1

Universitatea Tehnica Gh. Asachi Iasi

Facultatea de Inginerie Chimica i Protectia Mediului

CIMENTURI SI COMPOZITE PE BAZA DE COMPUSI

FOSFO-CALCICI SI POLIMERI BIOCOMPATIBILI.
SINTEZA SI CARACTERIZARE
RAPORT DE CERCETARE STIINTIFICA
1
Conducator Stiintific,
Prof.dr.chim. Neculai Aelenei
Doctorand,
Ing. Gabriel Dumitru Paduraru

2008

RAPORT DE CERCETARE STIINTIFICA

CIMENTURI SI COMPOZITE PE BAZA DE COMPUSI FOSFOCALCICI SI POLIMERI BIOCOMPATIBILI. SINTEZA SI
CARACTERIZARE
1. Obiectivele proiectului
Raportul de cercetare prezint o parte din rezultatele cercetrilor experimentale efectuate n
cadrul tezei de doctorat a crei tem este: NOI CIMENTURI BIOANORGANICE CU
UTILIZARE N MEDICINA RESTAURATIVA, respectiv, sinteza i caracterizarea unor noi
cimenturi pentru restaurri dentare i implanturi. Intenia noastr este aceea de a realiza compozite,
pe baz de ceramici bioactive i polimeri biocompatibili, cu proprieti mecanice, biocompatibile i
bioactive mbuntite.
La materialele fosfo-calcice se adaug polimeri n scopul de a se mbunti rezistena
mecanic, coeficientul de compresiune , dar i pentru creterea proprietilor osteoconductive. Pe
scurt, o combinare a celor dou tipuri de material permite obinerea unui compozit cu proprieti mai
bune dect cele ale fiecrui component n parte. Un aspect important al acestor compozite este
legtura interfacial dintre ceramic i polimer, cu alte cuvinte - biocompatibilitatea fazelor. Dac
adeziunea celor dou faze nu este corespunztoare proprietile mecanice sufer.
Pentru obinerea noilor materiale se vor utiliza diverse tipuri de polizaharide, polimeri
naturali cu biocompatibilitate avansat, cum ar fi chitosanul, acidul alginic, carboximetilceluloza,
care vor fi cuplate, prin procedee i metode variate, cu cimenturi fosfo-calcice de diverse compoziii.
Intenionm s obinem cimenturi injectabile pentru aplicaii ortopedice i dentale, cimenturi
cu auto-ntrire,materiale implantabile, materiale poroase pentru structuri scheletale osoase
Polimerii, naturali i sintetici, reprezint o clasa de materiale cu multiple aplicaii n
medicin, inclusiv n domeniul protezelor osoase. Aceste aplicaii sunt realizabile graie posibilitii
modificrii n limite foarte largi a proprietilor fizico-chimice avnd ca finalitate obinerea unor
materiale cu proprieti mecanice si chimice dorite. Astfel se pot obine polimeri cu proprieti
visco-elastice similare cu cele ale oaselor, care s nu produc suprasolicitri distructive. Totui,
astfel de polimeri, utilizai singuri, sunt prea puin rezisteni pentru a fi folosii ca implanturi
portante, fiind recomandai doar in unele situaii clinice cum ar fi placi de rigidizare sau articulaii
fisurate. n plus, polimerii pot suferi degradarea n bloc, aceasta avnd ca rezultat o micorare a
proprietilor mecanice i scderea local a pH-ului ceea ce accelereaz degradarea (n manier
auto-catalitic) i poate conduce la un proces inflamator. Ca un alt neajuns a utilizrii polimerilor
singulari este faptul c acetia nu posed proprieti osteoconductive i bioactive, care s stimuleze
formarea unor legturi trainice os/implant.
Cimenturile fosfo-calcice reprezint o clasa important de materiale utilizabile ca nlocuitori
de materiale osoase graie faptului c acestea reunesc ntr-un singur material trei proprieti foarte
importante: osteoconductivitatea, biocompatibilitatea i maleabilitatea (plasticitatea), proprieti care
favorizeaz creterea materialului osos. Cimenturile fosfo-calcice sunt mai atractive dect
ceramicile pe baz de hidroxiapatit deoarece ele pot fi modelate n forme variate pentru a umple

3
cavitile complexe din oase, n special cariile dentare. Fiind ne-toxice i ne-cancerigene sunt mai
recomandate dect cimenturile pe baz de polimeri (polimetilmetacrilat). Pe lng acestea,
cimeturile fosfo-calcice mai au i alte proprieti favorabile: ntrire ne-exoterm, contracie
neglijabil i resorbie excelent in vivo.

2. Stadiul actual al cercetrilor stiintifice n domeniul

cimenturilor bioanorganice
Unele dintre caracteristicile materialelor fosfo-calcice au fcut ca acestea sa constituie
obiectul utilizrii lor n foarte multe aplicaii practice, ca nlocuitori osoi ideali sau material
restaurativ. Totui, datorit unei rezistenei mecanice destul de reduse comparativ cu cea a oaselor
naturale, aplicaiile ceramicilor fosfo-calcice au fost limitate la zone care nu sunt supuse unor
compresiuni sau traciuni puternice [1-3]. S-a sugerat utilizarea unor reele matriceale pentru
realizarea nlocuitorilor osoi, utilizarea unor compozite HA/polimer sintetic sau HA/polimer natural
prin care s se obin materiale cu proprieti similare cu ale oaselor naturale. n ultimii ani se
remarc o revigorare nsemnat a studiilor n aceast direcie. Dintre noile materiale realizate n
ultimele decenii o parte sunt prezentate n continuare

2.1. Cimenturi fosfo-calcice

In 1982, LeGeros s.a. [7] au prezentat o serie de studii preliminare asupra posibilitii
extinderii cimenturilor fosfo-calcice, cu raiunea ca astfel de cimenturi s prezinte ntr-o singur
formulare urmtoarele proprieti : compatibilitate cu materialul osos natural, ajustabilitatea
compoziiei (cu sau fr F, Mg, Sr, etc.), aspectul estetic. Cimenturile fosfo-calcice au fost preparate
prin reacia acidului fosforic diluat (H 3PO4) cu fosfai de calciu apatitici [7]. Brown i Chow au
patentat o metod de preparare a cimentului fosfo-calcic prin reacia fosfatului tetracalcic
(Ca4(PO4)2O) cu fosfatul acid de calciu (CaHPO4.2H2O)

2.2 Implanturi metalice acoperite cu Hidroxiapatit sau cu Bioglass

Principala limitare limitare a ceramicilor fosfo-calcice este lipsa de rezisten a acestora,
deficien care favorizeaz posibilitatea de fractur i distrugere n cazul folosirii lor in articulaii [13, 8]. Unele dintre studiile efectuate pentru depirea acestui neajuns au fost focalizate spre crearea
de implanturi metalice acoperite cu HA, care s combine proprietile de rezisten ale metalului cu
adaptabilitatea hidroxilapatitei sau bioglass-ului fa de materialul osos natural [9-14].

2.3.Compozite fosfai de calciu/polimeri sintetici i naturali

Combinarea unei ceramici bioactive cu polimeri are dou scopuri : primul este mbuntirea
proprietilor mecanice ale compozitului [14-16] iar cel de al doilea este intensificarea proprietilor
osteoconductive ale polimerilor [17-19]. Polimerii sintetici care sunt studiai sunt fie resorbabili (ca
acidul polilactic, acidul poliglicolic i copolimeri ai acestora) fie ne-resorbabili ( polietilen,
polimetilmetacrilat, polimetilacrilat). In prezent se caut tot ai mult s se utilizeze polimeri naturali
sau derivai din acetia, care prezint biocompatibiltate avansat

2.4. Compozite fosfai de calciu/matrice proteic

Proprietile osteogenice ale proteinelor morfogenetice din matricea osului demineralizat au
fost foarte bine analizate [20,21]. Combinaia dintre un fosfat de calciu sintetic i o matrice proteic
coninnd factori care promoveaz formarea materialului osos poate fi un biomaterial ideal pentru
nlocuitori de oase. Astfel de compozite sunt formate n general cu colagen, care n combinare cu
hidroxilapatita sintetic, n anumite proporii, conduc la materiale cu proprieti fizice, chimice i
mecanice foarte apropiate cu cele ale oaselor.
Raiunea utilizrii materialelor fosfo-calcice pentru grefe osoase sau nlocuitori de organe
osoase este bazat pe faptul c faza anorganic a oaselor i dinilor (email, dentina, ciment, os) este
un fosfat de calciu apatitic. Totui, compararea unora dintre proprietile fizico-chimice ale
ceramicilor pe baz de HA sau -TCP cu acelea ale apatitei biologice indic diferene apreciabile
att n privina cristalinitii ct i compoziiei. Unele din aceste diferene, incluznd si posibila
prezen a factorilor de cretere, pot explica marele succes al grefrilor cu os de la acelai pacient,
n comparaie cu ceramicile fosfo-calcice [1] Trebuie recunoscut totui c utilizarea materialelor
fosfo-calcice au avut cteva avantaje decisive n comparaie cu grefele autogene [22]. Materialele
fosfo-calcice sunt suficient de similare cu mineralele din oase i dini ceea ce fac aceste materiale
biocompatibile i osteoconductive. Compozitele din fosfai de calciu (HA sau-TCP) cu polimeri
biologici (colagen) sau sintetici (PMMA, acid polilactic, etc.) pot avea proprieti foarte apropiate
cu cele ale oaselor.

2.5 Cimenturi i compozite fosfo-calcice injectabile

5
Defectele osoase apar ntr-o ntreag varietate de situaii, iar reconstituirea lor pentru a
asigura integritatea mecanic a scheletului este un pas necesar n reabilitarea pacienilor. In multe
ocazii reconstituirea standard cea mai bun este auto-grefarea. Totui reconstituirea prin autogrefare are unele dezavantaje, cum ar fi necesitatea unei operaii suplimentare la locul extragerii
grefei, cantitatea limitat de gref care se poate extrage, forma diferit a grefei n raport cu cea
necesar i resorbia grefei [23-25]. n scopul reducerii sau eliminrii grefrilor, eforturi substaniale
au fost fcute n direcia gsirii unui nlocuitor artificial convenabil. Recent, odat cu avansarea
tehnicilor experimentale, una dintre noutile n ortopedie a fost dezvoltarea sistemelor injectabile,
care pot fi modelate lund forma cavitii i polimerizeaz sau se ntresc dup umplerea acesteia.
Astfel de dispozitive vor scurta timpul operaiei chirurgicale, minimaliznd efectele distructive
asupra atrofierii muchilor, micorarea dimensiunilor cicatricelor, reducerea durerilor postoperatorii, recuperare mai rapid i costuri mult mai sczute.
Iniial cele mai utilizate cimenturi injectabile au fost realizate pe baz de polimetacrilat de
metil (PMMA), dar acestea prezint neajunsul c sunt ne-degradabile, iar n timpul ntririi (prin
polimerizare) produc nclziri locale puternice care pot cauza necroza esutului nconjurtor [26].
Ulterior, s-au studiat sisteme injectabile alternative, cimenturi fosfo-calcice care prin auto-ntrire
formeaz hidroxiapatit - cu excelente proprieti osteoconductive [27-35], cu posibile utilizri n
restaurrile cranio-faciale i ortopedice.
Principiul formrii cimenturilor fosfo-calcice este ntrirea unor fosfai de calciu acizi sau
bazici sub aciunea unui mediu apos. Amestecarea fosfailor de calciu anhidri sub form de pulbere
cu un mediu umed, preparat cu ap distilat, conduce la o past care se auto-ntrete. Timpul de
ntrire poate fi ajustat prin adugarea unor inhibitori sau acceleratori la masa de ciment. Compoziia
chimic a cimentului ntrit depinde de raportul Ca/P n precursorii utilizai. In cazul formrii
hidroxilapatitei acest raport trebuie s fie 1,67. Cele mai multe aplicaii chirurgicale au fost fcute
utiliznd ciment fosfo-calcic n form de past , aplicndu-se amestecul direct n defectele din oase.
In cazul defectelor minore cu accesibilitate limitat se impune aplicarea materialului cu ajutorul
unor ace de sering sau cu aplicatori speciali. Procedeul se folosete i n cazul fixrii fracturilor,
umplerea canalelor rdcinilor dinilor, etanarea unor perforaii n endodonie. Viscozitii mare a
pastei poate fi una dintre limitrile utilizrii cimenturilor fosfo-calcice, aceasta fiind adesea evitat
prin creterea raportului mediu lichid/pulbere solid dar i aceasta pn la o anumit limit.
Raporturi de diluare mari duc la creterea timpului de ntrire uneori pn la valori inacceptabile.
Proprietile de ntrire sunt afectate i de prezena sngelui sau a fluidelor interstiiale din corp.

6
Komath i Varma [36] au realizat un ciment fosfo-calcic apatitic, faza solid fiind un
amestec de particule de fosfat tetracalcic (Ca 4(PO4)2O) i fosfat dicalcic (CaHPO4.2H2O) (raport
molar 1 :1) iar mediul lichid fiind o soluie 0,2 M de Na2HPO4 (accelerator pentru ntrire). La
compoziia de baz a cimentului au fost adugai ageni de gelifiere (n proporie de 1 - 3 %), n
scopul mbuntirii proprietilor de coeziune i de manipulare i obinerea unui fluid consistent
injectabil n totalitate. Ca ageni de gelifiere s-au utilizat : gelatin, derivai de celuloz i alginai.
Dintre acetia glicerina i derivaii de celuloz s-au dovedit a fi mai puin proprii mpiedicnd
conversia totala a precursorilor la hidroxiapatit. Alginaii nu afecteaz drastic formarea cimentului
i s-au dovedit proprii pentru prepararea unor paste consistente si fluide. Reeta optim pentru
obinerea cimentului complet injectabil a fost: amestecarea n raport echimolar a pulberilor de fosfat
tetracalcic i fosfat dicalcic dihidrat (particule cu diametrul de 100 m) cu 2% w/w alginat. Partea
lichida , preparat cu ap deionizat, a fost o soluie 0,2M de Na 2HPO4. Raportul optim de umectare
a fost de 0,8 mL/g. Analiza difraciei razelor X pentru cimentul obinut indic faptul c substanele
precursoare s-au transformat aproape total la hidroxiapatit
Mickiewicz [37] a studiat posibilitatea creterii rezistenei la compresiune a unui ciment
fosfo-calcic comercial prin ncorporarea unor polimeri n pasta de ciment. Ca material comercial a
utilizat cimentul BSMTM, iar ca material de inserie s-au folosit: polielectrolii, poli(etilenoxid) i
albumina din ser de bovin. Compozitele formulate cu policationii polietilen imin i clorhidrat de
polialilamin prezint rezisten la compresiune de 10 ori mai mare dect cea

a cimentului

comercial, n special n cazul policationilor cu mas molar mare. Compozitele care conin albumin
din ser de bovine prezint rezisten la coroziune dubl fa de cea a cimentului original, atunci
cnd concentraia aditivului este cuprins ntre 10 i 25% w/w. Studiile de raze X efectuate asupra
acestor compozite au evideniat faptul c odat cu creterea rezistenei la compresiune se micoreaz
dimensiunile cristalitelor. Aceasta nseamn c prin absorbia policationilor sau a albuminei este
inhibat creterea cristalelor. Studiile de microscopie electronic indic o microstructur mai dens
i mai coeziv.
Creterea rezistenei a fost atribuit i capacitii matricei polimere de a absorbi energie prin
deformare plastic i prin abilitatea polimerilor cu masa molar mare de a forma att puni ntre
cristale ct i reele cu alte lanuri. Adsorbia preferenial a polimerului la o fa oarecare a
cristalului face ca ulterior dezvoltarea cristalului s se fac ntr-o alt direcie (cretere anizotropic),
rezultnd o microstructur mai coeziv i mai interconectat. O a doua cauz a mbuntirii
coeziunii componentului anorganic al cimentului este formarea unor interaciuni chimice ntre

7
cationii polimerului i anionii de pe suprafaa apatitei, legndu-se astfel cristalele la lanurile
polimere.
Liu .a. [38] pentru obinerea unui ciment injectabil rezistent la compresiune au realizat un
ciment folosind pentru reinforsare (armare) chitosan. Chitosanul, o amino-polizaharid obinut prin
deacetilarea alcalin a chitinei

(un produs natural care se gsete n cochiliile creveilor sau

crabilor) este un polimer biocompatibil, biodegradabil [39] i osteoconductiv [40]. A fost utilizat i
n intervenii chirurgicale pentru reducerea pungilor periodontale [40-43]. Soluii de chitosan au fost
utilizate ca faz lichid pentru prepararea unor cimenturi fosfo-calcice [44-46]. Formularea propus
de ctre Liu i colab. este bazat pe amestecarea unei pulberi solide format din fosfat tricalcic cu o
soluie lichid coninnd chitosan, acid citric i glucoz. Compoziia fazei lichide a fost : 2%
chitosan, 20% glucoz i (10 25) % acid citric. Analiza spectrelor de raze X indic faptul c
produii finali din ciment sunt hidroxilapatita i mici cantiti de fosfat dicalcic anhidru , rezultai
prin dizolvarea fosfatului tricalcic conform reaciei :

