Sisteme biologice

Curs 3
Membrane lipidice artificiale

https://link.springer.com/protocol/10.1385/1-59259-250-3:221
Membrane lipidice artificiale

https://www.researchgate.net/publication/285573036_Advances_and_Challenges_of_Li
posome_Assisted_Drug_Delivery/figures?lo=1
Proteine membranare

⚫ Funcția acestora:
− Enzime, care catalizează diferite reacții chimice
− Proteină-marker
− Receptori
− Rol de susținere
− Rol de transport
Proteine membranare

⚫ Procesele în care contribuie:

− Transportul molecular și ionic transmembranar
− Realizarea conexiunilor intercelulare și a ancorării
celulelor în matricea extracelulară
− Desfășurarea reacțiilor enzimatice asociate structurilor
membranare
− Controlul fluxului de informație între celulă și mediu prin
recunoașterea, legarea și transmiterea moleculelor-
semnal
− Imunitatea celulară
Elemente de importanța practica

⚫ Cum putem studia funcțiile membranare în experimente in-vitro?

⚫ Cum putem realiza în mod concret asta?

⚫ La ce ne poate fi de folos?
Elemente de importanța practica

⚫ Cum putem studia funcțiile membranare în experimente in-vitro?

⚫ Modificăm funcția de barieră folosind:
− Detergenți ce dizolvă lipidele
− Proteine ce destabilizează membranele și formează pori
celulari
⚫ Material genetic ce duce la producția crescută de anumite proteine de
interes
 Elemente de importanța practica
⚫ Cum putem realiza în mod concret asta?
⚫ Aplicam în culturile celulare detergenții sau proteinele formatoare de pori celulari
⚫ Realizam o transfecție genică și introducem ARNm în celulă pentru o producție
locală a proteinelor de interes:

⚫ Co-precipitarea cu fosfatul de calciu

⚫ Dextran-DEAE
⚫ Lipide cationice
⚫ atasarea la membrane

⚫ Lipozomi
⚫ Metode fizice (injectare)
⚫ Nanoparticule
⚫ Electroporare
(25) Transfection Tutorial – YouTube
https://www.promega.ro/resources/guides/cell-biology/transfection/
Elemente de importanță practică

⚫ La ce ne poate fi de folos?
⚫ Realizarea de dispozitive și compuși pentru sterilizare
⚫ Realizarea de dispozitive care să optimizeze transfecția genică
(electroporare)
⚫ Realizarea de dispozitive care să comunice cu celulele de interes
− Interfață om-mașina, proteze inteligente
Funcţia de transport
a membranelor celulare

⚫ Permeabilitatea membranelor fără proteine este selectivă:

⚫ Impermeabile pentru ioni (H+, Na+, HCO3-), molecule
încărcate polar (aminoacizi, acizi nucleici)
⚫ Permeabilitate foarte scăzută pentru molecule mari,
neîncărcate polar (glucoza, sucroza)
⚫ Permeabilitate scăzută pentru molecule mici (apa, uree,
glicerol)
⚫ Permeabilitate mare pentru molecule hidrofobe (O2, CO2,
N2, Benzen)
Funcţia de transport
a membranelor celulare
⚫ Moleculele hidrosolubile au nevoie de proteine care să medieze
transferul:
Proteine carrier (transportori)
- difuzia facilitată, asigură transportul moleculelor specifice (glucide,
aminoacizi) de pe o parte pe alta a membranei, prin modificări
conformaționale
- în sensul gradientului de concentrație
Proteine canal (canale ionice)
- proteine integrale, recunosc și selectează ionii, sunt activate de stimuli
chimici, mecanici, electrici
- formează un por hidrofilic îngust specific, în principal pentru mici ioni
anorganici
 Proteine carrier (transportori)

Moleculă de solvit

Stare A Stare B

Exterior

Bistrat
Gradient de
lipidic concentrație
Interior

Proteina Situs de
carrier legare
Proteine de transport membranar

Pompe dependente de ATP Canale ionice (transport

(transport activ) pasiv)
(10 − 103 ioni/s) (107 − 108 ioni/s)

Exterior

Citosol
Inchis
Deschis
Proteine de transport membranar

Transportori
(102 −104 molecule/s)

Uniport Simport Antiport

Transportul activ
cuplat cu gradient ionic
⚫ Cotransportul glucoză/sodiu
⚫ Glucoza trece de la concentrație mică la concentrație mare folosind
gradientul de sodiu

Exterior

Citosol
Clase de proteine de transport membranar
dependente de ATP
⚫ Pompe clasa P
− Pompele Na+/K+, H+/K+, Ca2+, H+
⚫ Pompe de proton clasa V
− Membrane vacuolare plante și fungi; osteoclaste, celule din tubulii renali
⚫ Pompe de proton clasa F
− Bacterii și plante; membrana mitocondrială internă
⚫ Superfamilia ABC (ATP- Binding cassette)
- Membrana plasmatică bacteriană; transportor de fosfolipide în celulele
mamiferelor, mici medicamente lipofile, colesterol, alte molecule mici
 Clase de proteine de transport membranar dependente de ATP

Fața
externă

Fața
citosolică

Pompe clasa P Pompe de proton clasa V Pompe de proton clasa F Superfamilia ABC
Canale ionice

Canale ionice activate de liganzi, semnale electrice sau mecanice

Proteine canal (canale ionice) – Canalul de sodiu
voltaj dependent

Structura
tetrodotoxinei - TTX

Structura canalului de
sodiu voltaj-dependent.
A. Subunitatea , B.
Domeniile subunităţii 
- porul canalului, C.
Situsuri de legare
pentru liganzi
Denac et al. 2000
Dependenta de nicotina

Nicotina se leaga de receptorii nicotinici pentru acetilcolina (neuroni

din SNC)
Modificare conformationala a receptorilor si intra sodiul in celula
nervoasa, ceea ce duce la eliberarea de dopamina (actioneaza la
nivelul multor neuroni si determina senzatia de placere –
dependenta)
Dependenta este data atat de senzatia de placere cat si de evitarea
efectelor adverse (insomnia, anxietate, depresie, dificultati de
concentrare)
Cresterea numarului de tigari este urmata de cresterea numarului de
receptori nicotinici (este impiedicata endocitoza receptorilor)
Expunerea prelungita la nicotina duce la functionarea anormala a
receptorilor nicotinici si la diminuarea potentialelor de actiune –
cresterea numarului de tigari
Transportul activ vs. pasiv

Transport activ Transport pasiv

• Împotriva gradientului • În gradient electrochimic
electrochimic
• Nu necesită energie
• Necesită energie pentru
• Are o viteză mare de transport
transport
• Are o viteză relativ redusă de
transport