Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curisri Nota
Curisri Nota
Celulele:
sunt unitile structurale ale lumii vii,
se afl permanent n relaie de echilibru dinamic cu mediul nconjurtor,
transform elementele din mediu n elemente proprii:
o prin procese consumatoare de energie,
au ca principale proprieti: creterea, dezvoltarea, autoreproducerea.
Din punct de vedere structural exist dou tipuri fundamentale de celule: procariotele i
eucariotele.
Procariotele (celulele fr nucleu propriu-zis) sunt:
formele celulare de via cele mai simple i primitive,
reprezentate n principal de bacterii i alge,
celule mici, cu lungimea de 1-5 m,
formate din puine elemente structurale:
o membrana celular alctuit din:
membrana intern ce trimite spre interior mici expansiuni,
membrana extern cu rol protector,
la exterior poate prezenta un perete celular,
o un nucleoid reprezentat de un lan de ADN fr histone asociate, ce nu prezint
nveli nuclear pentru a-l separa de ceilali constitueni celulari,
o numeroi ribozomi liberi n citoplasm.
Procariotele au capacitate de nmulire deosebit i se adapteaz foarte uor la
condiiile de mediu. Procariotele sunt studiate n medicin doar ca ageni patogeni.
Eucariotele:
sunt celule mai mari, cu diametrul peste 10 m,
sunt reprezentate de protozoare (ex. amoeba), celulele plantelor, ani-malelor, omului,
au o organizare complex, cu trei componente principale:
o membrana (suprafaa celular),
o citoplasma, la nivelul creia exist numeroase organite delimitate de
endomembrane,
o nucleul distinct, al crui material genetic, cu histone asociate este delimitat de
nveluul nuclear.
Organismul uman este alctuit din 1012 1015 celule eucariote grupate n numeroase
(cteva sute) tipuri celulare, difereniate pentru a-i realiza funcia cu o eficien mare. Ele pot
prezenta o singur funcie specific, dar frecvent au capacitatea de a realiza dou sau mai
multe funcii:
celulele glandelor mucoase au rol n sinteza i secreia unor substane mucoase,
celulele musculare au ca funcie contractilitatea,
1
FORMA CELULELOR
Celulelor eucariote au forme foarte diferite, determinate de:
factori genetici,
caracteristicile fizice i chimice ale mediului n care se afl,
raporturile intercelulare,
funciile pe care le ndeplinesc.
Celulele aflate n mediu lichid (ex. celulele sanguine) sunt de obicei de form rotund
sau ovalar, dar forma lor poate suferi modificri sub influena factorilor:
interni sau intracelulari,
externi sau extracelulari.
Astfel, leucocitele din snge, sferice sau ovale n plasma sanguin, i modific mult
forma cnd strbat peretele vascular prin procesul de diapedez.
La nivelul esuturilor i organelor, celulele realizeaz contacte strnse ntre ele, iar
forma lor devine neregulat datorit compresiunilor reciproce.
DIMENSIUNILE CELULELOR
La microscopul optic pot fi examinate structuri ale cror dimensiuni sunt de ordinul
micrometrilor. La microscopul electronic ns pot fi studiate i cele de ordinul nanometrilor
sau chiar al angstromilor.
De obicei este apreciat diametrul celulelor, iar suprafaa sau volumul lor pot fi
calculate.
Diametrul majoritii celulelor din organism este cuprins ntre 10-30 m:
cele mai mici celule la mamifere sunt considerate celulele granulare (neuronii
granulari) din cerebel, cu diametrul de 3-4 m,
cele mai mari sunt ovocitele care au aproximativ 200 m,
unele celule nervoase pot depi 100 m.
Nu exist o corelaie stns ntre mrimea celulei i mrimea corporal a individului
din aceeai specie dect numai pentru celulele foarte specializate cum sunt celulele nervoase.
Lund n considerare vrsta, se constat c celulele tinere au un diametru mai mare
dect cele mbtrnite.
2
Volumul celulelor variaz ntre 200-1500 m3. Acelai tip celular are un volum
comparabil n seria animal.
COMPOZIIA CHIMIC A CELULEI EUCARIOTE
Elemente chimice care intr n alctuirea celulelor eucariote sunt:
macroelemente (95%): oxigenul, carbonul, hidrogenul i azotul,
microelemente reprezentate de Ca, P, K, S, Na, Fe, Mg i Cl,
oligoelemente:
o foarte importante pentru activitatea celular chiar dac sunt prezente n cantiti
mici,
o se cunosc pn n prezent peste 30 oligoelemente ce intr n structura organismului
animal,
Cr, Co, Cu, I, Se, Vn i Zn au rol esenial n activitatea celular.
Moleculele organice care intr n structura unor constitueni de baz ai celulei sunt:
proteinele, lipidele, glucidele, acizii nucleici ADN-ul i ARN-ul.
Proteinele sunt reprezentate de:
proteinele structurale, cu rol central n realizarea structurii celulei,
enzime, care au rolul de a cataliza reaciile intra i extracelulare.
Glucidele sunt prezente sub form de glicogen, glicoproteine sau gli-colipide. Ele intr
n alctuirea membranei celulare i a unor organite.
Lipidele formeaz complexe lipoproteice care intr n structura cito-membranelor, pot
fi stocate ca rezerve i servesc drept substrat energetic.
Acizii nucleici dein informaia genetic.
Apa intr n alctuirea celulei n proporie de 60-90%, dar dei este in-dispensabil
activitii celulare, ea nu constituie substratul acesteia.
DURATA VIEII CELULELOR
Durata vieii celulelor difer n funcie de tipul celular. Astfel, celulele epitelului
intestinal triesc 48-72 ore, dup care sunt nlocuite, iar pe de alt parte celulele nervoase i
cele musculare cardiace au durata de via egal cu cea a individului.
Celulele epiteliale sunt elemente labile, cu o durat de via relativ scurt. Celulele
uzate sunt nlocuite n permanen cu celule tinere provenite din diviziunea celulelor epiteliale
din stratul bazal. Intensitatea procesului de rennoire celular a diferitelor epitelii este
variabil. Astfel epiteliul intes-tinului subire se rennoiete la 4-6 zile, epiteliul de suprafa
al stomacului la 3-4 zile, iar cel glandular anual. Studiul caracterelor morfologice ale celulelor
descuamate st la baza citologiei exfoliative care permite depistarea precoce a unor afeciuni
neoplazice (ex. studiul frotiului vaginal permite depistarea pre-coce a cancerului de col
uterin). Cheratinocitele au durata de via de aproxi-mativ 28 de zile, dup care se
descuameaz.
3
MEMBRANA CELULAR
.
Concepia actual privind structura membranei celulare a fost formu-lat pe baza
informaiilor furnizate de teoriile precedente (modelul paucimo-lecular, teoria "unitii de
membran", teoria mozaicului fluid), completate cu date noi oferite n primul rnd de
microscopia electronic.
S-a stabilit clar c structura fundamental a membranelor celulare este reprezentat de
un bistrat lipidic continuu, situat la periferia celulei, cu grosimea a dou molecule lipidice, n
care sunt interpuse molecule proteice integrale i periferice.
La nivelul celulelor exist trei tipuri de membrane:
membrana plasmatic, care delimiteaz celula i intervine n:
metabolismul celulei,
schimburile dintre celule i mediul extracelular,
realizarea adezivitii celulare i a dispozitivelor joncionale,
imunitate,
endomembrane care delimiteaz organitele (nucleul, reticulul endo-plasmic,
complexul Golgi, mitocondriile, lizozomii, peroxizomii),
membranele speciale, cum este teaca de mielin.
n compozia chimic a membranelor celulare intr 30% ap, 70% sub-stane organice
i cantiti foarte mici de substane anorganice. Din masa us-cat a membranelor, peste 90% o
reprezint lipidele i proteinele (35-40% lipide, 55-60% proteine), iar restul sunt glucide (19%).
Teaca de mielin conine 80% lipide i 20% proteine, n timp ce mem-brana intern a
mitocondriei este alctuit n proporie de 75% din proteine.
n structura membranei celulare:
lipidele sunt localizate n totalitate n plasmalem,
glucidele sunt prezente doar n structura glicocalixului, pe frontul E (extern) al
plasmalemei,
proteinele se gsesc sub form de proteine globulare n plasmalem i ca proteine
fibrilare (ce formeaz reele fine) n glicocalix i mai ales n citoscheletul membranei,
apa este localizat n glicocalix, feele hidrofile ale plasmalemei i n citoscheletul
membranei; n toate zonele mbibate cu ap vor ptrunde ionii anorganici, substane cu
rol funcional foarte important.
PLASMALEMA
Plasmalema:
este componenta principal a membranei celulare,
are o structur lipoproteic trilaminat cu grosimea de 7,5 nm:
aspectul trilaminat este conferit de cele dou foie ntunecate ntre care se afl
o foi clar,
are permeabilitate selectiv dat de distribuia lipidelor i proteinelor.
Lipidele, localizate n totalitate n bistratul lipidic sunt reprezentate de:
fosfolipide: fosfatidilcolin, fosfatidiletanolamin, fosfatidilserin i sfingomielin,
colesterol, mai abundent n stratul extern, mpreun cu acizii grai saturai,
glicolipide, care predomin n stratul intern, mpreun cu acizii grai nesaturai.
Moleculele lipidice din plasmalem au forma de cui, cu:
un cap, numit grup polar, hidrofil (solubil n ap), purttor de sarcini electrice,
dou cozi, segmentul apolar, hidrofob (solubil doar n lipide), format din acizi grai.
Avnd la un capt gruprile hidrofile, iar la cellalt pe cele hidrofobe, moleculele
lipidice sunt molecule bimodale.
Lipidele pot forma n soluii apoase micelii sau agregate moleculare bi-stratificate la
care partea hidrofil poate forma cu apa legturi de hidrogen (sau electrostatice), iar partea
hidrofob este orientat astfel nct s nu fie n contact cu mediul apos. n laborator se pot
crea bistraturi lipidice artificiale, sub forma unor vezicule sferice, cu diametrul de 25 nm-1
m, care poart nu-mele de liposomi.
Datorit acestor proprieti lipidele din membran se dispun n bistrat cu o grosime de
aproximativ 4 nm:
cu partea hidrofil (grupul polar) nspre exteriorul bistratului lipidic,
cu partea hidrofob nspre interiorul bistratului.
astfel, zona central a bistratului lipidic este hidrofob, iar cele dou zone
periferice hidrofile.
Datorit acestei distribuii a lipidelor, permeabilitatea plasmalemei pentru diferite
substane (molecule) este inegal:
gazele i solvenii organici trec foarte uor,
glucidele, aminoacizii, acizii grai trec lent,
monozaharidele, electroliii trec foarte lent,
proteinele, polizaharidele i acizii nucleici nu trec.
6
Bistratul lipidic:
prezint o asimetrie dat de compoziia chimic diferit a mono-straturilor,
este fluid, iar moleculele sale pot efectua trei tipuri de micri:
o de condensare,
o de deplasare lateral,
o "flip-flop", adic sar dintr-un strat n altul.
Proteinele:
constituie cea de a doua component de baz a plasmalemei,
sunt de dou tipuri:
o extrinseci sau periferice,
o intrinseci sau integrale.
Proteinele extrinseci se gsesc att pe faa plasmatic (P) ct i pe cea extern (E),
fiind mai numeroase ns pe faa P. Cele de pe faa plasmatic se mai numesc i proteine
membranare interne, iar cele de pe faa extern, proteine membranare de suprafa.
Proteinele intrinseci se extind n toat grosimea membranei, motiv pentru care se mai
numesc i proteine transmembranare sau proteine integrale. Aceste proteine pot delimita
canale transmembranare prin care o serie de molecule hidrosolubile pot difuza ntre lichidul
intracelular i cel extracelular. Alte proteine structurale au funcia de crui, sunt numite
proteine carrier i sunt implicate n transportul activ al unor substane.
Interaciunile dintre moleculele lipidice i cele proteice din plas-malem sunt de joas
energie, de aceea moleculele proteice pot fi extrase re-lativ uor.
GLICOCALIXUL
Glicocalixul sau glicolema:
se afla pe faa extern a plasmalemei,
apare ca o structur fibrilar lax la microscopul electronic,
are grosimea de aproximativ 50 nm:
o nu este la fel de dezvoltat n cazul tuturor celulelor,
o o celul poate prezenta zone cu grosime diferit a glicolemei, chiar zone n care
aceasta lipsete:
n cazul celulelor epiteliale, glicocalixul acoper polul apical, pe cnd la polul
bazal lipsete, aici aflndu-se membrana ba-zal,
prezint dou componente:
o intern mai puin dens, cu grosimea de 20 nm i care poart nu-mele de nveli de
suprafa,
o extern, ceva mai dens, cu grosimea de 30 nm, numit lamina extern.
Din punct de vedere chimic, glicocalixul este alctuit n principal din glicoproteine.
Structura sa prezint o estur delicat i lax de lanuri pro-teice pe care sunt ancorate
7
MOLECULELE DE ADEZIUNE
Moleculele de adeziune sunt proteinele exprimate la suprafaa mem-branelor celulare,
capabile s asigure o adeziune selectiv (specific) ntre dou celule sau ntre o celul i
matricea extracelular (membrana bazal sau esutul de susinere).
Selectivitatea unei molecule de adeziune este dat de capacitatea sa de a interaciona
cu un numr limitat de molecule numite liganzi.
Moleculele de adeziune joac dou posibile roluri n organism:
structural, prin asigurarea coeziunii esuturilor,
funcional tranzitor (limitat doar la perioada inducerii procesului) dnd posibilitatea
unei celule de a efectua o funcie biologic determinat.
Proprietatea fundamental a proteinelor de aderen este de a pune n relaie mediile
intracelular i extracelular. Astfel, recunoaterea ligandului extracelular de ctre molecula de
adeziune antreneaz producerea de infor-maii destinate restului celulei i susceptibilitatea de
a modifica structura sau funciile acesteia.
Aceste proprieti ale moleculelor de aderen se realizeaz datorit sistemelor
transmembranare de transducie, sisteme membranare specializate n transformarea unei
informaii extracelulare ntr-un mesaj intracelular recu-noscut de ctre celule.
Influena moleculelor de aderen asupra mediului intracelular este a-sigurat prin
relaia lor cu citoscheletul, ca n cazul moleculelor de aderen implicate n aderena
structural sau prin capacitatea lor de a produce mesa-geri intracelulari, cum se ntmpl n
cazul numeroaselor proteine implicate n aderena funcional.
Moleculele de aderen sunt grupate n cinci familii principale: cade-rinele,
imunoglobulinele, integrinele, selectinele, moleculele CD44.
Caderinele:
sunt o familie format din numeroase molecule, principalele sunt:
o caderina-E, prezent n toate epiteliile,
o caderina-N, caracteristic esuturilor nervos i muscular,
o caderina-P prezent n mezoteliu i epiderm,
sunt glicoproteine monomerice ce asegura prin:
10
actin ale
Imunoglobulinele:
sunt caracterizate de prezena unuia sau mai multor domenii de struc-tur molecular
caracteristic (legturi antiparalele stabilizate prin puni de sulf),
cuprind numeroase molecule cu funcii foarte diverse:.
o unele joac un rol major n rspunsul imun:
imunoglobuline,
moleculele HLA,
receptori antigenici ai limfocitelor T,
o altele sunt molecule de aderen care se pot grupa n:
familia N-CAM (neural cell adhesion molecule), care joac un rol important n
embriogenez i care sunt exprimate n esutul nervos la adult,
familia antigenelor carcinoembrionare,
proteinele de aderen endotelial reprezentate de I-CAM1 (intercellular
adhesion molecule 1), I-CAM2 (intercellular adhesion molecule 2) i V-CAM
(vascular cell adhesion molecule),
proteinele de aderen leucocitar CD2.
Integrinele sunt caracterizate printr-o structur heterodimeric i pre-zint dou lanuri
.
Natura lanurilor permite clasificarea integrinelor n trei subfamilii principale, cu
distribuie celular i cu funcii particulare. Integrinele 1 i 3 sunt principalele proteine
implicate n adeziunea celulelor la matricea extracelular. Integrinele 2 sunt caracteristice
leucocitelor i sunt implicate n interaciunile funcionale cu endoteliul. Prin domeniul lor
intracitoplasmatic integrinele sunt asociate microfilamentelor de actin ale citoscheletului.
Selectinele sunt:
glicoproteine monomerice transmembranare,
reprezentate de trei molecule:
o E-selectina i P-selectina exprimate la nivelul celulelor endoteliale,
o L-selectina, specific unei subpopulaii de limfocite.
implicate n aderena leucocitelor circulante la celulele endoteliale.
