Sunteți pe pagina 1din 115

esutul sanguin cuprinde:

celulele circulante i precursorii acestora localizai n organele hematoformatoare, elementele sanguine prezente n esuturi i organe.

esutul sanguin reunete urmtoarele compartimente :

Compartimentul tisular central = organele hematoformatoare, n care se gsesc precursorii elementelor figurate; Compartimentul circulant sau sngele; Compartimentul tisular periferic = totalitatea celulelor sanguine mature prezente n esutul conjunctiv, n care i ndeplinesc funciile.

Sngele deriv din mezenchim.

Este o varietate de esut conjunctiv : celulele = elementele figurate sanguine, se afl ntr-o matrice extracelular fluid = plasma sanguin.

Sngele + limfa + lichidul interstiial = mediul intern al organismului.

Cantitatea de snge la un adult de 70 kg = 5-6 litri 6-8% din greutatea total a individului.
Hematocrit = raportul dintre plasm i elementele figurate = 55/45

La adult ~ 3500 ml 5% din greutatea corporal.


Ea este format din : 90% ap 10% - proteine - hormoni (cantiti mici) - vitamine, - lipoproteine, - hidrocarbonai (glucoz), - ioni - diferii metabolii (uree, acid uric, creatinin).

Proteinele plasmatice - rol : reglarea volumului sanguin, meninerea balanei lichidelor organismului, menin vscozitatea sngelui, servesc ca transportori pentru unii hormoni.

Reprezentate de - albumine, - globuline, - fibrinogen.

Albuminele .

Sintetizate de ficat. Rol : meninerea presiunii coloid-osmotice n capilare. Pierderi de albumin presiunea osmotic scade fluidele se acumuleaz n esuturi edem.

Globulinele cuprind mai multe fraciuni : 1. alfa cu subfraciunea: - alfa1 transportul vitaminei B12, lipidelor, glucidelor, hormonului tiroidian; - alfa2 transportul glucidelor. 2. beta (ex: - transferina transport fierul, - ceruloplasmina este legat de cupru, - beta2globulinele ce transport lipidele). 3. gamma reprezint imunoglobulinele (anticorpii) ce intervin n aprarea imunologic. Sunt sintetizate de plasmocite.

Fibrinogenul particip la procesul de coagulare.

Elementele figurate ale sngelui sunt reprezentate de:

globulele roii (hematii) : rol predominant n trasportul gazelor respiratorii i ndeplinesc funciile doar n snge; globulele albe (leucocitele): elemente tranzitorii n snge esutul conjunctiv i limfoid , unde i ndeplinesc funciile specifice; plachetele sanguine : elementele figurate implicate n procesele de coagulare.

HEMATIILE
Sunt elemente figurate anucleate. !! Eritrocit denumire incorect : nu prezint nucleu nu sunt celule propriu-zise. - denumire folosit doar pentru hematiile nucleate ale unor vertebrate (ex. psri).

ERITROCITE ( SNGE DE PASRE )

HEMATII (SNGE UMAN)

a. CULOAREA hematiilor este dat de hemoglobin.

- stare proaspt -- galben-verzuie - pe frotiu colorat May-Grnwald-Giemsa -- rou crmiziu. Condiii fiziologice - hematiile izocrome (colorate uniform).
Stri patologice - hematiile : hipocrome (mai palid colorate) - ncrcre mai slab cu hemoglobin (anemie feripriv) hipercrome (mai intens colorate) creterea volumului /grosimii hematiilor (megalocitoz) n dauna diametrului (microsferocitoz), fr ca proporia de hemoglobin s depeasc valorile fiziologice.

b. NUMARUL hematiilor / ml de snge: vrsta sexul condiii fiziologice condiii patologice.

variabil

Varsta / sex Copil 6 milioane adult scade : - brbat 4,5-5 mil - femeie 4-4,5 mil. vrstnici valorile se egalizeaza ( scade la brbai i crete la femei). Conditii fiziologice Altitudine (pres. parial a O scade) nr. hematii crete poligobulie mine/ mediul subacvatic (pres. parial a O creste) nr. hematii scade
Conditii patologice Diminuarea patologic a nr. de hematii + scderea cantitii de Hb = anemie : - regenerativ, cnd n sngele periferic cresc reticulocitele - aregenerativ, afeciune grav ce impune o terapie adecvat. Creterea patologic a numrului hematiilor = policitemia (poliglobulia).

c. FORMA hematiilor : disc biconcav zona central, mai subire (1,5 m) palid colorata (MGG) zona periferic, mai groas (2,5 m) intens colorata (MGG). Form = adaptare morfofuncional la funcia respiratorie, suprafaa cea mai mare la volumul cel mai redus. Hematiile i schimb forma se alungesc (strbat capilarele sanguine ) revin apoi la forma iniial( cnd ajung n vase mai mari) modificri posibile datorit plasticitii/ elasticitii membranei lor, ce prezint o tensiune superficial sczut.

IMAGINE DE MICROSCOPIE ELECTRONIC DE BALEIAJ. X3300 Se observ forma biconcav a hematiilor umane normale.

Forma hematiilor este dependent i de echilibrul osmotic : n soluii hipotone ele se umfl, devin sferice, iar membrana lor se rupe i hemoglobina prsete celula, care va aprea ca o umbr celular. Este fenomenul de hemoliz ce poate fi provocat i de veninul de arpe, unele bacterii.

n soluii hipertone, hematiile se ratatineaz i au un aspect crenelat.

n stri patologice (anemii) hematiile se pot modifica, lund form de par, de rachet, de clopot, de semilun, fenomen numit poikilocitoz. n aceste cazuri ele iau numele de: sferocite, eliptocite, acantocite (membrana este deficitar n lecitin; se ntlnesc la bolnavii cu ciroz hepatic), leptocite (sunt plate, cu centrul cromofob; se ntlnesc n talasemie, caren de fier, hemoglobine anormale). Aceste modificri reprezint rezultatul unor mutaii genetice, transmise ereditar.

d. DIMENSIUNILE hematiilor :
- 7,2-7,5 m n stare fixat - 8,6 m n stare proaspt.

