Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Ultastuctura placentei
Hormonii placentari
S-a aratat ca placenta este un important organ endocrin, care
supleaza functia endocrina a ovarului, adenohipofizei si chiar a unor
factori releasing hipotalamici. Dupa stuctura chimica, hormonii
sintetizati de placenta sunt de doua categorii: hormoni proteici si
hormoni steroizi. Din prima categorie fac parte:
- coriogonadotropina (HCG)
- somatomamotropina crionica umana (HCS) sau hormonul
lactogen placentar (HPL)
- tirotropina corionica umana (HCT)
- corticotropina corionica umana (HCC) sau ACTH placentar
Hormonii steroizi placentari sunt reprezentati de :
- progesteron si
- estrogeni
Coriogonadotropina (HCG) este un hormon secretat de
sincitiotrofoblast si citrofoblast. Din punct de vedere chimic
coriogonadotropina este o glicoproteinacare difera de
gonadotropinele hipofizare, FSH si LH, acestea fiind de natura
peptidica, dar are o natura asemanatoare: foliculostimulanta si
luteinizanta. La coriogonadotropina predomina actiunea ei
luteinizanta, de unde rolul sau foarte important in mentinerea
corpului galben de sarcina, in primele trei luni, perioada in care
acesta secreta intens progesterona si estrogeni.
Somatomamotropina corionica (HCS) sau hormonul lactogen
placentar (HPL) este de natura proteica si se aseamana din punct de
vedere imunologic cu hormonul de crestere hipofizar (STH). Este
produs de sincitiotrofoblast din saptamanile 5-6, cand nivelul
plasmaticeste de 0,1 mg/ml; secretia sa creste foarte mult in al trei-lea
trimestru de gestatie si dispare foarte repede din sange, dupa nastere.
El dezvolta si pregateste glanda mamara pentru lactatie. Actunea sa
mamotropa este insa foarte slaba in comparatie cu cea a prolactinei
hipofizare. Cea mai mare cantitate de hormon este metabolizata in
ficat si foarte putin este eliminat prin urina materna.
Tirotropina corionica (HCT) este un hormon placentar,
considerat a indeplini o actiune stimulatoare tiroidiana, in fazele
timpuriiale sarcinii normale, fiind secretata si in sarcinile molare.
Corticotropina corionica (HCC) sau ACTH-ul placentar nu este
recunoscut ca hormon placentar de toti autorii.
Progesterona este hormonul steroid secretat din primele zile si
saptamani de sarcina si poate fi evidentiat in plasma sanguina si
urina materna. In primul trimestru este produsa de corpul galben de
sarcina, iar in trimestrele 2 si 3 numai de placenta. Extirparea
ovarelor in ultimele doua trimestre nu este urmata de intreruperea
sarcinii. Progesterona este sintetizata si secretata de sincitiotrofoblast,
din colesterolul preluat activ din sangele matern al spatiilor
interviloase.
Estrogenii sunt hormoni steroizi care include: estradiolul, estrona
si estriolul, ultimul fiind important pentru evaluarea eliminarii sale
uterine si aprecierii dezvoltarii fatului in uter. Ei sunt produsi in
cantitati mari de sincitiotrofoblast, concentratia lor fiind
proportionala cu cresterea in greutate a placentei. In primele
saptamani de sarcina sunt secretati si de corpul galben,
ulterior principala sursa fiind placenta. Hormonii estrogeni
stimuleaza dezvoltarea si inmultirea celulelor miometrului si ale
tesutului conjunctiv uterin. La termen cand secretia de progesterona
inceteaza, estrogenii sensibilizeaza musculatura uterina la actiunea
ocitocinei, declansandu-i astfel travaliul de expulzia fatului.
Date sumare de anatomie macroscopica si cantitativa a placentei
umane
S-a aratat ca placenta umana este de tip deciduat, discoidala,
hemocoriala si viloasa.
