AMINOACIZI

Aminoacizii sunt unitile constituente ale proteinelor i cuprind n molecula lor dou grupri
funcionale: carboxil i amino.Exist 20 de aminoacizi proteinogeni specificai prin codul genetic,
prezeni n toate organismele vii.
Aminoacizii naturali au formula general:
R-CH-COOH
NH2
n care gruparea aminic se afl la carbonul fa de carboxil.Excepie face prolina al crui
azot,dei tot n poziia fa de carboxil, face parte dintr-un inel pirolidinic, fiind o grup aminic
secundar.
Diversitatea aminoacizilor naturali este dat de natura lui R care poate fi o caten hidrocarbonat
alifatic sau aromatic, un heterociclu sau care poate s cuprind o funcie adiional.
CLASIFICARE
Aminoacizii pot fi clasificai:
dup natura catenei: alifatic, aromatic, heterociclic;
dup numrul gruprilor COOH i NH2: monoamino-monocarboxilici,
diaminomonocarboxilici;
dup poziia relativ pe care o au gruprilor funcionale n molecul: , , -aminoacizi.
dup prezena n cuprinsul catenei a altor grupri funcionale.
Cea mai interesant clasificare ni se pare a fi cea bazat pe polaritatea catenei i cuprinde patru
grupe :
1.)cu radical nepolar ( hidrofob ) : glicina, alanina, valina, leucina, izoleucina,
prolina,fenilalanina, triptofanul i metionina.Toi sunt mai puin solubili n ap dect aminoacizii
polari;
2.)cu radical polar nencrcat electric (la pH=6):serina,treonina,cisteina,tirosina
asparagina,glutamina.Aceti aminoacizi sunt mai solubili n ap dect cei nepolari, deoarece catena
poate stabili legturi de hidrogen cu apa, datorit gruprilor OH,-NH2 amidice i -SH pe care le
conine;
3.)cu radical polar ncrcat negativ (la pH=6): acidul aspartic i acidul glutamic;
4.)cu radical polar ncrcat pozitiv (la pH=6): lisina,arginina,histidina.
n afara acestor 20 de aminoacizi uzuali s-au izolat un numr de aminoacizi noi din
hidrolizatul unor proteine foarte specializate, toi derivnd din aminoacizii uzuali. Astfel, 4hidroxiprolina a fost gsit ntr-o protein fibroas,colagen i unele proteine vegetale; 5hidroxilisina n colagen;desmosina i izodesmosina n elastin.(Stucturile acestor ultimi doi
aminoacizi pot fi considerate ca fiind formate din 4 molecule de lisin,cu catenele laterale unite ntrun nucleu de piridiniu substituit.Aceast structur permite desmosinei i izodesmosinei s lege patru
lanuri peptidice n structuri radiare. Elastina difer de alte proteine fibroase prin capacitatea sa de a
suporta tensiuni n dou direcii).n anumite proteine musculare s-au gsit unii derivai metilai ai
referat.clopotel.ro

aminoacizii uzuali cum sunt : -N-metillisina, -N-trimetillisina i metilhistidina.Recent s-a

descoperit prezena n protrombin a acidului -carboxiglutamic, cu importan biologic
considerabil.Se mai pot gsi i ali aminoacizi n hidrolizatele proteice, dar numrul lor trebuie s
fie mic, innd seama de cunotinele genetice actuale, iar distribuia lor se va limita la o protein
dat.Aminoacizii rari din proteine se disting de cei uzuali prin faptul c nu au o codificare prin
triplet de baze (codon).n toate cazurile cunoscute ei sunt derivai ai celor uzuali i se formeaz
dup ce acetia au fost deja inserai n lanul polipeptidic,n procesul de biosintez a proteinelor.
n diferite celule i esuturi s-au pus n eviden nc circa150 de aminoacizi n form liber
sau combinaii,care nu se gsesc n proteine.Majoritatea dintre ei sunt derivai ai -aminoacizilor
din proteine; unii au ns gruparea amino la carbonul , sau fa de carboxil. Importan
biochimic ca intermediari metabolici sau precursori au urmtorii: sarcozina i betaina, provenii
prin N-metilarea (mono i respectiv trimetilarea) glicinei; -alanina care intr n constituia unor
dipeptide (carnozina i anserina),a acidului pantotenic i a coenzimei A; acidul -aminobutiric cu
rol de transmisie a influxului nervos; ornitina i citrulina care se gsesc n special n ficat i iau
parte

la

circuitul

urogenetic,

fiind

intermediari

sinteza

argininei;

homoserina

homocisteina,intermediari n metabolismul unor aminoacizi; acidul D-glutamic izolat din peretele

celular al bacteriilor; D-alanina n larvele sau crisalidele anumitor insecte;D-serina din unii
viermi.O varietate mare de aminoacizi ale cror funcii metabolice nu sunt definite nc, se gsesc
n ciuperci i plantele superioare; unii dintre acetia,cum sunt canavanina,acidul djencolic i cianoalanina sunt toxici pentru alte vieuitoare !5!.
Aminoacizii eseniali
Cei 20 de aminoacizi naturali constituie alfabetul proteinelor.Distribuia lor calitativ i
cantitativ ntr-o protein determin caracteristicile chimice,valoarea ei nutritiv i funciileei
metabolice n organism.Dintre cei 20 de aminoacizi uzuali,organismul uman i al vertebratelor
superioare poate sintetiza un numr limitat,restul trebuie s fie furnizai zilnic prin hran i se
numesc aminoacizi eseniali !9!.Cei mai muli autori, consider drept aminoacizi

eseniali

urmtorii:valina,fenilalanina,metionina,lisina,triptofanul; alii, includ i leucina,izoleucina ,treonina

i histidina!1,3,5,6,7,8,9,12!.
Nomenclatur:
n general, pentru aminoacizi se folosesc denumiri uzuale precum i prescurtrile
acestora,acceptate de IUPAC, care nu dau nici o indicaie asupra structurii.n paralel se folosesc i

referat.clopotel.ro

denumirile tiinifice care respect logica secvenial: acid, poziia gruprii NH2,prefixul amino
urmat de numele acidului carboxilic.
Tabelul nr. 1
Nr.
Crt.
1

Aminoacizii uzuali /3,5/

Formula de structur

Denumire uzual

Denumire raional

Prescurtri IUPAC
3
(hidrofob)
Glicina

acid -aminoacetic

NH2
CH3-CH-COOH

Gly, G
Alanin

acid -

NH2

Ala, A

aminopropionic

3.

CH3-CH-CH-COOH

Valin

acid -

4.

CH3 NH2
CH3-CH-CH2-CH-COOH

Val, V
Leucin

aminoizovalerianic
Acid -

5.

CH3
NH2
CH3-CH2-CH-CH-COOH

Leu, L
Izoleucin

aminoizocapronic
Acid -amino- -

6.

CH3 NH2
C6H5-CH2-CH-COOH

Ile, I
Fenilalanin

metil valerianic
Acid -fenil- -amino

1
9.

NH2
2
CH3-S-CH2-CH2-CH-COOH

Phe, F
3
Metionin

propionic
4
Acid -amino -

Met, M

metiltiobutiric

1.

2
Aminoacizi cu radical nepolar
CH2-COOH

2.

NH2

10.

Aminoacizi cu radical polar,

HO-CH2-CH-COOH

11.

NH2
CH3-CH-CH-COOH

Ser, S
Treonin

hidroxipropionic
Acid -amino -

12.

OH NH2
HS-CH2-CH-COOH

Thr, T
Cisteina

hidroxibutiric
Acid -amino -

13.

NH2
HO-C6H4-CH2-CH-COOH

Cys, C
Tirosin

tiopropionic
p-hidroxifenil alanin

14.

NH2
H2NOC-CH2-CH-COOH

Tyr, Y
Asparagin

Acid -amino -

15.

NH2
H2NOC-CH2-CH2-CH-COOH

Asn,N
Glutamin

amidosuccinic
Acid -amino -

referat.clopotel.ro

nencrcat electric la
Serin

pH= 6
Acid -amino -

16.
17.

18.
19.

NH2
Gln, Q
Aminoacizi cu radical polar, ncrcat negativ la pH= 6
HOOC-CH2-CH-COOH
Acid aspartic
NH2
HOOC-CH2-CH2-CH-COOH

NH2
Glu, E
Aminoacizi cu radical polar, ncrcat pozitiv la pH=6
CH2-CH2-CH2-CH2-CH-COOH
Lisina
NH2
NH2
H2N-C-NH-CH2-CH2-CH2-CH-COOH
NH

20.

(asparagic), Asp,D
Acid glutamic

NH2

C-CH2-CH-COOH

CH CH

NH2

amidoglutaric
Acid aminosuccinic
Acid -amino glutaric

Acid , -diamino

Lys,K
Arginina

caproic
Acid -amino

Arg,R

-guanidinovalerianic

Histidina

Acid -amino -

His, H

imidazolil propionic

NH

Tabelul nr. 2

Aminoacizi neproteinogeni /5/

Nr.

Formula de structur

Denumire uzual

Denumire raional

crt.
1
1.

2
H2N-CH2-CH2-COOH

Prescurtri IUPAC
3
-alanina

4
Acid -amino
propionic

Acid -aminobutiric
Acid aminolevulinic
Citrulina

Acid -amino -

Ornitina

amidinovalerianic
Acid , -diamino

Homocistina

valerianic
Acid -amino -

Homoserina

tiobutiric
Acid -amino -

2.
3.
4.

H2N-CH2-CH2-CH2-COOH
H2N-CH2-CO-CH2-CH2-COOH
H2N-CO-NH-(CH2)3-CH-COOH

5.

NH2
H2N-(CH2)3-CH-COOH

6.

NH2
HS-CH2-CH2-CH-COOH

7.

NH2
HO-CH2-CH2-CH-COOH

8.
9.
10.
11.

NH2
H2N-C6H4-COOH
CH3-NH-CH2-COOH
(CH3)3N+-CH2-COOH
H2N-C-NH-O-CH2-CH2-CH-COOH

Acid p-aminobenzoic
Sarcozina
Betaina
Canavanina

12.

NH
NH2
HOOC-CH-(CH2)2-S-CH2-CH-COOH

Acid djencolic

referat.clopotel.ro

hidroxibutiric
N-metil glicina

NH2
13.

