PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1

Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE SUBSTANŢE GRASE

COD: PSL - 07

Documente de referinţă:
 Standard de stat - STAS 6512-73
 Standard de stat - STAS 3104-80
 ISO 1443 - 1973 Codex approved method - Extraction / gravimetry Type I method
 AOAC Method 960.39 modified; Soxhlet ether extraction
 SR EN ISO 17025:2005 si SR EN ISO 9001:2001
Exemplar nr.:
Descriere revizie:-
Elaborat Avizat Aprobat
Nume: Elpida Paltenea – Şef Nume: Marilena Talpeş –
Nume: Neculai Patriche - Director
Laborator Secretar ştiinţific
Semnătura Semnătura Semnătura

1
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

INDICATORUL REVIZIILOR ŞI APROBĂRILOR

Nr. Ediţia/ Data Capitolul Nume, prenume, semnătură

Crt. Revizia aplicării Subcapitolul
Elaborat Verificat Aprobat
Pagina
(modificat, adăugat)
1. 1/0 Şef Secretar Director
Laborator ştiinţific

INDICATORUL RETRAGERILOR

Nr. Compartiment Persoana Data şi Data şi Obs.

copie primitor semnătura semnătura
de primire de retragere

2
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

CUPRINS

Nr. Capitolul Pagina

Crt.
Pagina de gardă
Indicatorul aprobărilor şi reviziilor
Indicatorul retragerilor
Cuprins
Cap.1
1.1. Scop
1.2. Domeniul de aplicare
Cap.2
2.1. Documente de referinţă
2.2. Definiţii şi abrevieri
2.2.1. Definiţii
2.2.2. Abrevieri
Cap.3
3.1. Descrierea procedurii
3.2. Materiale necesare
3.2.1. Aparatură
3.2.2. Reactivi
3.2.3. Sticlărie
3.2.4. Alte materiale
3.3. Analiza cererii
3.4. Verificarea şi înregistrarea probelor
3.5. Protecţia personalului
3.5.1. Protecţia mijloacelor de încercare şi/sau măsurare
3.6. Verificarea, înregistrarea şi pregătirea probelor pentru lucru
3.7. Modul de lucru
3.8. Calcul
3.9. Eliminarea deşeurilor
Cap.4
4.1. Responsabilităţi
4.2. Limite de autoritate
Cap.5 Înregistrări
Cap.6 Anexe

3
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

CAPITOLUL 1

1.1.Scop

Determinarea conţinutului de substanţe grase, din peşte, produse din peşte şi icre prin
extracţie cu solvenţi organici cu aparatul Soxhlet,.

1.2.Domeniul de aplicare

Se aplică pentru determinarea conţinutului de substanţe grase din peşte, produse de peşte
şi icre, în Laboratorul de încercări pentru calitatea şi siguranţa produselor din acvacultură şi
pescuit, din cadrul I.C.D.E.A.P.A.Galaţi

CAPITOLUL 2
2.1.Documente de referinţă

Manualul calităţii laboratorului MCL-01, Ed.1/07.07.2007, Rev.0/ 07.07.2007;

Standard de stat - STAS 6512-73
Standard de stat - STAS 3104-80
ISO 1443 - 1973 Codex approved method - Extraction / gravimetry Type I method
AOAC Method 960.39 modified; Soxhlet ether extraction
SR EN ISO/CEI 17025:2005 - Cerinţe generale pentru competenţa laboratoarelor de încercări şi
etalonări;
PGL - 02 - Procedură generală de lucru, analiza cererilor, comenzilor şi contractelor;
PGL – 03 - Aprovizionare
PO – 01 - Procedura operaţională. Mentenanţa echipamentelor
PO – 02 – Procedură operaţională. Controlul DMM – urilor
PO – 03 - Procedură operaţională. Competenţă, conştientizare, instruire
MCL – 01 subcapitolul 3.3. Condiţii de acomodare şi mediu
MCL – 01 subcapitolul 3.4. Metode de încercare
MCL – 01 subcapitolul 3.6. Trasabilitatea măsurării
MCL – 01 subcapitolul 3.8. Manipularea obiectelor de încercat
MCL – 01 subcapitolul 3.9. Asigurarea calităţii rezultatelor
MCL – 01 subcapitolul 3.10. Raportarea rezultatelor
PGL – 14 – Estimarea incertitudinii de măsurare
PGL – 15 – Managementul probelor
2.2.Definiţii şi abrevieri
2.2.1 Definiţii
Substanţe grase – substanţe extrase cu solvenţi organici după o procedură dată.

2.2.2.Abrevieri
MCL - Manualul calităţii laboratorului
PGL - Procedură generală de lucru
PSL - Procedura specifică a laboratorului
PO - Procedură operaţională
BA - Buletin de analiză

4
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

CAPITOLUL 3

3.1.Descrierea procedurii

Extracţia grăsimii din proba de analizat cu ajutorul unui solvent organic în aparatul
Soxhlet, îndepărtarea solventului, uscarea şi cântărirea substanţelor grase.

