Sistematica, nomenclatura
bacteriilor.
Rspndirea
microorganismelor
n
natur.
Ultrastructura,
morfologia
microorganismelor.
Istoricul
dezvoltrii
microbiologiei.Perioadele
de
dezvoltare:
morfologic, fiziologic, imunologic i contemporan. Noiune de
microbiologie. Derivatele microbiologiei medicale. Sistematica,
nomenclatura bacteriilor. Nivele de clasificare. Unitatea taxonomic specia. Ultrastructura microorganismelor. Elemente facultative: capsul,
spor, flageli, pili sau fimbrii. Elemente obligatorii: anvelopa, citoplasma,
nucleoid. Sferoplati, protoplati. Rolul peretelui celular n coloraia
Gram.
Morfologia microorganismelor, tipurile de bacterii: coci,
cilindrice, spiralate, filamentoase. Metoda microscopic de diagnostic.
munca i succesul sunt cuprinsul vieii omeneti. Voina deschide porile, munca te trece prin ele,
iar la sfritul drumului vine succesul ca o ncoronare a tuturor eforturilor.
Robert Koch considerat printele colii germane de microbiologie stabilete c microbii sunt
cauzele bolilor infecioase i descoper vibrionul holerei, agentul tuberculozei etc., studii ce-i
aduc n 1905 premiul Nobel pentru fiziologie i medicin. Koch introduce n practica de
laborator mediile de cultur solidificate ceea ce a permis izolarea n culturi pure a
microorganismelor din natur. Folosirea culturilor pure s-a extins odat cu realizarea de
aparatur destinat sterilizrii mediilor necesare pentru cultivare.
Un rol important n introducerea culturilor pure n industrie aparine savantului german E.H.
Hansen care a utilizat microorganismele drept inocul ai fermentaiilor, fapt ce a condus la
microbiologia industrial modern.
Descoperirea primului antibiotic, penicilina de ctre A. Fleming i stabilirea tehnologiei de
producere i purificare a acestui antibiotic de ctre Florey i Chain reprezint una dintre cele mai
importante realizri ale nceputului de secol XX. Omenirea devine astfel posesoarea unei noi
arme mpotriva microorganismelor patogene i sunt intens stimulate cercetrile de descoperire i
aplicare n terapeutic a noi antibiotice cu spectru specific de aciune.
Etapa contemporan a dezvoltarii microbiologiei
S-au adus contribuii importante privind studiul microorganismelor si proceselor fiziologice ale
acestora.
S-au descoperit noi grupe de microorganisme i s-a facut ncadrarea taxonomic a acestora.
S-a introdus n practica medical utilizarea unor grupe noi de antibiotice si chimioterapice.
S-au nregistrat progrese privind genetica bacterian.
LOUIS PASTEUR (1822 - 1895), chimist, biolog si imunolog francez, unul dintre intemeietorii
stiintelor microbiologice, este cel care a infiintat primele laboratoare de cercetare, fiind
considerat geniul microbiologiei. Pasteur a demonstrat ca fermentatiile, considerate anterior
procese pur chimice, sunt procese biologice determinate de actiunea microorganismelor, in
special anaerobe. El dovedeste ca fermentatia este "un act corelativ unui proces vital", o sursa de
energie necesara dezvoltarii germenilor, si ca "o fermentatie determinata are fermentul sau
determinant". Realizarea faptului ca drojdiile joaca un rol crucial in fermentatii a reprezentat
primul concept care asocia activitatea unui microorganism cu modificarile fizico-chimice ale
materiei organice. Extinzand cercetarile sale asupra fermentatiilor, a pus in evidenta natura
infectioasa a unor boli ale vinului si ale berii. Pentru impiedicarea alterarii vinului si berii,
Pasteur a imaginat procedeul incalzirii blande - pasteurizarea - aplicat ulterior si laptelui si
utilizat ca procedeu de sterilizare si in domeniul medical. Au fost puse astfel bazele tehnicilor
aseptice care constituie in prezent standardele de laborator.