NH2

N C-CH2-CH-COOH

-cianoalanina

NH2
Caracteristici generale :
Aminoacizii ndeplinesc mai multe roluri biologice,fiind n acelai timp:

ioni dipolari cu un moment de dipol mare, care determin o cretere considerabil a

mediului n care se dizolv;

electrolii amfoteri solubili n ap, cu capacitatea de a aciona ca substane tampon n diferite

domenii de pH;

sunt optic activi, datorit faptului c posed unul sau mai muli atomi de carbon asimetrici,
cu excepia glicinei;

sunt compui cu grupe reactive capabile s participe la reacii chimice avnd ca rezultat o
mare gam de produse sintetice;

sunt liganzi ai multor metale;

sunt participani n reacii metabolice cruciale, de care depinde viaa i sunt substane in
vitro pentru o gam mare de enzime;

sunt constitueni eseniali ai moleculelor proteice ale cror caractere specifice,biologice i

chimice sunt determinate n mare parte de numrul, distribuia i interrelaiile aminoacizilor din care
se compun.
Ei prezint unitate i diversitate n acelai timp:unitate, deoarece sunt -aminoacizi cu toate
consecinele fizice care decurg din aceasta i pentru c cei care sunt componeni uzuali ai
proteinelor au aceeai configuraie optic a atomului de carbon din poziia , i diversitate,
deoarece fiecare din ei posed o caten diferit, care-i confer proprieti unice, deosebindu-l
fizic,chimic i biologic de ceilali.
Proprieti fizice
Toi

aminoacizii

sunt

substane

solide,incolore,cristalizate.Forma

cristalelor

este

caracteristic pentru fiecare aminoacid /11/.Se topesc la temperaturi ridicate (peste 200 C),cu
descompunere; nu pot fi distilate nici chiar n vid.P.t. al cristalelor nu constituie un criteriu de
difereniere ntre ei.
Aminoacizii sunt, n general, solubili n ap, ns gradul de solubilitate este diferit de la un
aminoacid la altul.Solubilitatea este determinat de caracterul mai mult sau mai puin polar al
referat.clopotel.ro

catenei i de pH, fiind minim la punctul izoelectric. Sunt n general insolubili n solveni organici,
cu excepia prolinei, care este relativ solubil n etanol.Solubilitatea aminoacizilor ca i cea a
proteinelor, este influenat de prezena srurilor.
Termenii inferiori din seria aminoacizilor alifatici au gust dulceag,cei cu mas molecular mare
au gust amar.
Tabelul nr.3

Proprieti fizice ale aminoacizilor /1,3,9,11/

Nr.

Aminoacidul

Forma de

p.t.

pHi

Rotaia

MD

Solubilitatea

crt.
1
1.
2.
3.
4.
1
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.

2
Glicocol
Alanin
Valin
Leucin
2
Izoleucin
Serin
Treonin
Tirosin
Fenilalanina
Triptofan
Acid aspartic

Prezentare
3
Monolitic
Rombic
Foie
Foie
3
Plcue
Plcue
Cristale
Ace
Foie
Plcue
Foie

4
233d
297d
315
293
4
280d
228d
225
314d
283d
293d
270

5
6,1
6,1
6
6
5
5,8
5,7
6,53
5,7
5,98
5,88
3

optic
6
+3,5
+13,9
6
+12,8
-6,83
-28,3
-12,3
-35,14
-30
+4,36

7
+1,6
+6,6
-14,4
7
+16,3
-7,9
-33,9
-57
-68,6
+6,7

n ap la pHi
8
22,5
15,8
6,8
2,4
8
2,1
4,3
1,6
2,7
1,1
0,4

Acid glutamic
Glutamin
Asparagin
Lisin

rombice
Rombic
Ace
Cristale
Ace sau

206
256
225
224d

3,2
9,7

+
-6,7
+14,6

+17,7
+19,7

0,7
f. solubil

16.

Arginin

plci
Foie,

238d

10,8

+12,1

+21,8

f. solubil

17.
18.

Histidin
Cistein

prisme
Foie
Pulbere

277
260

7,5
5,1

-38,1
-

-59,8
-20

4
f. solubil

19.

Metionin

cristalin
Plcue

280

5,75

-7,2

-14,9

20.
21.
22.

Cistin
Prolin
Hidroxiprolin

hexagonal
Plcue
Ace
Plcue

259d
214
270

5,0
6,3
5,7

-222,4
-84,9
-

50,9
-99,2
-99,6

0,009
154,5
34,5

12.
13.
14.
15.

referat.clopotel.ro

Stereochimia aminoacizilor
Toi aminoacizii proteinogeni (cu excepia glicocolului) au un atom de carbon asimetric i
deci pot exista sub forma a doi antipozi optici.Treonina i izoleucina au doi centri asimetrici i deci
au patru stereoizomeri.
Prin sintez chimic se obin n general formele racemice.Scindarea acestora nu poate fi
efectuat prin metoda chimic obinuit,cu ajutorul bazelor i acizilor optic activi,fiindc
aminoacizii sunt acizi, respectiv baze prea slabe pentru a forma sruri stabile, cristalizabile cu aceti
compui.Singurul aminoacid suficient de puternic pentru a putea fi scindat prin intermediul srii
sale cu chinina, este acidul glutamic.Restul aminoacizilor se transform nti n derivai acilai,care
blocheaz gruparea amino i permite reacia cu baze optic active.Mai avantajoase s-au dovedit
metodele biochimice pentru scindarea racemicilor, folosind marea specificitate a enzimelor pentru
stereoizomerii naturali./1,3/.
Activitatea optic este exprimat cantitativ prin rotaia specific [ ]D , la temperatura de 20
sau 25 ,iar D fiind lungimea de und de obicei linia D a sodiului, 589.3 nm.Activitatea optic
depinde de natura solventului ,iar n cazul soluiilor apoase, de pH. n general, rotaia optic
specific a unui aminoacid monoaminic sau monocarboxilic este maxim la punctul
izoelectric.Rotaia specific depinde de natura catenei aminoacidului.
S a stabilit c toi aminoacizii din proteinele naturale se nrudesc cu L-glicerinaldehida,i
deci fac parte din seria L.n peretele celular al unor microorganisme sau n unele antibiotice se
gsesc i aminoacizi din seria D.(n notaia modern, literele D i L se nlocuiesc cu R, respectiv
S)./5,8/.
COOH
H-C-NH2
R
D-aminoacid

COOH
H2N-C-H
R
L-aminoacid

Proprieti spectrale
Aminoacizii uzuali nu absorb lumina n vizibil. Dintre acetia, numai tirosina,fenilalanina i
triptofanul dau spectre de absorbie la lungimi de und mai mari de 250nm,datorit nucleului
aromatic din caten.Fenilalanina prezint un maxim de absorbie la 260nm,tirosina la 275nm i
triptofanul la 280nm.ntruct majoritatea proteinelor conin tirosin, msurarea absorbiei luminii la
280nm la spectrofotometru poate constitui o metod satisfctoare de dozare a concentraiei

referat.clopotel.ro

proteinei ntr-o soluie.Cistina absoarbe la 240nm,datorit gruprii S-S-. Toi aminoacizii absorb n
U.V. ndeprtat.
Datorit comportrii diferite n soluie a aminoacizilor,n funcie de condiii,spectrele IR
difer in ele n funcie de condiiile experimentale.
n mediu acid se afl urmtoarele grupri la care corespund benzi caracteristice:
OH

-COOH

3570-3500 cm-1

-NH3+

3130-3030cm-1,

-COOH

C=O

-NH2+

2700-2250cm-1,

NH+

2450cm-1

1790-1760cm-1 (neasoc.), 1710cm-1.

n mediu bazic:
-COO-

C=O

-NH2

3500-3300cm-1(neasoc.), 3000-2000cm-1 dou benzi

-NH

o band

1600-1550cm-1

n spectrul RMN, protonul din aminoacizi are o deplasare chimic ( ) cuprins ntre 4.30 i
4.80 ppm./1,7,9/.
Proprieti electrochimice
Datorit prezenei n molecul att a unei grupri funcionale acide (-COOH),ct i a uneia
bazice (-NH2), aminoacizii sunt substane cu caracter amfoter.Att n cristale ct i n soluie
apoas,moleculele lor apar sub form de ioni dipolari (amfioni). Dovada acestui fapt s-a fcut prin
difracia razelor X, determinarea constantelor de bazicitate i aciditate, a momentelor dielectrice,
precum i pe baza interpretrii spectrelor Raman.Structura care reprezint caracterul lor dipolar
rezult prin reacia protolitic intramolecular:
R-CH-COOH
NH2

R-CH-COO+NH3

n prezena acizilor sau bazelor, soluiile aminoacizilor funcioneaz ca soluii tampon.Dac

se adaug soluiei de aminoacid un acid tare (HCl), protonii si sunt consumai, dnd un acid slab:
R-CH-COO- + H3O+
+NH3

R-CH-COOH + H2O
+NH3

n prezena unei baze tari, ionii HO- sunt consumai, formndu-se o baz slab:
R-CH-COO- + HO+NH3

referat.clopotel.ro

R-CH-COO- + H2O
+NH2

Amfionul dipolar nu migreaz n cmp electric;n mediu acid ns, aminoacidul se afl sub
form de cation i va migra ctre anod, iar n mediu bazic se afl sub form de anion i va migra
ctre catod. Toi aminoacizii pot fi neutri n soluie, deoarece gruprile amino i carboxil se
neutralizeaz reciproc;predomin forma amfionic a crei concentraie maxim este condiionat de
o anumit valoare a pH-ului, numit punct izoelectric,notat pHi.Punctul izoelectric este pH-ul la
care soluia apoas conine anioni i cationi ai aminoacidului n proporie egal:
pHi= (pK1+pK2)/2
Valoarea punctului izoelectric depinde de valoarea constantelor de ionizare: K1 pentru
funciunea

carboxil

K2

pentru

funciunea

amin;pK1

pK2

se

determin

titrimetric./1,2,5,8,9,11/.
Pentru aminoacizii monoamino-monocarboxilici pHi se gsete situat n domeniul de
pH=4.8-6.3,deoarece grupa COOH este mai puternic ionizat dect gruparea NH2,variaiile fiind
determinate de efectul exercitat de radicalul R de la C asupra celor dou funciuni,amino i
carboxil.
Aminoacizii monoamino-dicarboxilici au pHi situat la valori mai mici ale pH-ului
( domeniu acid) ca o consecin a faptului c n molecul exist nc o grupare carboxil,care nu
particip la salifierea intern i pentru a nu fi disociat este firesc ca valoarea pH-ului soluiei s se
gseasc situat n domeniul acid.
Aminoacizii diaamino-monocarboxilici, din aceleai considerente,au puncte izoelectrice
situate la valori mari ale pH-ului,respectiv n domeniul bazic.
La punctul izoelectric solubilitatea aminoacidului respectiv este minim, deoarece momentul
de dipol mare al amfionului duce la o puternic atracie ntre moleculele din cristal.Aceast
proprietate prezint importan pentru separarea unor aminoacizi din amestecuri./5,9/.
Pe baza celor menionate, se poate explica i comportarea soluiilor de aminoacizi la trecerea
unui curent electric,conductibilitatea acestora fiind determinat de valorile pH-ului.
Din punct de vedere structural,sub aspect funcional, electronic i steric, -aminoacizii se
prezint ca specii moleculare cu caracteristici bine determinate.
Proprieti chimice
Prezena grupelor amino i carboxil confer aminoacizilor caracter acid i caracter
bazic,precum i capacitatea de a da reaciile generale caracteristice acizilor carboxilici i aminelor,
innd seama totodat i de efectele reciproce pe care le exercit aceste grupri.
referat.clopotel.ro