4Ca3(PO4)2 + 2H2O Ca10(PO4)6(OH)2 + 2CaHPO4

Spectrele de raze X indic faptul c cele 4 probe au practic aceeai compoziie, care nu depinde de
cantitatea de acid citric introdus n lichidul de umectare a cimentului.
Msurtorile de rezisten la compresiune indic faptul c aceasta crete sensibil odat cu
creterea cantitii de acid citric n lichidul de umectare i totodat crete cu timpul de incubare .
Pentru aceleai probe s-au efectuat studii de bioactivitate (prin imersie n fluid uman simulat) i
citotoxicitate, rezultatul acestor teste indicnd faptul c cimenturile preparate au o bun bioactivitate
i citocompatibilitate.
Bigi, Bracci i Panzavolta [47] au introdus gelatin n scopul mbuntirii proprietilor de
ntrire al cimenturilor pe baz de fosfat tricalcic (-Ca3(PO4)2). Datorit proprietilor fosfatului
tricalcic, acesta este componentul de baz ntr-o serie de cimenturi fosfo-calcice bioactive. Fosfatul
tricalcic este mult mai solubil dect hidroxilapatita i hidrolizeaz n soluii apoase printr-un
mecanism care implic dizolvarea i precipitarea succesiv a unei faze mai stabil. Produii de
hidroliz pot fi: fosfatul dicalcic dihidrat (CaHPO4.2H2O), fosfatul octocalcic (Ca8H2(PO4)6.5H2O)
sau hidroxiapatit deficient n calciu depinznd de condiiile de lucru [73-75]. In condiiile
fiziologice de pH (7,4) i temperatur (37 oC) produsul de hidroliz este hidroxilapatita deficient
iar viteza reaciei de formare poate fi modulat prin adugarea a mici cantiti de alte sruri de calciu
[49] dar i prin introducerea unor aditivi naturali sau sintetici printre care i gelatina. Gelatina se
obine prin degradarea fizico-chimic sau termic a colagenului principala protein a esutului

8
osos. La temperaturi de aproximativ 40 oC soluiile apoase de gelatin sunt n stare de sol i sufer
gelifierea cnd sunt rcite la temperatura camerei. Este de ateptat ca prin adugarea gelatinei la un
ciment fosfo-calcic s se mbunteasc att proprietile de prelucrabilitate (n special cele viscoelastice - pentru injectare, ct i proprietile mecanice, respectiv rezistena la compresiune. Mai
mult dect att, gelatina este un polimer biocompatibil i complet resorbabil in vivo astfel nct
prezena acesteia n compozit conduce la un material care este foarte asemntor cu oasele, att n
privina componentei organice ct i a celei anorganice. Analiza morfologiei probelor prin
microscopie electronic cu baleiaj au indicat faptul c cimenturile aditivate cu gelatin prezint o
vitez de conversie la hidroxiapatit mai mare, o microstructur mai compact, reducerea total a
porozitii i mbuntirea proprietilor mecanice.
Granja .a. [51] au preparat un compozit injectabil sub form de microsfere pe baz de
chitosan reticulat i Hydroxylapatita Microsferele au fost obinute introducnd diverse cantiti de
hydroxylapatit ntr-o soluie de chitosan (1% w/v) n acid acetic (1 % v/v) i picurnd cu vitez
foarte mica aceast suspensie ntr-o soluie de Tripolifosfat (5% w/v), ca agent de reticulare.
Microparticulele obinute au fost caracterizate prin microscopie optic, microscopie electronic i
spectroscopie IR.. Au studiat influena coninutului de hydroxylapatit asupra morfologiei suprafeei
i formei particulelor. Microsferele de chitosan prezint o structur superficial tip fagure iar n
seciune transversal se observ o structur cu pori deschii cu interconexiuni. Creterea cantitii de
HA n microparticule promoveaz o distribuie mai omogen a dimensiunilor, o netezire a suprafeei
i o mbuntire a sfericitii. Analiza suprafeei ct i a seciunii transversale indic o distribuie
omogen a HA n matricea polimer, particulele de HA fiind foarte bine mpachetate n matricea de
chitosan. Dimensiunea porilor descrete cu creterea cantitii de HA, de la 50100 m, n
chitosanul pur, pn la 0,5 m n compozitul cu 30 % HA.

2.6. Cimenturi fosfo-calcice utilizate ca materiale de restauraie

Combinarea unei ceramici bioactive cum ar fi cimenturile fosfo-calcice cu polimeri are un
dublu scop. Primul, este acela de a mbunti proprietile mecanice ale compozitului [14-1] iar cel
de al doilea este intensificarea proprietilor osteoconductive ale polimerilor [17-19]. Cteva tipuri
de compozite studiate n ultimii ani sunt prezentate n continuare.
2.6.1 Compozite bioactive hibride organic-anorganic pentru substitute osoase

9
Pentru a asigura performane comparabile cu cele ale oaselor naturale, materialele fosfocalcice se asociaz cu polimeri naturali sau sintetici, n dou moduri: acoperirea suporturilor
polimerice cu materiale bioactive [68] i

realizarea unor compozite material anorganic

bioactiv/polimer organic [69].

Bioactivitatea unui material artificial poate fi evaluat in vitro prin aprecierea formrii i
depunerii hidroxiapatitei atunci cnd materialul respectiv este plasat ntr-o soluie care simuleaz
plasma din sngele uman ( simulated body fluid SBF, numit i soluie Kokubo [70]).
Materiale vitroase (sticle) de tipul CaO-SiO 2 prezint capacitatea de a forma hidroxiapatit n
SBF dar procesul de nucleaie este mpiedicat prin efectul catalitic al gruprii Si-OH formate pe
suprafaa materialului i accelerat prin eliberarea Ca2+ din material n soluie.
Tsuru .a. [101] au sintetizat silicai modificai organic, pornind de la polidimetilsiloxan,
tetraetoxisilan i azotat de calciu, i au raportat formarea apatitei pe materialul hibrid dup
introducerea n SBF. Pentru a putea fi utilizate astfel de materiale hibride organic-anorganic , pe
lng bioactivitate trebuie s ndeplineasc i alte condiii: rezisten mecanic mare,
prelucrabilitate.
Ohtsuki .a. [102] au sintetizat hibrizi organic-anorganic pornind de la methacryloxypropyltrimethoxysilane (MPS) i hydroxyethylmethacrylate (HEMA). Polimerii din MPS i HEMA au fost
sintetizai la cteva compoziii, dup care soluia de polimer a fost amestecat cu clorur de calciu.
Acest compozit a prezentat proprieti bioactive; dup meninere n soluie Kokubo timp de 7 zile
suprafaa hibridului organicanorganic s-a acoperit cu microcristale de hidroxiapatit.
Pentru fixarea unor implanturi, cum ar fi articulaiile de old, n clinici se utilizeaz curent
ciment pe baz de poli(metil metacrilat) (PMMA), principalul neajuns al acestuia fiind absena
bioactivitii, adic lipsa unei aderene ciment/os. S-a ncercat obinerea unui ciment bioactiv prin
metoda amestecrii unor pulberi ceramice bioactive cu ciment PMMA. In acest caz ns sunt
necesare cantiti mari de pulbere ceramic deoarece particulele de pulbere sunt acoperite cu PMMA
i nu sunt expuse la fluidul din corp.
Noile strategii pentru obinerea de cimenturi bioactive pe baz de PMMA au ca obiect ideea
folosirii hibrizilor organic-anorganic [72]. In acest sens s-a propus incorporarea de alkoxysilani i
sruri de calciu n cimentul PMMA. Alkoxysilanul asigur gruprile Si-OH, iar srurile de calciu
asigur eliberarea Ca2+ n fluidul din corp. ncercrile efectuate cu diverse sruri de calciu i cu
diveri alkoxysilani au evideniat posibilitatea obinerii unor hibrizi cu bun activitate n privina

10
depunerilor de hydroxyapatite din plasma sangvin i cu rezisten apropiat de aceea a cimentului
PMMA convenional.
2.6.2 Compozite ciment fosfo-calcic/chitosan
Utilizarea unui ciment fosfo-calcic pentru repararea unor defecte periodontale umane a
condus la rezultate nesatisfctoare; multe implanturi fiind exfoliate nc nainte de a fi integrate cu
osul nconjurtor. Implanturile recuperate au artat c materialul a fost acoperit adecvat cu
hidroxiapatit dar c pierderile au fost datorate deplasrilor mecanice cauzate de rigiditatea
cimentului [73].
Frame .a. [74].au utilizat un compozit coninnd

o matrice din sulfat de calciu i

hidroxiapatit granular. Acest ciment asigur o prelucrabilitate (manipulare) mbuntit, avnd o

matrice de priz, ns resorbia rapid a sulfatului de calciu adesea conduce la o ncapsulare a HA
destul de slab n esutul moale i o formare redus a noului material osos [75].
Avnd n vedere aceste constatri s-a bnuit c n material ideal pentru defecte periodontale
trebuie s fie un material nalt osteoconductiv, cum ar fi cimenturile fosfo-calcice, nglobat ntr-o
matrice elastomera ,rigid i resorbabil. Matricea elastomer va asigura o elasticitate limitat
pentru micrile minore ale dinilor fr a se fractura sau deplasa implantul.
Chitosanul i derivaii de chitosan sunt precursori foarte buni pentru matrice elastomere,
fiind att biocompatibili i biodegradabili [39] ct i osteoconductivi [40] i a fost deja utilizat n
operaii chirurgicale pentru reducerea pungilor periodontale [41].
Chitosaul este solubil n sluii acide dar este insolubil n soluii neutre sau bazice. Cnd un
ciment fosfo-calcic este amestecat cu o soluie acid de chitosan, are loc o cretere a pH-lui ca
rezultat a reaciei de ntrire a cimentului, fcnd ca paste moale de ciment/chitosan s se transforme
ntr-o masa rigid (pe de o parte datorat precipitrii compusului fosfo-calcic pin hidroliz iar pe de
alt parte prin precipitarea chitosanului n mediu alcalin sau slab acid (pH>5,5)).
Takagia .a. [76] au prepaat compozite folosind o pulbere solid de ciment fosfo-calcic original i o
faz lichid coninnd chitosan i/sau derivai de chitosan. Pulberea de ciment a constat dintr-un
amestec echimolecular de fosfat tetracalcic (TTCP), Ca4(PO4)2O (fracie de mas 72.9%) i fosfat
dicalcic anhidru (DCPA), CaHPO4 (fracie de mas :27.1%), a fost preparat prin amestecarea
pulberilor grosiere de TTCP i DCPA ntr-un .malaxor. Drept faz lichid utilizat pentru priza
cimentului au fost folosite mai multe soluii:
-

Chitosan 15 % n soluie HCl 1M

11
-

Chtosan 5 % n HCl 1M

Chitosan - malat 15% n ap

Chitosan - lactat n ap

Raportul faz solid (pulbere)/faz lichid a fost ales 4,0 ; 2,5 i 2,0, n funcie de cantitatea de
chitosan sau derivat utilizat.. Caracterizarea diverselor cimenturi obinute i compararea
proprietilor acestora a fost fcut sub

mai multe aspecte: timpul de ntrire, rezistena la

compresiune, rezistena la ncovoiere, formarea hidroxiapatitei, morfologia suprafeei. Rezultatele

acestor caracterizri pot fi sintetizate astfel:

Toate compozitele CPC-Chitosan se ntresc n aproximativ 10 min;

Rezistena la compresiune crete la cimenturile realizate cu chitosan-malat i chitosan-lactat

dar nu se modific semnificativ la cimenturile preparate cu chtosan;

Cnd se folosete soluia cu 15% chitosan se produce o uoar cretere a rezistenei la

ncovoiere dup o zi de incubare, iar utilizarea soluiei de 5% cauzeaz o scdere a
rezistenei la ncovoiere

Modulul de elasticitate al compozitelor CPC-chitosan este de aproape dou ori mai mare;

Conversia hidroxiapatitei n compozitele CPC-chitosan este mai mare dect n cimenturile

CPC de control i crete cu timpul de imersie ntr-o saliv artificial. Aceast cretere a
conversiei HA nu mbuntete rezistena. Cristalele de hidroxiapatit formate att pe
suprafaa ct i n interiorul compozitelor CPC-chitosan devin suficient de mari dup 7 zile
de imersie n saliv artificial cu coninut de CaCl2.

Compozitele CPC chitosan sunt stabile n mediu umed i au rezisten fizic suficient de mare
pentru a se putea utiliza n multe aplicaii clinice. Proprietile compozitelor CPC-chitosan depind
de raportul pulbere solid/mediu lichid, porozitate, coninutul de chitosan i proprietile fazei cu
chitosan.
2.6.3. Compozite ciment fosfo-calcic/gelatin
Proprietile eseniale ale unui ciment, astfel ca timpul de priz i rezistena final, pot fi
modelate prin : modificarea compoziiei pulberii solide (compoziia propriu-zis a cimentului),
compoziia fazei lichide i raportul lichid/pulbere, condiiile de maturare [66, 77-79] i aditivii
polimerici [80-84].

12
Bigi, Bracci i Panzavolta [47] au realizat o serie de noi cimenturi pe baz de fosfat tricalcic,
utiliznd ca aditiv polimeric gelatin din piele de porcine. Pulberea de ciment a fost obinut prin
dispersarea

fosfatului tricalcic ntr-o soluie de gelatin (10% w/v), uscarea natural a pastei

formate i mcinarea amestecului solid. Pentru asigurarea prizei cimentului la pulberea obinut s-a
adaugat fosfat dicalcic dihidratat, n proporie de 5% w/w. Au fost preparate dou cimenturi,
utilizndu-se dou rapoarte lichid (ap distilat)/pulbere: 0,3 pentru i 0,4 i cimenturi martor (fr
gelatin) Cimenturile preparate i ntrite au fost incubate n plasma sangvina artificial (SBF Simulated Body Fluid) pentru diverse perioade de timp

pentru a se verifica bioactivitatea

cimentului. Bioactivitatea s-a apreciat prin cantitatea i calitatea hidroxiapatitei depuse, pe baza
spectrelor de raze X i prin analiza morfologiei suprafeei - prin microscopie electronic.
Rezultatele msurtorilor de difracie indic faptul c prezena gelatinei accelereaz reacia
de priz, respectiv formarea hidroxiapatitei

i consumarea -TCP. Intensitile relative ale

maximelor de difracie caracteristice cresc fa de cele caracteristice pentru TCP pe msur ce tipul
de imersie n SBF crete, iar acestea sunt mai mari pentru proba cu gelatin n comparaie cu cele
pentru proba martor.
2.6.4 Compozite hidroxiapatit/acid polilactic i hidroxiapatit/acid poliglicolic
Hidroxiapatita calcic a fost utilizat intens n medicin i ca biomaterial ceramic [85,86].
Polimerii bioresorbabili acid polilactic (PLA), acid poliglicolic (PGA) i copolimerii acestora
(PLGA) au fost de asemenea utilizai extensiv n medicin i farmacie [87,88]. Pentru a combina
avantajele oferite de fiecare din aceste materiale au fost sintetizate compozite HA/PLA, HA/PGA i
HA/PLGA.
Biomaterialul compozit HA/PLA a fost sintetizat prin polimerizarea acidului L-lactic n
prezena hidroxiapatitei [89]. De asemenea, un alt compozit de acest tip a fost realizat prin armarea
hidroxiapatitei cu fibre de PLA [90]. O alt metod de preparare a compozitelor HA/PLA const n
presarea la rece a unui amestec de pulberi de HA si PLA [14,16]. Maquet .a. [91] a preparat un
compozit pe baz de PLA i bioglass, cu porozitate mare, pentru schelete, utiliznd o metod de
separare de faz urmat de sublimarea solventului.
Lu .a. [92] au prezentat un compozit tri-dimensional pe baz de copolimer PLGA i sticl
bioactiv utilizabil n bioingineria esuturilor osoase. Acest compozit este un compozit de tip
matrice polimer cu faza ceramic dispersat. Dezavantajul unui astfel de sistem deriv din faptul c
particulele materialului bioactiv sunt izolate de matricea polimer astfel nct activitatea nu poate fi
mrit.

13
Miao .a. [93] au preparat un compozit fosfo-calcic/polimer complex cu porozitate mare. O
ceramic fosfo-calcic poroas (n principal hidroxiapatit), coninnd att

micropori ct

macropori, a fost preparat prin sinterizarea unui ciment fosfo-calcic acoperit cu spum
poliuretanic. n micropori a fost infiltrat o past format sticl bioactiv/PLGA, astfel nct
bioactivitatea nu este afectat.
Interesant este modul de obinere a cimentului fosfo-calcic.

