Zucca FA 2017.en

Translated from English to Romanian - www.onlinedoctranslator.
com
Acces public HHS

Manuscris de autor
Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.
Manuscris al autorului
Publicat în forma finală editată ca:

Prog Neurobiol. 2017 august; 155: 96–119. doi: 10.1016 / j.pneurobio.2015.09.012.
INTERACȚIUNILE CĂILOR DE FIER, DOPAMINĂ ȘI NEUROMELANINĂ

ÎN ÎNVECHIMENTUL CRAINELUI ȘI BOLII PARKINSONULUI
Fabio A. ZuccaA,#, Juan Segura-Aguilarb, #, Emanuele FerrariA, Patricia Muñozb, Irmgard

Parisb, c, David Sulzerd, Tadeusz Sarnae, Luigi Casellaf, și Luigi ZeccaA,*
AInstitutul de Tehnologii Biomedice, Consiliul Național de Cercetare din Italia, Segrate (Milano), Italia.
bFacultatea de Medicină, Farmacologie Moleculară și Clinică, ICBM, Universitatea din Chile, Santiago, Chile. c
Departamentul de Științe de bază, Facultatea de Științe, Universitatea Santo Tomás, Viña del Mar, Chile. d
Departamentele de Psihiatrie, Neurologie și Farmacologie, Columbia University Medical Center, New York,
New York, SUA. eDepartamentul de Biofizică, Facultatea de Biochimie, Biofizică și Biotehnologie,
Universitatea Jagiellonian, Cracovia, Polonia. fDepartamentul de Chimie, Universitatea din Pavia, Pavia, Italia.
Abstract
Există mai multe mecanisme interdependente care implică fier, dopamină și neuromelanină în neuroni. Neuromelanina se acumulează în timpul îmbătrânirii și este pigmentul derivat din catecolamină al
neuronilor dopaminergici ai substanței negre și neuronilor norepinefrinici ai locus coeruleus, cele două populații neuronale cele mai vizate în boala Parkinson. Multe reacții redox celulare se bazează pe fier,
totuși o distribuție modificată a fierului reactiv este citotoxică. De fapt, sunt prezente niveluri crescute de fier în creierul pacienților cu boala Parkinson. Acumularea de dopamină poate induce moartea neuronală;
cu toate acestea, excesul de dopamină poate fi îndepărtat transformându-l într-un compus stabil precum neuromelanina, iar acest proces salvează celula. Interesant este că principalul compus de fier din
neuronii dopaminici și noradrenalinei este complexul neuromelanină-fier, întrucât neuromelanina este un chelator eficient al metalelor. Neuromelanina servește pentru a prinde fierul și a oferi protecție
neuronală împotriva stresului oxidativ. Acest echilibru între fier, dopamină și neuromelanină este crucial pentru homeostazia celulară și, în unele circumstanțe celulare, poate fi perturbat. Într-adevăr, atunci când
organele care conțin neuromelanină acumulează o cantitate mare de toxine și fier în timpul îmbătrânirii, se poate declanșa un proces neurodegenerativ. În plus, neuromelanina eliberată de neuroni degenerați
activează microglia și aceasta din urmă provoacă moartea neuronilor cu eliberarea ulterioară a neuromelaninei, pornind apoi un mecanism autopropulsiv de neuroinflamare și neurodegenerare. Având în vedere
problemele de mai sus, acumularea de neuromelanină legată de vârstă în neuronii dopaminici arată o legătură interesantă între îmbătrânire și neurodegenerare. Neuromelanina servește pentru a prinde fierul și
a oferi protecție neuronală împotriva stresului oxidativ. Acest echilibru între fier, dopamină și neuromelanină este crucial pentru homeostazia celulară și, în unele circumstanțe celulare, poate fi perturbat. Într-
adevăr, atunci când organele care conțin neuromelanină acumulează o cantitate mare de toxine și fier în timpul îmbătrânirii, se poate declanșa un proces neurodegenerativ. În plus, neuromelanina eliberată de
neuroni degenerați activează microglia și aceasta din urmă provoacă moartea neuronilor cu eliberarea ulterioară a neuromelaninei, pornind apoi un mecanism autopropulsiv de neuroinflamare și
neurodegenerare. Având în vedere problemele de mai sus, acumularea de neuromelanină legată de vârstă în neuronii dopaminici arată o legătură interesantă între îmbătrânire și neurodegenerare.
Neuromelanina servește pentru a prinde fierul și a oferi protecție neuronală împotriva stresului oxidativ. Acest echilibru între fier, dopamină și neuromelanină este crucial pentru homeostazia celulară și, în unele
circumstanțe celulare, poate fi perturbat. Într-adevăr, atunci când organele care conțin neuromelanină acumulează o cantitate mare de toxine și fier în timpul îmbătrânirii, se poate declanșa un proces
neurodegenerativ. În plus, neuromelanina eliberată de neuroni degenerați activează microglia și aceasta din urmă provoacă moartea neuronilor cu eliberarea ulterioară a neuromelaninei, pornind apoi un
mecanism autopropulsiv de neuroinflamare și neurodegenerare. Având în vedere problemele de mai sus, acumularea de neuromelanină legată de vârstă în neuronii dopaminici arată o legătură interesantă între
îmbătrânire și neurodegenerare. Acest echilibru între fier, dopamină și neuromelanină este crucial pentru homeostazia celulară și, în unele circumstanțe celulare, poate fi perturbat. Într-adevăr, atunci când organele care conțin neuromelanină acumulează o cantitate ma
*
Autor corespondent: Dr. Luigi Zecca, Institutul de Tehnologii Biomedice, Consiliul Național de Cercetare din Italia, Via Cervi, 93, 20090
Segrate (Milano), Italia, Tel: +39 02 26422616; Fax: +39 02 26422660, luigi.zecca@itb.cnr.it.
# FAZ și JSA au contribuit în mod egal la acest studiu
Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris neditat care a fost acceptat spre publicare. Ca serviciu pentru
clienții noștri, oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus redactării, compunerii și revizuirii dovezilor rezultate înainte
de a fi publicat în forma sa finală citabilă. Vă rugăm să rețineți că, în timpul procesului de producție, pot fi descoperite erori care ar putea afecta
conținutul și toate responsabilitățile legale care se aplică jurnalului aparțin.
Zucca și colab. Pagina 2
Cuvinte cheie
Fier; dopamina; melanină; neuromelanina umană; boala Parkinson
1. Introducere
Roluri pentru neuromelanină (NM), fier și dopamină (DA) în îmbătrânirea creierului și boala
Parkinson (PD) au fost raportate în mai multe studii. În special, depunerea și acumularea de fier
în forme reactive a fost asociată cu îmbătrânirea creierului și bolile neurodegenerative, inclusiv
PD. Au fost de asemenea detaliate rolurile duale de protecție și toxice pe care NM le poate juca în
neuronii DA ai substanței negre (SN), la fel ca rolurile toxice ale DA în sine în degenerarea
neuronilor din PD.
Acești trei factori interacționează între ei în mai multe moduri și influențează supraviețuirea
neuronală în SN uman. Într-adevăr, NM leagă fierul și poate juca un rol protector sau dăunător în
funcție de nivelul de fier legat. DA poate fi oxidată de fier pentru a forma DA-o-chinona, care poate
intra pe căi toxice formând aducti cu reziduuri de aminoacizi (în principal reziduuri de cisteină) ale
diferitelor proteine. Alternativ DA- citosolico-chinona poate reacționa cu cisteina pentru a forma
compuși cisteinil-DA, precursori ai sintezei NM. NM se acumulează în neuronii DA ai SN în timpul
îmbătrânirii ca proces fiziologic și, în unele circumstanțe, poate juca un rol neurodegenerativ prin
activarea microgliei. Un alt proces toxic potențial care implică NM se bazează pe expresia ridicată
a complexului major de histocompatibilitate clasa I (MHC-I) în organele care conțin NM, ceea ce
sugerează prezentarea peptidelor antigenice de către MHC-I pe membrana neuronală a
neuronilor catecolaminergici care conțin NM.
Se pare astfel că fierul, DA și NM interacționează pe căi multiple. În această

revizuire, descriem aceste căi și condițiile care le mențin în sănătate sau le

conduc spre neurodegenerare.
2. Rolul celular de fier: un echilibru critic între efectele fiziologice și

dăunătoare
2.1. Biochimia fierului
Fierul este un metal de tranziție cu o distribuție omniprezentă în biosferă și, datorită capacității
sale de a participa la reacțiile de transfer de electroni, este esențial pentru funcția celulară
normală. Ciclul redox reversibil între stările de oxidare a fierului, fierului și fierului feric, este
utilizat într-o varietate de reacții esențiale vieții (Aisen și colab., 2001; Dlouhy și Outten,
2013). În schimb, excesul de fier poate fi dăunător generând specii toxice de oxigen reactiv (ROS): astfel,
organismele, organele și celulele care sunt strict dependente de chimia fierului trebuie să gestioneze un
echilibru delicat între efectele fiziologice benefice ale fierului și consecințele grave derivate din fier deficit
sau supraîncărcare a fierului. Fierul din sistemele biologice este prezent în cea mai mare parte într-un
complex care constă din fier feros și fier feric în echilibru, care sunt asociați cu liganzi chelatori, inclusiv
biomolecule mici (de exemplu, citrat, ATP etc.) sau mari (de exemplu, proteine purtătoare, proteine de
stocare și complexe, enzime etc.).

Complexele biologice ale fierului prezintă o mare varietate de constante de stabilitate, în funcție de
starea de oxidare și ligand de care este legată specia de fier (Crichton 2009).
Rolurile majore ale fierului în biologia celulară includ transportul / stocarea / livrarea oxigenului
ca cofactor hem în hemoglobină și mioglobină, precum și cofactor hem în multe enzime oxidază
și oxigenază și în proteinele de transfer de electroni (citocromii) pentru respirația mitocondrială.
Fierul formează, de asemenea, grupuri Fe-S, grupurile protetice ale multor proteine importante
ale lanțului respirator mitocondrial (Crichton 2009; Dlouhy și Outten, 2013): deoarece creierul are
o cerere mare de energie, fierul este esențial pentru generarea de ATP prin transportul de
electroni. în mitocondriile cerebrale. Aceste grupuri de Fe-S sunt, de asemenea, cuprinse în
multe enzime, cu funcții variind de la metabolismul celular general la repararea ADN-ului
(Rouault 2012). Fierul este, de asemenea, implicat în sinteza ADN-ului, deoarece ribonucleotid
reductaza este dependentă de fier (Kolberg și colab., 2004; Tomter și colab., 2013),
În special, în creier fierul este esențial în sinteza și metabolismul

neurotransmițătorilor, inclusiv DA, norepinefrină, epinefrină și serotonină.
Fiecare dintre acești neurotransmițători monoaminici sunt sintetizați de enzime
dependente de fier: fenilalanină hidroxilază, tirozină hidroxilază, triptofan
hidroxilază (Beard 2003; Flydal și colab., 2013; Windahl și colab., 2008). Fierul
afectează și alte etape ale metabolismului neurotransmițătorilor, cum ar fi
absorbția, concentrația extracelulară, interacțiunea cu receptorii (Beard și colab.,
1994; Bianco și colab., 2008; Burhans și colab., 2005; Youdim și colab., 1989) și
catabolism. Nu în ultimul rând, mielinizarea necesită niveluri adecvate de fier
(Todorich și colab., 2009), iar oligodendrocitele care produc mielină mențin cele
mai mari concentrații de fier ale creierului (Connor și colab., 1990; Connor și
Menzies, 1995).
Spre deosebire de aceste roluri în funcția sănătoasă a creierului, atunci când nivelurile de fier depășesc capacitatea celulară de sechestrare a fierului proteinelor de stocare sau a altor molecule, fierul
din bazinul de fier labil (definit ca un bazin de fier chelatabil și activ redox în complexe cu stabilitate scăzută) poate crește, devenind dăunătoare și ducând la deteriorarea oxidativă și moartea
celulară (Kakhlon și Cabantchik, 2002; Kruszewski 2003; Zecca și colab., 2008a). Fierul poate induce stres oxidativ datorită rolului său central în generarea de radicali hidroxil, cel mai dăunător ROS
celular (Crichton și Ward, 2014; Dlouhy și Outten, 2013). ROS poate afecta direct ADN-ul și ADN-ul mitocondrial, provocând o varietate de leziuni ale ADN-ului (Melis și colab., 2013) și poate afecta
expresia ADN-ului prin evenimente epigenetice (Kwok 2010). În plus, ROS poate provoca mai multe modificări oxidative directe ale reziduurilor de aminoacizi, conducând la formarea de derivați
carbonilici ai proteinelor, o modificare post-translațională importantă indusă de ROS, adesea utilizată ca marker general al deteriorării proteinelor oxidative (Dalle-Donne și colab., 2003a, b).
Carbonilarea proteinelor a fost asociată cu modificări funcționale într-o varietate de proteine structurale și enzimatice, ducând la eliminarea sau acumularea acestora cu leziuni celulare finale
(DalleDonne și colab., 2003a). În plus, ROS poate promova peroxidarea acizilor grași polinesaturați în lipidele de membrană, ducând la modificări și pierderi funcționale ale membranelor (Català
2009). Subprodusele secundare ale peroxidării lipidelor sunt aldehide extrem de reactive, cum ar fi 4-hidroxi-2-nonenal, malondialdehidă și acroleină (Esterbauer și colab., 1991), o modificare
importantă post-translațională indusă de ROS, utilizată adesea ca marker general al deteriorării oxidative a proteinelor (Dalle-Donne și colab., 2003a, b). Carbonilarea proteinelor a fost asociată cu
modificări funcționale într-o varietate de proteine structurale și enzimatice, ducând la eliminarea sau acumularea acestora cu leziuni celulare finale (DalleDonne și colab., 2003a). În plus, ROS poate
promova peroxidarea acizilor grași polinesaturați în lipidele de membrană, ducând la modificări și pierderi funcționale ale membranelor (Català 2009). Subprodusele secundare ale peroxidării
lipidelor sunt aldehide extrem de reactive, cum ar fi 4-hidroxi-2-nonenal, malondialdehidă și acroleină (Esterbauer și colab., 1991), o modificare importantă post-translațională indusă de ROS,
utilizată adesea ca marker general al deteriorării oxidative a proteinelor (Dalle-Donne și colab., 2003a, b). Carbonilarea proteinelor a fost asociată cu modificări funcționale într-o varietate de
proteine structurale și enzimatice, ducând la eliminarea sau acumularea acestora cu leziuni celulare finale (DalleDonne și colab., 2003a). În plus, ROS poate promova peroxidarea acizilor grași
polinesaturați în lipidele de membrană, ducând la modificări și pierderi funcționale ale membranelor (Català 2009). Subprodusele secundare ale peroxidării lipidelor sunt aldehide extrem de reactive,
cum ar fi 4-hidroxi-2-nonenal, malondialdehidă și acroleină (Esterbauer și colab., 1991), Carbonilarea proteinelor a fost asociată cu modificări funcționale într-o varietate de proteine structurale și
enzimatice, ducând la eliminarea sau acumularea acestora cu leziuni celulare finale (DalleDonne și colab., 2003a). În plus, ROS poate promova peroxidarea acizilor grași polinesaturați în lipidele de membrană, ducând la modificări și pierderi funcțio

care poate provoca modificări ireversibile ale diferitelor biomolecule, cum ar fi fosfolipide, proteine și
ADN, rezultând o funcție afectată: în special, proteinele sunt deosebit de sensibile la reacțiile cu 4-
hidroxi-2-nonenal prin carbonilare (Dalle-Donne și colab., 2003a; Perluigi și colab., 2012). Introducerea
grupărilor carbonil în proteine poate avea loc și prin reacții secundare ale reziduurilor de aminoacizi cu
alți compuși carbonilici reactivi derivați din oxidarea glucidelor (produși de glicoxidare) (Dalle-Donne și
colab., 2003a, b). În cele din urmă, ROSul excesiv poate provoca, de asemenea, eliberarea fierului reactiv
din proteinele cluster Fe-S ale lanțului respirator mitocondrial, precum și din alte proteine de stocare a
fierului în alte compartimente celulare, pentru a alimenta în continuare producția de ROS prin reacția
Fenton.
Ipoteza neurodegenerării pe bază de metale este puternic sugerată de multiple in vitro

studii care arată că agregarea unor proteine legate de tulburări neurodegenerative, inclusiv α-
sinucleina și tau hiper-fosforilat, pot fi declanșate de niveluri ridicate de fier ca o consecință a
perturbării homeostaziei fierului (Hashimoto și colab., 1999; Li și colab., 2010; Yamamoto și colab.,
2002). Fierul poate promova direct amiloidulβ agregarea (House și colab., 2004; Schubert și
Chevion, 1995) și nivelurile de fier pot modula căile proteinelor precursoare amiloide (Exley și
colab., 2012; Silvestri și Camaschella, 2008). Excesul de fier poate facilita, de asemenea, procesele
neurotoxice prin mecanisme în afară de chimia Fenton. În special, catecolaminele cum ar fi DA pot
fi oxidate la chinone foarte reactive / toxice prin oxidare cu fier feric (Paris și colab., 2005a; Sulzer și
Zecca, 2000).
Mecanismele neurodegenerative provenite din toxicitatea fierului pot duce în cele din urmă la apoptoza
clasică semnalată de stresul oxidativ (Ott și colab., 2007) sau la feroptoza identificată mai recent, care
este o moarte celulară neapoptotică, dependentă de fier și oxidativă (Dixon și colab. .,
2012).
2.2. O scurtă prezentare generală asupra metabolismului fierului
Cantitatea totală de fier din corpul adult al omului este de aproximativ 3,5-4,0 g (aproximativ 50 mg / kg),
cea mai mare parte fiind găsită în hemoglobina eritrocitelor și precursorii acestora. Bazinul de fier este
derivat și din celulele roșii din sânge deteriorate după distrugerea lor de către macrofage pentru
reciclarea fierului. Fierul suplimentar poate fi obținut prin mobilizarea depozitelor de fier celular în
proteine, în special din hepatocite sau alte tipuri de celule (Muñoz și colab., 2009; Theil și Le Brun, 2013).
Pe lângă hemoglobină, fierul este distribuit între mioglobină, proteine care conțin fier (enzime care
catalizează o gamă largă de reacții, citocromi etc.) și o varietate de proteine de legare, transport și
stocare (de exemplu, transferină, lactoferină, feritină etc.) .) în mai multe tipuri de celule (Andrews 2005;
Muñoz și colab., 2009).
Homeostazia sistemică a fierului este un sistem semiînchis, deoarece nu pare să existe un mecanism
controlat pentru excreția fierului. Astfel, menținerea echilibrului fierului corporal depinde în principal de
absorbția de fier intestinal, care este strict controlată. Gestionarea fierului în organism începe cu
absorbția prin enterocite, dar implică și utilizarea acestuia în celulele eritroide, stocarea / mobilizarea în
hepatocite, reciclarea din macrofage și redistribuirea între mai multe tipuri de celule. Toate aceste
mecanisme sunt reglementate în mod critic de factori care echilibrează între deficiența de fier și
supraîncărcarea fierului (Andrews 2008; Crichton 2009). După ficat, creierul conține una dintre cele mai
mari concentrații de fier dintre organele din corp (Bush și colab., 1995; Hallgren și Sourander, 1958;
Zecca și colab., 2004a).

Homeostazia normală a fierului celular asigură funcția celulară optimă, permițând celulelor să
beneficieze de utilizarea fierului, evitând în același timp toxicitatea derivată din concentrația și distribuția
modificate, prin menținerea unui echilibru al concentrațiilor disponibile de fier între compartimentele
celulare și moleculele tampon (Hentze și colab., 2010) . Reglarea homeostaziei fierului la nivel celular este
controlată într-o mare măsură la nivelul translației ARNm a proteinelor implicate direct în absorbția,
transportul, depozitarea și mobilizarea fierului celular (Muckenthaler și colab., 2008).
Creierul reprezintă un compartiment „privilegiat” care, în condiții normale, nu răspunde strict la

modificările fierului periferic (Ward și colab., 2014). Acest lucru se datorează probabil faptului că creierul
este protejat de bariere (Abbott și colab., 2010), cel mai proeminent bariera hematoencefalică (BBB),
compusă din celule endoteliale strânse împreună de joncțiuni strânse, o lamă bazală, pericite și capăt
perivascular astrocitar. -picioare (Abbott și colab., 2006). BBB este o barieră fizică eficientă care reglează
intrarea nutrienților, de exemplu, fierul în diferite forme moleculare esențiale pentru dezvoltarea și
funcțiile creierului. O altă barieră care separă creierul de circulația sistemică este bariera sanguină-lichid
cefalorahidian, formată din celulele epiteliale ale plexului coroidian care se confruntă cu lichidul
cefalorahidian (Abbott și colab., 2010).
Mecanismele prin care fierul este transportat în creier din sânge și modul în care fierul este apoi
redistribuit / stocat din lichidul interstițial și lichidul cefalorahidian între neuroni, oligodendrocite,
astrocite și microglie sunt doar parțial înțelese. Descoperirile recente privind metabolismul fierului
cerebral au fost rezumate și discutate critic (Crichton și colab., 2011; Ke și Qian, 2007; Mills și
colab., 2010; Moos și colab., 2007; Rouault 2013; Rouault și Cooperman, 2006; Ward și colab.,
2014; Zecca și colab., 2004a; Zucca și colab., 2011).
Fierul poate traversa celulele endoteliale ale BBB fie ca un complex cu greutate moleculară mică,
fie prin endocitoză a complexului de fier-transferină prin receptorul său specific (Moos și colab.,
2007). În timp ce majoritatea transportului de fier în BBB este mediat de transferină și receptorul
său, fierul legat de non-transferferină (în complexe cu molecule cu greutate moleculară mică, cum
ar fi citrat, ascorbat și ATP, sau chelat de alte proteine, cum ar fi lactoferina, melanotransferina
etc.), poate traversează independent BBB (Ke și Qian, 2007). În plus, fierul poate pătrunde în creier
prin intermediul celulelor epiteliale ale plexului coroidian folosind proteine implicate în
transportul fierului / homeostazie care au fost identificate în alte celule polarizate (Rouault și
colab., 2009). Chiar dacă nivelurile de fier sunt menținute eficient în creier, o parte din fier trebuie
exportat în stare fiziologică, deși se știe puțin despre acest mecanism. Este posibil ca mai multe
forme moleculare de fier să iasă din creier prin circulația lichidului cefalorahidian, care drenează
lichidul interstițial și reabsorbția sa succesivă în sistemul de drenaj venos prin epiteliul vilozităților
arahnoide, care permite mișcarea lichidului cefalorahidian de la creier la sânge (Bradbury 1997).
O intersecție comună în mecanismele multiple de neurodegenerare este o

afectare a homeostaziei fierului, o afecțiune afectată de mai mulți factori, inclusiv
îmbătrânirea, disfuncția mitocondrială, stresul oxidativ, agregarea proteinelor, etc.
în multe boli neurodegenerative (Rouault 2013; Ward și colab., 2014) și este adesea
asociată cu stresul oxidativ și deteriorarea celulară. Rămâne neclar dacă
acumularea de fier observată la unii

tulburările neurodegenerative sunt un eveniment primar sau un efect secundar, în special pentru bolile
care afectează în mod specific zonele bogate în fier, cum ar fi SN din PD. Acumularea de fier legată de
vârstă în unele regiuni ale creierului poate furniza astfel un factor important care contribuie la procesele
neurodegenerative, pentru care îmbătrânirea constituie factorul de risc major.
3. Fierul în oxidarea DA
Oxidarea DA la o-Sa propus că chinonele joacă un rol în degenerarea neuronilor dopaminergici
care conțin NM, de când acestea o-chinonele pot participa la reacții neurotoxice (Segura-Aguilar
și colab., 2014). Este important să ne amintim că oxidarea DA lao-
chinonele sunt un eveniment esențial necesar pentru sinteza NM și că neuronii dopaminergici
SN ai sistemului nigrostriatal care se pierd în timpul PD conțin NM. Oxidarea DA lao-
chinonele se desfășoară într-un mod secvențial, deoarece DA este oxidată pentru prima dată
în DA-o-chinonă, care este stabilă numai la pH sub 2,0 (Segura-Aguilar și Lind, 1989). DA-o-
chinona la pH fiziologic suferă ciclizare la leukoaminocrom, care este oxidat ulterior la

aminocrom reducând oxigenul la radical superoxid (Segura-Aguilar și colab.,
2014), cu o rată constantă pentru ciclizarea intramoleculară a DA-o-chinonă la aminocrom de 0,15 s−1 (
Tse și colab., 1976). Deși este mai stabil decât DA-o-chinonă la pH fiziologic, aminocromul este, de
asemenea, instabil și se rearanjează la 5,6-dihidroxiindol, cu o rată constantă de 0,06 min.−1, și se poate
auto-oxida în continuare la 5,6-indolequinonă reducând oxigenul la radical superoxid (Bisaglia și colab.,
2007; Napolitano și colab., 2011). Studiile de rezonanță magnetică nucleară efectuate în timpul oxidării
DA cu tirozinază au arătat că aminocromul este singurulo-chinonă detectată până la 40 de minute, când
poate fi detectată și 5,6indolequinonă (Bisaglia și colab., 2007). 5,6-indolequinona este, de asemenea,
instabilă, deoarece se poate polimeriza și, după alte etape, poate genera pigmentul NM final (Fig. 1, 2),
care se acumulează odată cu îmbătrânirea în corpurile celulare ale neuronilor SN DA umani (Zecca și
colab. , 2002).
În plus, DA-o-chinona, aminocromul și 5,6-indolequinona pot participa la reacțiile neurotoxice. DA-o-

chinona formează aducturi cu mai multe proteine mitocondriale de șobolan, inclusiv cele ale
complexelor I, III și V ale lanțului de transport al electronilor și fosforilarea oxidativă, inducând disfuncții
mitocondriale (Van Laar și colab., 2009). În liniile celulare dopaminergice și în țesuturile SN umane, DA-o-
chinona este capabilă să formeze aducti cu parkin, care este o ligază E3 ubiquitin-proteină, provocând
probabil o afectare a sistemului proteazomatic (LaVoie și colab., 2005). DA-o-chinona formează aducturi,
de asemenea, cu alte proteine implicate în diferite căi celulare (variind de la metabolismul mitocondrial,
degradarea și procesarea proteinelor, sinteza neurotransmițătorului, etc.), de exemplu, deglicarea
proteinei DJ-1 și ubiquitin carboxil-terminal hidrolaza izozima L1 la șobolan și SH- Celule SY5Y, tirozin
hidroxilază din celule de șobolan, glutation peroxidază mitocondrială de șobolan 4, transportor DA uman
etc. (Hauser și colab., 2013; Van Laar și colab., 2009; Whitehead și colab., 2001; Xu și colab.,
1998).
DA-o-s-a propus că chinona este cea mai reactivă o-specii de chinone responsabile de
stresul oxidativ indus de oxidarea DA (Bisaglia și colab., 2010). Epuizarea glutationului
în neuronii dopaminergici ar fi consecința adăugării rapide nucleofile de glutation la
DA-o-chinonă cu o constantă de viteză de 200 s−1, generând 5-S-

glutationil-DA (Tse și colab., 1976). Ultimul compus suferă o degradare enzimatică pentru a
produce 5-S-cisteinil-DA (Shen și colab., 1996). Cu toate acestea, întrebarea este dacă DA-o-
epuizarea quinonedependentă a glutationului care duce la stres oxidativ este o reacție neurotoxică
sau contribuie la generarea de NM, care pare a fi neuroprotector în anumite condiții (vezi
secțiunea 9.1.). Hidroliza reductivă a pigmentului NM uman a arătat că cisteinil-DA este una dintre
componentele principale ale acestui pigment (Wakamatsu și colab., 2003).
Aminocromul interacționează cu omul α-sinucleină, inducând și stabilizând formarea

oligomerilor neurotoxici (Muñoz și colab., 2015; Norris și colab., 2005). Recent, prin utilizarea
unei linii de celule de șobolan cu supraexpresie stabilă de tip sălbaticα-sinucleină și un ARNsi
împotriva enzimei DTdiaphorase, s-a demonstrat că neurotoxicitatea α-oligomerii de sinucleină
depind de amortizarea enzimei DT-diaforază (Muñoz și colab., 2015). Această enzimă este o
flavoenzimă care catalizează reducerea cu doi electroni a aminocromului în leukoaminocrom,
prevenind astfel formarea de neurotoxiciα-oligomeri de sinucleină induși de aminocrom.
Interesant este că DT-diaforaza previneα-fibrilație a sinucleinei, probabil pentru că

leukoaminocromul se poate stabiliza α-sinucleină în starea monomerului (Muñoz și colab., 2015).
În plus, aminocromul formează aducti cu complexul I al lanțului de transport de electroni în

celulele SHSY5Y diferențiate într-un fenotip DA, inducând disfuncții mitocondriale și inhibând
producția de ATP (Aguirre și colab., 2012). Aminocromul induce, de asemenea, disfuncția
degradării proteinelor prin: i) afectarea sistemului proteazomal în diferitein vitro modele (Xiong și
colab., 2014; Zafar și colab., 2006; Zhou și Lim, 2009); ii) inhibarea autofagiei prin prevenirea
formării adecvate a microtubulilor necesari pentru fuziunea vacuolelor autofagice și lizozomilor în
liniile celulare de șobolan și uman (Huenchuguala și colab., 2014; Muñoz și colab., 2012a; Paris și
colab., 2010); iii) inducerea disfuncției lizozomale în liniile celulare umane prin afectarea acidificării
lizozomale necesare degradării proteinelor în interiorul acestor organite (Huenchuguala și colab.,

