Tehnici de fixare si colorare a rizopodelor parazite
Masterand NISTOR ANCUTA
CUPRINS Introducere Subîncrengătura Rizopode Clasa Amibele nude Clasa Testaceele amebele cu cochilie (Testacea) Clasa Foraminifere (Foraminifera) Clasa Radiolaria Clasa Acantharia Clasa Amibele parzite Amibele-intestinale şi rolul lor în viaţa omului. Rezistenţa la condiţiile nefavorabile INTRODUCERE
Rizopodele reprezintă numeroase animale de diferite forme, care se mişcă
cu ajutorul pseudopodelor, iar citoplasma corpului lor nu este diferenţiată în zone constante. În componenţa subîncrengăturii Rhizopodea intră 3 clase: 1. Amebele (Amoebozoa). 2. Testaceele (Testacea). 3. Foraminiferele (Foraminifera). Clasa Amibele nude (Amoebozoa) Reprezintă cele mai inferioare rizopode. Corpul formează pseudopode simple, lipsite de schelet. Majoritatea amebelor populează bazinile de apă dulce. Unele specii trăiesc în mări, altele – în solul umed. Printre amebe se întâlnesc şi unele specii parazite. Morfologia corpului. Dimensiunile amebelor sunt foarte variate: de la 10-15 mkm până la 2-3 mm. Majoritatea amebelor conţin un singur nucleu, însă se întâlnesc şi specii polinucleare. Un reprezentant tipic al ordinului este ameba comună (Amoeba proteus). Dimensiunile ei sunt relativ mari, atingând circa 0.5mm . La exterior corpul amebei este acoperit cu o membrană citoplasmatică fină (7-5 nm), după care urmează un strat transparent, compact, numit ectoplasmă. Partea centrală a celulei este ocupată de un strat vâscos, de culoare mai închisă, granulos, numit endoplasmă, care ocupă masa principală a corpului amebei. Locomoţia. Fiind studiată la microscop, ameba reprezintă o celulă de formă neregulată, de la care pornesc numeroase excrescenţe citoplasmaticce de diferite forme, numite pseudopode sau picioruşe false. Foarte uşor se poate observa, cum are loc schimbarea permanentă a formei şi dimensiunilor pseudopodelor. Rezistenţa la condiţiile nefavorabile Numeroase specii de amebe solitare (în deosebi acele care trăiesc în sol) au capacitatea de a se închista. Aceasta are loc atunci, când ele nimeresc în condiţii nefavorabile ale mediului înconjurător (de ex.: la uscarea solului). La închistare ameba îşi absoarbe pseudopodele, se rotungeşte şi elimină o membrană dublă tare de natură proteică Fig. 3). În asemenea stare amebele se pot păstra timp îndelungat, uneori chiar şi luni la rând, iar apoi din nou pot trece la modul activ de Fig. 3. Chistul amebei Acanthamoeba viaţă. palestinensis Amebele-intestinale şi rolul lor în viaţa omului. În intestinul omului şi al unui şir de animale vertebrate se conţine un număr mare de specii de amebe parazite, care se nutresc cu conţinutul lui, cu diferite bacterii şi care în majoritatea cazurilor nu aduc nici o daună gazdei. Ca exemplu poate servi ameba intestinală a omului – Entamoeba coli (Fig.5). Însă printre amebele, ce populează intestinul omului, se întâlneşte şi o specie deosebită – ameba-dizenterică Fig. 5. Entamoeba coli – Entamoeba histolytica, care poate fi A. Trofozoid; B. Prechist; C-F. agentul unei forme grave de colită Statiile succesive de matirizare intestinală, numită amebiază. ale chistului (de la un nucleu la opt) Acest protozoar reprezintă o amebă cu celula de 20-30 mkm în diametru şi care posedă organite de mişcare (Fig. 6). Ameba- dizenterică populează regiunea intestinului gros la om şi de obicei se nutreşte cu diferite bacterii, fără a aduce vre-o daună gazdei. Acest stadiu este numit trofozoid activ. Un asemenea fenomen, când organismul patogen nu-şi manifestă acţiunea ca dăinătoare, se numeşte stare de vector al infecţiei. Însă adesea ameba dizenterică se comportă în alt mod: celulele ei pătrund sub membrana mucoasă a intestinului, încep să se nutrească cu particulele elementare de sânge, înmulţindu-se intens. Astfel, pe membrana mucoasă a intestinului apar răni, ce cauzează o diaree gravă cu eliminări de sânge (colită). Ameba dizenterică poate provoca şi absces hepatic. Fig. 6. Entamoeba histolytica
A. Trofozoid activ; B. Stadiu
de prechist; C-I. Chisturi cu raza mică; J-K. Chisturi cu raza mare; C, D, E, F, J. Chisturi cu un nucleu; G, H, I. Chisturi cu două nuclee; K. Chist cu patru nuclee.
La cercetarea secţiunilor ultrafine în structura chisturilor se observă nişte
incluziuni deosebite, care se colorează intens. Aceştia sunt corpusculii cromatici. În infecţii acute omul bolnav elimină zilnic împreună cu excrementele circa 300 mln. de chisturi. Entamoeba dysenteriae: -marime intre 20-30 de microni, este o amiba vioaie cu miscari active, citoplasma prezinta diferenta neta intre ectoplasma si endoplasma. Ectoplasma refringenta are aspect sticlos, iar endoplasma granulara contine bacterii, resturi celulare si eritrocite. Nucleul nu este bine vizibil pe preparatele proaspete se pune in evidenta dupa fixare si colorare cu hematoxilina ferica. Are o forma rotunda, este situat excentric, prezinta o membrana nucleara subtire, granulatii cromatice reduse iar cariozomul este dispus central. BIBLIOGRAFIE 1.Parazitologie medicala- Simona Radulescu 2. Parazitologie: caiet de lucrari practice- Codruta Nemet 3. Ghid de diagnostic parazitologic- Vasile Cozma 4. Parazitologie vaterinara- Cristina Terinte 5. Microbiologie si parazitologie medicala- Gheorghe Dinache 6. Laboratorul Clinic- Petru Dancescu