] au ca reprezentani semnificativi acidul piroglutamic,
arginina i prolina. Proveniena acestora n propolis este pus att pe seama
polenului dar i a secreiilor salivare ale albinelor.
Acelai lucru se poate afirma i despre prezena vitaminelor cu
reprezentani: B1, B2, B6, C, E, acid nicotinic, acid pantotenic, vitamina A.
Elementele minerale sunt determinate din reziduul obinut dup
calcinarea propolisului. n diferite eantioane de propolis provenind din diferite
regiuni ale globului, VANHAELEN i VANHAELEN-FRASTRE (1979) [32] au
determinat urmtoarele proporii: 0,51-0,86% n mostre din Frana, 0,55% - China,
0,67% - SUA, 0,68%- Australia.
Principalii reprezentani ai acestora sunt: sodiul (Na), potasiul (K),
magneziu (Mg), calciul (Ca), bariu (Ba), bor (B) urme, stroniu (Sr), zinc (Zn),
cadmiu (Cd), aluminiu (Al), siliciu (Si), plumb (Pb), - urme (datorate mai ales
polurii din traficul rutier sau prin amplasarea stupinelor n aceste zone sau zone
industriale), seleniu (Se) urme, fer (Fe), nichel (Ni), crom (Cr), mangan (Mn),
titan (Ti), argint (Ag), cupru (Cu), cobalt (Co), molibden (Mo), vanadiu (V).
Substanele rinoase. Dei n datele curente de specialitate nu sunt
informaii foarte clare despre izolarea fraciunii rinoase din propolis i
caracterizarea ei, prezena rinilor nu este pus la ndoial de nimeni. Multe
dintre proprietile propolisului se pot raporta la coninutul mare de rini. Se
citeaz i prezena unor acizi rezinici, ca acidul abietic i acidul pimaric care fac
parte din constituenii cei mai caracteristici ai rinilor naturale.
Alte componente amintite deja, frecvent ntlnite n rini, ca acidul
benzoic, acidul cinamic, acidul ferulic, acidul cafeic, cumarine i triterpenoide
pentaciclice au fost identificate n propolis. Acidul benzoic atinge 1,33-20%
(BRILEANU i col., 1978)[33] i alturi de acidul cinamic este una dintre
substanele cele mai caracteristice din rina de Styrax benzoin de la care i trage
numele, fiind totodat o component comun a mai tuturor rinilor de pe muguri,
ca i acizii ferulic i cafeic.
Cercetarea esterilor aromatici din propolis de tipul celor citai anterior i
chiar mai complicai ca structur (prin identificarea unor acizi polifenolici
esterificai) a condus la descoperirea deosebit de valoroaselor proprieti
85
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
antimicrobiene ale propolisului, prin prezena sau absena lor, putnd fi explicat
inconsecvena de activitate antimicrobian a diferitelor sorturi de propolis
(METZNER i col., 1975, 1977, 1978) [27, 34, 35].
Din punct de vedere cantitativ, fraciunea rinoas se consider c
reprezint cca. 55% din propolis, cu meniunea cuprinderii n aceast fraciune i a
unor balsamuri. Se tie c balsamurile se definesc ca amestecuri de rini i uleiuri
volatile (eseniale) n care ultimele, ca regul general, trebuie s fie n proporie de
cel puin 40%. Este posibil ca numai mirosul balsamic al propolisului s fi generat
aceast exprimare deoarece studiile efectuate nu au relevat prezena de uleiuri
volatile n astfel de proporii.
86
Propolisul i extractele de propolis
Capacitatea extractiv a etanolului absolut este secondat de alcoolul etilic
de 70, aceton, metanol, alcool etilic de 50, cloroform i clorura de metilen.
Tehnologia de preparare prin aplicarea acestei metode urmrete realizarea
a dou variante : un extract fluid cu coninut de 10% bioflavonoide exprimate n
crizin i un extract uscat cu coninut de 5% bioflavonoide exprimate n crizin
(POPESCU i col., 1985) [37].
87
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
de propolis introdus n percolator. Se continu percolarea pn la epuizarea
propolisului, respectiv pn la obinerea unui lichid de culoare slab glbuie, cu
indicele de refracie cuprins ntre 1,3720 1,3655. Soluia extractiv obinut prin
percolare se colecteaz separat de soluia extractiv obinut prin macerare
repetat.
Faza urmtoare cuprinde determinarea concentraiilor de bioflavonoide ale
celor dou soluii extractive obinute prin macerare repetat i respectiv prin
percolare, stabilindu-se volumul aproximativ la care trebuiesc concentrate pentru a
realiza extractul fluid cu coninutul standard de 10% bioflavonoide specifice.
Concentrarea soluiilor se face la presiuni reduse i temperaturi care s nu
depeasc 50C. Cele dou concentrate obinute se omogenizeaz, se determin
coninutul de bioflavonoide i se aduce extractul fluid la concentraia final de 10%
bioflavonoide exprimate n crizin. (Figura 1)
Alcoolul etilic concentrat, recuperat prin distilare, se poate utiliza la o nou
extracie.
88
Propolisul i extractele de propolis
Procesul tehnologic de fabricaie a extractului de propolis spiss cuprinde
urmtoarele etape:
- selectarea propolisului ( acesta nu trebuie s conin un procent ridicat de
cear, impuriti sau semne de degradare);
- mrunirea blocurilor de propolis pn la o granulare de 2-4 mm care
permite creterea suprafeei de contact cu solventul facilitnd extracia.
Mrunirea propolisului este o operaie foarte dificil avnd n vedere
consistena sa dur, lipicioas, care face ca echipamentele folosite n mod
obinuit n acest scop s nu dea rezultate pozitive. Procesul se mrunire se
face n dou etape: mrunirea blocurilor de propolis pn la dimensiuni de 20-
30 mm, dup care granulele mari sunt aduse la dimensiunea de 3-4 mm. Pentru
prima operaiune se folosete o pres mecanic de 150 kg/cm la care se
adapteaaz tane cu cuite din oel foarte dur. Pentru faza a doua se folosete o
moar cu cuite prevzut cu un tambur robust, mobil, pe care sunt fixate
cuitele i care n timpul rotirii tamburului trec printre cuitele unei plci fixe.