Moleculele CD44 sunt glicoproteine de suprafa reprezentate de 10 molecule
isomorfe implicate n aderena intercelular i aderena celulelor la matricea extracelular.
11
JONCIUNILE CELULARE
Pentru meninerea integritii esuturilor ce sunt supuse unor solicitri mecanice (ex.
esuturile epiteliale) este necesar solidarizarea celulelor care le constituie. n acest scop,
celulele sunt prevzute cu dispozitive care le asigur ataarea unele de altele, n strat compact.
Aceste dispozitive, care asigur solidarizarea celulelor ntre ele sunt jonciunile
celulare.
Dup gradul lor de complexitate, jonciunile celulare se mpart n:
jonciuni simple;
jonciuni speciale.
Jonciunile simple:
sunt legaturi foarte slabe,
se realizeaz atunci cnd ntre membranele a dou celule alturate exist o distan de
cel mult 30 nm:
rmne un spaiu intercelular ngust care nefiind nchis va per-mite circulaia
lichidului intercelular,
sunt asigurate de fore fizice care in de atracia molecular sau de legturi chimice
realizate de anumitre substane prezente n glico-calixul celulelor:
o fore van der Waals,
o puni de hidrogen,
Jonciunile speciale sunt dispozitive de legtur care asigur o ataare a celulelor
mult mai puternic n comparaie cu jonciunile simple. n raport cu dispoziia pe suprafaa
celulei ntlnim dou tipuri de jonciuni speciale:
zonulae, formaiuni n form de panglic sau band, care nconjoar celula ca un bru,
avnd o dispunere continu,
maculae, formaiuni circumscrise, n form de buton, pat, spot, cu dis-punere
discontinu.
Dup modul de ataare al celulelor ntre ele, jonciunile speciale se m-part n:
jonciuni ocludente, impermeabile sau "tight junction", care leag celu-lele ntre ele i
oblitereaz spaiul intercellular,
jonciuni de ancorare, care leag celulele ntre ele, asigurndu-le rezis-ten la aciunea
unor factori mecanici,
jonciuni de comunicare, gap sau nexus, care asigur trecerea unor mo-lecule dintr-o
celul n alta.
Jonciunile ocludente (zonulae occludens):
sunt dispuse pe marginile laterale, n treimea apical a celulelor epiteliale ce
delimiteaz lumenul unor organe,
formeaz un cordon circumferenial complet, ca un bru, n jurul fiecrei
celule,
se realizeaz prin fuzionarea unor proteine (ocludine, claudine) prezente n
membranele plasmatice ale celulelor alturate,
punctele lor de sudur sunt separate de mici spaii interstiiale.
12
14
TRANSPORTUL PASIV
Transportul pasiv:
asigur traversarea membranei celulare de ctre unele molecule mici, n sensul
gradientului de concentraie sau al gradientului electrochimic n cazul ionilor,
se realizeaz fr consum de energie, deci nu este dependent de me-tabolismul celular,
se poate realiza prin dou modaliti:
o difuziunea simpl,
o difuziunea facilitat.
Difuziunea simpl
se desfoar lent, respectnd legile difuziunii i ale osmozei,
se realizeaz diferit n funcie de natura chimic a moleculelor.
o moleculele mici neionizate dar liposolubile vor strbate stratul bimolecular lipidic,
proporional cu gradul lor de liposolubilitate
oxigenul, azotul, dioxidul de carbon i alcoolii, au o mare liposolubilitate.
moleculele de ap trec cu ajutorul unor proteine transmembranare numite aquaporine,
moleculele hidrosolubile, dac sunt suficient de mici, trec prin protei-nele canal.
Proteinele canal:
sunt proteine transmembranare cu rol n difuziunea simpl,
prezint canale cu dou extremiti orientate una extracelular, iar cealalt intracelular,
aceast organizare structural permite moleculelor s treac prin difuziune
simpl, n mod direct prin aceste canale, de pe o parte a membranei, pe partea
opus.
Caracteristicile proteinelor canal sunt urmtoarele:
au permeabilitate selectiv pentru anumite molecule,
canalele pot fi nchise sau deschise prin pori.
16
TRANSPORTUL ACTIV
Transportul activ asigur trecerea foartee rapid prin membran a unor molecule i
ioni, mpotriva gradientului de concentraie sau al celui electro-chimic. Acest tip de transport
se realizeaz cu consum de energie. Modul de furnizarea a energiei utilizate a condus la
descrierea a dou tipuri de transport activ:
transport activ propriu-zis sau transportul activ primar, n care este utilizat energia
rezultat din hidroliza ATP;
cotransportul sau transportul activ secundar, n care energia necesar transportului
unor ioni sau molecule mpotriva gradientului este fur-nizat de transportul pasiv al
altor ioni sau molecule.
19
ANTIPORTUL
Antiportul este modalitatea de transport a unor ioni n celul, cuplat cu ieirea n
spaiul extracelular a unor ioni sau molecule. Exist dou mecanis-me importante de antiport:
antiportul Na -Ca2 i antiportul Na -H .
Antiportul Na -Ca2 este mecanismul prin care ionii de Na intr n citosol, cuplat cu
ieirea ionilor de Ca2 din citosol n spaiul extracelular. Acest tip de transport este realizat de
o protein de care se leag ambii ioni.
Antiportul Na -Ca2 constituie alturi de transportul activ prin pompa de Ca2 , un
mecanism adiional de transport al acestor ioni. La nivelul fibrei musculare cardiace,
antiportul Na -Ca2 este principalul mecanism de reducere a concentraiei ionilor de Ca2 din
citosol, urmat de scderea frecvenei cardiace.
Antiportul Na -H are o importan mare la nivelul tubilor contori pro-ximali, unde
prin participarea unei proteine de transport, ionii de Na ptrund din lumenul tubular n
citosolul nefrocitelor (n sensul gradientului de con-centraie), n timp ce ionii de H trec prin
antiport n lumenul tubilor uriniferi. Prin acest mecanism este meninut la un nivel normal
pH-ul citosolic necesar desfurrii proceselor vitale.
Prin endocitoz celulele introduc n citoplasm particule din mediul extracelular, prin
vezicule formate din membrana celular. Dup modul n care particulele sunt interiorizate,
deosebim dou tipuri de endocitoz:
fagocitoza, procesul prin care particulele sunt endocitate fr fluid intercelular;
pinocitoza, procesul de endocitare a unei cantiti oarecare de lichid in-terstiial
mpreun cu particulele pe care le conine.
FAGOCITOZA
Fagocitoza este o modalitate de hrnire pentru anumite vieuitoare inferioare
(protozoare). La mamifere fagocitoza joac un rol important n pro-cesele de aprare ale
organismului, deoarece pe aceast cale sunt nglobate i apoi distruse intracelular bacteriile,
unii parazii, substane strine, resturi celulare, celule degenerate sau mbtrnite, celule
maligne, etc. Procesul de fagocitoz este realizat la mamifere, n condiii normale i
patologice de ctre celulele specializate numite fagocite.
n funcie de dimensiunea particulelor pe care sunt capabile s le nglo-beze, fagocitele
sunt clasificate n:
microfage, reprezentate de granulocite, capabile s nglobeze numai particule de
dimensiuni mici;
macrofage, reprezentate de celulele din sistemul fagocitelor mononu-cleare (sistemul
monocito-macrofagic), capabile s nglobeze i particule de dimensiuni mai mari.
Microfagele reprezentate de granulocitele neutrofile i ntr-o msur mai redus de
granulocitele eozinofile, cnd ajung la nivelul esuturilor sunt deja mature avnd imediat
capacitatea de a fagocita. n mod normal, neutro-filul are capacitatea de a fagocita pn la 20
de bacterii, dup care se va inac-tiva i va fi distrus.
Macrofagele sunt prezente n toate tipurile de esut conjunctiv, cu o densitate mai
mare n zone apropiate mediului extern, cum sunt corionul mu-coaselor, dermul pielii, stroma
organelor parenchimatoase sau n jurul vaselor sanguine. Ele aparin sistemului monocitomacrofagic. Originea lor este n celulele stem existente n mduva hematogen, care prin
difereniere dau natere monocitelor. Acestea trec n snge pentru aproximativ 60 ore, apoi
prin diapedez trec n esutul conjunctiv, unde se transform n macrofage tisulare (histiocite)
care desfoar activiti specifice. Durata lor de via este de cteva luni.
Macrofagele au form rotund sau ovalar, prezint prelungiri citoplas-matice scurte,
iar nucleul lor este relativ mic, rotund sau reniform, dispus central sau excentric i este
heterocromatic. Nucleolii se disting greu. Cito-plasma este abundent i conine organite
celulare numeroase, dintre care se evideniaz numrul mare de lizozomi (primari i
secundari). Pe suprafaa lor prezint receptori pentru regiunea Fc a imunoglobulinei G (RFc)
i pentru cel de-al treilea component al sistemului complementului (RC3).
Diferitele celule care sunt incluse n sistemul fagocitelor mononucleare sunt
urmtoarele:
monocitele din snge,
macrofagele (histiocitele) din esutul conjunctiv,
23
leag unele componente ale matricei extracelulare, cum sunt fibro-nectina i laminina.
nglobarea
Legarea particulei opsonizate la receptorul RFc este suficient pentru a declana
nglobarea, care ns devine foarte intens n prezena receptorilor pentru complement.
n timpul nglobrii pseudopodele emise de fagocite vor nconjura par-ticula care
urmeaz a fi nglobat pe toat suprafaa, printr-un mecanism nu-mit "n fermoar", rezultnd
n final internalizarea unei poriuni din membrana plasmatic (a celulei fagocitare), cu
constituirea fagozomului. Membrana li-mitant a fagozomului va fuziona cu lizozomii
(primari), cu constituirea fago-lizozomilor (lizozomi secundari). Astfel coninutul granulelor
lizozomale va fi descrcat n interiorul fagolizozomului, granulocitele i monocitele degranulndu-se progresiv.
Multe dintre procesele implicate n fagocitoz i degranulare sunt simi-lare celor
ntlnite n cazul chemotaxiei, fiind asociate cu:
legtura ligand-receptor,
activarea fosfolipazei C,
producerea de diacilglicerol i inozitol-1,2,3-trifosfat,
activarea proteinkinazei C,
creterea concentraiei citosolice de calciu.
Degradarea
Reprezint ultima etap a procesului de fagocitoz. n cazul fagocitrii bacteriilor, la
nivelul fagozomilor (neutrofilelor sau macrofagelor), exist a-geni bactericizi care omoar
bacteriile nainte ca ele s fie digerate.
Omorrea bacteriilor se realizeaz printr-un mecanism dependent de oxigen, care
presupune intervenia unor ageni oxidani care se formeaz (sub aciunea unor enzime) la
nivelul membranelor fagozomilor, sau a peroxi-zomilor. Agenii oxidani sunt: superoxidul
(O2-), peroxidul de hidrogen (H2O2) i ionul hidroxil (OH-).
Astfel, fagocitoza stimuleaz:
arderile cu consum de oxigen,
glicogenoliza,
creterea oxidrii glucozei (pe calea untului hexozomonofosfat),
producerea de metabolii reactivi ai oxigenului.
Producerea metaboliilor de oxigen se realizeaz prin rapida activare a NADPH
oxidazei, care oxideaz NADPH (nicotinamidadenin dinucleotid fosfatul). n acest proces se
produce i reducerea oxigenului, cu generarea ionului superoxid. Acesta va fi apoi convertit n
H2O2. Cantitatea de peroxid de hidrogen (H2O2) produs la nivelul fagolizozomilor este
suficient pentru a omor bacteriile.
NADPH oxidaza este un sistem enzimatic complex, constituit din fos-foproteine
citosolice i componente proteice ale citocromilor membranari. Activarea NADPH oxidazei
necesit translocarea componentelor citosolice pentru a interaciona cu citocromii fixai la
nivelul membranei, iar cnd membrana este invaginat, la nivelul fagolizozomului. n aceast
situaie peroxidul de hidrogen este produs n interiorul lizozomilor.
Granulele azurofile ale neutrofilelor conin enzima numit mielo-peroxidaz, care n
prezena unui halogen, cum este clorul, transform pe-roxidul de hidrogen n HOCl. Acesta
26
este un agent antibacterian care distruge bacteriile prin halogenare, sau prin oxidarea lipidelor
i proteinelor.
Importana mecanismului de distrugere a bacteriilor, dependent de oxi-gen, este
demonstrat de existena unui grup de defecte congenitale privind omorrea bacteriilor, care
determin boala cronic granulomatoas caracte-rizat prin predispoziia unor pacieni
pentru infecii bacteriene recurente.
Aceast afeciune se datoreaz unor defecte genetice privind co-dificarea unor
componente ale NADPH oxidazei.
Omorrea bacteriilor se poate realiza n absena arderilor oxidative, prin intervenia
unor substane coninute n granulele leucocitelor. Aceste sub-stane sunt: proteina creterii
permeabilitii bactericide, lizozimul, lactofe-rina, proteina bazic major (la nivelul
eozinofilelor), defensina.
Dup omorre, bacteriile vor fi degradate la nivelul fagolizozomilor de ctre
hidrolazele acide coninute de granulele azurofile.
Materialele nedigerabile sunt reinute n vacuole, constituind corpii re-ziduali. n
citoplasma unor celule cu via lung, cum sunt neuronii sau ce-lulele musculare cardiace, se
acumuleaz cantiti mari de corpi reziduali care conin lipofuscina numit i pigment de
uzur.
PINOCITOZA
Pinocitoza reprezint procesul prin care se realizeaz ptrunderea n celule a unor
molecule mpreun cu fluid extracelular, sub forma unor vezicule extrem de mici. Pinocitoza
reprezint ingestia de substane aflate sub form de dispersie n fluidul extracelular, proces
stimulat de modificrile ionice.
Pinocitoza se realizeaz n mod continuu la nivelul membranei plas-matice a celor mai
multe celule. n unele cazuri procesul se desfoar cu mare rapiditate. Astfel, n cazul
macrofagelor, pinocitoza se desfoar extrem de rapid, n fiecare minut pn la 3% din
membrana macrofagului fiind nglobat sub form de vezicule.
Pinocitoza este singura modalitate prin care multe macromolecule (ex. moleculele
proteice) ptrund n celule.
Exist dou forme de pinocitoz:
pinocitoza independent de receptori, cu producerea de vezicule pino-citotice netede,
proces relativ neselectiv;
pinocitoza mediat de receptori, cu producerea de vezicule acoperite, prin care se
realizeaz un proces selectiv de absorbie.
Pinocitoza independent de receptori este o modalitate de interiorizare (nglobare) a
substanelor existente n lichidul extracelular, cu ajutorul unor vezicule formate prin
internalizarea unei poriuni a membranei celulare, fr ca particulele s fie fixate n prealabil
de receptorii membranari specifici. Procesul se desfoar la nivelul endoteliului vascular, n
celulele musculare netede, dar este prezent la aproape toate tipurile de celule.
Veziculele pinocitotice se formeaz prin invaginarea membranei plas-matice. Iniial,
membrana plasmatic se va invagina pentru a forma mici de-presiuni proiectate n interiorul
celulei. Apoi membranele se apropie, deschi-derea depresiunii create se ngusteaz, formnd
27
un lumen ngust. n conti-nuare membranele vor fuziona lund natere vezicule numite
pinozomi.
Continuarea constriciei va determina separarea veziculei de mem-bran. n faza
urmtoare, pinozomii care se desprind de membrana celular vor fi antrenai de curenii
intracitoplasmatici. n citoplasm pinozomii se vor uni cu lizozomii, iar particulele endocitate
vor fi digerate pn la componente simple.
Pinocitoza mediat de receptori se mai numete i absorbtiv, selec-tiv sau
concentrativ i este o modalitate de nglobare a unor particule pe care celula le recunoate cu
ajutorul unor receptori existeni la suprafaa membra-nei celulare.
n acest proces receptorii specifici de la suprafaa membranei se leag strns de
macromoleculele extracelulare pe care le recunosc. Aceste molecule poart numele de liganzi.
n mod uzual, moleculele proteice se ataeaz la membrana plasmatic la nivelul unor
receptori specializai, specifici pentru tipul de protein absor-bit. n general, aceti receptori
sunt concentrai n mici depresiuni la nivelul suprafeei externe a membranei plasmatice.
Acestea se numesc caveole aco-perite, deoarece pe suprafaa lor citosolic se gsete o reea a
crei compo-nent principal o constitue o protein fibrilar, clatrina.
Clatrina este o protein fibrilar, vizibil n microscopia electronic ca o reea care
acoper faa citosolic a caveolelor sau a veziculelor formate din membrana plasmatic i a
celor formate la nivelul compartimentului trans al complexului Golgi. Clatrina purificat are
forma unui triskelion cu trei brae, fiecare lan fiind constituit dintr-un bra lung (greu) i un
bra scurt (uor).
