Universitatea POLITEHNICA din Bucureti

Facultatea de Inginerie Medical

Departamentul Biomateriale i Dispozitive Medicale (BDM)

Testarea in-vitro i in-vivo

a implanturilor

Curs 1

Ce este un biomaterial?

Clasificarea biomaterialelor n funcie
de criterii diferite.

Exemple de biomateriale.
 Rspunsul biologic
Rspunsul esutului Tipul materialului

esutul nconjurtor moare Toxic

Se formeaz n jurul implantului

Biologic inert
capsule fibroase din esut

Se formeaz o legtur interfacial

Bioactiv
ntre materialul de implant i esut

Materialul se dizolv, fiind

Resorbabil
nlocuit de esutul nconjurtor
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

Se face conform normelor de standardizare i

legislaiei n vigoare.

n laborator :
- in-vitro: scufundare n SBF
interacii cu diferite linii celulare
- in-vivo: testri pe animale cu reacie biologic
apropiat sau asemntoare cu a
organismului uman.

Teste clinice.
clinice
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

n laborator:
 In-vitro:
o relativ uor de realizat, limiteaz utilizarea animalelor
n astfel de experimente;
o pot s apar diferene fa de comportarea n mediul
fiziologic, mult mai complex.
 In-vivo:
o se cere minimizarea utilizrii animalelor n
experimente, asigurndu-ne c rezultatele obinute
sunt relevante i obinute n condiii de tratament
adecvat al subiecilor.
TESTAREA BIOMATERIALELOR

n prezent exist teste de

biocompatibilitate stabilite de:

 ISO (International Organization for Standardization)

 FDA (Food & Drug Administration) care permit

predicii privind modul n care un biomaterial va
reaciona la contactul cu un esut viu.
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

ISO a publicat un ghid ISO al

biocompatibilitii (Biocompatibility Testing
Matrix), care cuprinde diferite teste n funcie
de:
 tipul de contact biomaterial-om; Pentru o anumit categorie
de dispozitive se recomand
 durata contactului; un numr de teste de
 utilizarea clinic. biocompatibilitate.

Majoritatea testelor trebuiesc realizate n

condiii de laborator controlate, conform GLP
(Good Laboratory Practices).
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

n Europa, pn recent, diferitele ri aveau

reglementri proprii privind fabricarea i
comercializarea dispozitivelor pentru uz uman.

Din ianuarie 1995, aceste dispozitive sunt
comercializate n Uniunea European conform
reglementrilor EU Medical Devices Directive
93/42/EEC, care specific cerinele evalurii
biocompatibilitii.
(http://eur-
lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=CELEX:3
1993L0042:EN:HTML).

n prezent, evalurile de biocompatibilitate ale
dispozitivelor medicale se realizeaz conform
recomandrilor standardului ISO 10993-1/EN
30993-1.
TESTAREA BIOMATERIALELOR
Lista prilor ISO 10993
Parte Titlu Parte Titlu
1. Evaluare i testare 10. Teste pentru iritare i sensibilitate
Cerine de ntreinere a
2. 11. Teste pentru toxicitatea sistemic
animalelor
Teste de genotoxicitate,
Prepararea probei i materiale de
3. carcinogenicitate i toxicitate 12.
referin
reproductiv
Selectarea testelor pentru Identificarea i dozarea cantitativ a
4. 13.
interacia cu sngele produilor de degradare din polimeri
Identificarea i dozarea cantitativ a
Teste de citotoxicitate
5. 14. produilor de degradare din
metode in vitro
ceramice
Identificarea i dozarea cantitativ a
Teste pentru efectele locale
6. 15. produilor de degradare din metale
dup implantare
i aliaje
Reziduurile sterilizrii cu oxid Schema studiului toxico-cinetic al
7. 16.
de etilen produilor de degradare eliberai
Reziduri de glutaraldehid i
Investigarea clinic a
8. 17. formaldehid n dispozitive medicale
dispozitivelor medicale
sterilizate industrial
Degradarea materialelor pentru
9.
testarea biologic
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

Protocolul evalurii biologice a unui dispozitiv

medical depinde de:

 natura materialelor utilizate la construcia lui;

 natura contactului cu organismul uman;
 durata contactului cu organismul uman.
 TESTAREA BIOMATERIALELOR
Clasificarea dispozitivelor utilizate n scopuri medicale,
n funcie de natura contactului cu organismul
CATEGORII DE DISPOZITIVE EXEMPLE
electrozi, proteze externe, benzi de fixare, bandaje de
Piele
comprimare, monitoare
lentile de contact, catetere urinare, dispozitive
Superficiale Membrane mucoase intravaginale i intraintestinale, tuburi endotraheale,
bronhoscop, proteze dentare, dispozitive ortodontice
Suprafee cu dispozitive de vindecare sau bandajare, pansamente
leziuni/ compromise ocluzive
Indirect, flux garnituri de transfer sau extensie, utilizate n
sanguin administrare de snge, soluii, etc.
Comunicare Comunicare laparoscoape, artroscoape, sisteme de drenare, cimenturi
extern esuturi, os, dentin dentare, materiale de umplutur dentare, capse piele
catetere intravasculare, electrozi pacemaker temporari,
Flux sanguin
tuburi i accesorii pentru oxigenatoare i dializ
cuie i plci ortopedice, implanturi subperiostal i de sn,
nlocuire de articulaii i tendoane, proteze osoase,
Dispozitive implant
cimenturi i dispozitive intraosoase i de eliberare de
esut/os
medicamente, senzori i stimulatori neuromusculari,
Implanturi laringe artificial, cleme de legare
electrozi pacemaker, fistule arteriovenoase artificiale,
valve cardiace, grefe vasculare, catetere interne de
Snge
eliberare medicamente, dispozitive de asisten
ventricular
 TESTAREA BIOMATERIALELOR

n funcie de durata contactului cu

organismul deosebim dispozitive cu un
contact:
 limitat (<24 ore) - A;
 prelungit (24 ore - 30 zile) - B;
 permanent (>30 zile) - C.