Pasteur stabileste principiul specificitatii microbiene, punand bazele teoriei bolilor
infectioase si demonstrand ca acestea sunt rezultatul patrunderii in organism a unor agenti
patogeni: intre activitatea unui agent patogen si particularitatile pe care le determina exista o
anumita specificitate. Pasteur evidentiaza principiul vaccinarii si stabileste bazele stiintifice ale
prepararii vaccinurilor. A demonstrat pentru prima data ca agentii patogeni, chiar cei mai
Scurt istoric
Scurt istoric
ROBERT HOOKE
n urma studiilor realizate la microscop, descoperea in 1665 celula, marcnd astfel nceputul
unei teorii celulare, consolidate ulterior de ali savani.
Scurt istoric
LOUIS PASTEUR (1822 - 1895)
chimist, biolog si imunolog francez, unul dintre ntemeietorii tiinelor microbiologice,
este cel care a nfiinat primele laboratoare de cercetare, fiind considerat geniul microbiologiei.
El dovedete c fermentaia este "un act corelativ unui proces vital", o sursa de energie necesara
dezvoltrii germenilor, si c "o fermentaie determinat are fermentul sau determinant".
Extinznd cercetrile sale asupra fermentaiilor, a pus n eviden natura infecioas a unor boli
ale vinului si ale berii. Pentru mpiedicarea alterrii vinului si berii, Pasteur a imaginat procedeul
nclzirii blnde - pasteurizarea - aplicat ulterior i laptelui i utilizat ca procedeu de sterilizare i
n domeniul medical. Au fost puse astfel bazele tehnicilor aseptice care constituie n prezent
standardele de laborator.
Pasteur stabilete principiul specificitii microbiene, punnd bazele teoriei bolilor
infecioase. El evideniaz principiul vaccinrii i stabilete bazele tiinifice ale preparrii
vaccinurilor. A demonstrat pentru prima data c agenii patogeni, chiar cei mai periculoi, pot fi
modificai pentru a fi folosii ca vaccinuri. ncununarea operei sale a fost descoperirea vaccinrii
antirabice, aplicata pentru prima data la om in 1885.
Scurt istoric
ROBERT KOCH (1843-1916)
savant german contemporan cu Pasteur, a avut de asemenea un rol deosebit n dezvoltarea
microbiologiei medicale, prin descoperirea unor numeroi ageni patologici rspunztori de
numeroase boli la om si animale, cum ar fi tuberculoza, holera etc. El a elaborat o serie
important de tehnici de izolare, utiliznd mediile de cultura solidificate (cu gelatina) pe care
creterea microorganismelor se face sub forma de colonii izolate. Descoperirea acestei
posibiliti de a obine culturi pure a constituit un progres care a stat la baza Microbiologiei
moderne, deoarece a oferit un mijloc simplu si sigur de izolare a bacteriilor, n vederea studierii
biologiei lor, a identificrii i ncadrrii lor sistematice. Koch a utilizat tehnici de colorare pentru
preparatele microscopice (frotiuri) i n 1882 a identificat bacilul care-i poarta numele (B.K.),
agentul patogen al tuberculozei. In 1905, Koch este recompensat cu premiul Nobel pentru
fiziologie si medicina.
Noiuni
Microbiologia reprezint o ramur a biologiei, care se ocup cu studiul microorganismelor
unicelulare, invizibile cu ochiul liber (ciuperci microscopice, alge, bacterii, virusuri, protozoare)
i influena acestora asupra oamenilor i a altor organisme.
Microbiologia medical studiaz problemele de sistematic, nomenclatur i clasificare a
microorganismelor patogene pentru om, morfologia, fiziologia, genetica, rolul lor n etiologia i
patogenia bolii infecioase, i elaboreaz procedee de diagnosticare a lor n laborator, de terapie
specific i profilaxie.
Generaliti
Microbiologia medical are ca obiective principale de cercetare :
- relaiile dintre microorganisme si gazda lor umana;
Ordinele primesc sufixul ales (Spirochetales: speria = bucla, chaete = par bacterii in forma de
par buclat);
familiile primesc sufixul aceae (Enterobacteriaceae: enteron = intestin, bacterii care traiesc in
intestine);
genurile primesc sufixuri variabile: - um (Clostridium), -us (Staphylococcus), -a (Leptospira),
-as(Pseudomonas).
Speciile definite prin cele doua nume latine Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes,
Clostridium perfringens...