Polimerizarea spontan a acestor formaiuni determin extinderea caveolelor i
eventual formarea veziculelor acoperite.
Dup legarea moleculelor proteice la receptori se produce o modificare a proprietilor
membranei celulare, astfel c ntreaga depresiune se invagi-neaz, iar proteinele care o
nconjoar ca o reea vor determina fuzionarea marginilor acesteia, cuprinznd i o mic
cantitate de fluid extracelular.
Imediat dup aceea poriunea invaginat a membranei se va desprinde de suprafaa
celulei, constituind vezicula acoperit. Veziculele acoperite cu clatrin tipice au aspectul unor
mingi de fotbal cu diametrul de 50-100 nm.
Dup endocitare veziculele acoperite pierd reeaua de clatrin, formnd vezicule
netede, numite receptozomi.
n afar de clatrin, care este componenta cea mai studiat a reelei proteice care
acoper veziculele, o alt protein este dinamina. Aceasta este o protein citosolic, care
leag i apoi hidrolizeaz GTP-ul. Perturbri ale ac-tivitii acesteia determin imposibilitatea
legrii GTP-ului, blocnd formarea veziculelor acoperite.
ntre reeaua de clatrin i membrana veziculelor se gsete un spaiu de aprox. 20 nm,
care conine particule de asamblare.
n afar de clatrin, dinamin, particule de asamblare, la acest nivel exist probabil i
filamente de actin i miozin.
Astfel, acest proces de formarea al veziculelor se realizeaz n urmtoarele etape:
membrana acoperit formeaz o depresiune,
apoi o caveol acoperit,
n final se va forma vezicula acoperit.
Pinocitoza mediat de receptori necesit:
28
TRANSCITOZA
Procesul de transcitoz (transportul transcelular):
implic endocitarea substanelor, iar apoi exocitarea lor:
materialele endocitate traverseaz celula, fiind apoi exocitate la nivelul membranei
plasmatice pe partea opus,
se desfoar n unele esuturi unde celulele formeaz o barier ntre dou medii
extracelulare, unele molecule sunt transportate de pe o parte a celulei pe cealalt fr
implicarea lizozomilor,
ex. la nivelul celulelor endoteliale i enterocitelor.
La nivelul celulelor endoteliale intensificarea transcitozei reprezint un mecanism
potenial de cretere a permeabilitii vasculare, aspect evideniat la nivelul neoplasmelor
maligne. n cazul enterocitelor, imunoglobulina A care este secretat de plasmocitele din
matricea esutului conjunctiv al laminei bazale (corion) se va lega de receptorii Fc de la
nivelul membranei plasmatice a acestor celule. Complexele IgA-receptor vor fi nglobate n
enterocite prin endocitoz, fiind apoi transportate sub forma veziculelor acoperite nspre polul
apical al acestora. La acest nivel, veziculele vor fuziona cu membrana plas-matic unde IgA
va fi eliberat n urma desfacerii complexelor IgA-receptor.
29
EXPANSIUNILE TRANZITORII
Suprafaa celular poate s emit expansiuni care privite la microscop apar ca valurile
pe suprafaa unei ape. Unele pot chiar s se desprind pentru ca imediat s fie ncorporate din
nou. Acest aspect, datorat fluiditii cito-plasmei, este foarte accentuat nainte de diviziunea
celular i nainte de ex-pulzarea nucleului eritrocitelor.
Alte expansiuni tranzitorii sunt pseudopodele, emise de obicei de ctre celulele
capabile s se deplaseze activ pe un suport solid. Emit pseudopode celulele care se deplaseaz
prin micri ameboidale i celulele capabile de fagocitoz (granulocitele neutrofile,
macrofagele).
EXPANSIUNILE PERMANENTE
Expansiunile permanente ale suprafeei celulare sunt structuri stabile, susinute de
fascicule de filamente de actin n cazul microvililor i stereoci-lilor sau de microtubuli n
cazul cililor i flagelilor.
Microvilii sunt expansiuni citoplasmatice
digitiforme, cilindrice, cu lungimea de
0,5-1
m i
apical al unor
diametrul de 0,08 m, localizate la polul
celule epiteliale, cum sunt entero-citele,
nefrocitele,
hepatocitele,
celulele
foliculilor
tiroidieni.
Fig. 1. Enterocite cu platou striat
-microfotografie.
Rolul acestor prelungiri este de a
mri de 10-20
de ori suprafaa de ab-sorbie a celulelor, dar i de a pompa n interiorul celulei substanele
absor-bite.
n microscopia optic microvilii nu pot fi identificai separat, ci apar ca o dung mai
intens colorat, cu aspect striat, dispus la polul apical al celu-lelor, constituindu-se aspectul
de platou striat la enterocite (fig. 1) i mar-ginea n perie n cazul nefrocitelor.
La microscopul electronic se constat c microvilul este delimitat de membrana
plasmatic, iar n interiorul lui se gsesc 20-30 de filamente de actin organizate n mnunchi
(fascicul), care-i confer rigiditate.
30
Filamentele care constituie fasciculul sunt paralele i sunt legate trans-versal prin
proteine asociate, cum sunt fimbrina i vilina. Rolul acestor pro-teine asociate este de a
stabiliza filamentele n mnunchi.
Filamentele de actin au aceeai polaritate i se termin la polul apical ntr-o zon
amorf care conine o protein de acoperire neidentificat i care realizeaz legarea
filamentelor de membrana plasmatic. n regiunile laterale ale microvilului, mnunchiul de
filamente se leag de membrana plasmatic prin calmodulin i printr-o protein similar
miozinei de tip I. La polul ba-zal, filamentele de actin din microvil se ancoreaz n regiunea
apical a celulelor epiteliale de reeaua terminal (regiune specializat a citoscheletu-lui)
constituit din filamente de actin i proteine asociate.
Stereocilii sunt microvili foarte lungi, vizibili n microscopia optic. Pot fi observai la
nivelul tractului ge-nital masculin, n epididim (fig. 2), dar i la nivelul urechii interne.
31
Fig. 4. Schema unui cil n seciune transversal. 1-membrana celular; 2-dublete periferice de
microtubuli; 3, 4-brae de dinein; 5-nexin; 6-teaca central; 7-spie radiale, cu capul de
legtur (8); 9-perechea central de microtubuli.
La microscopul electronic, pe o seciune transversal, se constat c a-xonema cililor
(Fig. 19) este constituit din:
20 de microtubuli cu configuraia 9 2, adic la periferie se afl 9 dublete de
microtubuli, iar n centru doi microtubuli aezai mai distanat;
braele de dinein, care pornesc unidirecional de la un dublet spre cel nvecinat;
dineina este o protein cu proprieti enzimatice (este o ATP-az) ce asigur energia
necesar micrii cililor;
spiele radiale, care se ntind de la dubletele periferice, la teaca central;
teaca central, care nconjoar cei doi microtubuli centrali; mpreun cu spiele
radiale intervin n reglarea micrilor ciliare;
nexina, care este o protein elastic ce conecteaz dubletele adiacente de microtubuli,
contribuind la meninerea formei cililor.
Dac seciunea transversal se face la nivelul corpusculului bazal (Fig. 20) se constat
c aici cei doi tubuli centrali lipsesc, iar dubletele de la peri-ferie devin triplete (configuraia
9 0), rezultnd o structur care se aseamn pn la identitate cu centriolii.
Cilii se gsesc la nivelul unor celule epiteliale pe suprafaa crora exist un strat de
lichid. Funcia cililor este aceea de a deplasa lichidul care i scald, ntr-un singur sens, de
regul nspre exterior, datorit faptului c micarea lor ordonat i succesiv ntr-o direcie
este lent, iar n cealalt este rapid. Prin deplasarea lichidului care i scald, cilii realizeaz
curirea epiteliului (ex. epiteliul traheal), fiind ndeprtate o serie de sub-stane sau particule
32
care au ptruns accidental sau care au rezultat din me-tabolismul sau moartea unor celule. n
cazul trompelor uterine, cilii faciliteaz deplasarea ovocitului nspre uter.
Mecanismul micrii cililor. Sub aciunea dinein ATP-azei are loc eli-berarea energiei
ATP-ului, care imprim braelor de dinein o micare de alunecare n lungul suprafeei
perechilor adiacente de microtubuli. Cnd mi-crotubulii frontali alunec n afar spre vrful
cilului, iar cei posteriori rmn nemicai, cilul se va nclina.
Flagelii sunt formaiuni cu lungimea de aprox. 80-100 m, prezente la suprafaa unor
celule. Structura flagelului nu difer de cea a cilului dar lun-gimea sa este mai mare. n
majoritatea cazurilor o celul prezint un singur flagel. n organismul uman singura celul cu
flagel este spermatozoidul. Micarea ondulatorie a flagelului permite celulei s se deplaseze n
mediul lichid, flagelul fiind componenta sa locomotorie. n acest mod, flagelul per-mite
deplasarea spermatozoidului spre ovocit n vederea fecundrii.
CITOPLASMA
Citoplasma reprezint spaiul aflat ntre membrana celular i nveliul nuclear. Ea
cuprinde dou componente majore:
matricea citoplasmatic;
organitele celulare.
Matricea citoplasmatic se mai numete citosol, matrice fundamen-tal, substan
fundamental a citoplasmei sau hialoplasm, toate semnificnd ns aceeai realitate
biologic. La microscopul optic, matricea citoplasmatic apare astructurat, cu grade diferite
de acidofilie sau bazofilie. Ea se prezint ca o "reea" microtrabecular cu dou faze:
faza polimerizat sub form de reea bogat n proteine structurale i protein-enzime;
faza fluid, bogat n ap, ce se afl n ochiurile reelei microtrabecu-lare.
n faza lichid se gsesc diferite molecule ca: glucoz, aminoacizi, ioni sau gaze
dizolvate (oxigen, dioxid de carbon, etc.).
Matricea citoplasmatic este sediul unor procese metabolice eseniale pentru celul ca:
glicoliza, calea pentozo-fosfatic, glicogenogeneza, glico-genoliza, metabolizarea
aminoacizilor, biosinteza acizilor grai i a nucleoti-delor.
La nivelul matricei citoplasmatice exist o serie de diferenieri care la celula animal
cuprind: filamentele de miozin, filamentele de actin, fila-mentele intermediare,
microtubulii.
FILAMENTELE DE MIOZIN
Miozina este o protein rspndit n celulele eucariote. Pn n prezent se cunosc
dou specii moleculare ale acestei proteine. Miozina de tip I nu este prezent n celulele
musculare, fiind implicat n celulele nemusculare n fenomene de motilitate ce au la baz
mecanismul actin-miozin (ex. mic-rile din microvili sau transportul veziculelor i
organitelor nvelite n mem-brane, de-a lungul filamentelor de actin). Miozina de tip II
formeaz miofi-lamente n celulele musculare din muchii striai i netezi.
33
reele alctuite din filamente de actin dispuse n zig-zag, legate printr-o protein
numit filamin.
Rolul fasciculelor i reelelor de filamente de actin este de a susine membrana
celular, contribuind astfel la meninerea formei celulelor. La pe-riferia celulelor, sub
membrana plasmatic se afl cortexul celular, cu aspec-tul unei reele tridimensionale. De
asemenea, la locul unde celulele stabilesc legturi cu alte celule sau cu matricea extracelular,
membranele celulare prezint regiuni specializate numite plci de adeziune.
n celulele nemusculare filamentele de actin au un caracter tranzitoriu, profilina fiind
o protein ce influeneaz procesul de polimerizare al actinei. Vilina i gelsolina sunt proteine
care regleaz procesele de polimerizare a ac-tinei prin ionii de Ca2 , n acelai timp
interconectnd filamentele de actin n mnunchiuri.
MICROTUBULII
Microtubulii, formaiuni filamentoase formate din tubuline, sunt com-ponente
principale ale citoscheletului.
Tubulinele sunt de dou tipuri: -tubulina i -tubulina. Sunt proteine globulare cu
diametrul de aprox. 5 nm, ambele au aceeai mas molecular (aprox. 50 kdal), dar cu
secvene diferite ale aminoacizilor.
Cele dou subuniti formeaz dimeri, care prin polimerizare vor alctui
protofilamente (protomicrotubuli), iar apoi 13 protofilamente
prin aranjare sub form de cilindru cu interiorul aparent gol,
vor forma un microtubul cu diametrul de 24 nm (fig. 5).
Asamblarea i polimerizarea tubuline-lor este
controlat de unele proteine asociate microtubulilor, cum
sunt: proteina MAP (microtubule - associated protein), care
favori-zeaz polimerizarea tubulinelor i leag mic-rotubulii
de alte componente celulare i pro-teina tau.
blocheaz formarea fusului mitotic prin fragmen-tarea microtubulilor, iar colchicina se leag
de dimerul tubulinic i blocheaz procesul de polimerizare.
Microtubulii intervin n:
alctuirea axonemei cililor i flagelilor;
meninerea formei celulare;
transportul intracelular al unor organite;
transportul intracelular al veziculelor;
transportul granulelor de melanin n celulele pigmentare;
alctuirea fusului de diviziune i n transportul cromozomilor de-a lun-gul acestuia;
formarea centriolilor.
FILAMENTELE INTERMEDIARE
Denumite astfel datorit diametrului lor care are valori ntre cele ale microfilamentelor
(aprox. 10 nm) i cele ale microtubulilor (aprox. 25 nm), fi-lamentele intermediare rezult
prin polimerizarea unor subuniti proteice, care difer n funcie de tipul celular.
Tabel. 1. Localizarea i funciile filamentelor intermediare.
Protein
Localizare
Funcii
citocheratin
cu celulele epiteliale
suport structural; markeri pentru
cele 20 forme distumorile de origine epitelial.
tincte (acide, bazice, neutre)
sunt asociate desmozomilor i
hemidesmozomilor
tonofilamentele
muchi scheletali, muchi formeaz o reea care leag miofidesmin
cardiac, muschi neted
brilele/miofilamentele; marker pentru tumorile de origine muscular
fibroblaste, celule endote- sunt asociate cu nveliul nuclear i
vimentin
liale; condroblaste, macrofa- cu porii nucleari; marker pentru
ge, celule mezenchimale, tumorile esutului conjunctiv
celule musculare netede din
peretele vacular
proteina glial fi- astrocite, oligodendrocite, ce- suport structural; marker pentru
lule Schwan
tumorile gliale
brilar acid
neuroni
suport structural pentru axon i
neurofilamente
dendrite; faciliteaz starea de gel a
citosolului
organizarea cisternei perinucleare i
lamininele A, B, C lamina nucler
a cromatinei perinucleare
CITOSCHELETUL
Celulele eucariote prezint n matricea citoplasmatic n plus fa de organitele
celulare delimitate de endomembrane i o reea complex de fila-mente proteice care
constituie citoscheletul .
Filamentele proteice ale citoscheletului sunt reprezentate de:
microfilamente (filamentele de actin);
microtubuli;
filamentele intermediare.
Filamentele proteice ale citoscheletului sunt legate ntre ele, sau de or-ganite, prin
intermediul unor proteine de asociaie.
Citoscheletul este o structur dinamic, ntr-o continu reorganizare, cu rolul n:
meninerea formei celulelor,
compartimentarea funcional a citosolului,
realizarea micrilor celulare (emiterea de pseudopode),
fagocitoz,
diviziune celular (aparatul mitotic, inelul de plasmadierez),
ancorarea celulelor ntre ele.
MICRILE CELULARE
Motilitatea celular, o proprietate esenial a celulei, are la baz in-teraciuni n:
sistemul actin-miozin prin activitatea cruia se produc contracia muscular i
micrile ameboidale;
sistemul microtubul-dinein prin funcionarea cruia se produc mic-rile cililor i ale
flagelilor.
Dintre micrile realizate la nivel celular, o importan deosebit o are contracia
celulelor musculare cardiace, scheletale i a celor netede.
37
CONTRACIA MUSCULAR
scheletale-
40
NUCLEUL
Nucleul este o component celular prezent n toate celulele eucariote, cu excepia
hematiilor adulte i a trombocitelor. El a fost descoperit n urm cu peste dou secole (1781)
de ctre Fontana, dar conceptul de celule nucleate a fost enunat abia n secolul urmtor
(1833) de ctre Brown.
Nucleul are un rol primordial n viaa celulei, ndeplinind n esen dou funcii foarte
importante:
stocarea codului genetic i transmiterea (perpetuarea) informaiei gene-tice de-a lungul
generaiilor, la nivelul su aflndu-se marea majoritate a ADN-ului celular, care
reprezint aprox. 20% din masa nucleului;
reglarea i controlul tuturor proceselor vitale care au loc la nivel celular.