 Un dispozitiv destinat unui contact superficial, o

perioad limitat de timp, nu este necesar s
rspund acelorlai cerine n ceea ce privete
biocompatbilitatea, ca un implant obinut din acelai
material i folosit permanent.
 TESTAREA BIOMATERIALELOR
Matrice de testare a biomaterialelor

Carcinogenicitate
Hemocompatibili
Genotoxicitate
Citotoxicitate

Sensibilitate

Implantare
Toxicitate

Toxicitate

Toxicitate
sistemic

subacut
Durata

Iritaii
CATEGORII DE
contactului

cronic
DISPOZITIVE

tate
A   
Piele
B   
C   
A   
Membrane
Superficiale
mucoase
B      
C        
A    
Suprafee
cu leziuni/ B      
compromise
C        
 Teste ISO
 Teste FDA
 TESTAREA BIOMATERIALELOR
 Teste ISO Matrice de testare a biomaterialelor
 Teste FDA

Genotoxixicitate

compatibilitate
Citotoxicitate

Sensibilitate

Implantare
Toxicitate

Toxicitate

Toxicitate
sistemic

subacut

Carcino-
Hemo-
Durata

Iritaii
CATEGORII DE

genicitate
contactului

cronic
DISPOZITIVE

A     
Indirect, flux
B      
sangvin
C          
A    
Comunicare
Comunicare
esuturi, os, B       
extern
dentin
C         
A      
Flux sanguin B        
C          
A    
Dispozitive
implant B       
esut/os
C         
Implanturi
A       
Snge B        
C          
 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR

SBF (simulated body fluid)=fluid biologic simulat=lichid fiziologic

simulat= soluie Kokubo.

Este un fluid anorganic, necelular, care are n compoziie specii

ionice similare cu cele ale lichidului extracelular uman, n
concentraii identice, utilizat n scopul de a reproduce formarea de
apatit pe materiale bioactive testate in-vitro.

Acest lichid poate fi folosit nu numai pentru evaluarea in- vitro a

bioactivitii materialelor artificiale, dar, de asemenea, poate fi
utilizat la acoperirea cu apatit a diferitelor materiale, n condiii
biomimetice.

Concentraiile speciilor ioni din SBF sunt date n tab. 1.

 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR

pH-ul este ajustat la pH = 7,25 la 36,5 C, prin utilizarea de 50 mM (= mmol/dm3)

de tris(hidroximetil) aminometan i aproximativ 45 mM de acid clorhidric.
Cnd capacitatea de formare a apatitei nu este att de mare, pH-ul SBF-lui este
uneori ajustat la pH = 7,40.
 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR
Modificarea concentraiilor de ioni pentru SBF Tab. II.

Reaciile la interacia material- SBF depind important de concentraiile

speciilor ionice:
1. HPO42- PO43- + H+

2. [Ca2+]<[H+]recombinare PO43- + H+ HPO42-

[Ca2+]>[H+]reacie de formare
10Ca2++ 6PO43- + 2OH- Ca10(PO4)6(OH)2
 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR

Materiile prime utilizate la sinteza SBF-lui Tab. III .

 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR
 Sistemul CaO-SiO2-P2O5 (Kokubo)
 TESTARE in-vitro PRIN SCUFUNDARE N
SBF A MATERIALELOR

Evaluarea in- vitro n SBF sau SBF modificat (M-SBF) se face prin
scufundare diferite intervale de timp, conform indicaiilor standard.

Etapa urmtoare este de splare soft ndeprtarea srurilor

solubile precipitate pe suprafaa materialului.

Modaliti de evaluare a interaciei:

- analiza suprafeei prin diferite tehnici experimentale:
experimentale difracie de
raze X, FT-IR (ATR), microscopie electronic (SEM, TEM) exemple:
biosticle, vitroceramuri, ceramica fosfatic, biocimenturi etc.
- cntrirea probelor nainte i dup imersare exemple:
biocompozite polimerice, materiale hibride etc.

W(%)=(m-mo)x100/mo,

mo-masa probei nainte de imersare (g); m-masa probei dup imersare

n SBF un anumit timp (g); W- variaia de mas (%)

Care sunt tipurile de rspunsuri la interacia esut-
biomaterial?

Care sunt metodele de determinare a
biocombatibilitii pentru diferite tipuri de materiale?

De ce depinde evaluarea biologic a unui dispozitiv?

Care sunt conform normelor de standardizare tipurile
de contact a unui dispozitive cu esutul?

Ce reprezint SBF-ul?

De ce la sinteza SBF-lui pH-ul joac un rol important?

Cum se evalueaz biocompatibilitatea prin scufundare
n SBF?