2014). Aminocromul poate induce stres oxidativ atunci când este un electron redus de flavoenzime
la leukoaminocromo-radical semiquinonă, care este extrem de reactiv cu oxigenul și se oxidează
imediat la aminocrom generând un ciclu redox între aminocrom și leukoaminocrom-o-radical
semiquinonă, epuizând atât NADH sau NADPH, cât și oxigen, acesta din urmă fiind redus la radical
superoxid cu formarea consecventă a radicalului hidroxil, așa cum s-a demonstrat în
experimentele privind liniile celulare de șobolan (Arriagada și colab., 2004). 5,6-indolequinona,
care este derivată din rearanjarea aminocromului, interacționează cu proteine precumα-
sinucleină, inducând formarea oligomerilor neurotoxici in vitro (Bisaglia și colab., 2007).
S-a raportat că mai multe enzime pot cataliza oxidarea DA la o-chinonă in vitro, precum prostaglandina
H sintază (Hastings 1995; Mattamal și colab., 1995), citocromul P450 (Segura-Aguilar 1996; Segura-
Aguilar și colab., 1998; Thompson și colab., 2000), tirozinaza (Jimenez și colab., 1984 ; Segura-Aguilar și
colab., 1998), xantină oxidază (Foppoli și colab., 1997), lactoperoxidază (Galzigna și colab., 1999; Segura-
Aguilar și colab., 1998), DA β-monooxigenaza (Terland și colab., 1997) și peroxidazele cerebrale
(Galzigna și colab., 2000). De asemenea, oxigenul catalizează oxidarea DA lao-chinonă în absența ionilor
metalici la pH 7,4 (Linert și colab., 1996). Reactivii anorganici sunt, de asemenea, capabili să oxideze DA la
o-chinona, de exemplu periodat de sodiu (Jimenez și colab., 1984) sau mangan (III), atât în condiții
aerobe, cât și anaerobe

(Segura-Aguilar și Lind, 1989). Interesant, expunerea ridicată la mangan atât în timpul sudării, cât și în
industria minieră poate induce sindroame parkinsoniene (Park 2013). Sulfatul de cupru catalizează
oxidarea DA în aminocrom prin formarea complexului de cupru-DA care este neurotoxic numai în liniile
celulare SN de șobolan care exprimă transportori DA (Paris și colab., 2001). Selectivitatea ridicată a
complexului cupru-DA pentru transportatorii DA poate explica existența sindroamelor parkinsoniene la
lucrătorii tineri foarte expuși la cupru (Caviedes și SeguraAguilar, 2001) și prevalența ridicată a
simptomelor parkinsoniene la pacienții cu boală Wilson (Taly et al. ., 2007). Oxidarea aerobă a DA lao-
chinona poate fi, de asemenea, catalizată de fier, după cum sa demonstrat in vitro atât de ioni de fier
liberi (trivalenți sau bivalenți), cât și de complexe de fier cu ioni de cianură, cum ar fi cianura feroasă de
potasiu și cianura ferică de potasiu (Zhou și colab., 2010).
Formarea complexului fier-DA, sub formă de fier (III) -DA, a fost, de asemenea, propusă ca un
mecanism selectiv de neurotoxicitate în neuronii dopaminergici sau celule care exprimă
transportori monoaminergici precum DA, norepinefrină și serotonină (Paris și colab.) ., 2005a, b).
Selectivitatea neurotoxicității complexului fier-DA depinde de capacitatea celulelor de a prelua un
astfel de complex neurotoxic. S-a raportat că celulele PC-12 expuse la fier au arătat o creștere a
fierului intracelular care a fost blocat atunci când celulele au fost tratate cu un inhibitor al sintezei
DA. De asemenea, s-a arătat că fierul s-a acumulat în vezicule dopaminergice, susținând astfel
ideea că complexul fier-DA este necesar pentru absorbția fierului (Ortega și colab., 2007).
In vitro experimentele au confirmat formarea complexului fier-DA și stabilitatea acestuia (Arreguin

și colab., 2009). Astfel, efectele neurotoxice ale complexului fier-DA în liniile celulare de șobolan
depind de: i) absorbția în celule prin intermediul transportorilor monoaminergici; ii) oxidarea DA în
aminocrom și reducerea fierului feros în fier; iii) Inhibarea DT-diaforazei (Paris și colab., 2005a, b).
Fierul (III) este, de asemenea, capabil să formeze complexe similare cu norepinefrina și serotonina
(Siraki și colab., 2000). Interesant este faptul că complexul fier-norepinefrină previne efectele
neurotoxice ale complexului fier-DA în celulele derivate din SN de șobolan, probabil din cauza
concurenței dintre norepinefrină și DA în formarea complexă cu fierul feric (Paris și colab., 2005b).
Oxidarea DA în aminocrom cu reducerea concomitentă a fierului feric în fierul feros duce în final la
eliberarea aminocromului și fierului feros din complexul fier-DA (Fig. 1). Această idee este
susținută și de formarea unui pigment întunecat în eprubetă după 3-4 ore de incubație ca o
consecință a polimerizării aminocromului. După cum sa discutat mai sus, aminocromul liber poate
fi redus cu un singur electron de către flavoenzimele care utilizează NADH sau NADPH, generând
leukoaminocromo-radical semiquinonă care se autooxidează imediat la aminocrom prin
reducerea dioxigenului la radical superoxid. Dismutarea a doi radicali superoxid generează
peroxid de hidrogen, care în prezența fierului feros formează radicalul hidroxil producând stres
oxidativ ridicat (Fig. 1, 2). În plus, aminocromul poate perturba homeostazia celulară generală a
fierului: în celulele SH-SY5Y diferențiate într-un fenotip dopaminergic, aminocromul a scăzut
expresia transportorului de export feroportin 1 și a crescut expresia transportatorului de import
de fier transportor de metal divalent 1, ducând astfel la acumularea de fier (Aguirre și colab., 2012).

4. Rolul oxidării DA în procesele neurodegenerative ale PD

Procesul degenerativ din PD începe cu mult înainte de apariția simptomelor motorii.

Simptomele pre-motorii includ fragmentarea somnului, tulburări olfactive și depresie
(Wolters și Braak, 2006). Diferite etape ale PD au fost propuse în dezvoltarea bolii (Braak și
colab., 2003, 2004), pe baza aparițieiα-agregatele de sinucleină în patologie, în care boala
inițiază în plexul enteric, bulbul olfactiv și componenta motorie a nervului cranian X (stadiul
1) și continuă până la locus coeruleus (LC), nuclei de rafă caudală și formarea reticulară
magnocelulară (stadiul 2) . Cu cinci ani înainte de apariția simptomelor motorii, boala
progresează către SN, subnucleul central amigdalian, nucleul tegmental pedunculopontin și
nucleul lui Meynert (stadiul 3). În stadiul 4 leziunile se extind în principal la mezocortexul
temporal. După 10 ani de simptome motorii, boala progresează către zone de asociere
senzorială terțiară și cortex prefrontal (stadiul 5). În stadiul 6 sunt afectate zonele motorii și
senzoriale secundare și apoi primare (Braak și colab., 2003, 2004; Hawkes și colab., 2010).
Apariția lui α-agregatele de sinucleină, deși indică în mod clar o problemă în manipularea unei proteine de către anumite celule, nu este neapărat identic cu modelul morții
neuronale: este posibil ca unele dintre agregări să ofere un răspuns protector de succes. După cum sa analizat recent (Sulzer și Surmeier, 2013), populațiile neuronale care
prezintă cel mai clar pierderi în studiile patologice sunt următoarele. i) În sistemul nervos periferic, pierderea neuronală cel mai clar documentată este cea a neuronilor
noradrenergici care inervează inima și pielea. Pierderea neuronilor catecolaminergici ai sistemului nervos enteric este larg suspectată, dar nu \ confirmată în mod clar. ii) Există
o pierdere a neuronilor nucleului motor dorsal al vagului în PD. Această regiune are mulți neuroni pigmentați, dar există diferențe în literatura de specialitate în ceea ce
privește dacă și când acestea sunt pierdute. Un factor potențial important este că nucleul motor colinergic dorsal al neuronilor vagi exprimă, de asemenea, tirozină hidroxilază
și acid aromatic decarboxilază și, prin urmare, ar putea sintetiza catecolamine. iii) Moartea neuronilor dopaminergici conținând NM din SN pars compacta, este de departe cea
mai notată și confirmată situație de pierdere neuronală, după cum sa raportat de aproape un secol. Pierderea SN NM este observată la toți pacienții cu PD. Unele patologii
Lewy au fost raportate și în zona tegmentală ventrală vecină și în neuronii câmpului retrorubral, dar pierderea neuronală în aceste două regiuni este variabilă. iv) Practic toți
pacienții cu PD prezintă pierderi substanțiale de neuroni LC noradrenergici care conțin NM. v) Regiunile suplimentare ale sistemului nervos central prezintă pierderi mai puțin
clare. Neuronii serotoninergici ai nucleului rafei se pierd în PD, în special în rafa mediană mai puțin în rafe obscurus. S-a raportat că nucleul pedunculopontin, care include un
amestec de neuroni colinergici, glutamatergici și acid gamma-aminobutirric-ergici, prezintă pierderi de neuroni în PD, deși acest lucru nu poate fi specific PD și se observă în
paralizia supranucleară progresivă și boala Alzheimer. Existența și direcționarea pierderii neuronale în sistemul olfactiv este controversată. S-a raportat că mai multe alte
regiuni au pierderi neuronale în PD, multe în studii individuale. Acestea includ, de exemplu, hipotalamusul, nucleii intralaminari ai talamusului și, eventual, nucleul bazal al lui
Meynert și neuronii DA ai retinei (Surmeier și Sulzer, 2013). neuronii glutamatergici și ai acidului gamma-aminobutirric-ergici au fost raportați că prezintă pierderi de neuroni în
PD, deși acest lucru nu poate fi specific PD și se observă în paralizia supranucleară progresivă și boala Alzheimer. Existența și direcționarea pierderii neuronale în sistemul
olfactiv este controversată. S-a raportat că mai multe alte regiuni au pierderi neuronale în PD, multe în studii individuale. Acestea includ, de exemplu, hipotalamusul, nucleii
intralaminari ai talamusului și, eventual, nucleul bazal al lui Meynert și neuronii DA ai retinei (Surmeier și Sulzer, 2013). neuronii glutamatergici și ai acidului gamma-
aminobutirric-ergici au fost raportați că prezintă pierderi de neuroni în PD, deși acest lucru nu poate fi specific PD și se observă în paralizia supranucleară progresivă și boala
Alzheimer. Existența și direcționarea pierderii neuronale în sistemul olfactiv este controversată. S-a raportat că mai multe alte regiuni au pierderi neuronale în PD, multe în
studii individuale. Acestea includ, de exemplu, hipotalamusul, nucleii intralaminari ai talamusului și, eventual, nucleul bazal al lui Meynert și neuronii DA ai retinei (Surmeier și
Sulzer, 2013). S-a raportat că mai multe alte regiuni au pierderi neuronale în PD, multe în studii individuale. Acestea includ, de exemplu, hipotalamusul, nucleii intralaminari ai
talamusului și, eventual, nucleul bazal al lui Meynert și neuronii DA ai retinei (Surmeier și Sulzer, 2013). S-a raportat că mai multe alte regiuni au pierderi neuronale în PD, multe
în studii individuale. Acestea includ, de exemplu, hipotalamusul, nucleii intralaminari ai talamusului și, eventual, nucleul bazal al lui Meynert și neuronii DA ai retinei (Surmeier și
Sulzer, 2013).
Aproape cinci decenii după introducerea L-3,4-dihidroxifenilalaninei (L-DOPA) în

tratamentul PD, mecanismul molecular implicat în pierderea conținutului de NM

neuronii dopaminergici rămân necunoscuți. Descoperirea mai multor modificări ale proteinelor legate de
forma genetică a PD a dus la o intrare enormă în cercetarea de bază: de exemplu, repetare serină /
treonină-kinază 2 bogată în leucină,α-sinucleină, parkină E3 ubiquitin-proteină ligază, ATPaza 13A2 care
transportă cationi probabil, proteină deglază DJ-1, serină / treoninproteină kinază PINK1 mitocondrială
etc. (Abbas și colab., 1999; Bonifati și colab., 2003; Hattori și colab. , 1998; Kachergus și colab., 2005;
Polymeropoulos și colab., 1997; Ramirez și colab., 2006; Trinh și Farrer, 2013; Valente și colab., 2004).
În general, consensul științific actual este că mai mulți factori sunt implicați în procesul
degenerativ, rezultând pierderea neuronilor dopaminergici care conțin NM în timpul PD, incluzând
neuroinflamarea, stresul oxidativ, disfuncția degradării proteinelor, agregarea α-sinucleină la
oligomeri neurotoxici, stresul reticulului endoplasmatic și disfuncție mitocondrială (Ebrahimi-
Fakhari și colab., 2012a, b; Exner și colab., 2012; Hauser și Hastings, 2013; Kalia și colab., 2013;
Martinez-Vicente și Vila, 2013; Mercado și colab., 2013; Mullin și Schapira, 2013; Rohn 2012; Taylor
și colab., 2013).
O problemă centrală este identificarea neurotoxinei (dacă există) responsabilă pentru

degenerarea neuronilor dopaminergici din sistemul nigrostriatal în timpul PD. Faptul că
neurotoxina 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridină exogenă induce la om un parkinsonism sever
într-o perioadă foarte scurtă, împreună cu o epuizare rapidă și severă a neuronilor dopaminergici
(Ballard și colab., 1985; Williams 1984), sugerează cu tărie că o astfel de neurotoxină trebuie să
aibă o origine endogenă, deoarece procesul neurodegenerativ din PD începe cu ani înainte de
simptomele motorii și progresia bolii este, de asemenea, foarte lentă. Interesant este faptul că
produsele oxidării DA (DA-o-chinonă, aminocrom și 5,6indolequinonă) sunt direct implicați în
disfuncția mitocondriilor, alterarea degradării proteinelor, α-agregarea sinucleinei la oligomeri
neurotoxici și stresul oxidativ în neuronii dopaminergici (Fig. 1, 2), sugerând că aceștia o-chinonele
pot juca un rol important în procesul degenerativ, ducând la pierderea neuronilor dopaminergici
SN care conțin NM (Aguirre și colab., 2012; Arriagada și colab., 2004; Bisaglia și colab., 2007;
Dibenedetto și colab., 2013; Hauser și Hastings, 2013; Huenchuguala și colab., 2014; LaVoie și
colab., 2005; MartinezVicente și colab., 2008; Muñoz și colab., 2012a, 2015; Norris și colab., 2005;
Paris și colab., 2010; Van Laar și colab., 2009; Whitehead și colab., 2001; Xiong și colab., 2014; Xu și
colab., 1998; Zafar și colab., 2006; Zhou și Lim, 2009).
Este important de remarcat faptul că formarea o-chinonele prin oxidare DA apar în interiorul
neuronilor care se pierd în boală și probabil moartea celulară indusă de aceștia o-chinonele în
timpul oxidării DA este un eveniment focal care explică de ce neurodegenerarea este foarte lentă
în PD. Aminocromul este cel mai stabil și studiat dintre acesteao-chinone și pot participa atât la
reacțiile neurotoxice, cât și la cele neuroprotectoare (Fig. 1, 2). Reacțiile neurotoxice în care este
implicat aminocrom sunt: i)α-agregarea sinucleinei la oligomeri neurotoxici ambii in vitro și în

experimente de linie celulară (Dibenedetto și colab., 2013; Muñoz și colab., 2015; Norris și colab.,
2005); ii) disfuncție de degradare a proteinelor care include afectarea sistemului proteazom în
diferitein vitro modele (Xiong și colab., 2014; Zafar și colab., 2006; Zhou și Lim, 2009), inhibarea
fuziunii vacuolelor autofagice cu lizozomi (Huenchuguala și colab., 2014; Muñoz și colab., 2012a;
Paris și colab. ., 2010) și disfuncție lizozomală (Huenchuguala și colab.,
2014) în linii de celule de șobolan și umane; iii) stresul oxidativ cu formarea hidroxilului

radicali în timpul reducerii cu un singur electron a aminocromului în leukoaminocrom-o-

radical semiquinonă, care este extrem de instabil în prezența oxigenului într-o linie celulară de șobolan
(Arriagada și colab., 2004); iv) disfuncție mitocondrială prin inhibarea complexului I al lanțului de
transport al electronilor cu o scădere semnificativă a ATP în celulele SH-SY5Y (Aguirre și colab., 2012).
The o-chinonele formate în timpul oxidării DA par să joace un rol important în pierderea neuronilor
dopaminergici care conțin NM din sistemul nigrostriatal în timpul PD. Cu toate acestea, oxidarea DA lao-
chinonele care rezultă în cele din urmă în formarea NM par a fi un eveniment normal, deoarece acest
pigment este prezent în SN de indivizi sănătoși. Un posibil motiv pentru care oxidarea DA formează
pigmentul NM și nu induce neurotoxicitatea este prezența enzimelor în SN care previn neurotoxicitatea
aminocromului, cum ar fi DT-diaforaza în neuronii dopaminergici ai SN (Lozano și colab., 2010;
Schultzberg și colab., 1988 ) și glutation S-transferază M2-2 în astrocite (Huenchuguala și colab., 2014)
atât la celulele șobolanului cât și la celulele umane.
După cum sa discutat mai sus, DT-diaforaza, numită și NQO1 sau NAD (P) H: chinon oxidoreductaza
1, catalizează reducerea cu doi electroni a aminocromului în leukoaminocrom (SeguraAguilar
și Lind, 1989). Această enzimă este flavoenzima unică care reduce chinonele cu doi electroni
la hidrochinone. Este rezonabil să presupunem că leukoaminocromul poate fi apoi rearanjat
la 5,6-dihidroxiindol, precursorul 5,6-indolequinonei: ultimul compus se poate polimeriza
conducând la formarea pigmentului NM, rezultând neuroprotecție sau poate interacționa cu
proteine precumα-sinucleină, inducând neurotoxicitatea (Fig.
1, 2). Reducerea cu doi electroni a aminocromului catalizată de DT-diaforaza previne formareaα-oligomeri
neurotoxici și fibrile de sinucleină: această enzimă poate stabiliza forma monomerului de α-sinucleină în
liniile celulare de șobolan (Muñoz și colab., 2015), inhibând efectele neurotoxice ale α-oligomeri de
sinucleină generați atunci când aminocrom (Muñoz și colab., 2015) și
5,6-indolequinonă (Bisaglia și colab., 2007) interacționează cu α-sinucleină. DT-diaforaza previne disfuncția
degradării proteinelor prin inhibarea afectării proteazomului indus de aminocrom în celulele șobolanului și
iepurelui (Xiong și colab., 2014; Zafar și colab., 2006) și afectarea autofagiei indusă de aminocrom într-o linie
celulară de șobolan (Muñoz și colab. , 2012b). Mai mult, DT-diaforaza poate bloca disfuncția mitocondriilor
indusă de aminocrom, scăderea potențialului membranei mitocondriale și scăderea producției de ATP în culturile
de celule de șobolan (Arriagada și colab., 2004; Fuentes și colab., 2007; Muñoz și colab., 2012b; Paris și colab.,
2011). DT-diaforaza ar putea acționa ca o enzimă neuroprotectoare, prevenind reducerea cu un singur electron a
aminocromului la leukoaminocromăo-radical semiquinonă, cu formare de radicali hidroxil și stres oxidativ
(Arriagada și colab., 2004). În cele din urmă, așa cum s-a demonstrat în liniile celulare de șobolan, DTdiaphorase
poate preveni, de asemenea, moartea celulară indusă de aminocrom (Arriagada și colab., 2004; Fuentes și colab.,
2007; Lozano și colab., 2010; Muñoz și colab., 2012b; Paris și colab. ., 2010, 2011).
Glutationul S-transferază M2-2 catalizează conjugarea glutationului DA-o-chinonă conducând la 5-

S-glutationil-DA (Dagnino-Subiabre și colab., 2000), care este apoi degradată la 5-Scisteinil-DA, iar
ultimul compus a fost detectat în SN și în alte regiuni ale creierului uman bogate în DA ( Rosengren
și colab., 1985), în pigmentul NM de la SN uman sănătos (Carstam și colab., 1991; Wakamatsu și
colab., 2003) și interesant în lichidul cefalorahidian al pacienților cu PD (Cheng și colab., 1996;
Rosengren și colab. al., 1985). Glutationul S-transferaza M2-2 conjugă, de asemenea, aminocromul
cu glutationul pentru a forma 4-S-glutationil-5,6dihidroxiindolină, care este stabilă în prezența
radicalilor superoxizi, oxigen și

peroxid de hidrogen (Baez și colab., 1997; Segura-Aguilar și colab., 1997). Prin urmare, glutationul
Stransferase M2-2 previne toxicitatea indusă de aminocrom în astrocite prin conjugarea aminocromului
cu glutationul. Într-adevăr, reducerea expresiei glutationului S-transferazei M2-2 cu un ARNsi într-un
model de linie celulară umană a astrocitelor a indus disfuncții autofagice și lizozomale (Huenchuguala și
colab., 2014). Interesant, deși glutationul Stransferază M2-2 este exprimat doar în astrocite, enzima
poate proteja, de asemenea, neuronii dopaminergici împotriva toxicității aminocromului. Acest lucru se
poate datora faptului că neuronii dopaminergici interiorizează glutation S-transferaza M2-2 secretată de
astrocite, dobândind astfel această enzimă de protecție împotriva neurotoxicității aminocromului, așa
cum sugerează experimentele de culturi celulare derivate de la om (Cuevas și colab., 2015).
Rolul recent apărut al 3,4-dihidroxifenilacetaldehidei (DOPAL), metabolitul primar al DA, în

degenerescența neuronală trebuie inclus în speciile reactive care conțin grupări carbonil
(Goldstein și colab., 2014). DOPAL rezultă din oxidarea DA de către monoaminoxidază, în special
izoforma A în neuronii catecolaminergici (Westlund și colab., 1985; Youdim și colab., 2006) și, în
condiții normale, DOPAL este transformat rapid în acidul corespunzător prin acțiunea aldehidei
dehidrogenazei. (Eisenhofer și colab., 2004). Deoarece activitatea aldehidei dehidrogenazei este
redusă aparent la pacienții cu PD sporadică (Goldstein și colab., 2013), trebuie, prin urmare, luată
în considerare posibilitatea acumulării de DOPAL reactiv. DOPAL conține două grupe funcționale
reactive, aldehida și catecolul, care pot fi implicate în modificarea proteinelor sau pot contribui la
procesul complex de oligomerizare oxidativă DA (Goldstein și colab., 2014). DOPAL s-ar putea de
asemenea auto-oxida în radical semi-chinonă șio-chinonă in vitro, cu posibilă formare de ROS
toxice (Anderson și colab., 2011), după cum sa raportat pentru aminocrom sau DA. Cu toate
acestea, efectul cel mai interesant pare să fie legat de capacitatea DOPAL de a induce
oligomerizareaα-
sinucleină într-un sistem fără celule, în culturi de celule dopaminergice SH-SY5Y și in vivo (Burke
și colab., 2008). DOPAL este mult mai activ în acest proces de oligomerizare decât DA în sine și
acest lucru ar putea explica legătura sa cu citotoxicitatea DA, deoarece proto-fibrilarulα-
sinucleina permeabilizează veziculele in vitro formând pori în membrană, îmbunătățind astfel
scurgerea DA endogenă în citosol (Volles și Lansbury, 2002).
5. Definiție, clasificare și proprietăți fizico-chimice de bază ale melaninelor

naturale
Conform unei recenzii recente asupra melaninelor și melanogenezei efectuată de un
grup internațional de experți, melaninele sunt pigmenți omniprezenți cu structură și
origine diversă, derivați prin oxidarea și polimerizarea tirozinei sau a compușilor
înrudiți, la animale sau compuși fenolici din organismele inferioare (d'Ischia) și colab.,
2013; Wakamatsu și Ito, 2002). Din punct de vedere biologic și chimic, se pot distinge
cel puțin patru tipuri distincte de pigmenți de melanină: eumelanine, feomelanine, NM
și piomelanine. Primele trei tipuri de melanine sunt prezente, într-un grad diferit, la om.
Cele mai studiate eumelanine sunt pigmenți insolubili negru-maronii derivați cel puțin
parțial din polimerizarea oxidativă a L-DOPA prin intermediari 5,6-dihidroxiindol (Prota
2000; Wakamatsu și Ito, 2002). Feomelaninele sunt galben-roșu-maroniu, solubile în
alcali,

intermediari (Ito și Wakamatsu, 2006). Pigmenții NM sunt discutate pe larg în următoarele

capitole ale acestei revizuiri și nu vor fi abordate în acest capitol. Cele mai puțin studiate
melanine, piomelaninele, sunt pigmenți întunecați produși în principal de microorganisme din

omogentizat (d'Ischia și colab., 2013).
În țesuturile umane și animale pigmentate, melaninele sunt de obicei sintetizate de celule

specializate, cunoscute sub numele de melanocite, sub formă de granule de pigment discernibile
legate de membrană numite melanosomi (Boissy și Hornyak, 2006; Quevedo și Holstein, 2006). O
serie de proteine și enzime structurale sunt implicate în biogeneza melaninei (Brilliant 2006;
Hearing 2006; Solano și Garcia-Borron, 2006; Takeda și Shibahara, 2006).
Granulele de pigment mature variază în mărime și formă, în funcție de tipul de celule pigmentare
responsabile de biogeneza melanozomilor. Astfel, melanosomii din sacul de cerneală alSepia
officinalis au o formă sferică și un diametru de aproximativ 150 nm (Kollias și colab., 1991; Liu și
Simon, 2003), în timp ce melanozomii din epiteliul pigmentar al retinei umane (RPE) sunt de obicei
alungiți și mult mai mari, având dimensiunea de 2-3 µm lung și 1 µm lățime (Boulton 1998; Sarna
1992; Simon și colab., 2008). În pielea umană normală, ultrastructura melanozomilor este legată
de tipul de melanină pe care îl produc (Sarna și Swartz, 2006). Eumelanosomii tipici au structură
lamelară elipsoidală cu melanină depusă într-un model uniform. În schimb, feomelanosomii sunt
rotunzi și granulari, cu o depunere inegală a pigmentului în melanosomi (Liu și colab., 2005).
Deși melanocitele se găsesc și în foliculii de păr și ocazional în dermă, ereditară, adică constitutivă,
culoarea pielii umane este determinată predominant de cantitatea și tipul de melanină din
epidermă (Quevedo și Holstein, 2006). Pigmentarea pielii umane este reglementată de factori de
mediu, printre care radiațiile ultraviolete joacă un rol cheie și de o varietate de factori endocrini,
paracrini și autocrini (Abdel-Malek și Kadekaro, 2006). Modificări distincte în localizarea și
morfologia granulelor de melanină apar în timpul rotației lor în epiderma umană. Astfel,
melanozomii maturi formați în melanocitul bazal sunt transferați prin dendritele sale către
keratinocite adiacente (Scott 2006). La încorporarea în keratinocite, melanozomii se fuzionează cu
lizozomii formând lizozomi secundari (Byers 2006). Hidrolaza lizozomală degradează melanosomii
pe măsură ce keratinocitele se deplasează pe suprafața epidermică. Melanosomii mai mari,
caracteristici pentru pielea umană puternic pigmentată, par a fi mai puțin susceptibili la
degradarea lizozomală decât melanosomii mai mici formați în pielea ușor pigmentată (Jimbow și
colab., 1999; Quevedo și Holstein,
2006). Astfel, în pielea umană ușor pigmentată, melanosomii degradați persistă doar ca așa-
numitul „praf de melanină” în stratul suprabazal al epidermei (Brenner și Hearing,
2008). Trebuie subliniat faptul că o astfel de degradare enzimatică a melanozomilor reduce doar
dimensiunea granulelor la particule mai fine, fără a degrada de fapt componenta lor de melanină.
De fapt, nu există enzime cunoscute care să poată descompune melanina. Proprietățile fizico-
chimice ale melanosomilor degradate în lizozomii secundari ai keratinocitelor nu au fost studiate
în mod sistematic și este discutabil dacă un astfel de „praf de melanină” este într-adevăr mai
eficient în protejarea epidermei de penetrarea și deteriorarea luminii ultraviolete decât
melanosomii nedegradați (Jimbow și colab., 1999). La fel de importantă este dacă melanina din
pielea umană suferă modificări chimice semnificative în timpul duratei relativ scurte de viață a
granulelor de pigment (Halprin 1972).