Sistematica, nomenclatura bacteriilor
De exemplu:
Domeniul Bacteria
Regnul Procaryota
Tipul Proteobacteria
Clasa Gammaproteobacteria
Ordinul Enterobacteriales
Familia Enterobacteriaceae
Genul Escherichia
Specia Escherichia coli
Ultrastructura microorganismelor
Unitatea morfofuncional a bacteriilor este celula, un complex autoorganizat de molecule
organice care schimb energie cu mediul nconjurtor i este capabil s-i regleze n mod
autonom funciile vitale.
Bacteriile sunt organisme unicelulare procariote autonome, cu dimensiuni ntre
0,2 i 10 m (Spirochaeta 250 m) i care difer esenial de celulele eucariote animale sau
vegetale.
Bacteriile au o structur foarte complex, fiind alctuite din componente obligatorii, prezente la
toate speciile bacteriene i componente facultative ce se gsesc doar la unele specii.
Ultrastructura microorganismelor
Ultrastructura microorganismelor
Ultrastructura microorganismelor
Elementele obligatorii sunt:
- Anvelopa
Membrana mucozitar
Peretele celular
Membrana citoplasmatic
- Citoplasma
- Nucleoidul
- Ribozomii
- Plasmida
Elementele facultative sunt:
- Sporul
- Capsula
- Flagelii
- Pili sau fimbrii
Ultrastructura microorganismelor
Sporul o difereniere celular care asigur supravieuirea bacteriei n condiii nefavorabile ale
mediului extern. Procesul de formare a sporului este numit sporogenez, sporulare.
Proprietile sporului:
- Intact metabolic
- Coninut sczut de ap liber
- Rezistent la temperaturi i pH extreme, desicare, radiaii, ageni chimici i fizici
Forma sporului poate fi oval sau sferic iar poziia n celul: central, subterminal i terminal.
Ultrastructura microorganismelor
Capsula strat mucozitar compact alipit de peretele celular care servete n calitate de organ
protector.
Funciile capsulei:
- mpiedic desicarea bacteriei
- Barier de permeabilitate pentru substane toxice
- Barier protectoare fa de factori antiinfecioi
- Rezerv nutritiv
- Asigur aderarea bacteriei la substrate - esuturi sau suporturi inerte
- Specificitate antigenic de specie sau tip
Ultrastructura microorganismelor
Flagelii structuri filamentoase proteice, ntlnite la bacterii, bacili, spirochete.
Funcii: intervin n mobilitatea bacterian, reprezint Ag H al bacteriilor.
Structura flagelului:
- Filamentul, structur helicoidal constituit din fibrile proteice rsucite
- Crligul de articulaie
- Corpul bazal, constituit dintr-un ax rigid i mai multe inele ce servesc la fixarea
flagelului.
Tipuri de bacterii dup dispoziia flagelilor:
- Monotriche (un flagel)
- Lofotriche (un mnunchi de flageli la o extremitate)
- Amfitriche (cte un flagel sau un manunchi de flageli la fiecare extremitate)
- Peritriche (flageli pe toat suprafaa)
Ultrastructura microorganismelor
Pili (fimbrii) elemente proteice fine, rigide, scurte, repartizate pe suprafaa celulei bacteriene.
Sunt formate din subuniti proteice identice (pilina), implantate n membrana extern. Ei asigur
adeziunea bacteriilor la suprafee inerte, la celule sau alte bacterii i reprezint antigenul F.
Morfologia i structura bacteriilor
n dependen de dimensiuni
Lumea bacterian este populat de entiti microscopice ce nu pot fi vzute cu ochiul liber.
Dimensiunile sunt att de reduse, nct un volum de 1cm3 poate cuprinde 1012 bacterii cu o
greutate de aproximativ 1g, iar ntr-un mediu lichid limpede sunt necesare cel puin 1-10
milioane de bacterii pentru a produce o turbiditate sesizabil macroscopic. n intestinul nostru
sunt prezente n jur de 10-100 de trilioane de bacterii, numrul lor depind cu mult cel al
celulelor noastre.
Dimensiunea bacteriilor se exprim n micrometri (1=10-3 mm), variaiile fiind n funcie de
specie, form, mediu i vrsta culturii. n general, este cuprins ntre 1-10.