Aminoacizii dau cu ionii cuprici i ai altor metale tranziionale sruri complexe interne sau
chelai, colorai,greu solubili,stabili.Acetia au structuri ciclice fr tensiune, n care aminoacidul
ocup dou poziii coordinative ale metalului,una prin oxigen, alta prin perechea de electroni
neparticipani ai grupei amino, de tipul /2,3,9/:
COO

NH2-CH-R
Cu

R-CH-NH2

OOC

Proprieti determinate de gruparea carboxil

Aminoacizii

formeaz

derivai

normali

ai

acestei

funciuni:

esteri,

amide,anhidride,nitrili,cloruri acide etc.

Clorurile acide (obinute prin tratare cu PCl5) ale aminoacizilor suspendai n clorur de
acetil se obin numai sub form de clorhidrai i sunt foarte reactive.Derivaii N-acilai ai
aminoacizilor ,n aceleai condiii, formeaz i ei cloruri acide care elimin ns HCl i dau
azlactone:
R-CH-COOH

R-CH-COCl

NH-COR

R-CH-C=O

NH-COR

N=C-R

Esterii se obin sub form de cristalohidrai, prin tratare direct cu metanol sau etanol
saturai cu acid clorhidric gazos.Esterii aminoacizilor inferiori se pot distila la presiune redus.Ei au
caracter bazic, dat de gruparea -NH2, gruparea -COOH fiind blocat. La conservare sau la nclzire,
esterii aminoacizilor se transform n polipeptide i n 2,5-dicetopiperazine-1,4-disubstituite:
O
C
R-CH

NH

HN

CH-R
C
O

Esterii se pot reduce prin hidrogenare catalitic sau cu sodiu i alcool, cu hidrur de litiu i
aluminiu, cu borohidrur de sodiu etc,dnd -aminoalcooli:
H2N-CH-COOR
R

H2

H2N-CH-CH2-OH
R

Esterificarea cu etanol sau alcool benzilic este adesea utilizat pentru a proteja gruparea
carboxil n cursul sintezei chimice a peptidelor.

referat.clopotel.ro

Sub aciunea amoniacului sau a aminelor, aminoacizii i esterii lor dau natere la
aminoamide H2N-CHR-CONH2.
Atunci cnd gruparea -COOH reacioneaz cu gruparea -NH2 din alt molecul de aminoacid
se obine o legtur amidic de tip special, legtura peptidic:
H2N-CHR-COOH + H2N-CHR-COOH

H2N-CHR-CO-NH-CHR-COOH +
H2O

Pot reaciona mai multe molecule de aminoacid n acest fel, obinndu-se un lan sau o caten
polipeptidic.Compuii cu numr mare de resturi de aminoacizi sunt proteine.Aceast proprietate de
a se combina ntre ei dnd natere polipeptidelor i proteinelor este una din cele mai importante
caracteristici ale aminoacizilor./1,2,4,5,8,9/.
Proprieti determinate de gruparea -NH2
Funciunea -NH2 din aminoacizi poate lua parte la alte tipuri de reacii.Astfel, prin tratare
cu cloruri acide sau anhidride, se obin derivai acilai.Acest procedeu se folosete de obicei pentru
a proteja funciunea aminic n timpul sintezei chimice a peptidelor:
C6H5-COCl + R-CH-COOH

R-CH-COOH

NH2

+ HCl

NH-CO-C6H5

( R=H- acid hipuric)

Se mai pot folosi sulfoclorurile aromatice, cloroformiaii de alchil, n special cei de t-butil,
sau

chiar

acidul

formic.Derivatul

benziloxicarboxilic

Ph-CH2-O-CO-NH-CHR-COOH

corespunztor aminoacidului ( numit i derivat carbobenzoxi ) sau t-butiloxicarbonilic (t-BOCderivatul) Me3C-OOC-NH-CHR-COOH, sunt cei mai comuni derivai protejai ai aminoacizilor. Cnd prepararea lor se efectueaz n condiii suficient de blnde, configuraia
atomului de carbon este conservat, dar n condiii mai energice are loc o racemizare.
Prin acilare, grupa -NH2 pierde caracterul ei bazic, iar aminoacizii acilai, de tipul acidului
hipuric, sunt acizi de tria acizilor carboxilici obinuii.n prezena hidroxizilor, aminoacizii se
combin cu CO2, dnd derivai ai acidului carbonic.
R-CH-COOH
NH2

+ CO2 + Ba( OH)2

R-CH-COO-

Ba2+

NH-COO-

Reaciile de acest tip au loc probabil n cazul transportului dioxidului de carbon de ctre
hemoglobin.Aminoacizii se pot alchila la grupa -NH2 prin metodele uzuale (cu iodur sau sulfat
de metil n prezena unui hidroxid alcalin). Derivaii metilai cuaternari ai aminoacizilor sunt

referat.clopotel.ro

denumii betaine. Reprezentantul cel mai cunoscut, betaina, este derivatul trimetilic al glicinei i se
obine din acid cloracetic i trimetilamin:
HOOC-CH2-N(CH3)3]+Cl-

HOOC-CH2Cl + N(CH3)3

-HCl

OOC-CH2-N+(CH3)3

Betaina este mult rspndit n plante, de exemplu n sfecl (Beta vulgaris), acumulndu-se
n melas n timpul extraciei i purificrii zahrului.Se gsete i n muchii multor
nevertebrate.Betainele, fiind sruri cuaternare de amoniu, sufer prin nclzire transpoziie de tip
degradare Hofmann;reacia este reversibil/1,3,5,8,9/.
(CH3)3N+-CHR-COO-

(CH3)2N-CHR-COOCH3

O reacie mult folosit a aminoacizilor este cea cu bromur de nitrozil sau cu acid azotos n soluie
acid, obinndu-se hidroxiacizii corespunztori i degajndu-se azot :
H2N-CHR-COOH

HONO

HO-CHR-COOH + N2 + H2O

Aceast reacie se folosete n chimia analitic pentru dozarea cantitativ a gruprii libere
-NH2 din aminoacizi i proteine, msurnd volumul de azot degajat ( metoda Van Slyke).n
soluie de HCl sau HBr se formeaz prin aceast reacie acizii clorurai sau bromurai respectivi.
Esterii -aminoacizilor dau cu acid azotos diazoesteri /3,8,9/:
EtOOC-CH2-NH2 + HNO2

EtOOC-CHN2 + 2H2O
ester diazoacetic

Prin tratamente termice, aminoacizii se descompun , dnd diferii compui , n funcie de

poziia gruprii -NH2 fa de -COOH.Astfel -aminoacizii dau 2,5-dicetopiperazine;
-aminoacizii duc la acizi nesaturai prin eliminare de NH3:
H2N-CHR-CH2-COOH

R-CH= CH-COOH

+ NH3

i -aminoacizii elimin uor apa intramolecular dnd lactame /1,5,8/:

R-CH-CH2-CH2-COOH
NH2

R-CH-CH2-CH2
NH

+ H2O

CO

Prin distilare uscat, n prezena hidroxidului de bariu ori sub aciunea enzimelor de
putrefacie, aminoacizii se decarboxileaz, conducnd la amine:
H2N-CHR-COOH

R-CH2-NH2 + CO2

Multe dintre acestea sunt substane cu proprieti fiziologice i farmacologice

remarcabile (amine biogene) /1,2,5,8,9/:
HOOC-(CH2)3-NH2
Acid -aminobutiric

referat.clopotel.ro

CH2-CH2-NH2
OH etanolamina

H2N-(CH2)5-NH2
cadaverina

C-CH2-CH2-NH2

CH2-CH2-NH2

CH CH
NH

SH
histamina

cisteamina

Prin topire cu hidroxidul de potasiu, aminoacizii sufer descompuneri adnci, ducnd la

acizi grai i amoniac sau amine.
Cu anumii ageni oxidani,aminoacizii sufer degradri,dnd aldehidele imediat
inferioare sau nitrilii corespunztori /3,5,8/:
R-CHO + NH3 + CO2
R-CH-COOH
NH2
O

reacie

R-CN + H2O + CO2

caracteristic

aminoacizilor

este

cea

cu

ninhidrina

(hidratul

tricetohidrindenului).Se formeaz compui colorai n albastru cu majoritatea -aminoacizilor;

excepie fac prolina i hidroxiprolina care formeaz compui galbeni.n prima faz se produce o
degradaere oxidativ a aminoacizilor la aldehide.
Prin condensarea cetoalcoolului cu o nou molecul de ninhidrin i cu amoniac se
formeaz produsul colorat.Una din structurile posibile ale acestuia este urmtoarea.
Reacia cu ninhidrin are o mare importan n chimia analitic, servind la recunoaterea
i dozarea aminoacizilor /1,2,3,5,9,11/.
Transformri biochimice
Transformrile pe care le sufer -aminoacizii n organismele vii sunt reacii catalizate
de enzime specifice.Biochimia aminoacizilor include toate transformrile chimice pe care le
sufer -aminoacizii n organismele vii.Analiza acestor transformri evideniaz faptul c n ele
sunt implicate direct grupele funcionale amino i carboxil i chiar radicalul pe care sunt grefate
aceste grupri.
Grupa amino poate fi eliminat din moleculele -aminoacizilor, formndu-se n final
amoniac, care la rndul su este supus altor transformri biochimice, conducnd la uree sau acid
uric care se elimin din organism.
Dezaminarea poate fi: oxidativ, hidrolitic sau reductiv, enzimele respective fiind, n
funcie de tipul de reacie, o oxidaz, hidrolaz i respectiv reductaz.
ox

R-C-COOH

H2O

R-C-COOH + NH3

NH
R-CH-COOH
NH2
referat.clopotel.ro

dezaminare

hidr.