Interesant este că astfel de modificări au fost determinate recent în melanină din RPE uman. Folosind
spectroscopie de rezonanță paramagnetică electronică (EPR) pentru detectarea specifică a melaninei în

celulele izolate RPE, a fost determinat conținutul de melanină într-un număr de probe, obținut
postmortem de la donatori de vârstă diferită (Sarna și colab., 2003). S-a demonstrat că îmbătrânirea
este însoțită de pierderea treptată a melaninei RPE (Sarna și colab.,
2003) și modificările sale oxidative (Ito și colab., 2013). Autorii au postulat că aceste fenomene
rezultă din reacții fotochimice cronice care duc la scindarea oxidativă ireversibilă și la reticularea
melaninei. Trebuie subliniat faptul că RPE umană, alcătuită din celule postmitotice, este un sistem
pigmentar unic, în care melanina este sintetizată devreme în timpul dezvoltării fetale și prezintă o
schimbare metabolică redusă sau deloc ulterioară. Deși consecințele biologice ale unei astfel dein
vivo fotoimbatranirea melanozomilor RPE nu este încă pe deplin înțeleasă, s-ar putea argumenta
că reducerea conținutului de melanină și modificarea sa oxidativă scad capacitatea melaninei de a
proteja celulele umane RPE, precum și alte celule ale retinei exterioare, împotriva stresului
oxidativ (Ito și colab., 2013; Sarna și colab., 2003). RPE uman, indiferent de culoarea pielii și a
ochilor, conține în principal eumelanină (Ito și colab., 2013), în timp ce melanocitele uveale umane
conțin atât eumelanină, cât și feomelanină, iar conținutul lor relativ depinde de culorile pielii și ale
irisului (Prota și colab., 1998; Wakamatsu și al., 2008; Wielgus și Sarna, 2005).
O altă localizare extracutanată distinctă a melaninei la om este urechea internă, unde

funcțiile biologice ale pigmentului rămân speculative (Boissy și Hornyak, 2006). Melanocitele
extrem de dendritice, puternic pigmentate, care se află sub stratul epitelial al fiecărei zone
respective se găsesc în stria vasculară și modiolus ale cohleei (Meyer zum Gottesberge 1988).
Atât eumelanina, cât și feomelanina sunt sintetizate de melanocitele otice, iar pigmenții otici
par a fi similari cu cei de la ochi și păr (Inoue și colab., 1984).
În ciuda cercetărilor semnificative, structura moleculară precisă a pigmenților de melanină nu a fost determinată. Într-o mare măsură, acest lucru se datorează caracterului intratabil al pigmenților,
care sunt în mare parte insolubili în majoritatea solvenților și prezenți în mod natural ca granule complexe de pigment care conțin nu numai melanină, ci și matrice proteică și membrană lipidică
bistrat. Rezultatele numeroaselor studii, efectuate pe eumelanine naturale și sintetice, în care au fost utilizate microscopie de forță atomică, spectroscopie EPR, spectroscopie de rezonanță
magnetică nucleară, difracție Xray, spectrometrie de masă și calcule chimice cuantice avansate, par să susțină un model agregat stivuit al structura eumelaninei (d'Ischia și colab., 2013; Meredith și
Sarna, 2006; Zajac și colab., 1994). În eumelanină din cerneală sepia, sunt identificate cel puțin trei niveluri distincte de organizare structurală. Oligomerii planari relativ mici stivați de-a lungul axei Z
cu spațiul de stivuire de aproximativ 3,4 Å sunt responsabili pentru primul nivel de agregare, formând nanoagregatele fundamentale (protomolecule). Al doilea nivel de agregare, care implică
protomolecule, duce la formarea de filamente care sunt mici structuri agregate. Al treilea nivel de agregare are ca rezultat formarea particulelor mari de dimensiunea 100-200 nm (Clancy și colab.,
2000; Zajac și colab., 1994). S-a postulat că eterogenitatea moleculară ridicată a eumelaninei, determinată de caracterul eterogen al unităților sale monomerice și oligomerilor, este responsabilă
pentru proprietăți fizico-chimice neobișnuite, inclusiv absorbția luminii (Meredith și Sarna, 2006). Oligomerii planari relativ mici stivați de-a lungul axei Z cu spațiul de stivuire de aproximativ 3,4 Å
sunt responsabili pentru primul nivel de agregare, formând nanoagregatele fundamentale (protomolecule). Al doilea nivel de agregare, care implică protomolecule, duce la formarea de filamente
care sunt mici structuri agregate. Al treilea nivel de agregare are ca rezultat formarea particulelor mari de dimensiunea 100-200 nm (Clancy și colab., 2000; Zajac și colab., 1994). S-a postulat că
eterogenitatea moleculară ridicată a eumelaninei, determinată de caracterul eterogen al unităților sale monomerice și oligomerilor, este responsabilă pentru proprietăți fizico-chimice neobișnuite,
inclusiv absorbția luminii (Meredith și Sarna, 2006). Oligomerii planari relativ mici stivați de-a lungul axei Z cu spațiul de stivuire de aproximativ 3,4 Å sunt responsabili pentru primul nivel de
agregare, formând nanoagregatele fundamentale (protomolecule). Al doilea nivel de agregare, care implică protomolecule, duce la formarea de filamente care sunt mici structuri agregate. Al treilea
nivel de agregare are ca rezultat formarea particulelor mari de dimensiunea 100-200 nm (Clancy și colab., 2000; Zajac și colab., 1994). S-a postulat că eterogenitatea moleculară ridicată a
eumelaninei, determinată de caracterul eterogen al unităților sale monomerice și oligomerilor, este responsabilă pentru proprietăți fizico-chimice neobișnuite, inclusiv absorbția luminii (Meredith și
Sarna, 2006). 4 Å sunt responsabili pentru primul nivel de agregare, formând nanoagregatele fundamentale (protomolecule). Al doilea nivel de agregare, care implică protomolecule, duce la
formarea de filamente care sunt mici structuri agregate. Al treilea nivel de agregare are ca rezultat formarea particulelor mari de dimensiunea 100-200 nm (Clancy și colab., 2000; Zajac și colab., 1994). S-a postulat că eterogenitatea moleculară ridic

Eumelaninele sunt de obicei privite ca antioxidanți eficienți și agenți fotoprotectori (Brenner și

Hearing, 2008; Sarna 1992; Sarna și Swartz, 2006; Zareba și colab., 2014). Într-adevăr, s-a
demonstrat că eumelaninele sintetice elimină eficient radicalii liberi reactivi (Rozanowska și colab.,
1999) și sting stările electronice excitate ale anumitor molecule (Sarna și colab., 1985; Ye și colab.,
2003). A fost demonstrată capacitatea eumelaninei de a sechestra ionii metalici activi redoxin
vitro, în cazul L-DOPA-melaninei sintetice (Pilas și colab., 1988), melaninei oculare bovine (Sarna și
colab., 1976), melanozomilor RPE porcini, atât extracelular, cât și intracelular (Kaczara și colab.,
2012) și melaninei sepia (Liu și colab., 2004; Liu și Simon,
2005). MN sintetic și uman, precum și melanosomii RPE bovine au împiedicat
peroxidarea lipidelor nesaturate în sisteme model constând din lipozomi din lipide
nesaturate (Korytowski și colab., 1995; Zadlo și colab., 2007, 2009).
O altă proprietate interesantă a melaninei cu implicații biologice necunoscute este conductivitatea

sa electrică, aparent tipică pentru semiconductorii amori (McGinness 1972; McGinness și colab.,
1974). Cu toate acestea, un studiu recent care utilizează relaxarea spinului muonului, măsurarea
EPR și a conductivității electrice, a demonstrat că eumelanina sintetică este de fapt un
semiconductor hibrid, în care atât electronii cât și ionii au participat la conductivitatea electrică
(Mostert și colab., 2012). Studiul a subliniat rolul reacției de proporționare, care conduce la
producerea de radicali liberi extrinseci și ioni de hidroniu în eumelanine sintetice și naturale din
diferite surse (Felix și colab., 1978; Sarna și Swartz, 2006).
6. Sinteza și structura NM
NM este un pigment prezent în diferiți neuroni ai sistemului nervos central uman și este deosebit
de abundent în neuronii DA ai SN și în neuronii noradrenergici ai LC (Zecca și colab., 2004b,
2008b). Pigmentul NM apare ca o moleculă neagră și insolubilă compusă din diferite

componente: melanină, proteine, lipide și ioni metalici. Pigmentul NM este situat în organite
citoplasmatice, cu dimensiuni variabile de la 0,5 la 3,0 µm, înconjurat de o membrană dublă,
împreună cu corpuri lipidice și proteine (Sulzer și colab., 2008; Zecca și colab., 2008b).
Concentrația de pigment NM crește odată cu îmbătrânirea, începând formarea și acumularea sa
la începutul vieții (Zecca și colab., 2002, 2004b).
Deși originea organelor care conțin NM nu este complet clară, s-a propus că sinteza NM este
condusă de un exces de catecolamine citosolice care nu se acumulează în vezicule sinaptice,
deoarece sinteza NM a fost inhibată în culturile neuronale de șobolan prin supraexprimarea
sinaptică. transportor de monoamină vezicular 2 (Sulzer și colab.,
2000), transportorul care sechestrează monoaminele din citosol în vezicule sinaptice pentru
neurotransmisia ulterioară (Liu și Edwards, 1997). Rolul de reglementare al acestui transportor
asupra biosintezei NM în SN uman a fost, de asemenea, susținut de studii imunohistochimice

asupra creierului uman post-mortem, care au corelat prezența nivelurilor ridicate de transportor
vezicular monoamină 2 cu niveluri relativ scăzute de pigment NM și viceversa, indicând o relație
inversă între expresia transportorului de monoamină vezicular 2 și conținutul de NM (Liang și
colab., 2004). La șobolanii expuși la lumină puternică timp de până la 90 de zile s-a constatat o
acumulare de pigment NM în neuroni cu o scădere simultană a tirozinei

neuronii hidroxilazici pozitivi în SN, arătând astfel probabil un efect neurodegenerativ al

NM (Romeo și colab., 2013).
Calea biosintetică care duce la formarea NM este complexă și doar parțial înțeleasă
(Zucca și colab., 2014). Se pare că diferă de cea care duce la melanine periferice,
explicând diferențele notabile în organizarea structurală a celor doi pigmenți. Sinteza
melaninelor naturale prezente în piele, păr și ochi este controlată enzimatic de
tirozinază, care este esențială în etapa inițială de energie necesară a procesului, în care
tirozina este oxidată la dopaquinonă (Solomon și colab., 2014). Acest intermediar
reactiv suferă o serie de reacții redox și de condensare, cunoscute în mod colectiv ca
schema Raper-Mason, ducând la eumelanină și feomelanină (Agrup și colab., 1982;
Simon și Peles, 2010; Wakamatsu și Ito, 2002). Biosinteza precursorilor eumelaninei
necesită participarea a două enzime suplimentare,
Acidul 5,6-dihidroxiindol-2-carboxilic oxidază și L-dopachrom tautomeraza (GarcìaBorron și
Solano, 2002; Wakamatsu și Ito, 2002), în timp ce precursorii feomelaninei sunt generați începând
cu adăugarea de cisteină la dopaquinonă (Di Donato și Napolitano , 2003; Napolitano și colab.,
2008). Pentru a explica organizarea structurală a celor două componente din pigmentul final de
melanină, este important de reținut că cinetica etapelor inițiale de formare a eumelaninei și a
feomelaninei este diferită și, în special, că reacția cisteinei cu dopaquinonă este mai rapidă decât
etapele implicat în sinteza eumelaninei (Ito și Wakamatsu, 2008). Astfel, feomelanina se formează
mai devreme, până când sunt consumate majoritatea peptidelor care conțin cisteină și cisteină și
numai după aceea eumelanina se acumulează din dopaquinonă reziduală (Simon și Peles, 2010).
Aceasta este baza pentru formularea „modelului de carcasă” de organizare a granulelor de
pigment în cadrul melanosomului (Greco și colab., 2011; Ito 2006; Simon și colab., 2008), cu un
miez feomelanic interior înconjurat de fotoprotector. , strat eumelanic antioxidant (Liu și colab.,
2005; Peles și colab., 2009). În prezent nu se știe dacă cele două componente sunt legate covalent
sau pur și simplu asociate prin interacțiuni non-covalente.
În cazul NM, nu există dovezi pentru controlul enzimatic al procesului oxidativ care duce la formarea pigmentului, deoarece tirozinaza nu a fost găsită în SN uman, unde NM este cel mai abundent
(Ikemoto și colab., 1998; Tribl și colab. , 2007). Alte enzime decât tirozinaza ar putea fi implicate în biosinteza NM (așa cum sa discutat în capitolul 3), dar până în prezent o cale de sinteză enzimatică
specifică pentru NM nu a fost dovedită fără echivoc; în plus, trebuie luată în considerare și existența unui proces de auto-oxidare a catecolaminelor pentru biosinteza NM (Zucca și colab., 2014).
Substratul implicat în principal în polimerizarea oxidativă este fie DA, în SN și în majoritatea celorlalte zone ale creierului, fie norepinefrină în LC, deși diferite catecolamine par să fie implicate în
sinteza pigmentului uman NM (Wakamatsu și colab., 2014; Zecca și colab., 2008b). În acest pigment NM, grupările melanice sunt legate covalent de lanțurile alifatice și părțile peptidice (Engelen și
colab., 2012); dolicholii și acidul dolicoic au fost identificați ca fiind componentele majore ale lipidelor NM (Fedorow și colab., 2005; Ward și colab., 2007; Zecca și colab., 2000, 2008b). Evenimentele
inițiale ale biosintezei NM sunt cele mai dificil de urmărit, dar opinia emergentă este că trei actori par a fi implicați: catecolaminele citosolice, ionii de fier (III) și „semințele” oligomerilor agregați ai
peptidelor / proteinelor (Fig. 3). Prezența fierului (III) promovează puternic auto-oxidarea catecolaminei într-o chinonă reactivă (Sulzer și Zecca, dolicholii și acidul dolicoic au fost identificați ca fiind
componentele majore ale lipidelor NM (Fedorow și colab., 2005; Ward și colab., 2007; Zecca și colab., 2000, 2008b). Evenimentele inițiale ale biosintezei NM sunt cele mai dificil de urmărit, dar opinia
emergentă este că trei actori par a fi implicați: catecolaminele citosolice, ionii de fier (III) și „semințele” oligomerilor agregați ai peptidelor / proteinelor (Fig. 3). Prezența fierului (III) promovează
puternic auto-oxidarea catecolaminei într-o chinonă reactivă (Sulzer și Zecca, dolicholii și acidul dolicoic au fost identificați ca fiind componentele majore ale lipidelor NM (Fedorow și colab., 2005;
Ward și colab., 2007; Zecca și colab., 2000, 2008b). Evenimentele inițiale ale biosintezei NM sunt cele mai dificil de urmărit, dar opinia emergentă este că trei actori par a fi implicați: catecolaminele
citosolice, ionii de fier (III) și „semințele” oligomerilor agregați ai peptidelor / proteinelor (Fig. 3). Prezența fierului (III) promovează puternic auto-oxidarea catecolaminei într-o chinonă reactivă
(Sulzer și Zecca, a oligomerilor agregati ai peptidelor / proteinelor (Fig. 3). Prezența fierului (III) promovează puternic auto-oxidarea catecolaminei într-o chinonă reactivă (Sulzer și Zecca, a
oligomerilor agregati ai peptidelor / proteinelor (Fig. 3). Prezența fierului (III) promovează puternic auto-oxidarea catecolaminei într-o chinonă reactivă (Sulzer și Zecca,

2000). Acesta, la rândul său, este prins de semințele peptidice / proteine prezente în citoplasmă,
în special de cele care conțin reziduuri de cisteină, inițiind un proces de conjugare care este formal
similar cu cel care se produce în formarea pigmentului de feomelanină și eumelanină, dar cu două
diferențe importante. Primul este că procesul are loc pe un miez preformat de peptidă / proteină,
iar al doilea este că fierul rămâne prins în componenta melanică. Pe măsură ce materialul rezultat
se acumulează în citosol, acesta este transferat în vacuole autofagice care se fuzionează cu
lizozomi și alte vacuole autofagice, formând organele care conțin NM (Zucca și colab., 2014).
Corpurile lipidice sunt probabil formate prin fuziunea cu alte organite și prin transportul
dolicholilor în interiorul organelor care conțin NM (Fig. 3).
Determinarea cantităților relative ale celor trei componente din pigmentul NM

uman este o sarcină dificilă, având în vedere cantitatea limitată de material
biologic disponibil. Estimările anterioare bazate pe degradare chimică,
spectrometrie de masă și metode spectrofotometrice (Dzierzega-Lecznar și colab.,

2006; Wakamatsu și Ito, 2002; Wakamatsu și colab., 2003, 2012; Zecca și colab.,
1992) au fost recent actualizate utilizând analiză elementară, spectroscopie de
rezonanță magnetică nucleară, spectroscopie în infraroșu și analize de aminoacizi
și prezintă o variabilitate semnificativă în funcție și de zona creierului din care se
extrage pigmentul NM (Engelen și colab., 2012). Melanina, cu un raport
aproximativ 1: 3 între componentele feomelanice și eumelanice, este cea mai
abundentă în pigmentul NM izolat din SN (~ 56%), cu cantități mai mici de lipide (~
18%) și proteine (~ 12%).
Pigmenții NM din diferite zone ale creierului constau din agregate granulare cu dimensiuni de 200-400
nm sau forme variate, compuse din substructuri sferice mai mici, cu diametrul de aproximativ 30 nm
(Bush și colab., 2006, 2009; Zecca și colab., 2008b ). Structura propusă pentru porțiunea melanică a
pigmenților NM umani seamănă cu cea a altor melanine naturale: arhitectura pigmentului NM este cea
a unui nucleu de feomelanină înconjurat de suprafața eumelaninei, formând agregate sferice cu
electroni densi conform „modelului de carcasă” al melanogenezei mixte ( Ito 2006).
Diferența dintre procesele biosintetice care conduc la pigmentare melanine și NM

se reflectă în structura generală și morfologia particulelor rezultate. Mărimea
acestor particule aproximativ sferice de pigment NM, cu un diametru de
aproximativ 30 nm, este similară cu cea observată pentru melanine (Simon și
colab., 2008), dar organizarea structurală interioară este diferită. În cazul
melaninelor, singurul element structural ordonat pare a fi aranjamentul stivuit al
unităților oligomerice indolice plane (sau „protomolecule”) ale eumelaninei, care

sunt separate de aproximativ 3,4 Å, după cum se deduce pe baza dispersiei cu raze
X timpurii și microscopie de scanare prin tunelare (Cheng și colab., 1994a, b; Gallas
și colab., 1999; Meredith și Sarna, 2006; Zajac și colab., 1994).
2014). În contrast, componenta melanică a pigmentului NM nu crește ca o fază ordonată ca în
melaninele naturale, ci mai degrabă ca un „copac”, ale cărui ramuri se inițiază în punctele de
atașare a semințelor peptidice / proteice. Analiza pigmentului NM izolat din mai mulți

zonele creierului uman prin difracția cu raze X a pulberii arată o lipsă completă a tiparului tipic al
π-aranjament de stivuire între molecule aromatice extinse, dar un motiv diferit caracterizat prin
sisteme ordonate separate de aproximativ 4,7 Å (Zecca și colab., 2008b). Această separare este
mult prea mare pentru a fi asociată cu stabilă, noncovalentăπ-interacțiunile de stivuire între inele
aromatice, în special pentru sistemele policiclice, care dispun de obicei în paralel dispuse la
distanțe de 3,4-3,8 Å (Bissantz și colab., 2010; Salonen și colab., 2011; Tiekink și Zukerman-
Schpector, 2012) și trebuie atribuită unui alt tip de structură ordonată. Într-adevăr, parametrul
metric de 4,7 Å corespunde separării dintre osele vertebrale legate de hidrogen ale lanțurilor
peptidice dispuse înβ-este extrem de similar cu modelul de difracție a razelor X observat pentru
amiloidβ structuri (Greenwald și Riek, 2010; Makin și Serpell, 2005). Acest lucru susține opinia că
biosinteza NM începe de la o sămânță de peptidă oligomerică sau material proteic acumulat în
citosol de care se leagă DA oxidat, norepinefrină sau alte catecolamine, inițierea procesului de
melanizare (Fig. 3). Lucrările recente privind conjugatele sintetice melanină-proteină sunt
conforme cu acest model și susțin calea biosintetică propusă (Ferrari și colab., 2013).
7. Modele sintetice de NM
Studierea structurii și funcției NM umane este o sarcină dificilă din cauza cantităților mici care pot
fi extrase din țesuturile creierului uman. Prin urmare, prepararea melaninelor sintetice ca modele
de NM oferă un mijloc util de a elucida sinteza, structura și reactivitatea acesteia. Modele bune de
NM sunt atrăgătoare, deoarece ar putea fi utilizate pentru a induce și studia procesele
neurodegenerative și neuroinflamatorii în liniile de cultură celulară șiin vivo modele. Melaninele
sintetice capabile să inducă neuroinflamarea cronică, prin activarea microgliei și degenerescența
neuronală pot reproduce ceea ce se întâmplă într-adevăr într-un creier PD, înlocuind toxinele
exogene care au fost utilizate până acum și care provoacă o insultă acută care perturbă neuronii
dopaminergici, adică rotenona, paraquat, 6 -hidroxidopamină sau 1metil-4-fenil-1,2,3,6-

tetrahidropiridină (Hattori și Sato, 2007).
O aplicație interesantă a melaninelor sintetice a fost prezentată recent de Viceconte și colegii săi
(2015): in vivo și in vitro experimentele au arătat că melaninele sintetice sunt capabile să inducă
activarea microgliei, după cum sa raportat anterior folosind NM uman (Wilms și colab., 2003;
Zhang și colab., 2011), printr-un mecanism dependent de caspază (Viceconte și colab., 2015). În
plus față de reglarea semnificativă a unei varietăți de mediatori pro-inflamatori la activarea
microgliei, a fost observată o creștere semnificativă a expresiei caspazei-8 și caspazei-3 ca
răspuns la tratamentul cu melanină, în absența morții celulare (Viceconte și colab., 2015 ). Deși
acest studiu folosește o melanină sintetică care reprezintă doar porțiunea melanică a NM umană,
oferă o abordare nouă și interesantă pentru studiul mecanismelor moleculare ale inflamației în
timpul PD.
Sinteza modelelor adecvate de NM nu este simplă datorită numeroaselor componente prezente în

pigment: melanină, peptide, lipide și ioni metalici. Până în prezent, omologii sintetici ai NM uman
au fost reprezentați în principal de melanine produse prin oxidarea precursorilor fenolici (Aime și
colab., 1997; Bridelli și colab., 1999; Crippa și colab., 2010; Double și colab., 2000; Wakamatsu și
colab., 2003), în unele cazuri cu adăugarea de ioni de fier. Aceste modele sunt insolubile în apă și
în majoritatea solvenților organici. În general, modelele sintetice ale

NM poate fi împărțit în două tipuri corespunzătoare componentelor melaninelor naturale:

eumelanine și feomelanine. Feomelaninele diferă de eumelaninele prin prezența unei surse de sulf
furnizate de L-cisteină sau glutation. O varietate de precursori fenolici pot fi utilizați pentru
prepararea feomelaninelor și eumelaninelor: L-tirozină, LDOPA, DA sau norepinefrină (d'Ischia și
colab., 2013; Manini și colab., 2007). Pentru a semăna cu NM din SN uman, precursorul ales este
DA, deoarece analizele chimice degradative au demonstrat că NM din SN uman constă în principal
din unități derivate din DA și cisteinil-DA derivate (Wakamatsu și colab., 2003), deși alte
catecolamine pot participa la sinteza acestuia (Wakamatsu și colab., 2014). În special,in vitro
experimentele au confirmat că DA (derivat din L-DOPA) este probabil cel mai important precursor
în biosinteza NM (Sulzer și colab., 2000).
Oxidarea DA pentru a forma melanina poate fi efectuată cu două metode: o oxidare enzimatică rapidă
de către tirosinază sau auto-oxidarea mai lentă în aer. În unele cazuri, a fost utilizat și peroxid de
hidrogen, dar un exces de peroxid ar putea degrada melanina care formează (d'Ischia și colab., 2013).
Deși, așa cum s-a discutat mai sus, se pare că porțiunea melanică a NM nu este sintetizată enzimatic,
atât această metodă, cât și procesul simplu de auto-oxidare pot fi utilizate pentru a pregăti modelele
NM, deși nu este încă clar ce preparat conduce la modele mai bune de NM uman ( Bridelli și colab.,
1999; Crippa și colab., 2010).
În plus față de porțiunea melanică, porțiunea proteică poate fi încorporată și în modelele NM

avansate. Până în prezent, numai albumina serică bovină a fost utilizată în studii sintetice, deși nu
este nici o proteină umană, nici neuronală. Cu toate acestea, avantajul utilizării acestei proteine
este disponibilitatea și cunoașterea extinsă a structurii și proprietăților sale de legare (Anand și
Mukherjee, 2013). Un prim model a fost preparat prin oxidarea DA mediată de tirosinază în
prezența albuminei, dar aductul rezultat nu a fost bine caracterizat (Aime și colab., 2000). O serie
de albumine-melanine mai bine caracterizate au fost preparate mai recent prin auto-oxidarea DA
în prezența albuminei și a ionilor de fier (Ferrari și colab., 2013). Aici, folosind rapoarte adecvate de
proteină la DA, a fost posibil să se obțină conjugați de albuminmelanină solubili în apă. Aceste
modele solubile au avantajul de a permite o analiză mai detaliată prin diverse tehnici, inclusiv
spectroscopia de rezonanță magnetică nucleară, spectroscopia UV și dicroismul circular; în special,
concentrația modelelor NM solubile poate fi controlată direct în cultura celulară șiin vivo studii.
Studii multiple au comparat melaninele sintetice cu NM natural extras din țesuturile creierului
uman, în special din SN. Deoarece NM are un spectru EPR tipic, cu un semnal la g = 4,3 atribuit
fierului (III) și un semnal la g = 2,0 datorită radicalului organic al melaninei (Zecca și Swartz, 1993),
această tehnică este utilă pentru a determina dacă melaninele sintetice pot fi legate de pigmentul
natural. Mai mult, spectrele EPR oferă informații utile despre interacțiunea dintre melanină și ionii
de fier (III). Interesant este faptul că melaninele sintetice care conțin fier prezintă spectre EPR
foarte similare (Aime și colab., 1997; Ferrari și colab., 2013; Shima și colab.,
1997), indiferent de metodele utilizate pentru prepararea lor și comparabile cu cele ale pigmentului
natural NM. Cu toate acestea, doar o analiză cantitativă atentă permite să demonstreze că două
meleaguri sintetice de fier sunt prezente în melaninele sintetice (Ferrari și colab., 2013), precum și în
pigmentul natural NM: agregate mici de oxi-hidroxi de fier similare cu cele prezente în feritină miez de
fier, care nu sunt detectabile prin EPR, dar detectabile prin spectroscopie Mössbauer (Zecca et

al., 2001a) și ionii mononucleari de fier (III) (detectabili prin EPR), așa cum se observă în
NM natural (Fig. 4). O diferență în cantitatea de fier în cele două situri a fost observată
între eumelanine și feomelanine, deoarece părțile feomelanice par să favorizeze

formarea centrelor de fier mononucleare (Ferrari și colab., 2013). Prezența a două situri
diferite a fost confirmată și de experimente de susceptibilitate magnetică, în care s-a
observat că cantitatea de fier mononuclear este mai mare la modelele sintetice în
comparație cu NM uman (Bolzoni și colab., 2002). Prepararea modelelor NM a fost
foarte utilă, de asemenea, pentru a identifica vârfurile infraroșii ale pigmentului
datorate componentei melanice atunci când se utilizează DA-melanine singure (Bridelli
și colab., 1999; Double și colab., 2000) și vârfurile datorate peptidelor folosind
albuminmelanine (Engelen și colab., 2012).
O altă comparație structurală între NM uman și modelele sale a fost efectuată de 13