- Macerarea: extracia principiilor active din propolis se realizeaz cu alcool
etilic de 90 n arje formate din 70 litri alcool i 30 kg propolis n granule.
Materiile prime se introduc ntr-un extractor din inox cu perei dubli prin care
circul ap cald la temperatura de 40C. masa este agitat mecanic cu un
agitator de turaie mic (1 rpm); folosirea agitrii i a temperaturii moderate
accelereaz i mbuntete procesul de extracie; dup 48 ore se obine o
cantitate de 75-80 kg extract fluid de propolis care este supus filtrrii;
- Filtrarea se execut n scopul separrii reziduurilor nedizolvate. ntr-o prim
faz se aplic o decantare, apoi filtrare grosier printr-un filtru de vid tip nuce
i n final o filtrare fin prin hrtie de filtru la aparat prevzut cu pomp de vid.
- Concentrarea extractului const n reducerea cantitii de solvent pn la
limita de 20% i recuperarea acestuia cu ajutorul unui aparat de concentrare la
vid. Aparatul este format dintr-un blaz de distilare, din tabl de inox, cu perei
dubli prin care circul ap nclzit la temperatura de 70-80C. evaporarea la
vid i nclzirea moderat asigur conservarea principiilor active ale
propolisului n condiiile unei concentrri rapide. Vaporii de solvent trec din
blazul de distilare ntr-un condensor format dintr-o serpentin cufundat n ap
rece cu circulaie continu; condensatul recuperat se colecteaz ntr-un vas
special la care este conectat pompa de vid.
- Verificarea calitii produsului se face prin determinarea densitii care este
cuprins ntre 1,096 - 1,159, identificarea flavonelor conform specificaiilor din
farmacopee i identificarea acizilor aromai. Extractul de propolis spiss este
caracterizat din punct de vedere calitativ i cantitativ prin determinarea
concentraiei n flavonoizi totali exprimai n quercetin, procedeu aprobat de
Agenia Naional a Medicamentului.
89
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Tehnologia de obinere a extractului de propolis hidrosolubil liofilizat
procedeu original brevetat la ICD Apicultur Bucureti
90
Propolisul i extractele de propolis
Fraciunea volatil de distilat prin antrenare cu vapori de ap a prezentat
urmtorii compui: acid benzoic, alcool benzilic, acid sorbic, vanilin i eugenol.
Distilatul prin antrenare cu vapori conine: eter fenil vinilic, anisil-vinil-eter i
ciclohexil benzoat compui presupui a fi artefacte experimentale.
Studiile efectuate pe propolisul recoltat de pe mugurii i scoara de eucalipt
specific Braziliei i zonelor cu climat mediteraneean s-au identificat un mare
numr de hidroxi i metoxi stilbeni, explicaia unei astfel de prezene putnd fi
faptul c albinele la recoltarea materialului rinos transform stilbenii naturali prin
metilare sau demetilare n pterostilbeni.
Alte tipuri de extracii aplicate propolisului brut au fost cele care utilizeaz
ca solveni apa i diferite concentraii de etanol. Capacitatea de extracie a acestor
solveni se poate estima prin msurarea spectrului de absorbie n UV.
91
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
la 290 nm a fost variabil n funcie de concentraia soluiilor de etanol. Extractul
apos a prezentat cea mai sczut valoare a absorbiei, care totui a crescut progresiv
cu concentraia de etanol pn la 80%. Extractele cu concentraii de etanol de 90%
i 95% au prezentat o scdere a absorbiei la 290 nm. Aa cum s-a menionat n
lucrri anterioare (MARKHAM, 1982; KUNO, 1987), [45, 46] apariia benzilor de
absorbie la lungimile de und de 270 330 nm este atribuit flavonoizilor i
fenolilor. Cu alte cuvinte cea mai mare concentraie de flavonoizi a fost eliberat la
utilizarea etanolului de 80%. Pe de alt parte, amestecurile de extracte etanolice de
propolis cu nitrat de aluminiu i acetat de potasiu modific complet spectrele de
absorbie, cu formarea unui nou peak de absorbie maxim la lungimea de und de
310 nm. Modificarea maximului de absorbie se datoreaz formrii complexului
(chelat) metalic cu flavonoizii. Cea mai mare parte a flavonoizilor naturali sunt
polifenoli care conin una sau mai multe grupri O-dihidroxil i hidroxiceto care
sunt implicate n formarea complecilor metalici. Formarea complexului
metal.flavonoizi induce o schimbare a spectrului de absorbie maxim (JURD i
GEISSMAN, 1956; PORTER i MARKHAM, 1970) [47, 48].
Tabelul nr.2
Absorbana extractelor etanolice i apos de propolis
92
Propolisul i extractele de propolis
Aa cum se poate observa din acest tabel, s-a concluzionat cu extractele de
propolis n soluie etanolic 80% conin cea mai mare concentraie de flavonoizi.
Pentru determinarea activitilor biologice ale propolisului, n Japonia
(MIYATAKA i col., 1997)[49] propun prepararea unor extracte etanolice i
apoase de propolis, aplicnd tehnici de laborator specifice.
Conform acestor autori propolisul este supus extraciei n etanol de
concentraie de 99,5%. 5 pri (volume) de etanol 99,5% sunt introduse ntr-un
recipient etan ce conine 1 parte (greutate) propolis brut. Amestecul obinut este
lsat n repaus timp de 10 zile, cu agitri ocazionale. Soluia obinut dup perioada
de extracie este supus filtrrii printr-un filtru No.2 (dimensiunea porilor 5).
Reziduul de pe hrtia de filtru este splat cu solventul de extracie. Soluia de
splare este combinat cu filtratul obinut i volumul total al soluiei obinute este
adus la 200 ml cu etanol 99,5%. Reziduurile au fost n prealabil uscate pe sulfat de
sodiu anhidru. Dup msurarea greutii reziduului obinut cantitatea extras n
fiecare extract i concentrare n etanol de 99,5%, se determin prin scderea valorii
obinute din masa iniial a propolisului luat n lucru. Concentraia extractului de
propolis accesibil pe piaa internaional este cuprins ntre 2,7 12,5%.
