C5 – Compartimente intracelulare și transport.

Sortarea proteinelor, transportul vezicular,

căi de secreție celulară.

1. Compartimente intracelulare și transport.

- Structura si ultrastructura reticulului endoplasmic; etimologia denumirii;
- Abordarea experimentala a organitului;
- Functiile reticulului endoplasmic;
- Functiile reticulului endoplasmic rugos/neted
- Lisosomii
- Peroxisomii
2. Sortarea proteinelor, transportul vezicular, căi de secreție celulară.
- Ultrastructura/functiile aparatului Golgi.
- Glicozilarea proteinelor
- Sortarea si exportul proteinelor
- Mecanismul trasportului vezicular.
- Formarea veziculelor prin inmugurire
- Fuziunea veziculelor
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

RER si REN nu reprezinta doua organite independente ci sunt zone diferit

organizate la nivel ultrastructural ale aceluiasi organit: reticulul endoplasmic
Spatiul din interiorul membranelor este denumit lumen si are o grosime
(diametru) de 30-60 nm
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

La Institutul de Biologie si Patologie Celulara din Bucuresti, profesorul

George Emil Palade si-a inceput prelegerea facand urmatoarea afirmatie:

“Functions must be understood in terms of structures; structures must be understood

in terms of chemistry”

Se pune problema:
cum putem separa,
pentru abordarea
studiului functiilor lor,
cele doua zone de
reticul endoplasmic
RER si REN ?
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

La Institutul de Biologie si Patologie Celulara din Bucuresti, profesorul

George Emil Palade si-a inceput prelegerea facand urmatoarea afirmatie:

“Functions must be understood in terms of structures; structures must be understood

in terms of chemistry”

Se pune problema:
cum putem separa,
pentru abordarea
studiului functiilor lor,
cele doua zone de
reticul endoplasmic
RER si REN ?
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

a. Functiile reticulului endoplasmic neted;

a1. Metabolizarea lipidelor (biosinteza, degradarea si modelarea
compozitiei lipidelor; vom puncta cu anticipatie ca REN produce
lipide membranare sau precursori ai unora dintre ele);
a2. Detoxificarea celulara;
a3. Functii speciale (depozit dinamic de ioni de calciu).

b. Functiile reticulului endoplasmic rugos;

b1. Biosinteza unor proteine: (i) proteine membranare, (ii) proteine
destinate a functiona in RE, in aparatul Golgi, sau lizosomi, (iii)
proteine destinate exportului;

b2. Prelucrarea proteinelor sintetizate in RE

b3. Asistarea proteinelor pentru impachetarea corecta

b4. Sortarea si transportul catre aparatul Golgi

C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b1. Biosinteza unor proteine: (i) proteine destinate a functiona in RE,

in aparatul Golgi, sau lizosomi, (ii) proteine membranare, (iii)
proteine destinate exportului;

Locul de sinteză a unei proteine ​a fost determinată prin secvența de aminoacizi

în porțiunea N-terminală a polipeptidei, care este prima parte sintetizata la
nivelul ribozomului în timpul sintezei proteice.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b1. Biosinteza unor proteine: (i) proteine destinate a functiona in RE,

in aparatul Golgi, sau lizosomi, (ii) proteine membranare, (iii)
proteine destinate exportului;

proteinele ​integrale conțin unul sau mai multe segmente transmembranare

hidrofobe care sunt triate direct din canalul de transloconului in bistratul lipidic.

În etapa 2a, transloconul a reorientat segmentul transmembranar. În etapa 3a,

transloconului are deschis lateral și expulzat segmentul transmembranar în stratul
dublu. Etapa 4a prezintă dispunerea finală a proteinei.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b2. Prelucrarea proteinelor sintetizate in RE;

La nivelul RE se petrec o serie de transformari asupra proteinelor care au

loc concomitent cu traducerea (modificari co-traducere)
sau dupa terminarea acesteia (modificari post-traducere).

