Determinarea contaminarii bacteriene

a aerului, suprafetelor si obiectelor

Cunoasterea gradului de contaminare a aerului, suprafetelor si
obiectelor cu microorganisme constiuie un criteriu important de
apreciere a conditiilor de igiena. Determinarile se fac in special pentru
acele spatii pentru care exista un risc crescut de transmitere a bolilor
infectioase.
Determinarea germenilor din aer
Aerul nu are o microflora proprie. In aer se gasesc totusi in permanenta
germeni aflati in suspensie: virusuri, bacterii, fungi. Acesti germeni
provin din mediul extern(germeni care se dezvolta la 15!!"C
aeromicroflora criofil#, sau sunt de provenienta umana sau
animala(germeni care se dezvolta la $%"Caeromicroflora mezofil#.
Acestia din urma sunt germenii care prezinta interes din punct de vedere
al importantei determinarii lor, pentru ca prezenta lor este legata de
posibilitatea transmiterii aerogene a unor boli infectioase. &ermenii
mezofili de origine umana eliminati in aer sunt saprofiti, conditionat
patogeni sau strict patogeni si provin din: nazofaringe si cavitatea
bucala, mai rar din tra'ee si bron'iile mari ( de pe suprafata
cutanata(intacta sau lezata# ( de)ecte.
Analiza bacteriologica a aerului nu se face in scop de diagnostic
epidemiologic ci de apreciere a potentialului ambiantei de a permite
transmiterea aerogena a infectiilor.
Indicatorii bacteriologici de contaminare a aerului
numarul total de germeni mezofili din aer, care se dezvolta la $%"C,
reprezinta un indicator global al aprecierii conditiilor de igiena dintro
incapere.
numarul de streptococi 'emolitici reprezinta un indicator al
contaminarii aerului cu flora nazofaringiana si bucala iar prezen a
tulpinilor * 'emolitice indica prezenta unei persoane bolnave sau
purtatoare de germen.
numarul de stafilococi (ma)oritatea sunt germeni saprofi i care
populeaz+ c+ile aeriene sau tegumentele umane sau animale# reprezinta
un indicator cu semnificatie apropiata de cea a microrganismelor
mezofile, indicand mai pr,cis originea umana sau animala a
contaminarii.
numarul de germenii coliformi (germeni de origine intestinal+, #indica
un grad mare de insalubrizare a mediului dintro inc+pere.