Structura nucleului difer n funcie de fazele ciclului celular. Astfel, n interfaz
(perioada dintre dou diviziuni) se descrie nucleul interfazic sau metabolic, alctuit din:
nveliul nuclear, care separ coninutul nucleului de cel al cito-plasmei;
matricea nuclear, care conine ncorporate n ea alte dou compo-nente ale nucleului:
nucleolul i cromatina.
n timpul diviziunii celulare nveliul nuclear dispare, nucleolul de ase-menea, iar
cromatina se organizeaz sub form de cromozomi.
Marea majoritate a celulelor eucariote prezint un singur nucleu, dar e-xist i celule
binucleate cum ar fi hepatocitele, dintre care 7-10% prezint doi nuclei. Exist i celule care
n mod normal sunt multinucleate. Unele dintre acestea prezint zeci de nuclei, ca
osteoclastele, care au pn la 60 de nuclei, sau chiar sute, cum sunt fibrele musculare striate,
ce au pn la 200 de nuclei.
Celule multinucleate pot apare ns n diferite situaii patologice, cum ar fi celulele
Langhans din infecia tuberculoas sau celulele de corp strin.
Celule pot deveni multinucleate prin unul din cele dou mecanisme:
nucleul unei celule se divide de mai multe ori fr ca aceste diviziuni s fie urmate de
diviziunea citoplasmei i separarea n celule fiice, rezultnd astfel un plasmodiu;
mai multe celule uninucleate pot fuziona formnd un sinciiu.
Forma nucleului este adaptat n funcie de forma celulei, astfel:
celulele sferice, cubice, poliedrice au nucleul sferic;
celulele prismatice au nucleul oval;
celulele pavimentoase au nucleul aplatizat;
celulele fusiforme au nucleul alungit.
45
Exist ns i excepii de la aceast regul. Astfel, leucocitele granulare din snge sunt
celule sferice i au un nucleu lobat, format din mai muli lobi unii ntre ei.
n cele mai multe cazuri, nucleul este dispus central n celul, dar n a-numite stri
funcionale el poate ocupa i alte poziii. Astfel, n celulele glan-dulare, n care la nivelul
polului apical se acumuleaz granule de secreie, nucleul este mpins nspre polul bazal, iar n
celulele adipoase nucleul este mpins la periferie de ctre lipidele acumulate n citoplasm.
Dimensiunile nucleului difer n funcie de tipul celular, vrsta celulei, activitatea sa
metabolic, etc. n medie, nucleul celulelor eucariote are di-ametrul cuprins ntre 5-25 m.
Celulele tinere, cu metabolism activ au nucleu mare, eucromatic, iar celulele mbtrnite au
nucleu mic, heterocromatic.
ntre volumul nucleului i volumul citoplasmei se stabilete un raport cunoscut sub
numele de raport nucleo-citoplasmatic, care poate varia n limite largi, de la 1/3 la 1/10. Cu
ct celula este mai tnr i mai activ, cu att nucleul este mai mare. n anumite situaii
patologice, cum ar fi cazul formaiunilor tumorale (n care toate celulele sunt tinere),
determinarea aces-tui raport reprezint un test cu valoare de diagnostic.
Valoarea raportului nucleo-citoplasmatic (RNC) se determin dup for-mula:
RNC
Vn
----------Vc - Vn
dinspre citoplasm. Pe lng ribozomi, membrana nuclear extern mai prezint numeroase
puncte de ancorare ale citoschele-tului, respectiv pentru ancorarea microtubulilor i a
filamentelor de actin.
Membrana nuclear intern are grosimea de 7-8 nm. Ea are un contur continuu i mai
rigid dect membrana extern, deoarece sub ea, pe faa nu-cleoplasmatic, exist o reea
proteic cunoscut sub denumirea de lamina fibrosa sau lamina nuclear, asemntoare unui
citoschelet. Aceast forma-iune are o grosime variabil i este compus dintr-o reea fibroas
de natur proteic, n care intr trei polipeptide denumite laminele A, B i C, care au
capacitatea de a se lega specific de proteinele membranei nucleare interne. Secvena
aminoacizilor acestor lamine este analoag cu cea a proteinelor fi-lamentelor intermediare ce
intr n componena citoscheletului. Laminele au i capacitatea de a se lega de regiunile de
cromatin nuclear, ancornd astfel cromozomii interfazici de nveliul nuclear (membrana
intern).
Spaiul cisternal este delimitat de cele dou membrane (intern i extern) i are o
grosime variabil cuprins ntre 10-60 nm, care poate crete mult n unele situaii patologice.
n acest spaiu au fost puse n eviden histone, imunoglobuline, ap, molecule mici solubile
i uneori chiar virusuri ncapsulate. Din loc n loc, spaiul cisternal comunic cu reticulul
endoplasmic ru-gos.
Porii nucleari sunt orificii ce strbat din loc n loc nveliul nuclear la toate celulele
eucariote. La nivelul porilor membrana nuclear extern fuzio-neaz cu membrana nuclear
intern, astfel nct cele dou membrane se afl n continuitate.
Numrul i distribuia porilor difer n funcie de specie i de tipul celular. La
mamifere constituie 10% din suprafaa nveliului nuclear i au o distribuie ordonat.
Arhitectura porilor a determinat introducerea termenului de complex al porului sau
complex por.
n structura complexelor porale intr niste proteine numite nu-cleoporine, care sunt
grupate n:
componenta columnar ce constitue suprafaa intern a porului nuclear,
componenta anular care este constituit din dou octogoane, unul pe frontul
citoplasmatic si unul pe frontul nuclear al porului nuclear:
octogoanele sunt realizate de cte opt nucleoporine i sunt concentrice,
componenta luminara este reprezentata de proteine transmembranare care leaga
complexul poral la invelisul nuclear.
De la periferia porului nuclear pornesc niste filamente spre citoplasm, iar altele spre
interiorul nucleului. Aici se ancoreaza la o structura n forma de inel.
Porii nucleari sau complexele porale au o mare importan pentru c permit transportul
selectiv al unor molecule sau ioni din interiorul nucleului n citosol i invers, din citosol n
nucleu. Astfel, n interiorul nucleului vor ptrunde prin complexele porale enzime necesare
sintezei ADN, proteine, aminoacizi, ioni. Invers, din nucleu n citoplasm sunt transportai
precursori ribozomali sintetizati sau produsi n nucleol.
Complexele porale au n general un diametru de aproximativ 9 nm, de aceea molecule
sau ioni cu dimensiuni mai mici trec liber prin complexele porale. Molecule mai mari ns pot
s treaca printr-un transport activ ntr-o direcie sau n cealalt. n acest proces de transport
intervin dou tipuri de moelecule, RAN i karioferine (importine, exportine).
Pentru a fi recunoscute moleculele ce urmeaz a fi transportate prin porii nucleari
intervin nite semnale i anume semnalul de localizare nucleara (NLS) i semnalul de export
47
nuclear (NES). NLS-ul este o secven de 3, 4 aminoacizi (de obicei lizina, arginina, prolina)
aflat n structura unor peptide. Importinele prezint o poriune i o poriune . Poriunea
recunoate NLS-ul din structura proteinei i leag proteina respectiv. n prezena Ran-GTP,
complexul realizat se leaga la nucleoporine apoi patrunde n interiorul nucleului. n mod
asemntor exportinele recunosc proteinele care au n structura lor NES-ul, complexul format
se ataaz la nucleoporine. Molecula respectiv va fi exportata astfel n citosol. Energia
necesar procesului este stocata n gradientul transmembranar, Ran-GDP ce se afl n
concentraie mai mare n citosol, iar Ran-GTP n nucleu.
Matricea nuclear (carioplasma, cariolimfa) reprezint acea parte a nucleului care n
mod aparent este lipsit de structur. Ea apare ca o mas incolor n care se evideniaz alte
dou componente nucleare: nucleolul i cro-matina.
Dup extragerea cromatinei i a nucleolului, rmne matricea nuclear propriu-zis,
alctuit dintr-o reea proteic stabil, cu greutate molecular mare. Cea mai mare parte a
proteinelor o reprezint proteinele nonhistonice, urmate de nucleoplasmin.
Matricea nuclear este o structur labil, dinamic, capabil de contractilitate. Ea
reprezint, prin analogie cu citoscheletul, un adevrat nucleoschelet. n afar de aceast reea
proteic, matricea nuclear mai conine: ap, ioni, molecule mici, enzime specifice, etc.
Matricea nuclear are rol esenial n:
determinarea formei nucleului;
medierea aciunii unor hormoni;
medierea aciunii unor enzime specifice ale unor procese glicolitice, n sinteza NAD
(nicotin adenin dinucleotid) i altele.
NUCLEOLUL
La microscopul optic, n celulele fixate, nucleolul apare ca un corpuscul bazofil, mai
refringent dect carioplasma nconjurtoare. Nucleolul este evident numai n nucleul
interfazic, dispare n timpul diviziunii celulare i reapare la sfritul mitozei, cnd se
reorganizeaz din componente ale unor cromozomi care poart numele de organizatori
nucleolari. El este prezent n nucleul tuturor celulelor eucariote nucleate, lipsind doar n
celulele embrionu-lui (nu se produce nc sintez proprie).
Nucleolul nu este delimitat de membran. n general are forma sferic i este dispus
mai mult sau mai puin central n nucleu, dar n momentul cnd se elibereaz n citoplasm
ARN-ul, el se deplaseaz spre nveliul nuclear. Odat cu mbtrnirea, nucleolul capt o
form din ce n ce mai neregulat. Nucleolul are densitatea cea mai mare dintre toate
structurile celulare.
Dimensiunea medie a nucleolului este de 1-3 m. Este mai mare i mai dens n
celulele cu activitate metabolic intens (ex. celule secretorii, neuroni) i mai mic n cele cu
activitate mai redus (ex. celule epiteliale). n general, nucleolul are dimensiuni mari n
celulele care prezint cretere rapid. Cei mai mari nucleoli se ntlnesc n celulele maligne,
unde poate ajunge s ocupe pn la 30% din masa nucleului i s prezinte forme aberante.
Numrul nucleolilor este variabil. Cel mai frecvent ntr-un nucleu exist un singur
nucleol, dar uneori pot fi prezeni mai muli. n anumite limite numrul nucleolilor este
48
corelat cu gradul de ploidie, existnd de obicei cte un nucleol pentru fiecare set
cromozomial.
La microscopul electronic, nucleolul prezint trei componete:
componenta granular (pars granulosa) alctuit din granule mici cu diametrul de 1520 nm; este componenta majoritar a nucleolului, fiind format din precursorii
ribozomilor, respectiv particule ale subuni-tilor ribozomale aflate n diferite stadii de
maturare;
componenta fibrilar (pars fibrosa) numit i nucleonem, alctuit din:
o fibrile fine, cu diametrul de 5 nm, reprezentnd ADN-ul com-plementar pe baza
cruia se induce sinteza ARNr, ele corespund transcripiei genelor ARN-ului
ribozonal, de la care ncepe for-marea ribozomilor,
o subuniti de 45 S, reprezentnd produsul primar rezultat n urma transcripiei,
componenta amorf (pars amorpha) constituit din elemente ale cario-plasmei,
respectiv ap, molecule mici, electrolii i care ocup zonele libere dintre granulele i
filamentele nucleolului.
n compoziia chimic a nucleolului intr ADN, ARN i proteine.
ADN-ul reprezint 3% din masa nucleolului. El intr n alctuirea organizatorilor
nucleolari, care sunt nite bucle ale perechilor de cromozomi 13, 14, 15, 20 i 21, care ptrund
n nucleol i sunt rspunztoare de sinteza ARNr i a proteinelor ribozomale. Organizatorii
nucleolari controleaz i formarea nucleolilor. Astfel, la sfritul mitozei se formeaz 5
nucleoli co-respunznd cte unul pentru fiecare din cei 5 cromozomi mai sus menionai i
care ulterior vor fuziona ntr-un singur nucleol.
ARN-ul ocup 7% din masa nucleolului, fiind constituit din ARNm (ARN mesager),
ARNr (ARN ribozomal) care se sintetizeaz n nucleol i ARNt (ARN de transfer sau de
transport) aflat n tranzit prin nucleol.
Proteinele ocup 90% din masa nucleolului. Aceste proteine provin din citoplasm i
ele sunt reprezentate de enzimele implicate n transcriere i de precursorii ribozomali.
Funciile nucleolului sunt urmtoarele:
biogeneza subunitilor ribozomale, funcia principal a nucleolului, ca-re ncepe prin
copierea de pe buclele cromozomilor (organizatorilor nucleolari) a genelor care
codific ARNr i proteinele ribozomale i apoi urmeaz sinteza ARNr i stocarea
precursorilor ribozomali nainte de a fi transportai n citosol;
stocarea i transferul ARNt i mai ales ARNm, prin care codific sec-venialitatea
proteinelor celulare i extracelulare, astfel c nucleolul re-prezint o staie de tranzit n
transmiterea ARNm i ARNt n citoplas-m;
pregtirea celulelor pentru diviziunea mitotic, fiind demonstrat faptul c celulele
crora li s-a distrus nucleolul nu se mai divid.
49
CROMATINA NUCLEAR
Cromatina este un material nuclear care pe coloraiile histologice are o mare afinitate
fa de coloranii bazici. Cnd cromatina este rarefiat nucleul se coloreaz slab (nucleu
eucromatic), iar cnd este mai condensat se colo-reaz intens bazofil (nucleu
heterocromatic). Cromatina reprezint partea vi-zibil la microscopul optic a cromozomilor n
interfaz. Cromatina i cromo-zomii sunt de fapt dou aspecte ale aceluiai material nuclear i
anume ADN (cromozomii reprezint aspectul din mitoz i cromatina aspectul din inter-faz).
n interfaz cromatina reprezint forma relaxat (desfurat) a cromo-zomilor, iar n
cursul diviziunii cromatina formeaz structurile condensate ale cromozomilor.
n interfaz cromatina se prezint sub dou aspecte:
eucromatina, o reea de filamente fine, mai slab colorate;
heterocromatina, blocuri condensate i intens colorate.
Din punct de vedere biochimic, cele dou tipuri de cromatin au aceeai compoziie:
ADN, proteine histonice i nonhistonice i cantiti foarte mici de ARN. Diferena
morfologic dintre ele este dat de gradul diferit de spiralizare a ADN-ului. Acesta este intens
spiralizat n heterocromatin i slab spiralizat n eucromatin.
Eucromatina fiind mai lax este accesibil transcrierii mesajului dei-nut de
moleculele de ADN. Ea este de dou feluri:
eucromatina activ, care este transcris continuu;
eucromatina permisiv, care este transcris cu intermiten, numai n urma unei
inducii enzimatice.
Heterocromatina este nalt condensat i inactiv pentru transcripia ADN-ului.
Exist dou feluri de heterocromatin:
heterocromatina constitutiv care este constant condensat i conine gene care nu se
transcriu; n cromozomi ea este situat pe lng centro-meri i constituie 15% din
ADN-ul repetitiv;
heterocromatina facultativ prezint regiuni condensate doar n anu-mite celule,
reflectnd diferene stabile de activitate genetic ntre diferitele tipuri de celule ale
unui organism.
Celulele embrionare au o heterocromatin redus pe cnd cele nalt specializate au o
cantitate mare, ceea ce nseamn c pe msur ce se dezvolt celulele, din ce n ce mai multe
gene sunt inactivate. De regul, heterocroma-tina facultativ conine gene structurale
represate care s-au transcris sau se vor transcrie ntr-un anumit stadiu evolutiv al celulei.
Raportul eucromatin/heterocromatin reprezint un indiciu al activit-ii metabolice.
Astfel, un nucleu cu mult eucromatin are ADN-ul relaxat i aici sunt transcrise mai multe
gene, fiind caracteristic unor celule cu activitate metabolic intens. Un nucleu cu mult
heterocromatin are ADN-ul condensat i aici genele nu se transcriu, ceea ce caracterizeaz
celulele cu ac-tivitate metabolic redus.
50
CROMOZOMII
n nucleul interfazic cromozomii sunt prezeni la nivelul cromatinei nucleare, respectiv
n eucromatin i heterocromatin. Ei se individualizeaz n timpul diviziunii celulare cnd
pot fi evideniai uor, datorit unui fenomen de condensare i spiralizare. Cromozomii
metafazici sunt cel mai uor de ob-servat la microscop i ei au dimensiuni variabile ntre 1,5 i
10 m.