In cazul extractului apos, 5 pri (volumetric) de ap distilat degazat prin
nclzire i apoi rcit la temperatura camerei sunt introduse ntr-un vas etan cu 1
parte (n greutate) de propolis. Amestecul obinut este lsat n repaus timp de 10
zile cu agitri ocazionale. Toate operaiile ulterioare sunt identice celor pentru
prepararea extractelor etanolice.
Teste asupra aciunii biologice a propolisului au fost efectuate i cu alt tip
de extract de propolis respectiv cu un extract apos de concentraie 13% w/v
produs n Danemarca de firma Propharma A/S.
In Cuba se prepar un extract de propolis rou prin suspendarea a 1 g
produs brut n etanol 95% (v/v). suspensia este decantat dup 48 ore de pstrare la
temperatura camerei. Extractul obinut are o concentraie de 70% (w/v) i se
recomand pstrarea sa la temperatura de 4C (NELSON MERINO i col., 1996) [50].
Tot pe propolisul brazilian s-au efectuat teste pe extracte obinute cu ap
fierbinte. Alte extracte obinute n metanol i cloroform au fost preparate prin
reluarea reziduului de la filtrare cu aceti solveni. (BASNET i col., 1996) [51].
93
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
aciunile terapeutice se pot enumra: antimicrobian, antibiotic, antifungic,
antiinflamatorie, analgezic, antioxidant i anti-tumoral.
La ora actual, pe plan mondial, propolisul este utilizat pe scar larg n
diferite formule de medicamente (ndeosebi n Europa rsritean), suplimente sau
aditivi alimentari i buturi pentru a mbunti starea de sntate i pentru
prevenirea unor afeciuni: inflamatorii, boli cardiace, hepatice, diabetul i chiar
unele forme de cancer.
Cu toate aceste dovezi asupra virtuilor sale terapeutice, ansa de a se
transforma dintr-un remediu empiric ntr-un medicament, depinde foarte mult de
purificare, standardizare i supunerea sa la toate celelalte etape de cercetare i
control: chimic, tehnologic, toxicologic, preclinic i clinic.
Progresul realizat n domeniul chimiei, farmacodinamiei i a tehnologiilor
farmaceutice au condus la stabilirea anumitor reguli pentru medicamente, ntre
care cea mai sever este cea privitoare la o anumit relaie ce trebuie s existe ntre
produsul respectiv i efectele sale asupra organismelor. Din aceast relaie se nate
noiunea de doz terapeutic, mai ales pentru substanele active pure, indiferent de
forma farmaceutic n care acestea sunt prezentate.
Prin standardizarea extractelor, tincturilor, etc., noiunea de doz poate fi
extins i la medicamentele sau produsele care sunt amestecuri naturale de
substane active. Standardizarea nseamn deci uniformizarea concentraiei n
principii active din produsele finite dimensiune ce poate fi exprimat prin
componentul cel mai caracteristic.
Atunci cnd metodele fizico-chimice nu pot fi aplicate, standardizarea se
poate face utiliznd o metod de control biologic. Oricum, standardizarea
extractelor naturale este de mult vreme o condiie de la sine neleas.
Propolisul este cunoscut ca fiind activ la nivelul organismelor, dar n cursul
ultimelor decenii, s-a raportat o larg varietate a compuilor si. De aceea extractele de
propolis de uz medicinal trebuie s rspund cerinei privitoare la raportul dintre
cantitatea administrat i efectul obinut; aceasta nseamn c att experimentele de
laborator ct i cele clinice trebuiesc efectuate numai cu extracte standardizate.
Orice extract, presupune nainte de orice altceva, s se obin un produs
mai pur; un extract standardizat ofer posibilitatea de a fi administrat n anumite
cantiti ce conin concentraii controlate de substane active, astfel nct cu
siguran el s fie lipsit de toxicitate, s ofere o eficiena terapeutic maxim i s
permit individualizarea tratementelor.
Extractul de propolis standardizat, departe de a fi un produs toxic, este
totui capabil s prezinte o serie de efecte secundare atunci cnd anumite doze sunt
depite. Modificarea dozelor poate induce efecte diferite sau chiar eecuri
terapeutice.
94
Propolisul i extractele de propolis
n acest sens, experiena Romniei prin Centrul Medical de Apiterapie al
Institutului de Cercetare i Dezvoltare pentru Apicultur, a dovedit c rezultatele
experimentelor biochimice i farmacologice efectuate pe organisme sntoase
precum i efectele sale pe organisme animale cu stri patologice induse sunt
elemente fundamentale n planificarea i efectuarea unui experiment clinic.
Extractul de propolis standardizat (extractul moale sau spiss) a fost supus
unor experimente biochimice pentru a i se demonstra eficacitatea asupra ficatului,
sngelui, sistemului muscular, organelor limfatice, glandelor suprarenale,
metabolismul general al glucidelor precum i n anumite aspecte imunobiologice.
Datele privitoare la efectele propolisului asupra organismului animal cu
condiii patologice induse privesc aciunile hepatoprotectoare i antiinflamatoare
precum i investigaii asupra aciunii epitelizante, asupra permeabilitii vasculare
i aciunea antiviral (testat pe anumite virusuri multiplicate n culturi de esuturi).
Aciunea antialergic
Aciunea antiviral
96
Propolisul i extractele de propolis
rotavirusul SA-II 25% i respectiv 35%. Quercetina la doza de 60g /ml i crizina
la 10 g/ml au redus infectivitatea virusurilor herpetice (HSV-2, HSV-1 i TK-
HSV-1) cu aproximativ 65% i respectiv 50%. (CHENG i WONG, 1996) [57].