Pentru aceasta pulbere de

pirofosfat de calciu (Ca2P2O7) a fost amestecat cu pulbere de carbonat de calciu (CaCO 3), proporie
gravimetric 1,27:1. Pentru treapta de amestecare, pulberile precursoare au fost introduse ntr-o
soluie alcoolic formndu-se o past viscoas, care, dup uscare , a fost mcinat ntr-un mojar i
calcinat la 1350 oC timp de 5 ore n aer. Reacia chimic corespunztoare formrii fosfatului
tetracalcic (Ca4(PO4)2O ) este:
Ca2P2O7 + 2CaCO3 Ca4(PO4)2O + 2CO2
Pentru obinerea hidroxiapatitei pulbere de fosfat tetracalcic (Ca4(PO4)2O) a fost amestecat cu
pulbere de fosfat dicalcic anhidru (raport gravimetric 72,9:27,1):
2Ca4(PO4)2O + 2CaHPO4 Ca10(PO4)6(OH)2 (HA)

(**)

Ca faz lichid pentru prepararea cimentului s-a folosit o soluie 0,5M de Na 2HPO4, adugat la
pulberea de ciment intr-o aa cantitate nct s se obine o past fluid (raport lichid pulbere 0,5
mL:g). Aceast past a fost folosit pentru a acoperi spume poliuretanice cu diverse dimensiuni ale
porilor (2,3 mm, 1,6 mm i 1 mm) prin imersare sub presiune i suflare cu aer. Spuma impregnat
cu past a fost lsat s reacioneze pentru formarea cimentului, conform reaciei (**) care are loc
numai n prezena fazei lichide.
Dup ce s-a fcut priza i a avut loc ntrirea, spuma poliuretanic s-a ndeprtat prin ardere ntr-un
furnal electric, n aer, n patru etape: 40 600 oC (cu 1 oC/min), 600 oC 1200 oC (la 5 oC/min),
meninere 2 ore la 1200 oC i rcire pn la 40 oC cu 5 oC/min.
Pulbere de sticl bioactiv a fost amestecat cu o soluie de PLGA n diclormetan obinndu-se o
past fluid cu care s-au umplut porii cimentului poros prin acelai procedeu cu care s-a introdus
pasta de ciment n poliuretan.
Pentru verificarea bioactivitii, cimentul poros acoperit cu sticl bioactiv/PLGA a fost
introdus n fluid uman simulat (SBF) pentru 1 2 sptmni, splate, uscate i analizate la
microscop. Formarea hidroxiapatitei pe suprafaa cimentului confirm faptul c prin procedeul
utilizat bioactivitatea materialului nu este afectat.

14
Din punctul de vedere al rezistenei mecanice s-a constatat c n timp ce cimentul
hidroxiapatitic poros este foarte puin rezistent ( R.M << 1Mpa), dup impregnarea i acoperirea cu
compozit format din sticl bioactiv (33%) i acid poli(lactic-co-glicolic) (67 %) rezistena
mecanic crete apreciabil (R.M. =7,7 MP).
Intr-o alt lucrare Miao [94] a raportat realizaea unui alt compozit complex, constnd din
trei reele interpenetrante: fosfat tricalcic (TCP), hidroxiapatit (HA) i poli(lactid-co-glicolid).
Pe scurt: o reea poroas de fosfat tricalcic, preparat prin sinterizarea unui fosfat tricalcic
impregnat cu spuma poliuretanic, este impregnat cu un ciment fosfo-calcic (n principal
hidroxiapatit, urmat de o nou impregnare cu PLGA.
Umplerea porilor fosfatului tricalcic poros cu Cimemt fosfo-calcic (HA) contribuie la
cretere rezistenei la compresiune de la sub 1 MPa pn la aproape 8 MPa. Introducerea
copolimerului biodegradabil PLGA

i formarea compozitului interpenetrant TCP/HA/PLGA

conduce la o cretere spectaculoas a rezistenei la compresiune, pn la aproximativ 30 MPa. Prin

aceasta se recunoate rolul durificator al fazei PLGA din compozit.

2.7 Materiale compozite poroase utilizate pentru reconstituirea sau

nlocuirea elementelor de schelete osoase
Materiale implantabile similare oaselor naturale sunt utilizate n foarte multe aplicaii
biomedicale. De exemplu, material scheletal sintetic asemntor materialului osos natural poate fi
implantat pentru a umple sau completa defecte majore produse de cancer sau alte boli ale oaselor
(osteoporoz, chisturi) [95,96]. Ideal, astfel de scheletri ar trebui s fie formulate astfel nct s
aib o structur i o compoziie compatibile cu aceea a osului natural [97-100] i care s induc un
rspuns similar cu acela al fracturii naturale care se vindec atunci cnd este plasat intr-un defect
osos.
Cuneyt Tas [101]a obinut un material scheletal bifazic coninnd carbonat de calciu i
hidroxiapatit deficient n calciu (CaCO3 + Ap-CaP). Acest material pentru utilizri medicale are
rezisten la compresiune relativ mic dar este macroporos i ieftin. Realizarea cimentului este
relativ simpl.
Pulbere solid a fost format dintr-o singur faz - CaCO 3 de puritate analitic, in timp ce
faza lichid (soluia pentru priz) a fost o soluie de acid fosforic (H 3PO4) neutralizat parial cu
hidroxid de sodiu pn la pH 3,2 (100 mL H3PO4 85% n care s-au adugat treptat, sub agitare, 138
mL NaOH 32%. O soluie de priz analoag s-a obinut din Na 2HPO4 si acid fosforic (108,33 g

15
Na2HPO4 + 80 mL ap distilat + 50 mL H3PO4 85% si final completat cu ap la 250 mL), pH-ul
acestei soluii este 3,2 i este stabil n timp. Raportul faz lichid/pulbere a fost cuprins ntre 1,0 i
1,35, cel mai bun rezultat obinndu-se la raportul de 1,l

ns celelalte rezultate sunt foarte

apropiate.
Prin mestecarea pulberii de carbonat cu lichidul de priz se formeaz un bloc poros bifazic
de CaCO3 + Ap-CaP. Transformarea acestuia ntr-o singur faz, hidroxiapatit deficient n calciu,
s-a fcut meninnd blocul timp de 36 ore, la 80 oC, ntr-o soluie tampon de fosfai 0,5M, cu pH =
7,2., spla i uscare n aer 17 ore la 80 oC.
Evoluia microstructurii probei , de la materialul de plecare (CaCO 3 calcit) la
cimentul ntrit este ilustrat n Fig. 2.1

Fig. 2.1 Microfotografiile SEM pentru calcit (CaCO3) (a) i pentru masa de ciment ntrit
(raport Ca/P = 1,51 care corespunde la un raport lichid/pulbere = 1,115)
Porii din masa cimentului sunt suficient de mari pentru a permite fixarea i proliferarea
celulelor osoase, ca osteoclastele i osteoblastele. Dimensiuni ale porilor de 150 - 500 m, obinute
n acest caz, sunt de dorit pentru creterea optim a celulelor osoase [102]. In cazul cimenturilor
fosfo-calcice comerciale nu se pot atinge pori mai mari de 10-20 m.
Spectrul de raze X pentru

proba de ciment abia ntrit confirm structura bifazic a

acesteia ; se remarc liniile intense caracteristice calcitului alturi de benzi mai slabe caracteristice
hidroxiapatitei. Pentru proba imersat n soluie tampon de fosfai se constat dispariia benzilor
caracteristice carbonatului de calciu i intensificare celor caracteristice hidroxiapatitei
Unele studii [103, 104], au artat c formarea

materialelor macroporoase bifazice

(CaCO3+HA) este favorizat dac n lichidul de priz se introduce acid citric, acid malic, acid lactic

16
sau acid succinic. Atunci cnd se adaug acid citric n soluia de priz grupele citrat au fost
coordinate puternic la ionii de calciu formndu-se un complex molecular relativ mare. Prin aceasta
reacia dintre Ca i P au fost parial mpiedicat., produsul intrnd ntr-un proces de gelifiere [105107]. Cu toate acestea , cnd produsul poros format a fost tratat hidrotermal la 80 oC n soluie
tampon fosfatic, acesta a fost integral convertit la hidroxiapatit calcic. Prezena acidului citric n
lichidul de priz mbuntete consistena i prelucrabilitatea fazei formate nainte de turnarea n
form i mrete timpul de priz pn la aproximativ 8 minute.
Xu i Simon Jr. [109] au realizat o structur macroporoas i rezistent pe baz de ciment
fosfo-calcic n care a fost incorporat chitosan i mannitol (solubil n ap) i au studiat
biocompatibilitatea noului compozitcu ajutorl unei linii de celule osteoblaste i o prob enzimatic.
Raiunea

alegerii unei astfel de microstructuri (ciment fosfo-calcic/chitosan/manitol) rezid n

faptul c cristalele de mannitol se vor dizolva foarte repede la contactul cu lichidul fiziologic in
vivo, formndu-se macropori pentru creterea materialului osos, n timp ce chitosanul asigur
rezistena necesar implantului. Au fost evaluate efectele chitosanului asupra proprietilor mecanice
ale compozitului, n funcie de volumul porilor elementului scheletal.
ntr-o prim serie de msurtori, pulberea de ciment (faza solid) a fost un amestec de fosfat
tetracalcic (Ca4(PO4)2)O) (TCP) i fosfat dicalcic anhidru (CaHPO 4) (DCP) n timp ce faza lichid
(lichidul de priz) a fost format dintr-o soluie 15 % chitosan lactat. Raportul pulbere/lichid a fost
variat n intervalul 2,0 4,5 (w/w)
Intr-o a doua serie de msurtori, faza solid a fost format din pulbere (TCP+DCP) la care s-a
adugat mannitol (CH2OH[CHOH]4CH2OH), n rapoarte de mas mannitol/(mannitol+Ciment
fosfo-calcic) cuprinse ntre 0 i 70 % (8 probe) iar faza lichid (chitosan 15 %) a fost amestecat cu
pulberea solid n raportul pulbere/lichid = 3,5 (w/w). Dup amestecare pasta de ciment a fost
imersat 20 ore

n soluie fiziologic, la 37 oC,

pentru dizolvarea mannitolului i crearea

macroporilor [110] .
Modulul de elasticitate crete cu creterea raportului pulbere solid/lichid, dar nu se semnaleaz o
diferen semnificativ ntre proba cu chitosan i proba martor. Rezistena la flexiune a cimentului
cu chitosan este sensibil mai mare dect aceea a cimentului de control (fr chitosan) i crete cu
creterea raportului pulbere/faz lichid, efectul maxim obinndu-se pentru o valoare a acestui
raport egal cu 3,5. Testele de biocompatibilitate au demonstrat c prin introducerea chitosanului nu
se modific citotoxicitatea cimentului, att cimentul fosfocalcic (CPC) ct i compozitul
CPC/chitosan sunt ne-citotoxice.

17

3. REZULTATE EXPERIMENTALE PRELIMINARE

3.1 Plan de activiti pentru etapa a II-a ; anul 2008
In schema de realizare a tematicii tezei de doctorat, etapa prevzut pentru anul 2008 este
poate cea mai important, fiind o etap pregtitoare n care se obin informaiile necesare conducerii
ulterioare a cercetrilor. Planul ntocmit iniial pentru aceast etap cuprinde activitile prezentate
mai jos.
A. Pregtirea experimentelor:

Activitatea II.1: Asigurarea i caracterizarea unor precursori anorganici, respectiv fosfai

de calciu, reactivi anorganici, polimeri biocompatibili, solveni organici

Activitatea II.2: Sinteza i caracterizarea unor precursori anorganici.

Activitatea II.3: Pregtirea unora dintre aparatele i dispozitivelor de lucru.

B. ncercri preliminare

Activitatea II.4

Sinteza i caracterizarea unor cimenturi dentare injectabile, cu

fluiditate mare pe baz de fosfat de calciu i hidroxiapatit,

Activitatea II.5 - Sinteza unor compozite fosfat de calciu/chitosan

18

Activitatea II.6 Formularea unor compozite fosfai de calciu/acid polilactic cu densitate

mare

C. Rezultate finale pentru etapa a II-a

Activitatea II.7 - Sinteza a 4-5 compozite pe baz de ciment fosfocalcic i polimeri biocompatibili

Activitatea II.8 - Caracterizarea probelor de ciment obinute: rezisten

la compresiune, timp de priz, compoziie fazic, morfologia suprafeei;

Activitatea II.9 Diseminarea rezultatelor

3.2 Asigurarea material: Procurarea , sinteza si caracterizarea precursorilor

3.2.1 Reactivi achiziionati
In prima faz s-au achiziionat o parte dintre precursorii necesari pentru prepararea cimenturilor
fosfo-calcice i a compozitelor ciment/polimer biocompatibil.

Compui anorganici: Ca3(PO4)2 - fosfat tricalcic anh. (Fluka;CAS No: 7758-87-4)

M = 310,18 g mol-1
CaHPO4 fosfat de calciu dibazic (Sigma; CAS No: 7757-93-9),
M = 130,06 g mol-1
CaCO3 carbonat de calciu (Sigma-Aldrich;CAS No:471-34-1)
M = 100,09 g mol-1

Polimeri biocompatibili:Chitosan, tip CHV2 (Vanson Chemicals Redmond WA, S.U.A)

Mw = 755900 g mol-1; GDA: 79,2 %; IP=1,82

Chitosan, tip CHV3 (Vanson Chemicals Redmond WA, S.U.A)

Mw = 309900 g mol-1; GDA: 79,2 %; IP=2,33
Acid polilactic (PLA) (polylactic acid sau polylactide)
(Lactel Birmingham Polymers Inc.)

19
Alginat de sodiu (Sigma-Aldrich:CAS : 9005-38-3)

Fosfatul tricalcic a fost caracterizat n privina distribuiei granulometrice, proprietate foarte

important pentru modelarea proprietilor materialelor fosfo-calcice.
Dimensiunile medii ale particulelor i distribuia acestora dup dimensiuni s-a determina cu un
analizor de particule prin difracia razelor Laser ( Laser Diffraction Particle size Analyzer) de tip
SALD-7001 (Shimadzu Corporation). Aparatul, prevzut cu o singur surs de laser violet i un
singur sistem optic, permite determinarea dimensiunilor particulelor de la 15 nm pn la 500 m
prin metoda difraciei laser. Achiziia i procesarea datelor s-a fcut cu softul specializat Wing-Sald
7001. Programul permite obinerea dintr-o singur msurtoare a curbelor de distribuie numeric, a
dimensiunilor liniare, a suprafeei i volumului particulelor n funcie de diametrul acestora,
evaluarea dimensiunilor medii. Pulberea de fosfat tricalcic a fost dispersat intr-o soluie 1 % lauril
sulfat ntr-o baie de ultrasunete. Curbele de distribuie volumetric sunt prezentate n Fig 3.1. Se
poate constata din aceasta figur c maximul curbei difereniale de distribuie a particulelor dup
volumul lor este situat n domeniul nanometric. , diametrul mediu fiind d 50 = 63 nm (50% dintre
particule au diametrul mai mic dect 63 nm).

Fig. 3.1 Curbele de distribuie volumetric pentru fosfatul tricalcic

Spectrul FT-IR pentru fosfatul tricalcic anhidru este prezentat n Fig. 3.2, indicndu-se i poziiile
benzilor de absorbie.

20

Fig. 3.2 Spectrul FT-IR pentru fosfatul tricalcic anhidru

3.2.2 Sinteza i caracterizarea carbonatul de calciu cu dimensiuni nanometrice

In afara de CaCO3 achiziionat din comer, s-au obinut patru probe de carbonat de calciu pulbere cu
dimensiuni nanometrice (C1 C4), necesare pentru obinerea unor compozite nanometrice. Aceste
probe au fost preparate n soluie apoas prin metoda carbonatrii (Ca(OH) 2 + CO2).Ca substrat

21
organic i mediu de cretere a CaCO3 s-a folosit o soluie de stearat de sodiu (preparat prin reacia
dintre C17H35COOH i NaOH).
Probele obinute au fost caracterizate n privina distribuiei particulelor dup dimensiuni i a
comportrii termice. Curbele de distribuie difereniale, att numerice ct i volumetrice sunt
prezentate n Fig. 3.3

Fig. 3.3 - Curbele de distribuie a particulelor dup dimensiuni

Analiza acestor curbe indic faptul c pulberile preparate au toate dimensiuni nanometrice
foarte apropiate, distribuia fiind destul de ngust (polidipersitatea probelor ete mic). Numai proba
C3 prezint un maxim ceva mai larg dar tot n domeniul manometric.. Dimensiunile medii ale
particulelor unt prezentate n Tabelul 3.1.

