CAPITOLUL 41

ANTIGENE I IMUNOGENE

Antigenul (imunogenul) - este reprezentat de ctre orice substan strin care

poate induce declanarea unor reacii imunologice i care poate interaciona specific cu
efectorii imunitari.
Imunogenicitatea - capacitatea unei substane de a induce un rspuns imun; de
aceea, termenul mai corect pentru antigen este sinonim cu imunogen.
Specificitatea antigenic - se refer la un anumit tip de rspuns imun indus
(caracteristic unui anumit antigen, unui anumit epitop)
- 1 epitop reprezint situsul de pe un antigen care
interacioneaz cu o molecul de anticorp i care imprim specificitatea
imunologic prin structura sa (proteic sau polizaharidic).
- 1 epitop este alctuit din civa aminoacizi sau cteva
polizaharide i reprezint imunogenul la scar molecular.
Proprietile fundamentale ale antigenului (imunogenului) sunt:
Imunogenicitatea
Specificitatea

FACTORI CARE CONDIIONEAZ IMUNOGENICITATEA:

Condiii filogenetice
- anumit substan este cu att mai imunogen, cu ct aceasta este mai
ndeprtat din punct de vedere filogenetic. Astfel, antigenele bacteriene, virale,
parazitare etc., ndeplinesc aceast condiie.
- Constituenii proprii organismului pot deveni strini (non-self) dac
sufer modificri induse viral, bacterian, tumoral, toxic, etc.
- Uneori, nu sunt recunoscute ca self aa - numitele antigene sechestrate
anatomic, (din cristalin, testicul, etc.) - n momentul n care acestea trec n mod
accidental n circulaie (n urma traumatismelor). Din cauza poziiei anatomice
particulare, aceste antigene cantonate n cristalin, gonade, creier nu sunt
recunoscute ca self de ctre sistemul limfoid n perioada embriofetal.
Caracterul de non-self nu este dat de prezena unor molecule unice, originale
pentru un organism, ci adesea este dat de ctre modificri minime, care se traduc prin
prezena unui aminoacid sau monozaharid diferit.

1
 Reaciile care apar n grefele de esuturi i organe (exogene) au atras atenia
asupra existenei pe suprafaa celulelor respective a unor antigene care induc rspuns
imun din partea receptorului, urmate de respingerea grefei respective. Aceste antigene
difer de la individ la individ, exprimarea lor pe suprafaa celulelor fiind codificat de
ctre genele complexului major de histocompatibilitate uman, aflat pe cromozomul 6.
CMH posed 3 regiuni genetice: CMH clasa I, a II - a i a III - a ce codific antigenele
HLA corespunztoare (human leucocytar antigens)si componente ale
complementului (vezi cap. Baza genetic a rspunsului imun).

Antigenele HLA clasa I - Sunt prezente pe suprafaa tuturor celulelor nucleate

din organism i reprezint adevrate carnete de identitate biochimic i genetic pentru
fiecare individ n parte. Pentru ca un anume antigen s fie recunoscut de ctre un
limfocit T citotoxic (CD8) - este necesar restricia HLA, restricia CMH. Aceste
molecule fac diferenierea self-non-self i devin inta sistemului imunitar n trei
situaii:
pentru respingerea de esuturi i organe incompatibile (non-self)
cnd suprafaa celulelor proprii e modificat prin antigene virale tumorale etc.
cnd moleculele HLA sufer procese de uzur sau mutaii, ele devin autointe
care vor fi eliminate.

Antigenele HLA clasa a II-a au o distribuie celular mai limitat, n special pe

suprafaa celulelor imunocompetente (limfocit T, limfocit B, macrofag) i au un rol
esenial n declanarea reaciilor imunitare, prin interaciuni i cooperri celulare,
funcionnd ca un dicionar de recunoatere a structurilor strine organismului.
Receptorii TCR de pe suprafaa limfocitelor T (receptori pentru antigen) posed
specificitate dubl: att pentru antigene, ct i pentru o molecul HLA de pe suprafaa
celulelor cu care interacioneaz.

