Proiect HG RT Metode Fabricarea Vinului PDF

Aprobat
prin Hotrrea Guvernului

nr. ____ din __________2009
REGLAMENTARE TEHNIC
PRIVIND METODELE DE ANALIZ
N DOMENIUL FABRICRII VINURILOR
I Clauza de emitere
Prezenta Reglamentare tehnic se refer la modalitatea tehnic privind aplicarea
metodelor de analiz n domeniul fabricrii vinurilor i creaz cadrul normativ de implimentare
a Regulamentului (CE) nr. 606/2009 al Comisiei din 10 iulie 2009 de stabilire a anumitor
norme de aplicare a Regulamentului (CE) nr, 479/2008 al Consiliului n privina categoriilor de
produse vinicole, a practicilor oenologice i a restriciilor care se aplic acestora, Articolul 15
Metode comunitare de analiz aplicabile , publicat n jurnalul Oficial al Uniunii Europene (JO)
L 193 din 24.07.2009.
Prezenta reglamentare tehnic stabilete metodele de analiz pentru determinarea
compoziiei fizico-chimice a produselor vinicole i a parametrilor de calitate a unor materiale
auxiliare, utilizate n vinificaie.
Metodele de analiz se aplic n procesul de evaluare a conformitii produselor , stabilite
n corespundere cu reglamentarea tehnic cu privire la Sistemul de organizare a pieii vitivinicole i trasabilitatea produselor.
Scopul prezentei Reglamentri este armonizarea metodelor de analiz, utilizate n
laboratoarele acreditate sau atestate pentru efectuarea ncercrilor n ramura viti-vinicol a
Republicii Moldova, cu cerinele i exigenele Comunitii Europene, Organizaiei Internaionale
a Viei i Vinului, la care ea este parte.
II Partea dispozitiv
1. Metodele pentru analiz n domeniul fabricrii vinurilor cuprinse n anexa la prezenta
Reglamentare tehnic sunt elaborate i recomendate de Organizaia Internaional a Viei i
Vinului, Comunitatea European, de specialiti din CSI i Republica Moldova.
2. Metodele pentru analiz n domeniul fabricrii vinurilor fac posibil:
- stabilirea compoziiei grupelor de produse vinicole i materialelor auxiliare
prevzute n Legea Viei i Vinului nr. 57-XVI din 10 martie 2006,
- verificarea produselor pentru a se constata dac au fost inclcate practicile
oenologice autorizate
3. n metodele de analiz , cuprinse n anexa la prezenta Reglamentare tehnic :
1) Repetabilitatea reprezint valoarea sub care se situez cu o probabilitate
specificat, diferena absolut dintre rezultatele a dou teste unice obinute pe material identic de
testare i n condiii identice ( acelai operator, aceeai aparatur, acelai laborator i un interval
scurt de timp);
2) "Reproductibilitatea" valoarea sub care se situez, cu o probabilitate specificat,
diferena absolut dintre rezultatele a dou teste unice obinute pe material identic dar n condiii
diferite ( operatori diferii, aparate diferite i/sau laboratoare diferite i/sau momente diferite).
2
3) Rezultatul unui test unic este valoarea obinut atunci cnd se aplic integral i
o singur dat metoda standardizat, pe o singur prob.
4) n cazul n care nu se stabilete altfel probabilitatea este de 95 %
5) Ori de cite ori se face referire la ap pentru soluie, diluare sau splare, aceasta
nseamn ap distilat sau ap demineralizat cu o puritate echivalent. Toate substanele chimice
trebuie s aib calitatea unui reaciv analitic.
4. Metodele de analiz
n dependen de scopul aplicrii lor se clasific n:
1) Metode de referin criter - aceste metode asigur o repetabilitate nalt i sunt

recunoscute ca cele mai exacte; se utilizez la stabilirea valorilor acceptabile pentru principalii
parametri de compoziie a vinului (titrul volumului alcoolmetric, aciditatea titrabil, aciditatea
volatil, extractul total i sec , zaharurile reductoare). Se utilizeaz n caz de litigiu, la
efectuarea cercetrilor tiinifice de talie internaional, pentru analiza mostrelor de referin
pentru metodele uzuale sau la etalonarea metodelor automate.
2) Metode uzuale
ntreprinderile vinicole.
- metode destinate pentru efectuarea analizelor uzuale
la
3) Metode analitice automatizate - metode relative i sunt admise pentru utilizare n

cazul cnd exactitatea, repetabilitatea i reproductibilitatea rezultatelor acestor metode sunt
echivalente cu cele obinute prin metodele de referin.
5. La determinarea substanelor, pentru care sunt prevzute metode de referin i
metode uzuale, prioritate au rezultatele obinute prin metodele de referin.
6. n cazuri
automatizate.
de litigiu metodele de referin criter
nu pot fi nlocuite cu metode
7. Prezenta Reglementare tehnic ntr n vigoare la data publicrii n Monitorul Oficial

al Republicii Moldova
3
Anexa
Cuprins
1. Simboluri i
abrevieri
2. Metode de analiz a vinurilor i mustului utilizate n laboratoarele

de oenologie
2.1. Densitatea i greutatea specific la 20oC

2.1.1. MA-MD-AS 2-01 MAS VUL
10
2.2. Concentraia alcoolic la 20 oC

2.2.1. MA-MD-AS 312-01 TAL VUL
21
2.3. Extractul total i sec nereductor

2.3.1. MA-MD-AS2-03 EXTSEC
58
2.4. Zaharuri
2.4.1. MA-MD-AS 311-01 SUCRED
61
2.4.2. MA-MD-AS 2-02 SUCREF
65
2.5. Aciditatea titrabil

2.5.1. MA-MD-AS 313-01 ACITOT
86
2.6. Aciditatea volatil

2.6.1. MA-MD-AS 313-02 ACIVOL
90
2.7. Dioxid de sulf

2.7.1. MA-MD-AS 323-04 DOSU
93
2.8. Zaharoza, glucoza, fructoza

2.8.1. MA-MD-AS 311-03 SUCRES
100
2.9. Glucoza i fructoza

2.9.1. MA-MD-AS 311-02 GLUFRU
104
2.10 Acizi organici

2.10.1 MA-MD-AS 313-04 ACIORG
107
4
2.11. Acidul citric
2.11.1. MA-MD-AS 313-09 ACIENZ
110
2.12. Acidul tartric

2.12.1. MA-MD-AS 313-05 ACITAR
113
2.13. Acidul lactic

2.13.1. MA-MD-AS 313-06 ALACHI
118
2.14. Acidul malic

2.14.1. MA-MD-AS 313-10 AMALTO
121
2.14.2.MA-MD-AS 313-11 ALMENZ
123
2.14.3.MA-MD-AS 313-12 ADMENZ
127
2.15. Acidul sorbic

2.15.1. MA-MD-AS 313-14 ACISOR
129
2.16. Acidul L-ascorbic

2.16.1. MA-MD-AS 313-13 ALASCO
133
2.17. Aciditatea ionic (pH-ul)

2.17.1. MA-MD-S 313-15 pH
138
2.18. Dioxidul de carbon

2.18.1. MA-MD-AS 314-01 DIOCAR
140
2.19. Metanol
2.19.1. MA-MD-AS 312-03 METHAN
146
2.20. Glicerol, butan-2,3-diol

2.20.1. MA-MD-AS 312-04 GLYBUT
149
2.20.2. MA-MD-AS 312-05 GLYENZ
153
2.21. Fierul
2.21.1. MA-MD-AS 322-05 FER
156
2.22. Cuprul
2.22.1. MA-MD-AS 322-06 CUIVRE
158
2.23. Zincul
2.23.1. MA-MD-AS 322-08 ZINC
160
2.24. Cadmiul
2.24.1. MA-MD-AS 322-10 CADMIU
162
2.25. Plumbul
2.25.1. MA-MD-AS 322-11 PLOMB
164
2.26. Arseniul
2.26.1. MA-F-AS 323-01 ASSAA
166
2.27. Mercurul sau Hidrargiul

2.27.1. MA-MD-AS 323-06 MERCUR
168
2.28. Sodiul
2.28.1. MA-MD-AS 322-03 SODIUM
173
2.29. Potasiul
2.29.1. MA-MD-AS 322-02 POTASS
176
2.30. Calciul
2.30.1. MA-MD-AS 322-04 CALCIU
180
2.31. Magneziul
2.31.1. MA-MD-AS 322-07 MAGNES
182
2.32. Acetaldehida
2.32.1. MA-MD-AS 315-01 ETHANA
184
2.33. Alcooli superiori

2.33.1. SM 152:1996
186
2.34. Oximetilfurfural
2.34.1. MA-MD-AS 315-05 HYDMFF
187
2.35. Derivaii cianici

2.35.1. MA-MD-AS 315-05 DERYA
190
2.36. Malvidol-3,5-diglucozid
2.36.1. MA-MD-AS 315-03 DIGMAL
192
2.36.2. MA-MD-AS 315-11 ANCYAN
194
2.37. Dietilenglicol
2.37.1. MA-MD-AS 315-09 DIEGLI
200
2.38. Indicele Folin-Cioclteu

2.38.1. MA-MD-AS 2-04 INDFOL
202
2.39. Caracteristici cromatice

2.39.1. MA-MD-AS 2-07 CARCHR
204
2.40. Oxratoxina-A
2.40.1. MA-MD-AS 315-10 OHRAT
213
2.40.2. Metoda enzimatic cu detectare spectrofotometric, aprobat de

Agenia Agroindustrial Moldova-Vin 15.08.08
217
2.41. Prezena coloranilor sintetici

2.41.1. MA-MD-AS 315-08 COLSYN
222
2.41.3. Metoda HPLC, aprobat de Departamentul Agroindustrial

Moldova-Vin 12.12.2003
225
2.42. Prezena ndulcitorilor sau edulcoranilor sintetici

2.42.1. MA-MD-AS 315-07 EDUSYN
227
2.43. Prezena aromatizatorilor sintetici

2.43.1. Metoda aprobat de Departamentul Agroindustrial
232
2.44. Analiz microbiologie a vinurilor i mustului

2.44.1. MA-MD- AS 4-01 ANMICR
2.45 Izotiocianatul de alil
235
252
7
3. Metode de testare a vinurilor materie prim i vinurilor tratate la
tulburri fizico- cimice aprobate de Agenia Agroindustrial
254
4. Indicii de calitate i metoda speciale pentru analiza mustului concentrat rectificat
262
5. Indicii de calitate i metodele de verificare acidul sorbic
275
6. Indicii de calitate i metodele de verificare acidul metatartric
281
7. Indicii de calitate i metodele de verificare sorbatul de potasiu
284
8
Anexa 1
la Reglementarea tehnic privind
metodele de analiz n domeniul
fabricrii vinurilor
ABREVIERI
MA-MD-AS Metoda de analiz Moldova-Anexa, Secia

SM
Standard Moldovean
GOST
Standard Interstatal
GOST
Standard al Federaiei Ruse
MAS VUL - Masa volumic
TAL VUL Titrul alcoolmetric volumic
EXTSEC Extract total i sec nereductor
SUCRED Zaharuri reductoare
SUCREF - Zaharuri, metoda refractometric
ACITOT Aciditatea total
ACIVOL - Aciditatea volatil
DOSU Dioxidul de sulf
SUCRES - Zaharurile
GLUFRU - Glucoza i fructoza
ACIORG - Acizi organici
ACIENZ - Acidul citric, metoda enzimatic
ACITAR - Acidul tartric
ALACHI - Acidul lactic, metoda chimic
AMALTO - Acidul malic total
ALMENZ - Acidul L-malic, metoda enzimatic
ADMENZ - Acidul D-malic, metoda enzimatic
ACISOR Acidul sorbic
ALASCO - Acidul L-ascorbic
DIOCAR - Dioxidul de carbon
METHAN Metanolul
GLYBUT - Glicerolul, butan-2,3-diol
GLYENZ Glicerolul enzymatice
HYDMFF Oximetilfurfuralul
DERYA - Derivaii cianici
DIGMAL - Malvidol-3.5-diglucozid
DIEGLI Dietilenglicolul
INDFOL - Indicele Folin-Cioclteu
CARCHR - Caracteristici cromatice
OHRAT - Oxratoxina-A
COLSYN - Colorani sintetici
EDUSYN - Edulcorani sintetici
ANMICR - Analiza microbiologic
9
Anexa 2
fabricrii vinurilor
2. METODE
A VINURILOR I
DE
ANALIZ
MUSTULUI UTILIZATE N
DE OENOLOGIE
LABORATOARELE
10
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.1 DENSITATEA I GREUTATEA SPECIFIC LA 20 0 C
2.1.1 MA-MD-AS2-01-MASVOL
1. DEFINIII
Densitatea reprezint masa per unitate de volum de vin sau must la 20 C. Se exprim n
grame pe mililitru i este reprezentat prin simbolul 20 C.
Greutatea specific la 20 C (sau 20 C/20 C densitate relativ ) reprezint raportul
exprimat n numr zecimal dintre densitatea unui anumit volum de vin sau must la 20 C i
densitatea
aceluiai volum de ap la aceeai temperatur . Se exprim prin
simbolul d
20
C
.
20 C
2. PRINCIPIUL METODELOR
Densitatea i greutatea specific la 20 C se determin pe o prob de testare:

- fie prin colorare: metoda de referin ,
- fie prin hidrometrie sau densimetrie, utiliznd o balan hidrostatic: metodele uzuale.
Not
Pentru determinri foarte precise, densitatea trebuie corectat pentru efectul bioxidului de sulf
utiliznd formula:
20 C = 20 C 0,0006 S
unde
densitatea corectat
20 C =
20 C =
densitatea observat
S
= cantitatea total de bioxid de sulf, n grame per litru.
3. TRATAREA PRELIMINAR A PROBEI
Dac vinul sau mustul conin cantiti apreciabile de bioxid de carbon, acesta se elimin n
cea mai mare parte prin agitarea a 250 ml de vin ntr-un balon de 1 litru sau prin filtrarea la
presiune redus prin 2 g de vat plasat ntr-un tub prelungitor.
4. METODA DE REFERIN
4.1. Aparatura
Echipament de laborator normal, n special:
4.1.1. Un picnometru Pyrex ( sau orice picnometru cu caracteristici echivalente ) cu o
capacitate de aproximativ 100 ml, cu un termometru detaabil cu mbinare din sticl lefuit ,
calibrat n zecimi de grad, de la 10 la 30 C (figura 1). Termometrul trebuie s fie standardizat.
Cele dou mbinri lefuite ale aparatului se pregtesc cu atenie deosebit .
4.1.2. Un recipient tar cu acelai volum exterior (sub 1 ml, cu aproximaie) i cu masa egal
cu a picnometrului umplut cu un lichid cu densitatea1,01 (soluie de clorur de sodiu 2,0 %/m/v).
11
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Un recipient izolat termic, bine ajustat pe corpul picnometrului.