AMOROS i col., (1992a) [58] au observat c propolisul este foarte activ
in vitro mpotriva virusului polio i herpetic. La o concentraie de 30 g/ml
propolisul reduce titrul virusurilor herpetice de 1000 de ori, inhib replicarea HSV
cu 99,5% i inhib total formarea plgii de poliovirus. S-a observat de asemenea
i o aciune virulicid asupra virusurilor ncapsulate, herpes simplex i virusul
stomatitei veziculare (VSV). n acest caz se sugereaz c flavonoizii galangin i
crizin majoritari n eantioanele de propolis recoltat din Frana (i n general din
zona european) acioneaz sinergic n aciunea antiviral a propolisului.
ntr-un studiu mai aprofundat asupra aciunii inhibitoare a flavonoizilor
asupra virusurilor, AMOROS i col., (1992b) [59] au observat efecte sinergice
individuale i binare ale flavonolilor (galangin, kaempferol i quercetin),
flavonelor (crizin, apigenin, luteolin i tectocrizin) i a flavanonelor
(pinocembrin i izosakuranetin) asupra infeciei cu virus herpetic de tip I i
replicarea acestuia n celule renale de maimu in vitro. Tot aceast echip a
constatat c flavonolii sunt mai eficieni n reducerea titrului virusurilor; totui s-a
constatat c galangina este activ n timp ce crizina nu prezint activitate,
contrazicnd astfel rezultatele obinute de DEBIAGGI i col., (1990)[56]. Autorii
au atribuit contradicia:
diferenei ntre tulpinile de HSV-1
diferenei dintre timpii de incubaie (48 de ore mai puin dect Debiaggi i
col., 1990) [56]
diferiilor parametri de lucru
Activitatea flavonolilor descrete n ordine invers cu numrul de grupri
hidroxil substituite: galangin > kampferol > quercetina. Afinitatea compusului la
lipide (lipofilie) pare s aib o importan deosebit pentru activitatea biologic.
Numai galangina, kaempferolul i balsamul de propolis pare s fie activi cu
adevrat mpotriva HSV-I. Ali constitueni de tipul metoxiflavonelor minore sau
conjugai de tip cafeoil pot contribui la rndul lor la aciunea antiviral. n plus,
atunci cnd doi flavonoizi diferii au fost administrai mpreun, s-a observat un
sinergism semnificativ mpotriva HSV-I, cu combinaii de flavonoli i flavone care
produc o reducere semnificativ a virusului. Cele mai importante combinaii binare
au fost: kaempferol + luteolin; quercetin + crizin; galangin + apigenin;
kaempferol + apigenin; quercetin + apigenin. Adeseori sinergismele indic
diferite moduri de aciune dar ntruct mecanismul (ele) inhibiiei virale mai
trebuie nc elucidate, se fac nc speculaii.
97
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Propolisul i extractele sale precum i o serie de soluii de flavonoizi s-au
dovedit mijloace eficiente n sistarea replicrii agentului patogen al hepatitei virale
HbsAg (MORFEI i col., 1980) [60].
Aciunea analgezic
98
Propolisul i extractele de propolis
KIMOTO i col., (1994, 1995) [64, 65] au reuit s identifice i s izoleze
din propolisul brazilian artepillina C un compus cu o puternic aciune anti-
tumoral prezent n produs n concentraii de aprox. 5%. Artepillina C s-a
dovedit extrem de eficient ndeosebi asupra celulelor leucemice i se ateapt ca
n viitor ea s fie administrat prin injecii intravenoase ca adjuvant n
chemoterapia acestei afeciuni.
Studiile efectuate au demonstrat c constituenii propolisului care prezint
o puternic aciune anti-tumoral sunt:
- derivai ai acidului cafeic
- flavonoizi
- acidul 2,2-dimetil-8-prenil-cromen-6-propendioic
- artepillina
- acidul 17-hidroxicleroda-3m(13Z)-dien-15-oic (MARCUCCI, 1995;
MATSUNO i col., 1995, 1996, 1997) [66, 67, 68, 69]
Aciunea antioxidant
99
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
produi ca rezultat al iraadierii cu raze X (raze Roentgen) sau iradiere cu substane
radioactive.
Aciunea reductoare a flavonoizilor stopeaz distrugerea acidului ascorbic
(vitamina C) prin oxidare i tansform ionul de fier trivalent (Fe3+) n forma sa
fiziologic bivalent. n plus, flavonoizii se pot lega puternic de ioni de metale
grele (cupru bivalent, mercur bivalent i plumb bivalent). Altfel, unele metale grele
vor avea tendina de a cere autooxidarea anumitor elemente eseniale : substane
nutritive, acizi grai polinesaturai i de asemenea de a inhiba activitatea anumitor
enzime.
Represia genic
100
Propolisul i extractele de propolis
101
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Tabel nr.3
Aciunea antibacterian i antifungic a propolisului
Organisme Gram-pozitive
Staphylococcus aureus - comun n infeciile localizate productoare de
puroi
Streptococcus pyogenes - infecii ale gtului
Streptococcus viridans - flora normal a tractului respirator superior ce
poate produce infecii la bolnavi cu imunodeficien
Streptococcus pneumoniae - cauza comun a pneumoniilor bacteriene
Corynebacterium diphteriae - produce difteria
Aciunea antifungic
Microsporum canis - viermi inelari la pisici i cini ce se transmit la om
Microsporum gzpseum - infecii al pielii capului i corpului n America de
Sud
Phialophora jeanselmei - urmare injectrii acest fung poate provoca moartea
esuturilor profunde din corp
Piedraia hartae - fung parazit la nivelul prului
Trichophyton mentagrophytes - atac prul, unghiile i pielea
Trichophyton rubrum - atac prul unghiile i pielea
Trichosporon cutaneum - se gsete n intestin, tractul respirator i pe piele
i poate afecta pacienii cu debiliti, rar fatal.
Propolisul n doze de 2 g/kg corp a fost bine tolerat de oareci.