Are loc maturarea proteinelor, pentru aducerea lor la starea

functionala si pentru a asigura sortarea si directionarea lor catre
locurile din celula carora le sunt destinate. Procesele de maturare, care
incep la nivelul RE, vor fi continuate si finalizate in complexul golgian.
Modificari co-traducere ale lantului polipeptidic
Initierea glicozilarii proteinelor.
Hidroxilari la nivelul lantului polipeptidic.
Carboxilarea acidului glutamic
Modificari post-traducere ale proteinelor
Glipiarea
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b2. Prelucrarea proteinelor sintetizate in RE;

C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b2. Prelucrarea proteinelor sintetizate in RE;

Glipierea
Glipierea este procesul prin care unele ectoproteine sunt atasate mai
ferm la bistratul lipidic prin ceea ce se numeste ancora
glicofosfatidilinozitolica.
b3. Asistarea proteinelor pentru impachetarea corecta

Proteinele pliate gresit sunt recunoscute de catre glicoziltransferaza

(GT) care adauga o glucoza la capatul lantului oligozaharidic.
Glicoproteinele ce contin oligozaharide monoglucozilate sunt
recunoscute de proteine chaperoane legate de membrana numite
calnexine.
Calnexinele ofera posibilitatea impachetarii corecte, daca acest lucru nu
se realizeaza, proteina este translocata in citosol si distrusa in
proteazom.
O proteina solubila care participa la fel in controlul impachetarii este
calreticulina.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

b4. Sortarea si transportul catre aparatul Golgi

Procesele prin care proteinele nou formate sunt prelucrate fac parte din
fenomenul denumit maturare.

Pentru realizarea acestor procese, este necesar un trafic de (macro)molecule

intre RE si complexul golgian.
Acest trafic se face prin vezicule si prin intermedierea unor
structuri veziculo-tubulare (prescurtat VTC, de la “Vesicular Tubular
Clusters”), cunoscute si sub numele ERGIC (de la “Endoplasmic
Reticulum-Golgi Intermediate Compartment”) a caror prezenta a fost
evidentiata in preparatele de microscopie electronica.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Retea cis

Cisterna cis

Cisterna mediana

Cisterna trans

Retea trans
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
Glicozilarea proteinelor
Prelucrarea oligozaharidelor N-linkate ale proteinelor destinate secretiei

Oligozaharid
N-linkat
Modificarile proteinelor destinate secretiei sau membranei plasmatice =
Eliminare 3 manoze (2), adaugare de N-acetil.gl.amina(3), eliminare 2 manoze (4)
adaugare N-acetil.gl.amina (5), aditiaunei fucoze si 2 galactoze (6),
adaugare 2 Ac. Sialic (7)
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
Glicozilarea proteinelor
Prelucrarea oligozaharidelor N-linkate ale proteinelor lizozomale
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

2.3 Sortarea si exportul proteinelor

C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
3. Mecanismul trasportului vezicular.
3.1 Formarea veziculelor prin inmugurire
Suprafetele citoplasmatice ale veziculelor de transport sunt acoperite
de proteine care induc deformarea membranei si constituirea veziculelo
prin inmugurire.

Exista 3 tipuri
de proteine: 1. vezicule acoperite cu clatrina
transporta prin exocitoza moleculele
extracelular sau transporta moleculele de la
ret Golgi trans lizozomi
2. vezicule acoperite cu proteine de invelis =
CoP I (coat protein) se formeaza prin inmugurire din
Ap. Golgi
3. vezicule acoperite cu proteine de invelis = CoP II
se formeaza prin inmugurire din RE
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
3.1 Formarea veziculelor prin inmugurire
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Formarea veziculelor acoperite de clatrina. Se observa grosimea

materialului cargo atasate la receptorii cargo care se elongheaza
prin membrana. Clatrina realizeaza un monostrat in partea
citosolica a membranei.
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Proteina CoP II CoP I (coat protein)