Spectroscopie de rezonanță magnetică cnucleară (Aime și colab., 2000). În această lucrare, o
albuminmelanină a fost comparată cu pigmenți NM izolați din SN de subiecți sănătoși și pacienți

cu PD. Spectrul de albumină-melanină a fost mai asemănător cu cel al pigmentului NM de la
pacienții cu PD, sugerând prezența unei porțiuni de proteine mai extinse în pigment în starea
de boală.
În plus față de angajarea pentru investigarea structurii NM și a proprietăților sale

fizice, analogii sintetici pot ajuta la elucidarea reactivității și rolului acesteia. În
special, modelele NM oferă o perspectivă asupra reactivității ionilor de fier legați
de pigmentul NM. De exemplu, melaninele sintetice, cum ar fi NM uman, reduc
producția de radicali hidroxil de către fier (III) (Zecca și colab., 2008a). Mai mult,
fierul legat de melaninele sintetice nu este capabil să oxideze DA, sugerând că
melanina poate proteja de stresul oxidativ prin chelarea ionilor metalici prezenți în
soluție (Zecca și colab., 2008a). Acest lucru se întâmplă atunci când fierul este
prezent în cantități mici, dar când melaninele sintetice sunt saturate cu ioni ferici,
acestea promovează formarea radicalilor hidroxilici (Zareba și colab., 1995).
Sunt necesare studii suplimentare pentru a obține modele NM mai bune. Alte proteine decât
albumina ar trebui utilizate în sinteza modelelor NM, eventual folosind proteine neuronale care ar
putea fi prezente în NM naturale. Disponibilitatea modelelor realiste de NM cu compoziție și structură
cunoscute va oferi capacitatea de a efectua experimente de structură / activitate care stabilesc ce
componente ale structurii NM interacționează cu receptorii microgliei și cu neuronii și organitele
celulare pentru a identifica procesele implicate în îmbătrânirea creierului și neurodegenerarea .
8. Complexul fier-NM ca compus principal de fier în neuronii DA
Pigmentul NM uman are capacitatea de a chela diferiți ioni ai metalelor de tranziție, în special fier,
cupru și zinc (Bohic și colab., 2008; Zecca și Swartz, 1993; Zecca și colab., 1994, 1996, 2001b, c, 2008b).
Fierul este cel mai abundent dintre acești ioni metalici și prezintă un interes deosebit, deoarece NM este
principala moleculă de stocare a fierului în neuronii DA ai SN uman (Fig. 5) (Zecca și colab., 2001a, b,
2004b). Legarea fierului de pigment previne reacția și ascorbatul lui Fenton

oxidare, după cum se observă în in vitro experimente utilizând atât NM uman cât și sintetic (Zecca
și colab., 2008a). În pigmentul izolat din SN de subiecți sănătoși, concentrația de fier este de
aproximativ 10 µg / mg de pigment NM (Zecca și colab., 2004b, 2008b; Zucca și colab., 2006), deși
NM poate lega cantități și mai mari de fier (Shima și colab., 1997; Zecca și colab., 1996, 2004b).
Două situri distincte de legare a fierului sunt prezente în pigmentul NM uman cu afinitate diferită pentru
metal; acestea au fost clasificate ca site-uri cu afinitate mare și mică (Double și colab., 2003; Fasano și
colab., 2006; Zecca și colab., 2008a). Prezența a două situri în pigmentul de la SN uman a fost confirmată
prin intermediul EPR (Aime și colab., 1997; Lopiano și colab., 2000; Zecca și Swartz, 1993),
susceptibilitatea magnetică (Bolzoni și colab., 2002), și spectroscopia Mössbauer (Double și colab., 2003;
Zecca și colab., 2001a). Ambele situri leagă fierul (III), într-o mare măsură ca chelați cu atomii donatorului
de oxigen din grupele catecol prezente în porțiunea melanică a pigmentului NM (Enochs și colab., 1993;
Kropf și colab., 1998). Identificarea și caracterizarea siturilor de legare a fierului cu afinitate ridicată și cu
afinitate scăzută au fost efectuate, de asemenea, utilizând modele sintetice ale pigmentului NM (Ben-
Shachar și colab., 1991; Bolzoni și colab., 2002; Double și colab., 2003; Ferrari și colab. ., 2013). Cu toate
acestea, diferențele structurale dintre site-urile cu afinitate mare și mică sunt încă neclare.
Datele colectate prin spectroscopie Mössbauer asupra pigmentului izolat din SN uman indică faptul că
unul dintre situri este similar cu cel al miezului feritinei (Galazka-Friedman și colab., 1996; Gerlach și
colab., 1995; Zecca și colab., 2001a), iar prezența acestei structuri a fost confirmată de măsurători de
susceptibilitate magnetică (Bolzoni și colab., 2002). În acest sit, ionii de fier sunt cuplați de punți oxi-
hidroxi în complexe multinucleare similare cu cele observate cu feritina. Cu toate acestea, în pigmentul
NM, ionii de fier (III) sunt legați de catecoli ai eumelaninei mai degrabă decât de resturile de aminoacizi,
oferind astfel un mediu diferit de feritină. În plus, domeniul fierului din interiorul NM pare a fi
semnificativ mai mic decât cel al miezului feritinei (Aime și colab., 1997; Bolzoni și colab., 2002). În plus,
se pare că cea mai mare parte a fierului NMbound se află într-un cluster asemănător feritinei (Aime și
colab., 1997; Gerlach și colab., 1995), deși tehnicile utilizate nu pot oferi date cantitative precise. Astfel,
este necesară o cuantificare fiabilă.
Celălalt loc de legare a fierului a fost caracterizat prin intermediul EPR. Spectrele EPR ale NM de la SN
uman arată de obicei un semnal la g = 4,3 atribuit fierului cu spin mare (III), care este coordonat de
atomii de oxigen din centrele mononucleare, rombice, cu șase coordonări (Aime și colab., 1997; Lopiano
și colab. al., 2000; Shima și colab., 1997; Zecca și Swartz, 1993). De asemenea, este detectat un semnal la
g = 2.0, indicând prezența unui radical organic delocalizat pe melanină (Aime și colab., 1997; Enochs și
colab., 1993; Zecca și Swartz, 1993; Zecca și colab., 1996, 2008b) . Măsurătorile dependente de
temperatură au demonstrat o interacțiune între aceste două semnale, indicând faptul că, de asemenea,
în acest caz, fierul este legat de porțiunea melanică a pigmentului NM. Interesant, spectrele EPR ale
pigmenților NM umani tratați cu chelatori de fier au arătat o reducere a intensității semnalului la g = 4. 3
și / sau o creștere a semnalului la g = 2,0 (Aime și colab., 1997; Lopiano și colab., 2000; Shima și colab.,
1997; Zecca și colab., 1996). Aceste rezultate sugerează că fierul legat în centrele mononucleare poate fi
extras din pigmentul NM. Prezența unui fier schimbabil în interiorul pigmentului NM a fost confirmată și
prin spectroscopie în infraroșu (Bridelli și colab., 1999). Într-adevăr, o creștere a amplitudinii în

banda de absorbție a grupărilor fenolice a fost detectată după epuizarea fierului de către agentul
chelator al acidului etilendiaminetetraacetic (Bridelli și colab., 1999), indicând faptul că fierul a fost legat
de atomii de oxigen ai catecolilor melaninei. Cu toate acestea, această tehnică nu indică dacă fierul
schimbabil se afla în nucleul asemănător feritinei sau în grupul de fier mononuclear.
Din analizele EPR asupra pigmentului NM după îndepărtarea fierului de către un agent de chelare, se pare că
fierul depozitat în centrele asemănătoare feritinei este legat probabil cu afinitate mare de pigmentul NM, unde
nu este reactiv redox (Aime și colab., 1997; Lopiano și colab., 2000; Shima și colab., 1997; Zecca și colab., 1996).
Prin urmare, acest domeniu ar putea oferi un sistem de stocare sigur pentru fier în neuroni. Cu toate acestea,
se poate întâmpla ca atunci când siturile cu afinitate ridicată sunt saturate, ca și în cazul supraîncărcării cu fier
observate în PD (așa cum este descris în secțiunile 9.1 și 10.2.), Ionii de fier se leagă, de asemenea, de locurile cu
afinitate scăzută ale pigmentului prin catecol. reziduuri din centrele mononucleare, de unde pot fi eliberate cu
ușurință, provocând toxicitate mediată de fier.

Pe scurt, fierul este legat de pigmentul NM în două tipuri de situri: primul sit este un grup de fier
cu punte oxihidroxi (III), înconjurat de grupări de catecoli din porțiunea melanică a pigmentului
NM, în timp ce al doilea sit este un fier mononuclear, direct coordonate de atomii de oxigen ai
porțiunilor de catecoli (Fig. 4). Cu toate acestea, nu este complet clar care dintre aceste site-uri
coordonează fierul cu afinitate mare sau mică. Pe lângă structura chimică a centrelor de fier, ar
trebui luată în considerare și accesibilitatea ionilor de fier. Experimentele viitoare care vizează
caracterizarea siturilor de legare a fierului NM ar trebui să ia în considerare nu numai structura
acestor centre, ci și accesibilitatea și reactivitatea acestora față de liganzi de legare mici și
substraturi biologice.
9. NM și fier: efecte neuroprotectoare și neurodegenerative

9.1. Rolurile neuroprotectoare ale NM uman
Sinteza NM este în sine un proces de protecție, care este susținut de excesul de DA în citosol care
nu este acumulat de veziculele sinaptice, așa cum s-a demonstrat în experimentele de culturi
celulare (Sulzer și colab., 2000). DA în citosol poate fi oxidată pentru a forma DA-o-chinona prin
cataliză mediată de fier și apoi poate urma două căi diferite: eumelanină sau feomelanină
(Wakamatsu și colab., 2003, 2012). Ambele căi sunt compatibile cu formarea NM (Fig. 3), după
cum sa discutat mai sus în capitolele 3 și 6. Fără sinteza NM, acumularea DA citosolică ar induce
efectele neurotoxice descrise în capitolul 4. Analiza prin microscopie cu emisie de fotoelectroni
arată că oxidarea potențialul pigmentului NM uman corespunde cu cel al eumelaninei,
demonstrând astfel că structura NM este compusă dintr-un miez feomelanic înconjurat de
suprafața eumelaninei (Bush și colab., 2006). Acest potențial de oxidare este redus și nu este
suficient de reductiv pentru a genera un nivel ridicat de procese oxidative și efecte

neurodegenerative consecvente.
Pigmentul NM uman poate lega diferite metale formând complexe stabile, blocând efectele
neurotoxice care ar putea avea loc prin reacții redox sau alte procese (Zecca și Swartz, 1993;
Zecca și colab., 1994, 1996, 2001b, c, 2008b). Această proprietate funcțională a pigmentului NM
se datorează prezenței grupărilor dihidroxiindol în structura sa, așa cum s-a discutat mai sus.
Fierul este cel mai abundent metal conținut în NM izolat de SN uman

și alte zone ale creierului, iar acest lucru prezintă un interes special datorită contribuției sale la stresul
oxidativ din neuroni. Este interesant faptul că NM din țesutul SN nu este complet saturat cu fier și este
capabil să chelate cantități mai mari din acest metal (Shima și colab., 1997; Zecca și colab., 1996, 2004b).
Într-adevăr, NM din SN poate acumula cantități mari de fier, de până la 55 de ori mai mari decât
concentrațiile tisulare (Zecca și colab., 2008b).
După cum sa discutat mai sus, NM pare să posede două tipuri de situri de legare a fierului. În condiții de
supraîncărcare a fierului, ca în PD (Dexter și colab., 1987, 1989; Earle 1968; Sofic și colab., 1988),
situsurile cu afinitate ridicată ale NM ar fi saturate, iar fierul s-ar putea lega de locurile cu afinitate
scăzută ca bine. În ultimele locuri, fierul este legat într-un complex de stabilitate scăzut și ar putea fi
eliberat cu ușurință, jucând un rol toxic prin participarea la procesele redox (Double și colab., 2003) și
oxidarea ascorbatului, un sistem antioxidant major în celulele creierului (Rice 2000) ). Supraîncărcarea
de fier pe NM poate cataliza, de asemenea, oxidarea DA cu formarea de DA-ulo-chinonă, inducând
modificarea oxidativă a proteinelor cu o cascadă consecventă de procese neurotoxice (Segura-Aguilar și
colab., 2014; Zecca și colab., 2008a).
În condiții de supraîncărcare a fierului pe NM, rata degradării NM de către peroxidul de

hidrogen ar putea crește, de asemenea (Zecca și colab., 2008a). Este posibil ca acest proces
să apară în microglie atunci când NM eliberat de neuroni pe moarte este fagocitat și
degradat, astfel încât fierul reactiv (Zecca și colab., 2008a; Zhang și colab., 2011) și alte
toxine acumulate anterior de NM (D'Amato și colab.) al., 1986; Karlsson și Lindquist, 2013;
Lindquist și colab., 1988; Oestergren și colab., 2004; Salazar și colab., 1978) sunt eliberate
brusc și pot provoca moartea celulelor. Un nivel crescut de fier redox activ a fost descris în
NM de SN de la pacienții cu PD (Faucheux și colab., 2003; Good și colab., 1992; Jellinger și
colab., 1992). Astfel, un rol protector al NM poate fi ipotezat atunci când fierul este legat în
condiții fiziologice,
9.2. Rolul neurodegenerativ al NM uman

NM a fost mult timp sugerat ca un factor critic care stă la baza vulnerabilității neuronale în PD (Hirsch și
colab., 1988; Marsden 1983). În SN, neuronii DA care conțin NM par să aibă o vulnerabilitate diferită în PD
în funcție de conținutul lor de NM. Unele studii au sugerat că neuronii cu cel mai mare conținut de NM
sunt mai susceptibili la moarte, în timp ce alte studii au raportat că neuronii ușor pigmentați sunt mai
vulnerabili în PD (Gibb 1992; Hirsch și colab., 1988; Kastner și colab., 1992; Mann și Yates , 1983;
Pakkenberg și colab., 1991). În orice caz, pacienții cu PD au o scădere severă a concentrației de NM în SN
de aproximativ 60% comparativ cu controalele potrivite pentru vârstă (Zecca și colab., 2002).
Rolul intraneuronal al NM în creșterea vulnerabilității neuronale poate fi, de asemenea, legat de

conținutul ridicat de MHC-I în organitele de neuroni care conțin NM în SN și LC umane; acești

neuroni care degenerează în mod specific în PD exprimă MHC-I, în timp ce alți neuroni care nu
sunt vizați de PD au o expresie MHC-I scăzută sau absentă. La SN și LC la subiecții PD, celulele CD8
+ au fost uneori observate în imediata apropiere a neuronilor care conțin NM și exprimă MHC-I,
sugerând că pot declanșa moartea neuronală. În neuronii murini DA cultivați, expresia MHC-I
poate fi indusă de factori eliberați din microglia activată de NM sau deα-sinucleina (ambele găsite
extracelular în creierele PD), sau alternativ indusă de DA citosolică ridicată și creșterea stresului
său oxidativ. Apoi, MHC-I poate lega peptidele antigenice

derivate prin scindarea proteinelor străine sau native și le prezintă pe membrana neuronală, astfel încât
limfocitele CD8 + citotoxice să vizeze degenerarea inducând neuronul (Cebrián și colab.,

2014). Prezența unui număr mare de celule infiltrante, atât în creierul pacienților cu PD, cât și la
modelele de șoareci ale bolii, se datorează probabil parțial scurgerii crescute de BBB, o afecțiune care
apare la îmbătrânire și la PD (Brochard și colab., 2009; Farrall și Wardlaw, 2009; Kortekaas și colab.,
2005). Deoarece NM se acumulează și în timpul îmbătrânirii, un astfel de mecanism neuroinflamator ar
putea oferi o legătură între îmbătrânire, NM și PD. Unin vitro studiul a raportat că celulele dendritice
murine pot dezvolta un fenotip matur după expunerea la NM uman (Oberländer și colab., 2011). Celulele
dendritice au fagocitat pigmentul NM și au secretat interleukina-6 și factorul de necroză tumoralăα, în
timp ce declanșează proliferarea celulelor T. Cu toate acestea, densitatea celulelor dendritice în SN este
mult mai mică decât microglia, iar răspunsul lor la activarea NM este mai lent decât microglia: prin
urmare, rolul celulelor dendritice în mecanismele neuroinflamatorii și neurodegenerative ale PD poate fi
redus în comparație cu microglia.
NM contribuie probabil la progresia mecanismelor neurodegenerative prin alimentarea

unui proces neuroinflamator care implică activarea microgliei (Block et al., 2007). Într-
adevăr, o caracteristică tipică în SN parkinsoniană este apariția NM eliberat de neuronii
morți în spațiul extracelular, împreună cu activarea microgliană intensă (Banati și colab.,
1998; Langston și colab., 1999; McGeer și colab., 1988) .In vitro și in vivo experimentele au
arătat că microglia activată poate induce moartea neuronală prin eliberarea diferitelor
molecule proinflamatorii, ROS și specii de azot reactiv și prin atacarea directă a corpurilor și
proceselor neuronale (Zecca și colab., 2008c; Zhang și colab., 2011). Datorită insolubilității
sale, granulele de NM eliberate ar putea rămâne perioade lungi de timp în spațiul
extracelular al SN uman și să ofere o sursă de inflamație cronică: acest NMmoreane
extraneuronal eliberează încet în mediul extracelular compușii toxici absorbiți în structura
NM. În plus, particulele extracelulare de NM pot fi fagocitate și degradate de celulele

microglia activate, cu consecința că pot fi eliberați compușii toxici și metalele active redox
imobilizate anterior în NM, ceea ce ar putea exacerba activarea microglială și deteriorarea
neuronală,in vitro
și in vivo modele de PD (Zecca și colab., 2008c; Zhang și colab., 2011, 2013). În concordanță cu
studiile care raportează o pierdere legată de vârstă a neuronilor pigmentați SN, au fost
raportate granule extraneuronale de NM în SN ale subiecților vârstnici neboliți în asociere cu
activarea microglială (Beach și colab., 2007).
În studiile de cultură celulară, tratamentul culturilor de microglie cu pigment NM uman produce

chemotaxie: celulele microgliei se îndreaptă spre granulele NM, fagocitează în mod activ granulele NM și
eliberează molecule neurotoxice, inclusiv factorul de necroză tumorală α, interleukina 6, oxid nitric
(Wilms și colab., 2003) și molecule reactive cum ar fi superoxid și peroxid de hidrogen (Zhang și colab.,
2011, 2013). Interesant este faptul că injecția de NM în SN de șobolan determină activarea intensă a
microgliei și degenerarea neuronilor DA cu o astrocitoză moderată (Zecca și colab. 2008c; Zhang și colab.,
2011, 2013).
Studiile asupra culturilor de celule derivate de la șoareci au demonstrat în mod clar că

neurodegenerarea indusă de microglia activată cu NM implică probabil antigenul macrofagic complex-1
și fagocit oxidaza microgliei (Zhang și colab., 2011, 2013), deși alți factori ar putea juca un rol cheie.

Moleculele inflamatorii eliberate din microglia activată de NM se pot difuza prin țesutul
cerebral și pot induce reacții vasculare cu efluentul consecvent de leucocite din sânge,
inclusiv macrofage în parenchimul creierului, unde aceste molecule inflamatorii și leucocite

extind și mai mult inflamația creierului.
Apoi, se pare că NM uman are un rol dublu: protector și / sau toxic, în funcție de contextul
celular și de condiții (Zecca și colab., 2003; Zucca și colab., 2014).
10. Fierul în îmbătrânirea creierului și PD
10.1. Modificări de fier în îmbătrânirea creierului
Concentrația fierului total crește în timpul îmbătrânirii în SN uman, putamen, globus

pallidus, nucleu caudat și cortexuri. Cu toate acestea, nu se știe de ce fierul crește
numai în aceste regiuni (Hallgren și Sourander, 1958; Hebbrecht și colab., 1999; Ramos
și colab., 2014; Zecca și colab., 2004b). Distribuția fierului total în creierul uman adult
normal este neomogenă și cel mai mare conținut se găsește în putamen, globus
pallidus și nucleul caudat, cu concentrații mai mici în substanța gri corticală, substanța
albă, creierul mediu (adică SN) și cerebelul, iar cele mai scăzute concentrații de fier se
găsesc la pons, LC și medulla (House și colab., 2012; Ramos și colab., 2014; Zecca și
colab., 1996, 2001b, c, 2004b). La îmbătrânire, se observă modificări ale diferitelor
forme moleculare ale fierului (feritină, NM, transferină, hemosiderină,
Mai mulți factori contribuie la creșterea concentrației totale de fier odată cu îmbătrânirea, inclusiv
permeabilitatea BBB, starea inflamatorie, redistribuirea fierului în creier și modificările
homoeostaziei fierului (Conde și Streit, 2006; Farrall și Wardlaw, 2009). Acumularea de fier în
neuroni poate induce direct leziuni celulare cu mecanismele raportate în secțiunea 2.1.
Acumularea de fier glial în timpul îmbătrânirii poate afecta neuronii prin inducerea unei stări
inflamatorii prin eliberarea crescută de citokine pro-inflamatorii (Williams și colab.,
2012) și stabilirea neuroinflamării și neurodegenerării (Xu și colab., 2012).
Modificările concentrației de fier, NM și feritine în SN uman și LC în timpul îmbătrânirii

au fost cercetate cu atenție (Zecca și colab., 2001a, 2004b). Aceste studii oferă valori și
mecanisme de referință importante pentru a înțelege rolul fierului în
neurodegenerarea PD, care vizează în principal neuronii catecolaminici ai SN și LC. La
subiecții sănătoși, o creștere liniară a concentrației totale de fier în SN se găsește de-a
lungul vieții și aceasta este mai mare decât cea măsurată în LC, unde concentrația
totală de fier rămâne stabilă pe tot parcursul vieții (Zecca și colab., 2004b; Zucca și
colab. al., 2006). În SN, concentrațiile lanțului greu de feritină și ale lanțului ușor de
feritină (cele două izoforme ale feritinei proteinei de stocare a fierului) cresc în timpul
îmbătrânirii, în timp ce acestea sunt mai mici și rămân constante în LC; prin urmare,
Pigmentul NM este prezent în toate tipurile de neuroni ca complexe NM-fier, iar cantitatea de fier
legată de NM variază în funcție de neuronii din fiecare zonă a creierului uman (Zecca și colab.,
1996, 2001c, 2004b, 2008b). Complexul NM-fier este principalul compus de fier din

neuronii catecolaminergici (așa cum s-a discutat în capitolul 8) și concentrația acestuia, măsurată
printr-o metodă precisă pentru cuantificarea NM, crește în timpul îmbătrânirii în SN și LC, deși
conținutul de fier în pigmentul NM din LC rămâne mult mai mic decât cel găsit în NM din SN, în
concordanță cu ipoteza că neuronii LC sunt mai puțin vulnerabili decât neuronii SN la daunele
provocate de fier (Zecca și colab., 2004b; Zucca și colab., 2006).
În SN cu vârstă sănătoasă, investigațiile histochimice au arătat numeroase depozite de fier feric reactiv
prin colorarea lui Perls în celulele gliale și în neuronii fără NM, indicând faptul că feritina nu este
suficient exprimată pentru a chela aceste cantități de fier (Zecca și colab., 2004a, b ; Zucca și colab.,
2006). În contrast, în neuronii care conțin NM, depozitele reactive de fier feric nu au fost detectabile prin
colorarea lui Perls (Fig. 5), deoarece fierul este sechestrat eficient de NM într-un complex stabil, așa cum
se arată în spectroscopia EPR și Mössbauer. Mai mult, aceste metode spectroscopice au arătat că NM în
neuronii catecolaminici nu este saturat cu fier, chiar și la subiecții vârstnici unde cea mai mare acumulare
de fier are loc în celulele gliale. Acest lucru indică faptul că NM este un tampon eficient al fierului
intraneuronal (Zecca și colab., 1996, 2001a, 2004b). Conținutul de complexe NM-fier crește odată cu
vârsta și în neuronii cortexului premotor, putamen și cerebel; aceasta este probabil o consecință a
conținutului crescut de fier și a mobilizării care au loc în acești neuroni în timpul îmbătrânirii normale
(Zecca și colab., 2008b).
În creierul uman în vârstă, așa cum s-a discutat mai sus, putamenul și globul
pallidus au un conținut ridicat de fier, iar colorarea lui Perls arată multe depozite
de fier în fibre, celule gliale și neuroni fără pigment NM vizibil, în timp ce neuronii
care conțin NM nu au fier detectabil depozite. În cerebel și în cortexul premotor,
nivelurile de fier detectate histochimic sunt mai mici decât în putamen și globus
pallidus. Atât neuronii, cât și glia cerebelului și a cortexului premotor sunt relativ
libere de depozite de fier. În cerebel, numeroase depozite de fier pot fi găsite prin
colorarea lui Perls în substanța albă, în contrast cu raritatea relativă observată în
straturile granulare și moleculare ale cortexului cerebelos (Fig. 6). Astfel, regiunile
cu un conținut ridicat de fier au depozite de fier mai detectabile histochimic în
neuroni și glia.
O creștere a situației pro-inflamatorii este prezentă în creierul persoanelor în vârstă (Conde și Streit,
2006). Numărul de celule gliale crește în timpul îmbătrânirii normale a creierului uman și există o
imunoreactivitate crescută a markerilor astrocitari și microgliali (Conde și Streit, 2006). Infiltrarea
limfocitelor ar putea fi, de asemenea, prezentă în același timp, reprezentând un factor de risc important
pentru neurodegenerare (Brochard și colab., 2009). Există, de asemenea, o permeabilitate crescută a BBB
care crește odată cu îmbătrânirea și toate aceste modificări legate de îmbătrânire pot duce la creșteri
specifice fierului în creier (Block și colab., 2007; Conde și Streit, 2006; Farrall și Wardlaw, 2009 ).
Depozitele de fier și conținutul de feritină cresc în general cu vârsta în microglia și astrocite ale
cortexului uman, cerebelului, hipocampului, ganglionilor bazali și amigdalei. Cele mai mari
cantități de fier și proteine care leagă fierul, cum ar fi feritina și transferrina, sunt conținute în
oligodendrocite (Connor și colab., 1990). Un grup de celule microglia feritin-pozitive cu

morfologia aberantă de tip distrofic se găsește în creierul uman în vârstă. Fierul fagocitat de
subpopulațiile de celule microglia feritin-pozitive ar putea fi o sursă de specii toxice care induc
degenerescența celulară. Prin urmare, microglia distrofică și feritină-pozitivă ar putea contribui la

patogeneza tulburărilor neurodegenerative datorate funcției microgliene modificate (Lopes și
colab., 2008).
O serie de procese de îmbătrânire poate afecta mecanismele homeostaziei fierului, astfel încât cantități
semnificative de fier nu sunt suficient de chelate de proteinele de stocare sau de alte molecule. Un
fenomen general observat la îmbătrânirea creierului este transformarea chimică a fierului din
moleculele fiziologice moleculare de fier, care sunt în principal solubile, în forme moleculare insolubile
de fier, cum ar fi NM și hemosiderina.
10.2. Fier și PD
După cum sa discutat mai sus, ganglionii bazali sunt regiuni îmbogățite cu fier ale creierului uman
în vârstă și reprezintă un loc privilegiat al acumulării excesive de fier în mai multe tulburări
neurodegenerative, în special PD (Rouault 2013; Ward și colab., 2014). Interesant este că unul
dintre primele studii referitoare la apariția depozitelor anormale de fier în creierul pacienților cu
PD a fost efectuat la începutul secolului trecut (Lhermitte și colab., 1924). După acel studiu de
pionierat, literatura despre legătura dintre fier și PD a devenit imensă, dar cu întrebări încă
deschise.
PD afectează în mod specific SN și mai multe studii au demonstrat puternic o creștere a concentrației
totale de fier la SN la pacienții cu PD, cu niveluri maxime de fier care se corelează aparent cu severitatea
bolii (Dexter și colab., 1987, 1989, 1991; Earle 1968; Riederer și colab., 1989; Sofic și colab., 1988).
Majoritatea studiilor au observat o creștere consistentă a fierului total la SN la pacienții cu PD, utilizând o
varietate de tehnici analitice semicantitative și cantitative (Sian-Hülsmann și colab., 2011). Cu toate
acestea, unele studii, în special cele care utilizează în principal spectroscopia Mössbauer, nu au raportat o
creștere semnificativă a nivelului total de fier la pacienții cu PD comparativ cu subiecții sănătoși (Galazka-
Friedman 1996; Wypijewska și colab., 2010): această discrepanță ar putea fi legată de o precizie scăzută
spectroscopiei Mössbauer, sau la proceduri inadecvate în pregătirea probelor (Hare și colab., 2012; Zecca
și colab., 1996). Discrepanțe similare în conținutul de fier au fost raportate în zonele cerebrale implicate
în progresia bolii, altele decât SN, cum ar fi putamen și globus pallidus (Sian-Hülsmann și colab.,
2011).
Motivele pentru acumularea ridicată de fier în SN a pacienților cu PD și vulnerabilitatea crescândă

a neuronilor DA au fost dezbătute de mult timp și s-au sugerat diverși factori care apar în boală: i)
permeabilitate crescută sau disfuncție a BBB în timpul bolii ( Faucheux și colab., 1999; Kortekaas și
colab., 2005); ii) starea pro-inflamatorie crescută (Block și colab., 2007; Conde și Streit, 2006; Gao și
Hong, 2008), deoarece neuroinflamarea poate perturba homeostazia fierului pe diferite celule ale
creierului, așa cum s-a demonstrat în
in vitro studii care au folosit atât culturi de celule de șoarece și șobolan (Rathore și colab., 2012; Urrutia și colab.,
2013); iii) expresia crescută a receptorilor de lactoferină (implicați în absorbția fierului prin
lactoferină) în neuroni și microvase din mezencefal, cu imunoreactivitate mai mare a receptorilor
de lactoferină la SN la pacienții cu PD cu pierderi nigral dopaminergice mai mari (Faucheux și
colab., 1995); iv) expresia crescută a unei izoforme specifice a metalului divalent

transportor de ioni 1 în neuronii SN ai pacienților cu PD (Salazar și colab., 2008); v) scăderea activității feroxidazei
a ceruloplasminului (Ayton și colab., 2013; Olivieri și colab., 2011), o fieroxidază exportatoare de fier esențială
pentru metabolismul creierului fierului, atât în SN, cât și în lichidul cefalorahidian, formează pacienți cu PD; vi)
dereglarea transportului de fier mediat de transferina / receptorul transferinei de tip 2 în neuronii dopaminergici
SN ai pacienților cu PD, în special în mitocondriile acestora (Mastroberardino și colab., 2009); vii) mutații ale
genelor care codifică proteinele implicate în transportul, legarea și metabolismul fierului (Borie și colab., 2002;
Guerreiro și colab., 2006; Hochstrasser și colab., 2004). Unele dintre aceste modificări care apar la pacienții cu PD
au fost observate și la modelele animale de PD (Mastroberardino și colab., 2009; Salazar și colab., 2008).
S-a demonstrat că fierul redox activ se acumulează în neuronii SN umani corpuri Lewy (Castellani
și colab., 2000), incluziunile patologice tipice PD care sunt compuse în principal din α-sinucleină
(Goedert 2001). În plus,in vitro studiile au arătat că fierul induce o schimbare conformațională a α-
sinucleină la β-conformarea foii, formând fibrile care sunt prezente în corpurile Lewy (el-Agnaf și
colab., 2002; Uversky și colab., 2001). Acumularea ambelorα-sinucleina și fierul din SN ar putea, în
principiu, să stabilească condițiile locale necesare pentru α-formarea de specii reactive mediate de
sinucleină, după cum s-a demonstrat in vitro de Turnbull și colegii (2001): formarea peroxidului de
hidrogen din α-
sinucleina urmată de conversia sa în radicali hidroxil prin reacția lui Fenton poate stabili
condițiile pentru α-agregarea sinucleinei (Hashimoto și colab., 1999).
Distribuția celulară a fierului a fost, de asemenea, profund investigată. Trebuie remarcat faptul că
conținutul de fier din celule se poate modifica atunci când o zonă bogată în fier, cum ar fi SN, începe să
degenereze. După degenerarea neuronală, microglia activată și macrofagele perivasculară fagocitează
resturi și alte componente celulare (de exemplu, NM, fier, proteine care conțin fier etc.) eliberate de
celulele degeneratoare (Andersen și colab., 2014; Block și colab., 2007; Zhang și colab., 2011). În
consecință, aceste celule scavenger se îmbogățesc cu fier și, în plus, în microglie activată este perturbată
homeostazia fierului, precum și expresia feritinei, așa cum s-a demonstrat în culturile celulare
(Cheepsunthorn și colab., 2001; Rathore și colab., 2012; Urrutia și colab., 2013). În plus, microglia și
macrofagele pe moarte își pot elibera fierul la rândul lor, sporind astfel stresul oxidativ mediat de fier al
celulelor adiacente (Andersen și colab., 2014). Metodele histochimice semiquantitative au arătat că
depunerile de fier au fost crescute în mod special în astrocite, macrofage, celule reactive de microglie
asociate cu NM extracelular și neuroni nepigmentați ai SN ale pacienților cu PD (Morris și Edwardson,
1994; Jellinger și colab., 1990), împreună cu o creștere a reactivității feritinei în proliferarea microgliei
(Jellinger și colab., 1990).
Modificările raportate ale imunoreactivității feritinei la SN ale pacienților cu PD nu sunt consistente,

probabil din cauza diferențelor de specificitate a anticorpilor utilizați. Reglarea în sus a expresiei
feritinei a fost raportată de un grup de studii (Jellinger și colab., 1990; Riederer și colab.,
1989), iar acest eveniment ar putea fi un răspuns fiziologic normal în cazul unor niveluri ridicate de fier
(Muckenthaler și colab., 2008), precum cele care apar în PD. În contrast, mai multe studii au raportat niveluri
neschimbate (Mann și colab., 1994) sau o scădere a nivelurilor de feritină SN la pacienții cu PD (Connor și
colab., 1995; Dexter și colab., 1990, 1991). Creșterile fierului și scăderea nivelului de feritină sunt indicative ale
unei încărcări mai mari de fier la feritinele SN ale pacienților cu PD (Griffiths și colab.,
1999). Mai mult, sinteza feritinei scăzută în PD se poate datora activității susținute a proteinei de
reglare a fierului 1 observată în creierul PD post-mortem (Faucheux și colab., 2002).