4.1.3. O balan cu dou talere cu o plaj de cel puin 300 g i cu o sensibilitate de 0,1 mg
sau o balan cu un taler cu o plaj de cel puin 200 g i cu o sensibilitate de 0,1 mg.
Figura 1
Picnometru i tara
Picnometrul are un tub lateral de 25 mm lungime i un diametru interior de maxim 1 mm, care se
termin printr-o mbinare conic lefuit. Acest tub poate fi etanat cu un dop rezervor format
dintr-un tub conic de legtur din sticl lefuit i terminat cu o seciune ascuit . Dopul folosete
drept camer de expansiune.
4.2. Calibrarea picnometrului
Calibrarea picnometrului implic determinarea urmtoarelor caracte-ristici:
- tara picnometrului vid,
- volumul picnometrului la 20 C,
- masa picnometrului umplut cu ap la 20 C.
4.2.1. Metoda utilizrii balanei cu dou talere
Recipientul tar fiind aezat pe talerul stng al balanei iar picnometrul, curat, uscat i
prevzut cu dopul rezervor pe talerul drept, se realizeaz echilibrarea prin adugarea de
greuti pe talerul pe care se afl picnometrul: se noteaz cu p grame.
Se umple picnometrul cu ap distilat la temperatura ambiant i se fixeaz termometrul; se
terge picnometrul pentru a-l usca i sea eaz n recipientul izolat termic. Se amestec prin
rotirea recipientului pn cnd temperatura artat de termometru este constant . Se regleaz cu
atenie nivelul, pn la nivelul superior al marginii tubului lateral. Se usuc prin tamponare tubul
lateral i se aeaz dopul; se citete temperatura t C, corectnd-o pentru eventuala imprecizie
12
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
a scalei termometrului. Se cntrete picnometrul umplut cu ap i se noteaz greutatea p', n

grame, necesar stabilirii echilibrului.
Calculare:
Tararea picnometrului vid:
tara picnometrului vid = p +m,
unde m = masa aerului coninut n picnometru,
m = 0,0012 (p p , ).
Volumul la 20 C:
V 20 C = (p + m p ,) F t ,
unde F t = un factor luat din tabelul 1 pentru temperatura t C.
V 20 C trebuie s fie cunoscut n intervalul 0,001 ml.
Masa apei la 20 C:
M 20 C = 0,998203 V 20 C ,
unde 0,998203 este densitatea apei la 20 C.
4.2.2. Metoda utilizrii balanei cu un taler
Se determin :
- masa picnometrului curat i uscat: P,
- masa picnometrului umplut cu ap la i C, urmnd metoda descris la punctul 4.2.1 de mai sus:
se noteaz cu P 1 ,
- masa tarei: T 0 .
Calculare :
Tararea picnometrului vid:
tara picnometrului vid = P - m,
unde
m = masa aerului din picnometru,
m = 0,0012 (P 1 - P).
Volumul la 20 C:
V 20 C = [P 1 (P m)] F t
unde
F t = un factor luat din tabelul 1 pentru temperatura t C.
Volumul la 20 C trebuie s fie cunoscut n intervalul 0,001 ml.
Masa apei la 20 C:
M 20 C = 0,998203 V 20 C ,
unde
0,998203 este densitatea apei la 20 C.
13
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4.3. Metoda de determinare

4.3.1. Metoda utiliz rii balan ei cu dou talere
Se umple picnometrul cu proba de testare pregtit conform procedurii de la punctul 4.2.1 de
mai sus.
p,, - greutatea n grame necesar stabilirii echilibrului la t C.
Masa lichidului coninut n picnometru = p +m - p,,
Densitatea aparent la t C:
+ m ,,
=
V200 c
Se calculeaz densitatea la 20 C utiliznd unul din tabelele de corecie prezentate mai jos, n
conformitate cu natura lichidului msurat: vin sec (tabelul II), must natural sau concentrat (tabelul
III), vin dulce (tabelul IV).
Greutatea specific a vinului 20 C/20 C se calculeaz prin mprirea la 0,998203 a
greutii lui la 20 C.
4.3.2. Metoda utiliz rii balan ei cu un taler
Se cntrete recipientul tar i se noteaz masa cu T1.
dT = T1 - T 0 .
Se calculeaz
Masa picnometrului vid n momentul msurrii = P- .m + dT.
Se cntrete picnometrul umplut cu proba de testare, urmndu-se procedura descris la
punctul 4.2.1 de mai sus. Se noteaz masa la t C cu P 2 .
Masa lichidului din picnometru la t C = P 2 (P m +dT)
Densitatea aparent la t C:
t c =
0
P2 (P m dT )
V200 c
Se calculeaz densitatea la 20 C a lichidului testat (vin sec, must natural sau concentrat sau
vin dulce) n conformitate cu punctul 4.3.1 de mai sus.
Greutatea specific a vinului 20 C/20 C se calculeaz prin mprirea densitii, la temperatura
de 20 C, la 0,998203.
4.3.3. Repetabilitatea determinrilor de densitate
pentru vinuri seci i demidulci:
r = 0,00010,
r = 0,00018.
i pentru vinuri dulci:
4.3.4. Reproductibilitatea determinrilor de densitate:
pentru vinuri seci i demidulci:
R = 0,00037,
R = 0,00045.
i pentru vinuri dulci:
14
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. EXEMPLU DE CALCULARE A DENSITII LA 20 C I A
GREUTII SPECIFICE LA 20 C/20 C (METODA DE REFERIN )
5.1. Picnometria prin utilizarea balanei cu dou talere

5.1.1. Standardizarea picnometrului
1. Cntrirea picnometrului curat i uscat:
Tara = picnometrul + p
p = 104,9454 g
2. Cntrirea picnometrului umplut cu ap la t C:
Tara = picnometrul + ap + p,
p,= 1,2396 g la t = 20,5 C
3. Calcularea masei aerului din picnometru:
m = 0,0012(p p,)
m = 0,0012 (104,9454 1,2396)
m = 0,1244 g
4. Valori caracteristice care trebuie reinute:
Tara picnometrului vid, p +m:
p + m = 104,9454 + 0,1244
p + m = 105,0698 g
Volumul la 20 C = F(p +m+p,) t C
F 20,5 C = 1,001900
V 20 C = (105,0698 1,2396) 1,001900
V 20 C
= 104,0275 ml
Masa apei la 20 C =
M 20 C = V 20 C . 0,998203
M 20 C = 103,8405 g
5.1.2. Determinarea densitii i a greutii specifice la 20 C/20 C la vinul sec
= 1,2622 la 17,80 C
17,8 c =
0
105,0698 1,2622
104,0275
17,8 o c = 0,99788 g/ml
Tabelul II permite calcularea 20 o c din t o c pe baza raportului:

C
200 c = t 0c
1000
Pentru t=17,80 0C i pentru tria alcoolic 11 % vol. C= 0,54
15
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
20 c = 0,99788
0
0,54
1000
20 c = 0,99734 g / ml
0
d 20200 cc =
0,99734
= 0,99913
0,998203
5.2. Picnometria prin utilizarea balanei cu un singur taler

5.2.1. Standardizarea picnometrului
1. Cntrirea picnometrului curat i uscat:
P = 67,7913 g
2. Cntrirea picnometrului umplut cu ap la t C:
P 1 = 169,2715 la 21,65 C
3. Masa aerului coninut de picnometru
M = 0,0012 (P 1 P)
M = 0,0012 101,4802
M = 0,1218 g
4. Valori caracteristice care trebuie reinute:
Tara picnometrului vid, P- m:
P-m = 67,7913 0,1218
P- m = 67,6695 g
Volumul la 20 C = [P 1 (P- m)]F t C
F 21,65 C = 1,002140
V 20 C = 1,002140 (169,2715 67,6695)
V 20 C = 101,8194 ml
Masa apei la 20 C:
M 20 C = V 20 C 0,998203
M 20 C = 101,6364 g
Masa sticlei tarate, T o :
To
= 171,9160 g
5.2.2. Determinarea denstii i a greutii specifice la 20 C la vinul sec
T t = 171,9178 g
dT = 171,9178 171,9160 = 0,0018 g
P m +dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g
P 2 = 169,2799 la 18 C
169,2799 67,6713
101,8194
18 C = 0,99793 g/ml
16
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul II permite calcularea lui 20 C pe baza raportului:

c
200 c = t 0c
1000
Pentru t =18 C i trie alcoolic de 11 % vol., c = 0,49.
0,49
200 c = 0,99793
1000
20 c = 0,99744 g / ml
0
d 20200 cc =
0,99923
= 0,99923
0,998203
TABELUL I
Factorii F de multiplicare a masei de ap coninut n picnometrul Pyrex la t C, pentru calcularea

volumului picnometrului la 20 C
t C
t C
t C
t C
t C
t C
t C
10,0
,1
,2
,3
,4
10,5
,6
,7
,8
,9
11,0
,1
,2
,3
,4
11,5
,6
,7
,8
,9
12,0
,1
1,000398
1,000406
1,000414
1,000422
1,000430
1,000439
1,000447
1,000456
1,000465
1,000474
1,000483
1,000492
1,000501
1,000511
1,000520
1,000530
1,000540
1,000550
1,000560
1,000570
1,000580
1,000591
13,0
,1
,2
,3
,4
13,5
,6
,7
,8
,9
14,0
,1
,2
,3
,4
14,5
,6
,7
,8
,9
15,0
,1
1,000691
1,000703
1,000714
1,000726
1,000738
1,000752
1,000764
1,000777
1,000789
1,000803
1,000816
1,000829
1,000842
1,000855
1,000868
1,000882
1,000895
1,000909
1,000923
1,000937
1,000951
1,000965
16,0
,1
,2
,3
,4
16,5
,6
,7
,8
,9
17,0
,1
,2
,3
,4
17,5
,6
,7
,8
,9
18,0
,1
1,001097
1,001113
1,001128
1,001144
1,001159
1,001175
1,001191
1,001207
1,001223
1,001239
1,001257
1,001273
1,001290
1,001306
1,001323
1,001340
1,001357
1,001374
1,001391
1,001409
1,001427
1,001445
19,0
,1
,2
,3
,4
19,5
,6
,7
,8
,9
20,0
,1
,2
,3
,4
20,5
,6
,7
,8
,9
21,0
,1
1,001608
1,001627
1,001646
1,001665
1,001684
1,001703
1,001722
1,001741
1,001761
1,001780
1,001800
1,001819
1,001839
1,001859
1,001880
1,001900
1,001920
1,001941
1,001961
1,001982
1,002002
1,002023
22,0
,1
,2
,3
,4
22,5
,6
,7
,8
,9
23,0
,1
,2
,3
,4
23,5
,6
,7
,8
,9
24,0
,1
1,002215
1,002238
1,002260
1,002282
1,002304
1,002326
1,002349
1,002372
1,002394
1,002417
1,002439
1,002462
1,002485
1,002508
1,002531
1,002555
1,002578
1,002602
1,002625
1,002649
1,002672
1,002696
25,0
,1
,2
,3
,4
25,5
,6
,7
,8
,9
26,0
,1
,2
,3
,4
26,5
,6
,7
,8
,9
27,0
,1
1,002916
1,002941
1,002966
1,002990
1,003015
1,003041
1,003066
1,003092
1,003117
1,003143
1,003168
1,003194
1,003222
1,003247
1,003273
1,003299
1,003326
1,003352
1,003379
1,003405
1,003432
1,003458
28,0
,1
,2
,3
,4
28,5
,6
,7
,8
,9
29,0
,1
,2
,3
,4
29,5
,6
,7
,8
,9
30,0
1,003704
1,003731
1,003759
1,003787
1,003815
1,003843
1,003871
1,003899
1,003928
1,003956
1,003984
1,004013
1,004042
1,004071
1,004099
1,004128
1,004158
1,004187
1,004216
1,004245
1,004275
,2 1,000601
,2 1,000979
,2 1,001462
,2 1,002044
,2 1,002720
,2 1,003485
,3 1,000612
,3 1,000993
,3 1,001480
,3 1,002065
,3 1,002745
,3 1,003513
,4 1,000623
,4 1,001008
,4 1,001498
,4 1,002086
,4 1,002769
,4 1,003540
12,5 1,000634
15,5 1,001022
18,5 1,001516
21,5 1,002107
24,5 1,002793
27,5 1,003567
,6 1,000645
,6 1,001037
,6 1,001534
,6 1,002129
,6 1,002817
,6 1,003594
17
Anexa 2 (ontinuare)
Reglementarea tehnic
privind metodele
de analiz n domeniul
fabricrii vinurilor
TABEL II
Temperatura (0C)
Corecia c de temperatur a densitii vinurilor seci dezalcoolizate, msurat cu un picnometru din sticl Pyrex la t C pentru exprimarea
rezultatului
la 20 C
c
p 20 = pt
- dac t C este sub 20 C
1000
0
1,59
1,48
1,36
1,22
1,08
0,92
0,76
0,59
0,40
0,21
0,21
5
1,64
1,53
1,40
1,26
1,11
0,96
0,79
0,61
0,42
0,21
0,22
6
1,67
1,56
1,43
1,28
1,13
0,97
0,80
0,62
0,42
0,22
0,22
7
1,71
1,60
1,46
1,32
1,16
0,99
0,81
0,63
0,43
0,22
0,23
8
1,77
1,64
1,50
1,35
1,19
1,02
0,84
0,65
0,44
0,23
0,23
9
1,84
1,70
1,56
1,40
1,23
1,05
0,86
0,67
0,46
0,23
0,24
10
1,91
1,77
1,62
1,45
1,27
1,09
0,89
0,69
0,47
0,24
0,25
11
2,01
1,86
1,69
1,52
1,33
1,13
0,93
0,72
0,49
0,25
0,26
12
2,11
1,95
1,78
1,59
1,39
1,19
0,97
0,75
0,51
0,26
0,27
13
2,22
2,05
1,86
1,67
1,46
1,24
1,01
0,78
0,53
0,27
0,28
+ dac t C este peste 20 C