Tabelul 3.1 Valorile medii ale diametrelor nanoparticulelor de Carbonat de calciu

PROBACurba de distribuie numericCurba de distribuie volumetric Dm50%D
(nm)Abatere standard25%D
(nm)75%D
(nm)Dm50%D

22
(nm)Abatere standard25%D
(nm)75%D
(nm)C1270,2032041610,2034484C2180,25015212620,493179394C3250,22119381010,33159176C4280,211

2042660,2134793

In toate diagramele care prezint curbele de distribuie , fie numerice fie volumetrice,
pe axa absciselor este reprezentat diametrul particulelor (n m) n scal logaritmic, iar n ordonat
cantitatea relativ de particule (procente) atunci cnd se reprezint curba integral sau cumulativ.
In acest caz, valoarea medie (Dm=10) i abaterea standard () se definesc prin relaiile;
OBSERVATIE:
OBSERVATIE:

log10 D j log10 D j1
1 n
qj
100 1
2

1 n log10 D j log10 D j1
2

q j

100 1

unde: Dj reprezint diametrul particulelor, n m, iar qj distribuia diferenial n %

Diametrul mediu reprezint n fapt diametrul la care 50 % dintre particule sunt fine i 50%
sunt grosiere. Pe diagram diametrul mediu corespunde pe axa absciselor punctului de
inflexiune din curba cumulativ sau maximului curbei difereniale de distribuie.
Abaterea standard apare ca o msur a gradului de uniformitate a particulelor.
Analiza termic s-a efectuat la un derivatograf de tip Mettler Toledo TGA-SDTA851e, n
atmosfer de N2 cu un debit de 20ml/min, cu o vitez de nclzire de 10K/min i greutatea probei
46 mg. S-au pstrat parametrii operaionali constani pentru toate probele n vederea obinerii unor
date comparabile. Curbele termogravimetrice

(TG) sunt

prezentate n Fig. 3.4, iar curbele

termogravimetrice derivate (DTG) sunt prezentate n Fig. 3.5

Se poate constata c procesul de descompunere termic a tuturor probelor de carbonat se
desfoar practic ntr-o singur etap; proces care ncepe la 655675 oC , prezint viteza maxim
la 750765 oC i se ncheie la 775780 oC

23

Fig. 3.4 - Curbele TG pentru probele de Carbonat de calciu preparate prin carbonatare n mediu
apos

Fig.3.5 Curbele termogravimetrice derivate pentru probele de Carbonat de calciu

24
Curba DTG pentru proba C4 prezint un pick nensemnat (o pierdere n greutate de aprox. 5%)
la temperatura de 116 oC. Acesta este datorat ndeprtrii apei din prob, care probabil nu a fost
suficient de bine uscat sau s-a contaminat n timpul manipulrii.
Parametrii procesului de descompunere termic n atmosfer neutr sunt prezentai n Tabelul
3.2
Tabelul 3.2 - Caracteristicile termogravimetice ale probelor de carbonat de calciu
PROBAETAPATonsetTpeakTendsetW%ReziduuProba C1I----55,32II65776778044,78Proba C2I---55,02II66375777444,98Proba C3I----51,78II67676277848,22Proba C4
I1091161264,8553,45II66775277541,70Tonset temperatura la care ncepe degradarea termic n fiecare
etap, Tendset temperatura la care se termin degradarea termic n fiecare etap, Tpeak temperatura la care viteza
de degradare din fiecare etap este maxim, W% pierderea procentual de mas din fiecare etap, reziduu
cantitatea de prob degradat ce rmne la temperatur mai mare de 900.

Analiza curbelor din figurile 3.4 si 3.5, precum i a datelor din Tabelul 3.3 indic faptul c cele
patru probe se comport practic identic, valorile temperaturilor de descompunere fiind
apropiate, probabil situate in limita erorilor experimentale, diferena dintre acestea ar putea fi
totui datorata existenei unor impuriti. Faptul pare a fi confirmat si de valorile reziduurilor
( de fapt CaO) care sunt mai mici dect procentul de CaO din carbonat (55,94%).
Spectrul FT-IR pentru carbonatul de calciu este prezentat n Fig. 3.6

25

Fig. 3.6 Spectrul FT-IR pentru Carbonatul de calciu

3.2.3 Sinteza i caracterizarea hidroxiapatitei
Obiectivul principal este prepararea unei hidroxiapatite sub form de pulbere fin,
sinterizabil. n acest scop am reluat ncercrile unui studiu mai vechi [71], folosind metoda
precipitrii n 4 variante. in scopul alegerii unui produs care s corespund scopului propus.
Patru probe de hidroxiapatit, notate HA1...HA4, au fost obinute prin precipitare din soluie
n sistemul Ca2+/HPO42-, avnd ca punct de plecare reactivi diferii i modificndu-se condiiile de
reacie. Sinteza a fost realizat ntr-un reactor din sticl (2,5 l capacitate ) prevzut cu agitator i
manta de termostatare, temperatura fiind meninut constant prin circulaie de ap de la un

26
termostat. Pentru controlul pH-ului n mediul de reacie a fost imersat un electrod de pH combinat,
sticl/referin.

Tabelul 3.3 - Condiiile experimentale

PROBA
HA1
HA2
HA3
HA4Soluia de baz
(Ca2+)0.93 M CaCl2 +
NH4OH (25%)
pH = 11.5 ... 121 M Ca(NO3)2 +
NH4OH (25%)
pH = 91 M Ca(NO3)2 +
NH4OH (25%)
pH = 90.5 M CaCl2 +
0.1 M KOH
pH = 9Soluia adugat
(HPO42-)
1.06 M (NH4)2HPO4
+ NH4OH (25%)
pH = 11.5 ... 121 M (NH4)2HPO4 +
NH4OH
pH = 91 M (NH4)2HPO4+
NH4OH
pH = 92.5 M K2HPO4
+0.1 M KOH
pH = 9Agent de alcalinizareNH4OH (25%)
Adugare n poriuniNH4OH (25%)
Adugare n poriuniNH4OH (25%)
Adugare continu0.1 M KOH
Adugare continuTemperatura (0C)75802085Interval de pH11.5...128.0...9.59...9.59...9.5Debitul de amestecare
(ml/min)
20
30
3
Pomp peristaltic
3.5
Pomp peristalticTimp de reacie (min)60
209035Timp de maturare (ore)96_481pH final8.58.58.59

Valoarea pH-ului a fost meninut constant prin adugarea, manual sau cu o pomp peristaltic, a
agentului de alcalinizare (NH4OH sau KOH). n toate cazurile, soluia coninnd ionii HPO42- a fost
adugat, cu debit controlat, peste soluia coninnd ionii Ca2+, acest procedeu conducnd adesea la
o HA stoichiometric, cu o bun cristalinitate.
Soluiile au fost preparate din reactivi p.a. cu ap bidistilat. n toate cazurile s-a asigurat un
raport molar Ca:P=1,67. Unele probe au fost maturate n soluie timp de 48 sau 96 ore. La sfritul
experimentului sau dup maturare, precipitatul sau suspensia de HA obinut a fost filtrat la vid,

27
splat pe filtru de mai multe ori, splat cu aceton i uscat n etuv. Reactivii i parametrii
principali ai proceselor de obinere a HA sunt prezentate n Tabelul 1.
Pri din HA obinut, notate HA1C1...HA4C1, au fost nclzite n aer, cu o vitez de 5 0/min,
pn la 10500C, meninute la aceast temperatur 3 ore i rcite lent (24 ore, n cuptor).
Alte pri din HA obinut, notate HA1C2...HA4C2, au fost nclzite mai rapid, cu o vitez
de 100C/min pn la 12000C, meninute la aceast temperatur 3 ore i rcite rapid n aer (1 or).
Probele au fost analizate chimic; prin titrare conductometric cu Complexon III pentru
dozarea calciului i gravimetric, pentru

dozarea fosforului sub form de fosfomolibdat de

chinolein
Produii, att pulberea uscat ct i probele calcinate, au fost caracterizati prin spectroscopie
IR- n domeniul 400-4000 cm-1- folosind un spectrofotometru SPECORD 80 ( proba dispersat n
KBr), prin difracie cu raze X - folosind un difractometru DRON 2 (Rusia) i radiaia CoK i prin
microscopie electronic cu baleiaj- folosind un microscop TESLA BM 300 (Cehoslovacia).

Tabelul 3.4 Raportul molar Ca/P n probele de hidroxiapatit uscate.

PROBAHA1HA2HA3HA4Raportul molar Ca/P 1.671.531.501.56
Aceste date indic faptul c un raport Ca/P stoichiometric s-a obinut numai pentru proba HA1aceast prob fiind o hidroxiapatit pur. Celelalte trei probe sunt produi nestoichiometrici
reprezentnd fie o hidroxiapatit deficient n calciu (HA4), fie un compus bifazic, hidroxiapatitafosfat tricalcic (HA-TCP)(probele HA2 i HA3). Aceste presupuneri sunt confirmate prin difracia
razelor X .

28

Fig. 3.7 Spectrele de raze X pentru proba HA4, uscat, calcinat la 1050 oC i la 1200 0C

Fig, 3.8 - Spectrele de raze X ale probelor calcinate la 1200 oC

29
Evoluia cristalinitii produilor de reacie obinui n urma proceselor de calcinare este
artat n Figura 3.7, pentru proba HA4. Proba uscat este practic necristalin n timp ce proba
calcinat la 12000C prezint cristalinitatea cea mai mare. O comportare similar s-a gsit i pentru
celelalte trei probe. n diagram sunt trecui indicii Muller ( hkl ) care indic orientarea planelor
cristalografice n structura hidroxiapatitei. n proba calcinat la 1050 0C se semnaleaz i maxime de
difracie caracteristice fosfatului tricalcic ().
n Fig. 3.8 sunt prezentate spectrele de difracie pentru cele patru probe de HA calcinate la
12000C. Aceste difractograme confirm rezultatul analizei chimice, indicnd o faz hidroxiapatitic
pur pentru HA1C2 i parial HA4C2 i o compoziie mai complex pentru celelalte dou probe.
Proba HA3C2 este produsul cel mai complex, diafractograma razelor X indicnd prezena fosfatului
tricalcic (-TCP) i azotatului de calciu (CN) alturi faza apatitic principal. Fosfatul tricalcic este
prezent de asemenea n proba HA2C2 dar ntr-o cantitate mai redus.
Compoziia diferit a probei HA3 poate fi datorat structurii foarte fine a precipitatului
obinut n cazul n care se lucreaz la temperatur mic i la viteze de amestecare a reactanilor
relativ mici sau poate fi datorat timpului de maturare destul de mare. Aceast microstructur a
precipitatului, n fapt o suspensie fin, foarte stabil - caracteristic sistemelor coloidale, favorizeaz
att formarea -Ca3(PO4)2 ct i adsorbia reactanilor ne-reacionai din mediul de reacie, n special
Ca(NO3)2. Aceast structur coloidal, aprut n timpul sintezei este mai redus n cazul probei
HA2 , datorit temperaturii mari de reacie, timpului mic de amestecare i absena etapei de
maturare, precipitatul fiind mai puin impurificate.
Spectrele IR pentru probele uscate i pentru probele calcinate la 1200 0C sunt prezentate n
Figurile 3.9 i 3.10. Toate benzile de adsorbie caracteristice gruprilor PO 4(tetraedric) i OH sunt
vizibile clar. Benzile n regiunea 1112-1004 cm-1 sunt datorate vibraiilor (3) n grupa PO4 n timp
ce umrul de la 960 cm-1 este datorat vibraiei 1) a gruprii fosfat. Benzile 4) ale gruprii fosfat
sunt prezente distinct n domeniul 604-564 cm -1 n timp ce modul vibraional este prezent printrun pic discret la 472 cm-1

30

Fig. 3.9 - Spectrele IR pentru probele uscate

Pentru gruparea PO4- tetraedric diversele moduri de vibraie dau benzi de absorbie n
regiunile: 1112-1004 cm-1(3), 960 cm-1(1), 604-564 cm-1(4) i 472 cm-(2). Pentru gruparea OH se
gsesc benzi distincte la 3424...3384 cm-1(vibraie de alungire) i un umr la 635 cm -1(vibraie de
legtur).

31

Fig. 3.10 - Spectrele IR pentru probele calcinate la 1200 oC

O band foarte bine definit la 1600-1640 cm-1 se gsete n spectrele probelor
uscate(necalcinate). Aceasta este datorat vibraiei de deformare H-O-H, din apa adsorbit fizic n
produii de reacie.
n regiunea 872-890 cm-1 se observ un maxim de absorbie caracteristic gruprii HPO 42-.
Aceast band apare att n spectrele probelor uscate ct i n spectrele probelor calcinate i se
datoreaz absorbiei (NH4)2HPO4 n precipitatele obinute.
Pentru probele ne-calcinate HA2 i HA3 n spectrul IR apare o band foarte pronunat la
1352 cm-1. Banda este datorat prezenei gruprii NO 3 n aceste dou probe ca rezultat a absorbiei
Ca(NO3)2 din mediul de reacie. Acest maxim este mai larg n cazul probei HA3, confirmnd
capacitatea mai mare de absorbie a acestei probe dispersate coloidal.

32
Absena unei benzi de absorbie n domeniul 1500-1400 cm-1 indic faptul c aceste probe nu
conin ioni carbonat, cu toate c sintezele au fost realizate n aer (n reactor deschis).
Ca i spectrele de raze X, spectrele IR confirm puritatea probelor HA1 i HA4 n raport cu
hidroxiapatita i impurificarea avansat a probei HA3. n cazul probelor calcinate maximele
caracteristice sunt largi datorit formrii legturilor cristaline; lrgirea benzilor dup calcinare
indicnd creterea noilor cristale de apatit.
Apariia benzii la 955-960 cm-1 dup calcinarea probelor HA2 i HA3 indic prezena
Ca3(PO4)2, n bun acord cu concluziile msurtorilor difractometrice.
Prin microscopie electronic cu baleiaj s-au obinut microfotografiile probelor HA1C2 i
HA3C2, calcinate la 1200 oC (Figurile 3.11 i 3.12). In cazul probei HA1C2 pulberea calcinat este
dens iar particulele sunt rotunjite - caracteristice hidroxiapatitelor naturale. Din contra, pentru
proba HA3C2 pe lng cristalele de hidroxiapatit, similare cu cele din figura 4, au aprut o o serie
de particule su form de bastonae, care sunt cel mai probabil cristale de fosfat tricalcic. Se
reamarc totui n acest caz o rotunjire mai pronunat a particulelor, probabil datorat impuritilor
din prob, care la 1200 oC sunt n stare topit iar rcirea probelor a fost fcut rapid

Fig.3.11-Microfotografia suprafeei HA1C2

Fig.3.12-Microfotografia suprafeei HA3C2

Se poate deci concluziona c hidroxiapatit, cu compoziie stoichiometric i bine cristalizat,

se obine pornind de la CaCl2 i (NH4)2PO4 , lucrnd la 75 oC , pH = 11...12 i asigurnd un timp de
maturare a precipitatului de peste 90 ore - la temperatura camerei,

33
La temperaturi de reacie mici i timpi de amestecare a reactanilor mari se obine o suspensie
fin, coloidal, care se filtreaz i se spal foarte greu favoriznd astfel adsorbia impuritilor din
mediul de reacie, n special Ca(NO3)2 i (NH4)2HPO4, n hidroxiapatita obinut. Mai mult, datorit
dimensiunilor mici ale cristalelor este facilitat formarea fosfatului tricalcic prin calcinare la 1200
o

C.
Cele patru probe de hidroxiapatit au fost caracterizate de asemenea n privina dimensiunilor

medii ale particulelor i a curbelor de distribuie dup dimensiuni. Porinui de proba au fost
dipersate ntro soluie 1% lauril sulfat. Masuratorile au fost efectuate cu analizorul de particule prin
difracie Laser SALD-7001 . Curbele de distribuie dup dimensiuni sunt prezentate n figura 3.13.

Fig. 3.13 Curbele difereniale de distribuie volumetric pentru probele de hidroxiapat

Se poate constata din analiza acestor curbe c primele dou probe sunt formate din particule cu
dimensiuni nanometrice i sunt puin polidisperse,

iar probele HA3 i HA4 au particule de

dimensiuni micrometrice i sunt mai polidisperse. Proba HA4 prezint o curb de distribuie
binodal, cu un maxim n domeniul nanometric i un maxim n domeniul micrometric
Valorile medii ale diametrelor particulelor sunt prezentate n Tabelul 3.5.

Tabelul 3.5 Valorile medii ale diametrelor particulelor de hidroxiapatita

PROBACurba de distribuie volumetricDm50%D
(nm)Abatere standard25%D
(nm)75%D

34
(nm)HA1480.0473762HA2450.0433557HA341413,62019437686HA442871,9289909198
HA1480.0473762HA2450.0433557HA341413,62019437686HA442871,9289909198

Se poate constata c probele HA1 i HA2 au dimensiuni nanometrice foarte apropiate, diametrul
median fiind de aproximativ 50 nm, iar particulele sunt uniforme (abaterea standard este foarte mic
pentru ambele probe). Probele HA3 i HA4

sunt

asemntoare dar au diametrul mediu al

particulelor de ordinul a 4 m, o distribuie larg a particulrelor i o neuniformitate pronunat.