Cromozomii reprezint o caracteristic de specie, fiind n numr con-stant la o
anumit specie. Ei au rol important n transmiterea ereditar a ca-racterelor. Acestea sunt
determinate de gene, iar genele sunt localizate n cromozomi. Genele sunt constituite din
acizi nucleici, care reprezint suportul material al ereditii. Fiecare specie i fiecare individ
are propriul su program genetic nscris n genele din cromozomii si. Materialul genetic este
reprezentat de ADN. Gena este o poriune din molecula de ADN, iar in-formaia este stocat
n gen sub form codificat. O gen cuprinde 300-1.500 nucleotide, iar cromozomii umani
conin peste 30.000 de gene.
Marea majoritate a materialului genetic se gsete n cromozomi i o parte foarte mic
se afl n mitocondrii. Transmiterea informaiei genetice se realizeaz astfel: n faza S
(sintetic) a ciclului celular se produce replicarea ADN-ului din cromozomi, ADN-ul nou
sintetizat fiind o replic (o copie) a secvenei de nucleotide din ADN-ul iniial i conine
aceeai informaie ge-netic. n cursul diviziunii celulare, ADN-ul cromozomial se mparte n
mod egal la cele dou celule fiice care vor avea aceeai informaie genetic ca i generaia
precedent.
Din punct de vedere biochimic, cromozomii sunt alctuii din ADN, proteine histonice
i nonhistonice precum i o cantitate foarte redus de ARN.
Din punct de vedere morfologic fiecare cromozom este format din dou cromatide
surori absolut identice, fiecare cromatid fiind o molecul de ADN. Cele dou cromatide
conin aceleai gene structurale. Extremitile cromatidelor poart numele de telomere. Locul
n care cele dou cromatide se unesc poart numele de centromer sau constricie primar.
Aceast zon este mai puin colorabil i la microscopul elctronic s-a constatat c este
constituit din dou formaiuni cilindrice numite kinetocori, respectiv cte unul pentru fiecare
cromatid.
Dup poziia centromerului deosebim patru tipuri de cromozomi:
metacentrici, cu centromerul situat n, sau imediat lng centrul cromozomului, ca
urmare braele unui astfel de cromozom sunt aproape egale,
submetacentrici, cnd centromerul este plasat excentric i mparte cro-mozomul n
dou brae scurte i dou lungi,
subtelocentrici (acrocentrici), cu centromerul astfel dispus nct braele scurte sunt
puin vizibile,
telocentrici, cu centromerul dispus la unul dintre capetele cromozomu-lui, deci nu
exist brae scurte.
La nivelul telomerelor pot s mai existe strangulri care poart denumi-rea de
constricii secundare.
51
CICLUL CELULAR
Prin ciclul celular se nelege perioada de timp scurs din momentul n-cheierii
diviziunii prin care a luat natere o celul i pn n momentul nche-ierii propriei sale
diviziuni.
Ciclul celular cuprinde dou mari faze:
interfaza (perioada dintre dou diviziuni),
mitoza (perioada diviziunii celulare).
Interfaza nu este o perioad de repaus ci o perioad de activitate meta-bolic intens
n care celula i realizeaz funciile specifice i n acelai timp se fac i pregtirile pentru o
nou mitoz.
Interfaza cuprinde trei perioade distincte:
perioada G1 sau presintetic, n care ADN-ul cromozomial are o funcie
heterocatalitic, adic n aceast perioad particip la sinteza tuturor tipurilor de ARN
i prin aceasta la sinteza diferitelor tipuri de proteine la nivelul ribozomilor,
perioada S sau sintetic, n care ADN-ul cromozomial are o funcie au-tocatalitic,
adic are loc fenomenul de duplicare semiconservativ a ADN-ului cromozomial
(2C 4C),
perioada G2 sau postsintetic n care ADN-ul i reia funcia heteroca-talitic, masa
citoplasmatic crete, se acumuleaz substane energetice necesare procesului de
mitoz i se sintetizeaz proteinele aparatului mitotic.
n ciclul celular exist anumite puncte de restricie pe care celula trebuie s le
depeasc pentru a putea parcurge etapele urmtoare. Dac celula nu este capabil s-l
depeasc, evoluia ei se oprete n etapa ciclului celular situat imediat naintea punctului de
restricie. Cel mai important punct de restricie este situat la trecerea din perioada G1 n
perioada S.
Ca durat n timp, ciclul celular este de aproximativ 16 ore n culturi celulare (G1 5
ore, S 7 ore, G2 3 ore, M 1 or). ntre diferitele tipuri de celule din organism exist mari
diferene n ceea ce privete durata ciclului celular.
Astfel, exist:
celule cu ciclul celular scurt, de aproximativ 72 ore, cum sunt enteroci-tele,
celule cu ciclul mediu, cum sunt celulele epidermului, cu ciclul celular de 30 zile, sau
hepatocitele cu un ciclu de aproximativ 100 zile,
celule au ciclul lung de mai multe luni de zile, cum sunt celulele cartilaginoase,
celule perpetue, cum ar fi neuronii sau fibrele musculare cardiace, a c-ror ciclu
dureaz ct viaa individului.
Sub aspectul desfurrii ciclului celular, celulele se mpart n:
celule statice,
celule n transit,
celule stem (matc, su, precursoare).
Celulele statice sunt celule foarte specializate cum ar fi neuronii, fibrele musculare
cardiace i scheletale, care sunt situate n faza G1 a ciclului celular, faz de care nu trec
niciodat.
52
Celulele n tranzit cuprind cea mai mare parte a celulelor din organism. Ele sunt
capabile de 1-2 cicluri celulare, dup care i pierd capacitatea de diviziune. Ele sunt nlocuite
mereu cu celule noi provenite din celule pre-cursoare.
Celulele stem sunt reprezentate de un numr redus de celule, ce i ps-treaz
proprietatea de diviziune pe tot parcursul vieii individului. n mod normal, aceste celule stem
se afl ntr-o faz blocat a ciclului celular (G0) de unde nu ies dect n urma aciunii unor
stimuli.
Ciclul celular poate fi influenat de:
factori generali ca: temperatura, lumina, ritmul circadian, hormoni (ex. hipofizari,
tiroidieni),
factori intracelulari ca:
o modificarea raportului nucleo-citoplasmatic,
o factorii de cretere ai fibroblastelor, condrocitelor, celulelor epi-dermice,
o factori genetici, n programul genetic fiind nscris numrul de cicluri celulare pe
care celula l poate desfura (ex. fibroblastee au 50 de cicluri),
factori intercelulari, adic mesageri chimici venii de la alte celule; n vecintatea unor
celule care mor, alte celule intr n mitoz; exist apoi hormoni locali (chalone) care
induc mitoze la distan, n celule din acelai esut.
Exist o seama de antimitotice utilizate n scop terapeutic cum ar fi: ci-tostaticele,
radiaii ionizante, etc.
MITOZA
Mitoza (mitos-filament) este modalitatea normal de diviziune a ce-lulelor somatice.
Ea se mai numete i diviziune indirect, pentru c mo-dificrile din nucleu le preced pe cele
din citoplasm. Mitoza este ecuaional pentru c celulele fiice dobndesc aceeai cantitate de
ADN i acelai cariotip ca i celula mam (2n, 2C).
Mitoza este un proces biologic esenial care st la baza creterii i dife-renierii
celulare, rennoirii celulelor, reparrii esuturilor, formrii i creterii tumorilor. Ea se mparte
n patru faze (Fig. 35):
profaza,
metafaza,
anafaza,
telofaza.
Durata mitozei la om este de circa 60 minute, iar fazele au o durat inegal. Astfel,
profaza dureaz 30 minute, metafaza 8 minute, anafaza 4 mi-nute, iar telofaza 18 minute.
Profaza debuteaz prin apariia celui de-al doilea centriol, fr alte modificri vizibile
la nivelul nucleului sau citoplasmei. Apoi cei doi centrioli migreaz fiecare nspre un pol al
celulei, iar ntre ei se dispun filamentele care vor alctui fusul de diviziune. Concomitent au
loc fenomene nucleare, marcate prin dispariia nucleolilor, condensarea cromatinei i
individualizarea cromozomilor, care se dispun cap la cap i constituie o formaiune numit
spirem. n continuare cromozomii se individualizeaz, nveliul nuclear se dizolv i astfel
nucleoplasma (mpreun cu cromozomii) se amestec cu citosolul. Dup dezorganizarea
nucleului, fusul de diviziune tinde s ocupe poziie central n celul.
53
celulele care se divid pentru a le nlocui pe cele care se distrug. Ori de cte ori o celul sau un
grup de celule moare, o alt celul sau alt grup de celule intr n diviziune, meninnd n
condiii normale un raport corespunztor ntre cele trei categorii de celule.
MEIOZA
Meioza:
este tipul de diviziune celular prin care se formeaz celulele sexuale,
ovulul i spermatozoidul sunt celule haploide (n, C), prin unirea lor se
formeaz zigotul care este o celul diploid (2n, 2C).
este alctuit din dou diviziuni succesive, meioza I i meioza II.
o n meioza I are loc njumtirea numrului de cromozomi (diviziune reducional)
n
o n meioza II se aseamn pn la identitate cu o mitoz obinuit (diviziune
ecuaional).
Cele dou diviziuni meiotice se deosebesc prin modul de repartizare a materialului
genetic la celulele fiice:
n anafaza meiozei I migreaz spre cei doi poli ai celulei cromozomi ntregi
(bicromatidici), nu cromatide separate ca n mitoz.
cromatidele surori ale unui cromozom bicromatidic se vor separa i vor migra spre cei
doi poli ai celulei abia n anafaza celei de a doua diviziuni meiotice.
Celulele care au calitatea de a parcurge diviziunea meiotic sunt sper-matocitul i
ovocitul primar. Dup prima diviziune meiotic vor lua natere spermatocitul i ovocitul
secundar, care n urma celei de-a doua diviziuni meiotice, vor deveni spermatozoid, respectiv
ovul.
La fel ca i n cazul mitozei, pentru ca o celul s poat ncepe procesul de diviziune
meiotic, ea trebuie s parcurg n prealabil faza S i s-i dubleze cantitatea de ADN. Numai
dup aceasta va intra n profaza primei diviziuni meiotice.
Meioza I cuprinde aceleai faze ca i mitoza (profaza, metafaza, anafa-za i telofaza),
dar care se realizeaz diferit.
Profaza I prezint urmtoarele subfaze:
leptoten, n care cromozomii sunt nc alungii i greu de individua-lizat, dar prin
declanarea procesului de spiralizare i condensare, vor deveni din ce n ce mai
vizibili,
zigoten, n care cromozomii omologi (din setul matern i patern) se aeaz unul n
dreptul celuilalt, parte corespondent cu parte co-respondent se apropie, se alipesc,
dar nu fuzioneaz,
procesul poart numele de conjugare,
n anumite zon, cromozomii omologi stabilesc legturi ntre ei, numite sinapse.
pachiten, n care se continu procesul de spiralizare a cromozomilor,
o devin scuri i groi,
o legturile dintre ei devin foatre stnse i suprapunerea lor este perfect, aa nct o
pereche de cromozomi omologi se vede ca unul singur,
55
56
RIBOZOMII
Ribozomii reprezint componente deosebit de importante ale comparti-mentului
matriceal, datorit rolului lor n sinteza proteinelor. Ribozomii sunt de natur
ribonucleoproteic i sunt prezeni n toate celulele, att la proca-riote, ct i la eucariote, cu
excepia hematiilor adulte. Ei se mai numesc i citoribozomi, pentru a fi difereniai de
ribozomii mitocondriali care se mai numesc i mitoribozomi.
Ribozomii au fost descoperii de George Emil Palade cu ajutorul mi-croscopului
electronic. Ei apar ca formaiuni granulare cu dimensiunea de aprox. 30 nm. Ribozomul este
un complex format din dou subuniti inegale ca dimensiuni i inegale n privina constantei
lor de sedimentare:
subunitatea mare, cu diametrul de 30 nm i cu o constant de sedimen-tare de 60 S,
are form sferoidal i prezint o mic depresiune nspre subunitatea mic;
subunitatea mic, cu diametrul de 10-20 nm i cu o constant de sedi-mentare de 40 S,
are o form alungit, convex-concav.
Cele dou subuniti reunite (adic ntreg ribozomul) au constanta de sedimentare 80
S.
Ribozomii sunt formai din ARN, proteine, cantiti mici de ap, ioni (calciu,
magneziu), etc.
ARN ribozomal (ARNr) se gsete n ambele subuniti ribozomale. Astfel,
subunitatea mic conine o molecul de ARNr cu constanta de se-dimentare 18 S, iar
subunitatea mare conine trei molecule de ARNr cu constanta de sedimentare 5 S; 5,8 S i 23
S.
Proteinele ribozomale sunt localizate n interiorul ambelor subuniti ribozomale, fiind
legate mai strns sau mai lax de moleculele de ARNr. Nu-mrul lor este destul de mare la
nivelul ambelor subuniti ribozomale. Astfel, subunitatea mare conine 50 de proteine
ribozomale, iar subunitatea mic 30.
Ribozomii se pot gsi liberi n citoplasm, sau ataai de membranele reticulului
endoplasmic rugos. Ei pot fi observai fie izolai, fie grupai n poliribozomi (polizomi).
Numrul de ribozomi ce intr n alctuirea unui poli-ribozom depinde de mrimea moleculei
proteice ce urmeaz a fi sintetizat. Gruparea n poliribozomi se realizeaz cu participarea
unei molecule de ARNm, care are forma unui filament cu diametrul de 2 nm. Acest filament
nir ribozomii ca mrgelele pe a, trecnd prin fiecare granul ribozomal ntre subunitatea
mic i subunitatea mare a acesteia. Dup ce proteina a fost sintetizat lanul polipeptidic se
rupe, iar ribozomii se disperseaz n cito-plasm. Marea majoritate a particulelor ribozomale
la eucariote se gsesc a-samblate tot timpul n poliribozomi i numai un numr mic sunt
dispersai n citosol.
Poliribozomii pot fi:
poliribozomi liberi,
poliribozomi ataai de membrana reticulului endoplasmic.
57
fiecare din cele dou perechi migreaz nspre unul din polii celulei. O serie de microtubuli se
vor organiza n jurul fiecrei perechi de centrioli sub forma unei structuri radiare ce poart
numele de aster. Ali microtubuli vor forma fusul de diviziune care se dispune ntre cele dou
perechi de centrioli. O parte dintre microtubulii fusului de diviziune se ntind de la un pol la
altul, dar muli microtubuli se ntind de la unul dintre poli, pn la kinetocorul cromatidelor,
legnd astfel fiecare cromatid de unul dintre poli.
Prezena microtubulilor este necesar n timpul diviziunii pentru mi-grarea celor dou
seturi de cromozomi spre polii celulei, aspect demonstrat de faptul c substanele
medicamentoase care interfereaz cu polimerizarea tubulinelor (ex. colchicina, vinblastina,
vincristina) blocheaz celulele n me-tafaz i determin n final moartea celulelor.
INCLUZIUNILE CELULARE
Dac organismul dispune la un moment dat de anumii produi meta-bolici n exces,
exist posibilitatea stocrii (depozitrii) lor temporare sau de-finitive la nivelul citosolului
unor celule. Aceste depozite intracitoplasmatice poart numele de incluziuni celulare. Pot fi
depozitate intracitoplasmatic substane diferite: glucide, lipide, proteine, pigmeni, cristale,
cristaloizi, etc. Dac acest fenomen depete anumite limite se poate ajunge n situaii patologice, unele cu un caracter reversibil, altele fiind ireversibile.
Glucidele sunt depozitate n citoplasma celulelor animale sub form de glicogen.
Depozite intracelulare de glicogen pot fi evideniate n hepatocite i celulele musculare prin
metoda PAS sau prin colorarea cu carmin Best.
Lipidele sunt stocate n citoplasma celulelor ca trigliceride, sub form de picturi
sferice de diferite mrimi. Celulele care stocheaz lipide sunt ce-lulele corticosuprarenalei,
celulele corpului galben din ovar, nefrocitele, he-patocitele.
Proteinele sunt depozitate aproape n exclusivitate sub forma gra-nulelor secretorii.
Pigmenii pot apare n mod normal sub form de pigment brun-negru (granulele de
melanin) n celulele pigmentare, sau pigment galben (lipofus-cin) n celulele nervoase,
celulele corticosuprarenalei, etc. Pe msur ce or-ganismul mbtrnete, lipofuscina poate
apare ca pigment de uzur n celu-lele musculare cardiace i n neuroni.
Cristalele i cristaloizii pot apare, n mod normal, n citoplasma unor celule cum ar fi
celulele Leydig din testicul sau chiar n nucleul unor hepato-cite.
n unele situaii patologice, la nivelul citoplasmei pot apare i ali pig-meni cum ar fi:
pigmenii biliari, hemosiderina. Atunci cnd nevoile celulei (sau organismului) o impun,
unele dintre aceste incluziuni pot fi mobilizate i utilizate pn la epuizarea lor.