Trii alcoolice
14 15 16 17 18 19 20
2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19
2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91
1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62
1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32
1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03
1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70
1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38
0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05
0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71
0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36
0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37
21
3,35
3,06
2,75
2,44
2,11
1,78
1,44
1,11
0,74
0,37
0,38
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77
23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17
24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58
25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00
26 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44
27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88
28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32
29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78
30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25
Not Tabelul poate fi utilizat pentru transformarea greutii specifice d20 n greutate specific d2020.
22
3,52
3,21
2,88
2,55
2,21
1,86
1,51
1,15
0,77
0,39
0,40
23
3,70
3,36
3,02
2,67
2,31
1,95
1,57
1,20
0,81
0,41
0,41
24
3,87
3,53
3,16
2,79
2,42
2,03
1,64
1,25
0,84
0,42
0,43
25
4,06
3,69
3,31
2,92
2,52
2,12
1,71
1,30
0,87
0,44
0,44
26
4,25
3,86
3,46
3,05
2,63
2,21
1,78
1,35
0,91
0,46
0,46
27
4,44
4,03
3,61
3,18
2,74
2,30
1,85
1,40
0,94
0,47
0,48
0,80
1,22
1,64
2,08
2,53
2,98
3,45
3,92
4,40
0,83
1,26
1,71
2,16
2,62
3,09
3,57
4,05
4,55
0,87
1,31
1,77
2,24
2,72
3,20
3,69
4,19
4,70
0,90
1,37
1,84
2,32
2,81
3,31
3,82
4,33
4,85
0,93
1,41
1,90
2,40
2,91
3,42
3,94
4,47
4,92
0,97
1,46
1,97
2,48
3,01
3,53
4,07
4,61
5,17
18
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
Corecia c de temperatur a densitii musturilor naturale i concentrate msurate cu un picnometru din sticl Pyrex la t C pentru exprimarea
rezultatului
la 20 C
c
p 20 = pt
1000
Temperatura (0C)
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
1,05
2,31
2,12
1,92
1,72
1,52
1,28
1,05
0,80
0,56
0,29
0,29
1,06
2,48
2,28
2,06
1,84
1,62
1,36
1,12
0,86
0,59
0,31
0,30
1,07
2,66
2,42
2,19
1,95
1,72
1,44
1,18
0,90
0,62
0,32
0,32
1,08
2,82
2,57
2,32
2,06
1,81
1,52
1,25
0,95
0,66
0,34
0,34
1,09
2,99
2,72
2,45
2,17
1,90
1,60
1,31
1,00
0,68
0,36
0,35
1,10
3,13
2,86
2,58
2,27
2,00
1,67
1,37
1,04
0,72
0,37
0,37
1,11
3,30
2,99
2,70
2,38
2,09
1,75
1,43
1,09
0,75
0,39
0,38
1,12
3,44
3,12
2,82
2,48
2,17
1,82
1,49
1,13
0,77
0,40
0,40
1,13
3,59
3,25
2,94
2,58
2,26
1,89
1,55
1,18
0,80
0,42
0,41
1,14
3,73
3,37
3,04
2,69
2,34
1,96
1,60
1,22
0,83
0,43
0,42
Densiti
1,15 1,16
3,88 4,01
3,50 3,62
3,15 3,26
2,78 2,88
2,43 2,51
2,04 2,11
1,66 1,71
1,26 1,30
0,85 0,88
0,44 0,45
0,44 0,46
1,18
4,28
3,85
3,47
3,05
2,66
2,24
1,81
1,37
0,93
0,48
0,48
1,20
4,52
4,08
3,67
3,22
2,82
2,36
1,90
1,44
0,98
0,50
0,50
1,22
4,76
4,29
3,85
3,39
2,96
2,48
2,00
1,51
1,02
0,52
0,53
1,24
4,98
4,48
4,03
3,55
3,09
2,59
2,08
1,57
1,05
0,54
0,56
1,26
5,18
4,67
4,20
3,65
3,22
2,69
2,16
1,62
1,09
0,56
0,58
1,28
5,42
4,84
4,36
3,84
3,34
2,79
2,24
1,68
1,12
0,57
0,59
1,30
5,56
5,00
4,51
3,98
3,45
2,88
2,30
1,72
1,16
0,59
0,60
1,32
5,73
5,16
4,65
4,11
3,56
2,97
2,37
1,76
1,19
0,60
0,61
1,34
5,90
5,31
4,78
4,24
3,67
3,03
2,43
1,80
1,21
0,61
0,62
1,36
6,05
5,45
4,91
4,36
3,76
3,10
2,49
1,84
1,24
0,62
0,62
0,58
0,89
1,20
1,51
1,84
2,17
2,50
2,86
3,20
0,61
0,94
1,25
1,59
1,92
2,26
2,62
2,98
3,35
0,64
0,99
1,31
1,66
2,01
2,36
2,74
3,10
3,49
0,67
1,03
1,37
1,74
2,10
2,46
2,85
3,22
3,64
0,70
1,08
1,43
1,81
2,18
2,56
2,96
3,35
3,77
0,73
1,12
1,49
1,88
2,26
2,66
3,07
3,47
3,91
0,76
1,16
1,54
1,95
2,34
2,75
3,18
3,59
4,05
0,79
1,20
1,60
2,02
2,42
2,84
3,28
3,70
4,17
0,81
1,25
1,66
2,09
2,50
2,93
3,40
3,82
4,30
0,84
1,29
1,71
2,16
2,58
3,01
3,50
3,93
4,43
0,87
1,33
1,77
2,23
2,65
3,10
3,60
4,03
4,55
0,96
1,44
1,92
2,42
2,87
3,35
3,87
4,34
4,90
1,00
1,51
2,01
2,53
3,00
3,50
4,04
4,53
5,12
1,05
1,57
2,10
2,63
3,13
3,66
4,21
4,72
5,39
1,09
1,63
2,17
2,72
3,25
3,80
4,36
4,89
5,51
1,12
1,67
2,24
2,82
3,36
3,93
4,50
5,05
5,68
1,15
1,73
2,30
2,89
3,47
4,06
4,64
5,20
5,84
1,18
1,77
2,36
2,95
3,57
4,16
4,75
5,34
5,96
1,20
1,80
2,40
2,99
3,65
4,26
4,86
5,46
6,08
1,22
1,82
2,42
3,01
3,72
4,35
4,94
5,56
6,16
1,23
1,84
2,44
3,05
3,79
4,42
5,00
5,64
6,22
0,90
1,37
1,82
2,30
2,73
3,18
3,69
4,14
4,67
Not Tabelul poate fi utilizat pentru transformarea greutii specifice d20 n greutate specific d2020
19
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL IV
Corecia c de temperatur a densitii vinurilor cu 13 % voi. i mai mult, cu coninut de zahr rezidual, msurat cu un picnometru din sticl
Pyrex la t C pentru exprimarea rezultatului la 20 C
c
p 20 = pt
1000
Temperatura (0C)
Vinuri
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
cu 13 % voi.
Vinuri
cu 15 % voi.
Vinuri
cu 17 % voi.
1,000
1,020
Densiti
1,040
1,060
1,080 1,100
1,120
1,000
1,020
Densiti
1,040 1,060
1,080 1,100
1,120
1,000
1,020
Densiti
1,040 1,060
1,080 1,100
1,120
2,36
2,17
1,97
1,78
1,57
1,32
1,08
0,83
0,58
0,30
0,30
2,71
2,49
2,25
2,02
1,78
1,49
1,22
0,94
0,64
0,34
0,33
3,06
2,80
2,53
2,25
1,98
1,66
1,36
1,04
0,71
0,37
0,36
3,42
2,99
2,79
2,47
2,16
1,82
1,48
1,13
0,78
0,40
0,40
3,72
3,39
3,05
2,69
2,35
1,97
1,61
1,22
0,84
0,43
0,43
3,96
3,65
3,29
2,89
2,53
2,12
1,73
1,31
0,89
0,46
0,46
4,32
3,90
3,52
3,09
2,70
2,26
1,84
1,40
0,95
0,49
0,49
2,64
2,42
2,19
1,97
1,74
1,46
1,18
0,91
0,63
0,33
0,33
2,99
2,73
2,47
2,21
1,94
1,63
1,32
1,02
0,69
0,37
0,36
3,36
3,05
2,75
2,44
2,14
1,79
1,46
1,12
0,76
0,40
0,39
3,68
3,34
3,01
2,66
2,32
1,95
1,59
1,21
0,83
0,43
0,43
3,99
3,63
3,27
2,87
2,52
2,10
1,71
1,30
0,89
0,46
0,46
4,30
3,89
3,51
3,08
2,69
2,25
1,83
1,39
0,94
0,49
0,49
4,59
4,15
3,73
3,29
2,86
2,39
1,94
1,48
1,00
0,52
0,51
2,94
2,69
2,42
2,18
1,91
1,60
1,30
1,00
0,69
0,36
0,35
3,29
3,00
2,70
2,42
2,11
1,77
1,44
1,10
0,75
0,39
0,39
3,64
3,32
2,98
2,64
2,31
1,93
1,58
1,20
0,82
0,42
0,42
3,98
3,61
3,24
2,87
2,50
2,09
1,71
1,30
0,89
0,46
0,45
4,29
3,90
3,50
3,08
2,69
2,24
1,83
1,39
0,95
0,49
0,48
4,60
4,16
3,74
3,29
2,86
2,39
1,95
1,48
1,00
0,52
0,51
4,89
4,41
3,96
3,49
3,03
2,53
2,06
1,56
1,06
0,54
0,54
0,60
0,93
1,27
1,61
1,94
2,30
2,66
3,05
3,44
0,67
1,02
1,39
1,75
2,12
2,51
2,90
3,31
3,70
0,73
1,12
1,50
1,90
2,29
2,70
3,13
3,56
3,99
0,80
1,22
1,61
2,05
2,47
2,90
3,35
3,79
4,28
0,85
1,30
1,74
2,19
2,63
3,09
3,57
4,04
4,54
0,91
1,39
1,84
2,33
2,79
3,27
3,86
4,27
4,80
0,98
1,49
1,95
2,47
2,95
3,44
4,00
4,49
5,06
0,65
1,01
1,37
1,73
2,09
2,48
2,86
3,28
3,68
0,72
1,10
1,49
1,87
2,27
2,68
3,10
3,53
3,94
0,78
1,20
1,59
2,02
2,44
2,87
3,23
3,77
4,23
0,84
1,29
1,72
2,17
2,62
3,07
3,55
4,02
4,52
0,90
1,38
1,84
2,31
2,78
3,27
3,77
4,26
4,79
0,96
1,46
1,95
2,45
2,94
3,45
3,99
4,49
5,05
1,01
1,55
2,06
2,59
3,10
3,62
4,20
4,71
5,30
0,71
1,10
1,48
1,87
2,26
2,67
3,08
3,52
3,95
0,78
1,19
1,60
2,01
2,44
2,88
3,31
3,77
4,22
0,84
1,29
1,71
2,16
2,61
3,07
3,55
4,01
4,51
0,90
1,38
1,83
2,31
2,79
3,27
3,76
4,26
4,79
0,96
1,46
1,95
2,45
2,95
3,46
3,99
4,50
5,07
1,01
1,55
2,06
2,59
3,11
3,64
4,21
4,73
5,32
1,07
1,63
2,17
2,73
3,26
3,81
4,41
4,95
5,57
20
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Temperatura (0C)
TABELUL IV
(continuare)
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
1,000
3,27
2,99
2,68
2,40
2,11
1,76
1,43
1,09
0,76
0,39
0,38
1,020
3,62
3,30
2,96
2,64
2,31
1,93
1,57
1,20
0,82
0,42
0,42
Vinuri 19 % vol.
Densiti
1,040 1,060 1,080
3,97 4,30 4,62
3,61 3,90 4,19
3,24 3,50 3,76
2,87 3,09 3,30
2,51 2,69 2,88
2,09 2,25 2,40
1,70 1,83 1,95
1,30 1,39 1,48
0,88 0,95 1,01
0,45 0,49 0,52
0,45 0,48 0,51
0,78
1,19
1,60
2,02
2,44
2,88
3,31
3,78
4,24
0,84
1,28
1,72
2,16
2,62
3,08
3,54
4,03
4,51
0,90
1,38
1,83
2,31
2,79
3,27
3,78
4,27
4,80
2.1.2. SM GOST R 51619-2000
0,96
1,47
1,95
2,46
2,96
3,42
4,00
4,52
5,08
1,02
1,55
2,06
2,60
3,12
3,66
4,22
4,76
5,36
1,100
4,92
4,45
4,00
3,51
3,05
2,55
2,08
1,57
1,06
0,55
0,54
1,120
5,21
4,70
4,21
3,71
3,22
2,69
2,18
1,65
1,12
0,57
0,57
1,000
3,62
3,28
2,96
2,64
2,31
1,93
1,56
1,20
0,82
0,42
0,41
1,07
1,64
2,18
2,74
3,28
3,84
4,44
4,99
5,61
1,13
1,72
2,29
2,88
3,43
4,01
4,64
5,21
5,86
0,84
1,29
1,73
2,18
2,53
3,10
3,56
4,06
4,54
1,020
3,97
3,61
3,24
2,88
2,51
2,10
1,70
1,31
0,88
0,46
0,45
Vinuri 21 % vol.
Densiti
1,040 1,060 1,080
4,32 4,66 4,97
3,92 4,22 4,50
3,52 3,78 4,03
3,11 3,33 3,54
2,71 2,89 3,08
2,26 2,42 2,57
1,84 1,97 2,09
1,41 1,50 1,59
0,95 1,01 1,08
0,49 0,52 0,55
0,48 0,51 0,54
1,100
5,27
4,76
4,27
3,74
3,25
2,72
2,21
1,68
1,13
0,58
0,57
1,120
5,56
5,01
4,49
3,95
3,43
2,86
2,32
1,77
1,18
0,61
0,60
0,90
1,39
1,85
2,32
2,81
3,30
3,79
4,31
4,82
0,96
1,48
1,96
2,47
2,97
3,47
4,03
4,55
5,11
1,14
1,74
2,31
2,90
3,47
4,06
4,69
5,27
5,91
1,19
1,82
2,42
3,04
3,62
4,23
4,89
5,48
6,16
1,02
1,57
2,08
2,62
3,15
3,69
4,25
4,80
5,39
1,08
1,65
2,19
2,76
3,31
3,88
4,47
5,04
5,66
21
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
0
2.2 CONCENTRAIA IA ALCOOLIC 20 C