Cnd diametrul este mai mic de 6 m apare microcitoza, cnd este mai mare de 9 m, macrocitoza (cele mai mari hematii se ntlnesc n anemia pernicioas i se numesc megalocite).
Variaiile de diametru eritrocitar = anizocitoz.

Hematiile nu prezint o mobilitate proprie se deplaseaz pasiv n curentul sanguin, putndu-se aglomera n fiicuri atunci cnd circulaia este ncetinit.

e. STRUCTURA hematiei. I. Hematia este anucleat format din citoplasm i membran. n timpul diferenierii, ea pierde: - nucleul, prin extruzie n mediul extracelular, unde este fagocitat de ctre macrofage, - organitele celulare. n citosol rmn rari microtubuli i microfilamente ancorate de membrana celular.
Uneori n hematii mai pot rmne resturi de nucleu. poate persista nveliul nuclear, care realizeaz un inel n interiorul celulei (inel Cabot). pot rmne numai civa grunji de cromatin dispersai n citosol care alctuiesc corpii Jolly.

II. Citoplasma este amorf sau fin granular i eozinofil.


Electronomicroscopic, citoplasma prezint un citoschelet format din microfilamente i tubuli reea, mai compact periferic, mai lax central. Biochimic, citoplasma conine : - 60% ap, - 35% hemoglobin, - 5% alte substane reprezentate de : * enzime (lactatdehidrogenaza, glucoz-6-fostatdehidrogenaza, catalaza), * vitamine din grupul B (B6, B12, acidul folic), * lipide.

Hemoglobina = cromoprotein - o parte proteic (globina) - o parte prostetic (hemul). Globina= protein din grupa histonelor cu caracter bazic alcatuita din 574 de aminoacizi grupai n 4 lanuri polipeptidice, identice ntre ele dou cte dou. Formula general este X2Y2 n care : - X corespunde catenelor alfa ce au n structur 141 aa - Y corespunde uneia din cele patru tipuri de catene non alfa : beta, gama, delta ce au n structur 146 aa i epsilon cu structura incomplet elucidat.

Hemul, pigmentul colorat este un nucleu tetrapirolic, o protoporfirin conine fier, are o compoziie chimic constant n diverse hemoglobine.

Fiecare lan polipeptidic din structura globinei are ataat o grupare hem; gruprile hem, patru per molecul, sunt plasate la exteriorul moleculei.

n cursul dezvoltrii organismului, succed mai multe tipuri de hemoglobin : Hemoglobina Gower 1 i Gower 2, la embriondispar la sfritul lunii a treia; Hemoglobina F sulfatat, reprezint la nou nscut 75% din totalul hemoglobinei scade rapid la sfritul primului an de via sub 1%; Hemoglobina A1 i A2 sinteza ncepe n perioada fetal persist tot restul vieii.

hemoglobina A1 (alfa2beta2) = componenta major (97-98%) a hemoglobinei din hematiile adulilor normali, hemoglobina A2 (alfa2delta2) = componenta minor (2-3%).

III. Membrana hematiei = barier selectiv la nivelul creia au loc schimburi ntre hematie i mediul nconjurtor. Organizat dup tipul unitar de membrane celulare: un strat bilipidic = continuum-ul lipidic, n care se intercaleaz proteinele n strat discontinuu => imagine de mozaic lipoproteic. Dup poziia lor n membran, proteinele pot fi: proteine integrale ( incluse n continuum-ul lipidic), proteine periferice (la suprafaa extern i intern a membranei, nefiind intercalate n stratul bilipidic). n membrana hematiei - proteinele 50% , - lipide 42-43%, - hidraii de carbon 7-8%.

Proteinele - dispuse asimetric pe cele dou fee ale membranei elementele cele mai active din punct de vedere funcional. ROL: Unele proteine au rol structural (spectrina), altele sunt protein-enzime, n mare parte lipido-dependente rol transportul activ contra gradientului de concentraie a diferitelor substane.

1. 2.

Lipidele membranare sunt reprezentate de: - fosfolipide (60-70%), - lipide neutre (20-30%, colesterolul fiind bine reprezentat), - glicolipide (10-15%). Cantitatea de lipide membranare variaz funcie de: - starea de nutriie, - vrsta celulei, - vrsta individului - starea patologic a individului. Pentru meninerea fluiditii membranei este foarte important raportul colesterol-fosfolipide alterarea sa tulburri de permeabilitate i fragilitate.

Hidraii de carbon : - pe suprafaa extern a membranei. - intr n compoziia glicoproteinelor i glicolipidelor, - sunt orientai asimetric i reacioneaza cu bacterii i virusuri. Acidul sialic = cel mai bine reprezentat, - responsabil de ncrcarea electric de suprafa.

Pe suprafaa extern, membrana hematiei prezint antigeni = aglutinogeni A i B.

n serul sanguin se gsesc antiaglutinogeni = aglutinine alfa i beta.

Dup cum sunt prezeni aceti aglutinogeni i aglutinine, populaia uman se mparte n 4 grupe sanguine :

Grupa 0 (I) = donatorul universal: nu conine pe hematii nici un aglutinogen, dar n plasm conine ambele aglutinine alfa i beta. Grupa A (II), pe hematii prezint aglutinogenul A, iar n plasm aglutinina beta.

Grupa B (III), hematii prezint aglutinogenul B, iar n plasm aglutinina alfa. Grupa AB (IV) = primitorul universal, prezint ambele aglutinogene A i B i nu conine n plasm aglutinine.