Conform DOBROWOLSKI i col., 1991
102
Propolisul i extractele de propolis
Aceast fraciune provoac activarea transcripiei genelor celulare i virale, induce
sinteza DNA i mitoza celulelor difereniate. n mod clar, caracteristicile celulelor
transformate par a produce cancer. Rezultatele arat c compusul CAPE inhib
preferenial sinteza DNA i creterea n celulele transformate AD5EIA, iar la
concentraii ridicate de CAPE, celulele transformate sunt ucise. Mecanismul
inhibiiei competitive este necunoscut dar se crede c este legat de starea de
transformare. Cnd celulele au fost transformate cu alte gene cum ar fi de exemplu
Ha-ras oncogen i virusul papilomului bovin tip I, au fost la rndul lor inhibate
selectiv. Probabil, celulele transformate au funcii ale membranelor celulare
alterate sau o fiziologie celular care permite activitatea CAPE.
ntr-un studiu de confirmare, GUARINI i col., (1992) [76] au determinat
efectele CAPE asupra a dou linii de celule tumorale, melanomul uman HO-I i
glioblastomul multiform uman GBM-18- rezultatele au fost comparate cu ale altor
modulatori, mezerein (MEZ), acidul micofenolic (MPA) i acidul retinoic (RA).
Mai mult, s-au studiat i combinaii ale CAPE cu aceti modulatori. Rezultatele
surprinztoare arat c n combinaie cu MEZ , CAPE prezint un foarte puternic
efect antiproliferativ i a fost singurul tratament care a suprimat complet creterea
n linia de celule GBM-18.
104
Propolisul i extractele de propolis
Revenind asupra efectelor sinergice ale compuilor din propolis (CHENG
i WONG, 1996) [57] trebuiesc menionate efectele antioxidante ale balsamului de
propolis n inhibarea linoleatului de metil de ctre benzil-cafeat.
Flavonoizii i n acest caz propolisul s-au dovedit un excelent mijloc
natural n inhibarea puternic a xenobioticelor cum este cazul intoxicrii induse
cu tetraclorur de carbon i intoxicaia alcoolic la nivelul ficatului (GIURGEA i
col., 1987) [85]. Tetraclorura de carbon CCl4 produce un radical foarte toxic i
foarte reactiv CCl3 implicat n peroxidarea lipidelor sau legarea covalent cu
macromoleculele eseniale la nivelul hepatocitelor.
Bioflavonoizii particip ca antioxidani la metabolizarea acestor
xenobiotice prin sistemul enzimatic al oxidazelor cu funcie mixt; se tie c
activitatea enzimatic este prima int a substanelor toxice i ale derivailor
acestora. Efectul de protecie este observat n special la nivelul activitilor succinat
dehidrogenazei (SDH), glutamat dehidrogenazei (GDH) i citocrom oxidazei.
Aa cum s-a menionat deja, cea mai mare atenie a fost acordat
capacitii propolisului de a combate strile infecioase locale i generale.
GRANGE i DAVEY (1990) [70] au artat c o fracie hidrosolubil termostabil
din propolis, care este stabil la liofilizare, este foarte eficient mpotriva infeciei
TBC produs de Mycobacterium tuberculosis.
La utilizarea asociat cu unele antibiotice, eficacitatea i durata de aciune
a extractului de propolis este mult accentuat iar respectivele microorganisme nu
dezvolt rezisten la antibiotice. La administrarea intern, propolisul nu produce
disbacterioze ci o stimulare a factorilor imuni specifici i non-specifici i ca
rezultat o cretere a rezistenei generale a organismului.
Conform celor deja menionate principalii compui responsabili pentru
aceast important aciune a propolisului sunt esterii acizilor fenolici cu alcooli
aromatici. Cnd se constat absena unei cantiti dozabile de ulei volatil,
eficacitatea propolisului nu este aceeai. Deaceea o importan condiie de calitate
a propolisului este existena fraciunii volatile. Cu ct propolisul este mai aromat cu
att este mai eficient.
Aciunea antimicrobian a propolisului l recomand a fi aplicat n diferite
domenii medicale:
boli digestive: enterite, diaree cronic, colibaciloz digestiv
boli genito-urinare: orhite, orhiepididimite, prostatite etc.
boli respiratorii: bronhopneumonie cronic, TBC pulmonar, TBC
limfoganglionar, TBC renal
boli ORL acute i cronice: rinite, rinofaringite, laringo-traheo-bronite,
amigdalite, otite medii i externe, mezotimpanite
boli oftalmice: infecii bacteriene i virale ale polului anterior ocular:
blefarite, conjunctivite, rni la nivelul ochilor
boli dermatologice: piodermit profund, TBC cutanat, rni infectate,
intertrigo cu diatez exudativ suprainfectat cu Candida albicans, acnee
juvenil, infecii streptococice
boli ale noilor-nscui i sugarilor: tratamentul moniliazei (Monilia
albicans)
boli ginecologice: infecii bacteriene mixte ale colului uterin i vaginale,
trichomoniaz i micoz vulvo-vaginal.
107
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Principalele tipuri de preparate cu propolis utilizate deja n domeniul
medical sunt prezentate ca:
unguente
soluii
spray-uri
aerosoli
ovule
supozitoare
tablete
capsule
siropuri
colutorii
colire
Pentru viitor specialitii din domeniul medicinei i farmacologiei trebuie s
reflecteze asupra unor formule de preparate menite s stimuleze reacia fagocitar.
108
Propolisul i extractele de propolis
Denumirea de vitamina P (factor de permeabilitate) a fost aplicat anterior
unui grup de flavone (hesperedina, eriodictina, quercetina i rutozidul).
n ulcerele cronice de gamb, propolisul contribuie la restructurarea
membranelor capilare, producerea vaselor de neoformaie i mbuntirea
proceselor metabolice celulare i tisulare locale prin:
reducerea anorexiei tisulare
reactivarea proceselor enzimatice
favorizarea restructurrii substanei fundamentale dezorganizate.
Aplicarea propolisului limiteaz lrgirea cicatricelor i reduce o serie de
fenomene secundare ca: nmugurirea, formarea de eczeme.
Aciunea antiedematoas
Propolisul este unul dintre produsele care s-a dovedit a fi un foarte bun
agent anestezic.
n aplicaii locale el prezint o activitate de 3,5 ori mai mare dect a
cocainei i de 5,2 ori mai mare dect a procainei (GHISALBERTI, 1979) [7].
n doze constnd n 0,012 g/kg corp, el produce la animale o anestezie
general ce poate dura 45 minute. Aplicat oral, n chirurgia veterinar (la oi i
cini) efectul anestezic se instaleaz m 2-5 minute iar animalele nu prezint
modificri de puls, respiraie i temperatur i nici dispariia excitabilitii de
reflex.