Dorind sa obinem o cantitate mai mare de hidroxiapatit, cu dimensiuni nanometrice i cu
puritate mare (raport Ca:P = 1,67), pe baza analizei datelor de mai sus am optat pentru utilizarea
procedeului folosit la obinerea probei HA1.Hidroxiapatita obinut a fost uscata n etuv la 125 oC
pn la greutate constanta. O parte din prob a fost calcinat timp de 3 ore la temperatura de 1200
o

C. Dimensiunile medii i curbele de distribuie dup diametrul particulelor au fost analizate pentru

proba umed (HA umed), n suspensia din amestecul de reacie dup o maturare de 24 ore, pentru
proba filtrat i uscat la 125 oC (HA uscata) i pentru proba calcinat m(HA calc). In Fig. 3.14 sunt
prezentate curbele difereniale de distribuie ale particulelor de hidroxiapatit, iar n Tabelul 3.6 sunt
date dimensiunile medii ale acestora.

Fig. 3.14 Curbele difereniale de distribuie, numeric i volumetric, pentru proba de

hidroxiapatita
Tabelul 3.6 Valorile medii ale diametrelor nanoparticulelor de Hidroxiapatit
(sintez nou)
PROBACurba de distribuie numericCurba de distribuie volumetric D50
(nm)Abatere standard25%D
(nm)75%D
(nm)D50

35
(nm)Abatere standard25%D
(nm)75%D
(nm)HA umeda220,39517774800,6072541008HA uscat240,21918361150,48661285HA

calcinata5850,0445426356110,049562684

Analiza curbelor din aceast figur i a rezultatelor din tabel permite s se avanseze
urmtoarele observaii:

Pentru hidroxiapatita din soluia de sintez i pentru proba uscat exist o diferen mare
ntre poziia maximului curbei difereniale numerice i cea a maximului curbei difereniale
volumetrice. Aceasta este o consecin a faptului c particulele nu sunt sferice ci au o form
alungit. Curbele volumetrice pentru aceste probe au maxime relativ largi, indicnd
oarecare polidispersitate a dispersiilor.

Pentru proba de hidroxiapatit calcinat particulele sunt sferice; poziiile maximelor celor
dou curbe (numeric i volumetric) sunt practic identice. Mai mult dect att, maximul
curbei este foarte ngust, aceasta nsemnnd c pulberea de hidroxiapatit calcinat este
practic monodispers,

Valorile abaterii standard confirm uniformitatea foarte bun a probei calcinate ( =

0,044 respectiv 0,049) i neuniformitatea mult mai mare a probelor necalcinate. Dintre
probele necalcinate proba umed este cea mai neuniform, probabil i datorit prezenei
unor impuriti din mediul de reacie.

Proba calcinat este uniform, cu particule sferice i cu diametrul mediu a particulelor de

ordinul a 550 - 600 nm.

Modificrile produse prin calcinarea probei sunt ilustrate n Fig. 3.15, unde sunt prezentate
spectrele FT-IR pentru proba de hidroxiapatit uscat i proba calcinat.

36

Fig. 3.15 - Spectrele FT-IR pentru hidroxiapatita uscata i calcinat

n ambele spectre se remarc distinct benzile caracteristice gruprii PO4 (tetraedric) din structura
apatitei (1088, 1041, 958, 600, 567 cm -1), precum i benzile caracteristice gruprii OH din
hidroxiapatit (3570 i 34405 cm-1). Spectrul probei necalcinate indic prezena unor mici cantiti
de impuriti, prin apariia benzilor 1640 cm-1 (apa adsorbit fizic), 1384 cm-1i 873cm-1 (HPO42-),
1423 cm-1 i umrul de la 873 ( urme de carbonat de calciu).
Analiza termogravimetric a probei de hidroxiapatit ne-calcinat este prezentat n Figura 3.16.

37

Fig. 3.16 Curbele: termogravimetrica (TG), termogravimetric derivat (DTG) i analza termic
diferenial (DTA) pentru proba de Hidroxiapatita necalcinat
Dup cum se poate observa nu se produc transformri majore n prob, pierderea total n greutate
fiind de numai 6,2 %. Aceste pierderi n greutate au loc treptat in trei etape. In prima etap care are
loc n intervalul 50150 oC pierderea n greutate este de 2,22 % i este datorat eliminrii apei
adsorbit fizic. Aceasta este n concordan i cu spectrele FT-IR ( reducerea maximului de absorbie
de la 3444 cm-1 i dispariia benzii de la 1641 cm -1. In etapa a doua pierderea n greutate este de
3,32% si ar putea fi datorat

descompunerii grupelor HPO42- aflate ca impuriti n proba

necalcinat. Aceast ipotez pare fie confirmat de spectrele FTIR pin dispariia benzilor de la
1384 i 873 cm-1 i deplasarea uoar a benzilor caracteristice PO 4 tetraedric din HA (din domeniul

38
10001100 cm-1), atunci cnd proba este calcinat. Ultima pierdere n greutate, foarte mic (de
numai 0,66%) este singura treapt net , distinct, indicnd existena unei reacii chimice. Aceasta
degradare are loc la 750 oC i este datorat descompunerii urmelor de carbonat de calciu din prob.
In spectrul FTIR aceasta este ilustrat prin dispariia benzilor de la 1454 i 873 cm-1.

3.3 Metode experimentale i aparate

3.3.1 Determinarea timpului de priz i a timpului de ntrire a cimenturilor
In practica experimental, pentru determinarea , consistenei normale, a consistenei standard
i a timpului de priz a cimenturilor i varului past se utilizeaz aparatul Vicat, n conformitate cu
normele in vigoare (de exemplu standardul american ASTM C-91 sau ASTM C-266) ). Aparatul
este prezentat n Fig. 3.17.

Fig. 3.17 - Aparatul Vicat

Aparatul const dintr-un stativ pentru o tij mobil cu greutate de 150 g, la care se poate aduga o
greutate adiional, pn la 300 g. Tija plonjorului are un diametru de 10 mm, iar la captul inferior
i se poate ataa un ac din oel cu diametrul de 1 mm i lungimea de 50 mm care ptrunde n pasta de
ciment. Tija culiseaz vertical n stativul suport iar poziia acesteia se poate urmri pe o scal
gradat. Dup omogenizare, pasta de ciment s-a introdus ntr-un inel din polietilen cu nlimea de
5 mm plasat pe o placa din sticl (Fig 3.18).
Msurtorile s-au fcut iniial la intervale mai
mari de timp iar atunci cnd acul ptrunde

Fig. 3.18 Probe de ciment pentru

determinarea timpului de priz

39
numai 1..2 mm n past la intervale de 30 secunde. In studiul de fa am identificat dou stadii n
procesul de ntrire a cimenturilor:
- timpul de priz iniial considerat ca timpul la care nu se mai poate prelucra (modela)
pasta. Valoarea acestuia s-a determinat ca timpul dup care tija cu greutatea de 150 g acul nu mai
ptrunde n past;
- timpul de priz final care indic ntrirea masei cimentului. Valoarea acestuia s-a
determinat ca timpul dup care tija cu greutate de 300 g nu mai ptrunde n ciment, adic acul de
otel nu mai las o urm circular perceptabil pe suprafaa masei ntrite.
Uneori timpul de priz se determin pe baza standardului internaional ISO 9917, pentru
cimenturi dentale silico-fosfatice [141]. Se folosete metoda acului Gillmore. O prob de ciment
meninut la 37 oC i umiditate 98% se consider c a fcut priz atunci cnd un ac cu diametrul de
1 mm la care este ataat o greutate de 400 g nu mai reuete s fac o amprent circular pe
suprafaa cimentului.
3.3.2 Determinarea proprietilor mecanice ale cimenturilor
Proprietile mecanice cele mai obinuite care se determin pentru cimenturile dentare i
pentru substitutele osoase sunt

rezistena la compresiune (compressive strength), rezistena la

torsiune (tensile strength) i modulul de flexibilitate (flexural modulus). Pentru determinarea acestor
proprieti se folosete un instrument de testare universal (Univeral Testing Machine model
5500R, Instron Corp., Canton MA, UA).
Pentru determinarea rezistenei la compresiune probele de ciment ntrit au fost prelucrate
sub form de cilindri cu nlimea de 12 mm i diametrul de 6 mm. Aceste probe au fost obinute
introducnd pasta de ciment in matrie din teflon ( Fig. 3.19a) i meninnd matriele timp de 4 ore
ntr-o incint la 37 oC i umiditate 100% (vapori saturai). Dup aceast perioad de timp cilindrii
(Fig. 3.19.b) au fost scoi din matri i introdui ntr-o soluie de saliva artificial i meninui
diferite perioade de timp. Unele probe au fost introduse n SBF incorporai n matri i scoase din
aceasta imediat nainte de msurtori. Alte probe au fost uscate si calcinate la 1200 oC.

40

Fig. 3.19 - Matrie din teflon (a) i probe de ciment (b) pentru msurtorile de
rezisten la compresiune
Pentru fiecare tip de ciment studiat se fac 56 determinri, la o vitez de comprimare transversal
de 1mm/min, pn la fracturarea probei. Rezistena la compresiune se calculeaz mprind sarcina
de rupere la aria seciunii transversale.
Pentru determinarea rezistenei la torsiune s au confecionat probe paralelipipedice cu
dimensiunile 25 x 2 x 2 mm, realizate prin introducerea pastei de ciment ntr-o matri adecvat
construit din oel inoxidabil. Matria, cu ambele fee acoperite cu placi de sticl prinse cu cleme a
fost plasat ntr-o incint la 37 o i umiditate 100 %. Dup 4 ore probele au fost scoase din matri ,
introduse n cte 10 mL saliv artificial i meninute diverse intervale de timp. Pentru fracturarea
epruvetei se folosete un test standard de ncovoiere n trei puncte, cu o deschidere de 10 mm i o
vitez de 0,5 mm/min.
3.3.3 Distribuia particulelor dup dimensiuni i analiza acestora
Dimensiunile medii ale micro i nano-particulelor i distribuia acestora dup dimensiuni sa determinar cu un analizor de particule prin difracia razelor Laser ( Laser Diffraction Particle size
Analyzer) de tip SALD-7001 (Shimadzu Corporation). Aparatul, prevzut cu o singur surs de
laser violet i un singur sistem optic, permite determinarea dimensiunilor particulelor de la 15 nm
pn la 500 m prin metoda difraciei laser. Achiziia i procesarea datelor s-a fcut cu softul

41
specializat Wing-Sald 7001. Programul permite obinerea dintr-o singur msurtoare a curbelor de
distribuie numeric, a dimensiunilor liniare, a suprafeei i volumului particulelor n funcie de
diametrul acestora, evaluarea dimensiunilor medii . Programul permite de asemenea suprapunerea
mai multor curbe i transferul de date prin clipboard spre alte programe de prelucrare a datelor.
3.3.4 Comportarea la nclzire i stabilitetea termic
Comportarea la nclzire i stabilitatea termic a precursorilor i materialelor preparate s-a studiat la
un derivatograf de tip Mettler Toledo TGA-SDTA 851e. Toate msurtorile s-au efectuat n
atmosfer de N2 la un debit de 20 ml/min, cu o vitez de nclzire de 10 K/min i greutatea probei
46 mg. S-au pstrat parametrii operaionali constani pentru toate probele n vederea obinerii unor
date comparabile. Softul STAR, aferent celulei de analiz permite i prelucrarea matematic a
curbelor termogravimetrice
3.3.5 Analiza prin spectroscopie IR
Spectrele IR cu transformat Fourier (FT-IR) au fost nregistrate cu un Spectrometru FTIR
BOMEM MB 104 (Canada), cu o rezoluie de 4 cm -1. Concentraia probelor n tabletele de KBr a
fost aproximativ aceeai pentru toate probele, 3 mg/500 mg KBr. Spectree dau informaii asupra
compoziiei i structurii chimice i a modificrii acestora n urma unor procese.
3.3.6 Analiza cristalografic
Difracia cu raze X furnizeaz informaii pentru nelegerea structurii materialelor cristaline
la scar atomic.. Astfel se poate stabili o relaie ntre structura cristalin i proprietile fizice i
chimice ale materialului studiat.
Dac asupra cristalului cade o und plan de radiaii X, fiecare atom al reelei cristaline
devine o surs de unde sferice secundare de aceeai frecven ca unda incident, a cror
nfurtoare este de asemenea o und plan. Ca urmare, aciunea total a atomilor ce se afl ntr-un
plan cristalin poate fi reprezentat sub forma unor plane reflectate dup legile obinuite ale reflexiei.
Undele plane reflectate de diversele plane cristaline sunt coerente i vor interfera ntre ele n mod
analog undelor trimise ntr-o direcie dat de diversele fante ale unei reele de difracie. Interferena
constructiv a radiaiei reflectate pe planele succesive se obine atunci cnd diferena de drum este

42
un numr ntreg (n) de lungimi de und . Astfel, condiia pentru reflexia constructiv a radiaiei
incidente este:
2dsin = n.
Aceasta este legea lui Bragg. Reflexia Bragg se poate produce numai pentru lungimi de und 2d.
Acesta este motivul pentru care nu se poate folosi lumina vizibil, ci se folosesc radiaiile X. Legea
lui Bragg cere ca i s fie corelate; radiaiile X de o lungime de und care cad pe un cristal sub
un unghi de inciden arbitrar, nu vor fi, n general, reflectate. Pentru a satisface legea lui Bragg este
necesar s se varieze: fie lungimea de und (metoda Laue), fie unghiul (metoda Debye Scherrer) .
Pentru analiza difraciei razlor X ale unor probe s-a utilizat un difractometru DRON 2
(Rusia) i radiaia CoKiar alte probe s-au caracterizat cu un aparat Philips PW 1050/81, echipat
cu un monocromator din grafit n fascicolul difractat , i radiaia CuK (40 mA 40 kV). S-a lucrat
n domeniul 2 cuprins ntre 10 i 70 o, la o vitez de scanare de 0,75 o/min. Probele de ciment au
fost mojarate i introduse ntr-un suport din silicon cu orificii.
3.3.7 Analiza morfologic
Microscopia electronic de baleiaj permite obinerea unor imagini ale topografiei i
compoziiei caracteristice suprafeei unor probe masive, netransparente la fascicule electronice.
Formarea imaginii se realizeaz cu ajutorul unui fascicul primar de electroni, foarte ngust care
baleiaz suprafaa probei. Prin interaciunea electronilor primari cu suprafaa, o parte din ei sunt
retromprtiai, iar alt parte determin generarea de electroni secundari din prob.
Imaginea se realizeaz cu ajutorul acestor electroni, fie secundari, fie retromprtiai, care
creeaz un contrast dependent de unghiul de inciden al fasciculului (adic dependent de nclinarea
fa de fascicul a unei zone sau alta din suprafa) i de compoziia probei. Imaginile sunt construite
punct cu punct pe ecranul unui tub catodic. Rezoluia sa este de ordinul 20 50
Unele probe au fost studiate cu microscopul TESLA BM 300 (Cehoslovacia)., ia alte probe au fost
studiate cu microscopul electronic cu baleiaj Philips XL-20, nainte de examinare probele fiind
acoperite cu aur, prin sprayere.