Pe suprafaa hematiilor se mai pot gsi i alte aglutinogene dect cele ale sistemului AB0: factorul Rh (de la maimua Rhesus la care a fost studiat prima dat) alctuit din ase antigene, cel mai puternic = antigenul D. Indivizii care - au aglutinogenul D =Rh pozitivi (85%), - nu au aglutinogenul D = Rh negativi (15%). IMPORTANT la transfuzii sanguine : indivizii Rh negativi formeaz aglutinin anti-D dac primesc snge cu hematii Rh pozitiv la o nou transfuzie tot cu astfel de snge pot apare reacii de incompatibilitate. !!! Mamele gravide Rh negative, care au avut o sarcin cu un ft Rh pozitiv, posed anticorpi (aglutinine) anti-Rh, iar la a doua sarcin aglutininele mamei trec prin placent la fetus la care provoac boal hemolitic (eritroblastoz fetal) foarte grav.

f. DURATA DE VIATA a hematiei n sngele circulant 100-120 zile. Hematiile mbtrnite sunt fagocitate de ctre macrofagele splenice sau din hemomedul. Hemoglobina este scindat n globin i hem: globina descompus n aminoacizii componeni, hemul convertit la nivelul ficatului n biliverdin i apoi n bilirubin. fierul din hemoglobin recuperat sub form de feritin i apoi este reutilizat n eritropoiez.

Funciile hematiei : 1. Rolul esenial al hematiei este de a transporta oxigenul i dioxidul de carbon . * Legturile hemoglobinei cu aceste gaze sunt reversibile: - hemoglobina + O = oxihemoglobin, - hemoglobina + CO2 = carbhemoglobin legndu-se i desfcndu-se foarte rapid. Aceste legturi sunt facilitate de unele enzime ca: - methemoglobinreductaza , menine fierul n stare feroas neoxidat, - carboanhidraza , leag /dezleag dioxidul de carbon de hemoglobin. * n anumite cazuri, hemoglobina poate s formeze combinaii stabile cu - oxigenul methemoglobina - oxidul de carbon carboxihemoglobina, combinaii care pot fi mortale pentru individ.

2.

Hemoglobina rol foarte important n meninerea echilibrului acido-bazic. Sistemul tampon realizat doxihemoglobin/carbhemoglobin contribuie n mod deosebit la meninerea pH-ului sanguin ntre anumite limite.

3. n practica medical : foarte important cunoterea grupelor sanguine pentru stabilirea compatibilitii transfuzionale, ct i pentru prevenirea accidentelor de hemoliz acut intravascular. 4. Grupele sanguine prezint importan i n practica medico-legal n expertize de excludere a paternitii dar i n criminalistic.

LEUCOCITELE Leucocitele sau globulele albe reprezint totalitatea elementelor nucleate ale sngelui. Numrul total al leucocitelor este adult : 6000-8000 / ml de snge; copii : la natere 15-20000 / ml scad la 12 ani numrul lor este acelai ca la adult; mai sczut la btrni.

Cretere a numrului de leucocite = leucocitoz : condiii fiziologice (postprandial, sarcin), condiii patologice (infecii acute, cronice, leucemii). Scderea numrului de leucocite = leucopenia : boli caectizante, neoplasmelor, dup iradiere. Spre deosebire de hematii, care circul antrenate de curentul sanguin, leucocitele prezint micri proprii, prin emiterea de pseudopode sau de membrane ondulante strbat peretele vaselor esutul conjunctiv unde ii desfoar activitatea.

Clasificarea leucocitelor dupa : prezena/absena granulaiilor specifice n citoplasm aspectul nucleului dou mari categorii :
1. Granulocite (polimorfonucleare) n citoplasm granulaii specifice funcie de tinctorialitate se mpart n : neutrofile, eozinofile i bazofile. Nucleul este segmentat = format din mai muli lobi unii prin puni de cromatin, citoplasma acidofil. Granulocitele sunt celule mobile ce joac un rol esenial n aprarea organismului.

2.

Agranulocitele (mononuclearele) nu conin n citoplasm granulaii specifice, ci numai granulaii primare azurofile. Citoplasma este bazofil, nucleul nu este segmentat.
Sunt de dou tipuri : limfocite i monocite.

Cele cinci tipuri de leucocite exist n snge n proporii bine stabilite, proporii care raportate la suta de elemente albe formeaz formula leucocitar. Valorile normale ale leucocitelor n formul variaz n limite destul de largi : neutrofile 60-70% eozinofile 1-3% bazofile 0,5-1% limfocite 25-30% monocite 4-8% Numrul leucocitelor, dar i procentul lor n sngele circulant pot varia n condiii fiziologice, dar mai ales patologice.

Exist variaii diurne ale granulocitelor : dimineaa, dup repaus, numrul lor scade, apoi va crete cu activitatea i mai ales dup efort fizic, stres, postprandial. Exist o variaie a celulelor seriei albe, n funcie de vrst : la natere n formula leucocitar predomin neutrofilele, pn n jurul vrstei de 4 ani predomin limfocitele, la 12-14 ani formula leucocitar are aspectul celei de la adult.

POLIMORFONUCLEARELE

NEUTROFILE

a. Numar. Neutrofilele = 60-70% din leucocitele circulante.

Creterea numrului de neutrofile = neutrofilie : condiii fiziologice (nou nscut, sarcin, efort fizic), condiii patologice (infecii i inflamaii acute). Scderea numrului de neutrofile = neutropenie : stri caectizante (malnutriie, alcoolism), la doze mari de radiaii ionizante, boli de snge (leucemii, anemii aplastice), boli imune (artrit reumatoid, lupus eritematos diseminat).

b. Forma celulei - rotunjit sngele circulant, - neregulat neutrofilele emit pseudopode pentru a prsi vasul i a trece n esuturi. c. Diametrul neutrofilului : - n stare proaspt = 12-15 m, - pe frotiul sanguin (celula este uscat) = 9-12 m. d. Durata de via a neutrofilelor : 2-5 zile.

e.

Structura neutrofilului. Neutrofilul = celul complet (nucleu, citoplasm, membran celular). Nucleul este segmentat : 2-5 lobi nucleari, legai ntre ei prin filamente fine de cromatin. n practica medical se execut aa-numita formul Arneth = se calculeaz procentul neutrofilelor dup numrul de lobi ai nucleilor (la 100 de neutrofile). Normal, n formula Arneth gsim neutrofile cu nuclei formai din : - 2 lobi (14-30%) - 3 sau mai muli lobi (40-50%).