Metode de determinare
Etapele specifice sunt:
recoltarea germenilor din aer(
insamantarea si incubarea(
interpretarea rezultatelor.
Recoltarea prin sedimentare metoda Koch
consta in retinerea germenilor pe suprafata unor cutii -etri ce contin
medii de cultura solide.
cutiile -etri se expun la locul determinarii timp de 5./ minute, 0n
func ie de gradul contamin+rii.
dupa terminarea expunerii se inc'id si se incubeaza la termostat la $%"C
1!2 ore.
se numara coloniile dezvoltate (fiecare germen da nastere la o colonie#.
Avanta)e : metoda simpla ce permite un numar mare de derminari.
Dezavanta)e : determina doar germenii sedimentati in unitatea de timp
cat a fost expusa cutia -etri, rezultatele neindicand gradul real al
contaminarii aerului.
Recoltarea prin aspiratie
Dispozitivul de recoltare este alcatuit din sistemul de aspiratie,
debitmetrul si sistemul de retinere a germenilor.
3etinerea germenilor in acest tip de metoda se realizeaza prin filtrare,
barbotare sau impact.
a. recoltarea prin aspiratie cu retinere prin filtrare: se folosesc filtre
-etri din nisip de cuart steril sau filtre solubile care dupa recoltare
se spala cu solutii izotone sterile care vor fi insamantate ulterior in
diferite dilutii.
Aplicabilitate mai mare o au membranele filtrante care dupa
aspirarea aerului sunt aplicate direct pe suprafata mediului de
cultura.
b. 3ecoltarea prin aspiratie cu retinere prin barbotare: aerul aspirat
este barbotat prin solutia izotona sterila ce se afla in vasul de
barbotare. Aceasta solutie se insamanteaza pe suprafata unui
mediu de cultura solid .
c. 3ecoltarea prin aspiratie cu retinere prin impact: aerul aspirat este
proiectat direct pe suprafata mediului de cultura solid ce va retine
germenii aflati in suspensie in aerul aspirat.
4oate metodele mentionate au ca etape urmatoare retinerii pe cea a
incubarii si interpretarii rezultatelor.
5ediile de cultura folosite sunt medii solide fiind diferite in raport cu
indicatorul bacteriologic cercetat:
geloza nutritiva sau geloza 6sange pentru determinarea numarului
total de germeni mezofili.
geloza 6sange cu violet de gentiana pentru determinarea
numarului de streptococci .
geloza nutritiva sau geloza 6sange pentru determinarea
numarului de stafilococi.
Recoltarea prin electroprecipitare 6 inducerea de sarcini electrice
cu a)utorul unor electrozi de depunere a eza i pe un mediu de
cultur+ solid.
Interpretare :
7umarul total de germeni mezofili:
incaperi in care se desfasoara activitati umane: sub !5//1m8 aer.
colectivitati de copii: sub 15//1m8aer
industrie alimentara: sub .//1m8aer.
spitale: sub .//1m8 aer in saloane( sub 5//1m8 aer in sali cu risc
crescut de transmitere a infectiilor(sali de tratamente, de
pansamente, de nasteri, bucatarii dietetice# ( sub $//1m8 aer in
blocul operator.
7umarul de streptococi1stafilococi (tulpini 'emolitice#: se admit maxim
1!9 din numarul total de germeni mezofili si semnifica o contaminare
de origine umana. 7u se admit in unit+ ile sanitare.
7umarul de coliformi: nu se admit iar prezenta lor semnifica un mediu
insalubru.
Determinarea contaminarii bacteriene a suprafetelor si obiectelor
-entru aprecierea gradului de contaminare a suprafetelor si obiectelor se
folosesc : aceeasi indicatori dar cu precizarea ca germenii coliformi
devin in acest caz indicator obligator. :tapele determinarii sunt
aceleasi : recoltare, insamantare, incubare, interpretare.
5etode de recoltare
Stergerea cu tampoane sterile:
;uprafata supusa analizei se apreciaza cu a)utorul unor sabloane sterile
ce vor delimita o suprafata cunocuta. <data stabilita, suprafata va fi
stearsa cu un tampon de vata sau tifon sterilizat(asemanator cu
ecuvioanele folosite in recoltarea exudatului faringian#, uscat sau usor
umezit in solutia izotona sterila. Dupa recoltare tampoul se introduce
intrun flacon ce contine 1/ ml solutie izotona sterila. ;e agita si din
suspensie se vor face diverse dilutii pentru insamantare. ;e face apoi
incubarea si numararea coloniilor urmata de interpretare
.
Spalarea suprafetelor sau obiectelor
;e spala( mai ales mainile#cu solutie izotona sterila care va fi apoi
insamantata pe mediu de cultura si incubata.
=tilizarea de pelicule adezive sterilizate ce se aplica pe suprafata de
cercetat iar dupa recoltare se depun pe suprafata mediului de cultura
minim $/ secunde, dupa care se incubeaza.
Contactul direct cu mediul de cultura timp de minim 15 secunde,
urmata de incubare.
Interpretare:
7umar total de germeni mezofili:
salonsub 51cm>
sali cu risc crescutsub $1cm>
bloc operatorsub !1cm>
mainile c'irurgilor dupa spalaresub 1/1cm>
m?inile personalului ce efectueaza diferite proceduri pe bolnavsub
2/1cm>.
instrumente sterile absenti
< mana este considerata curata daca pe o suprafata de !,@ cm> sunt
determinati pana la 1 germene mezofil, relativ curata daca sunt
determinati pana la maxim 1// germeni mezofili si murdara daca sunt
determinati peste 1// germeni mezofili.
7u se admite prezenta germenilor : streptococi si stafilococi 'emolitici
si a germenilor coliformi.