Dimensiuni:
-Diametrul placentei matureeste de 150-200 mm;
-Grosimea la termen este de 20 mm;
-Greutatea, circa 500g;
-Suprafata de schimb a vilozitatiloreste de 14 m2;
-Spatiul intervilos ocupa, din volumul total al placentei 25%;
-Grosimea membranei interhemale, la inceputul gestatiei este de:
0,025; mm, iar la placenta matura este 0,002 mm;
-Diametrul vilozitatilor: lunile 1-2 =140 microni; luna a 5-a = 70
microni; luna a 8-a = 50 microni;
-Raportul tesut conjunctiv/trofoblast = 60:35;
-Raportul nucleo-citoplasmatic in trofoblast =1:1,13;
-Volumul total al citrofoblastului din insule si placa bazala, in
placenta la termen = 2 cm3
Pozitia placentei raportata la peretii uterului si locul unde s-a
realizat implantatia poate fi: dorsala-situs dorsalis, cel mai frecvent;
ventrala-situs ventralis, corespunzad peretelui anterior al uterului;
laterala-situs lateralis; fundica-situs fundalis si cervicala-situs
cervicalis sau pervius. S-a mai descris si situs cornualis, dar acesta nu
este omologat in Nomina Embryologica. Dintre toate aceste pozitii
enumerate, placenta cervicala sau praevia este considerata un tip
patologic de insertie placentara, deoarece osbtureaza total sau partial
orificiul intern al colului uterin si produce mari complicatii
hemoragice in trimestrul 3 de sarcina si la sarcina. Ea este intalnita cu
o frecventa medie de 1% si in functie de gradul de obstructie a
ostiului intern al colului uterin poate fi: placenta praevia partial
centrala (15-20%), placenta praevia marginala (20-30%), placenta
praevia laterala (40-50%) cu marginea placentei la circa 2 cm de
orificiul intern al colului.
In cazuri anormale, vilozitatile coriale pot patrunde adanc in peretele
uterului, formand: placenta acreta, in care vilozitatile ajung in
apropierea miometrului; placenta increta, cand patrund in miometru
si placenta percreta, in care trec de miometru, ajungand pana la
peritoneul uterin.
Forme anormale de placenta. Forma normala a placentei umane
este discoidala, de unde si numele de placenta discoidea. De la aceasta
forma pot exista numeroase abateri sau variatii: placenta accesoria
annularis, bidiscoidea, bilobata si trilobata, circumvalata, duplex,
fenestrata, lobata, lunata, marginata, membranacea, multilobata,
multiplex, reflexa reniformis, velamentosa si placenta zonaria.
Variatiile de fixare a cordonului ombilical sunt trei mai importante:
fixionis centralis si fixionis marginalis si fixionis velamentosa.
Placenta la nastere este expulzata din uter impreuna cu
membranele fetale; amnios, corionul cu decidua parietala si cordonul
ombilical. Normal, expulzia placentei (delivrenta) se produce prin
contractiile miometrului, la 20-30 de minute, dupa a nou-
nascutului.Fata fetala a placentei este neteda si luciosa, deoarece
placa coriala este invelita de amnios.Pe acesta fata se afla
insertiacordonului ombilical. Fata materna sau bazala este
subimpartita in 15-40 de cotiledoane, ce corespund lobilor
placentari.Cotiledoanele sunt separate de mici santuri, carora, in
profunzime, le corespund septurilespatilui intervilos. Datorita
rupturilor vasculare din timpul dezlipirii placentei, fata materna este
acoperita de sange.Dezlipirea placentei se produce la nivelul deciduei
bazale, unde, inca inainte de nastere, prin degenerare tisulara, s-a
produs o zona de demarcatie(spatiu de clivaj). Ruperea vaselor
saguine in timpul dezlipirii da nastere, mai intai, hematomului
retroplacentar. Dupa expulzia placentei prin contractia miometrului,
uterul isi micsoreaza volumul si prin inchiderea vaselor rupte,
diminueaza pierderea de sange. Resturile placentare in uter sau
scaderea fortei de contractie a miometrului pot determina noi
hemoragii. Dupa nastere, intr-o perioada de 6-8 saptamani, organele
genitale materne isi revin la forma si functia lor dinaintea gestatiei.