Dac predomin neutrofilele cu 2-3 lobi, formula Arneth este deviat la stnga o bun capacitate funcional a mduvei dac predomin neutrofilele cu 5-6 lobi formula Arneth este deviat la dreapta o scdere a capacitii regenerative a mduvei.

Aezarea lobilor nucleari n celul realizeaz forme diferite, asemntoare literelor din alfabet : U, V, Y, T, S. Fiecare lob nuclear prezint : - eucromatin situat central, - heterocromatin dispus sub membrana nuclear. La sexul feminin 1-5% din neutrofile pot prezenta la unul din lobii nucleari corpusculul sexual Barr = = reprezint condensarea n interfaz a unuia din cei doi cromozomi X (aa numita cromatin sexual) ; apare sub forma unui beior de tob.

Citoplasma neutrofilului, uor acidofil conine : organite celulare comune puin dezvoltate, rare microfilamente, microtubuli, vacuole lipidice, vacuole de pinocitoz , particule de glicogen.

!!! Elementul structural caracteristic prezent n citoplasm este constituit din numeroasele granule care sunt de dou tipuri : - granule azurofile sau primare, - granule specifice sau secundare.

Granulele azurofile sau primare : - proporie 20% - diametru = 0,5 m. Sunt lizozomi primari ce conin un bogat echipament enzimatic : esteraz, mieloperoxidaz, peroxidaz, fosfataz acid, beta-glucuronidaz. ! Granulaiile primare apar din stadiul de promielocit i se reduc treptat pe msura diferenierii celulei. ncepnd cu stadiul de mielocit apar i granulele secundare specifice, astfel c n celulele difereniate se gsesc n raport de 1/4.

Granulele specifice sau secundare : - proporie 80% - diametrul = 0,2-0,4 m. - forma : n general rotunde, - rspndite inegal n citoplasm , - n coloraia May-Grnwald-Giemsa se evidentiaza n violet.
Ultrastructural granulaiile sunt delimitate de endomembrane i au un coninut omogen sau fin granular. Histochimic conin substane antibacteriene: lizozim distruge peretele bacterian, lactoferin inhib multiplicarea bacteriilor, fosfataz alcalin, colagenaz, etc.

FROTIU SANGUIN COL MGG


Se evideniaz doua neutrofile i numeroase hematii. Fiecare neutrofil are un singur nucleu, care prezint un numr variabil de lobi.

IMAGINE ELECTRONOMICROSCOPIC A UNUI NEUTROFIL.X27000 n citoplasm se remarc dou tipuri de granule: - azurofile - specifice;
Nucleul este lobulat, aparatul Golgi are dimensiuni mici, RER i M sunt slab reprezentate

f. Cinetica neutrofilelor. Hemomedula (stau ~3 zile) snge, repartizndu-se n dou sectoare : neutrofilele circulante, neutrofilele marginale ader la pereii vasculari nainte de a trece n esuturi. n snge neutrofilele rmn 5-8 ore apoi trec n esutul conjunctiv traversnd peretele venulelor postcapilare. La nivelul esuturilor dup 4-5 zile, neutrofilele sunt distruse de macrofage.

Funciile neutrofilului. 1. Neutrofilul = microfag sanguin fagociteaza particule de talie mic, n general microorganisme (bacterii, virusuri) sau particule mici inerte. Neutrofilele sunt primele leucocite care dau lupta cu microbii la locul de invazie a acestora. Pentru realizarea procesului de fagocitoz se parcurg mai multe etape : - chemotaxia i motilitatea, - opsonizarea, - degranularea , - liza intracelular a microorganismelor.

a.

Neutrofilele ajung n esuturi datorit proteinelor contractile (actina) din citoplasm, migreaz la locul de invazie microbian sub influena unor factori chemotactici :
toxine bacteriene, metabolii eliberai de alte leucocite (factori chemotactici limfocitari), prostaglandine, leucotriene. Neutrofilele sunt activate cnd germenii microbieni sunt acoperii de anticorpi n prezena complementului (opsonizare). Atrase prin chemotaxie, neutrofilele nglobeaz bacteria ntr-o vacuol de fagocitoz n care lizozomii i deverseaz coninutul lor enzimatic printr-un proces de degranulare.

b.

c.

Omorrea microorganismelor n interiorul fagozomului se face pe dou ci : sistemul dependent de oxigen : mediat de mieloperoxidaz = protein bazic, ce leag H2O2 (hidrogen peroxidul). Enzimele lizozomale provoac eliberarea oxigenului atomic, puternic bactericid, prin formarea hidrogen peroxidului (H2O2) i superoxidului (O2). Superoxidul = radical liber format prin pierderea unui electron din molecula de O2 . = toxic pentru esuturi, rapid inactivat de peroxidaz i superoxidaz-dismutaz. sistemul independent de oxigen sau sistemul neoxidativ, bactericid include aciunea enzimelor eliberate n esuturi dup moartea celulei, avnd activitate antimicrobian direct.

O parte din enzimele lizozomale se leag de fagozomi, nainte de nglobarea n celul prin includerea membranei plasmatice, constituind factori chemotactici pentru alte celule de aprare. Soarta microorganismelor fagocitate este diferit : unele sunt lizate n fagozomi, altele sunt doar parial distruse, altele sunt doar stocate (bacilul tuberculos, bacilul leprei).

POLIMORFONUCLEARELE EOZINOFILE a. Numar. Eozinofilul sau acidofilul reprezint 1-3 % din leucocitele circulante.