2.2.1 MA-MD-AS312-01-TALVOL
1. DEFINIIE
Concentraia alcoolic este numrul de litri de etanol din 100 litri de vin, ambele volume fiind
msurate la o temperatur de 20 C. Se exprim prin simbolul % vol..
Not:
Omologii etanolului, mpreun cu etanolul i omologii acestuia din esterii etilici sunt inclui n
concentraia alcoolic, deoarece ei apar n distilat.
2.1. Distilarea vinului alcalinizat cu o suspensie de hidroxid de calciu. Se determin

concentraia alcoolic a distilatului.
2.2. Metode de referin:
- determinarea concentraiei alcoolice a distilatului prin picnometrie;
- determinarea concentraiei alcoolice a vinurilor cu ajutorul balanei hidrostatice;
- determinarea concentraiei alcoolice a vinurilor prin densimetrie electronic, utiliznd un
oscilator de frecven;
2.3. Metode uzuale:
2.3.1. Se determin concentraia alcoolic a distilatului cu un hidrometru.
2.3.3. Se determin concentraia alcoolic a distilatului prin refractometrie.
Not:
Pentru obinerea concentraiei alcoolice din densitatea distilatului se utilizeaz tabelele I, II i III din
apendicele II la prezenta seciune din anex.
Acestea au fost calculate din Tabelele Internaionale ale Triei Alcoolice publicate n 1972 de
Organizaia Internaional de Metrologie Legal n Recomandarea nr. 22 i adoptate de OIV (Adunarea
general din 1974).
i densitatea amestecurilor
Tabelul I prezint ecuaia general dintre concentraia alcoolic
hidroalcoolice, n funcie de temperatur.
3. METODE DE OBINERE A DISTILATULUI
3.1. Aparat
3.1.1. Aparat de distilare alctuit din:
- balon cu fund rotund de 1 litru, cu gt din sticl lefuit,
- coloan de rectificare cu o nlime de aproximativ 20 cm sau orice aparat care evit mprocarea,
- surs de cdur: trebuie evitat printr-un sistem corespunztor, piroliza materialului extras,
22
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
- condensator terminat cu un tub de picurare care conduce distilatul spre baza unui balon gradat
receptor, n care se afl civa ml de ap.
3.1.2. Aparat de distilare prin antrenare cu vapori de ap alctuit din:
- generator de abur;
- conduct pentru abur;
- coloan de rectificare;
- agent de refrigerare.
Se poate utiliza orice tip de aparat de distilare sau de distilare prin antrenare cu vapori de ap, dac
trece urmtorul test:
Se distileaz de cinci ori consecutiv un amestec de etanol i ap cu o trie alcoolic de 10 % vol.
Distilatul trebuie s aib o trie alcoolic de cel puin 9,9 % dup a cincea distilare, adic pierderea
de alcool n timpul fiecrei distilri s nu fie mai mare de 0,02 % vol.
3.2. Reactivi
3.2.1. O suspensie de hidroxid de calciu 2 M, obinut prin adugarea cu grij a unui litru de ap la
60-70 C pe 120 g de var nestins (CaO).
3.3. Prepararea probei
Se nltur majoritatea bioxidului de carbon din vinurile tinere i vinurile spumante prin agitarea a
250-300 ml de vin ntr-un balon de 500 ml.
3.4. Metoda de lucru
Se msoar 200 ml de vin, utiliznd un balon cotat. Se nregistreaz temperatura vinului.
Se transfer vinul n balonul de distilare i introducei conducta de abur a aparatului de distilare cu
abur. Se cltete balonul cotat de patru ori succesiv cu cte 5 ml de ap adugat balonului sau conductei
de abur. Se adaug 10 ml de hidroxid de calciu (punctul 3.2.1) i cteva buci de material poros inert
(piatr ponce etc.).
Se colecteaz distilatul n balonul cotat de 200 ml utilizat pentru msurarea vinului.
Se colecteaz un volum de din volumul iniial dac este utilizat distilarea i un volum de 198-199
ml de distilat dac este utilizat distilarea cu abur. Se completeaz la 200 ml prin adugarea de ap
distilat, pstrnd distilatul la o temperatur n intervalul 2 C fa de temperatura iniial.
Se amestec cu mare grij, cu o micare circular.
Not:
n cazul vinurilor care conin concentraii deosebit de mari de ioni amoniu, distilatul poate
fi redistilat corespunztor condiiilor de mai sus, dar nlocuind suspensia de hidroxid de calciu cu acid
sulfuric 1 M diluat la 10 pri la 100 (vol./vol.).
23
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4-A. Determinarea concentraiei alcoolice a distilatului prin picnometrie

4.1. Aparatura
4.1.1. Se utilizeaz picnometrul standard descris n metoda Densitatea i greutatea specific
Se determin densitatea aparent a distilatului (punctul 3.4) la t C conform descrierii din metoda
Densitatea i greutatea specific . Se noteaz densitatea cu t.
4.3. Exprimarea rezultatelor

4.3.1. Metoda de calcul
Se calculeaz concentraia alcoolic utiliznd tabelul 1. Pe linia orizontal a acestui tabel
corespunztoare temperaturii T (exprimat ca numr ntreg), imediat sub t C, se caut densitatea cea mai
mic, superioar t. Densitatea la aceast temperatur T se calculeaz utiliznd diferena tabelar
imediat de sub aceast densitate.
Pe linia temperaturii T se caut densitatea care este imediat deasupra i se calculeaz diferena
dintre densitile i . Aceast densitate se mparte cu densitatea tabelar din dreapta densitii .
Partea de dup virgul d zecimalele concentraiei alcoolice, n timp ce partea ntreag a concentraiei
este situat la nceputul coloanei n care este situat densitatea .
Un exemplu de calculare a concentraiei alcoolice este prezentat n apendicele 1 la prezentul capitol
din anex.
Not:
Corecia de temperatur poate fi introdus ntr-un program de calculator i n aa caz exist
posibilitatea efecturii automate a acesteia.
4.3.2. Repetabilitatea r:
4.3.3. Reproductibilitatea R:
r = 0,10 % vol.
R = 0,19 % vol.
4-B. Determinarea concentraiei alcoolice a vinurilor cu ajutorul balanei hidrostatice

1. Metoda de msurare
1.1. Introducere
Concentraia alcoolic n volume
respectrii regulilor de etichetare.
trebuie msurat naintea comercializrii, n special n vederea
24
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Concentraia alcoolic este egal cu numrul de litri de etanol coninut n 100 litri de vin, msurai
la temperatura de 20 C. Se denumete prin % vol..
1.2. Obiectul i domeniul de aplicare

Metoda de msurare descris este densimetria cu ajutorul unei balane hidrostatice.
n sensul dispoziiilor de reglementare n vigoare, temperatura de testare se stabilete la 20 C.
1.3. Principiu i definiii
Principiul acestei metode se bazeaz pe distilarea vinului din volum n volum. Metoda de distilare
este descris n p. 3.4 . Distilarea elimin substanele nevolatile. Omologii etanolului, precum i etanolul
i omologii etanolului coninui n esteri etilici, sunt inclui n tria alcoolic, ntruct se regsesc n
distilat.
Se determin apoi densitatea distilatului obinut. Densitatea unui lichid la o temperatur dat se
definete ca raportul dintre masa i volumul su: 2 = m/V; n cazul vinurilor, densitatea se exprim n
g/ml.
Concentraia alcoolic a vinurilor poate fi msurat prin densimetrie cu ajutorul balanei
hidrostatice, pe baza principiului lui Arhimede, conform cruia asupra oricrui corp scufundat ntr-un
lichid acioneaz o for vertical ascendent egal cu greutatea lichidului dezlocuit.
1.4. Reactivi
n timpul analizei, n cazul n care nu exist indicaii explicite contrare, se utilizeaz numai reactivi
de o calitate analitic recunoscut i ap de cel puin categoria 3, conform standardului ISO 3696:1987.
1.4.1. Soluia de curare a flotorului (hidroxid de sodiu, 30 % m/v)
Pentru a prepara 100 ml, se cntresc 30 g de hidroxid de sodiu i se completeaz cu etanol de 96 %
n volume.
1.5. Aparatur i echipament

Aparatur standard de laborator, n special:
1.5.1. Balan hidrostatic monoplatan, cu precizia de 1 mg.
1.5.2. Flotor cu volumul de cel puin 20 ml, special adaptat pentru balan, suspendat printr-un fir cu
diametrul de cel mult 0,1 mm.
1.5.3. Cilindru gradat prevzut cu reper de nivel. Flotorul trebuie s ncap integral n cilindrul
gradat, sub reperul de nivel; suprafaa lichidului nu trebuie s fie n contact dect cu firul de suspensie.
Diametrul interior al cilindrului gradat trebuie s depeasc diametrul flotorului cu cel puin 6 mm.
1.5.4. Termometru (sau sond de msurare a temperaturii) cu scara n grade i zecimi de grade ntre
10 C i 40 C, etalonat la 0,05 C.
1.5.5. Greuti etalon, calibrate de un organism de certificare recunoscut.
25
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.6. Procedur
naintea fiecrei msurri, flotorul i cilindrul gradat trebuie splate cu ap distilat, uscate cu hrtie
fin de laborator care nu las fibre i cltite cu soluia a crei densitate urmeaz a fi determinat.
Msurrile trebuie efectuate imediat dup stabilizarea dispozitivului experimental, pentru a limita
pierderile de alcool prin evaporare.
1.6.1. Etalonarea balanei
Cu toate c balanele sunt prevzute, n general, cu un sistem de etalonare intern, balana hidrostatic
trebuie s poat fi etalonat cu greuti etalon verificate de un organism de certificare oficial.
1.6.2. Etalonarea flotorului
Se umple cilindrul gradat pn la reper cu ap bidistilat (sau ap de puritate echivalent, de exemplu
ap microfiltrat cu conductivitatea de 18,2 /cm), la o temperatur cuprins ntre 15 C i 25 C, de
preferin de 20 C.
Se introduce flotorul i termometrul n lichid, se agit, se citete densitatea lichidului pe aparat i,
dup caz, se corecteaz citirea, astfel nct s corespund valorii densitii apei la temperatura de
msurare.
1.6.3. Verificarea cu ajutorul unei soluii hidro-alcoolice
Se umple cilindrul gradat pn la reper cu un amestec hidroalcoolic de concentraie cunoscut, la o
temperatur cuprins ntre 15 C i 20 C, de preferin de 20 C.
Se introduce flotorul i termometrul n lichid, se agit, se citete densitatea lichidului (sau
concentraia alcoolic, n cazul n care este posibil) pe aparat. Concentraia alcoolic astfel stabilit
trebuie s fie egal cu concentraia alcoolic determinat anterior.
Observaie: Aceast soluie cu concentraia alcoolic cunoscut poate fi utilizat i la etalonarea
flotorului, n locul apei bidistilate.
1.6.4. Msurarea densitii unui distilat (sau a concentraiei sale alcoolice, n cazul n care aparatura
permite acest lucru)
Se toarn proba de testat n cilindrul gradat, pn la reperul de nivel.
Se introduce flotorul i termometrul n lichid, se agit, se citete densitatea lichidului (sau
concentraia alcoolic, n cazul n care este posibil) pe aparat. Se noteaz temperatura dac densitatea este
msurat la t C t.
Se corecteaz t, pe baza tabelului densitilor t pentru amestecuri hidro-alcoolice (tabelul II din
anexa II la prezentul capitol).
1.6.5. Curarea flotorului i a cilindrului gradat
Se introduce flotorul n soluia de splare a flotorului din cilindrul gradat.
Se las la muiat timp de o or, nvrtind flotorul la intervale regulate.
Se cltete din abunden cu ap de robinet, apoi cu ap distilat.
Se usuc cu hrtie fin de laborator care nu las fibre. Se execut aceast procedur la prima
utilizare a flotorului i apoi periodic, dup caz.
26
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.6.6. Rezultat
Cu ajutorul densitii 20, se calculeaz concentraia alcoolic real, utiliznd tabelul care indic
valoarea concentraiei alcoolice (% vol.), la 20 C, n funcie de densitatea la 20 C a amestecurilor hidroalcoolice, respectiv tabelul internaional adoptat de Organizaia Internaional de Metrologie Legal, n
Recomandarea nr. 22.
4-C. Determinarea concentraiei alcoolice a vinurilor prin densimetrie electronic utiliznd
oscilator de frecvena
1. Metoda de msurare
1.1. Titlu i introducere
Concentraia alcoolic a vinurilor trebuie msurat nainte de comercializare, n special pentru
conformarea la regulile de etichetare.
Concentraia alcoolic se definete la punctul 1 din prezentul capitol.
1.2. Obiectul i domeniul de aplicare
Metoda de msurare descris este densimetria electronic utiliznd un oscilator de frecven.
n sensul reglementrilor n vigoare, temperatura de prob se stabilete la 20 C.
1.3. Principiu i definiii
Principiul metodei const n principal n distilarea vinului volum cu volum. Metoda de distilare este
descris la punctual 3.4. Aceast distilare permite eliminarea substanelor nevolatile. Omologii etanolului,
ca i etanolul i omologii etanolului n esteri sunt inclui n tria alcoolic, deoarece se regsesc n
distilat.
ntr-o a doua etap se msoar densitatea distilatului obinut. Densitatea unui lichid la o temperatur
dat este egal cu raportul dintre mas i volum:
= m/V, pentru vin, se exprim n g/ml.
Pentru o soluie hidroalcoolic, cum este distilatul, cunoscnd temperatura, cu ajutorul tabelelor se
poate afla corespondena densitate-concentraie alcoolic. Concentraia alcoolic este cea
corespunztoare vinului (distilare volum cu volum).
n prezenta metod, densitatea distilatului se msoar prin densimetrie electronic, cu ajutorul unui
oscilator de frecven. Principiul const n msurarea perioadei de oscilaie a unui tub coninnd proba
supus unei excitaii electromagnetice. Densitatea se poate calcula, n legtur cu perioada de oscilaie,
dup urmtoarea formul:
C M