MATRICEA EXTRACELULARA
HTA de sarcina
Hipertensiunea arteriala constitue cea mai comuna, daca nu
principala complicatie a sarcinii. De cele mai multe ori HTA e
determinata de sarcina insasi, dar sdr poate preexista sarcinii sau
aparitia lui poate coincide cu sarcina.
Exista multiple denumiri care definesc aceiasi tulburare: toxicoza,
toxicoza de sarcina, toxemie- toxemie gravidica pura sau extinsa,
gestoza- gestoza EPH (edem, proteinurie si hipertensiune), mono sau
trisimptomatica, gestoza EPH extinsa tip B cu alte manifestari ca
traculocitopemie (T), afectare hepatica (L) sau preeclampsie (A),
miropatie gravidica, sdr vasculorenal de sarcina, sdr preeclamptic-
eclampsic, hipertensiune asociata sarcinii, hipertensiune indusa de
sarcina.
Comitetul pentru protectia sanatatii femeii si FIGO (1952) propune
clasificarea:
1. Toxemie acuta de sarcina :
-preeclampsie (medie, severa)
-eclampsie
2. Afectiuni hipertensive cronice in cursul sarcinii:
-fara toxemie
-cu toxemie supraadaugata
3. Toxemie neclasificata
iar Organizatia internationala pentru studiul gestozelor (1970)
1. Calsificare simptomatica
-gestoza monosimptomatica (E, P, H)
-gestoza plurisimptomatica (EPH)
-eclampsie iminenta
2. Clasificare patogenica
-gestoza supraadaugata
-gestoza tranzitorie
-gestoze neclasificate
3. Boli concomitente
-patologie preexistenta prezentand triada EPH fara
modificari de sarcina
-boala concomitenta si gestoza
-alte cazuri
Sindromul care amplifica al-3-lea trimestru de sarcina la o femeie,
de obicei pimisparo, indemna de orice afectiune renala sau vasculara
anterioara, la data aparitiei simptomelor, tradus prin hipertensiune
cu sau fara albuminurie si eventual cu o retentie excesiva de apa
(edem generalizat). Netratat, evolueaza, de obicei, catre eclampsie,
corect tratat se vindeca fara sechele si nu recidiveaza la sarcinile
ulterioare.
Comitetul de terminologie al colegiului American de obstretica si
Ginecologie propune o clasificare simpla:
Grupa A: -Hipertensiunea indusa de sarcina
1 Preeclompsie
2 Eclompsie
Grupa B: -Hipertensiune cronica de orice cauza dar
independenta de sarcina;
Grupa C: -Preeclompsie sau eclompsie supraadaugata
hipertensiunii cronice;
Grupa D: -Hipertensiune cronica;
Grupa E: -Tulburari hipertensive neclasificate
Drept criterii de diagnostic al notiunilor respective se considera:
a) Hipertensiune in sarcina:
- cresterea presiunii sistolice cu 30 mm Hg sau mai mult;
- cresterea presiunii diastolice cu 15 mm Hg sau mai mult;
- presiunea sistolica de 140 mm Hg sau mai mult;
- presiunea diastolica de 90 mm Hg sau mai mult;
Modificarile tensionale trebuie sa fie prezente la 2 determinari
separate de cel putin 6 ore.
b) Preeclampsia- aparitia bipertensiunii in timpul sarcinii dupa 20 de
saptamani impreuna cu proteinuire (mai mult de 0,3 g/l in 24 ore
sau un gram pe litru pe esantion randomizat) sau cu edeme
generalizate (edeme persistente dupa 12 ore de repaos la pat) sau
castig in greutate de aproximativ 2 kg mai mult.
c) Eclampsia – aparitia convulsiilor la o gravida cu preeclampsie.
d) Hipertensiune cronica de orice cauza: hipertensiune de 140/90 mm
Hg sau mai mare asociata sarcinii, prezenta inainte de sarcina sau
inaintea unei sarcini de 20 de saptamani.