n concluzie, antigenele HLA clasa I intervin n prezentarea antigenelor

endogene ctre limfocitele T citotoxice, n timp ce antigenele HLA clasa a II-a se
asociaz cu antigene exogene prelucrate, pe care le prezint limfocitul T helper (CD 4).
Recunoaterea asociat a antigenului i a produilor CMH, funcioneaz ca un sistem
de siguran cu dou chei, care pe de o parte limiteaz potenialul distructiv al
limfocitelor i pe de alt parte asigur eficiena rspunsului imun.
Astfel, se demonstreaz faptul c sistemul imunitar a evoluat n aa fel nct
ambele tipuri de molecule HLA servesc ca i indicatoare rutiere pentru celulele T,
ghidndu-le spre antigen.

Fig. nr. 22 - Receptorul pentru antigen al limfocitului T (dup Klein)

2
 Domeniu variabil

Domeniu constant

Membrana citoplasmatic

Condiii fizico-chimice. Greutatea molecular.

Pentru ca o substan s fie imunogen, GM minim trebuie s fie de
aproximativ 10000 . Cu ct o substan posed o GM mai mare, cu att
imunogenicitatea acesteia crete, prin creterea numrului de epitopi. Epitopii sunt
situsuri antigenice specifice, capabile s interacioneze cu molecule de anticorpi.
Numrul de epitopi al unui antigen constituie valena unui antigen. Imunogenicitatea
antigenului este direct proporional cu valena sa.

Fig. nr. 23 - Structura unui antigen (imunogen)

1
2 3 1-epitop cu specificitate x
2-epitop cu specificitate
3-epitop
y cu specificitate z
3
1

3 3
2 2
 Conformaia spaial a antigenului
Sela (1969) demonstreaz faptul c, din punct de vedere fizico-chimic exist
dou categorii de epitopi:
- epitopi secveniali (lineari) - a cror imunogenicitate poate fi
modificat prin schimbarea secvenei monomerilor.
- epitopi conformaionali - structuri stereo-spaiale particulare, cu
modificarea imunogenicitii prin modificarea configuraiei spaiale (de obicei a
proteinelor globulare.

Fig. nr. 24 - Structura unui imunogen conformaional

1 5
1
2 3
4

(epitopii sunt numerotai 1,2,3,4,5)

n majoritatea situaiilor, anticorpii produi de proteinele naturale recunosc mult

mai bine epitopii conformaionali, dect pe cei secveniali.
n aceste situaii, legturile antigen - anticorp sunt de tip lact - cheie, pe baza
potrivirilor de conformaie steric. Epitopii conformaionali au o imunogenicitate
crescut i o gam larg de specificitate.

Accesibilitatea epitopilor
Zonele imunogene (epitopii) trebuie s fie dispuse la suprafaa celulelor, pentru
a fi accesibile efectorilor sistemului imunitar. Antigenele corpusculare sunt
fragmentate n macrofag i epitopii vor fi ulterior dispui pe suprafaa acestuia (din
aceast cauz, macrofagul reprezint principala celul prezentatoare de antigen
(CPA) care poate expune i zone imunologice aa - zise ascunse).

Natura chimic a antigenului

Imunogenele sunt substane organice macromoleculare:
Proteinele
- n special cele cu greutate molecular mare sunt foarte bune imunogene, mult mai
eficiente dect celelalte.
Polizaharidele
- sunt mai puin imunogene dect proteinele.
Lipidele, acizii nucleici
- sunt slabe imunogene, dar imunogenicitatea acestora crete n substane complexe
(lipoproteine, nucleoproteine, etc.)

4
 Complexitatea structural a moleculei de antigen
Cu ct heterogenitatea moleculei de antigen crete, cu att imunogenicitatea este
mai exprimat. Astfel, antigenele nucleoproteice, glicoproteice, lipoproteice sunt mai
bune imunogene dect antigenele simple.

Izomerismul optic
Influeneaz imunogenicitatea, moleculele cu reziduuri de aminoacizi levogiri
(L) fiind mai imunogene dect cele cu aminoacizi dextrogiri (D). (Explicaia este c
moleculele L pot fi mai uor degradate enzimatic n fagolizozomii celulelor
fagocitare).