109
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
110
Propolisul i extractele de propolis
Concluzii
111
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
Pentru aplicaiile externe, gama de solveni specifici cuprinde att alcoolul etilic ct
i propilen-glicol, DMSO , etc.
Conform prerilor specialitilor japonezi, pentru propolisul de provenien
brazilian cea mai bun solventare a fost oferit de o soluie alcoolic de 80% -
rezultate exprimate prin spectrele de absorbie n UV i absorbana maxim
obinut la lungimea de und de 290 nm, tiut fiind faptul c majoritatea
compuilor flavonoizi absorb n acest domeniu spectral.
Eficiena solvenilor de extracie a fost verificat i prin studii asupra
aciunii antioxidante a extractelor de propolis obinute. i n acest caz se pare c
alcoolul etilic ofer cele mai relevante valori.
Marea diversitate de extracte de propolis obinute n diferite laboratoare ale
lumii a fost riguros testat pentru identificarea aciunilor biologice specifice. i
aceste studii au fost determinate tot de evidena rezultatelor obinute empiric n
medicina tradiional din diferite regiuni ale lumii.
Extractele de propolis, dar mai ales fraciunile active ale acestui produs
flavonoizii, compuii quinonici etc.- prezint o palet foarte larg de aciuni ntre
se pot meniona:
aciunea bacteriostatic i bactericid
aciunea antialergic dar paradoxal i alergen
aciunea antiviral i antifungic
aciunea antixidant
aciunea imunomodulatoare ( propolisul acioneaz ca un stimulent nespecific
dar i specific al sistemului imunitar, deci ca o substan de BRM biological
response modifier ( modificator al rspunsului biologic)
aciunea citotoxic i antitumoral
aciunea cicatrizant i epitelizant
i spectrul de aciuni se poate detalia ca rezultat al acestor aciuni principale, la
diferite niveluri ale organismului uman.
Evidenierea proprietilor biologice i terapeutice ale propolisului a
condus la cutarea i realizarea unor soluii tehnologice originale de obinere a unor
extracte standardizate cu aplicativitate n terapeutic. Marea lor majoritate de
bazeaz pe realizarea unor extracte alcoolice concentrate n principii active prin
aplicarea unor tehnologii blnde, neagresive care s permit utilizarea fraciunilor
active n diferite aplicaii terapeutice. Problema major a extractelor de propolis
rmne ns la nivel mondial gsirea unor soluii de standardizare a produsului.
Standardizarea propolisului este ns, la ora actual o misiune destul de
dificil, avnd n vedere diversitatea compoziional a produsului. ncercrile de
standardizare n funcie de originea geobotanic reprezint un astfel de parametru,
dar nici acesta nu ofer un maxim de reproductibilitate a rezultatelor, deoarece i
aici se produc variaii climatice, sezoniere, ponderea unor anumite specii vegetale,
etc. Totui o caracterizare conform originii geobotanice reprezint un parametru de
112
Propolisul i extractele de propolis
pornire de la care se pot aprofunda studiile pentru caracterizarea componentei
biochimice cu aciune biologic.
Avnd n vedere sinergismele de aciune dintre diferitele grupe de compui
prezeni n produs, aciunea biologic ar putea constitui un parametru deosebit de
important indiferent de originea geografic. Un exemplu n acest sens l constituie
aciunea antibacterian i antiviral a produsului recoltat att din zona de climat
temperat (Europa i Asia) dar i a celui recoltat din zone tropicale i sub-tropicale (
cazul diferitelor tipuri de propolis cubanez a cror compoziie este complet diferit
de cea a diferitelor alte tipuri de propolis european sau asiatic). Deasemenea,
aciunea anti-tumoral se pare c este foarte specific i puternic pentru diferitele
tipuri de propolis brazilian n care compui de tipul artepillinei C i a clerodan-
diterpenoidului acioneaz n diferite tipuri de tumori, fr ns a neglija aciunea
esterului fenetilic al acidului cafeic i ai altor derivai ai acidului cafeic (esteri de
tipul CAPE), compui specifici propolisului din zonele europene i asiatice.
Studiile viitoare ce stau n atenia specialitilor n domeniul nutriiei i
terapeutice au oricum ca scop principal gsirea unor soluii pentru standardizarea i
fundamentarea introducerii acestui valoros produs apicol n consumul uman sub
form de suplimente alimentare cu rol de ntreinere a sntii (profilaxie) dar i n
practica medical curent, alternativ natural lipsit de efectele nocive sau
secundare produse uneori de chimioterapia unor afeciuni.
Bibliografie
114
Propolisul i extractele de propolis
28. PERKIN, W., HUMMEL, H., (1896) in 1902 Journal of Chem, Soc., 81:
585-587.
29. BUDAVARI, S., (1989) in Merck Index, Merck &Co., Rahway, N.J.
30. KARDAKOV, V.P., (1980) Propolis, aminoacids and European foul brood,
Tekhnol.Proizvod.Prod.Pcelovodstvo, pp. 151-153.
31. GABRYS, J., KROL,W., SCHELLER,S., SHANI,J., (1986) Free aminoacids
in bee hive product (propolis) as identified and quantified by gas-liquid
chromatography, Pharmacol.-Res.-Commun., Jun. 18(6): 513-518.
32. VANHAELEN, M., VANHAELEN-FRASTRE (1979) Propolis II:
Identification by high-performance chromatography (liquid, gas-liquid and thin
layer) of the constituents. Bioautography of the chromatograms of the anti-
bacterial constituents. J.Pharm.Belg., Nov-Dec., 34(6): 253-259.
33. BRILEANU,C., MOTOCESCU,R.,BAZAVAN,E.,BLAN,E., (1978) n
vol. Comunicri prezentate la primul simpozion al medicamentului romnesc,
Ed.Medical, Bucureti, pp.634.