e) Preeclampsia sau eclampsia supraadaugata hipertensiunii cronice-
pentru a pune acest diagnostic e necesar sa se gaseasca o crestere de
30 mm Hg sau mai mult in presiunea sistolica, impreuna cu
proteinurie, edeme generalizate sau amandoua
f) Hipertensiune tranzitorie- aparitia hipertensiunii arteriale in
sarcina sau langa imediata la o femeie normotensiva, presiune
revenind la normal in zece zile de la o nastere; nu sunt alte semne de
preeclampsie
g) Tulburari hipertensive neclasificate
EPIDEMIOLOGIE
Sunt afectate in special primiparele si mai ales primiparele tinere,
raportul primipare/ multipare variind de la 1,5/1 la 6/1.Exista o
tendinta familiala pentru aparitia preeclampsiei, se dezvolta mai ales
la femeile cu standard socioeconomic scazut, subnutritie si
deproteinizate, o serie de conditii predispunand sau fiind asociate:
hidraminosul, sarcina multipla, afectiunile hipertensive
cardiovasculare, afectiunile renale cronice, diabetul.
RISCURI FETALE
ETIOPATOGENIE
SARCINA NORMALA
I Adaptarea vasculara si renala in cursul sarcinii normale
Adaptarea vasculorenala se produce inca din primele saptamani de
sarcina. In acest sens se produce:
1) O vasodilatatie generalizata musculotropa, in cadrul hipoteniei
generalizate a tuturor fibrelor musculare netede
2) Cresterea debitului cardiac
3) Cresterea volemiei (apr 30%)
4) Scaderea tensiunii arteriale predominant sistolica, in special in
trimestrul II
5) Scaderea sensibilitatii vasculare la stimuli vasopresori ca
angiotensina II, cotecolamine si altii
6) O retentie hidrosodata necesara fatului si anexelor, cresterii
lichidului circulator cu 1500-2000 ml lichid si o rezerva de 2000-3000
ml
7) O crestere generalizata a debitelor viscerale si mai ales renale, de
unde:
-cresterea considerabila a fluxului sangvin renal (25-30%)
-cresterea filtratiei glomerlare (50%) ceea ce explica cresterea
cu 50% a cleorence-ului glomerular, scaderea creatininei ce nu
depaseste 7 mg/l, scaderea azotemiei (sub 25 g %), scaderea uricemiei
(sub 0,4 mg/l)
Echilibrul groburulo-hibular nu e totdeauna conservat, astfel la
sfarsitul trimestrului III poate surveni:
- o crestere a uricemiei
- glicogurie tubulara
- amino-acidurie
FIZIOPATOLOGIE
DIAGNOSTICUL
1. Diagnosticul precoce
Boala se dezvolta cu mai multe saptamani ininte de aparitia
semnelor clinice. In acesta perioada se pot identifica femeile ce vor
dezvolta sindromul de preeclampsie –eclampsie prin tehnici de
screening:
a) reactivitatea la angiotensina II;
b) roll-over-test (test pozitianal);
c) alte metode
a) Testul la angiotensina II se bazeaza pe considerentul ca femeia
gravida normala dezvolta o stare refractara la efectul presor al
angiotensinei, pe cand cea care dezvolta o preeclampsie pierde
aceasta stare refractara. Astfel pentru a ridica TA diastolica cu 20
mm Hg este nevoie la femeia gravida de perfuzie de 7,4 mg/kg/min.
b) Roll-over-test in saptamana a 28-32-a de sarcina se pozitioneaza
bolnava in decubit lateral stang si i se ia tensiunea pana cand valorile
acesteia se stabilizeaza. Se intoarce bolnava in decubit dorsal si i se ia
TA la 1 si 5 minute. O crestere a presiunii diastolice cu 20 ml Hg sau
mai mult e anormala.
c) Alte metode:
-Urmarirea TA
-Dozarea acidului ureic; cresterea acestuia precede aparitia
hipertensiunii arteriale
-Clearence de sulfat de dehidroepiandrosteron; creste la gravidele
care vor dezvolta preeclampsie
2. Diagnosticul pozitiv
Semne si simptome: aparitia - hipertensiunii arteriale
- proteinurie
- edeme eventual
Hipertensiunea arteriala cel mai important semn clinic pentru ca
reflecta severitatea vasospasmului. Valorile diastolice situeaza, de
obicei, preeclampsia in forma clinica: 90-100 mm Hg usoara; 100-110
mm Hg moderata; mai mare de 110 severa. E principalul factor ce
genereaza convulsiile eclamptice.