Rigiditatea moleculei de antigen

O molecul stabil, rigid este mai bun imunogen dect o molecul
flexibil. Spre exemplu, gelatina dei are o greutate molecular mare este lipsit de
rigiditate. Dac acestei substane i se mrete coninutul n Tyr sau n Trp, molecula
devine stabil i antigenic.

Persistena moleculei de antigen n organism

Persistena epitopilor n organism influeneaz imunogenicitatea substanei
respective. Polimorfonuclearele neutrofile distrug epitopii n totalitate i funciile
imune nu pot fi stimulate. Dac antigenul persist nedegradat n fagocit, scade
imunogenicitatea substanei respective, pn la anularea ei. Se demonstreaz astfel
nc o dat - importana degradrii menajate a antigenului, cu expunerea epitopilor
specifici.

Cantitatea de antigen
- Dozele mici de antigene induc formarea unor cantiti mici de anticorpi,
cu mare afinitate i specificitate pentru antigenele respective.
- Dozele foarte mici de antigen stimuleaz n mod preferenial limfocitele
T, inducnd imunitatea mediat celular i chiar memorie imunologic.
- Administrarea unei doze foarte mari de antigen poate fi urmat de
fenomenul de paralizie imunologic, ce se caracterizeaz prin lipsa rspunsului
imun.

Modalitatea de administrare a antigenului:

- Administrarea antigenelor n doze fracionate, la diferite intervale -
asigur un rspuns imun mult mai bun dect doza de antigen unic.
- n funcie de natura antigenelor i cantitatea acestora, asocierea
antigenelor poate produce un efect sinergic n cursul imunizrii
- Administrarea antigenelor mpreun cu anumii adjuvani asigur o
imunogenicitate superioar.
- Antigenele solubile, macromoleculare sunt mai imunogene cnd sunt
inoculate intradermic, dect pe cale intravenoas.

5
 - Administrarea parenteral a antigenului ofer avantajele contactului
rapid cu celulele imunocompetente (protejeaz antigenul de degradarea
enzimatic posibil prin enzime digestive).
Toate aceste constatri experimentale stau la baza regulilor de administrare ale
vaccinurilor.

Rolul factorilor genetici

A fost demonstrat experimental pe linii genetic pure de oareci (linii inbread).
Astfel de experimente au dovedit faptul c markerii HLA pun amprenta unicitii
individuale a rspunsului imun. Spre exemplu, David C. i Mac Devitt demonstreaz
faptul c anumii oareci, incapabili de rspuns imun la un antigen dat, pot produce,
prin ncruciarea cu un oarece hibrid (care rspunde la acel antigen) - un rspuns
imun normal la antigenul incriminat. Genele care controleaz reactivitatea imun au
fost denumite gene Ir (immune response, adic genele rspunsului imun
individualizat).
David C., analiznd semnificaia regiunii genetice I (a complexului H 2 de la
oarece), afirm faptul c genele Ir au 6 categorii funcionale:
gene Ir care confer susceptibilitatea individului la boli infecioase
gene Ir care intervin n procese de cooperare celular
gene Ir care confer susceptibilitate crescut la boli autoimune i alergice
gene implicate n sinteza unor mediatori imunologici
gene ce intervin n diferenierea celulelor imunocompetente
gene care codific respingerea de gref incompatibil
Factorii genetici influeneaz att mecanismele rezistenei naturale, ct i
mecanismele imunitii dobndite.

Vrsta organismului
Rspunsul imunologic al vrstelor extreme este mai slab (n mod fiziologic)
dect la maturitate.
La copii putem lua n discuie imaturitatea sistemului limfoid, n timp ce la
vrstnici putem constata declinul funciilor acestui sistem.
Alterarea rspunsului imunitar la subiectul vrstnic:
Diminuarea mecanismelor rezistenei naturale
Involuia timusului i alterarea funciilor diverselor subclase ale limfocitelor T
Alterarea rspunsului imun umoral, calitativ i cantitativ
Cooperri celulare defectuoase: limfocit T - limfocit B
Diminuarea reactivitii limfocitelor
Consecinele patologice ale supravegherii imunitare la subiectul vrstnic se
produc prin fragilitate la aciunea agenilor etiologici infecioi i prin frecvena
crescut a maladiilor autoimune i a bolii canceroase.