43

4. SINTEZA SI CARACTERIZAREA UNOR CIMENTURI

DENTARE
4.1 Consideraii generale
Cimenturile fosfo-calcice sunt compuse n mod obinuit dintr-un amestec de doi sau mai
muli fosfai de calciu care se dizolv ntr-o soluie apoas, conducnd la o soluie suprasaturat n
produsul fosfo-calcic dorit (de regul hidroxiapatit sau hidroxiapatit deficient n calciu). Ulterior,
n procesul de priz, aceast faz precipit sub forma unor cristale aciculare care cresc i se
interptrund prin aceasta obinndu-se rigidizarea cimentului. nainte de ntrire, aceste materiale
pot fi modelate n forma dorit sau injectate in defecte oisoase de mici dimensiuni. Din pcate,
datorit

rezistenei la compresiune mult mai mici dect cea a oaselor naturale, utilizarea

cimenturilor fosfo-calcice cu auto ntrire ca nlocuitori osoi bioresorbabili n implanturi n prezent

este limitat doar la aplicaii n locuri care nu sunt supuse la eforturi de compresiune sau
flexibilitate. Cimenturi anorganice utilizate ca substitute osoase sunt deja realizate la scar
industrial i comercializate sub diverse denumiri. Parte dintre acestea sunt sintetizate n tabelul de
mai jos.
Tabel 4.1 - Originea i compoziia unor substitute osoase anorganice comerciale
Material

Origine

Compoziie

Porozitate

Resorbtie

Endobon (Biomet Merck)

Cerabone (Coripharm/AAP)
Ceros 80 (Mathys)
Biobon (-BSM, Etex, 26,
Biomet Merck)
Calcibon (Biomet Merck)

Oase de bovine
Oase de bovine
Sintetica
Sintetica

Hidroxiapatit
Hidroxiapatit
Hidroxiapatit
Hidroxiapatit

Sintetica

Hidroxiapatit

Ostim (Osartis/AAP)

Sintetica

Hidroxiapatita

Macroporos
Neresorbabil
Macroporos
Neresorbabi
Macroporos
Neresorbabil
Past cu intrire Resorbabil
in situ
Past cu intrire
Resorbabil
in situ
Pasta far ntrire Resorbabil

44
Printre acestea se poate remarca produsul -BSM (Etex Corp., SUA) care poate fi injectat i face
priz la temperatura corpului (37 oC), conducnd la o hidroxiapatit cu cristalinitate sczut.. BSM prezint performan foarte bun, att n vitro ct i in vivo, stimulnd formarea osului,
resorbia ntr-un timp rezonabil i nu prezint reacii adverse. Neajunsul principal al acestui material
este reziatena la compresiune foarte mic (10 MPa), ceea ce limiteaz aplicabilitatea sa n
ortopedie.
Un alt produs comercial, Calcibon (Merck Biomaterials GmbH, Germany), este un material
sintetic, biodegradabil, pe baz de fosfat de calciu, destinat pentru repararea defectelor osoase.
Rezistena la compresiune este mai mare dect a cimentului BSM, fiind de cca. 60 MPa, dar
totui nc prea mic pentru substitute osoase.
In scopul mbuntirii proprietilor mecanice ale cimenturilor fosfo-calcicie s-a optat
pentru utilizarea unor compozite ciment fosfo-calcic/polimer. In acest scop pentru componenta
polimeric s-au ales polielectroliii, datorit marii lor tendine de a se adsorbi pe fosfaii de calciu i
de a modifica chiar comportarea lor la cristalizare. Lucrri anterioare au artat c proteinele avnd
n lungul lanului molecule cu sarcini electrice i polimerii pot inhiba creterea cristalelor de fosfati
de calciu (n special hidroxiapatita) prin legarea unor ioni din soluie i/sau prin adsorbia pe
cristalele n cretere. Adsorbia preferenial a unor astfel de molecule pe anumite fee ale cristalelor
a fost atribuit complementaritii dintre grupele ncrcate electric ale speciei care se adsoarbe i
acelea de pe suprafaa cristalului. Astfel, este de ateptat ca incorporarea polimerilor cu sarcini
electrice s influeneze cristalizarea i, ca urmare, proprietile mecanice al cimentului fosfo-calcic.
Multe studii au fost publicate n ultimii ani in legtur cu acest subiect, printre acestea i o serie de
brevete. Un ciment pe baz de fosfat de calciu care se ntrete cu formarea de hidroxiapatit
deficient n calciu a fost modificat cu esteri organo-fosforici. Cimentul de baz conine de
preferin fosfat tricalcic, fosfat dicalcic, carbonat de calciu i hidroxiapatit. Esterul organo-fosforic
este adugat la cimentul de baz

ntr-o proporie de 0,5 5 %. Ulterior cimentul poate fi

mbuntit prin adugarea de colagen I mineralizat [111]. O sintez a realizrilor din ultimii ani n
domeniu a fost fcut de ctre Neumann i Epple [112].
In referatul de fa s-au luat n studiu o serie de compozite ciment fosfo-calcic/ polimer,
utiliznd n acest scop un ciment avnd compoziie modificat fa de aceea a cimentului comercial
Calcibon , iar drept component polimeric chitosanul i acidul polilactic.

45

4.2 Incercri preliminare

O prim serie de msurtori a fost efectuat cu copul de a se stabili n ce msur fosfatul tricalcic
(Ca3(PO4)2) poate fi utilizat pentru realizarea unui ciment baz n vederea realizrii unor compozite
organic/anorganic cu proprieti mbuntite. In acest scop , pulberea solid a fost format numai
din fosfat tricalcic (P1 = Ca3(PO4)2), iar drept componenta lichid s-u folosit soluii acide pe baz de
acid citric, acid citric+chitosan, sau acid lactic +chitosan, dup cum urmeaz:
L1.1 = soluie 10% acid citric
L1.2 = soluie 2% Chitosan CHV2+20% acid citric
L1.3 = soluie 2.5% Chitoan CHV2+7,5% acid lactic
S-a urmrit numai msura n care combinaiile alese conduc la materiale care fac priz i timpul de
priz. Rezultatele sunt sintetizate n Tabelul 4.2
Tabelul 4.2 Cimenturi si compozite pe baz de fosfat tricalcic
ProbaComponenta
Solida (P1)Componenta
lichidRaport L/P
mL/gTimp de priz
(min)ObservaiiC1.1Ca3(PO4)2L1.10,96120Past injectabil. Rezisten mecanic foarte mica, priz
nesatisacatoare.C1.20,4860Past prelucrabil. Rezisten mecanic redus. Usor casant C1.3L1.21,08645Pasta
injectabil,

rezistent

mecanica

medieC1.41,5060Past

injectabil,

rezisten

mecanic

foarte

mic.

C1.5L1.30,452ntrire prea rapid , nu se poate modela.. Casanta

Dintre probele studiate numai proba C1.3 este convenabil, att din punctul de vedere al
timpului de priz cat si din punctul de vedere al prelucrabilitii i rezistenei mecanice. Prin
micorarea raportului lichid/ pulbere (de exemplu la valori de ordinul 0,6..0,75) se obine o
past consistent, prelucrabil i cu timp priz rezonabil. Din acest motiv cimentul obinut a
fost caracterizat prin spectroscopie IR, microscopie electronic i termogravimetrie.
In Fig. 4.1 sunt prezentate spectrele FT-IR pentru cimentul C1.3, fosfatul tricalcic i
hidroxiapatit. Spectrul IR al cimentului este complex, remarcndu-se att benzi de absorbie
caracteristice fosfatului tricalcic dar si benzi caracteristice hidroxiapatitei, deplasate datorit
interferenelor. Nu sunt evideniate clar nici benzile caracteristice chitosanului (1655, 1598, 1423,
1381 1155, 1078, 1032 cm-1) unele dintre acestea fiind suprapuse peste benzile fosfatului tricalcic i
nici benzile caracteristice acidului citric, aceti componeni aflndu-se n cantitate relativ mic n
ciment. In domeniul spectral 1640.1400 cm-1 apar un numr mare de benzi, cu intensitate destul

46
de mare, marcndu-se prin aceasta complexitatea mare a cimentului obinut. In acest domeniu
fosfatul tricalcic prezint un singur maxim larg, n timp ce hidroxiapatita nu prezint nici un maxim
de absorbie. Maximul pronunat i foarte larg din domeniul 3450 cm -1 i umrul, de asemenea
pronunat, de la 1641 cm-1 sunt datorate vibraiilor caracteristice gruprii -OH

i apei absorbite

fizic. Din acest punct de vedere se pare c proba studiat a fost destul de umed.

Fig. 4.1 Spectrele FT-IR pentru cimentul C1.3 , precursor i produsul preconizat
Microfotografia suprafeei probei de ciment este prezentat n Fig. 4.2. Se poate observa c
suprafaa este rugoas i neregulat cu micropori., compus din flocoane i cristale granulare
cu dimensiuni cuprinse ntre 1 i 7 m. Aceste formaiuni granulare sunt formate probabil
dintr-un amestec de cristale de hidroxiapatit i fosfat tricalcic de dimensiuni nanometrice,
aglomerate prin intermediul macromoleculelor de chitosan care se adsorb chimic pe suprafaa
microcristalelor .
4.3 Noi compozite pe baz de ciment fosfo-calcic
Un ciment fosfo-calcic, care prin
ntrire

conduce la

deficient n calciu,

hidroxiapatit
are n general

rezisten la compresiune relativ mic i

timp de priz reglabil n limite nguste.
Proprietile mecanice ale unui astfel de
ciment pot fi modificate

prin adaus de

materiale flexibile cu rezisten bun i cu

Fi
Fig. 4.2 Microfotografia SEM pentru C1.3

47
capacitatea

de

lega

materialul

fosfo-calcic

fr

ai

modifica

bioactivitatea

biocompatibilitatea.
De cele mai multe ori cimentul baz este un ciment fosfatic care de preferin conine
ntre 50 i 60% -Ca3(PO4)2, 2030 % CaHPO4.anh, 512 % CaCO3 i 512 Ca10(PO4)6.
(OH)2.

Compozitele preparate n studiul de fa au fost realizate utiliznd drept component

solid o pulbere (P2) avnd compoziia:
60% Ca3(PO4)2, (pulbere nanometric: d50 = 63 nm)
25% CaHPO4.anh (reactiv p.a.)
10% CaCO3 (reactiv p.a.)
5%Ca10(PO4)6.(OH)2 (pulbere nanometric: d50=611 nm)

Componentele pulberii, uscate n etuv la 125 oC, au fost cntrite cu precizie, mojarate
mpreun i apoi mcinate.
Proprietile acestui ciment au fost modificate utiliznd

un polielectrolit cationic,

chitosanul care este un policarbohidrat natural modificat, derivat din chitin.. Chitosanul se obine
prin tratarea chitinei (produs insolubil) cu soluie concentrat de hidroxizi (40-45 % NaOH) cnd
are loc nlocuirea majoritii gruprilor acetil de la gruparea amino.

Chitosanul, care conine un numr suficient de grupri amino in lanul polimer, este o baz
policationic n medii acide, astfel nct se solv n medii slab acide. Gradul de deacetilare necesar
pentru a obine produi solubili trebuie s fie de 80 85 % sau mai mare
S-au utilizat o prob de Chitosan tip CHV3 ( Vanson ChemicalsRedmond WA, S.U.A) avnd
gradul de deacetilare 79,7 % i o mas molar medie gravimetric de 310000 g/mol. Spectrul FTIR al acestei probe este prezentat n Fig.4.3.

48

Fig. 4.3 - Spectrul FTIR pentru proba de Chitosan CHV3

In spectru se gsesc benzile caracteristice:

2879 cm-1 vibraia de alungire a legturii C-H;
1655 cm-1 - vibraia de alungire a legturii C=O din amida secundar
1598 cm-1 - vibraie legturii N-H din amina primar ne-acilat din 2-aminoglucoz
1423; 1381; 1321 cm-1 vibraii caracteristice legturii N-H din amida legturii eterice
1155; 1078; 1032 cm-1 - benzi de vibraie pentru puni de oxigen C-O-C eteric din ciclu
Introducerea chitosanului n compozite s-a fcut prin intermediul lichidului de priz, sub
form amoniu, chitosan lactat sau chitosan citrat. Componentele lichide utilizate au fost
preparate astfel:
LC1 Soluie de Chitosan 3% n acid clorhidric 1N. In fapt , datorit masei molare
relativ
mari a chitosanului i gradului de deacetilare mic (80 %) la concentraia de 3
% nu
se obine o soluie limpede ci o suspensie foarte fina (chitosan partial solvit ).
Aceast
suspensie a fost nclzit la 40 oC, dispersat foarte fin cu un agitator de turaie
mare
(ULTRATUREX) (la 1500018000 rpm) i n final ultrasonat. pH-ul soluiei =
1,0
LC2 Soluie Chitosan lactat 1,5% n acid clorhidric 0,5 N. Aceasta s-a preparat

49
amestecnd volume egale de suspensie de chitosan 3% cu o soluie de acid lactic
care
conine acid intr-o cantitate echivalent cu grupele NH ale chitosanului.
Amestecul sa nclzit pe baie de ultrasunete timp de 30 min la 50 oC. In final se obine o
soluie
limpede de Chitosan lactat (p H= 1,25)
LC3 Soluie Chitosan citrat 1,5 % n acid clorhidric 0,5 N, preparat n acelai mod
ca
soluia LC2 (pH = 1,20)
Tabelul 4.3 Cimenturi si compozite pe baz de fosfat tricalcic
ProbaComponenta
Solida (P2)Comp.
lichid L/P
mL/gTimp de priz
(min)ObservaiiIniialFinalCC1.1a60% Ca3(PO4)2
25% CaHPO4.anh
10% CaCO3
5%Ca10(PO4)6.(OH)2LC10,54560Pasta bine modelabil. Rezisten mecanic micCC1.1b0,43248Pasta
modelabil. Rezisten mecanic mic. Priz redusCC1.2LC20,56585Pasta prelucrabil. Priz foarte
proast. Ciment frmiciusCC1.2b0,45573CC1.3LC30,52437Pasta prelucrabil. Aderen bun.
Rezistenp medie

Probele de ciment obinute au fost caracterizate prin spectroscopie IR cu transformat

Fourier, microscopie electronic cu baleiaj i comportare termic. Unele probe, dup uscare
au fost calcinate n aer. Protocolul de calcinare a fost: nclzire de la 20 la 1100 oC n timp de
60 min (18 oC/min), meninere la 1100 oC timp de 30 min i rcire n aer.
Spectrele IR pentru proba CC1.1, necalcinat i calcinat la 1100 oC sunt prezentate n
Figura 4.4, comparativ cu spectrul FTIR al hidroxiapatitei. In spectrul cimentului ntrit se
regsesc benzile spectrale caracteristice fosfatului tricalcic (1062, 1034, 563 cm-1), cele ale
carbonatului de calciu (1431, 875,717 cm-1) dar i benzi caracteristice chitosanului (1635,
1138 , 1032 cm-1) unele dintre acestea deplasate i/sau suprapuse n benzi mai largi. Prezena
tuturor acestor benzi indic faptul ca priza i ntrirea cimentului n prim faz nu are loc

50
prin formarea produsului insolubil, respectiv hidroxiapatita, i poate fi datorat precipitrii
chitosanului prin modificarea pH-ului, formrii de legturi chimice ntre gruprile acide ale
chitosanului (-NH3+) i gruprile bazice ale componenilor pulberii de ciment. Se pare c
datorit prezenei chitosanului precipitarea hidroxiapatitei are loc mult mai lent dect n
cimentul baz, dovad i timpii de priz mai mari. Prezena benzii foarte largi n domeniul
3450 cm-1 i a benzii de la 1639 cm-1 indic faptul c proba are o mare cantitate de ap
adsorbit fizic.
Pin nclzire la temperaturi mari procesul de formare a hidroxiapatitei este favorizat i
accelerat foarte mult. Aceasta se poate constata prin compararea spectrului IR al probei
calcinate (CC1.1 calcinat) cu cel al hidroxiapatitei; practic cele dou spectre prezentnd
benzi de absorbie n aceleai domenii spectrale si la numere de und foarte apropiate

Fig. 4.4 Spectrele FT-IR pentru proba de ciment CC1.1 ntrit i aceeai prob calcinat

51
Se poate admite c prin calcinare n proba de ciment ntrit se formeaz numai
hidroxiapatit .
Analiza microfotografiilor din Fig 4.5, n care este prezentat aspectul suprafeei fracturate a
cimentului ntrit i a aceluiai material calcinat, permite s se confirme concluziile rezultate
din analiza spectrelor IR. Ambele imagini sunt realizate la aceeai scal (x2000). Suprafaa
probei ntrite i uscate este rugoas, pe o suprafa relativ neted, compact, care ar putea fi
matricea din chitosan, sunt mprtiate i ncastrate fragmente neregulate de dimensiuni
variabile (110 m), unele dintre acestea par a fi aglomerri de cristale nanometrice. Proba
calcinat prezint o structur neregulat acoperit cu fragmente cristaline neregulate mari
(525 m). La o analiz mai atent se poate observa c aceste fragmente sunt formate din
mici cristale aciculare, caracteristice celor de hidroxiapatit. Proba prezint pori mari aprui
probabil dup descompunerea termic a chitosanului i carbonatului de calciu.

Fig. 4.5 Microfotografiile SEM pentru proba CC1.1 ntrit (a) i calcinata la 1100 oC

52

Fig. 4.6 Spectrul FTIR pentru proba ntrit cu soluie de chitosan citrat (CC1.3)
Proba de ciment CC1.3, la care pentru priz s-a utilizat o soluie de chitosan citrat, se
prezint asemntor cu proba ntrit cu suspensie de chitosan (CC1.1); spectrul cimentului
ntrit contine benzile de absorbie caracteristice compoentilor principal n timp ce spectrul
probei calcinate este practic identic cu cel al hidroxiapatitei (Fig. 4.6).