Proteinuria apare de obicei dupa hipertensiune si edeme excesive.
Este o proteinurie mixta, dar fara alte semne de elemente neferitice
sau nefrotice in sediment. Cresterea ei este un semn de gravitate.
Edemele generalizate si castigul excesiv in greutate sunt semne de
alarma in aparitia preeclampsiei. Se intalneste in 60-80%in
preeclampsii, dar si in 35% in sarcinile normale.
Alte semne: in formele severe: oligurie cefalee, tilburari vizuale,
durere epigastrica sau in hipocondrul drept, exagerarea reflexelor
tendinoase. O crestere brutala a tensiunii determina: cefalee in casca,
epigastrolgia “in bava”, hiperreflexie, scotoame. Olijuria si cresterea
proteinuriei anunta criza eclamptica.
Date de laborator:
Parametri fetoplacentari
1.Clinic
a)examenul obstretical poate evalua:
-dezvoltarea fatului corespunzator varstei sarcinii;
-modificari ale batailor cordului fetal;
b)determinarea reactivitatii fetale si la contractie
2. Paraclinic
a)determinarea ultrasonica a dezvoltarii fatului intrauterin
b)masurarea fluxului sanguin uteroplacentar
3.Laborator
a)clearance metabolic de dehidroizoandrosteron sulfat
b)dozare urinara si plsmatica a estriolului si hormonului
lactogen placentar.
DIAGNOSTIC DIFERENTIAL
Afectiuni care se intovarasesc de hipertensiune cu/fara
proteinurie ce pot preexista sarcinii, pot coexista sarcinii sau se pot
suprapune disgravidiilor:
- hipertensiunea arteriala esentiala; coartatia si hipoplazia de aorta;
boala arteriala renala unilaterala; feocromocitom;
hiperaldosteronismul; glomerulonefrita acuta; glomerulonefrita
cronica; pielonefrita; insuficienta renala; lupus eritematos
sistemic; tumori cerebrale.
Crizele eclamptice pot fi confundate cu manifestari din: tumori
cerebrale,tromboze cerebrale, epilepsie, intoxicatii, afectiuni
hepatice, pancreatita.
TRATAMENT
Tratament profialctic
E cunoscut faptul ca aparitia disgravidiilor este favorizata de
factori de mediu extern (frig, umezeala, munca excesiva, agresiuni
psihice); factori alimentari (deficiente de proteine, vitamine, regim
hipercaloric, regim hipersodat) si poate fi declansata sau se poate
suprapune unor fenomene patologice preexistente sarcinii
(tulburari metabolice, renale, endocrine, cardiovasculare).
Controlul prenatal este cu atat mai eficient cu cat este mai precoce:
1) semnele subclinice ale preeclampsiei pot arecia cu saptamani
aparitia sindromului clinic;
2) depistarea unor tulburari precoce – hipertensiune, albuminurie.
In acest scop sunt necesare:
-controlul tensiunii arteriale;
-controlul greutatii gravidei;
-examen sumar de urina;
-dozarea acidului uric in sange;
-testul pozitional;
Tratamentul curativ
Obiectivele tratamentului preeclampsiei sunt:
1) sa previna eclampsia;
2) sa reduca vasospasmul si sa impiedice accidentele
cardiovasculare
3) sa permita nasterea unui copil viu, sanatos.
Regim igieno-dietetic
1) Repausul la pat;
2) Dieta 2000-2500 calorii/zi, normo/hiperproteica
3) Lichide si electroliti –diureza orara + 1000 ml
MEDICATIE
A) Sedative si tranchilizante- impotriva anxietatii si factorilor
disneurotonici frecventi in disgravidie. De obicei barbiturice
(ciclobarbital, fenobarbital), benzodiazepine(diazepam),
meprobamat, bromoval.