Nivelurile ridicate de fier detectate la SN la pacienții cu PD ar putea depăși capacitatea de tamponare a

fierului a complexelor, cum ar fi NM și feritine, ducând astfel la neurotoxicitate. Interesant este faptul că
studiile efectuate prin diferite metodologii au raportat că se acumulează mai mult fier în granulele NM
în neuronii pigmentați SN ai pacienților cu PD decât în martori (Good și colab., 1992; Jellinger și colab.,
1992). Acest fier asociat NM este activ redox și a fost cel mai crescut la pacienții cu cea mai severă
pierdere neuronală (Faucheux și colab., 2003). Aceste descoperiri sugerează că o supraîncărcare de fier
redox activ în NM apare în timpul PD, sporind astfel stresul oxidativ și contribuind în mod semnificativ la
degenerarea selectivă a neuronilor care conțin NM din SN.
11. Concluzii
O multitudine de studii au încercat să determine etapele patogene implicate în PD. Cu toate
acestea, o serie importantă de căi neuroprotectoare care servesc la blocarea eficientă a
patogenezei PD sunt frecvent ignorate. În ultimele trei decenii, au existat dovezi din ce în ce
mai mari că nereglementarea DA citosolică și a metalelor reactive, cel mai proeminent fier,
joacă un rol important în patogenie. Dacă da, sinteza NM poate oferi o astfel de cale de
protecție. Mai mult, NM blochează fierul reactiv formând un complex stabil, prevenind apoi
toxicitatea fierului. În condițiile în care acești pași nu mai sunt suficienți sau sunt deranjați,
fierul și NM pot iniția o serie de pași toxici și neuroinflamatori care construiesc un „ciclu
vicios” care susține progresul bolii. Dintre acești pași, activarea neuroinflamării prin fier și
NM ar putea avea o importanță deosebită și este în curs de investigare în multe studii. Un
scenariu optimist sugerat de interacțiunea complexă a acestor pași multipli este că există
mai multe puncte posibile în care progresia bolii poate fi blocată, astfel încât elucidarea
acestor căi promite o serie de direcții clinice viitoare pentru a opri sau modifica boala.
Mulțumiri
FAZ, EF și LZ au fost susținute de Ministerul Educației, Universității și Cercetării din Italia (MIUR) - Programul Național de
Cercetare (PNR) - Proiectul emblematic CNR „InterOmics” (PB.P05), de PNR - Programul de îmbătrânire CNR 2012–
2014 și după Regiunea Lombardia - CNR 2013–2015 Acord-cadru, Proiect MbMM (18089 / RCC). LZ și LC recunosc, de
asemenea, prot. MIUR-Proiecte de cercetare de interes național (PRIN) 2010–2011. 2010M2JARJ. LZ mulțumește, de
asemenea, Fundației Grigioni pentru boala Parkinson, Milano, Italia. JSA, PM și IP au fost sprijinite de FONDECYT
1100165. DS a fost sprijinit de Parkinson's Disease Fundations și JPB Foundations, iar NIH acordă DA07418 și DA10154.
FAZ, EF și LZ mulțumesc, de asemenea, Dr. Maria Carla Panzeri (Advanced Light and Electron Microscopy BioImaging Center)
- Institutul Științific San Raffaele) pentru asistență de specialitate în imagistica spectroscopică de electroni și doamna Chiara Bellei pentru
asistența sa tehnică abilă. Autorii mulțumesc, de asemenea, Secției de Medicină Legală și Asigurări, Departamentul de Științe Biomedice
pentru Sănătate de la Universitatea din Milano pentru furnizarea de probe de țesut cerebral.
Abrevieri
BBB bariera hematoencefalică
DA dopamina
DOPAL Rezonanță paramagnetică a electronului
EPR 3,4-dihidroxifenilacetaldehidă

L-DOPA L-3,4-dihidroxifenilalanină
LC locus coeruleus
MHC-I complex de histocompatibilitate majoră
NM neuromelanină clasa I
PD boala Parkinson
ROS specii reactive de oxigen
RPE pigment retinal epiteliu
SN substantia nigra
Referințe
Abbas N, Lücking CB, Ricard S, Dürr A, Bonifati V, De Michele G, Bouley S, Vaughan JR, Gasser T,
Marconi R, Broussolle E, Brefel-Courbon C, Harhangi BS, Oostra BA, Fabrizio E, Böhme GA, Pradier L,
Wood NW, Filla A, Meco G, Denefle P, Agid Y, Brice A. O mare varietate de mutații în gena parkin este
responsabilă de parkinsonismul autosomal recesiv în Europa. Grupul francez de studiu privind
genetica bolii Parkinson franceze și Consorțiul european pentru sensibilitatea genetică în boala
Parkinson. Zumzet. Mol. Genet. 1999; 8: 567–574. [PubMed: 10072423]
Abbott NJ, Rönnbäck L, Hansson E. Interacțiuni astrocite-endoteliale la bariera hematoencefalică. Nat.
Pr. Neurosci. 2006; 7: 41–53. [PubMed: 16371949]
Abbott NJ, Patabendige AA, Dolman DE, Yusof SR, Begley DJ. Structura și funcția sângelui
bariera creierului. Neurobiol. Dis. 2010; 37: 13-25. [PubMed: 19664713]
Abdel-Malek, Z., Kadekaro, AL. Pigmentarea umană: reglarea sa prin lumină ultravioletă și prin
Factori endocrini, paracrini și autocrini. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King, RA.Oetting,
WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar: fiziologie și fiziopatologie. A doua editie. Malden,
MA, SUA: Blackwell Publishing; 2006. p. 410-420.
Agrup G, Hansson C, Rorsman H, Rosengren E. Efectul cisteinei asupra oxidării tirozinei, dopa,
și cisteinildopa. Arc. Dermatol. Rez. 1982; 272: 103–115. [PubMed: 6819815]
Aguirre P, Urrutia P, Tapia V, Villa M, Paris I, Segura-Aguilar J, Núñez MT. Metabolitul dopaminei
aminocromul inhibă complexul mitocondrial I și modifică expresia transportorilor de fier
DMT1 și FPN1. Biometale. 2012; 25: 795–803. [PubMed: 22302610]
Aime S, Bergamasco B, Biglino D, Digilio G, Fasano M, Giamello E, Lopiano L. EPR anchete
a domeniului fierului în neuromelanină. Biochim. Biofizi. Acta. 1997; 1361: 49–58. [PubMed:
9247089]
Aime S, Bergamasco B, Casu M, Digilio G, Fasano M, Giraudo S, Lopiano L. Izolare și 13C-RMN
Caracterizarea unei fracțiuni proteice insolubile din substanța Nigra a pacienților cu boala
Parkinson. Mișcare. Tulburare. 2000; 15: 977–981. [PubMed: 11009208]
Aisen P, Enns C, Wessling-Resnick M. Chimie și biologie a metabolismului eucariot al fierului. Int. J.
Biochimie. Cell Biol. 2001; 33: 940-959. [PubMed: 11470229]
Anand U, Mukherjee S. Dinamica legării, desfășurării și replierii albuminelor serice. Biochim.
Biofizi. Acta. 2013; 1830: 5394–5404. [PubMed: 23707713]

Andersen HH, Johnsen KB, Moos T. Depozite de fier în sistemul nervos central inflamat cronic
și contribuie la neurodegenerare. Celulă Mol. Life Science. 2014; 71: 1607–1622. [PubMed:
24218010]
Anderson DG, Mariappan SV, Buettner GR, Doorn JA. Oxidarea a 3,4-
dihidroxifenilacetaldehidă, un metabolit dopaminergic toxic, la un radical semiquinonă și o orto-
chinonă. J. Biol. Chem. 2011; 286: 26978–26986. [PubMed: 21642436]
Andrews NC. Controlul molecular al metabolismului fierului. Cele mai bune practici. Rez. Clin. Hematol. 2005; 18: 159–
169. [PubMed: 15737882]

Andrews NC. Forjarea unui câmp: epoca de aur a biologiei fierului. Sânge. 2008; 112: 219–230. [PubMed:
18606887]
Arreguin S, Nelson P, Padway S, Shirazi M, Pierpont C. Dopamine complexe de fier în etiologie

și patogeneza bolii Parkinson. J. Inorg. Biochimie. 2009; 103: 87–93. [PubMed:
18976814]
Arriagada C, Paris I, Sanchez de las Matas MJ, Martinez-Alvarado P, Cardenas S, Castañeda P,
Graumann R, Perez-Pastene C, Olea-Azar C, Couve E, Herrero MT, Caviedes P, Segura-Aguilar J.
Despre mecanismul de neurotoxicitate al radicalului leukoaminocrom o-semiquinonă derivat din
oxidarea dopaminei: deteriorarea mitocondriilor, necroza și radicalul hidroxil formare. Neurobiol.
Dis. 2004; 16: 468–477. [PubMed: 15193303]
Ayton S, Lei P, Duce JA, Wong BX, Sedjahtera A, Adlard PA, Bush AI, Finkelstein DI. Ceruloplasmin
disfuncționalitate și potențial terapeutic pentru boala Parkinson. Ann. Neurol. 2013; 73: 554–559.
[PubMed: 23424051]
Badaracco ME, Siri MV, Pasquini JM. Oligodendrogenesis: rolul fierului. Biofactori. 2010; 36: 98–
102. [PubMed: 20336710]
Baez S, Segura-Aguilar J, Widersten M, Johansson AS, Mannervik B. Glutathione transferases
catalizează detoxicarea metaboliților oxidați (o-chinone) ai catecolaminelor și poate servi ca sistem

antioxidant care previne procesele celulare degenerative. Biochimie. J. 1997; 324: 25–28. [PubMed:
9164836]
Ballard PA, Tetrud JW, Langston JW. Parkinsonism uman permanent datorat 1-metil-4-
fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridină (MPTP): șapte cazuri. Neurologie. 1985; 35: 949-956. [PubMed:
3874373]
Banati RB, Daniel SE, Blunt SB. Patologia glială, dar absența neuronilor nigrali apoptotici în
boala Parkinson în picioare. Mișcare. Tulburare. 1998; 13: 221-227. [PubMed: 9539333]
Beach TG, Sue LI, Walker DG, Lue LF, Connor DJ, Caviness JN, Sabbagh MN, Adler CH. Marcat
reacție microglială în substanța nigra umană care îmbătrânește normal: corelație cu depozitele de pigment
neuromelanină extraneuronale. Acta Neuropathol. 2007; 114: 419–424. [PubMed: 17639428]
Barba J. Deficitul de fier modifică dezvoltarea și funcționarea creierului. J. Nutr. 2003; 133: 1468S – 1472S.
[PubMed: 12730445]
Beard JL, Chen Q, Connor J, Jones BC. Alterarea metabolismului monaminei în caudatul-putamenul de fier
șobolani deficienți. Farmacol. Biochimie. Comportă-te. 1994; 48: 621–624. [PubMed: 7524105]
Ben-Shachar D, Riederer P, YoudimMB. Interacțiunea fier-melanină și peroxidarea lipidelor: implicații

pentru boala Parkinson. J. Neurochem. 1991; 57: 1609–1614. [PubMed: 1919577]
Bianco LE, Wiesinger J, Earley CJ, Jones BC, Beard JL. Deficitul de fier modifică absorbția dopaminei și
răspuns la injecția L-DOPA la șobolani Sprague-Dawley. J. Neurochem. 2008; 106: 205-215.
[PubMed: 18363828]
Bisaglia M, Mammi S, Bubacco L. Analiza cinetică și structurală a produselor de oxidare timpurie a
dopamina: analiza interacțiunilor cu alfa-sinucleina. J. Biol. Chem. 2007; 282: 15597–
15605. [PubMed: 17395592]
Bisaglia M, Soriano ME, Arduini I, Mammi S, Bubacco L. Caracterizarea moleculară a dopaminei
reactivitatea chinonelor derivate față de NADH și glutation: implicații pentru disfuncția
mitocondrială în boala Parkinson. Biochim. Biofizi. Acta. 2010; 1802: 699-706. [PubMed:
20600874]
Bissantz C, Kuhn B, Stahl M. Ghidul unui chimist medicamentos pentru interacțiunile moleculare. J. Med. Chem.
2010; 53: 5061–5084. [PubMed: 20345171]
Bloc ML, Zecca L, Hong JS. Neurotoxicitate mediată de microglia: descoperirea moleculară
mecanisme. Nat. Pr. Neurosci. 2007; 8: 57–69. [PubMed: 17180163]
Bohic S, Murphy K, Paulus W, Cloetens P, Salomé M, Susini J, Double K. Produs chimic intracelular
imagistica fazelor de dezvoltare ale neuromelaninei umane utilizând microspectroscopie cu
raze X sincrotron. Anal. Chem. 2008; 80: 9557–9566. [PubMed: 19007186]
Boissy, RE., Hornyak, TJ. Melanocite extracutanate. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing,
VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar: fiziologie și
fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell Publishing; 2006. p. 91-107.

Bolzoni F, Giraudo S, Lopiano L, Bergamasco B, Fasano M, Crippa PR. Investigații magnetice ale
neuromelanina mezencefalică umană. Biochim. Biofizi. Acta. 2002; 1586: 210–218. [PubMed:
11959462]
Bonifati V, Rizzu P, van Baren MJ, Schaap O, Breedveld GJ, Krieger E, Dekker MC, Squitieri F,
Ibanez P, Joosse M, van Dongen JW, Vanacore N, van Swieten JC, Brice A, Meco G, van Duijn
CM, Oostra BA, Heutink P. Mutații ale genei DJ-1 asociate cu parkinsonismul autosomal recesiv
precoce. Ştiinţă. 2003; 299: 256–259. [PubMed: 12446870]
Borie C, Gasparini F, Verpillat P, Bonnet AM, Agid Y, Hetet G, Brice A, Dürr A, Grandchamp B.
Grupul francez de studiu genetic al bolii Parkinson. Studiu de asociere între polimorfismele
genelor legate de fier și boala Parkinson. J. Neurol. 2002; 249: 801-804. [PubMed: 12140659]
Boulton, ME. Melanina și epiteliul pigmentar al retinei. În: Marmor, MF., Wolfensberger, TJ.,
editori. Epiteliul pigmentar retinian. New York: Oxford University Press; 1998. p. 68-85.
Braak H, Del Tredici K, Rüb U, de Vos RA, Jansen Steur EN, Braak E. Stadializarea patologiei creierului
legat de boala Parkinson sporadică. Neurobiol. Îmbătrânire. 2003; 24: 197–211. [PubMed:
12498954]
Braak H, Ghebremedhin E, Rüb U, Bratzke H, Del Tredici K. Etape în dezvoltarea Parkinson
patologie legată de boală. Rez. 2004; 318: 121–134. [PubMed: 15338272]

Bradbury MW. Transportul fierului în sistemul sânge-creier-lichid cefalorahidian. J. Neurochem. 1997;
69: 443–454. [PubMed: 9231702]
Brenner M, Hearing VJ. Rolul protector al melaninei împotriva deteriorării UV la nivelul pielii umane.
Fotochimic. Fotobiol. 2008; 84: 539–849. [PubMed: 18435612]
Bridelli MG, Tampellini D, Zecca L. Structura neuromelaninei și situl său de legare a fierului studiat de
spectroscopie cu infraroșu. FEBS Lett. 1999; 457: 18–22. [PubMed: 10486555]
Strălucitor, MH. Reglarea moleculară a formării melaninei: proteine de transport melanozom. În:
Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul
pigmentar: fiziologie și fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell
Publishing; 2006. p. 230-241.
Brochard V, Combadière B, Prigent A, Laouar Y, Perrin A, Beray-Berthat V, Bonduelle O, Alvarez-
Fischer D, Callebert J, Launay JM, Duyckaerts C, Flavell RA, Hirsch EC, Hunot S. Infiltrarea
limfocitelor CD4 + în creier contribuie la neurodegenerare într-un model de șoarece al bolii
Parkinson. J. Clin. Investi. 2009; 119: 182–192. [PubMed: 19104149]
Burhans MS, Dailey C, Beard Z, Wiesinger J, Murray-Kolb L, Jones BC, Beard JL. Deficiență de fier:
efecte diferențiale asupra transportorilor de monoamină. Nutr. Neuroști. 2005; 8: 31–38. [PubMed:
15909765]
Bush VJ, Moyer TP, Batts KP, Parisi JE. Concentrațiile elementelor esențiale și toxice în stare proaspătă și
țesuturi de autopsie umană fixate în formalină. Clin. Chem. 1995; 41: 284–294. [PubMed: 7874782]
Bush WD, Garguilo J, Zucca FA, Albertini A, Zecca L, Edwards GS, Nemanich RJ, Simon JD. The
potențialul de oxidare a suprafeței neuromelaninei umane dezvăluie o arhitectură sferică cu un nucleu de
feomelanină și o suprafață eumelanină. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 2006; 103: 4785–4789.
Bush WD, Garguilo J, Zucca FA, Bellei C, Nemanich RJ, Edwards GS, Zecca L, Simon JD.
Neuromelaninele izolate din diferite regiuni ale creierului uman prezintă un prag comun de
fotoionizare la suprafață. Fotochimic. Fotobiol. 2009; 85: 387–890. [PubMed: 19067944]
Burke WJ, Kumar VB, Pandey N, Panneton WM, Gan Q, Franko MW, O'Dell M, Li SW, Pan Y,
Chung HD, Galvin JE. Agregarea alfa-sinucleinei de către DOPAL, metabolitul monoamin
oxidazei dopaminei. Acta Neuropathol. 2008; 115: 193–203. [PubMed: 17965867]
Byers, HR. Prelucrarea melanozomilor în keratinocite. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King,
RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar: fiziologie și fiziopatologie.
A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell Publishing; 2006. p. 181-190.
Carstam R, Brinck C, Hindemith-Augustsson A, Rorsman H, Rosengren E. Neuromelanina din
uman substantia nigra. Biochim. Biofizi. Acta. 1991; 1097: 152–160. [PubMed: 1911888]
Castellani RJ, Siedlak SL, Perry G, Smith MA. Sechestrarea fierului de către corpurile Lewy din Parkinson
boală. Acta Neuropathol. 2000; 100: 111–114. [PubMed: 10963356]

Catalá A. Peroxidarea lipidică a fosfolipidelor de membrană generează hidroxi-alcalini și se oxidează

fosfolipide active în condiții fiziologice și / sau patologice. Chem. Fizic. Lipidele. 2009; 157:
1-11. [PubMed: 18977338]

Caviedes P, Segura-Aguilar J. Prețul dezvoltării în Chile: depășirea pericolelor pentru mediu
produs de exploatarea industrială grea. Neuroreport. 2001; 12: A25.
Cebrián C, Zucca FA, Mauri P, Steinbeck JA, Studer L, Scherzer CR, Kanter E, Budhu S, Mandelbaum
J, Vonsattel JP, Zecca L, Loike JD, Sulzer D. Expresia MHC-I face ca neuronii catecolaminergici să fie
susceptibili la degenerescența mediată de celulele T. Nat. Comun. 2014; 5: 3633. [PubMed: 24736453]
Cheepsunthorn P, Radov L, Menzies S, Reid J, Connor JR. Caracterizarea unui roman derivat din creier
linie celulară microglială izolată de creierul de șobolan neonatal. Glia. 2001; 35: 53–62. [PubMed: 11424192]
Cheng FC, Kuo JS, Chia LG, Dryhurst G. Raport crescut 5-S cisteinildopamină / acid homovanilic și
reducerea acidului homovanilic în lichidul cefalorahidian: markeri posibili și perspective potențiale asupra
patetiologiei bolii Parkinson. J. Transmisie neuronală. 1996; 103: 433-446. [PubMed: 9617787]
Cheng J, Moss SC, Eisner M, Zschack P. Caracterizarea cu raze X a melaninelor - I. Rezerva celulelor pigmentare
1994a; 7: 255–262. [PubMed: 7855074]

Cheng J, Moss SC, Eisner M. Caracterizarea cu raze X a melaninelor - II. Rezerva celulelor pigmentare 1994b; 7: 263–
273. [PubMed: 7855075]
Clancy CM, Nofsinger JB, Hanks RK, Simon JD. O auto-asamblare ierarhică a eumelaninei. J. Phys.
Chem. B. 2000; 104: 7871–7873.
Conde JR, Streit WJ. Microglia în creierul îmbătrânit. J. Neuropatol. Exp. Neurol. 2006; 65: 199–203.
[PubMed: 16651881]
Connor JR, Menzies SL. Managementul celular al fierului în creier. J. Neurol. Știință. 1995; 134 (Supliment):
33-44. [PubMed: 8847543]
Connor JR, Menzies SL, St Martin SM, Mufson EJ. Distribuția celulară a transferinei, feritinei și
fier în creierul uman normal și în vârstă. J. Neurosci. Rez. 1990; 27: 595–611. [PubMed: 2079720]
Crichton, RR. Biochimie anorganică a metabolismului fierului de la mecanisme moleculare la clinice
consecințe. Chichester: John Wiley & Sons; 2009. p. 461461.
Crichton, RR., Ward, RJ. Neurodegenerare pe bază de metale: de la mecanisme moleculare la terapeutice
strategii. Al 2-lea ed. Chichester: John Wiley & Sons; 2014.

Crichton RR, Dexter DT, Ward RJ. Metabolismul fierului cerebral și perturbarea acestuia în bolile neurologice.
J. Transmisie neuronală. 2011; 118: 301-314. [PubMed: 20809066]
Crippa PR, Eisner M, Morante S, Stellato F, Vicentin FC, Zecca L. Un studiu XAS al sulfului
mediul în neuromelanina umană și analogii săi sintetici. Euro. Biofizi. J. 2010; 39: 959–970.
[PubMed: 19471920]
Cuevas C, Huenchuguala S, Muñoz P, Villa M, Paris I, Mannervik B, Segura-Aguilar J. Glutathione
Transferaza-M2-2 secretată de celula glioblastomului protejează celulele SH-SY5Y de neurotoxicitatea
aminocromului. Neurotox. Rez. 2015; 27: 217–228. [PubMed: 25403520]
Dagnino-Subiabre A, Cassels BK, Baez S, Johansson AS, Mannervik B, Segura-Aguilar J. Glutathione
transferaza M2-2 catalizează conjugarea dopaminei și dopa o-chinonelor. Biochimie. Biofizi. Rez.
Comun. 2000; 274: 32–36. [PubMed: 10903891]
Dalle-Donne I, Giustarini D, Colombo R, Rossi R, Milzani A. Carbonilarea proteinelor la om
boli. Tendințe Mol. Med. 2003a; 9: 169–176. [PubMed: 12727143]
Dalle-Donne I, Rossi R, Giustarini D, Milzani A, Colombo R. Grupări carbonil proteice ca biomarkeri
de stres oxidativ. Clin. Chim. Acta. 2003b; 329: 23–38. [PubMed: 12589963]
D'Amato RJ, Lipman ZP, Snyder SH. Selectivitatea neurotoxinei parkinsoniene MPTP: toxică
metabolitul MPP + se leagă de neuromelanină. Ştiinţă. 1986; 231: 987–989. [PubMed: 3080808]
Dexter DT, Wells FR, Agid F, Agid Y, Lees AJ, Jenner P, Marsden CD. Creșterea conținutului de fier nigral în
creierul parkinsonian postmortem. Lancet. 1987; 2: 1219–1220. [PubMed: 2890848]
Dexter DT, Wells FR, Lees AJ, Agid F, Agid Y, Jenner P, Marsden CD. Creșterea conținutului de fier nigral
și modificări ale altor ioni metalici care apar în creier în boala Parkinson. J. Neurochem. 1989; 52:
1830–1830. [PubMed: 2723638]

Dexter DT, Carayon A, Vidailhet M, Ruberg M, Agid F, Agid Y, Lees AJ, Wells FR, Jenner P, Marsden
CD. Scăderea nivelului de feritină în creier în boala Parkinson. J. Neurochem. 1990; 55: 16–20.
[PubMed: 2355217]
Dexter DT, Carayon A, Javoy-Agid F, Agid Y, Wells FR, Daniel SE, Lees AJ, Jenner P, Marsden CD.
Modificări ale nivelului de fier, feritină și alte urme de metale în boala Parkinson și alte boli
neurodegenerative care afectează ganglionii bazali. Creier. 1991; 114: 1953–1975. [PubMed:
1832073]
Dibenedetto D, Rossetti G, Caliandro R, Carloni P. O simulare a dinamicii moleculare bazată pe
interpretarea rezonanței magnetice nucleare spectrele heteronucleare multidimensionale ale α
sinucleină • aducturi dopaminergice. Biochimie. 2013; 52: 6672–6683. [PubMed: 23964651]
Di Donato P, Napolitano A. 1,4-benzotiazine ca intermediari cheie în biosinteza părului roșu
feomelanine pigmentare. Rezerva celulelor pigmentare 2003; 16: 532-539. [PubMed: 12950733]
d'Ischia M, Wakamatsu K, Napolitano A, Briganti S, Garcia-Borron JC, Kovacs D, Meredith P,