34. METZNER, J., BEKEMEIER,H., SCHNEIDEWIND,E.M., FRIEDERICH,E.,
(1977) Zur Wirkung von Propolis und Pinocembrin auf Sprosspilze.
Pharmazie, 32: 730-733.
35. METZNER,J., SCHNEIDEWIND,E.M., (1978) Studies on the question of
potentiating effects of propolis constituents. Pharmazie, Jul. 33(7): 465-468.
36. POLINICENCU,C., LEUCUA,S., POPESCU,H.,TAMA,M., (1984)
Symposium Flavonoidae, 1 iunie 1984, Cluj-Napoca, pp.60.
37. POPESCU,H., GIURGEA,R., POLINICENCU,C., (1985) Extractul
standardizat de propolis i medicamentele Candiflor Centrala industrial de
medicamente, cosmetice, colorani i lacuri, Bucureti.
38. PALO, E., PETRE,N., ANDREI,C., (1975) - Tehnologia de obinere a
extractului moale de propolis, Propolis- a remarkable hive product, Editura
Apimondia, Bucureti.
39. OI, N., BAIDAN,N.,PALO, E., POPESCU,F., (1981) Produsele apicole
n oftalmologie, Romnia Apicol, nr.8.
40. BANKOVA, V.S., POPOV,S.S., MAREKOV,N.L., (1982) High
performance liquid chromatograpic analysis of flavonoids from propolis,
Journal of Chromatography, 242(1):135-143.
41. ABD EL HADY, F.K., HEGAZI, A.G., (1994) Gas chromatography mass
spectrometry (GC/MS) study of the Egyptian propolis I aliphatic, phenolic
acids and their esters. Egypt.J.Appl.Aci., 9, 749-760.
42. ABD EL HADY, F.K., (1994) Gas chromatography mass spectrometry
(GC/MS) study of the Egyptian propolis 2 Flavonoid constituents.
Egypt.J.Appl.Sci., 9(8): 91-109.
43. PARK, Y.K., KOO,M.H., IKEGAKI,M., (1998) Current Microbiology, 36,
24-28.
115
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
44. MATSUSHIGE, K., BASNET,P., HASE,K., KADOTA,S., TANAKA,K.,
NAMBA,T., (1996) Propolis protects pancreatic beta-cells against the
toxicity of streptozotocin (STZ) Phytomedicine, vol.III.(2), pp. 203-209.
45. MARKHAM, K.R., (1982) In Techniques of Flavonoid Identification,
Academic Press, pp. 36-51.
46. KUNO, K., (1987) Analysis of propolis and its quality evaluation in
Fragrance J., 83: 36-39.
47. JURD, L., GEISSMAN, T.A., (1956) J.Org.Chem., 21, 1395-1401.
48. PORTER,L.J., MARKHAM, K.R., (1970) Phytochemistry, 9, 1363 1365.
49. MIYATAKA, H., NISHIKI,H., MATSUMOTO,H., FIJIMOTO,T.,
MATSUKA, M., SATOH,T., (1997) Biol.Pharm.Bull., 20: 496-501.
50. NELSON-M., GONZALES,R., GONZALES,A., REMIREZ, D., (1996)
Histopathological evaluation on the Effect of Red propolis on liver damage
induced by CCl4 in rats Arch.Med.Res., 27(3):285-289.
51. BASNET, P., MATSUSHIGE,K., HASE,K., KADOTA, S., NAMBA,T.,
(1996) Potent antihepatotoxic activity of dicaffeoyl quinic acids from
propolis- Biol.Pharm.Bull., 19(4): 655-657.
52. KLIMMEK, E.W., (1988) Propolis und Bienengift Eine Herausforderung
an die Medizinische Wissenschaft, Frechen: 1-68.
53. HAUSEN, B.M., WOLLENWEBER,E., SENFF,H., POST,B., (1987)- Propolis
allergy (I) Origin, properties and usage and literature review, Contact
Dermatitis, sept., 17(3): 163-170.
54. SCHULER, T.M., FROSCH, P., (1988) J.Hautartzt, 39, 139-142.
55. ITOH,K., AMAMIYA,I.,IKEDA, K., KONISHI, M., (1994) Honeybee
Science, 15, 171-173.
56. DEBIAGGI,M., TATEO,F.,PAGANI,L., LUINI,M., ROMERO,E., (1990)
Effects of propolis flavonoids on virus infectivity and replication,
Microbiologica, 13(3): 207-213.
57. CHENG, P.C., WONG, G., (1996) Honey bee propolis: prospects in
medicine, Bee World, 77(1): 8-15.
58. AMOROS, M., SAUVAGER,F., GIRRE, L., CORMIER, M., (1992) In vitro
antiviral activity of propolis, Apidologie, 23(3): 231-240.
59. AMOROS, M., SIMOES, C.M.O., GIRRE, L., (1992) Synergistic effect of
flavones and flavonols against Herpes simplex virus type I in cell culture.
Comparison with the antiviral activity of propolis. Journal of Natural
Products, 55(12): 1732-1740.
60. MORFEI, A., BURDUCEA, O., NEUMAN,R., CAJAL,N., COPELOVICI, Y.,
CRIAN, I., (1980) Investigations concerning the action of several chemical
and biological agents on HBAg Rev.Roum.Med.-Virol., 31(4): 273-278.
61. MATSUNO, T., (1991) Anti-tumoral effect of 3 substances isolated from
propolis (quercetin, caffeic acid phenetylester and a diterpenoid of clerodane, -
The 50-th annual Reunion of the Cancer Japanese Society.
116
Propolisul i extractele de propolis
62. MATSUNO, T., (1992) On cancer cellcidal activities of propolis, 14-th
meeting of Honeybee Science Inst.of Tamagawa Univ., Anti-tumor properties
of propolis, 51-th Japan Cancer Society Conference.
63. ARAI, S., et al., (1993) Effects of propolis on colon cancer Honeybee
Science, 15(4): 155-162 (1994).
64. KIMOTO, T., (1995) Antitumor activities and its clinical application by
artepillin-C isolated from propolis. Nippon Iji Shinpo, 3726: 43-48.