B) Anticonvulsivante
1)Sulfatul de Mg
2)Benzodiazepine (Valium, Diazepam)
3)Barbiturice(Penthotal)
C) Antihipertensive- tratamentul nu trebuie sa fie brutal.De aceea,
tensiunea arteriala va fi modulata prin terapeutica
antipresoarede inceput la o presiune diastolica>110 mmHg ca
apoi sa fie mentinuta la 90-100mmHg si nu mai coborata:
hidralazina, diazoxid, simpaticolitice centrale(alfametildopa,
clonidina,prazosin), betablocante(oxiprenolol, atenolol,
labetalol, propranolol), dihidroergocornina(hydergin),
antagonisti pe receptorii serotoninergici (ketans) alte
hipotensoare(nitrorusiat de Na, rezerpina, clorura de
hexametoniu, guanetidina)
D) Diuretice si agenti hiperosmotici
E) Anticoagulante.Antiagregante
F) Tratamentul obstretical
In practica , tratamentul poate fi rezumat astfel:
I) Cazuri de risc (stadiul preclinic):- dispensarizare
- control la 2 saptamani al TA,
greutatii,
examen sumar de urina,
proteinurie,
uricemie, evolutia fatului
-regim normosodat,
normocaloric, bogat in
vitamine
- evitarea oboselii fizice si
psihice, a frigului
si umezelii
II) Forme usoare: - dispensarizare, control saptamanal
- repaus la domiciliu
- regim normocaloric, normosodat, bogat in
proteine si
vitamine
- sedative
III) Forme medii: - internare in spital
- repaus la pat
- monitorizare materna:- TA masurata de 4
ori/zi;
- masurarea greutatii;
- evaluarea
semnelor de agravare
(cafalee, tulburari vizuale dureri
epigastrice);
- diureza 30ml/h;
- proteinurie;
- explorari
saunguine(uricemie, uree
creatininemie, ionograma);
- monitorizare fetala: BCF, miscari, test de non-
stres, eco
- regim normocaloric, normosodat, bogat in
proteine si
vitamine;
- sedative;
- diuretice in edeme
importante ce nu cedeaza la repaus; -
hipotensoare; IV) Forme
severe- tratament numai in spital
a) in sarcina:- repaus la pat;
- monitorizare materna si fetala;
- regim
hipocaloric, hiposodat, bogat in proteine -
sedative, diuretice, sulfat de Mg, hipotensoare;
- intreruperea sarcinii cand nu se amelioreaza fenomenele,
se agraveaza sau se deterioreaza starea
fatului; b) in travaliu:- sulfat de Mg, hydralazine,
analgezie(mialgin, petidina); - scurtarea
expulziei prin aplicarea forcepsului. V) Eclampsia -
tratament in ATI;
- bolnava imobilizata, intre dinti departator de gura, limba
mentinuta cu o pensa;
- eliberarea cailor respiratorii
superioare prin aspiratie de secretii, saliva, sange,
produs de voma; - oxigenare
continua; -
monitorizare materna:- la 2h: TA, puls, respiratie, temperatura;
- examene de laborator:
ionograma, uree, acid uric,
creatinina, hematocrit, HLG,
probe de coagulare, probe hepatice; - monitorizare
fetala:- BCF -
tratament medicamentos; VI)
Hipertensiune cronica
- este vorba de hipertensiune esentiala;
- forma clinica este in general medie;
- sunt mult mai multe nasteri premature, mortalitate perinatala mai
mare si dretesa fetala mai frecventa;
- de obicei hipertensiunea se
agraveaza, accidentele sunt mai
frecvente(IC, EPA, hemoragii cerebrale), creste si mortalitatea
materna;
- tratament de electie: metildopa,
hidralazina, betablocanti; -
intreruperea sarcinii inainte de termen este indicata in alterarea
starii materne sau deteriorarea starii fetale;
a) Deshidratarea
b) Clarificarea
b) Parafinarea
Patrunderea pieselor, pana in cele mai mici interstitii, cu
parafina topita si solidificata in bloc prin racire are menirea de la a
conferi o consistenta omogena, fara de care obtinerea unor sectini
plane si subtiri nu este posibila. Operatia decurge la cald, la
termostatul pentru parafina, la o temperatura care depaseste cu 2-3 0
punctul de topire al parafinei utilizate. Am utilizat parafina cu timp
de topire 560 C.