R-CH-COOH + NH3
OH

red.

R-CH2-COOH + NH3

-ceto, -hidroxi i respectiv acidul organic, care se formeaz n urma dezaminrii, devin
n organism o surs de formare a glucidelor sau grsimilor /2,3,5,7,8/.
Pierderea CO2 n prezena unor enzime specifice fiecrui aminoacid conduce la formarea de
amine biogene.
R-CH-COOH

R-CH2-NH2 + CO2

NH2
Dezaminarea i decarboxilarea prin reacii enzimatice pot avea loc i simultan sub influena
unor microorganisme.Astfel se explic,de exemplu,prezena alcoolului izoamilic, a alcoolului
amilic optic activ i a alcoolului izobutilic n "coada" de distilare care se obine la fabricarea
alcoolului etilic /1,2,5,8,9,11/.
-cetoacizii i -aminoacizii prezeni n organism, pot participa la reacii, n urma crora
prin mai multe etape, acizii -cetonici se transform n -aminoacizi i invers.
Enzimele care catalizeaz reaciile de transaminare se numesc transaminaze.n organismele
vii poate fi sintetizat orice -aminoaci dac este prezent acidul -cetonic corespunztor /
1,2,3,7,12/.
Acidul glutamic joac un rol important n reaciile de transaminare, fiind donorul de grup
-NH2, iar pe de alt parte acidul -cetoglutaric este capabil s accepte grupa -NH2 de la aproape
toi
L-aminoacizii naturali, tramsformndu-se n acid glutamic:
HOOC-(CH2)2-CH-COOH + CH3-C-COOH
NH2

HOOC-(CH2)2-C-COOH +

CH3-CH-COOH
NH2
Transformrile catalizate de enzime, care au loc n cursul transferului grupei amino fr
formare de amoniac, de la acidul L-glutamic la acidul piruvic, sunt complexe.Acidul L-glutamic, la
rndul su, poate reface acidul -ceto glutaric i prin desaminare oxidativ.
Organismul animal nu-i poate sintetiza unii -aminoacizi ( aminoacizii eseniali) datorit
faptului c nu posed -cetoacizii corespunztori.
n prezena unor microorganisme au loc i degradri mai profunde, scindri de legturi
carbon-carbon, concomitente cu reacii de oxidare, esterificare .a. explicndu-se, astfel, diversitatea
de compui organici identificai n organism sau compui care se elimin /1,2,5,7,8,9,11/.
Identificarea i dozarea aminoacizilor
referat.clopotel.ro

Se realizeaz prin mai multe metode i anume:

1.Reacii

de

culoare:

cea

mai

important

este

reacia

-aminoacizilor

cu

ninhidrina.Compuii de culoare albastr au un maxim de absorbie la 570nm.Prolina i

hidroxiprolina dau cu ninhidrina compui galbeni cu maxim de absorbie la 440nm.Adaosul de
compui de cadmiu stabilizeaz culoarea /1,2,5,8,9/.
2. Msurarea absorbiei n u.v. se poate folosi pentru dozarea aminoacizilor aromatici, n
amestec cu ali aminoacizi.Citirea se face la 260nm pentru fenilalanin i 280nm pentru tirosin i
triptofan /5,8/.
3.Metode

cromatografice.Se

folosesc

toate

variantele

acestei

tehnici:CH,CSS,CSI,GC,HPLC.
n cromatografia pe hrtie (CH) i n strat subire (CSS) exist o strns dependen ntre
constituia catenei unui aminoacid i viteza sa de migrare.Cei cu catene hidrofobe mari
(valina,leucina,izoleucina,fenilalanina,tirosina,triptofanul,metionina) migreaz mai repede dect cei
cu catene hidrofobe mai scurte (alanina, glicina,prolina) i dect cei cu catene hidrofile
(cistein,serin, treonin, acid aspartic, acid glutamic, lisin, arginin,histidin).Migrarea
difereniat a aminoacizilor este determinat de afinitatea mai mare pe care o au aminoacizii cu
catene hidrofile pentru faza staionar (apoas) i cei cu catene hidrofobe pentru faza mobil
(solvent organic).n cazul amestecurilor complexe de aminoacizi se folosete cromatografia
bidimensional, folosindu-se un amestec de solveni organici cu migrare ntr-un sens i un alt
amestec de solveni pentru sensul perpendicular pe primul.Aminoacizii se dozez prin tratare cu o
soluie de ninhidrin, la cald,eluia fiecrui spot colorat ntr-un solvent al compusului cu ninhidrin,
stabilizarea acestuia prin combinaii cu sruri de cadmiu i citirea absorbiei la o lungime de und
de 570nm la un spectrofotometru.
Separarea cromatografic pe schimbtori de ioni are loc datorit afinitii diferite a
aminoacizilor pentru acetia, n funcie de constantele de disociere a gruprilor -COOH i NH2.
Eluia aminoacizilor reinui n coloan se face cu solveni cu valori de pH crescnde (n gradient de
pH); eluia aminoacizilor se va face n ordinea invers afinitii lor pentru schimbtorul de ioni
folosit.S-au elaborat dou tehnici: una folosind un colector automat de fraciuni i a doua, folosind
un analizor automat de aminoacizi.
n cazul cromatografiei de difuzie pe gel, aminoacizii cu molecul mai mic i mai
hidrofili difuzeaz n gel i sunt mai puternic reinui;cei cu molecule mai mari rmn n apa dintre
particulele de gel i ies mai repede de pe coloan.

referat.clopotel.ro

n electroforez sau ionoforez, separarea are loc sub aciunea unui cmp
electric.Aminoacizii se separ n funcie de valoarea constantei lor de disociere la un anumit pH
dat.Se folosete de obicei pH-ul 4,0 la care separarea este net pentru toi aminoacizii (n condiiile
unei tensiuni electrice mari, 70 V/cm).
Indiferent de metoda de separare,prelucrarea probelor cu ninhidrin i citirea absorbiei la
570nm este procedura final comun.
Pentru dozri exacte, n special pentru stabilirea unor mecanisme de reacie sau a unor ci
de metabolizare sau de biosintez se aplic metoda diluiei izotopice /1,3,5,8,9/.
Prezena unor anumii aminoacizi este indicat dup poziia maximelor, iar raportul n care
se gsesc,dup intensitatea maximelor de absorbie:
Asp:Thr:Ser:Glu:Pro:Gly:Ala= 15:10:15:12:4:3:12
4.Determinri microbiologice.Exist dou tipuri de metode microbiologice folosite la
dozarea aminoacizilor.Prima metod se bazeau pe compararea gradului de dezvoltare a unui
microorganism dependent de aminoacidul ce urmeaz s fie dozat, cu o curb de dezvoltare
prestabilit n funcie de concentraia aminoacidului.A doua metod de dozare microbiologic se
bazeaz pe faptul c unele microorganisme conin enzime specifice de degradare pentru anumii
aminoacizi, de exemplu decarboxilaze care catalizeaz decarboxilarea aminoacidului cu degajare de
CO2.Se msoar cantitatea de CO2 degajat n condiii de lucrubine stabilite, care este proporional
cu concentraia aminoacidului n prob /2,3,5,8,9,11/.
Metode de preparare
Importana deosebit a aminoacizilor att pentru cercetrile biochimice, nutriionale i
microbiologice, ct i pentru utilizarea lor n preparate farmaceutice, alimente i furaje a determinat
elaborarea unei multitudini de metode de preparare n laborator i n industrie.Astfel, aminoacizii
pot fi obinui prin izolarea lor din hidrolizatele acide,bazice sau enzimatice ale proteinelor, prin
sinteze chimice i prin biosintez.
I.Izolarea din hidrolizatele proteice
Izolarea aminoacizilor se poate realiza folosind adsorbia pe crbune activ, pmnturi
adsorbante, schimbtori de ioni, cromatografie de repartiie, electroforez,coprecipitare cu reactivi
specifici.n timpul hidrolizei acide, triptofanul este degradat aproape complet; el se separ din
hidrolizatele alcaline.Serina i treonina sunt i ele distruse parial n condiiile hidrolizei acide.De
asemenea, n timpul hidrolizei acide i alcaline, aminoacizii se racemizeaz parial.Prin hidroliz
enzimatic se obin aminoacizi optic activi, cu configuraiaL.Izolarea din hidrolizatele proteice

referat.clopotel.ro

servete

la

prepararea

industrial

multor

aminoacizi,

cum

sunt:acidul

glutamic,lisina,cisteina,arginina,triptofanul,tirosina.
II.Sinteze chimice de aminoacizi
1.Aminarea acizilor -halogenai
Prin tratarea unui acid -clorurat sau -bromurat cu amoniac sau hexametilentetramin
se obine aminoacidul corespunztor:
R-CH-COOH + 2NH3

R-CH-COOH + NH4X

NH2

Metoda se aplic la toi -bromacizii accesibili prin bromurarea acizilor, folosind metoda HellVolhard-Zelinski.Se utilizeaz un exces mare de amoniac, pentru evitarea formrii de amine
secundare i teriare.Cu HMTA se formeaz un aduct care se descompune prin nclzire cu HCl,
dnd aminoacidul cu randament mare.
2. Aminarea reductiv
Prin reducerea catalitic (cu Pd i H2) a unui -cetoacid n prezena amoniacului se obine
aminoacidul corespunztor:
R-C-COOH
O

+NH3

-H2o

+H2

R-C-COOH

R-CH-COOH

NH

NH2

-cetoacidul sau esterul acetilacetic substituit pot fi transformai n oxime, hidrazone sau
fenilhidrazone, care formeaz aminoacidul respectiv, prin reducere chimic sau catalitic:
R-CO-COOH