6
 Nicolleti C. i colaboratorii au studiat modalitile de alterare a rspunsului
imun umoral la vrstnici, pornind de la experimente pe animale. Studiul demonstreaz
faptul c anticorpii antifosforilcolinici (antipneumococ) - produi de ctre oareci
vrstnici (BALBC: 18 - 22 luni) sunt diferii din punct de vedere structural i
funcional, comparativ cu anticorpii produi de ctre oarecii tineri (3-4 luni).
Anticorpii produi de ctre oarecii vrstnici au un coninut idiotipic mai srac i o
capacitate de legare a antigenului mai sczut.

MODALITI DE CLASIFICARE ALE ANTIGENELOR

(dup OLINESCU)

1. Dup natura antigenelor:

- Naturale (existente n natur)
- Sintetice (obinute artificial)
2. Dup sursa lor:
- Exoantigene (antigene exterioare organismului)
- Endoantigene (antigene proprii organismului, modificate prin
tumori, infecii virale, mbtrnire, etc.)
3. Dup gradul de nrudire genetic:
- Autohton (autolog) antigene proprii unui individ
- Singen (izolog) - antigenele provin de la indivizi ai aceleai
specii, dar identici din punct de vedere genetic (ex.: gemenii monozigoi sau linii
de animale inbread).
- Alogen (omolog) - provin de la subiecii aceleai specii,
diferii din punct de vedere genetic (ex.: sistemul ABO i sistemul Rh)
- Xenogen (heterolog) - antigenele provin de la specii diferite.
4. Dup necesitatea prezenei limfocitelor T, antigenele pot fi:
- Timodependente - pentru a declana reacii imune au nevoie
de prezena limfocitelor T (marea majoritate a antigenelor naturale).

7
 - Timoindependente - nu necesit prezena limfocitelor T,
realiznd stimularea direct a limfocitelor B. De exemplu: flagelina,
endotoxinele, polivinilpirolidona, etc., cu epitopi care se succed n mod repetativ.
5. n funcie de necesitatea de prelucrare a antigenului, la nivelul celulei
prezentatoare de antigen - CPA.
- Tipul I - nu necesit prelucrarea. Ex.: fibrinogenul, proteinele
Listeriei monocitogenes.
- Tipul II - necesit doar desfurarea moleculei de antigen,
cu evidenierea epitopilor si. Ex.: lizozim, mioglobin, ribonucleaz.
- Tipul III - necesit degradarea moleculei (ovalbumin,
citocromul C)
6. Natura antigenelor agenilor infecioi.
- Antigene bacteriene (somatice i difuzibile):
Somatice
- ale peretelui celular: polizaharidul C, endotoxinele bacililor gram-
- capsulare: polizaharidele pnemnococice
- ribozomale: antigen P al bacteriilor patogene
- flagelare: antigenul H al Salmonellei
- piliare: proteina M piliar streptococic
- Antigene parazitare, micotice, virale (somatice)
Difuzibile
- toxine: ex.: toxina difteric
- enzime extracelulare: ex.: hialuronidaza stafilococic.
7. Dup natura antigenelor organismului:
- Antigene HLA clasa I - exprimate pe suprafaa tuturor celulelor
nucleate ale organismului, confer noiunea de self
- Antigenele HLA clasa II - exprimate pe suprafaa celulelor care intervin
n cooperri imunologice
- Antigene eritrocitare: - antigenele sistemului ABO, Rh, MN
(stabilesc regulile transfuzionale)

8
8. Dup modalitatea de utilizare a antigenelor:
- n scop diagnostic: folosind antigene cunoscute, se pot detecta prin
reacii serologice - anticorpii specifici din serul de bolnav.
- n scop profilactic: pentru prepararea vaccinurilor:
- corpusculare (ex.: bacterii cu virulen atenuat sau bacterii omorte)
- difuzibile (ex.: anatoxine, preparate din exotoxine)