2
4 V V
= T 2
= densitatea probei
T = perioada de vibraie indus
(1)
27
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.2.1. MA-MD-AS312-01-TALVOL
M = masa tubului gol

C = constant de restabilire
V = volumul probei n vibraie
Aceast relaie este de forma = A T2 B (2); exist deci o relaie linear ntre densitate i perioada
la ptrat. Constantele A i B sunt specifice fiecrui oscilator i sunt estimate prin msurarea fluidelor de
densitate cunoscut.
1.4. Reactivi i produse

1.4.1. Fluide de referin
Dou fluide de referin servesc la reglarea densimetrului. Densitile fluidelor de referin trebuie s
ncadreze masele distilatelor de msurat. Se recomand o diferen de densitate de minimum 0,01000
g/ml ntre fluidele de referin. Densitatea lor trebuie cunoscut cu o variaie mai mic de +/- 0,00005
g/ml, la o temperatur de 20,00 +/- 0,05 C.
Pentru msurarea riei alcoolice n volume prin densimetria electronic, fluidele de referin sunt:
- aer uscat (nepoluat);
- ap de minimum clasa 3, n conformitate cu definiia normei ISO 3696:1987;
- soluii hidroalcoolice cu densiti de referin;
- soluii n conformitate cu standardele naionale de vscozitate mai mic de 2 mm2/s.
1.4.2. Produse de curare i uscare
- detergeni, acizi;
- solveni organici: etanol 96 % vol, aceton pur.
1.5. Aparatur
1.5.1. Densimetru electronic cu oscilator de frecven
Densimetrul electronic are urmtoarele elemente componente:
- celul de msurare compus dintr-un tub de msurare i o camer termostatat;
- sistem de oscilare a tubului i de msurare a perioadei de oscilare;
- ceas;
- sistem de afiare numeric i eventual un sistem de calculare.
Densimetrul se aaz pe un suport perfect stabil i izolat de vibraii.
1.5.2. Controlul temperaturii celulei de msurare
Tubul de msurare este situat ntr-o camer termostatat. Stabilitatea temperaturii trebuie s fie de +/0,02 C.
Atunci cnd densimetrul permite, este necesar s se controleze temperatura celulei de msur, ntruct
acesta influeneaz puternic rezultatele msurtorilor. Densitatea unei soluii hidroalcoolice cu
concentraia de 10 % vol este de 0,98471 g/ml la 20 C i de 0,98447 g/ml la
21 C, adic o diferen
de 0,00024 g/ml.
Temperatura de prob este fixat la 20 C. Msurarea temperaturii la nivelul celulei se realizeaz cu
un termometru cu o rezoluie mai mic de 0,01 C i n conformitate cu standardele naionale.
Termometrul trebuie s garanteze citirea temperaturii cu o incertitudine mai mic de +/- 0,07 C.
28
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.5.3. Calibrarea aparatului

Aparatul trebuie calibrat nainte de prima utilizare, apoi la fiecare ase luni sau ori de cte ori
verificarea nu este satisfctoare. Obiectivul este de a utiliza dou fluide de referin pentru a calcula
constantele A i B (a se vedea relaia 2). Realizarea practic a calibrrii se face n conformitate cu
instruciunile de utilizare a aparatului. n principiu, calibrarea se efectueaz cu aer uscat (a se ine seama
de presiunea atmosferic) i cu ap foarte pur (distilat de dou ori i/sau microfiltrat cu rezistivitate
foarte ridicat > 18 ).
1.5.4. Verificarea calibrrii
Pentru verificarea calibrrii se msoar densitatea fluidelor de referin.
Verificarea densitii aerului se efectueaz zilnic. O diferen mai mare de 0,00008 g/ml dintre densitatea
teoretic i cea observat poate indica c tubul este ancrasat. n acest caz trebuie curat. Dup curare,
se verific din nou densitatea aerului. n cazul n care aceast verificare nu este concludent, aparatul
trebuie reglat.
Se verific, de asemenea, densitatea apei; n cazul n care diferena dintre densitatea teoretic i cea
observat este mai mare de 0,00008 g/ml, se regleaz aparatul.
n cazul n care verificarea temperaturii celulei este dificil, este posibil s se verifice direct densitatea
unei soluii hidroalcoolice de trie alcoolic n volume TAV comparabil cu cea a distilatelor analizate.
1.5.5. Controlul
Cnd diferena dintre densitatea teoretic a unei solui de referin (cunoscu cu o incertitudine de +/0,00005 g/ml) i msurare este mai mare de 0,00008 g/ml, trebuie verificat temperatura celulei.
1.6. Prelevarea i prepararea probelor

(a se vedea punctul 3.4 Obinerea distilatului din prezentul capitol)
1.7. Mod de lucru
Dup obinerea distilatului, se msoar, prin densimetrie, densitatea sa sau concentraia alcoolic , %
vol. .
Operatorul se asigur de stabilitatea temperaturii celulei de msurare. Distilatul din celula
densimetrului nu trebuie s conin bule de aer i trebuie s fie omogen. n cazul n care se utilizeaz un
sistem de iluminare pentru a verifica absena bulelor, acesta trebuie stins imediat dup ncheierea
verificrii, deoarece cldura generat de lamp influeneaz temperatura msurrii.
n cazul n care aparatul indic numai perioada, se calculeaz densitatea graie constantelor A i B (a se
vedea punctul 1.3).
n cazul n care aparatul nu indic n mod direct concentraia alcoolic , cunoscnd densitatea o
putem obine cu ajutorul tabelelor.
Concentraia alcoolic a vinului este cea obinut pentru distilat. Se msoar n % vol.
n cazul n care condiiile de temperatur nu sunt respectate, este necesar s se realizeze o corecie pentru
a exprima temperatura de 20 C. Rezultatul se exprim cu dou zecimale.
29
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.9. Observaii
Volumul introdus n celul trebuie s fie suficient de mare pentru a se evita contaminarea cu proba
precedent. Prin urmare, este necesar s se efectueze cel puin dou msurri.
n cazul n care acestea nu dau rezultate ncadrate n limitele de repetabilitate, o a treia msurare este
necesar. n general, rezultatele ultimelor dou msuri sunt omogene i se elimin prima valoare.
1.10. Fidelitate
Pentru probele de concentraie alcoolic cuprinse ntre 4 %-18 % vol
Repetabilitate (r) = 0,067 (% vol)
Reproductibilitate (R) = 0,0454 + 0,0105 concentraia alcoolic (%, vol)
6. EXEMPLU DE CALCULARE A CONCENTRAIEI ALCOOLICE A UNUI VIN
6.1. Msurarea cu un picnometru pe o balan cu dou talere

6.1.1. Constantele picnometrului au fost determinate i calculate conform descrierii din capitolul
1, Densitatea i greutatea specific, seciunea 6.1.1
6.1.2. Cntrirea picnometrului umplut cu distilat
Exemplu numeric
t C
Tara = picnometru + distilat la t C + p
= 18,90 C
t C corectat
= 18,70 C
= 2,8074 g
p
p + m p = masa distilatului la t C 105,0698 2,8074 = 102,2624 g

Densitatea aparent la t C
p+m p
102,2624
t =
18,700 C =
= 0,983076
0
104,0229
volumulpicnometruluila 20
6.1.3. Calcularea triei alcoolice
Pe linia 18 C a tabelului densitilor aparente, cea
mai mic densitate mai mare dect densitatea
observat de 0,983076 este 0,98398 n coloana 11 %
vol.
Se face referire la tabelul densitilor
Densitatea la 18 C
este:
-5
aparente ale amestecurilor de alcool i ap (98307,6 + 0,7 22) 10 = 0,98323
la temperaturi diferite, conform indicaiilor
0,98398 0,98323 = 0,00075
de mai sus
Partea zecimal a % vol. din concentraia alcoolic
este 75/114 = 0,65
Concentraia alcoolic este 11,65 % vol.
30
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.2. Msurarea cu picnometrul pe o balan cu un taler

6.2.1. Constantele picnometrului au fost determinate i calculate conform descrierii din capitolul 1,
Densitatea i greutatea specific, seciunea 6.2.1.
6.2.2. Cntrirea picnometrului umplut cu distilat
Flaconul tar n momentul msurrii, n grame:
T1 = 171,9178
Picnometrul umplut cu distilat la 20,50 C, n grame:
P2 = 167,8438
Variaia n fora de ascensiune a aerului: dT = 171,9178 171,9160 = + 0,0018

Masa distilatului la 20,50 C:
Lt =167,8438 (67,6695 + 0,0018) = 100,1725
Densitatea aparent a distilatului: 20,500 C =
100,1725
= 0,983825
100,8794
6.2.3. Calcularea triei alcoolice
Se face referire la tabelul densitilor aparente ale

amestecurilor de alcool i ap la temperaturi diferite,
conform indicaiilor de mai sus
Pe linia 20 C a tabelului densitilor

aparente, cea mai mic densitate mai mare
dect densitatea observat de 0,983076 este
0,98471 n coloana 10 % vol.
Densitatea la 20 C este:
(98382,5 + 0,5 24) 10-5 = 0,983945
0,98471 0,983945= 0,000765
Partea zecimal a % vol. din concentraia
alcoolic este 76,5/119 = 0,64
Concentraia alcoolic este 10,64 % vol.
Formula de calcul pentru tabelele cu concentraiei alcoolice ale amestecurilor de etanol-ap

Densitatea , n kilograme per m3 (kg/m3) ale amestecului de etanol-ap la temperatura t, n grade
Celsius, este dat de formula de mai jos, ca funcie a:
triei alcoolice n greutate greutii p, exprimat ca numr zecimal (1),
31
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
-temperaturii t, n C (E. I. P. T. 68);

coeficientului numeric de mai jos.
Formula este valabil pentru temperaturi cuprinse ntre 20 i + 40 C.
12
= A1 + Ak p
k=2
k-1
k=1
Bk(t-20C)
+ Ci,k p
k(t-20C)
i=1 k=1
n = 5
m1 = 11
m2 = 10
m3 = 9
m4 = 4
m5 = 2
De exemplu, pentru o concentraie alcoolic de 12 % n greutate, p = 0,12.

Coeficienii numerici din formul
k
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
k
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
Ak
kg/m3
9,982 012 300 102
-1,929 769 495 102
3,891 238 958 102
-1,668 103 923 103
1,352 215 441 104
-8,829 278 388 104
3,062 874 042 105
-6,138 381 234 105
7,470 172 998 105
-5,478 461 354 105
2,234 460 334 105
-3,903 285 426 104
C1,k
kg/(m3 C)
1,693 443 461 530 087 10-1
-1,046 914 743 455 169 101
7,196 353 469 546 523 101
-7,047 478 054 272 792 102
3,924 090 430 035 045 103
-1,210 164 659 068 747 104
2,248 646 550 400 788 104
-2,605 562 982 188 164 104
1,852 373 922 069 467 104
-7,420 201 433 430 137 103
1,285 617 841 998 974 103
Bk
-2,061 851 3 10-1 kg/(m3 C)
-5,268 254 2 10-3 kg/(m3 C2)
3,613 001 3 10-5 kg/(m3 C3)
-3,895 770 2 10-7 kg/(m3 C4)
7,169 354 0 10-9 kg/(m3 C5)
-9,973 923 1 10-11 kg/(m3 C6)
C2,k
kg/(m3 C2)
-1,193 013 005 057 010 10-2
2,517 399 633 803 461 10-1
-2,170 575 700 536 993
1,353 034 988 843 029 101
-5,029 988 758 547 014 101
1,096 355 666 577 570 102
-1,422 753 946 421 155 102
1,080 435 942 856 230 102
-4,414 153 236 817 392 101
7,442 971 530 188 783
32
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1
2
3
4
5
6
7
8
9
C3,k
kg/(m3 C3)
-6,802 995 733 503 80310-4
1,876 837 790 289 664 10-2
-2,002 561 813 734 156 10-1
1,022 992 966 719 220
-2,895 696 483 903 638
4,810 060 584 300 675
-4,672 147 440 794 683
2,458 043 105 903 461
-5,411 227 621 436 81210-1
C4,k
kg/(m3 C4)
4,075 376 675 622 027 10-6
-8,763 058 573 471 11010-6
6,515 031 360 099 368 10-6
-1,515 784 836 987 21010-6
C5,k
kg/(m3 C5)
-2,788 074 354 782 40910-8
1,345 612 883 493 354 10-8
33
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
TRIA ALCOOLIC INTERNAIONAL LA 20 C