65. KIMOTO, T., (1998) Apoptosis and Suppression of Tumor Growth bz
Artepillin C extracted from Brazilian propolis Cancer Detection and
Prevention, 22(6): 506-515.
66. MARCUCCI,M.C., (1995) Propolis chemical composition, biological
properties and therapeutic activity Apidologie, 26, 83-99.
67. MATSUNO, T., - (1995) Z. Naturforsch., 50 c, 93-97.
68. MATSUNO, T., SUGA,S., TAKANO, H., MATSUMOTO,Y., MOROKAWA,
J., - (1996) - Chem.Abstr., 124, 194307c.
69. MATSUNO, T., MATSUMOTO,Y., MOROKAWA, J., SAITOM., (1997)
Chem.Abstr., 127, 39814j.
70. GRANGE,J.M., DAVEY,R.W., (1990) Antibacterial properties of propolis
(bee glue) Journal of the Royal Society of Medicine, 83(3): 159-160.
71. SIMUTH, J., TRNOVSKY, J., JELOKOVA,J., - (1996) Inhibition of
bacterial DNA-depdendent RNA polymerases and restriction endonucleases by
UV-absorbing components of propolis. Pharmazie, 41: 131-132.
72. BRUMFITT, W., HAMILTON-MILLER, J.M., FRANKLIN, T., (1990)
Antibiotic activity of natural products: I. Propolis., Microbios, 62(250): 19-22
73. DOBROWOLSKI,J.W., VOHORA, S.B., i col., (1991) Immunomodulatory
action of propolis. Influence on anti-infectious protection and macrophage
function. Apidologie, 22(2): 155-162.
74. GRUNBERGER, D., BANERJEE, R., EISINGER, K., et al., (1988)
Preferential cytotoxicity on tumor cells by caffeic acid phenetyl ester isolated
from propolis. Experientia, 44(3): 230-232.
75. SU, Z.Z., GRUNBERGER, D., FISHER, P.B., (1991) Suppression of
adenovirus type 5 EIA mediated transformation and expression of the
transformed phenotype by caffeic acid phenetyl ester (CAPE)
Mol.Carcinogen., 4: 231-242.
76. GUARINI, L., SU,Z.Z.,ZUCKER, S., LIN, J., GRUNBERGER, D., FISHER,
P.B., (1992) Growth inhibition and modulation of antigenic phenotype in
human melanoma and glioblastoma multiforme cells by caffeic acid phenetyl
ester (CAPE). Cellular and Molecular Biology, 38(5): 513-527.
77. RAO, C.V., DESAI, D., KAUL, B., et al., (1992) Effect of caffeic acid esters
on carcinogen-induced mutagenicity and human colon adenocarcinoma cell
growth. Chemical and Biological Interactions, 84: 277-290.
117
Cristina Mateescu, I.F. Dumitru
78. RODRIGUEZ, S., ANCHETA, O., RAMOS, M.E., et al., (1997) Effects of
Cuban Red propolis on galactoseamine-induced hepatitis in rats
Pharmacological Research, 35(1): 1-4.
79. KROL, W., CZUBA, Z., SCHELLER, S., GABRYS, J., (1990) Antioxidant
property of ethanolic extract of propolis (EEP) as evaluated by inhibiting the
chemoluminiscence oxidation of luminol. Biochem. Int., 21(4):593.
80. HERMANN ,G.R., BRACAMONTE, J.A., (1990) Propolis extract as a
sunscreen agent. Drug and Cosmetic Industry, 147(4): 38.
81. LIN ,S.C., Y.H.LIN, C.F.CHEN, (1997) The Hepatoprotective and
Therapeutic Effects of Propolis Ethanol extract on Chronic Alcohol - Induced
Liver Injuries, American Journal of Chinese Medicine, XXV (3-4), pp. 325-332.
82. BASNET,P., MATSUSHIGE, K., HASE,K., (1996) Potent antihepatotoxic
activity of dicaffeoyl quinic acids from propolis, Biol.Pharm. Bull., 19 (4):
655-657.
83. BASNET, P., MTASUSHIGE, K., HASE, K., (1996) Four Di-O-caffeoyl
quinic acid derivatives from propolis. Potent hepatoprotective activity in
experimental liver injury models. Biol.Phaarm.Bull., 19(11): 1479-1484.
84. MARKHAM, K.R., MITCHELL, K.A., WILKINS,A.L., (1996)
Phytochemistry, 42: 205-211.
85. GIURGEA, R., RUSU, M.A., COPREAN, D., POPESCU, H.,
POLINICENCU, C., (1987) Biochemical effects of standardized propolis
extract (SPE) and of sylimarin on the liver of ethyl alcohol intoxicated rats
Agressologie, 28 (8): 831-833.
86. RABINOVITCH, A., (1994) Immunoregulatory and cytokine inbalances in
the pathogenesis of IDDM: therapeutic intervention by immunostimulation?
Diabetes, 43: 613-621.
87. YAMAUCHI, R., KATO,K., OIDA, S., KANAEDA, J., UENO,Y., (1992)
Benzylcaffeate, an antioxidative compound isolated from propolis.
Biosci.Biotech.Biochem., 56:1321-1322.
88. TURK,J., CORBETT, J.A., RAMANADHAM, S., BOHRER, A.,
MCDANIEL, M.L., (1993) Biochemical evidence for nitric oxide formation
from streptozotocin in isolated pancreatic islets. Biochem.Biophys. Res.
Comm., 197: 1458-1464.
89. UCHIGATA, Y., YAMAMOTO, H., KAWAMURA, A., OKAMOTO, H.,
(1982) Protection by superoxide dismutase, catalase ans poly (ADP) ribose
synthetase inhibitors against alloxan- and streptozotocin-induced islet DNA
strand breaks and against the inhibition of proinsulin synthesis. J.Biol.Chem.,
257: 6084-6088.
90. MATSUSHIGE, K., KUSUMOTO, I,T., (1995) Quality evaluation of
propolis. 1. A comparative study on radical scavenging effects of propolis on
vespae nidus. J.Trad.Med., 12:45-53.
118