Pezzella A, Picardo M, Sarna T, Simon JD, Ito S. Melanins și melanogeneză: metode, standarde,
protocoale. Melanom celular pigmentar Res. 2013; 26: 616–633. [PubMed: 23710556]
d'Ischia M, Napolitano A, Ball V, Chen CT, Buehler MJ. Polidopamină și eumelanină: din
relații structură-proprietate la o strategie unitară de croitorie. Acc. Chem. Rez. 2014; 47: 3541–
3550. [PubMed: 25340503]
Dixon SJ, Lemberg KM, Lamprecht MR, Skouta R, Zaitsev EM, Gleason CE, Patel DN, Bauer AJ,
Cantley AM, Yang WS, Morrison B 3rd, Stockwell BR. Ferroptoza: o formă dependentă de fier a morții
celulelor nonapoptotice. Celula. 2012; 149: 1060-1072. [PubMed: 22632970]
Dlouhy AC, Outten CE. Metalomul de fier din organismele eucariote. Întâlnit. Ioni Life Sci. 2013;
12: 241-278. [PubMed: 23595675]
Double KL, Zecca L, Costi P, Mauer M, Griesinger C, Ito S, Ben-Shachar D, Bringmann G, Fariello
RG, Riederer P, Gerlach M. Caracteristici structurale ale substanței negre umane neuromelanină și
melanine dopaminerice sintetice. J. Neurochem. 2000; 75: 2583–2589. [PubMed: 11080212]
Double KL, Gerlach M, Schünemann V, Trautwein AX, Zecca L, Gallorini M, YoudimMB, Riederer
P, Ben-Shachar D. Caracteristicile de legare a fierului ale neuromelaninei din substanța neagră umană.
Biochimie. Farmacol. 2003; 66: 489–494. [PubMed: 12907248]
Dzierzega-Lecznar A, Kurkiewicz S, Stepien K, Chodurek E, Riederer P, Gerlach M. Structural
investigațiile neuromelaninei prin piroliză-cromatografie gazoasă / spectrometrie de masă. J.
Transmisie neuronală. 2006; 113: 729-734. [PubMed: 16755376]

Earle KM. Studiile asupra bolii Parkinson, inclusiv spectroscopia fluorescentă cu raze X a formalinei fixate
tesutul cerebral. J. Neuropatol. Exp. Neurol. 1968; 27: 1-14. [PubMed: 5656584]
Ebrahimi-Fakhari D, Wahlster L, McLean PJ. Căi de degradare a proteinelor în boala Parkinson:
blestem sau binecuvântare. Acta. Neuropatol. 2012a; 124: 153–172. [PubMed: 22744791]
Ebrahimi-Fakhari D, McLean PJ, Unni VK. Degradarea in vivo a alfa-sinucleinei: deschiderea unei noi
fereastră (craniană) cu privire la rolurile căilor de degradare în boala Parkinson. Autofagie. 2012b; 8:
281-283. [PubMed: 22301995]
Eisenhofer G, Kopin IJ, Goldstein DS. Metabolismul catecolaminelor: o perspectivă contemporană cu
implicații pentru fiziologie și medicină. Farmacol. Rev. 2004; 56: 331–349. [PubMed:
15317907]
el-Agnaf OM, Irvine GB. Agregarea și neurotoxicitatea alfa-sinucleinei și a peptidelor conexe.
Biochimie. Soc. Trans. 2002; 30: 559-565. [PubMed: 12196137]
Engelen M, Vanna R, Bellei C, Zucca FA, Wakamatsu K, Monzani E, Ito S, Casella L, Zecca L.
Neuromelaninele creierului uman au componente solubile și insolubile cu dolicholi atașați la

structura melanică. Plus unu. 2012; 7: e48490. [PubMed: 23139786]
Enochs WS, Nilges MJ, Swartz HM. Neuromelanină umană purificată, dopamină sintetică melanină ca o
pigment model potențial și substanța nigra umană normală: caracterizare prin spectroscopie de
rezonanță paramagnetică a electronilor. J. Neurochem. 1993; 61: 68–79. [PubMed: 8390568]
Esterbauer H, Schaur RJ, Zollner H. Chimie și biochimie a 4-hidroxinonului,
malonaldehidă și aldehide înrudite. Radic liber. Biol. Med. 1991; 11: 81–128. [PubMed:
1937131]

Exley C, Casa E, Polwart A, Esiri MM. Poverile cerebrale de aluminiu, fier și cupru și ale acestora
relații cu amiloid-β patologie în 60 de creiere umane. J. Alzheimers Dis. 2012; 31: 725–730.
[PubMed: 22699848]
Exner N, Lutz AK, Haass C, Winklhofer KF. Disfuncție mitocondrială în boala Parkinson:
mecanisme moleculare și consecințe fiziopatologice. EMBO J. 2012; 31: 3038-3062.
[PubMed: 22735187]
Farrall AJ, Wardlaw JM. Bariera hematoencefalică: îmbătrânire și boli microvasculare - revizuire sistematică și
metaanaliza. Neurobiol. Îmbătrânire. 2009; 30: 337–352. [PubMed: 17869382]
Fasano M, Bergamasco B, Lopiano L. Modificări ale sistemului fier-neuromelanină în Parkinson
boală. J. Neurochem. 2006; 96: 909–916. [PubMed: 16417570]
Faucheux BA, Nillesse N, Damier P, Spik G, Mouatt-Prigent A, Pierce A, Leveugle B, Kubis N, Hauw
JJ, Agid Y și colab. Expresia receptorilor lactoferinei este crescută în mezencefalul pacienților
cu boala Parkinson. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 1995; 92: 9603–9607. [PubMed: 7568181]
Faucheux BA, Bonnet AM, Agid Y, Hirsch EC. Vasele de sânge se modifică în mezencefalul pacienților
cu boala Parkinson. Lancet. 1999; 353: 981–982. [PubMed: 10459912]
Faucheux BA, Martin ME, Beaumont C, Hunot S, Hauw JJ, Agid Y, Hirsch EC. Lipsa reglării în sus
de feritină este asociată cu o activitate de legare susținută a legării proteinei-1 a fierului în substanța
neagră a pacienților cu boala Parkinson. J. Neurochem. 2002; 83: 320–330. [PubMed: 12423242]
Faucheux BA, Martin ME, Beaumont C, Hauw JJ, Agid Y, Hirsch EC. Neuromelanină asociată
fierul redox activ este crescut în substanța neagră a pacienților cu boala Parkinson. J.
Neurochem. 2003; 86: 1142–1148. [PubMed: 12911622]
Fedorow H, Pickford R, Hook JM, Double KL, Halliday GM, Gerlach M, Riederer P, Garner B.
Dolicholul este componenta lipidică majoră a substanței negre umane neuromelanină. J. Neurochem.
2005; 92: 990-995. [PubMed: 15686500]
Felix CC, Hyde JS, Sarna T, Sealy RC. Interacțiunile melaninei cu ionii metalici. Rotire electronică
dovezi de rezonanță pentru complexele chelate de ioni metalici cu radicali liberi. J. Am. Chem. Soc.
1978; 100: 3922–3926.
Ferrari E, Engelen M, Monzani E, Sturini M, Girotto S, Bubacco L, Zecca L, Casella L. Sinteză și
caracterizarea structurală a analogilor solubili ai neuromelaninei oferă indicii importante asupra
biosintezei sale. J. Biol. Inorg. Chem. 2013; 18: 81–93. [PubMed: 23111628]
Flydal MI, Martinez A. Phenylalanine hydroxylase: funcție, structură și reglare. IUBMB Life.
2013; 65: 341–349. [PubMed: 23457044]

Foppoli C, Coccia R, Cini C, Rosei MA. Oxidarea catecolaminelor de către xantin oxidază. Biochim.
Biofizi. Acta. 1997; 1334: 200–206. [PubMed: 9101714]
Fuentes P, Paris I, Nassif M, Caviedes P, Segura-Aguilar J. Inhibarea VMAT-2 și a DT-diaforasei
induce moartea celulară într-o linie celulară derivată din substantia nigra - un model experimental de celule pentru studii de
toxicitate dopaminică. Chem. Rez. Toxicol. 2007; 20: 776-783. [PubMed: 17425337]
Gałazka-Friedman J, Bauminger ER, Friedman A, Barcikowska M, Hechel D, Nowik I. Iron in

parkinsonian și control substantia nigra - un studiu de spectroscopie Mössbauer. Mișcare. Tulburare. 1996; 11:
8-16. [PubMed: 8771061]
Gallas JM, Littrell KC, Seifert S, Zajac GW, Thiyagarajan P. Structura soluției induse de ionul de cupru
agregate moleculare ale tirozinei melanine. Biofizi. J. 1999; 77: 1135–1142. [PubMed:
10423458]
Galzigna L, Schiappelli MP, Rigo A, Scarpa M. O fracție cerebrală de șobolan și diferite peroxidaze purificate
catalizând formarea dopaminocromului din dopamină. Biochim Biophys Acta. 1999;
1427: 329–336. [PubMed: 10350648]

Galzigna L, De Iuliis A, Zanatta L. Peroxidarea enzimatică a dopaminei în substanța neagră a omului
creier. Clin. Chim. Acta. 2000; 300: 131–138. [PubMed: 10958869]
Gao HM, Hong JS. De ce bolile neurodegenerative sunt progresive: inflamația necontrolată determină
progresia bolii. Tendințe Immunol. 2008; 29: 357-365. [PubMed: 18599350]
García-Borrón JC, Solano F. Anatomia moleculară a tirozinazei și a proteinelor sale conexe: dincolo de
centru catalitic metalic legat de histidină. Rezerva celulelor pigmentare 2002; 15: 162–173. [PubMed:
12028580]

Gerlach M, Trautwein AX, Zecca L, YoudimMB, Riederer P. Mössbauer studii spectroscopice ale
neuromelanină umană purificată izolată din substantia nigra. J. Neurochem. 1995; 65: 923–
926. [PubMed: 7616255]

Gibb WR. Melanina, tirozin hidroxilaza, calbindina și substanța P în creierul mediu uman și
substantia nigra în raport cu proiecțiile nigrostriatale și susceptibilitatea neuronală diferențială în
boala Parkinson. Brain Res. 1992; 581: 283–291. [PubMed: 1382801]
Goedert M. Alfa-sinucleină și boli neurodegenerative. Nat. Pr. Neurosci. 2001; 2: 492-501.
[PubMed: 11433374]
Goldstein DS, Sullivan P, Holmes C, Miller GW, Alter S, Strong R, Mash DC, Kopin IJ, Sharabi Y.
Determinanți ai acumulării metabolitului toxic dopaminic DOPAL în boala Parkinson. J.
Neurochem. 2013; 126: 591-603. [PubMed: 23786406]
Goldstein DS, Kopin IJ, Sharabi Y. Catotolamină autotoxicitate. Implicații pentru farmacologie și
terapeutica bolii Parkinson si tulburarile conexe. Farmacol. Ther. 2014; 144: 268-282.
[PubMed: 24945828]
Bun PF, Olanow CW, Perl DP. Se acumulează neuroni ai substanței negre care conțin neuromelanină
fier și aluminiu în boala Parkinson: un studiu LAMMA. Brain Res. 1992; 593: 343-346.
[PubMed: 1450944]
Greco G, Panzella L, Gentile G, Errico ME, Carfagna C, Napolitano A, d'Ischia M. A inspirat de melanină
sistem pro-oxidant pentru polimerizarea dopa (a mea): imitarea procesului natural de carcasă.
Chem. Comun. (Camb). 2011; 47: 10308-10310. [PubMed: 21858305]
Greenwald J, Riek R. Biologia amiloidului: structură, funcție și reglare. Structura. 2010;
18: 1244–1260. [PubMed: 20947013]
Griffiths PD, Dobson BR, Jones GR, Clarke DT. Fier în ganglionii bazali în boala Parkinson. Un in
studiu in vitro folosind o structură fină de absorbție cu raze X extinsă și microscopie crio-electronică.
Creier. 1999; 122: 667-673. [PubMed: 10219780]
Guerreiro RJ, Bras JM, Santana I, Januario C, Santiago B, Morgadinho AS, Ribeiro MH, Hardy J,
Singleton A, Oliveira C. Asociația mutațiilor comune HFE cu boala Parkinson, boala
Alzheimer și afectarea cognitivă ușoară într-o cohortă portugheză. BMC Neurol. 2006; 6:24.
[PubMed: 16824219]
Hallgren B, Sourander P. Efectul vârstei asupra fierului non-haemin din creierul uman. J. Neurochem.
1958; 3: 41–51. [PubMed: 13611557]
Halprin KM. „Timpul de rulare” epidermic - o reexaminare. Fr. J. Dermatol. 1972; 86: 14-19.
[PubMed: 4551262]
Hare DJ, Gerlach M, Riederer P. Considerații pentru măsurarea fierului în țesutul post-mortem al
Pacienți cu boala Parkinson. J. Transmisie neuronală. 2012; 119: 1515–1521. [PubMed: 22972672]
Hashimoto M, Hsu LJ, Xia Y, Takeda A, Sisk A, Sundsmo M, Masliah E. Stresul oxidativ induce
formarea de agregate asemănătoare amiloidului de NACP / alfa-sinucleină in vitro. Neuroreport. 1999; 10: 717–
721. [PubMed: 10208537]
Hastings TG. Oxidarea enzimatică a dopaminei: rolul prostaglandinei H sintază. J. Neurochem.
1995; 64: 919-924. [PubMed: 7830086]
Hattori N, Sato S. Modele animale ale bolii Parkinson: asemănări și diferențe între
boală și modele. Neuropatologie. 2007; 27: 479–483. [PubMed: 18018484]
Hattori N, Kitada T, Matsumine H, Asakawa S, Yamamura Y, Yoshino H, Kobayashi T, Yokochi M,
Wang M, Yoritaka A, Kondo T, Kuzuhara S, Nakamura S, Shimizu N, Mizuno Y. Analiza genetică
moleculară a unei noi gene Parkin în familiile japoneze cu parkinsonism juvenil recesiv
autozomal: dovezi pentru deleții homozigote variabile în gena Parkin la indivizii afectați . Ann.
Neurol. 1998; 44: 935–941. [PubMed: 9851438]
DN Hauser, Hastings TG. Disfuncția mitocondrială și stresul oxidativ în boala Parkinson și
parkinsonism monogen. Neurobiol. Dis. 2013; 51: 35–42. [PubMed: 23064436]
DN Hauser, Dukes AA, Mortimer AD, Hastings TG. Dopamina chinonă modifică și scade
abundența selenoproteinei mitocondriale glutation peroxidază 4. Radic liber. Biol. Med.
2013; 65: 419–427. [PubMed: 23816523]
Hawkes CH, Del Tredici K, Braak H. O cronologie pentru boala Parkinson. Parkinsonism Relat. Tulburare.
2010; 16: 79–84. [PubMed: 19846332]

Audierea, VJ. Reglementarea formării melaninei. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King,

Hebbrecht G, Maenhaut W, De Reuck J. Oligoelemente cerebrale și îmbătrânire. Nucl. Instrum. Metode Phys.
Rez. B. 1999; 150: 208–213.
Hentze MW, Muckenthaler MU, Galy B, Camaschella C. Două la tango: reglarea fierului de mamifere
metabolism. Celula. 2010; 142: 24–38. [PubMed: 20603012]
Hirsch E, Graybiel AM, Agid YA. Neuronii dopaminergici melanizați sunt diferiți de susceptibili
degenerescență în boala Parkinson. Natură. 1988; 334: 345-348. [PubMed: 2899295]
Hochstrasser H, Bauer P, Walter U, Behnke S, Spiegel J, Csoti I, Zeiler B, Bornemann A, Pahnke J,
Becker G, Riess O, Berg D. Variații ale genei ceruloplasminei și hiperecogenitatea substantia nigra
în boala Parkinson. Neurologie. 2004; 63: 1912–1917. [PubMed: 15557511]
Casa E, Collingwood J, Khan A, Korchazkina O, Berthon G, Exley C. Aluminiu, fier, zinc și
cuprul influențează formarea in vitro a fibrilelor amiloide ale Abeta42 într-un mod care poate avea
consecințe pentru terapia de chelare a metalelor în boala Alzheimer. J. Alzheimer. Dis. 2004; 6:
291-301. [PubMed: 15201484]
Casa E, Esiri M, Forster G, Ince PG, Exley C. Aluminiu, fier și cupru în țesuturile creierului uman
donat pentru studiul funcției cognitive și al îmbătrânirii Consiliului de cercetare medicală. Metalomică.
2012; 4: 56–65. [PubMed: 22045115]
Huenchuguala S, Muñoz P, Zavala P, Villa M, Cuevas C, Ahumada U, Graumann R, Nore BF, Couve
E, Mannervik B, Paris I, Segura-Aguilar J. Glutathione transferase mu 2 protejează celulele
glioblastomului împotriva toxicității aminocromului prin prevenirea disfuncției autofagiei și lizozomilor.
Autofagie. 2014; 10: 618–630. [PubMed: 24434817]
Ikemoto K, Nagatsu I, Ito S, King RA, Nishimura A, Nagatsu T. Există tirozinază în
neuroni pigmentați de neuromelanină în substanța neagră umană? Neuroști. Lett. 1998; 253: 198–
200. [PubMed: 9792245]
Inoue K, Ito S, Kimura E, Nabeshima M, Takayama M, Ishii T. Analiza chimică a melaninei în
Urechea interioară a cobaiului. Urechea Res. Japonia. 1984; 16: 68–71.
Ito S. Incapsularea unui nucleu reactiv în neuromelanină. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 2006;
103: 14647–14648. [PubMed: 17005730]
Ito, S., Wakamatsu, K. Chimia melaninelor. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King,

Ito S, Wakamatsu K. Chimia melanogenezei mixte - roluri esențiale ale dopaquinonei. Fotochimic.
Fotobiol. 2008; 84: 582-592. [PubMed: 18435614]
Ito S, Pilat A, Gerwat W, Skumatz CM, Ito M, Kiyono A, Zadlo A, Nakanishi Y, Kolbe L, Burke JM,
Sarna T, Wakamatsu K. Foto-îmbătrânirea epiteliului pigmentar al retinei umane este însoțită de
modificări oxidative ale eumelaninei sale. Melanom celular pigmentar Res. 2013; 26: 357–366.
[PubMed: 23421783]
Jellinger K, Paulus W, Grundke-Iqbal I, Riederer P, YoudimMB. Fierul cerebral și feritina în Parkinson
și bolile Alzheimer. J. Transmisie neuronală. Parc. Dis. Dement. Sectă. 1990; 2: 327-340.
[PubMed: 2078310]
Jellinger K, Kienzl E, Rumpelmair G, Riederer P, Stachelberger H, Ben-Shachar D, YoudimMB. Fier-
complex de melanină în substanța neagră a creierului parkinsonian: o microanaliză cu raze X.
J. Neurochem. 1992; 59: 1168–1171. [PubMed: 1494904]
Jimbow, K., Quevedo, WC., Fitzpatrick, TB., Szabo, G. Biology of Melanocytes. În: Freeberg,
IA.Eisen, AZ.Wolf, K.Austen, KF.Goldsimth, LA.Katz, SI., Fitzpatrick, TB., Editori. Fiotzpatrick's
Dermatology in General Medicine. Ediția a 5-a. New York: McGraw Hill; 1999. p. 192-220.
Jimenez M, Garcia-Carmona F, Garcia-Canovas F, Iborra JL, Lozano JA, Martinez F. Chemical

intermediari în oxidarea dopaminei prin tirozinază și studii cinetice ale procesului. Arc.
Biochimie. Biofizi. 1984; 235: 438-448. [PubMed: 6097187]
Kachergus J, Mata IF, Hulihan M, Taylor JP, Lincoln S, Aasly J, Gibson JM, Ross OA, Lynch T, Wiley
J, Payami H, Nutt J, Maraganore DM, Czyzewski K, Styczynska M, Wszolek ZK, Farrer MJ,

Toft M. Identificarea unei noi mutații LRRK2 legată de parkinsonismul autosomal dominant: dovezi
ale unui fondator comun în rândul populațiilor europene. A.m. J. Hum. Genet. 2005; 76: 672–
680. [PubMed: 15726496]

Kaczara P, Zaręba M, Herrnreiter A, Skumatz CM, Ządło A, Sarna T, Burke JM. Melanosom-fier
interacțiuni în interiorul celulelor derivate din epiteliu pigmentare retiniană. Melanom celular pigmentar Res.
2012; 25: 804–814. [PubMed: 22883111]
Kakhlon O, Cabantchik ZI. Bazinul de fier labil: caracterizare, măsurare și participare la

procese celulare (1). Radic liber. Biol. Med. 2002; 33: 1037-1046. [PubMed: 12374615]
Kalia LV, Kalia SK, McLean PJ, Lozano AM, Lang AE. α-Oligomeri de sinucleină și clinici
implicații pentru boala Parkinson. Ann. Neurol. 2013; 73: 155–169. [PubMed: 23225525]
Karlsson O, Lindquist NG. Afinitatea cu melanină și rolul său posibil în neurodegenerare. J. Neural
Transm. 2013; 120: 1623–1630. [PubMed: 23821370]
Kastner A, Hirsch EC, Lejeune O, Javoy-Agid F, Rascol O, Agid Y. Este vulnerabilitatea neuronilor în
substanța neagră a pacienților cu boala Parkinson legată de conținutul lor de neuromelanină? J.
Ke Y, Qian ZM. Metabolismul creierului: neurobiologie și neurochimie. Prog. Neurobiol. 2007;
83: 149–173. [PubMed: 17870230]

Kolberg M, Strand KR, Graff P, Andersson KK. Structura, funcția și mecanismul ribonucleotidei
reductaze. Biochim. Biofizi. Acta. 2004; 1699: 1–34. [PubMed: 15158709]
Kollias N, Sayre RM, Zeise L, Chedekel MR. Fotoprotecție prin melanină. J. Photochem. Fotobiol. B.
1991; 9: 135–160. [PubMed: 1907647]
Kortekaas R, Leenders KL, van Oostrom JC, Vaalburg W, Bart J, Willemsen AT, Hendrikse NH.
Disfuncție a barierei hematoencefalice la nivelul creierului central parkinsonian in vivo. Ann. Neurol. 2005; 57: 176–
179. [PubMed: 15668963]
Korytowski W, Sarna T, Zareba M. Acțiunea antioxidantă a neuromelaninei: mecanismul inhibitor
efect asupra peroxidării lipidelor. Arc. Biochimie. Biofizi. 1995; 319: 142–148. [PubMed: 7771778]
Kropf AJ, Bunker BA, Eisner M, Moss SC, Zecca L, Stroppolo A, Crippa PR. Absorbție cu raze X
studii de spectroscopie a structurii siturilor de Fe în neuromelanina umană naturală și analogi
sintetici. Biofizi. J. 1998; 75: 3135–3142. [PubMed: 9826634]
Bazin de fier Kruszewski M. Labile: principalul determinant al răspunsului celular la stresul oxidativ. Mutat.
Rez. 2003; 531: 81–92. [PubMed: 14637247]

Kwok JB. Rolul epigeneticii în boala Alzheimer și Parkinson. Epigenomica. 2010; 2 671-282.
Langston JW, Forno LS, Tetrud J, Reeves AG, Kaplan JA, Karluk D. Dovezi ale celulei nervoase active
degenerescența în substanța neagră a oamenilor la ani după expunerea la 1-metil-4-
fenil-1,2,3,6 tetrahidropiridină. Ann. Neurol. 1999; 46: 598-605. [PubMed: 10514096]
LaVoie MJ, Ostaszewski BL, Weihofen A, Schlossmacher MG, Selkoe DJ. Dopamina covalent
modifică și inactivează funcțional parkin. Nat. Med. 2005; 11: 1214–1221. [PubMed:
16227987]
Lhermitte J, Kraus WM, McAlpine D. Lucrări originale: PRIVIND APARIȚIA ANORMALĂ
DEPOZITE DE FIER ÎN CREIER ÎN PARKINSONISM CU REFERINȚĂ SPECIALĂ LA
LOCALIZAREA SĂ. J. Neurol. Psihopatol. 1924; 5: 195–208. [PubMed: 21611545]
Li WJ, Jiang H, Song N, Xie JX. Agregarea alfa-sinucleinei dependentă de doză și de timp indusă de
fier feric în celulele SK-N-SH. Neuroști. Taur. 2010; 26: 205–210. [PubMed: 20502498]
Liang CL, Nelson O, Yazdani U, Pasbakhsh P, German DC. Relația inversă între conținut
a pigmentului neuromelanin și a transportorului de monoamină vezicular-2: neuroni umani dopamină din creierul
mediu. J. Comp. Neurol. 2004; 473: 97–106. [PubMed: 15067721]
Lindquist NG, Larsson BS, Lydén-Sokolowski A. Autoradiografia [14C] paraquat sau [14C] diquat în
broaște și șoareci: acumulare în neuromelanină. Neuroști. Lett. 1988; 93: 1-6. [PubMed:
3264893]
Linert W, Herlinger E, Jameson RF, Kienzl E, Jellinger K, YoudimMB. Dopamina, 6-
hidroxidopamină, fier și dioxigen - interacțiunile lor reciproce și posibile implicații în
dezvoltarea bolii Parkinson. Biochim. Biofizi. Acta. 1996; 1316: 160–168. [PubMed:
8781534]

Liu Y, Edwards RH. Rolul proteinelor de transport vezicular în transmiterea sinaptică și neuronală
degenerare. Annu. Pr. Neurosci. 1997; 20: 125–156. [PubMed: 9056710]
Liu Y, Simon JD. Efectul procedurilor de preparare asupra morfologiei melaninei din sacul de cerneală
de Sepia officinalis. Rezerva celulelor pigmentare 2003; 16: 72–80. [PubMed: 12519128]
Liu Y, Simon JD. Interacțiunile metal-ion și organizarea structurală a eumelaninei Sepia. Pigment
Rez. Celulare 2005; 18: 42–48. [PubMed: 15649151]
Liu Y, Hong L, Kempf VR, Wakamatsu K, Ito S, Simon JD. Schimbul de ioni și adsorbția Fe (III) prin
Melanină sepia. Rezerva celulelor pigmentare 2004; 17: 262–269. [PubMed: 15140071]
Liu Y, Hong L, Wakamatsu K, Ito S, Adhyaru B, Cheng CY, Bowers CR, Simon JD. In comparatie cu
proprietățile structurale și chimice ale melanozomilor părului negru și roșu. Fotochimic.
Fotobiol. 2005; 81: 135–144. [PubMed: 15504086]
Lopes KO, Sparks DL, Streit WJ. Distrofia microglială la vârstnici și creierul bolii Alzheimer este
asociată cu imunoreactivitatea feritinei. Glia. 2008; 56: 1048-1060. [PubMed: 18442088]
Lopiano L, Chiesa M, Digilio G, Giraudo S, Bergamasco B, Torre E, Fasano M. Q-band EPR
investigațiile neuromelaninei la pacienții de control și cu boala Parkinson. Biochim. Biofizi. Acta.
2000; 1500: 306–312. [PubMed: 10699372]
Lozano J, Muñoz P, Nore BF, Ledoux S, Segura-Aguilar J. Expresie stabilă a ARN-ului cu interferență scurtă
pentru DT-diaforaza induce neurotoxicitate. Chem. Rez. Toxicol. 2010; 23: 1492–1496. [PubMed:
20849151]
OS Makin, Serpell LC. Structuri pentru fibrilele amiloide. FEBS J. 2005; 272: 5950-5961. [PubMed:
16302960]
Manini P, Panzella L, Napolitano A, d'Ischia M. Chimia oxidării norepinefrinei: partiționarea
O-chinona dintre ciclizarea concurentă și căile de defalcare a lanțului și rolurile lor în
formarea melaninei. Chem. Rez. Toxicol. 2007; 20: 1549–1555. [PubMed: 17892264]
Mann DM, Yates PO. Posibil rol al neuromelaninei în patogeneza bolii Parkinson. Mech.
Îmbătrânire Dev. 1983; 21: 193–203. [PubMed: 6865505]
Mann VM, Cooper JM, Daniel SE, Srai K, Jenner P, Marsden CD, Schapira AH. Complexul I, fier și
feritina în boala Parkinson substantia nigra. Ann. Neurol. 1994; 36: 876-881. [PubMed:
7998774]
CD Marsden. Neuromelanina și boala Parkinson. J. Neural. Transm. Supl. 1983; 19: 121–141.
[PubMed: 6321645]
Martinez-Vicente M, Vila M. Alfa-sinucleină și căi de degradare a proteinelor în Parkinson
boală: o buclă de reacție patologică. Exp. Neurol. 2013; 247: 308-313. [PubMed: 23499831]
Martinez-Vicente M, Talloczy Z, Kaushik S, Massey AC, Mazzulli J, Mosharov EV, Hodara R,
Fredenburg R, Wu DC, Follenzi A, Dauer W, Przedborski S, Ischiropoulos H, Lansbury PT, Sulzer D,
Cuervo AM. Alfa-sinucleina modificată prin dopamină blochează autofagia mediată de chaperonă. J.
Clin. Investi. 2008; 118: 777–788. [PubMed: 18172548]
Mastroberardino PG, Hoffman EK, Horowitz MP, Betarbet R, Taylor G, Cheng D, Na HM, Gutekunst
CA, Gearing M, Trojanowski JQ, Anderson M, Chu CT, Peng J, Greenamyre JT. Un nou sistem de
transport al fierului mitocondrial mediat de transferină / TfR2 este perturbat în boala Parkinson.
Neurobiol. Dis. 2009; 34: 417–431. [PubMed: 19250966]
Mattammal MB, Strong R, Lakshmi VM, Chung HD, Stephenson AH. Prostaglandina H sintetaza-
metabolismul mediat al dopaminei: implicație pentru boala Parkinson. J. Neurochem. 1995; 64:
1645–1654. [PubMed: 7891092]
McGeer PL, Itagaki S, Boyes BE, McGeer EG. Microglia reactivă este pozitivă pentru HLA-DR în
substantia nigra a creierului bolii Parkinson și Alzheimer. Neurologie. 1988; 38: 1285–1291.
[PubMed: 3399080]
McGinness JE. Golurile de mobilitate: un mecanism pentru golurile benzilor din melanine. Ştiinţă. 1972; 177: 896–897.
[PubMed: 5054646]
McGinness J, Corry P, Proctor P. Semiconductori amorfi comutați în melanine. Ştiinţă. 1974;
183: 853–855. [PubMed: 4359339]
Melis JP, van Steeg H, Luijten M. Deteriorarea ADN-ului oxidativ și repararea exciziei de nucleotide. Antioxidant.
Semnal Redox. 2013; 18: 2409–2419. [PubMed: 23216312]