Tabelul densitilor aparente ale amestecurilor de etanol i ap - picnometru Pyrex
Densitatea la t C corectat pentru fora de ascensiune a aerului
0
t
0 999,64
-0,07
1 999,71
-0,05
2 999,76
-0,03
3 999,79
-0,02
4 999,81
0,00
5 999,81
0,01
6 999,80
0,03
7 999,77
0,05
8 999,72
0,05
9 999,67
0,07
10 999,60
0,09
11 999,51
0,10
12 999,41
0,11
1,50
1,51
1,51
1,51
1,51
1,51
1,51
1,51
1,50
1,51
1,51
1,51
1,50
1
998,14
-0,06
998,20
-0,05
998,25
-0,03
998,28
-0,02
998,30
0,00
998,30
0,01
998,29
0,03
998,26
0,04
998,22
0,06
998,16
0,07
998,09
0,09
998,00
0,09
997,91
0,11
1,44
1,44
1,45
1,45
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
2
996,70
-0,06
996,76
-0,04
996,80
-0,03
996,83
-0,01
996,84
0,00
996,84
0,01
996,83
0,03
996,80
0,04
996,76
0,06
996,70
0,07
996,63
0,09
996,54
0,09
996,45
0,11
1,40
1,40
1,40
1,41
1,40
1,40
1,41
1,41
1,42
1,42
1,42
1,41
1,42
3
995,30
-0,06
995,36
-0,04
995,40
-0,02
995,42
-0,02
995,44
0,00
995,44
0,02
995,42
0,03
995,39
0,05
995,34
0,06
995,28
0,07
995,21
0,08
995,13
0,10
995,03
0,11
1,35
1,35
1,35
1,35
1,36
1,37
1,36
1,37
1,37
1,37
1,37
1,38
1,38
4
993,95
-0,06
994,01
-0,04
994,05
-0,02
994,07
-0,01
994,08
0,01
994,07
0,01
994,06
0,04
994,02
0,05
993,97
0,06
993,91
0,07
993,84
0,09
993,75
0,10
993,65
0,11
1,30
1,30
1,30
1,30
1,30
1,31
1,32
1,32
1,32
1,32
1,33
1,33
1,34
Tria alcoolic n %
5
6
992,65 1,24 991,41
-0,06
-0,06
992,71 1,24 991,47
-0,04
-0,03
992,75 1,25 991,50
-0,02
-0,02
992,77 1,25 991,52
-0,01
0,00
992,78 1,26 991,52
0,02
0,02
992,76 1,26 991,50
0,02
0,03
992,74 1,27 991,47
0,04
0,04
992,70 1,27 991,43
0,05
0,05
992,65 1,27 991,38
0,06
0,07
992,59 1,28 991,31
0,08
0,08
992,51 1,28 991,23
0,09
0,10
992,42 1,29 991,13
0,11
0,11
992,31 1,29 991,02
0,11
0,12
vol.
7
1,19 990,22
-0,05
1,20 990,27
-0,03
1,20 990,30
-0,01
1,21 990,31
0,00
1,21 990,31
0,02
1,21 990,29
0,04
1,22 990,25
0,05
1,23 990,20
0,06
1,24 990,14
0,07
1,24 990,07
0,09
1,25 989,98
0,10
1,25 989,88
0,11
1,25 989,77
0,12
1,14
1,15
1,16
1,16
1,17
1,17
1,18
1,19
1,19
1,20
1,20
1,21
1,22
8
989,08
-0,04
989,12
-0,02
989,14
-0,01
989,15
0,01
989,14
0,02
989,12
0,05
989,07
0,06
989,01
0,06
988,95
0,08
988,87
0,09
988,78
0,11
988,67
0,12
988,55
0,13
9
1,10 987,98
-0,03
1,11 988,01
-0,02
1,11 988,03
0,00
1,12 988,03
0,02
1,13 988,01
0,03
1,14 987,98
0,05
1,14 987,93
0,07
1,15 987,86
0,07
1,16 987,79
0,09
1,17 987,70
0,10
1,17 987,60
0,11
1,18 987,49
0,13
1,19 987,36
0,14
10
1,05 986,93
-0,02
1,06 986,95
-0,01
1,07 986,96
0,01
1,08 986,95
0,03
1,09 986,92
0,04
1,10 986,88
0,05
1,10 986,83
0,08
1,11 986,75
0,08
1,12 986,67
0,10
1,13 986,57
0,11
1,14 986,46
0,12
1,15 986,34
0,13
1,15 986,21
0,15
11
1,00 985,93
-0,01
1,01 985,94
0,00
1,02 985,94
0,02
1,03 985,92
0,04
1,04 985,88
0,05
1,05 985,83
0,06
1,06 985,77
0,09
1,07 985,68
0,09
1,08 985,59
0,11
1,09 985,48
0,12
1,10 985,36
0,13
1,11 985,23
0,14
1,12 985,09
0,16
0,95
0,97
0,98
1,00
1,00
1,01
1,03
1,03
1,05
1,06
1,06
1,07
1,09
34
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
0
t
13 999,30
0,12
14 999,18
0,13
15 999,05
0,15
16 998,90
0,16
17 998,74
0,17
18 998,57
0,18
19 998,39
0,19
20 998,20
0,20
21 998,00
0,21
22 997,79
0,22
23 997,57
0,24
24 997,33
0,24
25 997,09
0,25
26 996,84
0,26
1,50
1,50
1,51
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,49
1,50
1,50
1
997,80
0,12
997,68
0,14
997,54
0,14
997,40
0,16
997,24
0,17
997,07
0,18
996,89
0,19
996,70
0,20
996,50
0,21
996,29
0,22
996,07
0,23
995,84
0,25
995,59
0,25
995,34
0,26
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,47
1,47
1,46
1,47
2
996,34
0,12
996,22
0,14
996,08
0,14
995,94
0,16
995,78
0,17
995,61
0,18
995,43
0,19
995,24
0,20
995,04
0,21
994,83
0,23
994,60
0,23
994,37
0,24
994,13
0,26
993,87
0,26
1,42
1,43
1,42
1,43
1,43
1,42
1,43
1,43
1,43
1,43
1,43
1,43
1,44
1,43
3
994,92
0,13
994,79
0,13
994,66
0,15
994,51
0,16
994,35
0,16
994,19
0,19
994,00
0,19
993,81
0,20
993,61
0,21
993,40
0,23
993,17
0,23
992,94
0,25
992,69
0,25
992,44
0,27
1,38
1,38
1,38
1,38
1,38
1,39
1,39
1,39
1,40
1,40
1,40
1,41
1,40
1,41
4
993,54
0,13
993,41
0,13
993,28
0,15
993,13
0,16
992,97
0,17
992,80
0,19
992,61
0,19
992,42
0,21
992,21
0,21
992,00
0,23
991,77
0,24
991,53
0,24
991,29
0,26
991,03
0,27
1,34
1,34
1,35
1,35
1,36
1,36
1,36
1,36
1,36
1,37
1,37
1,37
1,38
1,38
Tria alcoolic n %
5
6
992,20 1,30 990,90
0,13
0,13
992,07 1,30 990,77
0,14
0,14
991,93 1,30 990,63
0,15
0,16
991,78 1,31 990,47
0,17
0,17
991,61 1,31 990,30
0,17
0,18
991,44 1,32 990,12
0,19
0,19
991,25 1,32 989,93
0,19
0,20
991,06 1,33 989,73
0,21
0,21
990,85 1,33 989,52
0,22
0,22
990,63 1,33 989,30
0,23
0,24
990,40 1,34 989,06
0,24
0,24
990,16 1,34 988,82
0,25
0,26
989,91 1,35 988,56
0,26
0,26
989,65 1,35 988,30
0,27
0,27
vol.
7
1,25 989,65
0,14
1,26 989,51
0,15
1,27 989,36
0,16
1,27 989,20
0,18
1,28 989,02
0,18
1,28 988,84
0,20
1,29 988,64
0,20
1,29 988,44
0,22
1,30 988,22
0,23
1,31 987,99
0,24
1,31 987,75
0,25
1,32 987,50
0,26
1,32 987,24
0,26
1,32 986,98
0,28
1,23
1,23
1,24
1,25
1,25
1,26
1,26
1,27
1,27
1,28
1,28
1,29
1,29
1,31
8
988,42
0,14
988,28
0,16
988,12
0,17
987,95
0,18
987,77
0,19
987,58
0,20
987,38
0,21
987,17
0,22
986,95
0,24
986,71
0,24
986,47
0,26
986,21
0,26
985,95
0,28
985,67
0,28
9
1,20 987,22
0,15
1,21 987,07
0,16
1,21 986,91
0,17
1,21 986,74
0,19
1,22 986,55
0,20
1,23 986,35
0,20
1,23 986,15
0,22
1,24 985,93
0,23
1,25 985,70
0,24
1,25 985,46
0,25
1,26 985,21
0,26
1,26 984,95
0,27
1,27 984,68
0,28
1,27 984,40
0,29
10
1,16 986,06
0,16
1,17 985,90
0,17
1,18 985,73
0,18
1,19 985,55
0,19
1,19 985,36
0,21
1,20 985,15
0,21
1,21 984,94
0,23
1,22 984,71
0,24
1,23 984,47
0,24
1,23 984,23
0,26
1,24 983,97
0,27
1,25 983,70
0,28
1,26 983,42
0,28
1,26 983,14
0,30
11
1,13 984,93
0,16
1,13 984,77
0,18
1,14 984,59
0,19
1,15 984,40
0,20
1,16 984,20
0,22
1,17 983,98
0,22
1,10 983,76
0,24
1,19 983,52
0,24
1,19 983,28
0,26
1,21 983,02
0,25
1,20 982,77
0,29
1,22 982,48
0,28
1,22 982,20
0,30
1,24 981,90
0,30
1,09
1,11
1,12
1,13
1,14
1,14
1,16
1,16
1,18
1,18
1,20
1,20
1,21
1,22
35
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
0
t
27 996,58
0,27
28 996,31
0,28
29 996,03
0,28
30 995,75
0,30
31 995,45
0,31
32 995,14
0,31
33 994,83
0,32
34 994,51
0,33
35 994,18
0,34
36 993,84
0,35
37 993,49
0,36
38 993,13
0,36
39 992,77
0,37
40 992,40
1,50
1,50
1,50
1,51
1,51
1,51
1,51
1,52
1,52
1,53
1,53
1,53
1,54
1,54
1
995,08
0,27
994,81
0,28
994,53
0,29
994,24
0,30
993,94
0,31
993,63
0,31
993,32
0,33
992,99
0,33
992,66
0,35
992,31
0,35
991,96
0,36
991,60
0,37
991,23
0,37
990,86
1,47
1,47
1,47
1,47
1,47
1,47
1,48
1,48
1,49
1,49
1,50
1,50
1,50
1,51
2
993,61
0,27
993,34
0,28
993,06
0,29
992,77
0,30
992,47
0,31
992,16
0,32
991,84
0,33
991,51
0,34
991,17
0,35
990,82
0,36
990,46
0,36
990,10
0,37
989,73
0,38
989,35
1,44
1,44
1,45
1,45
1,45
1,46
1,46
1,46
1,47
1,47
1,46
1,47
1,47
1,48
3
992,17
0,27
991,90
0,29
991,61
0,29
991,32
0,30
991,02
0,32
990,70
0,32
990,38
0,33
990,05
0,35
989,70
0,35
989,35
0,35
989,00
0,37
988,63
0,37
988,26
0,39
987,87
1,41
1,42
1,41
1,42
1,43
1,42
1,42
1,44
1,43
1,43
1,44
1,44
1,45
1,44
4
990,76
0,28
990,48
0,28
990,20
0,30
989,90
0,31
989,59
0,31
989,28
0,32
988,96
0,35
988,61
0,34
988,27
0,35
987,92
0,36
987,56
0,37
987,19
0,38
986,81
0,38
986,43
1,38
1,38
1,39
1,39
1,39
1,40
1,41
1,40
1,41
1,41
1,41
1,41
1,41
1,42
Tria alcoolic n %
5
6
989,38 1,35 988,03
0,28
0,29
989,10 1,36 987,74
0,29
0,29
988,81 1,36 987,45
0,30
0,31
988,51 1,37 987,14
0,31
0,31
988,20 1,37 986,83
0,32
0,32
987,88 1,37 986,51
0,33
0,33
987,55 1,37 986,18
0,34
0,35
987,21 1,38 985,83
0,35
0,35
986,86 1,38 985,48
0,35
0,35
986,51 1,38 985,13
0,36
0,37
986,15 1,39 984,76
0,37
0,37
985,78 1,39 984,39
0,38
0,38
985,40 1,39 984,01
0,39
0,39
985,01 1,39 983,62
vol.
7
1,33 986,70
0,29
1,33 986,41
0,30
1,34 986,11
0,31
1,34 985,80
0,31
1,34 985,49
0,33
1,35 985,16
0,34
1,36 984,82
0,35
1,36 984,47
0,35
1,36 984,12
0,36
1,37 983,76
0,37
1,37 983,39
0,37
1,37 983,02
0,39
1,38 982,63
0,39
1,38 982,24
1,31
1,31
1,32
1,32
1,33
1,33
1,34
1,33
1,34
1,34
1,35
1,36
1,35
1,36
8
985,39
0,29
985,10
0,31
984,79
0,31
984,48
0,32
984,16
0,33
983,83
0,35
983,48
0,34
983,14
0,36
982,78
0,36
982,42
0,38
982,04
0,38
981,66
0,38
981,28
0,40
980,88
9
1,28 984,11
0,30
1,29 983,81
0,31
1,29 983,50
0,32
1,30 983,18
0,33
1,31 982,85
0,34
1,32 982,51
0,35
1,32 982,16
0,35
1,33 981,81
0,36
1,33 981,45
0,37
1,34 981,08
0,37
1,33 980,71
0,39
1,34 980,32
0,39
1,35 979,93
0,39
1,34 979,54
10
1,27 982,84
0,31
1,28 982,53
0,31
1,28 982,22
0,32
1,28 981,90
0,34
1,29 981,56
0,35
1,30 981,21
0,35
1,30 980,86
0,36
1,31 980,50
0,36
1,31 980,14
0,37
1,31 919,11
0,39
1,33 979,38
0,38
1,32 979,00
0,40
1,33 978,60
0,40
1,34 978,20
11
1,24 981,60
0,32
1,25 981,28
0,32
1,26 980,96
0,33
1,27 980,63
0,34
1,27 980,29
0,36
1,28 979,93
0,35
1,28 979,58
0,37
1,29 979,21
0,37
1,30 978,84
0,38
1,31 978,46
0,39
1,31 978,07
0,39
1,32 977,68
0,40
1,32 977,28
0,41
1,33 976,87
1,23
1,23
1,24
1,25
1,26
1,26
1,28
1,28
1,29
1,29