53

Fig. 4.7 Microfotografiile suprafeei fracturate pentru proba CC1.3, preparat cu soluie de
chitosan citrat (a) proba necalcinat, (b) proba calcinat
i n acest caz proba ntrit are aspectul unei faze continue acoperit cu fragmente
amorfe neregulate cu dimensiuni variabile de 18 m, n timp ce proba cristalizat are o
structur afnat format mari aglomer de nanocristale de hidroxiapatit. (Fig. 4.7b)
Caracterul microporos al probelor de compozit ciment fosfo-calcic/polimer calcinate se
poate remarca cel mai bine n cazul probei preparate cu chitosan-lactat. Microfotografiile
probei calcinate, nregistrate la dou puteri de mrire (x1000 respectiv x5000) sunt prezentate
n Fig. 4.8. In microfotografia realizat la rezoluie mic indic o suprafa rugoas dar relativ
uiform, n timp ce microfotografia realizat la o mrire de 5000 ori evideniaz caracterul
foarte poros al acestui material, remarcndu-se pori deschii cu diametru cuprins ntre 38
m, dar i pori foarte fini cu diametre sun 1 m.

54

Fig. 4.8 Microfotografiile probei CC1.2 calcinat la 1100 oC, ntrit cu chitosan-lactat.
Dac se rezolv i problema atingerii unei rezistene mecanice corespunztoare, aceast
formul de compozit ar putea fi folosit nu numai ca ciment pentru restaurri ci si ca materia
pentru confecionarea substitutelor osoase.

4.4 Compozite ciment fosfo-calcic/acid polilactic

O alt metod de obinere a compozitelor organic/anorganic const n includerea polimerului
n componenta solid, prin realizarea unui complex polielectrolit/ciment fosfo-calcic.
In studiul de fa componenta anorganic a fost amestecul notat simbolic cu P2, definit n
cap. 4.3 i avnd compoziia:

60% Ca3(PO4)2, 25% CaHPO4.anh., 10% CaCO3, 5%Ca10(PO4)6.(OH)2,

iar

componenta organic a fost acidul polilactic (PLA). Acesta este un ester alifatic biodegradabil i
termoplastic derivat de la acidul lactic, care poate fi produs uor cu mas molar mare prin
polimerizarea cu deschiderea ciclului acidului lactic folosind drept catalizator SnCl2.

55

Acidul polilactic s-a dizolvat n diclormetan obinndu-se o soluie de concentraie 10 % (w/v).

Pentru obinerea pulberilor de ciment, o cantitate cntrit de amestec P2 a fost amestecat
cu o cantitate de soluie de acid lactic 10% pentru a se obine un anumit raport P2/acid lactic. Se
amestec foarte bine obinndu-se o past alb consistent. Solventul sa evaporat din past i aceasta
s-a uscat ntr-o etuv de vid, la 45 oC. Dup uscare pasta solid obinut a fost mojarat. Prin acest
procedeu au fost realizate pulberile solide cu compoziia:
P3 : 95% P2 + 5% PLA
P4 : 90% P2 + 10% PLA
P5 : 97% P2 + 3% PLA
Componentele lichide folosite pentru realizarea prizei cimentului au fost:
L3 : soluie Na2HPO4 3% (pH = 9,13)
L4 : soluie tampon fosfai 0,2M (pH = 7,46)
LC1: suspensie de Chitosan 3% n HCl 1M (pH = 1,0)
Utiliznd aceste materiale de baz s-au realizat compozitele prezentate n Tabelul 4.4
Tabelul 4.4 Compozite pe baz de ciment fosfo+calcic i acid polilactic
ProbaComponenta
Solida Componenta
lichidRaport L/P
mL/gTimp de priz
(min)ObservaiiCC3.1aP3L40,418Past moale injectabila. Priz bun. Rezisten mic CC3.1b0,35Pasta
consistent, prelucrabil.

Intrire rapid. Rezisten bun CC4.1aP4L40,3816Past prelucrabil. Rezistennt la

compresiune bun.CC4.1b0,3112IdemCC4.2LC10,4120Past foarte consistent. Necesit amestecare foarte bun,

de preferat prin mojarare.CC4.3L30,3615Past grunjuroas, greu modelabilCC5.1aP5L40,3853Past injectabil.
Intrire lent. Rezisten micCC5.1bL40,3021Past prelucrabil. Rezisten relativ mic

Sub aspectul prelucrabilitii pastei i a timpului de priz compozitele realizate cu ciment

fosfo-calcic i acid polilactic , cu coninut de polimer mai mare de 5% , par cele mai
convenabile mai ales atunci cnd se folosete ca lichid de priz o soluie tampon pe baz de
fosfai 0,2M, cu pH=7,6..
Timpul de priz scade foarte repede cu creterea coninutului de acid polilactic n
pulberea solid i cu micorarea raportului lichid/pulbere. Reglarea timpului de priz i
ntrire prin modificarea raportului L/P este limitat datorit consistenei pastei obinute; la

56
rapoarte L/P mari se obin paste fluide, injectabile cu timp de priz mare i cu rezisten
mecanic mic, n timp ce la rapoarte L/P mici timpul de ntrire este prea scurt, amestecarea
componenilor nu e face bine, se obin paste foarte consistente grunjuroase. Se pare c o
proporie de 10% acid lactic i un raport L/P aproximativ 0,3 sunt cele mai convenabile
condiii.
Sub aspectul structurii compozitelor, spectroscopia FT-IR permite s se evidenieze o
serie de concluzii. Spectrele FT-IR pentru compozitul obinut cu pulbere P3 (5% ac. Lactic)
ntarit cu soluie tampon fosfai la un raport L/P = 0,3 (proba CC3.1b), sunt prezentate n
Fig. 4.9.

Fig. 4.9 - Spectrele FT-IR pentru proba CC3.1b; (a) ntrit, (b) calcinat la 1100 oC

57
In spectrul FTIR al probei ntrite, pe lng benzile caracteristice fosfailor tricalcic i dicalcic
din cimentul baz (1066, 1036, 939 cm -1) se pot remarc benzi caracteristice carbonatului de
calciu (1427, 875, 717 cm-1). Prezena acidului lactic este evideniat prin banda de intensitate
mic de la 1795 cm-1 care poate fi atribuit gruprii carbonil (n acidul polilactic pur aceast
band este situat la numrul de unde 1760 cm -1, deplasarea produs n cimentul ntrit fiind
datorat interaciunilor cu ceilali componeni ai compozitului). Prezena acestor benzi indic
faptul c procesul de formare a hidroxiapatitei nu este nc realizat.
Spectrul probei calcinate este foarte apropiat de cel al hidroxiapatitei. Umrul de intensitate
mic de la 1400 cm-1 caracteristic ionilor carbonat indic fatul c produsul calcinat este o
hidroxiapatit carbonatat, similar cu materialul din oasele naturale.
Microfotografiile suprafeei fracturate ale probelor ntrit i calcinat sunt prezentate
n Fig. 4.10.

Fig. 4.10 Microfotografiile SEM pentru proba CC3.1b :

(a) - proba ntrit (x5000), (b) proba calcinat (x4000)
Imaginea din Fig. 4.10a, indic faptul c prezena acidului polilactic n compozit favorizeaz
procesul de cristalizare n timpul realizrii prizei microfotgrafia indicnd o structur
microcristalin dezordonat. Dup calcinare (Fig. 4.10b)

aspectul probei se modific,

dimensiunile fragmentelor sunt mult mai mari, probabil datorit aglomerrii nano cristalelor
de hidroxiapatit.

58

Bibliografie
1. JARCHO, M. Calcium Phosphate Ceramics as Hard Tissue Prosthetics, Clin Orthopaed 157,
(1981), p. 259-278.
2. JARCHO, M.): Biomaterials Aspects of Calcium Phosphates: Properties and Applications, Dent
Clin N Am 30, (1986), p. 25-47.
3. JARCHO, M.; KAY, J.F.; DROBECK, H.P, DOREMUS, R.H., Tissue, Cellular and
Subcellular Events at Bone-Ceramic Hydroxylapatite Interface, J Bioeng 1, (1976), p. 79-92.
4.JARCHO, M.; SALISBURY, R.L.; THOMAS, M.B.; DOREMUS, R.H., Synthesis and
Fabrication of Tricalciumphosphate (Whitlockite) Ceramics for Potential Prosthetic
Application, JMater Sci 14, (1979), p. 142-148.
5. de GROOT, K. Ceramic of Calcium Phosphates: Preparationand Properties. In: Bioceramics of
Calcium Phosphate, K. de Groot, Ed., Boca Raton, FL: CRC Press, (1983):, p. 100-114.
6. de GROOT, K. (Hydroxylapatite Coatings for Implants in Surgery. In: High Tech Ceramics, P.
Vincenzini, Ed., Amsterdam, Elsevier Science Publishers, B.V., (1987): pp. 381-386
7. LeGEROS, R.Z.; CHOHAYEB, A.; SCHULMAN, A. Apatitic Calcium Phosphates: Possible
Restorative Materials, J Dent Res , 61 (1982),: 343 Abst. No. 1482
8. LEMONS, J. and NATIELLA, J. Biomaterials, Biocompatibility and Peri-implant
Considerations, Dent Clin N Am 30, (1986), p. 3-23.
9. ARDOIN, R.C.; BLOCK, M.S.; KAY, J.; KENT, J.N.; JARCHO, M. SEM of HA Coated and
Non-coated Titanium Dental Implants in Canines, J Dent Res 65(1986): 222, Abstr. 475
10. DENISSEN, H.W. and de GROOT, K. Immediate Dental Root Implants from Synthetic Dense
Calcium Hydroxylapatite Implants, J Prosthet Dent 42,1979), p. 551-556.
11. DUCHEYNE, P.; HENCH, L.L.; KAGAN, A.; MARTENS, M.; BURSENS, A.; MULIER, J.C.
Short Term Bonding Behavior of Bioglass Coatings on Metal Substrate, Arch Orthop Traum
Surg 94, (1979), p. 155-160.
12. DUCHEYNE, P.; VAN RAEMDONCK, W.; HEUGHEBAERT, J.C; HEUGHEBAERT, M
Structural Analysis of Hydroxylapatite Coatings on Titanium, Biomaterials 7, (1986), p. 97103.
13. GOLEC, T.S. The Use of Hydroxylapatite to Coat Subperiosteal Implants, J Oral Implantol 10,
(1983)p. 21-38.
14. IGNJATOVIC, N.; TOMIC, S.; DAKIC, M.; MILJKOVIC, M.; PLAVSIC, M.,
USKOKOVIC, D., Synthesis and properties of hydroxyapatite/poly-L-lactide composite
biomaterials". Biomaterials 20, (1999), p. 809-816
15. MARRA, K.G.; SZEM, J.W.; KUMTA, P.N.; DIMILLA, P.A. & WEISS, L.E. "In vitro
analysis of Biodegradable polymer blend/hydroxyapatite composites for bone tissue
engineering". Journal of Biomedical Materials Research 47, (1999), p.324-335

59

16. IGNJATOVIC, N.L.; PLAVSIC, M.; MILJKOVIC, M.S.; ZIVKOVIC, L.M. &
USKOKOVIC, D.P., Microstructural characteristics of calcium hydroxyapatite/ poly-Llactide based composites". Journal of Microscopy-Oxford, 196, (1999)., p. 243-248
17. ZHANG, R.Y., MA, P.X., Porous poly(L-lactic acid)/apatite composites created by
biomimetic process, ,Journal of Biomedical Materials Research 45, (1999), p..285-293
18. LIU, Q.; DE WIJN, J., VAN BLITTERSWIJK, C.A. "Composite biomaterials with
chemical bonding between hydroxyapatite filler particles and PEG/PBT copolymer matrix".
Journal of Biomedical Materials Research 40, (1998),.490-497
19. CERRAI, P.; GUERRA, G.D.; TRICOLI, M.; KRAJEWSKI, A.; RAVAGLIOLI, A.;
MARTINETTI, R.; DOLCINI, L.; FINI, M.; SCARANO, A. & PIATTELLI, A. Periodontal
membranes from composites of hydroxyapatite and bioresorbable block Copolymers .
Journal of Materials Science - Materials in Medicine 10, (1999), p. 677
20. REDDI, A.H. (1981): Bone Induction: Introduction and Perspectives. In: The Chemistry and
Biology of Mineralized ConnectiveConnectiveTissues, A. Veis, Ed., Amsterdam: Elsevier
Publishers, p. 593-596.
21. URIST, M.R, STRATES, B.S. Bone Morphogenetic Protein, J Dent Res 50,(1971):: 1391-95.
22.LASKIN, D.M., State of the Art of Alveolar Ridge Augmentation, Compendium Cont Edu Dent
Suppl 2, (1982), S46-S48.
23. MIYAMOTO Y, ISHIKAWA K, TAKECHI M, TOH T, YUASA T, NAGAYAMA M, Basic
properties of calcium phosphate cement containing atelocollagen in its liquid or powder phases.
Biomaterials, 19,1998, p. 70715.
24. NGUYEN H, QIAN JJ, BHATNAGAR RS, LI S. Enhanced cell attachment and osteoblastic
activity by P-15 peptide-coated matrix in hydrogels, Biochem Biophy Res Commun 311,
(2003), p. 17986.
25. KARESH JW. Biomaterials in ophthalmic plastic and reconstructive surgery., Curr Opin
Ophthal, 9, (1998), p. 6674.
26. In vitro degradation of a poly(propylene fumarate)/ b-tricalcium phosphate composite
orthopedic scafold, Tissue Eng, 3, (1997), p. 20715.
27. BROWN WE, CHOW LC. A new calcium phosphate water setting cement. In: BROWN PW,
editor. Cements research progress. Westerville (OH), American Ceramic Society; 1986. p.
35179.
28. GINEBRA MP, FERNANDEZ E, DE MAEYER EAP, VERBEECK RMH, BOLTONG MG,
GINEBRA J, Setting reaction and hardening of an apatite calcium phosphate cement. J Dent
Res ,76 , (1997), p. 90512.
29. CONSTANTZ BR, BARR BM, ISON IC, FULMER MT, BAKER J, MCKINNEY L,.
Histological, chemical, and crystallographic analysis of four calcium phosphate cements in
diferent rabbit osseous sites, J Biomed Mater Res, 43, (1998), p. 45161.
30. MIYAMOTO Y, ISHIKAWA K, TAKECHI M, TOH T, YUASA T, NAGAYAMA
M,.Histological and compositional evaluations of three types of calcium phosphate cements
when implanted in suvcutaneous tissue immediately after mixing, J Biomed Mater Res, 48
(1999), p. 3642.
31. BROWN W, CHOW LC. Combinations of sparingly soluble calcium phosphates in slurries and
paste as mineralizers and cements. US Patent No. 4612053, (1986).
32. FUKASE Y, EANES ED, TAKAGI S, CHOW LC, BROWN WE. Setting reactions and
compressive strength of calcium phosphate cement, J Dent Res, 69, (1990), p. 18526.