Creterea numrului de eozinofile = eozinofilie : reacii alergice (astm bronic, urticarie, edem angioneurotic) boli parazitare (trichinoz, giardia, oxiuri, toxoplasmoz), boli dermatologice (pemfigus, dermatit herpetiform), boli de snge (leucemie granulocitar, leucemia cu eozinofile). Scderea numrului de eozinofile = eozinopenie : hiperactivitatea adenocorticosteroid din cursul *traumatismelor, *interveniilor operatorii, *sindroamelor infecioase dup administrarea terapeutic a preparatelor de corticosteroizi.

b. Forma celulei : rotunjit. c. Diametrul = 12-15 m la celula n stare proaspt = 9-12 m la celula uscat. d. Durata de via a eozinofilelor: 8-12 zile.

e. Structura eozinofilului Eozinofilul prezint membran, citoplasm i nucleu. Nucleul este de obicei bilobat, format din doi lobi, unii ntre ei prin puni fine de cromatin. Lobii nucleari conin de obicei eucromatin dispus central, i heterocromatin lng membrana nuclear. Citoplasma = intens acidofil, conine organite celulare mai bine reprezentate dect n neutrofil, vacuole , glicogen i numeroase granule. Granulele - sunt rotunde, - de mrimi egale, cu diametrul de 1 m, - uniform rspndite, - colorate n rou-portocaliu cu reactivi acizi (icrele de Manciuria).

FROTIU SANGUIN. COL. MGG


Eozinofil cu nucleu bilobat i granule citoplasmatice mari.

Ultrastructural, fiecare granul : nconjurat de o endomembran, prezint n zona central un cristaloid electronodens, dispus n axul lung al granulei = internum conine o protein bazic - bogat n arginin , - constituie 50% din totalul proteinelor granulare, - rspunztoare de eozinofilia granulelor.

zona ce nconjoar cristaloidul este mai puin dens = externum sau matrice bogat n fosfataz acid, beta-glucuronidaz, aril-sulfataz, fosfolipaz.

=> cristaloidul electronodens + zona periferic mai puin dens, confer granulelor aspect caracteristic de boabe de cafea.

IMAGINE ELECTRONOMICROSCOPIC A UNUI EOZINOFIL. X20000

Se observ granulele eozinofilice (EG) cu aspect caracteristic. Fiecare granul are un miez cristalin electronodens n form de disc, n jurul cruia exist o matrice delimitat de membran. N nucleu M - mitocondrie

Membrana eozinofilului este lipoproteic acoperit de glicoproteine. La nivelul ei apar pseudopode rare i scurte faciliteaz micrile celulei i mai puin procesul de fagocitoz.
f.

Cinetica eozinofilelor. Tranzitul medular al eozinofilului ( 5-6 zile) sngele circulant periferic (cteva ore sau zile) esuturi - organele care vin n contact direct cu mediul extern (tubul digestiv, interstiiul pulmonar, derm) unde i ndeplinesc funciile. Ele apar n locurile unde se acumuleaz proteine strine, parazii sau unde au loc reacii alergice.

Funciile eozinofilelor : 1. Funcie antihistaminic, acumulndu-se n esuturile n care histamina este n concentraie ridicat. Numrul lor n bolile parazitare este mare.
2.

Funcie antiparazitar, prin secreia de imunoglobuline E. Funcie de moderator asupra mastocitelor i bazofilelor care atrag eozinofilele printr-un factor chemotactic specific : EFCA (Eosinophil Chemotactic Factor of Anaphylaxis). Eozinofilele sunt crescute n sngele persoanelor alergice.

3.

4.

Au funcie redus i selectiv de fagocitoz pentru unele substane solubile de origine bacterian, complexe antigen-anticorp i unele componente citoplasmatice. Conin profibrinolizin prin care intervin n procesele de coagulare sanguin.

5.

6. Hormonii steroizi determin o scdere rapid a eozinofilelor sanguine, probabil interfernd cu procesul lor de eliberare din mduva hematogen.

POLIMORFONUCLEARELE BAZOFILE a. Numar. Bazofilul este cea mai rar celul a sngelul circulant uman, reprezentnd 0,5% din elementele albe. Creterea numrului de bazofile n snge = bazofilie : bolile mieloproliferative (leucemia granulocitar cronic), dup splenectomie, n boala Hodgkin. Scderea numrului de bazofile = bazopenie : strile de stres, infecii acute, hipertiroidii.

b. Forma celulei : rotunjita c. Diametrul = 10-12 m. d. Durata de via a bazofilelor : 10-15 zile.

e. Structura bazofilului. Nucleul apare incomplet segmentat avnd o form neregulat. Cromatina are un aspect heterogen, zonele eucromatice alternnd cu cele heterocromatice. Nucleu este mascat adesea de garnulaiile specifice. Citoplasma este bazofil, conine : - puine organite celulare, - glicogen, - multe granule bazofile, colorate ortocromatic n albastru cu May-Grnwald-Giemsa metacromatic n rou-violet cu albastru de toluidin.

Granulele - au forme i mrimi diferite, diametrul = = 0,1-1 m, - sunt inegal rspndite n citoplasm, deseori suprapuse pe nucleu, mascndu-l. - sunt foarte sensibile, dispar repede n ap datorit glicozaminoglicanilor acizi pe care i conin.
Ultrastructural granulele sunt delimitate de o endomembran, conin o matrice dens, uneori de aspect lamelar. Histochimic conin aceleai substane active ca i mastocitele : histamin, heparin, serotonin, fiind PAS pozitive. Produc i leucotriene, responsabile de contracia fibrelor musculare netede.

FROTIU SANGUIN. COL. MGG Bazofil cu numeroase granule suprapuse nucleului, motiv pentru care acesta este dificil de vizualizat.

IMAGINE ELECTRONOMICROSCOPIC A UNUI BAZOFIL. X16000

Nucleul (N) lobular prezint trei regiuni separate. n citoplasm: granulele bazofilice(B), mitocondrii (M), complex Golgi (G).

Membrana bazofilului : lipoproteic, acoperit de glicocalix. Pe suprafaa ei extern se gsesc receptori pentru imunoglobulinele E.
f. Cinetica bazofilelor. Bazofilul se formeaz n mduva hematogen n sngele periferic n esutul conjunctiv.

1.

Funciile bazofilelor : Intervin n strile de stres, oc prin substanele vasomotorii i anticoagulante pe care le conin granulaiile lor specifice.