1,30
1,31
1,32
1,32
36
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.2.1
MA-MD-AS312-01-TALVOL
TABELUL I
(continuare)
10
t
0 986,93
-0,02
1 986,95
-0,01
2 986,96
0,01
3 986,95
0,03
4 986,92
0,04
5 986,88
0,05
6 986,83
0,08
7 986,75
0,08
8 986,67
0,10
9 986,57
0,11
10 986,46
0,12
11 986,34
0,13
12 986,21
0,15
13 986,06
0,16
14 985,90
0,17
15 985,73
0,18
16 985,55
0,19
1,00
1,01
1,02
1,03
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
1,09
1,10
1,11
1,12
1,13
1,13
1,14
1,15
11
985,93
-0,01
985,94
0,00
985,94
0,02
985,92
0,04
985,88
0,05
985,83
0,06
985,77
0,09
985,68
0,09
985,59
0,11
985,48
0,12
985,36
0,13
985,23
0,14
985,09
0,16
984,93
0,16
984,77
0,18
984,59
0,19
984,40
0,20
0,95
0,97
0,98
1,00
1,00
1,01
1,03
1,03
1,05
1,06
1,06
1,07
1,09
1,09
1,11
1,12
1,13
12
984,98
0,01
984,97
0,01
984,96
0,04
984,92
0,04
984,88
0,06
984,82
0,08
984,74
0,09
984,65
0,11
984,54
0,12
984,42
0,12
984,30
0,14
984,16
0,16
984,00
0,16
983,84
0,18
983,66
0,19
983,47
0,20
983,27
0,21
0,92
0,92
0,94
0,95
0,97
0,98
0,99
1,00
1,02
1,02
1,04
1,06
1,06
1,08
1,08
1,09
1,11
13
984,06
0,01
984,05
0,03
984,02
0,05
983,97
0,06
983,91
0,07
983,84
0,09
983,75
0,10
983,65
0,13
983,52
0,12
983,40
0,14
983,26
0,16
983,10
0,16
982,94
0,18
982,76
0,18
982,58
0,20
982,38
0,22
982,16
0,22
0,88
0,90
0,91
0,92
0,93
0,95
0,96
0,98
0,98
1,00
1,02
1,02
1,04
1,05
1,07
1,08
1,08
14
983,18
0,03
983,15
0,04
983,11
0,06
983,05
0,07
982,98
0,09
982,89
0,10
982,79
0,12
982,67
0,13
982,54
0,14
982,40
0,16
982,24
0,16
982,08
0,18
981,90
0,19
981,71
0,20
981,51
0,21
981,30
0,22
981,08
0,23
0,84
0,85
0,88
0,89
0,91
0,92
0,94
0,95
0,96
0,98
0,99
1,00
1,01
1,02
1,04
1,05
1,07
Tria alcoolic n %
15
16
982,34 0,80 981,54
0,04
0,07
982,30 0,83 981,47
0,07
0,08
982,23 0,84 981,39
0,07
0,09
982,16 0,86 981,30
0,09
0,10
982,07 0,87 981,20
0,10
0,12
981,97 0,89 981,08
0,12
0,13
981,85 0,90 980,95
0,13
0,15
981,72 0,92 980,80
0,14
0,15
981,58 0,93 980,65
0,16
0,18
981,42 0,95 980,47
0,17
0,18
981,25 0,96 980,29
0,17
0,19
981,08 0,98 980,10
0,19
0,21
980,89 1,00 979,89
0,20
0,21
980,69 1,01 979,68
0,22
0,23
980,47 1,02 979,45
0,22
0,24
960,25 1,04 979,21
0,24
0,24
980,01 1,04 978,97
0,24
0,26
vol.
17
0,78 980,76
0,08
0,79 980,68
0,10
0,81 980,58
0,11
0,83 980,47
0,12
0,85 980,35
0,14
0,87 980,21
0,14
0,88 980,07
0,16
0,89 979,91
0,18
0,92 979,73
0,19
0,93 979,54
0,20
0,95 979,34
0,20
0,96 979,14
0,22
0,97 978,92
0,23
0,99 978,69
0,24
1,00 978,45
0,25
1,01 978,20
0,27
1,04 977,93
0,27
0,75
0,77
0,79
0,81
0,83
0,84
0,87
0,89
0,90
0,92
0,92
0,95
0,97
0,98
1,00
1,01
1,02
18
980,01
0,10
979,91
0,12
979,79
0,13
979,66
0,14
979,52
0,15
979,37
0,17
979,20
0,18
979,02
0,19
978,83
0,21
978,62
0,20
978,42
0,23
978,19
0,24
977,95
0,24
977,71
0,26
977,45
0,26
977,19
0,28
976,91
0,29
19
0,73 979,28
0,12
0,75 979,16
0,14
0,77 979,02
0,15
0,79 978,87
0,16
0,81 978,71
0,17
0,83 978,54
0,19
0,85 978,35
0,19
0,86 978,16
0,21
0,88 977,95
0,22
0,89 977,73
0,23
0,92 977,50
0,25
0,94 977,25
0,25
0,95 977,00
0,26
0,97 976,74
0,27
0,98 976,47
0,28
1,00 976,19
0,30
1,02 975,89
0,30
20
0,72 978,56
0,14
0,74 978,42
0,16
0,76 978,26
0,17
0,78 978,09
0,18
0,80 977,91
0,19
0,82 977,72
0,21
0,84 977,51
0,21
0,86 977,30
0,23
0,88 977,07
0,24
0,90 976,83
0,24
0,91 976,59
0,27
0,93 976,32
0,27
0,95 976,05
0,28
0,97 975,77
0,28
0,98 975,49
0,30
1,00 975,19
0,31
1,01 974,88
0,32
21
0,70 977,86
0,17
0,73 977,69
0,18
0,75 977,51
0,19
0,77 977,32
0,20
0,79 977,12
0,22
0,82 976,90
0,22
0,83 976,68
0,23
0,85 976,45
0,25
0,87 976,20
0,26
0,89 975,94
0,26
0,91 975,68
0,29
0,93 975,39
0,28
0,94 975,11
0,30
0,96 974,81
0,30
0,98 975,51
0,32
1,00 974,19
0,32
1,01 973,87
0,33
0,70
0,72
0,74
0,77
0,79
0,80
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,92
0,95
0,96
0,98
1,00
1,02
37
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
10
t
17 985,36
0,21
18 985,15
0,21
19 984,94
0,23
20 984,71
0,24
21 984,47
0,24
22 984,23
0,26
23 983,97
0,27
24 983,70
0,28
25 983,42
0,28
26 983,14
0,30
27 982,84
0,31
28 982,53
0,31
29 982,22
0,32
30 981,90
0,34
1,16
1,17
1,18
1,19
1,19
1,21
1,20
1,22
1,22
1,24
1,24
1,25
1,26
1,27
11
984,20
0,22
983,98
0,22
983,76
0,24
983,52
0,24
983,28
0,26
983,02
0,26
982,77
0,29
982,48
0,28
982,20
0,30
981,90
0,30
981,60
0,32
981,28
0,32
980,96
0,33
980,63
0,34
1,14
1,14
1,16
1,16
1,18
1,18
1,20
1,20
1,21
1,22
1,23
1,23
1,24
1,25
12
983,06
0,22
982,84
0,24
982,60
0,24
982,36
0,26
982,10
0,28
981,84
0,27
981,57
0,29
981,28
0,29
980,99
0,31
980,68
0,31
980,37
0,32
980,05
0,33
979,72
0,34
979,38
0,35
1,12
1,13
1,13
1,15
1,15
1,17
1,18
1,18
1,20
1,20
1,21
1,22
1,23
1,24
13
981,94
0,23
981,71
0,24
981,47
0,26
981,21
0,26
980,95
0,29
980,67
0,28
980,39
0,29
980,10
0,31
979,79
0,31
979,48
0,32
979,16
0,33
978,83
0,34
978,49
0,35
978,14
0,36
1,09
1,11
1,12
1,13
1,14
1,15
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
1,21
1,22
1,23
14
980,85
0,25
980,60
0,25
980,35
0,27
980,08
0,27
978,81
0,30
979,52
0,29
979,23
0,30
978,93
0,32
978,61
0,32
978,29
0,33
977,96
0,34
977,62
0,35
977,27
0,36
976,91
0,37
1,08
1,09
1,10
1,11
1,12
1,13
1,15
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
1,21
1,22
Tria alcoolic n %
15
16
979,77 1,06 978,71
0,26
0,27
979,51 1,07 978,44
0,26
0,28
979,25 1,09 978,16
0,28
0,29
978,97 1,10 977,87
0,28
0,29
978,69 1,11 977,58
0,31
0,33
978,39 1,12 977,27
0,31
0,32
978,08 1,13 976,95
0,31
0,33
977,77 1,15 976,62
0,33
0,33
977,44 1,15 976,29
0,33
0,35
977,11 1,17 975,94
0,34
0,35
976,77 1,18 975,59
0,35
0,36
976,42 1,19 975,23
0,36
0,37
976,06 1,20 974,86
0,37
0,38
975,69 1,21 974,48
0,38
0,40
vol.
17
1,05 977,66
0,28
1,06 977,38
0,29
1,07 977,09
0,30
1,08 976,79
0,31
1,10 976,48
0,33
1,12 976,15
0,33
1,13 975,82
0,33
1,13 975,49
0,35
1,15 975,14
0,36
1,16 974,78
0,36
1,17 974,42
0,38
1,19 974,04
0,38
1,20 973,66
0,40
1,22 973,26
0,40
1,04
1,05
1,07
1,08
1,10
1,10
1,12
1,14
1,15
1,16
1,18
1,18
1,20
1,21
18
976,62
0,29
976,33
0,31
976,02
0,31
975,71
0,33
975,38
0,35
975,05
0,35
974,70
0,35
974,35
0,36
973,99
0,37
973,62
0,38
973,24
0,38
972,86
0,40
972,46
0,41
972,05
0,41
19
1,03 975,59
0,31
1,05 975,28
0,32
1,06 974,96
0,33
1,08 974,63
0,34
1,09 974,29
0,35
1,11 973,94
0,35
1,11 973,59
0,37
1,13 973,22
0,37
1,14 972,85
0,39
1,16 972,46
0,39
1,17 972,07
0,40
1,19 971,67
0,40
1,19 971,27
0,43
1,21 970,84
0,42
20
1,03 974,56
0,32
1,04 974,24
0,34
1,06 973,90
0,34
1,07 973,56
0,36
1,09 973,20
0,36
1,10 972,84
0,37
1,12 972,47
0,38
1,13 972,09
0,39
1,15 971,70
0,40
1,16 971,30
0,40
1,17 970,90
0,41
1,18 970,49
0,42
1,20 970,07
0,44
1,21 969,63
0,44
21
1,02 973,54
0,35
1,05 973,19
0,35
1,06 972,84
0,36
1,08 972,48
0,37
1,09 972,11
0,37
1,10 971,74
0,39
1,12 972,47
0,40
1,14 970,95
0,40
1,15 970,55
0,41
1,16 970,14
0,42
1,18 969,72
0,43
1,20 969,29
0,43
1,21 968,86
0,45
1,22 968,41
0,45
1,04
1,05
1,06
1,08
1,09
1,12
1,12
1,14
1,16
1,17
1,18
1,20
1,22
1,23
38
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
t
10
31 981,56
0,35
32 981,21
0,35
33 980,86
0,36
34 980,50
0,36
35 980,14
0,37
36 979,77
0,39
37 978,38
0,38
38 979,00
0,40
39 978,60
0,40
40 978,20
11
1,27 980,29
0,36
1,28 979,93
0,35
1,28 979,58
0,37
1,29 979,21
0,37
1,30 978,84
0,38
1,31 978,46
0,39
1,31 978,07
0,39
1,32 977,68
0,40
1,32 977,28
0,41
1,33 976,87
12
1,26 979,03
0,36
1,26 978,67
0,37
1,28 978,30
0,37
1,28 977,93
0,38
1,29 977,55
0,38
1,29 977,17
0,40
1,30 976,77
0,40
1,31 976,37
0,41
1,32 975,96
0,41
1,32 975,55
13
1,25 977,78
0,37
1,26 977,41
0,37
1,26 977,04
0,38
1,27 976,66
0,39
1,28 976,27
0,39
1,29 975,88
0,40
1,29 975,48
0,41
1,30 975,07
0,42
1,31 974,65
0,42
1,32 974,23
14
1,24 976,54
0,38
1,25 976,16
0,38
1,26 975,78
0,39
1,27 975,39
0,39
1,27 975,00
0,40
1,28 974,60
0,41
1,29 974,19
0,42
1,30 973,77
0,42
1,30 973,35
0,43
1,31 972,92
15
1,23 975,31
0,39
1,24 974,92
0,39
1,25 974,53
0,40
1,26 974,13
0,40
1,27 973,73
0,41
1,28 973,32
0,42
1,29 972,90
0,43
1,30 972,47
0,43
1,31 972,04
0,44
1,32 971,60
16
1,23 974,08
0,39
1,23 973,69
0,40
1,24 973,29
0,41
1,25 972,88
0,42
1,27 972,46
0,42
1,28 972,04
0,43
1,29 971,61
0,44
1,30 971,17
0,44
1,31 970,73
0,45
1,32 970,28
17
1,22 972,86
0,40
1,23 972,46
0,42
1,25 972,04
0,42
1,26 971,62
0,42
1,26 971,20
0,44
1,28 970,76
0,44
1,29 970,32
0,45
1,30 969,87
0,45
1,31 969,42
0,46
1,32 968,96
1,22
1,24
1,24
1,25
1,27
1,28
1,29
1,30
1,32
1,33
18
971,64
0,42
971,22
0,42
970,80
0,43
970,37
0,44
969,93
0,45
969,48
0,45
969,03
0,46
968,57
0,47
968,10
0,47
967,63
19
1,22 970,42
0,43
1,23 969,99
0,44
1,25 969,55
0,44
1,26 969,11
0,46
1,28 968,65
0,45
1,28 968,20
0,47
1,30 967,73
0,47
1,31 967,26
0,48
1,32 966,78
0,48
1,33 966,30
20
1,23 969,19
0,44
1,24 968,75
0,45
1,25 968,30
0,46
1,27 967,84
0,46
1,27 967,38
0,47
1,29 966,91
0,48
1,30 966,43
0,49
1,32 965,94
0,49
1,33 965,45
0,49
1,34 964,96
21
1,23 967,96
0,46
1,25 967,50
0,46
1,26 967,04
0,47
1,27 966,57
0,48
1,29 966,09
0,48
1,30 965,61
0,49
1,31 965,12
0,50
1,32 964,62
0,50
1,33 964,12