3.2. Materiale necesare

3.2.1. Aparatură
- Aparat pentru extracţie continuă sau semicontinuă (de exemplu: tip Soxhlet);
- Etuvă electrică termoreglabilă, care să asigure temperatura de (103±2).

3.2.2. Reactivi şi materiale

- Sulfat de sodiu anhidru;
- Eter etilic sau eter de petrol (eter anhidru liber de peroxizi, cu punct de fierbere 34...35°C
şi reziduu la evaporare maximum 0,0015g/100cm3 sau eter de petrol, cu interval de distilare
40...60°C şi indice de brom maximum; reziduul la evaporare pentru n-hexan şi eter de petrol
maximum 0,002g/100cm3;
- Piatră ponce sau bucăţele de porţelan degresate şi uscate;
- Vată degresată şi uscată.

3.3.Analiza cererii

Modul de analiză, acceptare şi înregistrare a cererilor de încercare se face conform PGL – 02

Analiza cererilor, comenzilor şi contractelor şi MCL – 01 subcapitolul 2.4.
Comanda se înregistrează în Registrul de primire – predare probe, cod Rg 1 – MCL – 01.

3.4.Verificarea, înregistrarea probelor

Probele şi documentele însoţitoare se verifică de Şeful de laborator sau locţiitorul acestuia,

urmărind starea probelor primite şi conformitatea acestora cu documentele însoţitoare;
Recepţia şi verificarea probelor se face conform MCL – 01 subcapitolul 3.8 şi PGL – 15 -
Managementul probelor.

3.5.Protecţia personalului

Măsurile impuse pe timpul programului de lucru în laborator sunt conforme cu Normele de

protecţie a muncii specifice, prezentate periodic de către Responsabilul Compartimentului de
Protecţie a Muncii cu ocazia instruirilor planificate prin Programul Anual de instruiri.
Purtarea halatului de protecţie (alb din bumbac) este obligatorie în laborator.
Verificarea aplicării Normelor de protecţie a muncii se face de către Şeful laboratorului şi
de către Responsabilul cu protecţia muncii pe laborator.

3.5.1.Protecţia mijloacelor de încercare şi/sau măsurare

Mijloacele de măsurare nu se vor utiliza dacă:

5
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

- perioada de valabilitate metrologică este depăşită;

- nu funcţionează la parametrii corespunzători;
- nu se încadrează în clasa de precizie impusă de standardul de lucru.
.
3.6. Verificarea, înregistrarea şi pregătirea probelor pentru lucru

Probele şi documentele însoţitoare sunt preluate de responsabilul de încercare, sau de

personalul executant de încercare sub supravegherea Şefului de laborator, urmărind starea
probelor primite şi conformitatea acestora cu documentele însoţitoare.
Masa probei necesară pentru analiză este de cel puţin 500 g.

Pregătirea probelor pentru analiză se face conform STAS 3104-80 : Pregătirea probelor.
Proba de semiconserve, preparate culinare industriale sau conserve de peşte pentru analiză
se formează din conţinutul tuturor ambalajelor care constituie proba de laborator.
Părţile componente lichide ale produsului (sos, ulei maioneză etc.) se separă printr-o
deschidere făcută în capacul ambalajului şi se culeg în mojarul de porţelan după o prealabilă
încălzire pe baia de apă pînă la lichefierea gelurilor.
Dacă se cere şi determinarea conţinutului de legume şi condimente, acestea se separă
verificînd prin cîntăriri proporţiile. Apoi se trec prin maşina de tocat .
În caz contrar legumele, condimentele şi conţinutul se trec direct în maşina de tocat.
Peştele se mărunţeşte şi se omogenizează prin trecerea de două ori prin maşina de tocat cu
sita cu latura ochiului de 2 mm.
Se amestecă bine cu partea lichidă tot ce sa trecut prin maşina de tocat (peşte, legume şi
condimente).
Din aceasta se ia cantitatea de 250...300g, care se introduce într-un recipient bine închis şi
se ţine la temperatura de maximum 8ºC până la efectuarea analizelor, dar nu mai mult de 4 ore.
Pregătirea probelor de icre (icrele moi de sturioni, precum şi orice fel de icre de peşte de
apă dulce sau oceanic) se triturează în mojar pînă la obţinerea unei mase omogene.
Icrele conservate în ovare se trec întîi de două ori prin maşina de tocat pentru distrugerea
membranelor şi apoi se triturează în mojar pînă la obţinerea unei mase omogene .
Icrele tescuite nu se mărunţesc; proba pentru analiză se ia din diferite locuri ale probei de
laborator.

3.7. Modul de lucru

3.7.1. Într-o capsulă degresată şi uscată la etuvă până la masă constantă, se cântăresc circa 5g din
proba pregătită conform STAS 3104-80 cu o precizie de 0,001g. Se adaugă circa 8g sulfat de
sodiu anhidru şi se amestecă până la omogenizare, cu o baghetă de sticlă degresată.
Amestecul obţinut se trece cantitativ în cartuşul de extracţie, ştergând capsula şi bagheta cu
vată îmbibată cu solvent, care se introduc în cartuş.