59
RETICULUL ENDOPLASMIC
Reticulul endoplasmic este un organit celular cavitar, rspndit n n-treaga
citoplasm, fiind format din saci, cisterne, tubi, vezicule, anastomozate ntre ele. Formaiunile
reticulului sunt delimitate de o endomembran cu grosime de aprox. 6 nm.
Reticulul endoplasmic, observat iniial la microscopul optic, a fost des-cris sub diferite
denumiri: substan tigroid sau corpi Nissl n pericarion, corpi Berg n hepatocit i
ergastoplasm n celula pancreasului exocrin. De-numirea actual i prima descriere
electronomicroscopic au fost fcute de ctre Porter i Kallman (1952). Organitul este prezent
n toate celulele euca-riote cu excepia hematiei adulte.
Deoarece el a fost observat la nceput n partea intern a citoplasmei a primit
denumirea de reticul endoplasmic. Morfologia reticulului endoplasmic difer de la o celul la
alta. Astfel, celulele embrionare au un reticul en-doplasmic rudimentar, care se dezvolt pe
msura diferenierii celulei. De a-semenea, celulele aflate n interfaz au un reticul
endoplasmic mai bine dez-voltat dect celulele aflate n diviziune.
Exist dou tipuri de reticul endoplasmic:
60
62
COMPLEXUL GOLGI
Acest organit a fost descris prima dat de medicul italian Camillo Golgi n anul 1898,
ca o reea de filamente fine pe care le-a observat n citoplasma unor celule nervoase. El a
denumit aceast formaiune cu numele de aparat reticular intern. n 1910 elevul lui Golgi,
Aldo Peroncito a observat c n timpul diviziunii celulei are loc o fragmentare a elementelor
acestui aparat i a denumit aceste fragmente cu numele de "dictiozomi". Acetia apar la
microscopul optic sub diferite aspecte: bastonae, tubi anastomozai, cisterne, etc. n cinstea
descoperitorului su, oamenii de tiin au denumit ulterior organitul cu numele de aparat
Golgi.
Numrul complexelor Golgi ntr-o celul difer mult, de la unu la cte-va sute, n
funcie de tipul, vrsta sau de activitatea funcional a celulei. Astfel, celulele tinere sau aflate
n plin proces secretor au de regul un nu-mr mare de asemenea organite.
Poziia organitului n celul difer dup tipul i activitatea acesteia. Astfel, n neuroni
complexul Golgi este dispus perinuclear, iar n celulele se-cretorii exocrine apare
supranuclear.
La microscopul electronic s-a constatat c n structura lui intr trei componente de
baz (fig. 7):
pachete de saci turtii sau cisterne aplatizate,
microvezicule,
macrovezicule.
Cisternele aplatizate sau sacii turtii au form curbat i se dispun sub form de
pachete. Numrul sacilor ntr-un pachet este variabil, n majoritatea cazurilor fiind ntre 5 i
11. Fiecare sac poate fi comparat cu o farfurie care are partea central mai subire i periferiile
mai dilatate.
n ansamblu, complexul Golgi are o polaritate morfofuncional dis-tinct, prezentnd:
compartimentul "cis" orientat spre nucleu, reprezentat de faa convex, numit i fa
formatoare sau imatur, deoarece prin aceast fa organitul primete veziculele de
transport a proteinelor sau lipidelor sintetizate de reticulul endoplasmic;
compartimentul "median", la nivelul cruia se realizeaz glicozilarea lipidelor i
proteinelor;
compartimentul "trans" orientat spre membrana plasmatic, reprezentat de faa
concav, numit i faa de elaborare sau matur, deoarece la a-cest nivel are loc
elaborarea granulelor de secreie.
Fig. 7.
Structura
complexului
Golgi-diagram.
63
Microveziculele sunt mici vezicule (de ordinul nm) care se desprind din reticulul
endoplasmic i se deplaseaz nspre sacii golgieni de pe faa cis, cu care fuzioneaz. Ele se
mai numesc i vezicule de transfer deoarece macro-moleculele sintetizate n reticulul
endoplasmic sunt "transferate" cu ajutorul microveziculelor n sacii golgieni.
Macroveziculele sunt dispuse la periferia cisternelor i pe faa concav a organitului.
Ele se formeaz prin nmugurirea la periferie a cisternelor gol-giene i sunt de fapt vezicule de
secreie care conin proteine sau alte macro-molecule ce au fost maturate la nivelul cisternelor
golgiene i care urmeaz s fie eliminate din celul prin exocitoz.
Grosimea endomembranelor care delimiteaz formaiunile complexu-lui Golgi este de
aprox. 6-8 nm, mai mic la microvezicule i mai mare la ma-crovezicule.
Alte vezicule eliberate de pe faa trans sunt de dimensiuni mai mici de-ct cele ale
veziculelor de secreie. Ele conin hidrolaze acide i reprezint li-zozomi primari care prin
enzimele pe care le conin vor participa la procesul de digestie intracelular.
Complexele Golgi sunt structuri dinamice care prezint o mare labilita-te, o
permanent modificare i o permanent regenerare. Astfel, paralel cu "dispariia" cisternelor
prin formarea de macrovezicule (pe faa trans), noi cisterne se formeaz pe faa cis (faa
formatoare), din microveziculele venite de la reticulul endoplasmic. Se apreciaz c o cistern
sau sac golgian se for-meaz n 2-3 minute, iar ansamblul sacilor dintr-un complex Golgi se
ren-noiete n aproximativ 30 minute pe seama microveziculelor care vin de la reticulul
endoplasmic i care fuzioneaz cu membranele compartimentului cis.
FUNCIILE COMPLEXULUI GOLGI
LIZOZOMII
Lizozomii sunt organite n form de vezicule, sferice sau ovale, au dia-metrul cuprins
ntre 0,2-1 m, sunt formai de aparatul Golgi i conin enzi-mele hidrolitice necesare
digestiei intracelulare a materialelor nglobate de ctre celul. Au fost descoperii de ctre
Christian de Duve (1952) prin me-tode biochimice i apoi au fost vizualizai la microscopul
electronic de ctre Nivikoff (1956). Lizomii sunt prezeni n citoplasma tuturor celulelor
anima-le, cu excepia hematiei adulte. La microscopul electronic s-a observat c ei sunt
alctuii din:
membrana lizozomal,
matricea lizozomal.
Membrana lizozomal are grosimea de 7-8 nm i structura asemn-toare cu a
celorlalte endomembrane.
Matricea lizozomal poate apare omogen, fin granular, sau heteroge-n, ceea ce
determin un polimorfism lizozomal n fiecare celul. n matricea lizozomal exist aprox.
50-60 enzime hidrolitice ca: proteaze, lipaze, nucle-aze, fosfataze, sulfataze, etc., capabile s
digere proteine, carbohidrai, lipide sau derivate ale acestora. Toate aceste enzime sunt
hidrolaze acide, active la un pH situat n jurul valorii de 5. Membrana lizozomal este n mod
normal impermeabil pentru aceste enzime, prevenind astfel contactul i digestia altor
structuri celulare. Ruperea din diverse motive a membranei lizozomale, va determina
eliberarea enzimelor, care vor produce liza citoplasmei nvecinate.
Prin observaii la microscopul electronic s-a stabilit c lizozomii pot fi mprii n trei
categorii:
lizozomi primari,
lizozomi secundari,
lizozozmi teriari.
Lizozomii primari se prezint sub forma unor vezicule sferice care au la interior un
coninut bogat n hidrolaze acide. Enzimele lizozomale sunt sin-tetizate n ribozomii ataai
membranelor reticulului endoplasmic, unde sunt glicozilate cu manoz. Trec apoi n
compartimentul cis al complexului Golgi, unde moleculele de manoz sunt fosforilate n
poziia 6 (manozo-6-fosfat). Aceste enzime trec apoi prin compartimentul median spre
compartimentul trans unde pe baza gruprilor manozo-6-fosfat (M6P) sunt direcionate spre
lizozomi. Aceast selecie este posibil datorit unor receptori pentru M6P localizai n
membranele compartimentului trans i care leag doar proteinele care au gruparea M6P.
Astfel, enzimele lizozomale sunt separate de alte proteine, vor fi concentrate n vezicule
transportoare, care fuzioneaz cu endolizozomii, iar apoi ajung la lizozomii maturi. La un pH
acid se va produce disocierea receptorilor pentru M6P, care apoi vor fi reciclai, ajungnd din
nou la nivelul compartimentului trans al complexului Golgi (fig. 8). Lizozomii primari sunt
65
FUNCIILE LIZOZOMILOR
(lizozomi teriari). Corpii reziduali sunt eliminai n afara celulei prin exocitoz, dar uneori ei
pot fi depozitai n citosol (ex. granulele de lipofuscin n procesul de mbtrnire) diminund
treptat capa-citatea metabolic a celulelor respective.
PEROXIZOMII
Peroxizomii au fost descoperii la microscopul electronic de ctre Rhodin (1954) n
celulele renale, dar o descriere detaliat a lor a fost fcut abia n 1966 de ctre Wattiaux.
Peroxizomii sunt organite mici, sferice, cu diametrul de 0,5-1,5 m i se aseamn fizic cu
lizozomii. Se deosebesc ns de acetia prin urmtoarele:
se presupune c se formeaz prin autoreplicare sau prin nmugurirea reticulului
endoplasmic neted,
conin n special oxidaze.
Peroxizomii sunt delimitai de o membran lipoproteic, iar n interior prezint o
matrice proteic mai dens dect cea a lizozomilor.
Matricea peroxizomilor conine enzime implicate n oxidarea anumitor substane, n
special n -oxidarea unor lanuri lungi de aminoacizi (care con-in mai mult de 18 atomi de
carbon). Dintre enzimele cele mai importante amintim: urat-oxidaza, D-aminoacid-oxidaza i
catalaza.
Peroxizomii se gsesc n cantitate mai mare n celulele ficatului i ri-nichiului. n
unele cazuri, peroxizomii prezint n matricea lor un miez electronodens ce are o structur
paracristalin i care a fost numit cristaloid.
FUNCIILE PEROXIZOMILOR
H2O2
catalaz
H2O2 -----------------------
2H2O
catalaz
2H2O2 ---------------------
2H2O
O2
MITOCONDRIILE
Pentru desfurarea complexelor activiti ce se desfoar la nivelul celulelor
eucariote este nevoie n permanen de energie. Aceasta este asigu-rat de sistemele
generatoare de energie. n cazul eucariotelor, sursa de ener-gie o reprezint unii metabolii, iar
energia metaboliilor este convertit n e-nergia chimic a legturilor de ATP (adenozintrifosfat). Aceste legturi sunt numite legturi fosfat-macroergice i reprezint forma de
energie chimic ce poate fi utilizat cu promptitudine de ctre toate componentele celulare.
Ce-lulele eucariote folosesc concomitent dou sisteme generatoare de ATP:
glicoliza;
fosforilarea oxidativ.
Glicoliza se deruleaz la nivelul citosolului i folosete glucoza ca sub-strat pentru
generarea energiei. Aceasta este prelucrat enzimatic pn la piruvat, cu generarea a dou
molecule de ATP.
Fosforilarea oxidativ se deruleaz la nivelul mitocondriilor i folo-sete ca substrat
energetic piruvatul, deci ncepe acolo unde se sfrete gli-coliza.
n felul acesta, cele dou sisteme de conversie energetic, glicoliza i fosforilarea
oxidativ sunt cuplate.
Mitocondriile sunt organite celulare prezente n citoplasma tuturor celulelor eucariote,
cu excepia hematiilor adulte. Principala lor funcie este a-ceea de a produce energia necesar
desfurrii activitilor celulare (cretere, difereniere, diviziune, micare, etc.). Ele au fost
descoperite la microscopul optic de ctre Altman (1890) i denumite astfel de ctre Benda
(1897). La microscopul electronic au fost descrise de Sjstrand i Palade (1952), in-dependent
unul de altul. Mitocondriile au lungimea cuprins n medie ntre 1-3 m, dar pot ajunge pna
la 7 m i au diametrul 0,5 m.
Form mitocondriilor poate fi sferic sau pot fi ca un bastona, filifor-me, ramificate,
curbe sau spiralate.
Numrul mitocondriilor n celule este variabil, depinznd de tipul celu-lei i de
intensitatea proceselor sale energetice. Astfel, spermatozoidul are aprox. 25 mitocondrii,
nefrocitul n jur de 300, iar hepatocitul aprox. 2500.
68
ATP
AMP
adenilat-kinaza
-----------------------------
2 ADP
CODUL GENETIC
Prin separarea celor dou lanuri ale ADN, baze purinice i piri-midinice proemin pe
marginea fiecrei catene constituind codul genetic. Fiecare caten a moleculei de ADN
posed cte un cod genetic propriu. Prin intermediul su, ADN controleaz procesele de
sinteza de la nivel celular.
Codul genetic cuprinde cuvinte de cod care sunt constituite din triple-tele succesive de
baze. Cuvintele de cod controleaz secvena aminoacizilor n procesul de sintez a
proteinelor.
72
Majoritatea ADN-ului celulei se afl n nucleu, iar cea mai mare parte a funciilor
celulare se desfoar n citoplasm. Controlul reaciilor chimice din citoplasm se realizeaz
prin intermediul ARN. Sinteza acestuia este controlat de ADN. Astfel, prin procesul numit
transcripie codul genetic este transferat ARN-ului, care trece n citoplasm prin porii
nucleari.
Sinteza ARN necesit separarea temporar a celor dou catene de ADN, rezultnd:
o caten, folosit ca matri pentru sinteza ARN (transcripia); tri-pletele codului ADN
determinnd formarea tripletelor (codoni) codului complementar al ARN, care
controleaz secvena aminoacizilor din proteinele sintetizate;
o caten inactiv.
Fiecare caten de ADN a fiecrui cromozom conine codul pentru aproximativ patru
mii de gene.
Structura elementar a ARN este similar cu a ADN, cu dou di-ferene: riboza
nlocuiete dezoxiriboza, iar uracilul nlocuiete timina.
Sinteza moleculei de ARN se realizeaz n dou etape:
sinteza nucleotidelor ARN (ca la ADN), pentru care sunt utilizate patru nucleotide
diferite care conin bazele adenina, guanina, citozina, uraci-lul (n locul timinei din
ADN).
activarea nucleotidelor, prin adiia a cte doi radicali fosfat, cu formarea trifosfailor.
Cei doi radicali fosfat se combin cu nucleotidul prin legturi fosfat ma-croergice
provenite de la ATP-ul celular. Astfel, fiecare nucleotid dispune de o mare cantitate de
energie, necesar n urmtoarele etape ale sintezei ARN.
Nucleotidele activate vor fi asamblate folosind ca matri catena de ADN. n acest
proces este implicat enzima ARN polimeraza.
Aceat enzim are urmtoarele proprieti funcionale:
recunoate i se fixeaz pe o secven de nucleotide numit promotor, din catena
ADN, situat imediat naintea genei iniiale, aceasta fiind eta-pa esenial n sinteza
ARN;
dup fixarea la promotor, determin "despletirea" a aproximativ dou ture din spirala
helix a ADN cu separarea acestor poriuni;
se deplaseaz n lungul catenei ADN, nucleotidele complementare ale ARN vor fi
legate la catena ADN; iar prin legarea ntre ele a nu-cleotidelor succesive ale ARN se
va forma molecula de ARN.
cnd polimeraza ARN ajunge la captul genei sau al secvenei de gene, ntlnete
secven de ncheiere a lanului; care determin desprinderea polimerazei de pe catena
de ADN i eliberarea concomitent n nucleo-plasm a catenei de ARN.
Cele patru tipuri de baze ale ADN i cele patru tipuri de baze ale ARN se combin
ntre ele ntr-un mod specific, codul de pe catena ADN fiind transcris ntr-o form
complementar pe molecula de ARN, astfel:
73
Baza ADN
guanina
citozina
adenina
timina
Baza ARN
citozina
guanina
uracil
adenina
Exist trei tipuri de ARN, cu rol n procesul de sintez proteic. Acestea sunt:
ARN mesager (ARNm), ce transport codul genetic la nivelul citoplas-mei;
ARN de transfer (ARNt), ce transport aminoacizii activai ctre ribo-zomi, unde
sufer un proces de asamblare rezultnd moleculele pro-teice;
ARN ribozomal (ARNr), care intr n structura ribozomilor.
SINTEZA PROTEINELOR
Proteinele sunt sintetizate din aminoacizi. Secvena n care sunt legai este determinat
de ordinea n care bazele sunt aranjate n catena ADN, fie-care aminoacid fiind reprezentat de
o secven de trei baze (triplet).