C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

3.2 Fuziunea veziculelor

Presupune 2 etape: 1. Recunoasterea specifica a membranei tinta

realizata de catre proteine perechi de suprafata
membranara
2. Fuzionarea dintre vezicule si membranele tiinta
realizata de proteinele de fuziune globala
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Lizozomii = organite delimitate de o membrana ce contin

enzime specifice, capabile sa digere toate tipurile de polimeri
Biologici.
Christian DeDuve laureat al premiului Nobel
1974
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Componenţi membranari unici

Proteine integrale tip lgp A şi lgp B glicozilate,
sintetizate în RER şi transportate în aparatul Golgi
pentru o glicozilare extensivă
Pompă protonică membranară ATP-dependentă care
…….asigura un mediu optim pentru acţiunea
hidrolazelor – pH …….5 (pH-ul citoplasmei este 7,2)
Nucleaze
Proteaze
Glicozidaze
HIDROLAZE ACIDE Lipaze
Fosfataze
Sulfataze
Fosfolipaze
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Autofagia
Materialul supus degradării are origine intracelulară
●Macroautofagia – turn over al organitelor –
autofagozom
●Microautofagia – pinocitoza unor proteine
citoplasmatice
Heterofagia
Implică endocitoza unor materiale extracelulare
●Fagocitoza – încorporare de particule străine
(bacterii) – fagozomi ce vor fuziona cu lizozomii
primari formănd lizozomi secundari
●Pinocitoza – înglobarea unor macromolecule aflate
în soluţie – pinozomi ce vor fuziona şi ei cu lizozomii
primari
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Fagocitoză

Exocitoză

Pinocitoză
LIZOZOM
PRIMAR

Endocitoză
mediată de
receptori

Autofagocitoză
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Boli lizozomale
Patologie (tezaurismoze):

Boala Pompe – a-glucozidaza

Boala Niemann-Pick - sfingomielinaza

Boala Gaucher – b-glucozidaza

C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Peroxisomii
– studiu in microscopia electronica

Peroxizomii au forma sferica sau ovala, cu diametrul 0,5-

1microni, fiind inconjurati de o membrana unica si poarta
un continut sau matrice densa granulara.In unele celule in
aceasta matrice peroxizomala s-a descoperit o zona mai
densa numita miez sau cristaloid care este enzima
uratoxidaza aranjata ordonat. Acest cristaloid de
uratoxidaza este prezent in mod normal in peroxizomii
celulelor de sobolan si de alte specii dar la om, in conditii
normale, el lipseste.
C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Cristaloidul - caractere
morfologice
 Prezent la numeroase specii
animale si vegetale.
 Ocupa centrul peroxismului
 Are un aspect dens politubular
 Unitatea de baza este tubulul primar
 Dispozitia tubulilor este variabila:
 Să fie strâns uniţi formand structuri
dense
 Dispusi in jurul unui spatiu formand
tubulul secundar
 Absent la primate si la om.
C5 – Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.

Produc/descompun H2O2
RH2 + O2 R + H2O2

D-aminoacidoxidazele alanina → piruvat

A-hidroxiacidoxidazele -hidroxiacizii → -cetoacizi

lactatul piruvat

uratoxidaza acidul uric → uree

enzime acizii grasi → Acetil - CoA

C5– Compartimente intracelulare și transport. Sortarea proteinelor, transportul vezicular,
căi de secreție celulară.
Oxidarea acizilor grasi
O alta functie a peroxizomilor este de a oxida acizii grasi (prin
indepartarea succesiva a cite doi atomi de C (carbon) sub
forma de acetil – C0A (acetil coenzima A), in special la cei cu
lant lung de atomi de C. cand lantul s-a scurtat la 6C (6 atomi
de carbon), urmeaza oxidarea acidului gras in mitocondrii.
Biosinteza lipidelor
Are loc sinteza colesterolului si a dolicolului. In ficat sunt implicati
in biosinteza acizilor biliari care sunt derivati din colesterol.
Biosinteza plasmalogenilor
O familie de fosfolipide in care unul din lanturile hidrocarbonate
are legat prin legatura eterica un glicerol.
Sunt componente membranare in celulele tesutului cardiac sau
ale neuronilor.