Mercado G, Valdés P, Hetz C. O viziune ERcentrică a bolii Parkinson. Tendințe. Mol. Med. 2013;
19: 165–175. [PubMed: 23352769]
Meredith P, Sarna T. Proprietățile fizice și chimice ale eumelaninei. Rezerva celulelor pigmentare 2006;
19: 572-594. [PubMed: 17083485]
Meyer zum Gottesberge AM. Fiziologia și fiziopatologia melaninei urechii interne. Rezerva celulelor pigmentare
1988; 1: 238–249. [PubMed: 3070525]
Mills E, Dong XP, Wang F, Xu H. Mecanisme de transport al fierului în creier: perspectivă asupra neurodegenerării
și tulburări ale SNC. Viitorul Med. Chem. 2010; 2: 51–64. [PubMed: 20161623]
Moos T, Rosengren Nielsen T, Skjørringe T, Morgan EH. Traficul de fier în interiorul creierului. J.
Morris CM, Edwardson JA. Histochimia fierului substanței negre în boala Parkinson.
Neurodegenerare. 1994; 3: 277-282. [PubMed: 7842298]
Mostert AB, Powell BJ, Pratt FL, Hanson GR, Sarna T, Gentle IR, Meredith P. Rolul
semiconductivitatea și transportul ionilor în conducerea electrică a melaninei. Proc. Natl. Acad. Știință.
SUA 2012; 109: 8943–8947. [PubMed: 22615355]
Muckenthaler MU, Galy B, Hentze MW. Homeostazia sistemică a fierului și elementul care răspunde la fier /
rețea de reglare a proteinelor de reglare a fierului (IRE / IRP). Annu. Pr. Nutr. 2008; 28: 197–213.
[PubMed: 18489257]
Mullin S, Schapira A. α-Sinucleină și disfuncție mitocondrială în boala Parkinson. Mol.
Neurobiol. 2013; 47: 587–597. [PubMed: 23361255]
Muñoz M, Villar I, García-Erce JA. O actualizare asupra fiziologiei fierului. Lumea J. Gastroenterol. 2009;
15: 4617–4626. [PubMed: 19787824]
Muñoz P, Huenchuguala S, Paris I, Segura-Aguilar J. Oxidarea dopaminei și autofagia. Parkinson
Dis. 2012a; 2012: 920953. [PubMed: 22966478]
Muñoz P, Paris I, Sanders LH, Greenamyre JT, Segura-Aguilar J. Supraexprimarea VMAT-2 și DT-
diaforaza protejează celulele derivate din substanța neagră împotriva neurotoxicității aminocromului.
Biochim. Biofizi. Acta. 2012b; 1822: 1125–1136. [PubMed: 22483869]
Muñoz P, Cardenas S, Huenchuguala S, Briceño A, Couve E, Paris I, Segura-Aguilar J. DT Diaphorase
previne formarea și neurotoxicitatea oligomerilor alfa-sinucleinici induși de aminocrom. Toxicol. Știință.
2015; 145: 37–47. [PubMed: 25634539]
Napolitano A, De Lucia M, Panzella L, d'Ischia M. Cromoforul "benzotiazinei" din

feomelanine: o reevaluare. Fotochimic. Fotobiol. 2008; 84: 593–599. [PubMed: 18435615]
Napolitano A, Manini P, d'Ischia M. Chimia oxidării catecolaminelor și neuronale
degenerare: o actualizare. Curr. Med. Chem. 2011; 18: 1832–1845. [PubMed: 21466469]
Norris EH, Giasson BI, Hodara R, Xu S, Trojanowski JQ, Ischiropoulos H, Lee VM. Reversibil
inhibarea fibrilizării alfa-sinucleinei prin alterări conformaționale mediate de
dopaminocrom. J. Biol. Chem. 2005; 280: 21212–21219. [PubMed: 15817478]
Oberländer U, Pletinckx K, Döhler A, Müller N, Lutz MB, Arzberger T, Riederer P, Gerlach M,
Koutsilieri E, Scheller C. Neuromelanina este un stimulator imunitar pentru celulele dendritice in
vitro. BMC Neurosci. 2011; 12: 116. [PubMed: 22085464]
Olivieri S, Conti A, Iannaccone S, Cannistraci CV, Campanella A, Barbariga M, Codazzi F, Pelizzoni
I, Magnani G, Pesca M, Franciotta D, Cappa SF, Alessio M. Oxidarea ceruloplasminei, o caracteristică a
LCR a bolii Parkinson, inhibă activitatea feroxidazei și promovează retenția celulară a fierului. J. Neurosci.
2011; 31: 18568–18577. [PubMed: 22171055]
Ortega R, Cloetens P, Devès G, Carmona A, Bohic S. Depozitarea fierului în neurovezicele dopaminei
dezvăluită de nano-imagistica chimică. Plus unu. 2007; 2: e925. [PubMed: 17895967]

Ostergren A, Annas A, Skog K, Lindquist NG, Brittebo EB. Retenția pe termen lung a beta-neurotoxicului
carboline din neuromelanina creierului. J. Transmisie neuronală. 2004; 111: 141–157. [PubMed: 14767717]
Ott M, Gogvadze V, Orrenius S, Zhivotovsky B. Mitocondriile, stresul oxidativ și moartea celulară.

Apoptoza. 2007; 12: 913–922. [PubMed: 17453160]
Pakkenberg B, Møller A, Gundersen HJ, Mouritzen Dam A, Pakkenberg H. Numărul absolut de
celulele nervoase din substanța neagră la subiecții normali și la pacienții cu boala Parkinson estimată cu o
metodă stereologică imparțială. J. Neurol. Neurochirurgie. Psihiatrie. 1991; 54: 30–
33. [PubMed: 2010756]

Paris I, Dagnino-Subiabre A, Marcelain K, Bennett LB, Caviedes P, Caviedes R, Azar CO, Segura-
Aguilar J. Neurotoxicitatea cuprului este dependentă de absorbția cuprului mediată de dopamină și
de reducerea cu unelectron a aminocromului într-o linie celulară neuronală de șobolan. J.

Neurochem. 2001; 77: 519-529. [PubMed: 11299314]
Paris I, Martinez-Alvarado P, Cárdenas S, Perez-Pastene C, Graumann R, Fuentes P, Olea-Azar C,
Caviedes P, Segura-Aguilar J. Toxicitatea fierului dependentă de dopamină în celulele derivate din
hipotalamusul de șobolan. Chem. Rez. Toxicol. 2005a; 18: 415–419. [PubMed: 15777081]
Paris I, Martinez-Alvarado P, Perez-Pastene C, Vieira MN, Olea-Azar C, Raisman-Vozari R, Cardenas

S, Graumann R, Caviedes P, Segura-Aguilar J. Inhibitorii transportorului de monoamină și
norepinefrina reduc toxicitatea fierului dependent de dopamină în celulele derivate din substanța
neagră. J. Neurochem. 2005b; 92: 1021-1032. [PubMed: 15715653]
Paris I, Perez-Pastene C, Cardenas S, Iturriaga-Vasquez P, Muñoz P, Couve E, Caviedes P, Segura-
Aguilar J. Aminochrome induce întreruperea rețelelor de citoschelet de actină, alfa și beta-tubulină
în linia celulară derivată din substanța-nigra. Neurotox. Rez. 2010; 18: 82-92. [PubMed: 20087799]
Paris I, Muñoz P, Huenchuguala S, Couve E, Sanders LH, Greenamyre JT, Caviedes P, Segura-Aguilar
J. Autofagia protejează împotriva morții celulare induse de aminocrom în linia celulară derivată din substantia
nigra. Toxicol. Știință. 2011; 121: 376–388. [PubMed: 21427056]
Parc RM. Deficite neurocomportamentale și parkinsonism în ocupațiile cu expunere la mangan: a

revizuirea problemelor metodologice în literatura epidemiologică. Saf. Munca în sănătate. 2013; 4:
123–135. [PubMed: 24106642]
Peles DN, Hong L, Hu DN, Ito S, Nemanich RJ, Simon JD. Melanosomi de stroma iridală umană de
conținutul diferit de feomelanină posedă o suprafață exterioară eumelanică comună. J. Phys. Chem.
B. 2009; 113: 11346–11351. [PubMed: 19618947]
Perluigi M, Coccia R, Butterfield DA. 4-Hidroxi-2-nonenal, un produs reactiv al peroxidării lipidelor,
și boli neurodegenerative: o combinație toxică iluminată de studii proteomice redox.
Antioxidant. Semnal Redox. 2012; 17: 1590–1609. [PubMed: 22114878]
Pezzati R, Bossi M, Podini P, Meldolesi J, Grohovaz F. Cartografierea calciului de înaltă rezoluție a
reticul endoplasmatic-sistem Golgi-membrană exocitară. Analiza imagistică a pierderilor de energie electronică a
celulelor PC12 uscate prin congelare rapidă. Mol. Biol. Celula. 1997; 8: 1501–1512. [PubMed: 9285821]
Pilas B, Sarna T, Kalyanaraman B, Swartz HM. Efectul melaninei asupra fierului este asociat
descompunerea peroxidului de hidrogen. Radic liber. Biol. Med. 1988; 4: 285–293. [PubMed:
2834276]
Polymeropoulos MH, Lavedan C, Leroy E, Ide SE, Dehejia A, Dutra A, Pike B, Root H, Rubenstein J,
Boyer R, Stenroos ES, Chandrasekharappa, S ,, Athanassiadou A, Papapetropoulos T,
Johnson WG, Lazzarini AM, Duvoisin RC, Di Iorio G, Golbe LI, Nussbaum RL. Mutația genei
alfasinucleinei identificată la familiile cu boala Parkinson. Ştiinţă. 1997; 276: 2045–2047.
[PubMed: 9197268]
Prota G. Melanine, melanogeneză și melanocite: analizând semnificația lor funcțională din
punctul de vedere al chimistului. Rezerva celulelor pigmentare 2000; 13: 283–293. [PubMed: 10952398]
Prota G, Hu DN, Vincensi MR, McCormick SA, Napolitano A. Caracterizarea melaninelor la om

iride și melanocite uveale cultivate din ochi de diferite culori. Exp. Ochi Res. 1998; 67: 293–
299. [PubMed: 9778410]
Quevedo, WC., Jr, Holstein, TJ. Biologia generală a pigmentării mamiferelor. În: Nordlund,
JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul
pigmentar: fiziologie și fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell

Publishing; 2006. p. 63-90.
Ramirez A, Heimbach A, Gründemann J, Stiller B, Hampshire D, Cid LP, Goebel I, Mubaidin AF,
Wriekat AL, Roeper J, Al-Din A, Hillmer AM, Karsak M, Liss B, Woods CG, Behrens MI, Kubisch
C. Parkinsonismul ereditar cu demență este cauzat de mutații în ATP13A2, care codifică o
ATPază de tip P lizozomală 5. Nat. Genet. 2006; 38: 1184–1191. [PubMed: 16964263]

Ramos P, Santos A, Pinto NR, Mendes R, Magalhães T, Almeida A. Nivelurile de fier în creierul uman: o
studiu post-mortem al diferențelor de regiune anatomică și al modificărilor legate de vârstă. J. Trace. Elem.
Med. Biol. 2014; 28: 13-17. [PubMed: 24075790]
Rathore KI, Redensek A, David S. Homeostazia fierului în astrocite și microglie este diferențiată
reglementat de TNF-α și TGF-β1. Glia. 2012; 60: 738–750. [PubMed: 22298416]
Orez ME. Reglarea ascorbatului și rolul său neuroprotector în creier. Tendințe Neuroști. 2000;
23: 209–216. [PubMed: 10782126]
Riederer P, Sofic E, Rausch WD, Schmidt B, Reynolds GP, Jellinger K, YoudimMB. Tranziție
metale, feritină, glutation și acid ascorbic în creierul parkinsonian. J. Neurochem. 1989; 52:
515–520. [PubMed: 2911028]
Rohn TT. Direcționarea alfa-sinucleinei pentru tratamentul bolii Parkinson. SNC Neurol. Tulburare.
Ținte de droguri. 2012; 11: 174–179. [PubMed: 22483285]
Romeo S, Viaggi C, Di Camillo D, Willis AW, Lozzi L, Rocchi C, Capannolo M, Aloisi G, Vaglini F,
Maccarone R, Caleo M, Missale C, Racette BA, Corsini GU, Maggio R. Expunerea la lumină puternică
reduce neuronii dopaminei TH-pozitivi: implicații ale poluării luminoase în epidemiologia bolii
Parkinson. Știință. Rep. 2013; 3: 1395. [PubMed: 23462874]
Rosengren E, Linder-Eliasson E, Carlsson A. Detectarea 5-S-cisteinildopaminei în creierul uman. J.

Neural. Transm. 1985; 63: 247–253. [PubMed: 3840838]
Rouault TA. Biogeneza clusterelor de fier-sulf în celulele de mamifere: noi perspective și relevanță pentru
boala umană. Dis. Model Mech. 2012; 5: 155–164. [PubMed: 22382365]
Rouault TA. Metabolismul fierului în SNC: implicații pentru bolile neurodegenerative. Nat. Rev.
Neuroști. 2013; 14: 551-564. [PubMed: 23820773]
Rouault TA, Cooperman S. Metabolismul fierului cerebral. Semin. Pediatru. Neurol. 2006; 13: 142–148.
[PubMed: 17101452]
Rouault TA, Zhang DL, Jeong SY. Homeostazia fierului cerebral, plexul coroidian și localizarea fierului
transport proteine. Metab. Creier Dis. 2009; 24: 673-684. [PubMed: 19851851]
Rózanowska M, Sarna T, Land EJ, Truscott TG. Proprietăți de eliminare a radicalilor liberi ai melaninei
interacțiunea modelelor eu- și feo-melanină cu radicalii reducători și oxidanți. Radic liber. Biol.
Med. 1999; 26: 518-525. [PubMed: 10218640]
Salazar J, Mena N, Hunot S, Prigent A, Alvarez-Fischer D, Arredondo M, Duyckaerts C, Sazdovitch
V, Zhao L, Garrick LM, Nuñez MT, Garrick MD, Raisman-Vozari R, Hirsch EC. Transportorul de metal
divalent 1 (DMT1) contribuie la neurodegenerare la modelele animale ale bolii Parkinson. Proc.
Natl. Acad. Știință. SUA 2008; 105: 18578–18583. [PubMed: 19011085]
Salazar M, Sokoloski TD, Patil PN. Legarea medicamentelor dopaminergice de către neuromelanina
substantia nigra, melanine sintetice și granule de melanină. Fed Proc. 1978; 37: 2403-2407.
[PubMed: 354974]
Salonen LM, Ellermann M, Diederich F. Inele aromatice în recunoașterea chimică și biologică:
energetică și structuri. Angew. Chem. Int. Ed. Engleză. 2011; 50: 4808-4842. [PubMed:
21538733]
Sarna T. Proprietățile și funcția melaninei oculare - o vedere fotobiofizică. J. Photochem.
Fotobiol. B. 1992; 12: 215–258. [PubMed: 1635010]
Sarna, T., Swartz, HM. Proprietățile fizice ale melaninelor. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing,
VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar: fiziologie și
fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell Publishing; 2006. p. 311-341.
Sarna T, Hyde JS, Swartz HM. Schimbul de ioni în melanină: un studiu de rezonanță a spinului de electroni cu
sonde lantanide. Ştiinţă. 1976; 192: 1132–1134. [PubMed: 179142]

Sarna T, Menon IA, Sealy RC. Fotosensibilizarea melaninelor: un studiu comparativ. Fotochimic.
Fotobiol. 1985; 42: 529-532. [PubMed: 4089035]
Sarna T, Burke JM, Korytowski W, Rózanowska M, Skumatz CM, Zareba A, Zareba M. Pierderea
melanina din RPE umană cu îmbătrânire: posibil rol al fotooxidării melaninei. Exp. Ochi. Rez.
2003; 76: 89–98. [PubMed: 12589778]
Schubert D, Chevion M. Rolul fierului în toxicitatea beta-amiloidului. Biochimie. Biofizi. Rez. Comun.
1995; 216: 702-707. [PubMed: 7488167]

Schultzberg M, Segura-Aguilar J, Lind C. Distribuția diaforasei DT în creierul șobolanului: biochimică

și studii imunohistochimice. Neuroștiințe. 1988; 27: 763–776. [PubMed: 2908055]
Scott, GA. Traficul și transferul melanozomilor. În: Nordlund, JJ.Boissy, RE.Hearing, VJ.King,
Segura-Aguilar J. Activitatea peroxidază a ficatului microsomal vitamina D 25-hidroxilază și citocrom
P450 1A2 catalizează 25-hidroxilarea vitaminei D3 și oxidarea dopaminei în aminocrom.
Biochimie. Mol. Med. 1996; 58: 122–129. [PubMed: 8809353]
Segura-Aguilar J, Lind C. Despre mecanismul neurotoxicității induse de Mn3 (+) a
dopamina: prevenirea toxicității oxigenului derivat din chinonă de către diaforaza DT și superoxidul
dismutaza. Chem. Biol. Interacționa. 1989; 72: 309-324. [PubMed: 2557982]
Segura-Aguilar J, Baez S, Widersten M, Welch CJ, Mannervik B. Clasa umană Mu glutation
transferazele, în special izoenzima M2-2, catalizează detoxicarea metabolitului dopaminei
aminocrom. J. Biol. Chem. 1997; 272: 5727-5731. [PubMed: 9038184]
Segura-Aguilar J, Metodiewa D, Welch CJ. Activarea metabolică a dopaminelor o-chinone la o-
semiquinonele de citocromul P450 reductazei NADPH pot juca un rol important în stresul
oxidativ și efectele apoptotice. Biochim. Biofizi. Acta. 1998; 1381: 1–6. [PubMed: 9659366]
Segura-Aguilar J, Paris I, Muñoz P, Ferrari E, Zecca L, Zucca FA. Roluri de protecție și toxice ale
dopamina în boala Parkinson. J. Neurochem. 2014; 129: 898–915. [PubMed: 24548101]
Shen XM, Xia B, Wrona MZ, Dryhurst G. Sinteză, proprietăți redox, formare in vivo și
efectele neurocomportamentale ale conjugaților N-acetilcisteinil ai dopaminei: posibili metaboliți
relevanți pentru boala Parkinson. Chem. Rez. Toxicol. 1996; 9: 1117-1126. [PubMed: 8902266]
Shima T, Sarna T, Swartz HM, Stroppolo A, Gerbasi R, Zecca L. Legarea fierului la neuromelanina de
substanța neagră umană și melanina sintetică: un studiu de spectroscopie de rezonanță paramagnetică
electronică. Radic liber. Biol. Med. 1997; 23: 110–119. [PubMed: 9165303]
Sian-Hülsmann J, Mandel S, YoudimMB, Riederer P. Relevanța fierului în patogeneza
Boala Parkinson. J. Neurochem. 2011; 118: 939-957. [PubMed: 21138437]
Silvestri L, Camaschella C. Un potențial rol patogenetic al fierului în boala Alzheimer. J. Cell. Mol.
Med. 2008; 12: 1548–1550. [PubMed: 18466351]
Simon JD, Peles DN. Roșu și negru. Acc. Chem. Rez. 2010; 43: 1452–1460. [PubMed:
20734991]
Simon JD, Hong L, Peles DN. Prezentări despre melanozomi și melanină din unele spațiale interesante
și proprietăți temporale. J. Phys. Chem. B. 2008; 112: 13201–13217. [PubMed: 18817437]
Siraki AG, Smythies J, O'Brien PJ. Eliminarea radicalilor superoxizi și atenuarea hipoxiei-
leziuni de reoxigenare de către neurotransmițător complexe ferice în hepatocite izolate de șobolan. Neuroști.
Lett. 2000; 296: 37–40. [PubMed: 11099828]
Sofic E, Riederer P, Heinsen H, Beckmann H, Reynolds GP, Hebenstreit G, YoudimMB. A crescut

fier (III) și conținutul total de fier în substanța nigra post mortem a creierului parkinsonian. J. Transmisie
neuronală. 1988; 74: 199–205. [PubMed: 3210014]
Solano, F., Garcia-Borron, JC. Enzimologia formării melaninei. În: Nordlund, JJ Boissy,
RE.Hearing, VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar:
fiziologie și fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell Publishing;
2006. p. 230-241.
Solomon EI, Heppner DE, Johnston EM, Ginsbach JW, Cirera J, QayyumM, Kieber-Emmons MT,
Kjaergaard CH, Hadt RG, Tian L. Copper Active Sites in Biology. Chem. Rev. 2014; 114: 3659–
3853. [PubMed: 24588098]

Sulzer D, Zecca L. Sinteza intraneuronală de dopamină-chinonă: o revizuire. Neurotox. Rez. 2000; 1: 181–
195. [PubMed: 12835101]
Sulzer D, DJ Surmeier. Vulnerabilitate neuronală, patogenie și boala Parkinson. Mișcare. Tulburare.
2013; 28: 715–724. [PubMed: 23589357]
Sulzer D, Bogulavsky J, Larsen KE, Behr G, Karatekin E, Kleinman MH, Turro N, Krantz D, Edwards
RH, Greene LA, Zecca L. Biosinteza neuromelaninei este condusă de catecolamine citosolice în exces
care nu sunt acumulate de vezicule sinaptice. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 2000; 97: 11869–11874.
[PubMed: 11050221]

Sulzer D, Mosharov E, Talloczy Z, Zucca FA, Simon JD, Zecca L. Autofagic pigmentat neuronal
vacuole: lipofuscina, neuromelanina și ceroidul ca răspuns macroautofagic în timpul îmbătrânirii și al
bolii. J. Neurochem. 2008; 106: 24–36. [PubMed: 18384642]

Surmeier DJ, Sulzer D. Foaia de parcurs a patologiei în boala Parkinson. Prion. 2013; 7: 85-91. [PubMed:
23324593]
Takeda, K., Shibahara, S. Reglementarea transcripțională a funcției melanocite. În: Nordlund, JJ Boissy,
RE.Hearing, VJ.King, RA.Oetting, WS., Ortonne, JP., Editori. Sistemul pigmentar:
fiziologie și fiziopatologie. A doua editie. Malden, MA, SUA: Blackwell Publishing;
2006. p. 242-260.
Taly AB, Meenakshi-Sundaram S, Sinha S, Swamy HS, Arunodaya GR. Boala Wilson: descrierea
282 de pacienți evaluați pe parcursul a 3 decenii. Medicină (Baltimore). 2007; 86: 112–121. [PubMed:
17435591]
Tamarit J, Gerez C, Meier C, Mulliez E, Trautwein A, Fontecave M. Componenta activatoare a

ribonucleotidă reductază anaerobă de la Escherichia coli. Un centru fier-sulf cu doar trei
cisteine. J. Biol. Chem. 2000; 275: 15669–15675. [PubMed: 10821845]
Taylor JM, BS principal, Crack PJ. Neuroinflamarea și stresul oxidativ: co-conspiratori în
patologia bolii Parkinson. Neurochem. Int. 2013; 62: 803–819. [PubMed: 23291248]
Terland O, Flatmark T, Tangerås A, Grønberg M. Oxidarea dopaminei generează un stres oxidativ
mediată de dopamină semiquinonă și fără legătură cu speciile reactive de oxigen. J. Mol. Cardiol
celular. 1997; 29: 1731–1738. [PubMed: 9220358]
Theil, EC., Le Brun, NE. Transportul și depozitarea Fe legate de oameni, agenți patogeni și oxigen. În:
Reedijk, J. Poeppelmeier, J., Elsevier, K., editori. Chimie anorganică cuprinzătoare II. Vol. 3.
2013. str. 21-33.
Thompson CM, Capdevila JH, Strobel HW. Citocromul recombinant P450 2D18 metabolismul
dopamina și acidul arahidonic. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2000; 294: 1120–1130. [PubMed:
10945868]
Tiekink, ERT., Zukerman-Schpector, J., editori. Importanța interacțiunilor Pi în cristal
Inginerie: Frontiere în ingineria cristalelor. John Wiley & Sons; 2012.
Todorich B, Pasquini JM, Garcia CI, Paez PM, Connor JR. Oligodendrocite și mielinizare: rolul
de fier. Glia. 2009; 57: 467–478. [PubMed: 18837051]
Tomter AB, Zoppellaro G, Andersen NH, Hersleth HP, Hammerstad M, Røhr AK, Sandvik GK, Strand
KR, Nilsson GE, Bell CB III, Barra AL, Blasco E, Le Pape L, Solomon EI, Andersson KK.
Ribonucleotid reductaza clasa I cu diferite grupări generatoare de radicali. Recenzii chimice
de coordonare. 2013; 257: 3–26.
Tribl F, Arzberger T, Riederer P, Gerlach M. Tirozinaza nu este detectată în catecolaminergice umane
neuronii prin imunohistochimie și analiza Western blot. J. Transmisie neuronală. Supl. 2007; 72:
51–55. [PubMed: 17982878]
Trinh J, Farrer M. Progrese în genetica bolii Parkinson. Nat. Pr. Neurol. 2013; 9: 445–454.
[PubMed: 23857047]
Tse DC, McCreery RL, Adams RN. Căile oxidative potențiale ale ncatecolaminelor cerebrale. J. Med.
Chem. 1976; 19: 37–40. [PubMed: 1246050]
Turnbull S, Tabner BJ, El-Agnaf OM, Moore S, Davies Y, Allsop D. alfa-Synuclein implicat în
Boala Parkinson catalizează formarea peroxidului de hidrogen in vitro. Radic liber. Biol. Med. 2001;
30: 1163–1170. [PubMed: 11369507]
Urrutia P, Aguirre P, Esparza A, Tapia V, Mena NP, Arredondo M, González-Billault C, Núñez MT.
Inflamația modifică expresia DMT1, FPN1 și hepcidin și provoacă acumularea de fier în

celulele sistemului nervos central. J. Neurochem. 2013; 126: 541-549. [PubMed: 23506423]
Uversky VN, Li J, Fink AL. Transformări structurale declanșate de metal, agregare și fibrilație a
alfa-sinucleina umana. Un posibil NK molecular între boala Parkinson și expunerea la metale
grele. J. Biol. Chem. 2001; 276: 44284–44296. [PubMed: 11553618]
Valente EM, Abou-Sleiman PM, Caputo V, Muqit MM, Harvey K, Gispert S, Ali Z, Del Turco D,
Bentivoglio AR, Healy DG, Albanese A, Nussbaum R, González-Maldonado R, Deller T, Salvi
S, Cortelli P, Gilks WP, Latchman DS, Harvey RJ, Dallapiccola B, Auburger G, Wood NW.

Boala Parkinson ereditară cu debut precoce cauzată de mutații în PINK1. Ştiinţă. 2004; 304:
1158–1160. [PubMed: 15087508]
Van Laar VS, Mishizen AJ, Cascio M, Hastings TG. Identificarea proteomică a dopaminei conjugate
proteine din mitocondriile izolate ale creierului șobolanului și celulele SH-SY5Y. Neurobiol. Dis. 2009; 34: 487–
500. [PubMed: 19332121]
Viceconte N, Burguillos MA, Herrera AJ, De Pablos RM, Joseph B, Venero JL. Neuromelanină
activează microglia proinflamatorie printr-un mecanism dependent de caspază-8. J
Neuroinflamatie. 2015; 12: 5. [PubMed: 25586882]
Volles MJ, Lansbury PT Jr. Permeabilizarea veziculelor prin alfa-sinucleina protofibrilară este sensibilă la
Mutația legată de boala Parkinson și apare printr-un mecanism asemănător porilor. Biochimie. 2002; 41:
4595–4602. [PubMed: 11926821]
Wakamatsu K, Ito S. Metode chimice avansate în determinarea melaninei. Rezerva celulelor pigmentare 2002;
15: 174–183. [PubMed: 12028581]
Wakamatsu K, Fujikawa K, Zucca FA, Zecca L, Ito S. Structura neuromelaninei așa cum a fost studiată de
metode chimice degradative. J. Neurochem. 2003; 86: 1015-1023. [PubMed: 12887698]
Wakamatsu K, Hu DN, McCormick SA, Ito S. Caracterizarea melaninei la omul iridal și
melanocite coroidale din ochi cu diverse iride colorate. Melanom celular pigmentar Res. 2008; 21:
97–105. [PubMed: 18353148]
Wakamatsu K, Murase T, Zucca FA, Zecca L, Ito S. Calea biosintetică către neuromelanină și
procesul de îmbătrânire. Melanom celular pigmentar Res. 2012; 25: 792-803. [PubMed: 22938712]
Wakamatsu K, Tanaka H, Tabuchi K, Ojika M, Zucca FA, Zecca L, Ito S. Reducerea grupului nitro
la amină de acid hidroiodic pentru a sintetiza derivați de o-aminofenol ca markeri degradativi
putativi ai neuromelaninei. Molecule. 2014; 19: 8039–8050. [PubMed: 24936706]
Ward RJ, Zucca FA, Duyn JH, Crichton RR, Zecca L. Rolul fierului în îmbătrânirea creierului și
tulburări neurodegenerative. Lancet Neurol. 2014; 13: 1045–1060. [PubMed: 25231526]
WC WC, Guan Z, Zucca FA, Fariello RG, Kordestani R, Zecca L, Raetz CR, Simon JD.
Identificarea și cuantificarea dolicholului și acidului dolicoic în neuromelanina din substanța
neagră a creierului uman. J. Lipid Res. 2007; 48: 1457–1462. [PubMed: 17446624]
Westlund KN, Denney RM, Kochersperger LM, Rose RM, Abell CW. Monoaminoxidază A distinctă
și populațiile B din creierul primatelor. Ştiinţă. 1985; 230: 181–183. [PubMed: 3875898]
Whitehead RE, Ferrer JV, Javitch JA, Justice JB. Reacția dopaminei oxidate cu endogenă
reziduuri de cisteină în transportorul de dopamină uman. J. Neurochem. 2001; 76: 1242–1251.