+PhNHNH2

C6H5-NH-N-CR-COOH

CH3-CO-CHR-COOEt

HON= CR-COOEt

H2

H2N-CHR-COOH
H2N-CHR-COOH

Reducerea se poate efectua cu Sn i HCl sau Zn i CH 3-COOH, cu amalgam de sodiu sau

de Al, catalitic (cu Ni Raney) sau electrolitic.
Importana preparativ a metodei reductive este mult mrit prin obinerea compuilor
azotai intermediari pe ci mai simple dect cele de la acizii -cetonici.O astfel de cale este
cuplarea esterilor -cetonici -substituii cu sruri de diazoniu aromatice (Feofilaktov, 1938).
R-CH-COOEt + C6H5-N= N]+ClCOCH3

R-C-COOEt

R-CH(NH2)-COOH +

N-NHC6H5

+H2N-C6H5
3.Aminarea prin transpoziie intramolecular
Aceast metod implic transformarea unui derivat al acidului cianoacetic ntr-o azid sau
amid i apoi n aminoacidul dorit, folosind transpoziiile (degradrile) Schmidt, Curtius sau
Hofmann:
referat.clopotel.ro

CN

CN

CN

CN

R-CH

R-CH

R-CH

R-CH

COOEt

CONHNH2

CON3

CN

NH2

NH2

R-CH

COOH

R-CH

NHCOOEt

CONH2

R-CH

COOH

R-CH

COOH

COOH

4.Reacia cianhidrin (sinteza Strecker, 1858)

Aceast metod implic interaciunea unei aldehide cu ionul cianur, n prezena
amoniacului sau a carbonatului de amoniu.Se formeaz aminonitrilul,respectiv hidantoina
substituit, care prin hidroliz cu acizi sau baze, se transform n aminoacidul respectiv:

R-CH= O + HCN

R-CH-CN

R-CH-CN

OH

R-CH-COOH

NH2

NH2

+(NH4)2CO3
R-CH-CO-NH
NH-CO

+H2O
-NH3, -CO2

5.Condensarea cu esteri N-acilai ai acidului aminomalonic

Esterul aminomalonic se obine prin reducerea esterului izonitrozomalonic.Derivaii Nacilai formeaz combinaii sodate, care reacioneaz n acelai mod ca esterul malonic sodat.Se
utilizeaz de obicei derivatul N-acetilat sau N-formilat.
EtOOC

EtOOC
CH2

ONOH

EtOOC
C= NOH

EtOOC

+H2, -H2O

EtOOC

CH-NH2

Ac2O

EtOOC

EtOOC
CH-NH-COCH3
EtOOC
Se pot folosi i esteri aminocianoacetici N-acilai:
EtOOC-CH-NH-COCH3
CN
Derivaii esterilor acidului aminomalonic se transform n combinaii sodate (cu etoxid de
sodiu) care, prin condensare cu halogenuri de alchil sau acil i hidroliz ulterioar, formeaz
aminoacizii corespunztori.

referat.clopotel.ro

EtOOC

R-X
C-Na+

EtOOC

EtOOC

-NaX

NHAc

EtOOC

NC

H2O

HOOC-CH-R

CR

-CO2

NH2

NHAc

-AcOH

NC
C-Na+ + RX

EtOOC

CR

-NaX

NHAc

EtOOC

H2O

NHAc

-CO2,-NH3,-AcOH

6.Condensarea unei aldehide cu un compus avnd o grup metilen activ

Aceast metod se folosete pentru obinerea aminoacizilor aromatici sau heterociclici i se
realizeaz pornind de la o aldehid aromatic, care se condenseaz cu o azlacton (de exemplu 2,5
dicetopiperazina, hidantoina, rodanina sau 2-mercaptotiazolin-5-ona).Dup reducere cu amalgam de
sodiu sau zinc i acid acetic i hidroliz se obine aminoacidul corespunztor.Aceast metod este o
aplicare a condensrii Perkin.
NH
O=

H2C-CO

H2C-CO

= O

NH

NH
2,5 dicetopiperazin

Ar-CH= O +

NH

HN-CO

S-CS

hidantoin

rodanin

H2C-CO

H2C-CO
S
HN-CS
2-mercaptotiazolin-5-on
=O

Ar-CH=

N O

H2O

Ph

H2

Ph

azlacton
=O

Ar-CH2
N

H2O

Ar-CH2-CH-COOH

-PhCOOH

NH2

Ph
7.Oxidarea aminoalcoolilor
Metoda este limitat la aminoalcoolii accesibili.
AcHN-CHR-CH2OH + [O]

AcHN-CHR-COOH + H2O

8.Se cunosc o serie de metode chimice de sintez specifice unor aminoacizi, deci cu
aplicabilitate limitat; de exemplu, adiia amoniacului la dubla legtur a acizilor nesaturai:
HOOC-CH= CH-COOH + NH3
acid fumaric
Obinerea formelor optic active
referat.clopotel.ro

HOOC-CH2-CH-COOH
NH2 acid asparagic

Metodele chimice de sintez conduc de obicei la aminoacizi racemici.Dedublarea formelor

racemice ale aminoacizilor se poate realiza, n principiu, prin urmtoarele metode :
a.) Cristalizarea selectiv a unuia din enantiomeri din soluia saturat a acestuia.
b.) Formarea de sruri diastereoizomere cu baze sau acizi chirali.Se folosesc de obicei
aminoacizi N-acilai, pentru a le intensifica caracterul acid i a forma sruri cu baze optic active.
Se pot utiliza i esteri ai aminoacizilor, care au caracter bazic mai pronunat dect aminoacizii i
formeaz sruri cu acizi optic activi.Aminoacizii bazici reacioneaz ca atare cu acizii optic activi
(acid D-camforic).Srurile diastereoizomere se separ prin diferena de solubilitate.Dup separare,
prin hidroliz se obin aminoacizi liberi.
c.)Tratarea racemicului cu preparate enzimatice.Aceast metod este nalt selectiv datorit
marii specificiti a enzimelor i posed avantajul c permite obinerea unor izomeri cu coufiguraie
cunoscut.Procedeele constau n:
- introducerea amestecului racemic, prin ingerare (furaj) sau prin injectare, ntr-un animal,
ale crui enzime metabolizeaz numai forma L.Din urin se separ apoi enantiomerul D rmas
netransformat;
- oxidarea sau decarboxilarea cu ajutorul unor microorganisme specifice sau esuturi, ale
unuia din izomeri, cellalt rmnnd neatacat.
- hidroliza asimetric sub aciunea unor enzime (amidaze, esteraze, acilaze) ale derivailor
aminoacizilor racemici substituii n mod adecvat, prin care se elibereaz numai antipodul L, care se
separ de enantiomerul D rmas nehidrolizat.
III. Metode de biosintez a aminoacizilor /2,5,7,8,9,10,12/
Aceste metode se bazeaz pe capacitatea de biosintez a microorganismelor i au avantajul
c se obin aminoacizi

din seria L, avnd configuraia aminoacizilor

naturali din

proteine.Mecanisme foarte precise de reglare menin concentraia aminoacizilor n celule n limite

foarte strnse.Prin mutagenez, celulele microbiene sufer modificri genetice, cu implicaii asupra
mecanismelor de reglare.Ele pot suferi o mutaie sau deleie a genelor operatoare sau reglatoare ale
unora din enzime sau prin mutaie genetic se pot codifica enzime modificate astfel nct s nu mai
fie sensibile la metabolitul care le regleaz n mod normal.Acest fel de microorganisme cu
mecanismele de reglare modificate, cu permeabilitatea membranei celulare schimbat sau cu
deficiene metabolice, pot fi ntrebuinate industrial pentru producerea unor metabolii importani
pentru om, printre care i aminoacizii.
Pentru

obinerea

aminoacizilor

se

folosesc

mutani

de

Brevibacterium

sau

Corymbacterium, dependeni de ali aminoacizi ce fac parte din schema de biosintez a

referat.clopotel.ro

aminoacidului n cauz (de exemplu pentru producerea lisinei se folosesc mutani dependeni de
homoserin) sau mutani rezisteni la analogi ai respectivului aminoacid.
Drept materii prime se folosesc hidrai de carbon, alcooli,hidrocarburi alifatice cu cel puin
10 atomi de carbon, compui cu azot (proteine, peptide, uree, sruri de amoniu), sruri minerale (ce
conin K, Mg, Ca, P, Fe, Mn, Zn etc) i factori de cretere.Aceste substane sunt folosite de
microorganisme pentru a se dezvolta i pentru a efectua biosinteza propriu-zis a aminoacidului.
n timpul biosintezei se introduce aer sub presiune, steril, care furnizeaz

oxigen

diferitelor procese metabolice.n funcie de aminoacid, concentraia acestuia n mediile fermentate

este cuprins ntre cteva grame i pn la 90-100 g/l.Aminoacizii astfel sintetizai sunt izolai i
purificai cu ajutorul schimbtorilor de ioni, cristalizrii fracionate, adsorbiei pe diferii adsorbani.
IV.Metode mixte
Aceste metode se folosesc de avatajele metodelor chimice i biochimice,deopotriv.Astfel,
se produc n cantiti mari intermediari prin sintez chimic i apoi sunt supui transformrilor
stereospecifice, cu obinerea direct a L-aminoacidului.
Utilizrile aminoacizilor
Aminoacizii se folosesc n medicin pentru prepararea unor medicamente i pentru
alimentaia artificial n anumite mbolnviri ale sistemului digestiv, n caz de intervenii
chirurgicale etc.Se folosesc n alimentaie, pentru suplimentarea unor produse deficitare n
aminoacizi eseniali, pentru accentuarea aromelor, pentru prepararea supelor concentrate,a
alimentelor pentru copii, alimentaia dietetic pentru cosmonaui,ca antioxidani la prepararea
conservelor i buturilor etc /5,10/.
Cantiti mari de aminoacizi se folosesc n zootehnie, pentru obinerea concentratelor
furajere i pentru a mri digestibilitatea furajelor bogate n hidrai de carbon i srace n proteine
complete.Se folosesc, de asemenea, pentru prepararea unor medii bacteriologice necesare depistrii
unor boli /5,10/.
Din punct de vedere fiziologic aminoacizii au un rol deosebit. Astfel, acidul glutamic are
un rol major n dezintoxicarea organismului, glutamina obinut prin aminarea lui fiind
recomandat mpotriva oboselii, depresiei i impotenei.Glicina intervine n sinteza hemoglobinei;
ca precursor al glutationului, glicina se combin cu acidul colic i formeaz glucocolai (sruri
biliare) cu rol deosebit n digestie.Serina particip la sinteza cefalinei i stingomielinei.Arginina
trece n ornitin care permite sinteza spermidinei i sperminei, prolamine considerate principali
factori decretere.Tirosina este precursorul a doi hormoni tiroidieni i anume: triiodotironina i
tiroxina.De aceea, tirosina este deosebit de important n eliminarea dereglajelor tiroidiene.De
remarcat c tirosina este precursor al adrenalinei i noradrenalinei, substane cu rolimportant n
referat.clopotel.ro

pstrarea echilibrului psihic.Triptofanul conduce la formarea serotoninei care este un

vasoconstrictor puternic, un bun stimulator al contraciei muchilor netezi, un excelent
neurotransmitor al sistemului nervos central.Am menionat o parte din aminoacizi, n special cei a
cror activitate fiziologic este remarcabil i care nu se gsesc ntotdeauna ct ar trebui n
alimentaia zilnic /1,3,7,12/.