2. Au capacitate de fagocitoz i de mobilitate redus.

LIMFOCITELE Sunt leucocite agranulocitare, mononucleare nu conin n citoplasm granulaii specifice, nucleul lor este nesegmentat.

a. Numar. Limfocitele se gsesc n sngele periferic n proporie de 25-30%.


Creterea numrului de limfocite = limfocitoz: * conditii fiziologice n primii ani de via, * condiii patologice : - infecii acute (mononucleoza infecioas, tuse convulsiv), -infecii cronice (tuberculoz, sifilis). Scderea numrului de limfocite = limfocitopenie: - n mixedem, - boala Cushing, - dup tratamente cu corticoizi sau raze X.

b. Forma. Limfocitul este o celul sferic.

c. Dimensiunile depind de tipul limfocitului : limfocitul mic are diametrul de 6-9 m, limfocitul mijlociu 10-12 m, limfocitul mare 12-18 m. n sngele periferic predomin limfocitele mici.
d. Durata de via a limfocitelor este diferit : cteva zile civa ani unele ajung la 25 de ani, datorit circulrii i recirculrii lor.

e. Structura limfocitului. Limfocitul este o celul complet, fiind alctuit din membran, citoplasm i nucleu. Nucleul este mare (ocup cea mai mare parte din celula), rotund cantitate mare de heterocromatin pe frotiu apare intens colorat : pat de cerneal. n nucleu se poate observa i prezena unui nucleol.
Citoplasma limfocitului este puin, redus la un inel perinuclear, bazofil: cerul senin . Conine : - organite celulare slab reprezentate, - granulaii azurofile, - incluziuni de glicogen i lipide, - enzime, n special lipaz i fosfataz acid ! ! Nu conine peroxidaz, ceea ce-l difereniaz de monocit.

FROTIU SANGUIN. COL. MGG


Se observ dou limfocite mici, cu nuclei rotunzi, intens cromatici.

Ultrastructural se observ c limfocitul este o celul puin activ: nu sintetizeaz produi destinai exportului extracelular, sintetizeaz receptorii si de suprafa, necesari recunoaterii antigenice.

IMAGINE ELECTRONOMICROSCO PIC A UNUI LIMFOCIT. X 22000

Aceast celul conine : RER slab reprezentat, numr redus de poliribozomi liberi, mitocondrii (M), nucleul ( N) cu nucleol (Nu).

Membrana limfocitului este lipoproteic, organizat n mozaic, acoperit de un strat subire, glicoproteic. La microscopul electronic se observ microviloziti i vezicule de pinocitoz, care demonstreaz capacitatea de endocitoz a limfocitelor.
f.

Cinetica limfocitelor. Limfocitele iau natere n organele hemolimfopoietice vasele sanguine esuturile conjunctive, unde i desfoar n principal activitatea :

o parte din aceste limfocite, dup o intens activitate local, se distrug pe loc n esuturile conjunctive de ctre macrofage, alt parte, dup contactul cu antigenul, sunt preluate de capilarele limfatice i ajung din nou n circuitul sanguin. Procesul recirculrii se poate repeta de mai multe ori. !! Acestea sunt limfocitele cu memorie.

Clasificarea limfocitelor. Dei asemntoare din punct de vedere morfologic n microscopia optic, studiile imunohistochimice i la microscopul electronic, au artat c limfocitele reprezint o populaie heterogen, cu celule de diferite mrimi, cu via i caracteristici imunologice variate. Morfofuncional, limfocitele se mpart n 3 clase : Limfocitele B sau timoindependente (10-20%) Limfocitele T sau timodependente (60-70%) Limfocitele citolitice non B, timoindependente (non B, non T) (10-15%)

1. 2. 3.

LIMFOCITUL B

(TIMOINDEPENDENT)

Limfocitele B se formeaz dup natere n mduva hematogen de unde migreaz n:

organele limfoide periferice (splin, ganglioni limfatici, amigdale, apendice), structurile limfoide ale tubului digestiv (GALT=gut associated lymphoid tissue), structurile limfoide din cile respiratorii (BALT=bronchus associated lymphoid tissue), unde se localizeaz n anumite zone numite timoindependente.

Ca i dimensiune, limfocitul B este puin mai mare dect limfocitul T. Ultrastructural s-a observat c membrana celular a limfocitului B prezint un numr mare de microvili ce conin receptori pentru antigene. Limfocitul B are capacitatea de a secreta imunoglobuline dup transformarea sa n plasmocit. n acest fel contribuie la realizarea imunitii umorale a organismului mediat prin anticorpi.

LIMFOCITUL T (TIMODEPENDENT) n viaa intrauterin, L T migreaz de la nivelul - ficatului, - splinei timus (se maturizeaz). - mduvei hematogene. La nivelul timusului se difereniaz diferit, sub influena unor factori timici (secretai de ctre celulele stromale de tip epitelial) : - timozina, - timopoietina, - factorul de difereniere timocitar in acest proces de difereniere a limfocitelor T, au loc modificri nucleare /citoplasmatice pierderea sau ctigarea unor proprieti.

Limfocitele T din corticala lobilor timici (85%) : se divid rapid, au pe suprafa antigenii sistemului major de histocompatibilitate (HLA) , sunt sensibile la corticosteroizi fiind celule tinere. Limfocitele T localizate n medular : se divid lent, au puini antigeni HLA pe suprafaa lor, sunt rezistente la corticosteroizi fiind celule mature.

Din timus (organ limfoid central) L T migreaz n organele limfoide secundare unde se cantoneaz n anumite zone, numite zone timodependente :

tecile limfoide periarteriolare din splin, zona paracortical a ganglionului limfatic, infiltratul limfoid difuz al amigdalelor, al apendicelui i plcilor Peyer.

Ultrastructural membrana celular prezint - foarte rari i mici microvili, - un numr relativ redus de receptori membrana LT apare mult mai neted comparativ cu cea a limfocitului B.
Majoritatea limfocitelor T au receptori pentru poriunea FC - a Ig G - a formei monomerice a Ig M. Receptorii limfocitelor sunt dimeri (dou lanuri pp ) legai disulfidic i ancorai de o protein membranar = CD3 . n afara acesteia, membrana mai prezint i alte proteine ca : CD4, CD8, CD28, CD43. Limfocitele T secret unele substane numite limfokine i interleukine, participnd la realizarea imunitii mediate celular.