[PubMed: 11181843]
Wielgus AR, Sarna T. Melanina în irizi umane de diferite culori și vârstă a donatorilor. Rezerva celulelor pigmentare
2005; 18: 454–464. [PubMed: 16280011]
Williams A. Parkinsonismul MPTP. Fr. Med. J (Clin. Res. Ed). 1984; 289: 1401-1402.
Williams R, Buchheit CL, Berman NE, LeVine SM. Implicații patogene ale acumulării de fier în
scleroză multiplă. J. Neurochem. 2012; 120: 7-25. [PubMed: 22004421]
Wilms H, Rosenstiel P, Sievers J, Deuschl G, Zecca L, Lucius R. Activarea microgliei de către om
neuromelanina este dependentă de NF-kappaB și implică proteina kinază activată cu mitogen p38:
implicații pentru boala Parkinson. FASEB J. 2003; 17: 500-502. [PubMed: 12631585]
Windahl MS, Petersen CR, Christensen HE, Harris P. Structura cristalină a triptofan hidroxilazei cu
substrat de aminoacizi legat. Biochimie. 2008; 47: 12087–12094. [PubMed: 18937498]
Wolters, ECh, Braak, boala H. Parkinson: corelații clinico-patologice premotoare. J. Neural.
Transm. Supl. 2006; 70: 309-319. [PubMed: 17017546]
Wypijewska A, Galazka-Friedman J, Bauminger ER, Wszolek ZK, Schweitzer KJ, Dickson DW,
Jaklewicz A, Elbaum D, Friedman A. Activitatea speciilor de fier și oxigen reactiv în substanța nigra
parkinsoniană. Parkinsonism Relat. Tulburare. 2010; 16: 329–333. [PubMed: 20219408]
Xiong R, Siegel D, Ross D. Modificări de manipulare a proteinelor induse de chinonă: implicații pentru proteine majore
sisteme de manipulare în toxicitate mediată de chinone. Toxicol. Aplic. Farmacol. 2014; 280: 285–295.
[PubMed: 25151970]
Xu J, Jia Z, Knutson MD, Leeuwenburgh C. Afectarea stării de fier în cercetările privind îmbătrânirea. Int. J. Mol. Știință.
2012; 13: 2368–2386. [PubMed: 22408459]

Xu Y, Stokes AH, Roskoski R Jr, Vrana KE. Dopamina, în prezența tirosinazei, covalent
modifică și inactivează tirozin hidroxilaza. J. Neurosci. Rez. 1998; 54: 691–697. [PubMed:
9843160]
Yamamoto A, Shin RW, Hasegawa K, Naiki H, Sato H, Yoshimasu F, Kitamoto T. Iron (III) induce
agregarea tau hiperfosforilat și reducerea acestuia la fier (II) inversează agregarea:
implicații în formarea de încurcături neurofibrilare ale bolii Alzheimer. J. Neurochem.
2002; 82: 1137–1147. [PubMed: 12358761]
Ye T, Simon JD, Sarna T. Transfer de energie ultrarapid de la tetra legat (4-N, N, N, N-
trimetilaniliniu) porfirină la melanine dopa sintetice și cisteinildopa. Fotochimic.
Fotobiol. 2003; 77: 1–4. [PubMed: 12856874]
YoudimMB, Ben-Shachar D, Yehuda S. Mecanisme biologice putative ale efectului fierului
deficiență în biochimia și comportamentul creierului. A.m. J. Clin. Nutr. 1989; 50: 607–615. discuție 615–
617. [PubMed: 2773840]
YoudimMB, Edmondson D, Tipton KF. Potențialul terapeutic al inhibitorilor monoaminooxidazei.
Nat. Pr. Neurosci. 2006; 7: 295–309. [PubMed: 16552415]
Zadlo A, Rozanowska MB, Burke JM, Sarna TJ. Fotoblanșarea epiteliului pigmentar retinian
melanozomii își reduc capacitatea de a inhiba peroxidarea lipidelor indusă de fier. Rezerva celulelor
pigmentare 2007; 20: 52–60. [PubMed: 17250548]
Zadlo A, Burke JM, Sarna T. Efectul melanozomilor din RPE bovină netratată și fotobleached asupra
peroxidarea fotoindusă a lipidelor. Fotochimic. Fotobiol. Știință. 2009; 8: 830–837. [PubMed:
19492111]
Zafar KS, Siegel D, Ross D. Un rol potențial pentru chinonele ciclizate derivate din dopamină, DOPA,
și acid 3,4-dihidroxifenilacetic în inhibiție proteazomală. Mol. Farmacol. 2006; 70: 1079–
1086. [PubMed: 16790533]
Zajac GW, Gallas JM, Cheng J, Eisner M, Moss SC, Alvarado-Swaisgood AE. Unitatea fundamentală
de melanină sintetică: o verificare prin microscopie prin tunel a rezultatelor împrăștierii cu raze X. Biochim.
Biofizi. Acta. 1994; 1199: 271-278. [PubMed: 8161565]
Zareba M, Bober A, Korytowski W, Zecca L, Sarna T. Efectul unei neuromelanine sintetice asupra randamentului
de radicali hidroxil liberi generați în sisteme model. Biochim. Biofizi. Acta. 1995; 1271: 343–
348. [PubMed: 7605801]
Zareba M, Skumatz CM, Sarna TJ, Burke JM. Vătămarea fotică a RPE cultivat variază în funcție de individ
celule proporțional cu conținutul lor de lipofuscină endogenă modulat de conținutul lor de

melanosom. Investi. Oftalmol. Vis. Știință. 2014; 55: 4982–4990. [PubMed: 25034597]
Zecca L, Swartz HM. Metale totale și paramagnetice în substanța neagră umană și neuromelanina acesteia.
J. Transmisie neuronală. Parc. Dis. Dement. Sectă. 1993; 5: 203–213. [PubMed: 8396395]
Zecca L, Mecacci C, Seraglia R, Parati E. Caracterizarea chimică a melaninei conținută în
substantia nigra a creierului uman. Biochim. Biofizi. Acta. 1992; 1138: 6-10. [PubMed: 1737070]
Zecca L, Pietra R, Goj C, Mecacci C, Radice D, Sabbioni E. Fier și alte metale în neuromelanină,
substantia nigra și putamenul creierului uman. J. Neurochem. 1994; 62: 1097-1101. [PubMed:
8113797]
Zecca L, Shima T, Stroppolo A, Goj C, Battiston GA, Gerbasi R, Sarna T, Swartz HM. Interacțiunea dintre
neuromelanina și fierul în substanța neagră și în alte zone ale creierului uman. Neuroștiințe. 1996; 73:
407–415. [PubMed: 8783258]
Zecca L, Costi P, Mecacci C, Ito S, Terreni M, Sonnino S. Interaction of human substantia nigra
neuromelanina cu lipide și peptide. J. Neurochem. 2000; 74: 1758-1765. [PubMed:
10737635]
Zecca L, Gallorini M, Schünemann V, Trautwein AX, Gerlach M, Riederer P, Vezzoni P, Tampellini D.
Conținutul de fier, neuromelanină și feritină în substanța neagră a subiecților normali la diferite
vârste: consecințe pentru depozitarea fierului și procesele neurodegenerative. J. Neurochem. 2001a;
76: 1766–1773. [PubMed: 11259494]
Zecca L, Tampellini D, Costi P, Rizzio E, Giaveri G, Gallorini M. Separare biochimică combinată
și INAA pentru determinarea fierului și a altor metale în neuromelanina creierului uman
Substantia Nigra. J. Radioanal. Nucl. Chem. 2001b; 249: 449-454.

Zecca L, Tampellini D, Rizzio E, Giaveri G, Gallorini M. Determinarea fierului și a altor metale

de INAA în Cortex, Cerebel și Putamen din creierul uman și în neuromelaninele lor. J.
Radioanal. Nucl. Chem. 2001c; 248: 129–131.

Zecca L, Fariello R, Riederer P, Sulzer D, Gatti A, Tampellini D. Concentrația absolută de nigral
neuromelanina, testată printr-o nouă metodă sensibilă, crește pe tot parcursul vieții
și scade dramatic în boala Parkinson. FEBS Lett. 2002; 510: 216–220. [PubMed:
11801257]
Zecca L, Zucca FA, Wilms H, Sulzer D. Neuromelanina substantiei negre: o gaură neagră neuronală
cu caracteristici de protecție și toxice. Tendințe Neuroști. 2003; 26: 578–580. [PubMed:
14585596]
Zecca L, YoudimMB, Riederer P, Connor JR, Crichton RR. Fierul, îmbătrânirea creierului și neurodegenerativ
tulburări. Nat. Pr. Neurosci. 2004a; 5: 863–873. [PubMed: 15496864]
Zecca L, Stroppolo A, Gatti A, Tampellini D, Toscani M, Gallorini M, Giaveri G, Arosio P,
Santambrogio P, Fariello RG, Karatekin E, Kleinman MH, Turro N, Hornykiewicz O, Zucca FA. Rolul
moleculelor de fier și cupru în vulnerabilitatea neuronală a locus coeruleus și substantia nigra în
timpul îmbătrânirii. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 2004b; 101: 9843–9848. [PubMed: 15210960]
Zecca L, Casella L, Albertini A, Bellei C, Zucca FA, Engelen M, Zadlo A, Szewczyk G, Zareba M,
Sarna T. Neuromelanina poate proteja împotriva daunelor oxidative mediate de fier în modelarea sistemului de
supraîncărcare de fier a îmbătrânirii creierului și a bolii Parkinson. J. Neurochem. 2008a; 106: 1866–1875.
[PubMed: 18624918]
Zecca L, Bellei C, Costi P, Albertini A, Monzani E, Casella L, Gallorini M, Bergamaschi L, Moscatelli

A, Turro NJ, Eisner M, Crippa PR, Ito S, Wakamatsu K, Bush WD, Ward WC, Simon JD, Zucca FA. Noi
pigmenți melanici din creierul uman care se acumulează în timpul îmbătrânirii și blochează metalele
toxice pentru mediu. Proc. Natl. Acad. Știință. SUA 2008b; 105: 17567–17572. [PubMed: 18988735]
Zecca L, Wilms H, Geick S, Claasen JH, Brandenburg LO, Holzknecht C, Panizza ML, Zucca FA,
Deuschl G, Sievers J, Lucius R. Neuromelanina umană induce neuroinflamarea și
neurodegenerarea la substanța neagră a șobolanului: implicații pentru boala Parkinson.
Acta Neuropathol. 2008c; 116: 47–55. [PubMed: 18343932]
Zhang W, Phillips K, Wielgus AR, Liu J, Albertini A, Zucca FA, Faust R, Qian SY, Miller DS,
Chignell CF, Wilson B, Jackson-Lewis V, Przedborski S, Joset D, Loike J, Hong JS, Sulzer D,
Zecca L. Neuromelanin activează microglia și induce degenerarea neuronilor

dopaminergici: implicații pentru progresia bolii Parkinson. Neurotox. Rez. 2011; 19: 63-72.
[PubMed: 19957214]
Zhang W, Zecca L, Wilson B, Ren HW, Wang YJ, Wang XM, Hong JS. Neuromelanina umană: an
activator microglial endogen pentru moartea neuronului dopaminergic. Față. Biosci. (Elite Ed). 2013; 5:
1-11. [PubMed: 23276965]
Zhou ZD, Lim TM. Dopamina (DA) a indus o inhibare ireversibilă a proteazomului prin intermediul derivatului DA
chinone. Radic liber. Rez. 2009; 43: 417–430. [PubMed: 19291591]
Zhou ZD, Lan YH, Tan EK, Lim TM. Oxidarea dopaminei mediată de specii de fier, proteazom
inhibarea și dispariția celulelor dopaminergice: implicații pentru degenerarea neuronilor
dopaminergici legați de fier. Radic liber. Biol. Med. 2010; 49: 1856–1871. [PubMed: 20854902]
Zucca FA, Bellei C, Giannelli S, Terreni MR, Gallorini M, Rizzio E, Pezzoli G, Albertini A, Zecca L.
Neuromelanina și fierul în locusul coeruleus uman și substanța neagră în timpul îmbătrânirii: consecințe
pentru vulnerabilitatea neuronală. J. Transmisie neuronală. 2006; 113: 757-767. [PubMed: 16755380]
Zucca, FA., Cupaioli, FA., Zecca, L. Rolul fierului în neurodegenerare. În: Milardi, D., Rizzarelli,
E., editori. Neurodegenerare: metalostază și proteostază. Cambridge: Editura RSC;
2011. p. 174-211.
Zucca FA, Basso E, Cupaioli FA, Ferrari E, Sulzer D, Casella L, Zecca L. Neuromelanin of the human
substantia nigra: an update. Neurotox. Rez. 2014; 25: 13–23. [PubMed: 24155156]

Repere
• În această revizuire sunt discutate interacțiunile / modulațiile multidirecționale

dintre fier, oxidarea dopaminei, neuromelanina și rolul lor în creier.
• Fiecare dintre aceste componente este discutată în detalii înainte de a descrie

interacțiunile dintre ele.
• Este prezentată relația dintre oxidarea fierului și a dopaminei cu consecințe

asupra celulelor.
• O prezentare generală a sintezei și proprietăților melaninelor periferice este dată.
• Sinteza neuromelaninei, structura și interacțiunea cu fierul sunt revizuite, luând în

considerare căile lor de protecție / toxice în neuroni.
•
Se apreciază rolul fierului și al neuromelaninei și posibilele efecte dăunătoare ale acestora
asupra îmbătrânirii creierului și a bolii Parkinson.


Fig. 1. Neurotoxicitatea complexului fier-DA

DA formează complex cu fier feric (Fe3+) care este preluat în celulă de transportatorii DA.
Complexul fier-DA suferă o reacție redox în care fierul feric este redus la fierul fier (Fe2+) iar DA se
oxidează în aminocrom. Apoi aminocromul se poate polimeriza la NM prin intermediul
5,6indolequinonei care oferă neuroprotecție sau poate fi redus cu doi electroni de DT-diaforază la
leukoaminocrom, prevenind reacțiile neurotoxice induse de aminocrom precum: i)α-
agregarea sinucleinei la oligomeri neurotoxici; ii) disfuncție de degradare a proteinelor; iii)
disfuncție a mitocondriilor; iv) stresul oxidativ cauzat de reducerea cu un singur electron a
aminocromului la leukoaminocrom-o-radical semiquinonic catalizat de flavoenzime (Fp).
Leukoaminocrom-o-radicalul semiquinonă se poate autooxida la aminocrom prin reducere

dioxigen (O2) la anion radical radical superoxid (O • - 2): apoi dismutarea a doi superoxizi
radicalii regenerează O2 și produce peroxid de hidrogen (H2O2), care în prezența fierului feros
formează radicalul hidroxil (•OH) prin reacția lui Fenton, ducând la stres oxidativ ridicat.

Fig. 2. Oxidarea DA la o-chinone

DA se oxidează în DA-o-chinonă care poate forma aducturi cu parkin, rezultând inactivarea
sistemului proteazomal. DA-o-chinona poate forma aducti și cu complexele mitocondriale I,
III și V inducând disfuncții mitocondriale. DA-o-chinona poate suferi o ciclizare
intramoleculară până la aminocrom, care poate: i) inactiva proteazomul; ii) inactivează
complexul mitocondriilor I inducând disfuncții mitocondriale; iii) să fie un electron redus de
flavoenzime la leukoaminocrom-o-radical semiquinonă, care se auto-oxidează imediat în
aminocrom generând stres oxidativ; iv) inactivează pompa de protoni vacuolară ATPază a
lizozomilor inducând disfuncție lizozomală; v) induc agregareaα- și
β-tubulina prevenind formarea microtubulilor necesari pentru fuziunea vacuolelor
autofagice cu lizozomii, generând astfel disfuncții autofagice; vi) induceα-agregarea
sinucleinei la oligomeri neurotoxici. Reacțiile neurotoxice ale aminocromului pot fi prevenite

prin polimerizarea aminocromului la NM (prin rearanjare la 5,6-dihidroxindol și apoi la 5,6-
indolequinonă) sau la reducerea cu doi electroni, catalizată de DT-diaforază, a
aminocromului la leukoaminocrom, care probabil poate suferă rearanjarea la
5,6dihidroxiindol, precursorul 5,6-indolequinonei, care poate fi implicat și în sinteza NM.

Fig. 3. Mecanisme posibile pentru sinteza pigmentului NM și pentru formarea de organite

care conțin NM
Excesul de DA prezent în citosol poate fi oxidat la DA-o-chinonă prin fier feric într-o reacție
catalitică. În formarea pigmentului NM, DA-o-chinona poate suferi trei căi diferite: i)
ciclizare, oxidare suplimentară și polimerizare pentru a da eumelanină;
ii) reacție cu L-cisteină sau glutation pentru a da compuși cisteinil-DA apoi oxidați la feomelanină;
și iii) conjugarea cu reziduuri de proteine pentru a da aducti de proteină DA. Ultimele două
reacții par a fi mai rapide și conduc la formarea unui nucleu proteină-feomelanină, care este apoi
acoperit de eumelanină, conform modelului mixt de melanogeneză. Fierul (III) este încorporat în
porțiunea melanică a pigmentului NM de formare. Pigmentul nedegradabil și insolubil rezultat
este luat în vacuole autofagice care se fuzionează cu lizozomi și alte vacuole autofagice care
conțin lipide, proteine etc., ducând la formarea de organite care conțin NM. Aceste organite
duble cu membrană conțin pigment NM împreună cu componentele sale, corpuri lipidice

abundente și matrice proteică. Acest proces continuă pe parcursul întregii vieți a neuronilor și are
ca rezultat acumularea de organite care conțin NM odată cu îmbătrânirea. Această schemă este
modificată de la Zucca și colegii săi
(2014) cu permisiunea Springer Publishing.

Fig. 4. Centrii de fier în pigmentul NM

Figura prezintă cele două tipuri de centri de fier prezenți în pigmentul NM. Clusterul multinuclear de fier,
similar cu feritina, conține ioni de fier (III) (de culoare albastră în figură) cuplați de punți oxi-hidroxi și
înconjurați de grupări catecolice de NM. În acest site, fierul este probabil stocat cu afinitate ridicată și
menținut într-o stare inactivă redox și este detectat în principal prin spectroscopie Mössbauer. Celălalt
amplasament de fier constă din centre mononucleare, în care fierul (de culoare roșie) este coordonat de
atomii de oxigen ai porțiunilor de catecoli și, eventual, de grupările hidroxo. Acesta ar putea fi un loc de
legare cu afinitate scăzută ocupat numai în caz de supraîncărcare a fierului, atunci când centrele de
afinitate ridicată sunt saturate; în condiții de supraîncărcare a fierului ca în PD, fierul mononuclear ar
putea fi încă redox reactiv și catalizează producția de specii toxice, de exemplu prin reacția lui Fenton.
Fierul din acest site este detectat în principal prin spectroscopie EPR.

Fig. 5. Depozite de fier în SN îmbătrânit sănătos
(A, B, C) Histochimie cu colorare Perls modificată pentru detectarea depozitelor reactive de fier feric
(pentru detalii vezi Zecca și colab., 2004b) în secțiuni normale de țesut uman uman (88 de ani). Multe
depozite de fier sunt prezente în celulele gliale și sunt colorate în albastru: prezentarea generală (A, bară
de scară = 100 µm) arată că depozitele de fier albastru sunt abundente în întreg parenchimul SN, în timp
ce sunt absente în neuronii care conțin NM (de culoare maro pentru prezența pigmentului NM în
citoplasmă), confirmat la o mărire mai mare, arătând un grup de neuroni care conțin NM (B). Cu toate
acestea, neuronii fără SN ai SN conțin cantități mari de depozite de fier (vârful săgeții în C). Panourile A,
B, C sunt modificate de la Zucca și colegi
(2011) cu permisiunea Royal Society of Chemistry Publishing. (D, E) Organele care conțin NM ale
SN uman normal (89 de ani) observate folosind imagistica electronică. In stanga

(D), microscopia electronică de transmisie arată structura clasică a organelor care conțin NM prezente în
neuronii SN: aceste organite conțin o cantitate mare de pigment NM întunecat (săgeată) strâns asociat
cu corpurile lipidice (vârful săgeții), așa cum sa raportat anterior (Sulzer și colab. , 2008; Zecca și colab.,
2008b). Harta elementară de distribuție a fierului obținută prin imagistica spectroscopică de electroni (E,
bară de scară = 500 nm) relevă în mod clar că cantități mari de depozite de fier sunt localizate în
interiorul pigmentului NM al organitei (elementul de fier este prezentat în culoare roșie). Această
descoperire nepublicată confirmă cu tărie capacitatea pigmentului NM de a curăța fierul formând
complexe stabile de NM-fier. Imagistica spectroscopică electronică a fost realizată utilizând un
microscop electronic LEO 912AB așa cum este descris de Pezzati și colegii (1997). Pentru tratamentele
țesuturilor și politicile de etică, consultați: Zecca și colab., 2008b; Engelen și colab., 2012.

Fig. 6. Depozite de fier în diferite regiuni ale creierului în vârstă sănătos

(A, B, C) Putamen de 71 de ani subiect. (A, bară de scară = 100 µm). Depozitele reactive de fier feric
vizualizate de histochimia lui Perls (pentru detalii vezi Zecca și colab., 2004b) sunt în mod clar
abundente în întreg parenchimul și localizate în principal în celulele gliale (colorare difuză în albastru) și
fibre (asterisc în C). Depozitele de fier sunt prezente în mod clar în citoplasma a doi neuroni care nu
conțin NM (vârf de săgeată în A), confirmat la o mărire mai mare (vârf de săgeată în B). Neuronii
putamenului care conțin NM (de culoare maro pentru prezența pigmentului NM) nu prezintă colorare
albastră în citoplasma lor (vârfuri de săgeată în C). (D, E, F)

Globus pallidus de 71 de ani subiect. (D, bară de scală = 100 µm). Distribuția fierului în globul palid este
similară cu cea observată la putamen. Depozitele de fier sunt abundente și prezente în principal în
celulele gliale (colorare difuză în albastru) și în fibre (asteriscuri în D și E). Citoplasma neuronilor care nu
conțin NM (vârful săgeții în E) este clar pozitivă pentru colorarea fierului, în timp ce neuronul care
conține NM (ușor de culoare maro pentru prezența pigmentului NM) aparent nu conține depozite de fier
(vârful săgeții în F). (G, H, I) Cortex premotor al subiectului în vârstă de 72 de ani. Depunerile de fier în
cortexul premotor sunt mai puține în comparație cu alte zone cerebrale anterioare (G, bară de scară =
100 µm). Depozitele rare de fier sunt prezente în principal în celulele gliale (săgețile indică unele
depuneri în G) și sunt complet absente atât în neuronii fără NM vizibili (vârfuri de săgeată în H), cât și în
neuronii care conțin NM (vârf de săgeată în I, indicând un neuron cu maro slab) pigmentare colorată
datorită prezenței NM). (J,
K, L) Cerebelul subiectului în vârstă de 80 de ani. (J, bară de scală = 100 µm). Zăcămintele de fier sunt
împrăștiate în diferitele straturi ale arhitecturii cerebelului (J): săgeata indică fierul în stratul molecular,
vârful săgeții în stratul granular și asteriscul în substanța albă. Cu toate acestea, cea mai intensă colorare
este localizată în substanța albă a cerebelului. Panourile K și L prezintă la mărire mai mare stratul
celulelor Purkinje: colorarea fierului este uneori observată în stratul mediu dintre straturile moleculare și
granulare (săgeata în K), în timp ce celulele Purkinje aparent nu conțin depozite de fier în citoplasma lor
(vârful săgeții în L) . Prezența pigmenților NM a fost stabilită recent prin intermediul diferitelor tehnici în
neuronii putamenului, globului palid, cortexului premotor, cerebelului și a altor zone ale creierului uman
(Engelen și colab., 2012; Zecca și colab., 2008b). Cu toate acestea, concentrația de pigment NM în aceste
zone este mai mică decât cea observată în SN și LC (Zecca și colab., 2004b, 2008b). Pentru tratamentele
țesuturilor și politicile de etică, consultați: Zecca și colab., 2008b; Engelen și colab., 2012.

Zucca FA 2017.en

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Zucca FA 2017.en

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Translated from English to Romanian - www.onlinedoctranslator.

Acces public HHS

Publicat în forma finală editată ca:

INTERACȚIUNILE CĂILOR DE FIER, DOPAMINĂ ȘI NEUROMELANINĂ

Fabio A. ZuccaA,#, Juan Segura-Aguilarb, #, Emanuele FerrariA, Patricia Muñozb, Irmgard

Fier; dopamina; melanină; neuromelanina umană; boala Parkinson

Se pare astfel că fierul, DA și NM interacționează pe căi multiple. În această

revizuire, descriem aceste căi și condițiile care le mențin în sănătate sau le

2. Rolul celular de fier: un echilibru critic între efectele fiziologice și

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

În special, în creier fierul este esențial în sinteza și metabolismul

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Ipoteza neurodegenerării pe bază de metale este puternic sugerată de multiple in vitro

2.2. O scurtă prezentare generală asupra metabolismului fierului

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Creierul reprezintă un compartiment „privilegiat” care, în condiții normale, nu răspunde strict la

O intersecție comună în mecanismele multiple de neurodegenerare este o

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

neurodegenerative, pentru care îmbătrânirea constituie factorul de risc major.

chinona la pH fiziologic suferă ciclizare la leukoaminocrom, care este oxidat ulterior la

În plus, DA-o-chinona, aminocromul și 5,6-indolequinona pot participa la reacțiile neurotoxice. DA-o-

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Aminocromul interacționează cu omul α-sinucleină, inducând și stabilizând formarea

Interesant este că DT-diaforaza previneα-fibrilație a sinucleinei, probabil pentru că

În plus, aminocromul formează aducti cu complexul I al lanțului de transport de electroni în

lizozomale necesare degradării proteinelor în interiorul acestor organite (Huenchuguala și colab.,

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

In vitro experimentele au confirmat formarea complexului fier-DA și stabilitatea acestuia (Arreguin

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

4. Rolul oxidării DA în procesele neurodegenerative ale PD

Procesul degenerativ din PD începe cu mult înainte de apariția simptomelor motorii.

Aproape cinci decenii după introducerea L-3,4-dihidroxifenilalaninei (L-DOPA) în

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

O problemă centrală este identificarea neurotoxinei (dacă există) responsabilă pentru

implicat aminocrom sunt: i)α-agregarea sinucleinei la oligomeri neurotoxici ambii in vitro și în

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

radicali în timpul reducerii cu un singur electron a aminocromului în leukoaminocrom-o-

aminocromului la leukoaminocromăo-radical semiquinonă, cu formare de radicali hidroxil și stres oxidativ

Glutationul S-transferază M2-2 catalizează conjugarea glutationului DA-o-chinonă conducând la 5-

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Rolul recent apărut al 3,4-dihidroxifenilacetaldehidei (DOPAL), metabolitul primar al DA, în

5. Definiție, clasificare și proprietăți fizico-chimice de bază ale melaninelor

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

intermediari (Ito și Wakamatsu, 2006). Pigmenții NM sunt discutate pe larg în următoarele

melanine, piomelaninele, sunt pigmenți întunecați produși în principal de microorganisme din

În țesuturile umane și animale pigmentate, melaninele sunt de obicei sintetizate de celule

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

spectroscopie de rezonanță paramagnetică electronică (EPR) pentru detectarea specifică a melaninei în

O altă localizare extracutanată distinctă a melaninei la om este urechea internă, unde

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Eumelaninele sunt de obicei privite ca antioxidanți eficienți și agenți fotoprotectori (Brenner și

O altă proprietate interesantă a melaninei cu implicații biologice necunoscute este conductivitatea

2008b). Pigmentul NM apare ca o moleculă neagră și insolubilă compusă din diferite

asupra biosintezei NM în SN uman a fost, de asemenea, susținut de studii imunohistochimice

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

neuronii hidroxilazici pozitivi în SN, arătând astfel probabil un efect neurodegenerativ al

sau pur și simplu asociate prin interacțiuni non-covalente.

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.

Determinarea cantităților relative ale celor trei componente din pigmentul NM

spectrometrie de masă și metode spectrofotometrice (Dzierzega-Lecznar și colab.,

Diferența dintre procesele biosintetice care conduc la pigmentare melanine și NM

unităților oligomerice indolice plane (sau „protomolecule”) ale eumelaninei, care

Prog Neurobiol. Manuscris de autor; disponibil în PMC 2018 01 august.