PEPTIDE
Peptidele sunt combinaii de tip amidic rezultate prin condensarea a dou sau mai multor
molecule de aminoacizi.
R-CH-COOH + H2N-CH-COOH
NH2

-H2O

H2N-CH-CONH-CH-COOH
R

Peptidele pot rezulta din dou, trei sau "n" molecule de aminoacizi.Pentru sistematizarea
acestor compui, convenional ei se clasific n /3/:
-

peptide (oligopeptide) - compui formai dintr-un numr relativ mic de -aminoacizi;

polipeptide - compui formai dintr-un numr mai mare de -aminoacizi, dar cu masa

molecular mai mic de 10000;

-

proteine (poliprotide superioare, holoproteide) - compui cu masa molecular mai mare

de 10000;

heteroproteide - compui care pe lng un lan proteic,mai conin i o grupare

neproteic numit grupare prostetic.

Deci, fiecare molecul de peptid, polipeptid sau protein va conine: "n" resturi de aminoacizi; (n-1) legturi peptidice (de tip amid substituit); un N-acid (aminoacidul N terminal),
rest de -aminoacid de la captul lanului, care posed grupa amino liber i un C-acid
(aminoacidul C-terminal), rest de -aminoacid, de la cellalt capt al lanului, care posed grupa
carboxil liber /3/.
Denumirile peptidelor se construiesc socotindu-le derivai acilai ai aminoacidului Cterminal.Se citesc succesiv radicalii aminoacizilor ncepnd cu captul N-terminal pn la restul Cterminal /1,3,8/.De exemplu:
referat.clopotel.ro

H2N-CH-CO-NH-CH2-CO-NH-CH-CO-NH-CH-COOH
CH(CH3)2

CH2-OH

CH3

valil-glicil-seril-alanina sau Val-Gli-Ser-Ala

Datorit posibilitii de legare a acelorai aminoacizi n secvene diferite, peptidele pot
prezenta fenomenul de izomerie de structur, de poziie.Doi aminoacizi diferii pot da natere la
dou dipeptide izomere dup cum unul sau altul ocup poziia N- sau C-terminal.
n organismele vii se ntlnesc numeroase peptide (oligopeptide sau peptide mai mari) cu
funcii particulare.Unele din aceste peptide au legturi peptidice atipice, cuprind resturi de
aminoacizi modificai, structuri ciclice, altele cuprind D-aminoacizi /1,3,4,8,9/.
Peptidele se deosebesc de proteine prin aceea c dializeaz prin membrane de celofan.Spre
deosebire de peptide, proteinele sunt precipitate din soluie cu acid tricloracetic /4/.
PROPRIETI
Cele mai multe peptide sunt cristaline, incolore, solubile n ap i insolubile n alcool
absolut, solubilitatea lor fiind condiionat de mrimea moleculelor.La fel ca aminoacizii, au
caracter amfoter, formnd sruri solubile cu acizii i cu bazele.
Peptidele arat unele proprieti ale proteinelor.Cele compuse din mai mult de 3-4
aminoacizi dau reacia biuretului.Unele dintre ele se precipit din soluie, prin adugare de
electrolii, ise redizolv dup ndeprtarea lor.
Prin hidroliz elibereaz aminoacizii componeni.Peptidele n a cror componen intr
aminoacizii optic activi naturali, pot fi hidrolizate de enzime proteolitice (peptidaze).
Unele peptide apar ca produi intermediari la hidroliza proteinelor cu acizi sau cu enzime
i servesc la stabilirea structurii proteinelor din care provin /3,4/.
STRUCTUR
Comportarea general a peptidelor poate fi explicat pe baza structurii lor, problemele de
structur fiind complexe, un exemplu de corelaie ntre efecte electronice i sterice, ntre aspecte
calitative i cantitative.Elementul central l constituie gruparea peptidic.
Examinarea geometriei i dimensiunilor legturii peptidice pe structuri cristaline ale unor
oligopeptide, confirm cunotinele generale asupra lagturii amidice.Distana C-N este cu 10% mai
scurt dect n amine iar dubla legtur C= O este cu 0,02A mai lung dect cea cunoscut pentru
aldehide i cetone.Aceste efecte sunt puse pe seama conjugrii p- din gruparea amidic,
reprezentat ca o structur de rezonan ntre structurile limit I i II /3,4,8/.

R'

O-

R'

R-CH-C-N-CH-COOH R-CH-C= N+-CH-COOH

referat.clopotel.ro

NH2

NH2

H '
II

Din lungimile de legtur i din spectre RMN s-a calculat c structura hibrid conine
aproximativ 60% I i 40% II, electronii fiind delocalizai pe legturile C-O i C-N.Datorit
acestei conjugri grupa C= O din amide i peptide nu d reaciile caracteristice cetonelor, iar
electronii neparticipani ai azotului nu sunt disponibili pentru legarea protonului i ele sunt baze
foarte slabe.De asemenea, conjugarea face ca legtura carbon-azot din gruparea peptidic s aib
caracter parial de dubl legtur.Structura steric a gruprii peptidice este condiionat de
distribuia electronic din aceast grupare, care are ca efect o anumit orientare n spaiu a
substituenilor legai de atomii implicai n legtura peptidic i anume, acetia sunt orientai n
acelai plan.Rotirea n jurul legturii carbon-azot este frnat, fapt care creeaz condiia necesar
existenei unor aranjamente geometrice temporare, a izomerilor conformaionali de tip S-trans
(transoid) i S-cis (cisoid); dintre acetia, izomerul S-trans fiind cel mai stabil /4/.
Studiul peptidelor cu ajutorul difraciei razelor X, a evideniat faptul c acestea adopt
preferenial structura corespunztoare formei S-trans, n timp ce structura corespunztoare formei Scis se regsete n sisteme ciclice de tipul 1,4-dicetopiperazinelor substituite.
Avnd lungimile legturilor i unghiurile relativ rigide, legtura peptidic n ansamblu este
i ea rigid, dei o uoar deformare este totui posibil.Fiecare unitate peptidic este relativ
voluminoas i datorit rigiditii legturii peptidice, flexibilitatea de ansamblu a lanului
polipeptidic este apreciabil restrns /3,4,9/.
SINTEZE DE PEPTIDE
O trstur caracteristic a stadiului actual de cercetare a peptidelor o reprezint
interferena i condiionarea strns dintre metodele de studiu i sinteza de peptide sau de analogi
structurali.
Construirea unei catene polipeptidice formate dintr-o succesiune de aminoacizi diferii are
loc n etape.Deoarece aminoacizii au dou grupe funcionale reactive care pot reaciona ntre ele
intrnd n competiie cu grupri echivalente dintr-un nou aminoacid cu care se face condensarea, n
sintezele de peptide se pornete ntodeauna de la un aminoacid cu una din gruprile funcionale
blocate.Alegerea agenilor de blocare se face n aa fel ca ndeprtarea lor, la sfritul sintezei s se
fac n condiii care nu afecteaz legtura peptidic creat /1,3,4,8,9,11/.
Metode de blocare i activare a gruprilor amino i carboxil
Pentru blocarea gruprii aminice se utilizeaz mai ales cloroformiai i anhidride.
referat.clopotel.ro

1.)Protejarea gruprii aminice prin carbobenzoxilare const n acilarea aminoacidului cu

cloroformiat de benzil (Cbz); produsul obinut se transform ntr-un derivat funcional reactiv care
reacioneaz

cu

gruparea

aminic

(neblocat)

aminoacidului

cu

care

se

face

condensarea.Eliminarea gruprii protectoare se face prin hidrogenare catalitic n prezen de

paladiu /1,9/.
C6H5-CH2-O-COCl + H2N-CHR-COOH
Cbz-NH-CHR-COCl + H2N-CHR'-COOCH3
H2/Pd

-HCl

Cbz-NH-CHR-COOH

PCl5

Cbz-NH-CHR-CO-NH-CHR'-COOCH3

C6H5-CH3 + CO2 + H2N-CHR-CO-NH-CHR'-COOH

2.) Protejarea gruprii aminice prin ftalilare se bazeaz pe observaia c gruparea ftalil se

elimin foarte uor prin tratare cu hidrat de hidrazin /1,8,9/.

CO
C6H4

CO
O + H2N-CHR-COOH

C6H4

CO

PCl5

CO

CO
C6H4

N-CHR-COOH

CO
N-CHR-COCl

H2N-CHR'-COOH

CO

C6H4

N-CHR-CO-NH-CHR'-COOH
CO

Ca i metoda carbobenzoxilrii, metoda aceasta nu provoac racemizarea aminoacizilor.