Exist mai multe subtipuri funcionale de LT :

limfocite T reglatoare ce recunosc antigenii HLA : - limfocitele T helper aparin subsetului CD4 ele activeaz n mod special transformarea LB in plasmocit. - limfocitele T supresoare aparin subsetului CD8 ele previn sau inhib activarea LB i T dup contactul acestora cu antigenul. limfocite T efectoare, reprezentate de LT citolitice, citotoxice, killer ce aparin subsetului CD8 ele distrug celulele recunoscute ca strine dup ce au fost stimulate i sunt implicate n : *reaciile alergice tardive, *rejetul de organe, *boli autoimune ,*unele tumori maligne).

LIMFOCITELE CITOLITICE NON B, NON T Formeaz a treia categorie de limfocite =limfocite nule. Nu prezint pe suprafaa lor : - receptori antigen-specifici - imunoglobuline. Au dimensiuni mai mari comparativ cu restul L circulante. Exist dou subpopulaii de limfocite non B, non T : Limfocitele K (killer) distrug celulele ai cror antigeni de suprafa sunt complexai de anticorpi. Nu fagociteaz. Limfocitele NK ( natural killer) distrug celulele-int ai cror antigeni nu au fost reinui de sistemul imun i distrug uor celulele tumorale.

!!! Diagnostic diferential LT - LB :

Electronomicroscopic : - LT prezint o suprafa celular mai neted - LB prezint numeroase microviloziti; Imunohistochimic, pe baza receptorilor de suprafa pentru LT (CD3, CD4, CD8); Rozetarea spontan a LT cu hematiile de oaie; Histochimic, prin activitatea pozitiv a LT pentru alfa-naftil-acetat-esteraz.

1.

Funciile limfocitelor : Prezint mobilitate tisular migrarea prin membranele bazale ale epiteliilor printre celulele epiteliilor de acoperire ale tubului digestiv i urinar (teliolimfocite). Se pot ataa altor celule : *macrofage, *celule epiteliale, *celule tumorale, dispunndu-se n coroan n jurul acestora, proces = peripolesis, proces ce faciliteaz schimbul informaional. Pot ptrunde n citoplasma altor celule = emperipolesis (celulele hepatice, celulele intestinale, celulele canceroase).
Limfocitele sunt celulele pivot ale reaciilor imune de tip celular (LT) i de tip umoral (LB), avnd capacitatea de a recunoate: - proteinele proprii organismului - proteinele strine, mpotriva crora secret limfokine i respectiv anticorpi.

2.

3.

MONOCITELE Monocitul = leucocit mononuclear /agranulocitar.


a.

Numar. Monocitele reprezint 6-8% din leucocitele periferice. Creterea numrului de monocite = monocitoz : *neoplazii, *infecii bacteriene (TBC, febr tifoid). Scderea numrului de monocite = monocitopenie : n toate formele de insuficien medular.

b.

Forma celulei : rotunjita. Diametrul monocitului= 20-25 m cea mai mare celul ntlnit n mod normal n sngele periferic : gigantul sanguin.

c.

d. Structura monocitului. Monocitul este alctuit din membran, citoplasm i nucleu. Nucleul este nesegmentat, apare adeseori reniform. Cromatina are un aranjament particular, asemntor cu o tabl de ah - heterocromatina = zonele intunecate - eucromatina = zonele clare. Citoplasma este abundent, bazofil albastrucenuiu n coloraia MGG ( cerul nainte de furtun). n citoplasm se gsesc : * organite celulare relativ abundente (ribozomi / poliribozomi, complex Golgi, mitocondrii, lizozomi), *granule azurofile concentrate n scobitura nucleului.

Histochimic s-au evideniat la nivelul citoplasmei numeroase activiti enzimatice pentru : - fosfataz acid, - fosfataz alcalin, - peroxidaz, - esteraze nespecifice. Caracteristic monocitele conin i dou enzime - lipaz - esteraz, capabile de a distruge capsula ceroas a bacteriilor.

IMAGINE ELECTRONOMICROSCOPIC A UNUI MONOCIT. X22000

Se observ : complexul Golgi (G), mitocondriile (M), granulele azurofile (A), RER slab dezvoltat, rari ribozomi liberi (R).

Membrana celular = lipoproteic . Prezint receptori pentru Ig i pentru complement. Prezint numeroase *microviloziti, *vezicule de pinocitoz i de* micropinocitoz. Membrana emite pseudopode monocitul se deplaseaz n afara vasului. e. Cinetica monocitelor. Monocitele se formeaz n mduva roie hematogen, dintr-un precursor comun cu granulocitele (CFU-GM). Din mduv snge esuturi :se transform n macrofage (procesul de transformare n macrofage este nsoit de modificri morfologice, metabolice , de coninut enzimatic.

Funciile monocitelor :
1.

Macrofagul interacioneaz cu limfocitul = proces esenial pentru imunitatea celular. Activarea macrofagelor este determinat de limfokine, fenomen care se produce la locul invaziei antigenului. Monocitele macrofage dup ce au prsit sngele circulant, fagocitnd particule de talie mare: *bacterii, *virusuri, *complexe antigen-anticorp, *materii anorganice, *celule i resturi celulare. Distrugerea acestora se realizeaz cu ajutorul enzimelor lizozomale.

2.

3.

n condiiile unor antigene sau substane proprii degradate, de dimensiuni mari, macrofagele fuzioneaz, dnd natere celulelor multinucleate. Macrofagele sintetizeaz i secret : - hidrolaze acide, - lizozim, - proteaze, - prostaglandine, - componente ale complementului, - stimulatori ai celulelor medulare, - substane care regleaz coagularea.

4.