Adenina, citozina, timina i guanina, din molecula de ADN, funcio-neaz ca literele
ntr-un cuvnt. Prin aranjarea lor n combinaii diferite, pot forma mai mult de 64 de cuvinte
de cod. Astfel pot fi codai pn la 20 de aminoacizi. Fiecare aminoacid poate avea mai mult
de un codon.
Codul unui lan polipeptidic se formeaz prin aranjarea ntr-o secven proprie a
aminoacizilor care intr n alctuirea sa.
ARN mesager (ARNm)
Majoritii aminoacizilor le corespund mai mult de un codon. Pe de alt parte un
anumit codon reprezint comanda de ncepere a sintezei proteinei, iar trei codoni reprezint
semnalul de ncetare a sintezei proteinei.
ARN de transfer (ARNt)
ARN de transfer, indispensabil pentru sinteza proteinelor, are rolul de a transfera
aminoacizii pe catena de ARNm, pe msur ce proteina este sinte-tizat.
Fiecare tip de ARNt se combin specific cu unul din cei 20 de amino-acizi comuni
acionnd ca un cru al aminoacidului specific spre ribozomi. La acest nivel, fiecare tip
specific de ARNt recunoate un anumit codon de pe ARNm i aeaz aminoacidul la locul su
n lanul molecule proteice sin-tetizate.
ARNt este o molecul mic cu aspectul unui lan molecular plicaturat, n form de
frunz de trifoi, fiind format din 80 de nucleotide.
Rolul ARNt este de a ataa aminoacizii la catena proteic. De aceea este important ca
pentru fiecare tip de aminoacid s existe numai un singur tip specific de ARNt, care s
corespund n acelai timp unui anumit codon al ARNm.
74
75
MATRICEA EXTRACELULAR
Matricea extracelular realizeaz interaciunea dintre celule i ali con-stitueni. Ea
este alctuit din fibre incluse ntr-o substan fundamental al-ctuit din glicozaminoglicani
i glicoproteine structurale.
Matricea extracelular ocup spaiul interstiial i prezint o compo-nent fluid
reprezentat de ap i de molecule solubile i o component solid alctuit din molecule
insolubile i macromolecule ordonate n structuri. Componentele matricei extracelulare sunt
secretate de ctre celulele con-junctive.
Pn nu demult se considera c matricea extracelular este alctuit din proteine
structurale pasive. n prezent, ca urmare a progreselor din biochimia i biologia celular i
molecular a esutului conjunctiv, s-a schimbat con-cepiei privind matricea extracelular.
Acum este clar c matricea extrace-lular este implicat ntr-un numr tot mai mare de
procese. Astfel, matricea extracelular stabilizeaz structura fizic a esuturilor, asigurnd
elasticitatea esuturilor i organelor; joac un rol important n adezivitatea celular;
ndeplinete un rol metabolic i nu n ultimul rnd intervine n morfogenez prin influenarea:
formei celulelor, proliferrii, migrrii i dezvoltrii celulelor la embrion.
SUBSTANA FUNDAMENTAL
76
FIBRELE CONJUNCTIVE
n substana fundamental a esuturilor conjunctive se deosebesc trei categorii de fibre:
de colagen, elastice i de reticulin. La microscopul optic ele au aspect diferit, dar studiile
biochimice i cele de microscopie electronic au scos n eviden faptul c ntre ele exist
asemnare ultrastructural i de compoziie n aminoacizi.
FIBRELE DE COLAGEN
electronic, lamina bazal poate fi observat ca o reea de fibrile fine ce pierd modelul
caracteristic reprezentat prin benzi n-tunecate i clare. Endoteliul capilarelor este de
asemenea susinut de o lamin bazal. n acest caz (capilarele glomerulului renal) lamina
bazal are o gro-sime de 1500 . Colagenul servete pentru o varietate larg de funcii structurale i mecanice, iar ca un component al laminei bazale joac un rol important n controlul
permeabilitii vasculare i epiteliale.
Fibrele de colagen se coloreaz n roz n coloraia uzual cu hematoxi-lin-eozin,
albastru n coloraia tricrom Malory sau cu albastru de anilin, verde prin metoda tricrom
Masson (modificat de Goldner), rou aprins prin metoda Van Gieson i n mod specific rou
cu colorantul rou Sirius.
Fibrele de colagen au diametrul de 10-15 m, culoarea alb, sunt drepte sau ondulate,
nu se ramific i nu se anastomozeaz. Fiecare fibr este alctuit din fibrile fine de 0,3-0,5
m, dispuse paralel, solidarizate ntre ele prin proteoglicani.
Studiile de microscopie electronic au artat c fiecare fibril este alc-tuit din
protofibrile cu diametrul de 200-400 , cu un aspect ultrastructural caracteristic, reprezentat
printr-o periodicitate de 640 compus dintr-o ban-d clar i o band ntunecat.
Unitatea de protein care se polimerizeaz pentru a forma fibrilele de colagen este o
molecul alungit denumit tropocolagen, care msoar 280 nm n lungime i 1,5 nm
grosime. Tropocolagenul const din trei subuniti de lanuri polipeptidice alfa spiralate,
dispuse sub forma unui triplu helix. Diferenele n compoziia chimic a acestor lanuri
polipeptidice sunt respon-sabile de existena diferitelor tipuri de colagen. Structura molecular
este de-terminat de compoziia n aminoacizi a fiecrui lan. Lanurile de polipeptide din
colagen conin secvena repetitiv de tipul (X-Y-Gly)n, n care cel mai adesea prolina se afl
n poziia X, iar hidroxiprolina n poziia Y. Aceti doi aminoacizi reprezint 22% din
compoziia n aminoacizi a colagenului. Glicina reprezint aproximativ 33% din coninutul n
aminoacizi a colagenu-lui.
Toi colagenii prezint segmente helicale spiralate care constau din lan-uri similare ca
structur, dar proprietile unice ale fiecrui tip de colagen se datoreaz n primul rnd
segmentelor care ntrerup triplu helixul i care se plicatureaz n alte tipuri de structuri
tridimensionale.
Configuraia sub form de triplu helix i ofer colagenului o serie de proprieti unice
i este esenial pentru fibrilogeneza normal. Mutaiile care afecteaz formarea unui triplu
helix stabil, conduc la modificri funcionale ale esutului conjunctiv.
n colagenii de tip I, II i III, moleculele de tropocolagen se agreg n uniti
microfibrilare care se mpacheteaz mpreun pentru a forma fibrile. Legturile de hidrogen i
stabilirea de interaciuni hidrofobe, reprezint etape importante n agregarea i mpachetarea
acestor molecule. ntr-o etap ulterioar, aceast structur este solidarizat prin formarea unei
legturi co-valente, proces catalizat de lizil oxidaz.
n prezent este clar ideea potrivit creia colagenii reprezint o familie de proteine
foarte nrudite structural, dar care din punct de vedere genetic sunt distincte.
n genomul uman exist cel puin 25 de gene diferite ce codific lanu-rile alfa, care
prezint diferene minime n secvenele de aminoacizi, iar aceste lanuri alfa corespund cel
puin pentru 16 tipuri diferite de colagen identificate i numerotate cu litere romane. n pielea
uman s-au identificat 10 tipuri de colagen distincte din punct de vedere genetic, iar
localizarea precis a genelor pe cromozomi, pentru cei mai muli dintre acetia, a fost fcut
prin tehnici de hibridizare in situ.
79
Segmente colagenice de tipul triplu helix au fost identificate i n alte proteine, ca:
acetilcolinesteraza, fraciunea C1q a complementului i n recep-tori ai macrofagelor.
FIBRELE ELASTICE
Fibrele elastice sunt alctuite din elastin, o scleroprotein care spre deosebire de
colagen conine n cantitate mai mic hidroxiprolina, dar n mod caracteristic mai mult
valin, dezmozin i isodezmozin. Proprietatea e-senial a fibrelor elastice este elasticitatea,
proprietate care diminu odat cu mbtrnirea organismului, din cauza depunerii srurilor de
calciu i a trans-formrii elastinei n elacin. Elastina este sintetizat de fibroblaste i se agreg n fibre cu diametrul de 0,5-2 m, mai subiri dect cele colagene, care se ramific i se
anastomozeaz. Precursorul intracelular al elastinei se numete tropoelastin, care prin
polimerizare d natere fibrelor elastice solidarizate ntre ele prin legturi covalente i
necovalente. Fibrele i lamele elastice se coloreaz slab prin metoda hematoxilin-eozin sau
sunt cromofobe, fiind evideniate cu orcein n rou brun, n rou cu rezorcin-fuxin sau n
negru cu aldehid-fuxin; sunt constant PAS+ datorit cimentului interfibrilar de natur
glicoproteic.
Examinate cu ajutorul microscopului electronic cu transmisie, fibrele elastice mature
prezint dou componente distincte:
componenta major reprezentat de elastin (aproximativ 90%) care este amorf,
electronodens i nu prezint periodicitate distinct n mi-croscopia electronic;
componenta microfibrilar care nconjoar elastina fiind reprezentat de microfibrile
cu diametrul de aproximativ 10-12 nm, alctuite din fibrilin, o familie de
glicoproteine codificate de gene aflate pe cro-mozomii umani 5, 15 i 17; o
caracteristicile fibrilinei este coninutul su mare n cistein.
Fibrele elastice din esuturile conjunctive formeaz o reea res-ponsabil de
elasticitatea diferitelor organe.
Distribuia fibrelor elastice este variabil n diferite esuturi: n plmni i n aparatul
cardiovascular sunt bine reprezentate (abundente); n aort se gsesc lamele elastice, iar n
piele constituie o component minor, elastina reprezentnd doar 1-2% din greutatea
dermului.
FIBRELE DE RETICULIN
reticulin sunt alctuite n principal de colagen de tip III n asociere cu alte tipuri de colagen,
glicoproteine i proteoglicani. Ultrastructural, fibrele de reticulin prezint fibrile cu
periodicitate axial specific colagenului, dar cu o dispoziie particular ce explic absena
birefringenei. Fibrele de reticulin sunt sintetizate de fibroblaste, condroblaste, celule
endoteliale, ca molecule de colagen tip III, care exocitate vor polimeriza n spaiul
extracelular.
PROLIFERAREA I DIFERENIEREA
CELULAR
Dezvoltarea organismului se realizeaz prin dou procese fundamen-tale:
proliferarea celular, prin care se produce creterea numeric a celulelor,
diferenierea celular, prin care se produce specializarea celulelor pentru ndeplinirea
anumitor funcii.
n perioada timpurie a dezvoltrii embrionare se produce proliferarea rapid a
celulelor, iar prin difereniere vor rezulta numeroase tipuri de celule specializate. Organismul
adult este alctuit din mai multe sute de tipuri celulare deosebite, majoritatea fiind blocat n
faza Go a ciclului celular.
Diferenierea celular:
se desfoar pe tot parcursul vieii (ncepe n momentul concepiei i nceteaz la
moartea individului).
are intensitate maxim n timpul dezvoltrii embrionare,
este un proces ireversibil la om, deoarece nici o celul difereniat nu mai poate, n
condiii normale s-i recapete caracterele embrionare avute la nceputul diferenierii.
Desfurarea procesului de difereniere celular are la baz anumite mecanisme
specifice. Astfel, la mamifere fertilizarea oului marcheaz nce-putul procesului de
difereniere. Oul fertilizat i celulele rezultate din primele dou diviziuni (primele blastomere)
pot genera prin difereniere oricare din tipurile celulare funcionale ale adultului. Acestea au
deci un potenial maxim de difereniere, motiv pentru care sunt numite celule pluripotente sau
multipotente. n cazul celulelor pluripotente, ntregul set de gene din nucleu este funcional,
ele avnd astfel posibilitatea s urmeze orice traseu evolutiv de difereniere.
Cnd celulele discului embrionar se dispun pe cele trei straturi ectoderm, mezoderm
i endoderm, ele devin celule orientate. Din acest mo-ment ele pot da natere diferitelor tipuri
de celule. Astfel, celulele ecto-dermului vor putea forma celule nervoase, celule epiteliale.
i celulele orientate posed ntregul set de gene caracteristic speciei res-pective ns
nu toate sunt funcionale, unele fiind represate. Vor rmne funcionale acele gene care sunt
necesare pentru ndeplinirea funciilor specifice, caracteristice tipurilor celulare spre care
poate evolua o celul orientat.
Se formeaz mai trziu celulele stem, care au capacitate de nmulire, dar pot da
natere numai unui singur tip celular sau a unui numr mic de celule nrudite. Astfel, celulele
stem din mduva osoas hematogen reprezint celule cap de serie pentru leucocite, hematii i
81
trombocite; celulele stem din epiteliu sunt celule cap de serie pentru celulele epiteliale.
Celulele care se formeaz din celulele stem nu mai au posibiliti de difereniere, ele
numindu-se celule adulte specializate. nlocuirea acestora se poate face doar pe baza celulelor
stem.
Organismul adult la mamifere nu posed celule pluripotente sau celule orientate, dar
are rezerve de celule stem n toate esuturile care se autontrein prin diviziune. Excepie fac
esutul muscular cardiac i esutul nervos ale cror celule nu se mai divid.
FACTORII DE CRETERE
Proliferarea celular este controlat prin factorii de cretere care se leag la receptorii
de pe suprafaa celular, care la rndul lor sunt conectai la moleculele semnal care transmit
mesajul la receptorii nucleari, unde factorii de transcripie se leag la ADN, iar sinteza
proteic va fi stimulat, determinnd astfel continuarea diviziunilor celulare (fig. 9).
Factorii de cretere sunt proteine care se leag la receptorii de pe suprafaa celulelor,
avnd ca principal rezultat activarea proliferrii i/sau diferenierii celulare (tabel. 2).
Muli factori de cretere stimuleaz
diviziunea celular a mai multor
tipuri
celulare, n timp ce alii sunt
specifici unui
tip celular.
proliferrii
Factor de
cretere
PDGF
EGF
TGF-
Sursa principal
Activitate primar
FGF
NGF
Eritropoetina
rinichii
TGF-
IGF-I
ficatul
IGF-II
diverse celule
Tot un rspuns la EGF este i inducia expresiei unor proto-oncogene nucleare, cum sunt
Fos, Jun i Myc. EGF are de asemenea efect de scdere a secreiei gastrice acide.
Factorul de cretere derivat din plachete (PDGF) este alctuit din dou lanuri
polipeptidice A i B, care formeaz homodimerii AA sau BB, sau hetero-dimeri (AB). Protooncogena c-Sis este omoloag lanului A al PDGF. Doar forma dimeric a PDGF
interacioneaz cu receptorul PDGF. Se cu-nosc receptori specifici homodimerului AA i
receptori pentru dimerii BB i AB. Ca i receptorul EGF, receptorii PDGF au activitate tirozin
kinazic intrinsec. Dup autofosforilarea receptorului PDGF, numeroase proteine semnal
asociate receptorului sunt n mod subsecvent tirozin fosforilate. Efectul proliferativ al PDGF
se exercit asupra mai multor tipuri de celule mezenchimale. Alte rspunsuri la PDGF includ:
remanierile citoscheletale i intensificarea turnoverului polifosfoinositolului. Ca i EGF,
PDGF induce expresia a numeroase proto-oncogene localizate nuclear, cum sunt Fos, Myc i
Jun.
Factorul de cretere fibroblastic (FGFs). Sunt cel puin 19 membrii distinci ai
familiei FGF. Sarcomul Kaposi, prevalent la pacienii cu SIDA, secret un omolog al FGF,
83
Receptor afectat
Sindrom produs
FGFR1
FGFR2
FGFR2
FGFR2
FGFR2
FGFR2
FGFR3
Pfeiffer
Apert
Beare-Stevenson
Crouzon
Jackson-Weiss
Pfeiffer
Crouzon
hematopozei, miogenezei, adipo-genezei, steroidogenezei. Diferii membrii ai familiei TGFpot induce di-ferenierea mezodermal n perioada timpurie a embriogenezei.
Factorul de cretere transformator- (TGF- ) ca i forma , a fost ini-ial identificat
ca substan secretat de diferite celule tomorale. n conjuncie cu TGF- -1, poate transforma
reversibil diferite tipuri de celule normale n cultur. TGF- se leag la receptorii EGF ca i
de receptorii proprii pro-ducndu-se astfel efectul factorului de cretere. Sursa principal de
TGF- sunt carcinoamele, dar i macrofagele i cheratinocitele activate. n popu-laiile de
celule normale, TGF- este un puternic factor de cretere al chera-tinocitelor.