3.) Protejarea gruprii aminice prin butoxicarbonilare se bazeaz pe observaia c
eliminarea gruprii terbutoxicarbonil are loc deosebit de uor, la tratarea cu acid trifluor acetic n
acid acetic sau n clorur de metilen, marele avantaj constnd n faptul c, n afar de peptid
rezult numai compui gazoi /1,8,9/.
(CH3)3C-OCON3 + H2N-CHR-COOH

(CH3)3C-OCONH-CHR-COOH

(Boc)
PCl5

(CH3)3C-OCONH-CHR-COCl + H2N-CHR'-COOH
(CH3)3C-OCONH-CHR-CONH-CHR'-COOH
(CH3)3C= CH2 + CO2 + H2N-CHR-CO-NH-CHR'-COOH

4.) Blocarea gruprilor carboxil se realizeaz prin esterificare cu alcool benzilic, terbutanol .a./1,3,8,9/.
5.) Activarea gruprii COOH se realizeaz prin transformarea ei n cloruri acide, esteri i
prin utilizarea unor reactivi ca diciclohexilcarbodiimida (DDC) sau carbonildiimidazolul.
Clorurile acide ale aminoacizilor care conin i alte grupri funcionale n molecul sunt
greu de obinut.Utilizarea esterilor obinuii este limitat de reactivitatea redus a acestora; se

referat.clopotel.ro

folosete mult esterul p-nitrofenilic, ("ester activat") obinut prin tratarea aminoacidului (protejat)
cu p-nitrofenol, n prezena DDC.
N,N'-carbonildiimidazolul reacioneaz cu gruparea carboxil din aminoacizi sau peptide
protejate, dnd N-acil-imidazol care n reacie cu o amin sau un aminoacid conduce la o
amid,respectiv o peptid /1,3,8,9/.
6.) Sinteza peptidelor n faz solid (metoda Merrifield)
Aceast metod utilizeaz ca agent de blocare al gruprii carboxil, polistiren
clorometilat.Polimerul clorometilat este tratat cu o soluie a srii de sodiu a aminoacidului care se
fixeaz, sub form de ester benzilic, pe polimerul solid:
Avantajul metodei const n faptul c peptida intermediar ataat de polimer este
insolubil i poate fi uor izolat prin simpl filtrare i splare.Se evit izolarea i purificarea, dup
adugarea fiecrui aminoacid.
Desprinderea polipeptidei de pe polimer se poate face prin tratare cu HF anhidru care nu
scindeaz legturile peptidice.Prin aceast metod s-au sintetizat, cu rezultate bune, insulina i unii
hormoni hipofizari /1,3,4,8,9/.
Reprezentani
Carnozina ( -alanilhistidina) i anserina ( -alanil-N-metilhistidina) sunt dipeptide
prezente n muchi, care intervin n schimburile energetice din organism.
L-aspartil- -fenil-L-alanil metil eterul (aspartam) este o dipeptid de 152 de ori mai
dulce dect zaharoza;dac radicalul fenil este nlocuit cu un radical ciclohexil, compusul rezultat
este de 225 ori mai dulce dect zaharoza.Acest compus este folosit ca edulcorant artificial, cu slab
aport caloric, de ctre diabetici i pentru controlul greutii corporale ncepnd din anul 1983.
Glutationul ( -glutamil-cisteinil-glicina) - prima tripeptid natural cunoscut i izolat
din drojdia de bere, prezent n toate celulele, joac un rol important n procesele de oxido-reducere,
datorit prezenei n molecul a gruprii -SH, care are caracter reductor conducnd la disulfura
corespunztoare.Glutationul funcioneaz ca i coenzim a unor enzime.
Oxitocina i vasopresina sunt nonapeptide cu structur ciclic, datorit formrii unei puni
disulfurice ntre gruprile -SH, care provin de la dou resturi de cistein, prezente n lanul
polipeptidic.n structura acestor peptide s-a constatat prezena a trei grupri amidice, formate la
gruprile carboxil libere, care provin de la aminoacizii monoaminodicarboxilici prezeni n
molecul.Diferenele structurale ntre aceste peptide sunt mici, dar aciunea fiziologic este
diferit.Aceste peptide sunt hormoni hipofizari.Oxitocina acioneaz asupra musculaturii netede, n

referat.clopotel.ro

special a uterului, provocnd contracii.Vasopresina are o aciune similar dar mult mai redus,
provocnd creterea tensiunii arteriale prin inhibarea diurezei.
Insulina este de asemenea un hormon de natur proteic, secretat de pancreas.Masa
molecular a insulinei este de aproximativ 6000, dar moleculele sunt asociate formnd agregate cu
mase moleculare de 12000, 48000 care n anumite condiii disociaz.
Insulina regleaz metabolismul glucidic i indirect influeneaz i asupra metabolismului
altor compui organici.Hipofuncia pancreasului conduce la diabet zaharat, boal care se
caracterizeaz prin hiperglicemie i glicozurie, aprnd totodat i modificri n metabolismul
proteinelor i lipidelor.Hiposecreia de insulin poate fi compensat prin administrare periodic de
insulin, care influeneaz direct asupra sintezei glicogenului hepatic i asupra oxidrii glucozei n
muchi /1,3,4,8,9,11/.

referat.clopotel.ro

PROTEINE
Proteinele sunt compui organici naturali, considerai ca fiind suportul material al tuturor
fenomenelor vieii.Aceti compui sunt principalii constitueni cu structur macromolecular ai
protoplasmei tuturor celulelor vegetale i animale.Denumirea lor deriv de la cuvntul "protos" care
nseamn de prim rang, cel dinti,fundamental /2,3/.
Proteinele sunt substane macromoleculare de natur polipeptidic, la construcia crora
particip 20 de aminoacizi fundamentali.Proteinele sunt macromolecule informaionale, cu secvene
specifice de aminoacizi, sunt expresia epigenetic a genomului celular.
Chimia proteinelor este deosebit de complex, ea presupunnd, mai nti, nelegerea
principiilor generale de construcie a moleculelor proteice, a modului n care dintr-un numr limitat
de uniti structurale se pot forma infinit de multe proteine i ce factori intervin n realizarea
arhitecturii lor.n al doilea rnd, studiul proteinelor necesit abordarea fiecrui tip de protein n
parte, stabilirea pentru fiecare specie molecular a constituiei chimice, a arhitecturii ei spaiale i a
funciei sau a funciilor pe care le exercit /1,3,8,9/.
Structur
Cu ct numrul de -aminoacizi, care formeaz molecula unui compus de natur proteic
este mai mare, cu att problemele pe care le ridic structura acestor compui sunt mai
complexe.Cercetrile efectuate n acest domeniu, au condus la rezultate experimentale pe baza
crora se disting patru grade structurale sau niveluri de organizare, deosebindu-se prin
complexitatea lor.Acestea au fost numite structuri primare, secundare, teriare i cuaternare /2,8,9/.
Structura primar a unei proteine este determinat prin felul aminoacizilor, numrul lor
i succesiunea lor specific, respectiv secvena lor.Structura primar red totalitatea legturilor
covalente din molecul, fiind denumit i structur covalent.Distanele interatomice i unghiurile
de valen calculate sunt cele precizate pa peptide /1,2,3,8,9/.

referat.clopotel.ro

Cunoaterea structurii primare are o importan deosebit pentru nelegerea rolurilor

proteinelor. Prin studii de secvenialitate s-a stabilit c o protein dat are o structur unic, nu este
un amestec de specii moleculare diferite, cum este cazul polimerilor de sintez.S-a constatat c nu
exist regularitate n nlnuirea aminoacizilor, nu exist anumite secvene preferate fa de altele,
astfel c dac la o protein cu 100 de resturi de aminoacizi se cunoate natura i secvena a 99 dintre
ei, nu exist nici o regul care s permit prevederea celui de al 100-lea.
Structurile primare ale proteinelor constituie baza nelegerii la nivel molecular a activitii
lor biologice.Prin compararea structurilor primare ale proteinelor care ndeplinesc funcii omoloage
la organisme diferite se poate stabili gradul de varietate structural compatibil cu o anumit
funcie.Secvena aminoacizilor ntr-o protein este veriga ntre mesajul geneti nscris n ADN i
expresia acestui mesaj.S-au descoperit specii de proteine anormale (mutante) ca expresie a unor
modificri la nivelul genomului.Aceste proteine anormale se pot manifesta sub forma unor bolibolile moleculare.
Structura secundar este determinat de aranjarea n spaiu a catenei polipeptidice i de
legturile care se stabilesc ntre catene.Legturile de hidrogen, ntre gruprile NH- i

C=O, joac

un rol esenial la acest nivel de organizare /2/.

Prin studii de difracie cu raze X pe cristale pure de polipeptide sintetice i naturale,
Pauling i Corey au indicat modalitile de realizare a structurii secundare: atomii implicai n
legtura peptidic sunt coplanari; atomii de carbon din lanul peptidic sunt poziionai trans unul
fa de altul, fcnd s scad forele de respingere;distanele interatomice i unghiurile de valen au
aceleai valori indiferent de dimensiunile catenei;numrul legturilor de hidrogen care se stabilesc
ntre oxigenul carbonilic i azotul amidic este maxim posibil, hidrogenul fiind plasat pe linia
imaginar care ar uni oxigenul de azot.Legtura de hidrogen poate fi intramolecular, rezultnd o
structur -elicoidal, format printr-o rsucire n spiral a catenei polipeptidice, i
intermolecular, obinndu-se o structur pliat, prin simpla pliere a catenei.S-a dovedit c aceste
structuri sunt concordante cu proprietile fizico-chimice i biologice /2,3/.
Structura de -helix
Lanul polipeptidic se rsucete la nivelul legturilor simple, pentru ca gruprile C=O i
NH s devin adiacente stereochimic pentru a forma puni de hidrogen.Se obine astfel o structur
repetitiv elicoidal n care toate unitile se afl n raporturi spaiale identice cu unitile vecine.O
grupare

NH formeaz legtura de hidrogen cu gruparea

aminoacid din secvena liniar.n acest fel toate gruprile

hidrogen.

referat.clopotel.ro

C=O a celui de-al patrulea rest de

C=O i NH sunt unite prin puni de

Stereochimia

gruprii

peptidice,

unghiurile

de

legtur,

distanele

interatomice,colinearitatea legturilor de hidrogen, apartenena tuturor aminoacizilor la aceeai serie

optic ( seria L) determin o anumit geometrie a elicei :
-

cu fiecare rest de aminoacid se avanseaz pe vertical cu 1,47A;

-

pasul elicei, distana ntre dou puncte echivalente pe vertical, este de 5,21 A i

cuprinde 3,6 resturi de aminoacizi;

-

diametrul elicei, diametrul suprafeei cilindrtce n care se afl atomii C , este de

10,1A;
-

sensul rsucirii lanului polipeptidic este de la stvga la dreapta;

radicalii R ai tuturor aminoacizilor sunt orientai spre exteriorul elicei,

configuraia atomilor C fiind aceeai pentru toi aminoacizii;

-

toate gruprile NH i C=O formeaz puni de hidrogen.