3.7.2. Se trece cartuşul în extractorul aparatului Soxhlet.

Balonul de extracţie pregătit în prealabil (în balonul de extracţie se introduc câteva bucăţele
de piatră ponce şi se usucă timp de 1 oră la temperatura de (103±2)°C);
Se răceşte balonul în exicator 30 minute şi se cântăreşte cu precizie de 0,001g; se repetă
încălzirea, răcirea şi cântărirea până la masă constantă;

6
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

Se montează la extractorul aparatului şi se toarnă solvent până se produce sifonarea, după

care se mai adaugă solvent până la jumătatea extractorului.
Se asamblează apoi întreaga instalaţie şi se aşează pe baia de apă încălzită electric.
Temperatura băii se reglează astfel încât să se producă 8...10 sifonări pe oră.
Extracţia dureză circa 8 ore, după care se îndepărtează cartuşul filtrant şi se distilă
solventul care se colectează în extractorul aparatului. Balonul cu grăsime se mai menţine circa 10
minute pe baia de apă şi apoi se usucă timp de 1 oră în etuvă la (103±2)°.
Se repetă uscarea la etuvă, răcirea şi cântărirea până la masa constantă.

3.7.3. Pentru a verifica dacă extracţia a fost totală, câteve picături din solventul colectat în
extractorul aparatului se scurg prin sifon pe o sticlă de ceas şi se evaporă. Pe sticla de ceas nu
trebuie să rămână urme de grăsime.

3.7.4. Se efectuează două determinări paralele din aceeaşi probă pregătită pentru analiză.

3.8. Calcul şi exprimarea rezultatului

3.8.1. Conţinutul de substanţe grase se calculează cu formula:

% Substanţe grase =
în care:
m2 – masa balonului de extracţie cu grăsime, în g;
m1 – masa balonului de extracţie fără grăsime, în g;
m – masa probei luate pentru determinare, în g.
Ca rezultat se ia media aritmetică a celor două determinări efectuate în paralel, dacă sunt
îndeplinite condiţiile de repetabilitate de la pct. 3.8.2.

3.8.2. Repetabilitate
Diferenţa dintre rezultatele a două determinări efectuate în paralel în acelaşi laborator, pe
aceeaşi probă, de acelaşi operator, nu trebuie să fie mai mare de 0,5 g grăsime la 100 g probă
pentru analiză.

3.9. Eliminarea deşeurilor

Resturile de probe rezultate după expirarea perioadei de păstrare în laborator şi

materialele consumabile uzate sunt colectate în saci impermeabili. Reziduurile chimice rezultate
în urma efectuării analizelor sunt colectate în recipienţi de sticlă. Acestea, împreună cu deşeurile
solide sunt predate responsabilului cu activitatea de mediu din ICDEAPA conform
subsubcapitolului 3.3.2 pct. f) din MCL – 01. În acest scop se efectuează şi se păstrează
înregistrări în Fişa de eliminare a deşeurilor laboratorului - formular Cod FED – MCL – 01.

CAPITOLUL 4
4.1.Responsabilităţi
Directorul aprobă BA
Secretarul Ştiinţific vizează datele prezentate în B.A
• Şeful de Laborator:
– acceptă comanda
7
 PROCEDURĂ SPECIFICĂ DE LABORATOR Exemplar: 1
Ediţia: 01
DETERMINAREA CONŢINUTULUI DE Revizia: 0
SUBSTANŢE GRASE Data: 07.07.2007
COD: PSL - 07
Laborator de încercări pentru
calitatea şi siguranţa produselor
din acvacultură şi pescuit

- nominalizează responsabilul de analiză

- validează şi semnează buletinul de analiză
• Responsabilul de încercare/analiză
– înregistrează proba în registrul de primire – predare probe
- supervizează execuţia încercării
- răspunde de corectitudinea execuţiei încercării
- verifică funcţionarea mijloacelor de măsurare şi/sau încercare
- pune la dispoziţia executanţilor procedura specifică
- validează execuţia încercării
- confirmă rezultatul prin semnătură.
• Executantul de încercare:
- înregistrează proba în fişa de lucru
- condiţionează şi verifică starea sticlăriei utilizate în încercare;
- execută sub supravegherea specialistului operaţia de pregătire a probei conform
procedurii specifice
- comunică responsabilului de încercare orice problemă apărută în timpul operaţiilor
efectuate.

4.2.Limitele de autoritate

Pentru executarea în bune condiţii a PS - 07 sunt prezentate limitele de autoritate:

- Director
- Secretar Ştiinţific
- Şef Laborator
- Responsabil analiză/încercare
- Executant
CAPITOLUL 5

Înregistrări
Înregistrarea datelor se face în:
- Registrul de primire – predare probe
- Registrul de analize probe
- Buletinul de analiză
- Fişa de eliminare a deşeurilor din laborator
- Fişa de înregistrare a temperaturii mediului ambiant/frigider/congelator
- Fişă de lucru
- Caiet de evidenţă reagenţi
CAPITOLUL 6
Anexe
Anexa 1. Fişă de lucru Cod: FL01 – PSL 07
Anexa 2. Caiet de evidenţă reagenţi Cod: C - 01