PLACHETELE SANGUINE Plachetele sanguine = elemente anucleate Termenul de trombocit = incorect datorit lipsei nucleului. a. Numar. Plachetele sanguine se gsesc n numr de 150.000-400.000/ml n sngele periferic. Creterea numrului de plachete sanguine = trombocitoz: mai rar ntlnit, de obicei reactiv (poate s apar dup hemoragii). Scderea numrului de plachete sanguine= trombocitopeni: - tulburri de producie (deficit de vitamina B12 i acid folic), - tulburri de distribuie (splenomegalie), - tulburri de distrucie (purpur trombocitopenic, coagulare intravascular diseminat).

b. Forma plachetei : * elipsoid, de lentil biconvex - atunci cnd se afl n stare proaspt n vasele sanguine. * forme diferite: coluroase ca o stea, discoidal, poligonal, forma plachetei depinznd de gradul de uscare a frotiului; apar sub form de agregate i mai rar n mod individual.

c. Diametrul trombocitului = 3-5 m cele mai mici elemente sanguine.

d. Structura plachetei sanguine. Este un fragment de citoplasm, fr nucleu, nconjurat de o membran.


Citoplasma este format dintr-o: - zon central ntunecat, fin granular = granulomer - zon periferic mai clar = hialomer.

1. Granulomerul = zona central electronodens, format dintr-un ansamblu de granule fine, vacuole, mitocondrii i glicogen. Ultramicroscopic au fost identificate urmtoarele tipuri de granule : Granule alfa diametrul = 300-500 nm; conin : *fibrinogen,* factor de cretere de origine plachetar, *proteine plachetare specifice. Granule delta diametrul = 250-300 nm; conin: * *ioni de calciu,* serotonin (5-hidroxitriptamin), ADP, ATP. Granule lambda diametrul = 175-250 nm; conin : *enzime lizozomale (hidrolaze acide, fosfataz acid, beta-glucuronidaz)

2.

Hialomerul este ectoplasma periferic ce are un aspect omogen, uor acidofil. Conine : - microtubuli, - microfilamente - proteine implicate n procesul de coagulare (trombostenin), - glicozaminoglicani i - glicoproteine.

Microtubulii se gsesc la periferia plachetei, unde formeaz o band inelar ; rol : meninerea formei ovalare a plachetei. Microfilamentele sunt formate din actin i miozin, aceasta din urm fiind diferit de cea muscular. Contracia microfilamentelor modificarea formei plachetei n perioadele de secreie/ retracie a cheagului sanguin. Tot la nivelul hialomerului, se gsesc nite tubi electronodeni de form neregulat ce alctuiesc un - sistem tubular dens - sistem canalicular deschis ce se conecteaz cu invaginaiile membranei i prin care se realizeaz eliminarea moleculelor active.

Din punct de vedere biochimic, plachetele conin :

Proteine (52% din greutatea uscat), din care face parte trombostenina, o protein contractil ce are activitate ATP-azic i care este activat de ionii de calciu i de magneziu. Lipide (14% din greutatea uscat), reprezentate de fosfolipide (76%), o lipoprotein termostabil, factorul 3 plachetar. Hidrai de carbon (8% din greutatea uscat).

Membrana plachetei g= 7-19 nm, lipoproteic, acoperit de un strat bogat n glicozaminoglicani i glicoproteine, cu o grosime de 15-20 nm, ce permite absorbia unor proteine plasmatice (fibrinogen, factorul 8 al coagulrii). Membrana joac un rol important n adeziunea plachetar, la peretele vascular lezat, - alte trombocite, - suprafeele strine. Membrana conine locusuri antigenice i receptori pentru factorii stimulatori sau inhibitori ai agregrii plachetare.

Cinetica plachetelor sanguine. Plachetele se formeaz n mduva roie hematogen sngele periferic, unde au o durat de via de 8-12 zile trombocitele sunt reinute i distruse n sistemul macrofag al organismului, cu precdere n cel splenic.

Funciile plachetelor sanguine sunt : 1. ndeplinesc rol important n hemostaza i coagularea sngelui. Aceste fenomene complexe se desfoar n patru timpi ce presupun : *activarea, *adeziunea, *agregarea, *contracia plachetelor. Activarea. Exist substane ce activeaz plachetele, cel mai important fiind colagenul sub form polimerizat, a crui suprafa este electronegativ. n leziunile vasculare, sngele este n contact direct cu colagenul membranei bazale subendoteliale i cu cel din esutul conjunctiv vecin.

Adeziunea. Plachetele activate se balonizeaz, emit pseudopode i elibereaz anumite substane active: - serotonina ce produce vasoconstricie, - ADP-ul, - factorul 4. Prin pseudopode, plachetele ader la spaiul subendotelial. Agregarea. Are loc n prezena ADP-ului i a altor substane active (trombina). Plachetele prezint la nivelul membranei receptori pentru fibrinogen, prin intermediul cruia ele se leag.

Contracia este momentul n care are loc trombocitoliza. Prin acumulare de ap, plachetele se balonizeaz endomembranele se rup, exulzndu-se citoplasma mpreun cu substanele active pe care le conine. Aceast faz este declanat de trombin, enzim ce provine din protrombina plasmatic de origine hepatic prin aciunea factorului 3 plachetar. Factorii eliberai, asociai cu trombina, au rol n polimerizatea fibrinogenului solubil ntr-o reea de fibrin insolubil, n ochiurile creia se gsesc elementele figurate sanguine. Trombostenina de origine plachetar este responsabil de retracia cheagului. La sfrit, fibrina din trombus este degradat prin fibrinoliz i tromboliz de ctre sistemul plasminogenplasmine.

2.

Trombocitele au rol n procesul inflamator, acumulndu-se la locul invaziei microbiene, unde elibereaz factori care cresc permeabilitatea peretelui vascular i sunt chemotactici pentru granulocite.

3. Au rol n vindecarea plgilor, prin eliberarea unor factori care stimuleaz creterea *fibrelor musculare netede,* a fibroblastelor din piele i *a celulelor endoteliale. De asemenea stimuleaz sinteza colagenului n fibroblaste.

4. Intervin n reaciile imune, rspunznd prin

eliberare de mediatori la stimularea produs de complexele imune.