Pentru baile de parafina am ales recipiente mai scunde, cu
diametrul mai mare, din sticla sau portelan, fara capac, pentru a se
putea evapora urmele de benzen din piese.
Durata mentineriipieselor in baile de parafina este in functiede
dimensiunile pieselor si de consistenta lor, precum si de natura
clarificatorului(durata mai scurta pentru clarificatirii mai volatili).
Am folosit trei bai de parafina, iar timpul de mentinere al
pieselor in bai a fost de 6 ore pentru fiecare baie.
- parafina I------------------- 6ore
- parafina II------------------ 6ore
- parafinaIII------------------ 6ore
Coloratia Van-Gieson
Coloranti si reactivi
Tehnica de colorare
1. Deparafinarea
2. Hidratarea
3. Colodinarea(facultativ)
4. Supracolorarea nucleilor cu hematoxilina Weigert
5. Diferentierea cu alcool acidulat(sub control microscopic,
pana raman colorati doar nucleii)
6. Virarea coloratiei nucleare timp de 20-30 minute in apa
curenta sau cateva minute in apa litinata
7. Diferentierea in apa acetifiata, daca este cazul,sau trecere
directa in alcool absolut pentru deshidratare
8. Clarificare cu xilol
9. Montare in balsam de Canada
Rezultat: nucleii se coloreaza in negru, citoplasmele in galben,
fibrele colagene in rosu, membranele bazale si
glicozaminoglicanii in roz, mucusul galbui sau rosu deschis,
muschiul si hematiile galben.
Reactivi
1. Solutie 1% permanganat de potasiu
38 2. Solutie 3% metabisulfit de sodiu sau potasiu
3. Solutie 2% alaun de fier(cristale violet) proaspat preparata
4. Solutie argento-amoniacala proaspat preparata(la 10 ml de
solutie 10% azotat de argint se adauga 2 ml solutie 10% hidroxid
de potasiu, iar precipitatul format se dizolva picurand treptat
amoniac concentrat, fara a depasi necesarul; se picura apoi
solutie 10%azotat de argint, agitand solutia continuu, pana cand
precipitatul ce se formeaza se dizolva cu greutate; se dubleaza
volumul sulutiei cu apa)
5. Formol 10% (diluat cu apa)
6. Solutie 0,2%clorura de aur
7. Solutie 3%metabisulfit de potasiu
39 8. Solutie 3%tiosulfat de sodiu
40 Tehnica de impregnare
41 1. Deparafinare (fara colodinare)
42 2. Hidratare
43 3. Oxidare 1 minut cu permanganat de potasiu
44 4. Spalare 5 minute cu apa curenta
45 5. Albire cu metabisulfit de sodiu sau potasiu
46 6. Spalare 6-10 minute cu apa curenta
47 7. Mordansare 1 minut cu alaun
48 8. Spalare 3-5 minute cu apa curenta
49 9. Spalare in doua bai cu apa distilata
50 10. Impregnare 1-3-10 minute (tatonare) cu solutie argento-
amoniacala
51 11. Clatire foarte rapida (10 secunde) cu apa distilata
52 12. Reducere cu formol 3-5 minute
53 13. Spalare 5 minute cu apa curenta
54 14. Tonare cu clorura de aur 10 minute
55 15. Clatire cu apa distilata
56 16. Reducere cu metabisulfit de potasiu sau sodiu, 1 minut
57 17. Fixarea cu tiosulfat de sodiu ,1 minut
58 18. Spalare 15-20 minute cu apa curenta
59 19. Deshidratare cu alcool
60 20. Clarificare cu xilol
61 21. Montare in balsam de Canada
62 Rezultat: fibrele de reticulina se evidentiaza in negru intens,
cele colagene in rosu purpuriu sau cafeniu, nucleii in negru, iar
citoplasmele in galben sau cenusiu.
Metoda Cajal-Nonidez
Impregnarea proriu-zisa
Coloratia Giemsa
Timpii de colorare:
Varsta sub 19 Varsta intre 20- Varsta intre 30- Varsta peste 40
ani 29 ani 39 ani ani
1 32 30 7
7 38 30 10