Morfologia i structura bacteriilor
Dup form
n raport cu forma lor deosebim 4 categorii de bacterii:
- Rotunde (cocii)
- Cilindrice (bacili)
- Spiralate (spirili, spirochete, vibrioni)
- Filamentoase (actinomycetele)
Morfologia i structura bacteriilor
Cocii la rndul lor se pot clasifica n:
- Micrococi (Micrococcus) celule izolate
- Diplococi (Diplococcus) perechi (neisserii - bob de cafea, pneumococi - lanceolati)
- Streptococi (Streptococcus) - lanturi
- Tetracoci (Tetracoccus) cate 4 celule (diviziune n 2 planuri)
- Sarcine (Sarcina) pachete din 8-16-32 coci (diviziune n 3 planuri)
- Stafilococi (Staphylococcus) gramezi neregulate de coci
Morfologia i structura bacteriilor
Bacilii sunt bacterii cu form alungit de bastona cu dimensiuni ntre 1,5 - 10. La bacili este
important examinarea extremitilor, aspectul acestora avnd rol n identificarea lor. Astfel,
bacilii pot prezenta capetele rotunjite (familia Enterobacteriaceae), tiate drept (Bacillus
anthracis - bacilul crbunos), mciucate (Corynebacterium diphteriae - bacilul difteric), n form
de suveic (Fusobacterium).
Bacilii se aaz:
cel mai ades izolai i n poziii ntmpltoare unul fa de cellali;
grupai cte doi (diplobacili) sau n lanuri scurte ca, de exemplu, genul Klebsiella;
dispui n lanuri ca bacilii din genul Bacillus (bacilul crbunos);
dispui n mod caracteristic sub forma unor majuscule sau litere chinezeti cum sunt bacilii
difterici (Corynebacterium diphteriae);
n palisad, ca scndurile unui gard (bacilii difterimorfi).
Morfologia i structura bacteriilor
Cocobacilii sunt bacterii uor alungite, fiind forme intermediare ntre coci i bacili (Yersinia
pestis, Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae);
Vibrionii sunt bacterii ncurbate n form de virgul (Vibrio cholerae);
Spirilii sunt bacterii spiralate avnd 1-2 spire rigide (Spirillum volutans);
Spirochetele sunt bacterii spiralate cu corpul flexibil avnd 12-20 de spire (Treponema
pallidum), foarte multe spire strnse (Leptospira) sau 2-3 spire (Borrelia):
Actinomicetele sunt bacterii foarte asemntoare fungilor i formeaz filamente sau hife lungi i
ramificate care se rup, rezultnd forme bacilare (Actinomyces).
Morfologia i structura bacteriilor
Metoda microscopic de diagnostic
Examenul microscopic studiaz morfologia i structura bacteriilor, precum si caracterele lor
tinctoriale.
Bacteriile pot fi studiate microscopic:
1. n stare nativ (preparate umede, necolorate). Se studiaz bacterii vii numai prin tehnici
microscopice speciale (fond negru, contrast de faza)
2. n frotiuri (preparate fixate si colorate)
Frotiu materialul microbian (produs patologic, cultur microbian) etalat n strat subire pe
suprafaa unei lame de sticl, ulterior uscat, fixat i colorat n vederea examenului microscopic.
Fixarea omoar microbii, le fixeaz de lam i mrete afinitatea lor pentru colorani (fixare
termic, chimic)
Fixarea termic trecerea lamei prin flacra spirtierei de 3 ori.
Fixarea chimic - meninerea lamei cu frotiul n fixatori chimici.
Colorarea asigura contrastul dintre microbi si fondul preparatului
Caracter tinctorial capacitatea bacteriilor i a elementelor de structura de a fixa diferiti
coloranti
Colorantii de anilin bazici (violetul de gentiana sau de metil, fucsina bazica, albastrul de
metilen, vezuvina, chrizoidina, etc) au afinitate sporit pentru structurile acide ale celulei
bacteriene
Tipuri de coloratii: simple (cu un singur colorant), complexe (diferentiale, speciale).
Metoda microscopic de diagnostic
Colorarea asigura contrastul dintre microbi si fondul preparatului
Caracter tinctorial capacitatea bacteriilor i a elementelor de structura de a fixa diferiti
coloranti
Colorantii de anilin bazici (violetul de gentiana sau de metil, fucsina bazica, albastrul de
metilen, vezuvina, chrizoidina, etc) au afinitate sporit pentru structurile acide ale celulei
bacteriene
Tipuri de coloratii: simple (cu un singur colorant), complexe (diferentiale, speciale).