60
33. SUGAWARA A, NISHIYAMA M, KUSAMA K, MORO I, NISHIMURA S, KUDO I,
Histopathological reaction of calcium phosphate cement, Dent Mater J , 11, (1992),p.116.
34. ISHIKAWA K, TAKAGI S, CHOW LC, ISHIKAWA Y, EANES ED, ASAOKA K,Behavior of
a calcium phosphate cement in simulated blood plasma in vitro, Dent Mater , 10, (1994), p. 26
32.
35. ISHIKAWA K, ASAOKA K. Estimation of ideal mechanical strength and critical porosity of
calcium phosphate cement. J Biomed Mater Res, 29, (1995), p. 153743.
36. MANOJ KOMATH, H K VARMA ,Development of a fully injectable calcium cement for
orthopedic and dental applications, Bull. Mater. Sci., 26, (2003), p. 415422.
37. MICKIEWICZ R A, Polymer-Calcium Phosphate composites for use as an injectable bone
Substitute, Thesis - Massachusetts Institute of Technology, (2001)
38. LIU H, LI H , CHENG W, YANG Y, ZHU M , ZHOU C, Novel injectable calcium
phosphate/ chitosan composites for bone substitute materials, Acta Biomaterialia, 2, (2006)
p. 557565,
39. MACHIDA Y, NAGAI T, ABE M, SANNAN T. Use of chitosan and hydroxypropylchitosan
in drug formulations to e.ect sustained release, Drug Discov Deliv, 1, (1986), p. 11930.
40. MUZZARELLI RAA, BIAGINI G, BELLARDINI M, SIMONELLI L, CASTALDINI C,
FRATTO G,. Osteoconduction exerted by methylpyrrolidinone chitosan used in dental surgery.
Biomaterials, 14(1), (1993), p. 3943.
41. MUZZARELLI RAA, Amphoteric derivatives of chitosan and their biological signi.cance.
In: SKJAK-BRAK G, ANTHONSEN T, SANDFORD P, editors. Chitin and chitosan. New
York (NY): Elsevier; (1989). p. 8799.
42. MUZZARELLI R, BALDASSARRE V, CONTI F, FERRARA P, BIAGINI G,GAZZANELLI G, .
Biological activity of chitosan: ultrastructural study., Biomaterials, 9, (1988), p. 24752.
43. DI MARTINO A, SITTINGER M, RISBUD MV. Chitosan: a versatile biopolymer for
orthopedic tissue-engineering, Biomaterials, 26, (2005), p.598390.
44. MARUYAMA M, ITO M. In vitro properties of a chitosan-bonded selfhardening paste with
hydroxyapatite granules, J Biomed Mater Res, 32, (1996), p. 52732.
45. ITO M, MIYAZAKI A, YAMAGISHI T, YAGASAKI H, HASHEM A, OSHIDA Y,
Experimental development of a chitosan-bonded beta-tricalcium phosphate bone filling paste.
Biomed Mater Eng, 4, (1994), p. 43949.
46. ITO M, YAMAGISHI T, YAGASAKI H, KAFRAWY AH. In vitro properties of a chitosanbonded bone-.lling paste: studies on solubility of calcium phosphate compounds. J Biomed
Mater Res 32, (1996), p.958.
47. BIGI A., BRACCI B., PANZAVOLTA S., Effect of added gelatin on the properties of
calcium phosphate cement, Biomaterials, 25, (2004), p. 28932899
48. DURUCAN C, BROWN PW. -Tricalcium phosphate hydrolysis to hydroxyapatite at and
near physiological temperature, J Mater Sci Mater Med, 11, (2000),p.36571.
49. DURUCAN C, BROWN PW. Reactivity of alpha-tricalcium phosphate. J Mater Sci
37, (2002), p. 9639.
50. BIGI A, BOANINI E, BOTTER R, PANZAVOLTA S, RUBINI K. -tricalcium phosphate
hydrolysis to octacalcium phosphate: effect of sodium polyacrylate, Biomaterials, 23,
(2002), p.184954.
51. GRANJA P.L., SILVA A.I.N., BORGES J.P., BARRIAS C.C; AMARAL I.F.,
Preparation

61
and characterization of injectable Chitosan/Hydroxyapatite microspheres,
Key Engineering
Materials Vols, 254-256, (2004), p.573-576
52. DRIESSENS F C M, PLANELL J A AND GIL F J in Encyclopedic handbook of
biomaterials and bioengineering, Part B (N. Y., Marcel Dekker Inc) Vol. 2, (1995), p 855
53. DRIESSENS, F.C.M.; PLANELL, J.A.; BOLTONG, M.G.; KHAIRUM, I.; GINEBRA, M.P.
Proc. Inst. Mech. Engrs.,. 212(1998), p. 427-435,.
54. KIM, S.R.; PARK, S.J. in: Ceramic Transactions Vol.22:Ceramic Powder Science III,
MESSING, G.L.; HIRANO, S.; HAUSNER, H. (Eds.), American Ceramic Society,
Westerville, OH, (1991), p. 201,.
55. PRADO DA SILVA, M.H.; LIMA, J.H.C.; SOARES, G.A.; ELIAS, C.N.; DE ANDRADE,
M.C.; BEST, S.M.; GIBSON, I.R. Surf. Coat. Technol., 137, (2001), p. 270-276,.
56. FULMER, M.T.; BROWN, P.W. J. Mater. Sci. Mater. Med., 9, (1998), .p. 1997-2002,
57. LEGEROS, R.Z. Calcium Phosphates in Oral Biology and Medicine, Karger,
Basel,
Switzerland, (1991).
58. CARRODEGUASA R G, ALONSOA L M, GARCA-MENOCAL J A D, ALONSO L M,
GINEBRA MOLINS MP, MANENTC S M, MURB J M, PREZA J T, ESTANY J A P,
Hydrothermal Method for Preparing Calcium Phosphate Monoliths, Materials Research, 6
(3), (2003), p.395-401
59. KHAIROUN I, LE GEROS RZ, DACULSI G, BOULER JM, GAUTHIER O, GUICHEUX
J. Macroporous, resorbable and injectable calcium phosphate-based cements (MCPC) for bone
repair, augmentation, regeneration, and osteoporosis treatment, patent WO2005077049.
60. LEGEROS RZ, SHIRRA WP, MIRAVITE MA, LEGEROS JP. Amorphous calcium
phosphates: synthetic and biological. In: Monetal G, editor. Colloque Int CNRS No. 230
Physicolchimie et cristallographie des Apatites dInteret Biologique, Paris, 1973. p. 1015
61. BOSKEY AL, POSNER AS. Magnesium stabilization of amorphous calcium phosphate: a
kinetic study., Mater Res Bull , 9, (1974) , p. 90716.
62. LEGEROS RZ. Calcium phosphates in oral biology and medicine.Monographs in oral
sciences, vol. 15. Karger: Basel; (1991)
63. JULIEN M., KHAIROUN I., LeGEROS R.Z.,DELPLACE S., PILET P., WEISS P.,
DACULSIG., BOULER J.M., GUICHEUX J., Physico-chemical-mechanical and in vitro
properties of calcium phosphate cements with doped amorphous calcium phosphates,
Biomaterials,, 28, (2007), p. 956-965;
64 SANIN N, TAKAGI S, CHOW LC, MATSUYA S. Particle size effects on pH and strength
of calcium phosphate cement, J Dent Res, 70, (1991), 567
65. OTSUKA M, MATSUDA Y, SUWA Y, FOX JL, HIGUCHI WI. Effect of particle size of
metastable calcium phosphates on mechanical strength of a novel self-setting bioactive
calcium phosphate cement. J Biomed Mater Res, 29, (1995), p.2532.
66. FERNANDEZ E, GIL FJ, GINEBRA MP, DRIESSENS FCM, PLANELL JA, BEST SM.
Production and characterisation of new calcium phosphate bone cements in the CaHPO4Ca3(PO4)2 system: pH, workability and setting times. J Mater Sci Mater Med, 10, (1999),
p.22330.
67. GINEBRA M.P., DRIESSENS F.C.M., PLANELL J.A., Effect of the particle size on the
micro and nanostructural features of a calcium phosphate cement: a kinetic analysis,
Biomaterials,, 25, (2004), p. 3453-3462
67. GINEBRA MP, FERN!ANDEZ E, DRIESSENS FCM, PLANELL JA. Modeling of the hydrolysis

62
of a-tricalcium phosphate. J Amer Ceram Soc, 82, (1999), p. 280812.
68 ANAHASHI M, YAO T., KOKUBO T., MINODA M., MIYAMATO T., NAKAMURA T.,
YAMAMURO T., Apatite coating on organic polymers by biomimetic process, J. Am.Ceram.
Soc., 77, (1994), p. 2805 2808.
69 Bonfield W., in: LeGEROS R.Z., LeGEROS J.P. (Eds.), Composite Biomaterials: Present
and Future, Bioceramics, vol. 11, World Scientific, Singapore, (1998), p. 37.
70 Kokubo T., Kushitani H.,. Sakka S, Kitsugi T., Yamamuro T., Solutions able to reproduce in
vivo surface-structure changes in bioactive glassceramic A-W, J. Biomed. Mater. Res. 24,
(1990), p. 721 734.
71. TSURU K., OHTSUKI C., OSAKA A., IWAMOTO T., MACKENZIE J.D., Bioactivity
of sol gel-derived organically modified silicates: Part I. In vitro examination, J. Mater.
Sci.: Mater. Med., 8, (1997), p. 157161.
72. OHTSUKI C., MIYAZAKI T., TANIHARA M., Development of bioactive organicinorganic hybrid for bone substitutes, Materials science and Eng, part C, 22, (2002),p 27-34
73. BROWN GD, MEALEY BL, NUMMIKOSKI PV, BIFANO SL, WALDROP TC ,
Hydroxyapatite cement implant for regeneration of periodontal osseous defects in humans.
J Periodontol,69, (1998), p. 14657.
74. FRAME JW, ROUT PGJ, BROWNE RM. Ridge augmentation using solid and porous
hydroxylapatite particles with and without autogenous bone or plaster. J Oral Maxillofac
Surg, 45(9), (1987); p. 7718.
75. AMLER MH. Osteogenic potential of nonvital tissues and synthetic implant materials.
J. Periodontol, 58(11), (1987), p. 75861
76. Takagia S,. Chow L C, Hirayamab S,. Eichmiller FC, Properties of elastomeric calcium
phosphate cementchitosan composites, Dental Materials, 19, (2003), p. 797-804,
77. EL BRIAK H, DURAND D, NURIT J, MUNIER S, PAUVERT B, BOUDEVILLE P,
Study of a hydraulic dicalcium phosphate dihydrate/calcium oxide-based cement for dental
applications. J Biomed Mater Res, 63, (2002), p.44753.
78. DRIESSENS FCM, BOLTONG MC, DE MAEYER EAP, WENZ R, NIES B, PLANELL
JA. The Ca/P range of nanoapatitic calcium phosphate cements, Biomaterials 23, (2002),
p. 40117.
79. DRIESSENS FCM, BOLTONG MG, DE MAEYER EAP, VERBEECK RMH, WENZ R.
Effect of temperature and immersion on the setting of some calcium phosphate cements.
J Mater Sci Mater Med, 11, (2000, p.:4537.
80. KHAIROUN I, DRIESSENS FCM, BOLTONG MG, PLANELL JA. Addition of cohesion
promotors to calcium phosphate cements, Biomaterials, 20, (1999), p.3938.
81. DOS SANTOS LA, DE OLIVEIRA LC, RIGO ECS, CARRODEGUAS RG, BOSCHI AO,
DEARRUDA ACF. Influence of polymeric additives on the mechanical properties of atricalcium phosphate cement. Bone Biomaterials, 25,(1999), p.99102.
82. Durucan C, Brown PW. Low temperature formation of calcium deficient hydroxyapatitePLA/PLGA composites, J Biomed Mater Res, 51, (2000), p.71725.
83. MICKIEWICZ RA, MAYES AM, KNAACK D. Polymer-calcium phosphate cement
composites for bone substitutes. J Biomed Mater Res, 61, (2002), p.58192.
84. SARDA S, FERN!ANDEZ, NILSSON M, BALCELLS M, PLANELL JA,. Kinetic study
of citric acid ifluence on calcium phosphate bone cements as water-reducing agent.,
J Biomed Mater Res, 61, (2002), p.6539.
85. KURASHINA K, KURITA H, TAKEUCHI H, HIRANO M, KLEIN C, DE-GROOT K
Osteogenesis in muscle with composite graft of hydroxyapatite and autogenous calvarial

63
perosteum: a preliminary report. Biomaterials, 16, (1995), p.119-23.
86. SUCHANEK W, YOSHIMURA M. Processing and properties of hydroxyapatite-based
biomaterials for use as hard tissue replacement., J Mater Res, 13, (1998), p.94-117.
87. AGRAWAL M. Reconstructing the human body using biomaterials. JOM, (1998),p. 31-5.
88. FREED L, VUNJAK-NOVAKOVIC G, BIRON R, EAGLES D, LESNOY D, BARLOW
S, LANGER R. Biodegradable polymer sca!olds for tissue engineering. Bio/Technology
12, (1994), p. 689-93.
C,
DEGROOT K. Evaluation of hydroxylapatite/poly(L-lactide) composites: physico-chemical
properties. J Mater Sci: Mater Med, 4, (1993), p. 58-65.

89. VERHEYEN C, KLEIN C, DEBLIECK-HOGERVORST J, WOLKE J, VANBLITTERSWIJK

90. POHJONEN T, HELEVIRTA P, TOK

RMAK LAK P, KOSKIKARE K, PAK TIAK LAK

H, ROKKANEN P. Strength retention of self-reinforced poly-L-lactide screws. A
comparison of compression moulded and machine cut screws. J Mater Sci: Mater Med, 8,
(1997), P. 311-20.
91. MAQUET V., BOCCACCINI A.R., PRAVATA L., NOTINGHER I.,. JEROME R, Journal
of Biomedical Materials Research Part A, 66 (2) (2003), p. 335.
92 . Lu H.H., El-Amin S.F.,. Scott K.D, Laurencin C.T., Journal of Biomedical Materials
Research Part A, 64 (3), (2003), p. 465.
93. MIAO X.,., TAN L.-P.,. TAN L.-S , HUANG X. Porous calcium phosphate ceramics
modified with PLGAbioactive glass, Mat Sce and Eng ,C 27, (2007), p. 274279
94. MIAO X.,. LIM W.-K, HUANG X., CHEN Y., Preparation and characterization of
interpenetrating phased TCP/HA/PLGA composites, Materials Letters, 59, (2005) ,
p. 4000 4005;
95. JANSEN J. A.,.. VEHOF M J.W,. RUHE P. Q, KROEZE-D H.., KUBOKI Y., TAKITA
H, HEDBERG E. L.,. MIKOS A. G, Growth Factor-Loaded Scaffolds for Bone
Engineering, J. Control. Release, 101, (2005), p. 127136
96. RUHE P. Q.,. KROESE-DEUTMAN H. C, J. WOLKE. G. C, SPAUWEN P. H. M.,.
JANSEN J. A, Bone Inductive Properties of rhBMP-2 Loaded Porous Calcium Phosphate
Cement Implants in Cranial Defects in Rabbits, Biomaterials, 25, (2004), p 21232132
97. LE GEROS R. Z., Properties of Osteoconductive Biomaterials: Calcium Phosphates,
Clin. Orthop. Relat. R., 395, (2002), p. 8198
98. POSNER A. S, Crystal Chemistry of Bone Mineral, Physiol. Rev., 49 (1969). P.760792
99. KUHN L. T., XU Y. T., REY C., GERSTENFELD L. C., GRYNPAS M. D.,. ACKERMAN
J. L,KIM H.M. , GLIMCHER M. J., Structure, Composition, and Maturation of Newly
Deposited Calcium Phosphate Crystals in Chicken Osteoblast Cell Cultures, J. Bone Miner.
Res., 15, (2000), p.13011309.
100. LIVINGSTON T.,. DUCHEYNE P, GARINO J., In Vivo Evaluation of a Bioactive
Scaffold for Bone Tissue Engineering, J. Biomed. Mater. Res., 62, (2002). p. 113
101. CUNEYT TAS A., Porous , biphasic CaCO3 Calcium Phosphate Biomedical Cement
Scaffolds from Calcite (CaCO3) Powder, Int. J. Appl. Technol., 4 (2), (2007), p.152-163;
102. BOYAN B. D, LOHMANN C. H., ROMERO J.,. SCHWARTZ Z, Bone and Cartilage
Tissue Engineering, Tissue Eng., 26, (1999), p.629645
103. EDWARDS B., HIGHAM P., ZITELLI J., Porous Calcium Phosphate Cement, US
Patent No: 6,547,866, April 15, (2003).
104 EDWARDS B.,. HIGHAM P, ZITELLI J., Porous Calcium Phosphate Cement, US Patent
No: 6,670,293, December 30, (2003).

64
105. WENG W., HAN G., DU P., SHEN G., The Effect of Citric Acid Addition on the
Formation of SolGel Derived Hydroxyapatite, Mater. Chem. Phys., 74, (2002), p. 9297
106. LOPEZ-MACIPE A., GOMEZ-MORALES J., RODRIGUEZ-CLEMENTE R., The Role
of pH in the Adsorption of Citrate Ions on Hydroxyapatite, J. Coll. Interf. Sci., 200, (1998)
p. 114120
107. FILGUEIRAS M. R. T, MKHONTO D., DE LEEUW N. H., Computer Simulations
of the Adsorption of Citric Acid at Hydroxyapatite Surfaces, J. Cryst. Growth, 294, (2006)
p. 6068 ;
108.
FODA N.H., El-IAITHY H.M.. TADROS M.I., Implantable Biodegradable Sponges:
Effect of Interpolymer Complex formation of Chitosan with Gelatin on the Release
behavior of Tramadol Hydrochloride, Drug Develop and Ind Pharmacy, 33 (1), (2007),
p. 7-17
109.
XU H.H.K, SIMON Jr C.G., Fast setting calcium phosphate-chitosan scaffold:
mechanical properties and biocompatibility, Biomaterials, 26, (2005), p. 1337-1348:
110. XU HHK, QUINN JB, TAKAGI S, CHOW LC, EICHMILLER FC. Strong and
macroporous calcium phosphate cement:effects of porosity and .ber reinforcement on
mechanical properties., J Biomed Mater Res 57, (2001); p. 45766.
111. Reinstorf A., Pompe W., Bernhardt A., Gelinsky M., Niles B., Modified Calcium
Phosphate Bone Cement, U S Patent Application 20050217538
112. Neumann M., Epple M., Composites of Calcium Phosphate and Polymers as Bone
Substitution Materials, European Journal of Trauma,2, (2006), p. 131.
113. Schnettler R., Stahl J. P., Alt V., Pavlidis T., Dingeldein E., Calcium Phosphate-Based
Bone Substitutes, European Journal of Trauma No. 4, (2004), p. 219-229