Eritropoietina (Epo) este sintetizat de rinichi, fiind reglator al eritropo-iezei. Epo
stimuleaz proliferarea i diferenierea eritrocitelor imature, sti-muleaz creterea celulelor
progenitoare eritroide i induce diferenierea uni-tilor formatoare de colonii de eritrocite.
Factorul de cretere insulin-like (IGF-I), numit iniial somatomedina C, este un factor
de cretere nrudit structural cu insulina. IGF-I este produs ca rspuns la hormonul de cretere
(GH) i atunci induce activiti celulare sub-secvete, n mod particular n dezvoltarea osoas.
Datorit faptului c IGF-I rspunde la hormonul de cretere a fost numit
somatomedin. Studiile ulterioare au demonstrat c IGF-I are activitii autocrine i paracrine
n plus fa de activitile endocrine observate iniial. Re-ceptorul IGF-I, ca i receptorul
pentru insulin, are activitate intrinsec ti-rozin kinazic. Datorit structurii similare, IGF-I
poate s se lege de recep-torii pentru insulin, dar cu o afinitate mai mic dect insulina.
Factorul de cretere insulin-like este aproape exclusiv exprimat n esu-turile
embrionare i neonatale. Dup natere nivelul detectabil al IGF-II scade semnificativ. De
aceea se consider c este un factor de cretere fetal. Re-ceptorii IGF-II sunt identici cu
receptorii pentru manoz-6-fosfat, respon-sabili pentru integrarea enzimelor n lizozomi.
Factorul de necroz tumoral- (TNF- ) este produs de ctre macrofa-gele activate.
Ca i IL-1, TNF- induce expresia altor factori de cretere au-tocrini, intensificnd rspunsul
celular la aciunea factorilor de cretere. TNF- acioneaz sinergic ce EGF i PDGF asupra
unor tipuri celulare. Ca ali factori de cretere, TNF- induce expresia unor proto-oncogene
nucleare i a unor interleukine.
Factorul de necroz tumoral- (TNF- ) se caracterizeaz prin capaci-tatea de a omor
diferite tipuri celulare i de capacitatea de a induce diferen-ierea terminal n altele. Un
rspuns semnificativ non-proliferativ ca rs-puns la TNF- este inhibarea lipoprotein lipazei
prezent pe suprafaa clulelor endoteliale. Sinteza TNFse realizeaz n principal n
limfocitele T citotoxice. Inducerea expresiei TNF- rezult dup creterea nivelului IL-2, ca
i prin interaciunea antigenelor cu receptorii de pe celulele T.
Citokinele:
reprezint un grup de molecule cu rol regulator ce funcioneaza ca mediatori ai
comunicrii intercelulare, n condiii normale ct i n condiii patologice,
sunt glicoproteine solubile, cu greutate molecular mic,
i exercit efectele prin intermediul interaciunii cu receptori specifici de pe suprafaa
celulelor circulante sau a celor tisulare,
sunt secretate primar de ctre leucocito i stimuleaz rspunsul imun umoral i celular
i celulele fagocitare:
o citokinele secretate de limfocite se numesc limfokine,
o cele secretate de monocite sau macrofage sunt numite monokine.
85
O mare familie de citokine sunt produse de diferite celule ale orga-nismului. Multe
dintre limfokine sunt cunoscute ca interleukine, care nu sunt secretate doar de leucocite, dar
sunt capabile s afecteze rspunsul celular al leucocitelor. n mod specific interleukinele sunt
factori de cretere orientai spre celule de origine hematopoietic.
Interleukinele au un spectru mult mai larg de efecte biologice (tabel. 4). Au fost
descrise pn acum aproximativ 20 de tipuri de interleukine. IL-1, IL-6 i IL-8 sunt mediatori
multifuncionali nespecifici sintetizai de mai multe tipuri celulare, printre care i de
keratinocite, cu rol n etapa precoce a re-aciilor de aprare a organismului mpotriva
diferitelor agresiuni. n ansamblu rolul lor este de reglare a proliferrii, diferenierii i migrrii
celulelor infla-matorii i non-inflamatorii.
Interleukina-1 (IL-1) este reprezentat de o familie de trei polipeptide nrudite din
punct de vedere structural. Acestea sunt IL-1a i IL-1b, molecule cu un spectru larg de efecte
sistemice, locale (prin mecanism autocrin) i imunologice, acestea din urma cu rol n
medierea mecanismelor de aparare ale organismului gazda. A treia polipeptid este
antagonistul receptorului IL-1 (IL-1ra), inhibitor specific al activitaii IL-1.
IL-4
IL-5
IL-6
IL-7
IL-8
Principala surs
Activitate primar
macrofagele i alte
celule prezentatoare
de antigene
limfocitele TH1 i
NK
limfocitele T activate
limfocitele TH2
mastocitele
limfocitele TH2 i
mastocitele
limfocitele TH2 activate, celulele prezentatoare de antigene i alte celulele
somatice
celulele stromale timice i din mduva
osoas
macrofagele i alte
celule somatice
IL-9
limfocitele T
IL-10
gele
IL-11
celulele stromale
IL-12
limfocitele B, macrofagele
IL-13
limfocitele TH2
limfocitele TH1
activate i celule
NK
88
Activitate primar
efect antiviral, activarea
celulelor i macrofagelor
activarea macrofagelor,
neutrofilelor, limfocitelor NK,
stimuleaz imunitatea mediat
celular, efect antiviral
SEMNALIZAREA CELULAR
Celulele nu triesc izolat, comunicarea intercelular ajungnd n orga-nismele
superioare la o mare complexitate. Orice modificare aparut n comunicarea intra- sau
intercelular ca urmare a unor disfuncii ale unor ci de semnalizare celular, determin
modificri n creterea i diferenierea celulelor.
Celulele semnalizatoare sintetizeaz moleculele semnal sau liganzii, c-re vor ajunge la
celulele int, unde detecia lor este realizat de receptori specifici. Prin transducie, semnalul
captat de receptor este transmis, declannd rspunsul celular. Astfel, moleculele semnal pot
declana: mo-dificarea metabolismului celular (ex. glicozilarea n hepatocitele care detecteaz adrenalina), o imediat modificare a ncrcturii electrice membra-nare, sau
modificarea expresiei unor gene (transcripia) n nucleu.
n funcie de distana la care sunt transmise semnalele, deosebim:
semnalizarea endocrin, moleculele semnal sunt hormonii, ce acioneaz la distan,
semnalizarea paracrin, realizat ntre celulele vecine prin intermediul citokinelor,
semnalizarea autocrin, n care celulele rspund la moleculele semnal pe care le
produc.
Liganzii sunt de dou tipuri:
unii trec prin membrana plasmatic, pentru a se lega la receptorii intracelulari (ex.
steroizii, monoxidul de azot),
alii se leag la receptorii celular de la suprafaa celulei (ex. proteine).
Steroizii sunt mici molecule hidrofobe care pot difuza liber prin membrana plasmatic,
pentru a se lega la receptorii intracelulari. Receptorii pentru steroizi sunt proteine ce se afl n
nucleu, cu excepia celor pentru glucocorticoizi, care se afl n citosol naite de a lega
ligandul. Dup legarea moleculei semnal, receptorii devin activatori sau vor represa genele
int.
Monoxidul de azot dup ce este sintetizat, iese n afara celulei afectnd activitatea
celulelor vecine prin mecanism paracrin. Dup ce difuzeaz liber prin membrana plasmatic
monoxidul de azot va aciona pe enzimele intracelulare. Cea mai frecvent protein int este
guanil ciclaza, enzima care genereaz mesagerul de ordinul II, cGMP.
89
Exist i altfel de receptori celulari, receptorii tirozin kinazici, care spre deosebire de
cei descrii mai sus se leag la enzimele intracelulare. n aceast categorie este inclus
majoritatea factorilor de cretere. Procesul de fosforilare care urmeaz legrii ligandului va
cuprinde att proteina receptor, ct i proteina int intracelular. Acest proces st la baza
rspunsului celular la aciunea factorilor de cretere.
Receptorii pentru citokine i pentru unii hormoni peptidici func-ioneaz n asociere cu
tirozin kinaze nereceptoare, care aparin familiilor Src, Janus sau Jak. Legarea ligandului va
determina dimerizarea receptorului i fosforilarea ncruciat a tirozin kinazelor nereceptoare,
care odat activate vor fosforila receptorul, iar apoi tirozin fosforilarea moleculelor de
semnalizarea situate n aval.
90
MBTRNIREA CELULAR
mbtrnirea este rezultatul modificrilor continue acumulate n or-ganismele vii, de la
natere pn la moarte. Odat cu naintarea n vrst se produc o serie de modificri
morfologice i funcionale, iar alterrile celulare reprezint o component important a
mbtrnirii organismului.
O serie de funcii celulare sufer un declin progresiv, odat cu naintarea n vrst.
Fosforilarea oxidativ la nivelul mitocondriei se reduce, ca i sinteza proteinelor structurale i
a enzimelor, sau a receptorilor celulari.
Celulele senescente au o sczut capacitate de a prelua nutrieni, sau de a repara
defectele cromozomiale.
Fiecare celul mbtrnete specific, printr-un mecanism mai mult sau mai puin
diferit de acela al altor tipuri celulare. Astfel, n cazul celulelor difereniate i care mai au
capacitate de diviziune, se consider c n cursul vieii lor, acestea sunt capabile de un numr
precis de diviziuni programate genetic. Pentru acest tip de celule, mbtrnirea nseamn n
primul rnd scderea sau chiar oprirea procesului de diviziune. Pentru celulele care nu se
divid (neuroni, celule musculare cardiace) mbtrnirea nseamn acumularea de
macromolecule cu proprieti diferite fa de cele specifice acestor celule, sau acumularea de
substane nedegradabile n citoplasma lor, paralel cu sc-derea capacitii metabolice.
n procesul de mbtrnire celular apar o serie de modificri morfologice ale
celulelor, cum sunt:
scaderea volumului celulei,
scaderea volumului nucleului,
scaderea raportului nucleu/citoplasm,
scaderea raportului nucleu/nucleol,
scaderea ratei diviziunilor,
hipercromia nucleului,
nuclei neregulai i anormal lobai,
modificarea bazofiliei citoplasmei,
mitocondrii vacuolate,
reducerea reticulului endoplasmic i a complexului Golgi,
acumularea de reziduuri nemetabolizabile n lizozomii teriari,
acumularea de lipofuscin, un produs de peroxidare a lipidelor,
vacuolizarea citoplasmei.
Exist mai multe mecanisme diferite prin care se produce sinuciderea celulelor prin
apoptoz: unul este generat de semnale ce provin din interiorul celulei; altul este declanat de
activatori ai morii celulare care se leag la suprafaa celular cum sunt factorul de necroz
tumoral (TNF-), limfotoxina, ligandul Fas (FasL); un altul este declanat de speciile
reactive de oxigen.
1. Apoptoza declanat de semnale interne este calea intrinsec sau mitocondrial. La
celulele sntoase, pe membrana extern a mitocondriilor este exprimat proteina Bcl-2, care
este legat de o protein Apaf-1. Afectarea intern a celulei (ex. prin speciile reactive de
oxigen) va cauza desprinderea Apaf-1 de Bcl-2. O protein nrudit, numit Bax, va penetra
membranele mitocondriale, determinnd eliberarea citocromului-c. Acesta i proteina Apaf-1
se vor lega la moleculele de caspase 9. Va rezulta un complex constituit din citocromul c,
Apaf-1, caspasa 9 i ATP, numit apoptosome, a-gregat n citosol. Caspasa 9 face parte dintr-o
familie de caspase, toate fiind proteaze. Caspasa 9 va activa alte caspase. Aceast capacitate a
caspaselor de a activa alte caspase va produce o activitate proteolitic n cascad, care va
determina digestia proteinelor structurale din citoplasm, degradarea ADN i n final
fagocitarea celulei.
2. Apoptoza declanat de semnale externe este numit i calea extrinsec. Receptorii
Fas i TNF sunt proteine membranare integrale, al cror domeniu receptor se afl la exteriorul
membranei celulare. Legarea activatorilor complementari ai apoptozei, ligandul Fas i TNF,
determin transmiterea semnalului la citoplasm i va determina activarea caspasei 8, care ca
i caspasa 9 va iniia o activare n cascad a caspaselor care n final va duce la distrugerea i
fagocitarea celulei.
3. Apoptoza declanat de factorul de inducere a apoptozei (AIF). Neuronii i
probabil i alte celule au o alt cale de sinucidere, care spre deosebire de cele dou precedente
nu utilizeaz caspasele.
93
Factorul de inducere a apoptozei (AIF) este o protein care n mod normal este
localizat n spaiul intermembranar al mitocondriei. Cnd celula va primi mesajul c este
momentul sinuciderii, AIF va fi eliberat de ctre mitocondrie, va ptrunde n nucleu, se va
lega la ADN, va fi declanat distru-gerea ADN urmat de moartea celular.
Apoptoza i cancerul
Unele virusuri care cauzeaz cancere utilizeaz mijloace care previn a-poptoza
celulelor transformate. Unele papiloma virusuri sunt implicate n producerea cancerului de col
uterin. Unele dintre ele produc proteina E6 care leag i apoi inactiveaz un promotor al
apoptozei, numit p53. Virusul Epstein-Barr, cauza mononucleozei i a limfomului Burkitt,
produce o pro-tein similar Bcl-2, sau produce alte proteine care cresc producia celular de
Bcl-2. Aceste aciuni vor face ca celulele s fie mai rezistente la apoptoz, iar celulele
canceroase vor putea prolifera.
Chiar i celulele canceroase care apar fr implicarea virusurilor au ci prin care evit
apoptoza.
n unele leucemii i limfoame celulele B prezint un nivel crescut de Bcl-2, care
blocheaz semnalele ce induc apoptoza.
Celulele neoplazice ale melanoamelor evit apoptoza, prin inhibarea expreziei genei
proteinei Apaf-1.
Unele celule neoplazice, din cancerul pulmonar i din cancerul de colon, secret la un
nivel crescut unele molecule care leag FasL, ce determin blocarea legrii acestuia la Fas.
Astfel, celulele T citotoxice nu vor putea distruge celulele maligne.
Alte celule canceroase au o expresie crescut a Fasl i pot distruge orice celul T
citotoxic care va ncerca s le omoare.
Apoptoza n SIDA
Caracteristic pentru pacienii cu SIDA este declinul numrului de celule T CD4+
responsabile direct sau indirect pentru rspunsul imun. Cnd numrul lor scade n jur de
200/l, pacientul nu va mai avea un rspuns imun eficient, cu producerea unor infecii
periculoase.
Apoptoza este cea care cauzeaz dispariia celulelor T CD4+. Virusul HIV invadeaz
celulele T CD4+ ceea ce va determina distrugerea acestora. Dar mai puin de 1 din 100.000 de
celule T CD4+ din sngele pacienilor cu SIDA sunt infectate cu virusul HIV. Apoptoza este
cea care omoar i celulele CD4+ neinfectate. Dei mecanismele apotozei n aceast situaie
nu sunt clare, exist mai multe posibiliti. Toate celulele T, att cele infectate ct i cele
neinfectate au crescut expresia Fas. Expresia genei HIV, numit Nef n celulele infectate va
cauza creterea expresiei FsaL pe suprafaa lor i va fi prevenit interaciunea cu Fas care s
cauzeze distrugerea.
Pe de alt parte, cnd o celul T infectat va ntlni una neinfectat (ex. n ganglionii
limfatici) interaciunea FasL cu Fas la nivelul celulelor neinfectate va determina moartea
acestora prin apoptoz.
Apoptoza n transplantul de organe
Se cunoate de mult timp c unele pri ale corpului, cum sunt camera anterioar a
ochiului sau testiculul, sunt locuri privilegiate imunologic. Antigenele din aceste spaii nu
reuesc s induc un rspuns imun. Celulele din aceste locuri difer de celulele din alte zone
94
ale corpului prin faptul c un nivel crescut al expresiei FasL tot timpul. Astfel, celulele T
antigen reactive care au expresie crescut a Fas vor fi omorte cnd ajung n aceste spaii. n
acest mod ar fi posibil o nou cale de prevenire a rejeciei. Dac la unele celule ale rinichilor,
ficatului sau cordului transplantat ar crete nivelul expresiei FasL, ar putea fi protejat rejecia
grefelor de atacul celulelor T ale imunitii mediate celular.
Cunoaterea mecanismelor intime ale acestui important proces de apoptoz ar
deschide perspective pentru modularea lui. Modularea apoptozei ar putea servi pentru
inhibarea apoptozei n celulele normale i inducerea ei n celulele tumorale. Clarificarea
mecanismelor biochimice ale procesului de apoptoz ar putea schimba conceptul actual
privind tratamentul bolilor n general i al neoplasmelor n special.
95