Un lan polipeptidic sub form de -elice se prezint ca un bastona cu diametrul de

10.1A, pentru 300 de resturi de aminoacid, lungimea fiind 450A /1,2,3,9,11/.
Structura
O alt structur secundar a lanurilor polopeptidice n care se realizeaz potenialul maxim
de legare prin puni de hidrogen a gruprilor C=O i NH este structura sau structura pliat.n
acest caz punile de hidrogen sunt intercatenare, lanurile polipeptidice aezndu-se n straturi.Cea
mai stabil structur se obine dac lanurile evolueaz unul de la captul N-terminal i cellalt n
sens invers (structura
coplanaritii gruprii

cu lanuri antiparalele).Datorit rigiditii legturii peptidice i

-CH-NH-CO-CH-

se realizeaz structuri asemntoare unei foi

plisate.Radicalii R sunt orientai, alternativ,de-o parte i de alta.Structura este ntlnit n

proporie de 100% n fibroin, proteina din mtase, i n proporii variabile n alte proteine
fibrilare.Structura se ntlnete ns i la proteine globulare, fie ntre segmente aparinnd la
lanuri diferite, fie ntr-un acelai lan polipeptidic.
-keratina este compus din straturi formate din catene polipeptidice orientate paralel, n
acelai sens i unite prin legturi de hidrogen.Fiecare caten este legat astfel de cele dou catene
vecine, prin legturi de hidrogen ntre gruprile CO i NH ale lor /1,2,3,8,9/.
Structura teriar

referat.clopotel.ro

Acest nivel de organizare nglobeaz structura secundar i definete raporturile dintre

segmentele de -elice i structur , modul de mpachetare a lanului polipeptidic.Factorii
determinani ai structurii teriare ai unei proteine sunt interaciunile necovalente ntre radicalii R de
la C , fie c acetia se afl n regiuni cu structur sau , fie c sunt cuprini n segmente
neorganizate.La acest nivel de organizare teriar, molecula proteic dobndete forma sa specific /
2/.
ntre diverii radicali ai aminoacizilor se pot stabili urmtoarele tipuri de legturi
necovalente:
1.puni de hidrogen ntre radicalii cu grupri alcoolice (din resturi seril, treonil), fenolice
(din resturi tirosil), amidice (din resturi glutaminil i asparaginil).
2.legturi ionice, saline, ntre radicalii cu sarcini electrice sau interaciuni polare ntre
radicalii polari, fr sarcini.
3.interaciuni hidrofobe ntre resturile aminoacizilor nepolari ca: valin, leucin,
izoleucin, fenilalanin, alanin.
Resturile cisteinil din multe proteine formeaz legturi disulfurice care leag covalent
regiuni mai ndeprtate ale lanurilor polipeptidice /3/.
Un lan polipeptidic adopt, n msura n care i permite structura sa primar, configuraii
de -elice sau de structur i prin pliere, mpachetarea lanului caut s satisfac i afinitile
radicalilor

R.Rezultanta

proteice.Factorul

ultim

tuturor
care

acestor

determin

interaciuni
conformaia

determin
unei

conformaia

proteine

este

moleculei

structura

sa

primar.Informaia genetic tradus n secvene de aminoacizi, prin jocul forelor fizico-chimice, se

transform spontan n edificii tridimensionale specifice /1,2,3,9/.
Prima protein a crei structur tridimensional a fost stabilit n cele mai mici detalii,
precizndu-se poziia n spaiu a tuturor atomilor componeni este mioglobina.
Numrul proteinelor cu structur teriar cunoscut este n continu cretere i analiza
acestor structuri dovedete pstrarea trsturilor calitative dar cu o mare plasticitate n
detalii.Structura teriar, spre deosebire de cea secundar, este determinat de elemente nerepetitive;
totui i la acest nivel au fost recunoscute cteva scheme de organizare spaial.Aceasta a permis
clasificarea proteinelorglobulare n cteva clase /2/:
a.) proteine all- -lanul polipeptidic are structur secundar de -elice n proporie de
aproape 100% i elicele sunt mpachetate ntr-o form compact, globular;
b.) proteine all-

-lanul polipeptidic prin ndoire formeaz structuri

antiparalele,aezate unele lng altele;

referat.clopotel.ro

cu lanuri

c.) proteine + -segmentele cu organizare secundar i sunt segregate n structura

teriar;
d.) proteine / -segmentele i alterneaz n structura teriar;
e.) proteine fr organizare secundar sau , plierea lanului fiind hotrt numai de
interaciunile ntre R;n general sunt proteine mici ce cuprind un numr relativ mare de
puni disulfurice
Organizarea pe domenii a proteinelor /2,3/
Dup recunoaterea unor scheme structurale la nivelul organizrii teriare a moleculelor
proteice,un concept nou, care permite o mai bun nelegere a raporturilor dintre structura i
funciile unei proteine este conceptul organizrii proteinelor mai complexe, pe domenii structurale.
Prin domenii structurale ale unei proteine se nelege regiunile compacte cu organizare
teriar specific, relativ rigide, separate ntre ele de segmente mai puin organizate, care permit
micarea unui domeniu n raport cu altul (dinamica domeniilor).Fiecare domeniu structural al unei
proteine este rspunztor de o anumit funcie.Gradul de flexibilitate al domeniilor variaz de la
micri mai ample la altele restrnse, depinznd de natura segmentelor interdomenii.
Un aspect de cea mai mare importan care a rezultat din dezvolterea conceptului de
organizare pe domenii a proteinelor este acela c domenii cu structuri i proprieti asociative
similare sunt prezente n proteine diferite.Complexitatea structurilor i funciilor proteinelor poate
rezulta prin asocierea de domenii structurale diferite (construcie modular).
Construcia proteinelor complexe din module funcionale independente confer proteinelor
potenialiti noi.Organizarea pe domenii este ntlnit la unele enzime solubile, fiecare domeniu
cataliznd o etap dintr-o secven metabolic.Eficiena crete foarte mult deoarece este mpiedicat
pierderea intermediarilor n reacii colaterale, procesul desfurndu-se n flux continuu /2/.
Structura cuaternar a proteinelor
Multe proteine sunt alctuite din mai multe lanuri polipeptidice, de regul un numr mic i
pereche (proteine oligomere).Lanurile individuale sunt denumite protomeri.La aceste proteine, pe
lng structurile primar, secundar i teriar ale fiecrui protomer, apare un nivel superior de
organizare-structura cuaternar.Aceasta definete natura, numrul i modul de asociere a
protomerilor /1,2,3,8,9/.
Funcia specific a unei proteine oligomere se manifest numai la nivelul structurii
cuaternare, protomerii separai fiind inactivi.
Asocierea protomerilor, structura cuaternar, se relizeaz numai prin fore slabe,
necovalente i devine stabil, permanent, numai dac suprafeele de contact sunt complementare i

referat.clopotel.ro

un numr ct mai mare de atomi se apropie pn la nivelul razelor por van der
Waals.Complementaritatea suprafeelor de contact asigur un grad foarte nalt de exactitate i de
specificitate a structurilor cuaternare.Protomerii unor proteine omoloage de la specii diferite nu se
asociaz.
Interaciunile prin suprafee complementare prezint fenomenul de cooperare, adic
primele interaciuni favorizeaz formarea celorlalte.La nceput moleculele se juxtapun prin cteva
puncte, dup care celelalte grupri i gsesc mai uor partenerii.
Capacitatea de interaciune a moleculelor prin suprafee complementare explic nu numai
formarea proteinelor oligomere, a unor structuri supramoleculare, dar i modul n care proteinele i
ndeplinesc funciile caracteristice.
Structurile cuaternare permit funcionarea unor mecanisme fine de reglare a activitii
proteinelor.O perturbaie care are loc la nivelul unui protomer poate fi transmis n restul moleculei,
fiind resimit la nivelul contactului dintre protomeri;structura cuaternar este alterat i totodat i
funcia proteinei.Acest mecanism de reglare este denumit reglare alosteric.
Un exemplu de structur cuaternar este aceea a hemoglobinei, studiat prin analiz
cristaligrafic cu razeX.n acest caz, lanurile polipeptidice, n numr de patru, sunt legate ntre ele
prin legturi de hidrogen, fore van der Waals,legturi polare, formnd o legtur tetramer, care
sub aciunea unor factori din mediu, se desface n protomeri, iar sub aciunea condiiilor iniiale, se
srtuctureaz din nou cuaternar /2,9,11/.
METODE DE DETERMINARE A STRUCTURII
Pentru a fi studiate, proteinele trebuie izolate din diverse organe i apoi purificate.De
obicei, proteinele se separ din materiale biologice cu o soluie salin sau cu solveni organici
diluai cu ap.n principiu, proteinele se separ de substanele cu care se gsesc n amestec n
soluie, fie prin dializ prin membrane semipermeabile, fie prin electroforez; apoi se cristalizeaz
prin precipitare cu etanol sau sruri neutre /9/.
Analiza elementar calitativ i cantitativ a proteinelor a pus n eviden prezena
elementelor:C (50-52%); H(6,8-7,7%); O(20-25%); N(15-18%) i S(0,5-2%).n unele cazuri s-au
identificat i elementele: P,Fe,Cu,I,Cl,Br /8,9/.
Pentru stabilirea structurii peptidelor, polipeptidelor i proteinelor se utilizeaz metodele
fizico-chimice, problemele de structur fiind deosebit de complexe.
Pentru determinarea structurii primare a substanelor proteice este necesar cunoaterea
felului i numrului -aminoacizilor din care este format compusul proteic analizat (adic
identificarea i dozarea -aminoacizilor) precum i stabilirea secvenei -aminoacizilor, adic
stabilirea ordinei n care acetia se succed n molecul /3/.
referat.clopotel.ro

Identificarea i dozarea aminoacizilor

Extractele proteice sunt supuse unor operaii de separare i purificare laborioase,
obinndu-se n final polipeptide sau proteine n stare pur.Acestea sunt hidrolizate, pe cale chimic
sau enzimatic, conducnd la hidrolizate proteice.
Din hidrolizatele proteice, aminoacizii se identific folosind mai ales metodele
cromatografice (vezi aminoacizi).Apoi se determin cantitativ aminoacizii, mai ales prin metode
spectrofotometrice.Se cunosc aparate bazate pe separarea cromatografic a aminoacizilor i dozarea
spectrofotometric a acestora, cu funcionare automat /3,9/.

referat.clopotel.ro