9. Dup capacitatea de declanare a rspunsului imun:

- Antigene incomplete - haptene
Haptena este o substan cu greutate molecular mic, incapabil s produc
singur un rspuns imun, dar care poate deveni imunogen (poate induce
sinteza anticorpilor) - prin cuplare cu o molecul carrier (purttor)
Haptena - este de obicei de natur polizaharidic i confer n mare parte
specificitatea antigenului respectiv (are o GM sub 10.000 i aproximativ 1 -
10 epitopi)
induce preponderent rspuns imun umoral
Carrier- purttorul haptenei este de natur proteic
- prin cuplare cu haptena determin apariia unui antigen complet,
imunogen
- rspunsul imun indus este puternic, n special de tip mediat celular
Haptenele autocuplante sunt substane cu greutate molecular mic (ex.: sruri
de diazoniu), care se pot cupla spontan cu proteinele organismului,
determinnd apariia unor afeciuni dermatologice imunoalergice. Prin aceste
haptene autocuplante s-ar putea explica i mecanismul alergiei la Peniciline.
Antigenul complet - substan capabil s produc singur rspuns imun (ex.:
polipeptidele, substane complexe chimic)

FACTORI CARE INFLUENEAZ SPECIFICITATEA

ANTIGENIC

Specificitatea antigenic este asigurat prin anumite pri ale moleculei de

antigen, denumite epitopi.

9
 Un epitop este alctuit din civa aminoacizi sau cteva polizaharide, dintre care
unul este imunodominant i asigur specificitatea antigenic. Specificitatea este
influenat nu numai de compoziia chimic a moleculei respective, ci i de
conformaia ei steric (epitopi conformaionali).
Orice modificare n structura chimic sau conformaional a unui antigen duce
la schimbri de specificitate.
S-au obinut informaii privind specificitatea antigenic, prin studii
experimentale asupra lipopolizaharidului Salmonellei (antigenul O).

Fig. nr. 25 Lipopolizaharidul genului Salmonella.

Lipidul A Smburele UR UR UR
polizaharidului
uniti repetitive compuse
din 3-6 monozaharide

Specificitatea antigenic a Salmonellelor se datoreaz:

ordinii n care sunt dispuse aceste monozaharide
tipului de legtur chimic ( sau glicozidic)
ramificrii oligozaharidului.
Astfel, se explic specificitatea antigenic diferit a celor 1500 de specii ale
genului Salmonella.

Specificitatea epitopilor proteici depinde de:

secvena aminoacizilor n cazul proteinelor fibrilare
conformaia stereospaial a proteinelor globulare.

Valena antigenului este dat de numrul de epitopi al antigenului i este direct

proporional cu acest numr.
Structura unitii repetitive ale diverselor grupuri antigenice ale genului
Salmonella este:

10
 Salmonella paratiphi A - formula epitopilor este 1,2,12.
Epitopul imunodominant 2, cu structura polizaharidic de tipul:
[manoza paratoza
[rhamnoza [
[galactoza
Salmonella paratiphi B - formula epitopilor 1,4,5,12
Epitopul imunodominant 5, cu structura:
[manozaabequoza
[rhamnoza [
[galactoza

COMPLEXUL IMUN ELEMENTAR (CIE)

CIE este complexul AG - AC format la nivel molecular, ntre epitop (aparinnd

antigenului) i paratop (aparinnd anticorpului).

Fig. nr. 26 Complexul imun elementar (dup Klein, 1991)

Imunoglobulina

Epitopi

Imunoglobulina

Legturile epitop - paratop sunt realizate prin fore fizice, (sunt reversibile),
structurile implicate fiind complementare steric (modelul minilor care se strng)

Conceptul de imunon
Un antigen ideal trebuie s declaneze rspunsul imun primar i va avea
urmtoarele proprieti:
greutatea molecular s fie ideal (> 10.000 )
molecula s aib o structur linear, s fie flexibil, hidrofil i capabil s
interacioneze liber cu receptori de suprafa

11
 rspunsul imun s necesite cooperri celulare minime
numrul minim de epitopi coninut s fie aproximativ 10. (Concept elaborat de
ctre Dintzis i colaboratorii - 1976)

12