0,51
1,35 963,61
1,24
1,25
1,27
1,29
1,30
1,32
1,33
1,34
1,36
1,37
39
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
t
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
20
978,56
0,14
978,42
0,16
978,26
0,17
978,09
0,18
977,91
0,19
977,72
0,21
977,51
0,21
977,30
0,23
977,07
0,24
976,83
0,24
976,59
0,27
976,32
0,27
976,05
0,28
975,77
0,28
975,49
0,30
0,70
0,73
0,75
0,77
0,79
0,82
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,93
0,94
0,96
0,98
21
977,86
0,17
977,69
0,18
977,51
0,19
977,32
0,20
977,12
0,22
976,90
0,22
976,68
0,23
976,45
0,25
976,20
0,26
975,94
0,26
975,68
0,29
975,39
0,28
975,11
0,30
974,81
0,30
974,51
0,32
0,70
0,72
0,74
0,77
0,79
0,80
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,92
0,95
0,96
0,98
22
977,16
0,19
976,97
0,20
976,77
0,22
976,55
0,22
976,33
0,23
976,10
0,25
975,85
0,25
975,60
0,27
975,33
0,28
975,05
0,28
974,77
0,30
974,47
0,31
974,16
0,31
973,85
0,32
973,53
0,34
0,69
0,72
0,75
0,76
0,79
0,82
0,83
0,86
0,87
0,89
0,91
0,94
0,95
0,97
0,99
23
976,47
0,22
976,25
0,23
976,02
0,23
975,79
0,25
975,54
0,26
975,28
0,26
975,02
0,28
974,74
0,28
974,46
0,30
974,16
0,30
973,86
0,33
973,53
0,32
973,21
0,33
972,88
0,34
972,54
0,35
0,71
0,73
0,75
0,78
0,80
0,81
0,84
0,86
0,89
0,90
0,93
0,94
0,96
0,98
1,00
24
975,76
0,24
975,52
0,25
975,27
0,26
975,01
0,27
974,94
0,27
974,47
0,29
974,18
0,30
973,88
0,31
973,57
0,31
973,26
0,33
972,93
0,34
972,59
0,34
972,25
0,35
971,90
0,36
971,54
0,37
0,71
0,73
0,76
0,78
0,80
0,83
0,85
0,87
0,89
0,92
0,93
0,95
0,97
0,99
1,01
Tria alcoolic n %
25
26
975,05 0,72 974,33
0,26
0,29
974,79 0,75 974,04
0,28
0,30
974,51 0,77 973,74
0,28
0,31
974,23 0,80 973,43
0,29
0,31
973,94 0,82 973,12
0,30
0,33
973,64 0,85 972,79
0,31
0,33
973,33 0,87 972,46
0,32
0,34
973,01 0,89 972,12
0,33
0,35
972,68 0,91 971,77
0,34
0,35
972,34 0,92 971,42
0,34
0,37
972,00 0,95 971,05
0,36
0,38
971,64 0,97 970,67
0,36
0,38
971,28 0,99 970,29
0,37
0,39
970,91 1,01 969,90
0,38
0,40
970,53 1,03 969,50
0,39
0,40
voi.
27
0,75 973,58
0,31
0,77 973,27
0,32
0,79 972,95
0,33
0,81 972,62
0,34
0,84 972,28
0,35
0,86 971,93
0,35
0,86 971,58
0,36
0,90 971,22
0,37
0,92 970,85
0,38
0,95 970,47
0,39
0,97 970,08
0,40
0,99 969,68
0,40
1,01 969,28
0,41
1,03 968,87
0,41
1,04 968,46
0,42
0,77
0,80
0,82
0,85
0,87
0,89
0,91
0,93
0,96
0,97
0,99
1,01
1,03
1,05
1,07
28
972,81
0,34
972,47
0,34
972,13
0,36
971,77
0,36
971,41
0,37
971,04
0,37
970,67
0,38
970,29
0,40
969,89
0,39
969,50
0,41
969,09
0,42
968,67
0,42
968,25
0,43
967,82
0,43
967,39
0,44
29
0,80 972,01
0,36
0,82 971,65
0,37
0,85 971,28
0,38
0,87 970,90
0,38
0,89 970,52
0,39
0,91 970,13
0,40
0,94 969,73
0,40
0,96 969,33
0,42
0,98 968,91
0,41
1,00 968,50
0,43
1,02 968,07
0,44
1,04 967,63
0,44
1,06 967,19
0,45
1,08 966,74
0,45
1,10 966,29
0,46
30
0,83 971,18
0,39
0,86 970,79
0,39
0,88 970,40
0,40
0,90 970,00
0,40
0,92 969,60
0,42
0,95 969,18
0,42
0,97 968,76
0,42
0,99 968,34
0,43
1,00 967,91
0,44
1,03 967,47
0,45
1,05 967,02
0,46
1,07 966,56
0,45
1,08 966,11
0,47
1,10 965,64
0,47
1,12 965,17
0,48
31
0,87 970,31
0,41
0,89 969,90
0,41
0,91 969,49
0,42
0,93 969,07
0,43
0,96 968,64
0,44
0,98 968,20
0,44
1,00 967,76
0,44
1,02 967,32
0,46
1,05 966,86
0,46
1,07 966,40
0,46
1,08 965,94
0,47
1,09 965,47
0,48
1,12 964,99
0,49
1,14 964,50
0,49
1,16 964,01
0,49
0,90
0,92
0,95
0,98
1,00
1,01
1,03
1,06
1,07
1,09
1,12
1,13
1,15
1,17
1,19
40
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.2.1
MA-MD-AS312-01-TALVOL
TABELUL I
(continuare)
t
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
20
975,19
0,31
974,88
0,32
974,56
0,32
974,24
0,34
973,90
0,34
973,56
0,36
973,20
0,36
972,84
0,37
972,47
0,38
972,09
0,39
971,70
0,40
971,30
0,40
970,90
0,41
970,49
0,42
970,07
0,44
969,63
0,44
969,19
0,44
1,00
1,01
1,02
1,05
1,06
1,08
1,09
1,10
1,12
1,14
1,15
1,16
1,18
1,20
1,21
1,22
1,23
21
974,19
0,32
973,87
0,33
973,54
0,35
973,19
0,35
972,84
0,36
972,48
0,37
972,11
0,37
971,74
0,39
971,35
0,40
970,95
0,40
970,55
0,41
970,14
0,42
969,72
0,43
969,29
0,43
968,86
0,45
968,41
0,45
967,96
0,46
1,00
1,02
1,04
1,05
1,06
1,08
1,09
1,12
1,13
1,14
1,16
1,17
1,18
1,20
1,22
1,23
1,24
22
973,19
0,34
972,85
0,35
972,50
0,36
972,14
0,36
971,78
0,38
971,40
0,38
971,02
0,40
970,62
0,40
970,22
0,41
969,81
0,42
969,39
0,42
968,97
0,43
968,54
0,45
968,09
0,45
967,64
0,46
967,18
0,46
966,72
0,47
1,00
1,02
1,04
1,05
1,08
1,09
1,11
1,12
1,14
1,15
1,16
1,18
1,20
1,21
1,23
1,24
1,26
23
972,19
0,36
971,83
0,37
971,46
0,37
971,09
0,39
970,70
0,39
970,31
0,40
969,91
0,41
969,50
0,42
969,08
0,42
968,66
0,43
968,23
0,44
967,79
0,45
967,34
0,46
966,88
0,47
966,41
0,47
965,94
0,48
965,46
0,48
1,02
1,03
1,05
1,07
1,08
1,10
1,12
1,13
1,14
1,16
1,18
1,20
1,21
1,22
1,24
1,26
1,27
24
971,17
0,37
970,80
0,39
970,41
0,39
970,02
0,40
969,62
0,41
969,21
0,42
968,79
0,42
968,37
0,43
967,94
0,44
967,50
0,45
967,05
0,46
966,59
0,46
966,13
0,47
965,66
0,49
965,17
0,49
964,68
0,49
964,19
0,50
1,03
1,05
1,06
1,08
1,10
1,11
1,13
1,15
1,17
1,18
1,20
1,21
1,23
1,24
1,25
1,26
1,28
Tria alcoolic n %
25
26
970,14 1,04 969,10
0,39
0,41
969,75 1,06 968,69
0,40
0,42
969,35 1,08 968,27
0,41
0,43
968,94 1,10 967,84
0,42
0,43
968,52 1,11 967,41
0,42
0,45
968,10 1,14 966,96
0,44
0,45
967,66 1,15 966,51
0,44
0,45
967,22 1,16 966,06
0,45
0,47
966,77 1,18 965,59
0,45
0,47
966,32 1,20 965,12
0,47
0,48
965,85 1,21 964,64
0,47
0,49
965,38 1,23 964,15
0,48
0,49
964,90 1,24 963,66
0,48
0,50
964,42 1,26 963,16
0,50
0,52
963,92 1,28 962,64
0,50
0,51
963,42 1,29 962,13
0,51
0,52
962,91 1,30 961,61
0,51
0,53
voi.
27
1,06 968,04
0,43
1,08 967,61
0,44
1,10 967,17
0,45
1,12 966,72
0,45
1,14 966,27
0,46
1,15 965,81
0,46
1,16 965,35
0,48
1,19 964,87
0,48
1,20 964,39
0,49
1,22 963,90
0,49
1,23 963,41
0,50
1,24 962,91
0,51
1,26 962,40
0,52
1,28 961,88
0,53
1,29 961,35
0,53
1,31 960,82
0,53
1,32 960,29
0,54
1,09
1,11
1,12
1,14
1,16
1,17
1,20
1,21
1,22
1,24
1,26
1,27
1,29
1,31
1,31
1,33
1,35
28
966,95
0,45
966,50
0,45
966,05
0,47
965,58
0,47
965,11
0,47
964,64
0,49
964,15
0,49
963,66
0,49
963,17
0,51
962,66
0,51
962,15
0,51
961,64
0,53
961,11
0,54
960,57
0,53
960,04
0,55
959,49
0,55
958,94
0,55
29
1,12 965,83
0,46
1,13 965,37
0,48
1,16 964,89
0,48
1,17 964,41
0,48
1,18 963,93
0,49
1,20 963,44
0,50
1,21 962,94
0,51
1,23 962,43
0,51
1,25 961,92
0,52
1,26 961,40
0,53
1,28 960,87
0,53
1,30 960,34
0,54
1,31 959,80
0,56
1,33 959,24
0,55
1,35 958,69
0,55
1,35 958,14
0,57
1,37 957,57
0,57
30
1,14 964,69
0,48
1,16 964,21
0,50
1,18 963,71
0,49
1,19 963,22
0,50
1,21 962,72
0,51
1,23 962,21
0,52
1,25 961,69
0,52
1,26 961,17
0,53
1,28 960,64
0,54
1,30 960,10
0,54
1,31 959,56
0,54
1,32 959,02
0,56
1,34 958,46
0,57
1,35 957,89
0,56
1,36 957,33
0,58
1,39 956,75
0,58
1,40 956,17
0,58
31
1,17 963,52
0,51
1,20 963,01
0,50
1,20 962,51
0,52
1,23 961,99
0,52
1,25 961,47
0,52
1,26 960,95
0,53
1,27 960,42
0,54
1,29 959,88
0,55
1,31 959,33
0,55
1,32 958,78
0,55
1,33 958,23
0,57
1,36 957,66
0,56
1,36 957,10
0,59
1,38 956,51
0,58
1,40 955,93
0,58
1,40 955,35
0,60
1,42 954,75
0,59
1,21
1,22
1,24
1,25
1,27
1,29
1,31
1,32
1,33
1,35
1,37
1,38
1,40
1,41
1,42
1,44
1,44
41
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL I
(continuare)
t
32
33
34
35
36
37
38
39
40
20
968,75
0,45
968,30
0,46
967,84
0,46
967,38
0,47
966,91
0,48
966,43
0,49
965,94
0,49
965,45
0,49
964,96
1,25
1,26
1,27
1,29
1,30
1,31
1,32
1,33
1,35
21
967,50
0,46
967,04
0,47
966,57
0,48
966,09
0,48
965,61
0,49
965,12
0,50
964,62
0,50
964,12
0,51
963,61
1,25
1,27
1,29
1,30
1,32
1,33
1,34
1,36
1,37
22
966,25
0,48
965,77
0,49
965,28
0,49
964,79
0,50
964,29
0,50
963,79
0,51
963,28
0,52
962,76
0,52
962,24
1,27
1,28
1,29
1,31
1,32
1,34
1,35
1,36
1,38
23
964,98
0,49
964,49
0,50
963,99
0,51
963,48
0,51
962,97
0,52
962,45
0,52
961,93
0,53
961,40
0,54
960,86
1,29
1,30
1,31
1,32
1,34
1,35
1,37
1,38
1,39
24
963,69
0,50
963,19
0,51
962,68
0,52
962,16
0,53
961,63
0,53
961,10
0,54
960,56
0,54
960,02
0,55
959,47
1,29
1,31
1,33
1,34
1,35
1,37
1,38
1,40
1,41
Tria alcoolic n %
25
26
962,40 1,32 961,08
0,52
0,53
961,88 1,33 960,55
0,53
0,54
961,35 1,34 960,01
0,53
0,55
960,82 1,36 959,46
0,54
0,55
960,28 1,37 958,91
0,55
0,56
959,73 1,38 958,35
0,55
0,57
959,18 1,40 957,78
0,56
0,57
958,62 1,41 957,21
0,56
0,58
958,06 1,43 956,63
voi.
27
1,33 959,75
0,55
1,35 959,20
0,56
1,37 958,64
0,56
1,38 958,08
0,57
1,40 957,51
0,57
1,41 956,94
0,58
1,42 956,36
0,58
1,43 955,78
0,59
1,44 955,19
1,36
1,38
1,38
1,40
1,41
1,43
1,44
1,46
1,47
28
958,39
0,57
957,82
0,56
957,26
0,58
956,68
0,58
956,10
0,59
955,51
0,59
954,92
0,60
954,32
0,60
953,72
29
1,39 957,00
0,57
1,39 956,43
0,59
1,42 955,84
0,58
1,42 955,26
0,60
1,44 954,66
0,60
1,45 954,06
0,60
1,46 953,46
0,61
1,47 952,85
0,62
1,49 952,23
30
1,41 955,59
0,59
1,43 955,00
0,59
1,43 954,41
0,60
1,45 953,81
0,61
1,46 953,20
0,61
1,47 952,59
0,62
1,49 951,97
0,62
1,50 951,35
0,63
1,51 950,72
31
1,43 954,16
0,61
1,45 953,55
0,60
1,46 952,95
0,62
1,48 952,33
0,62
1,49 951,71
0,62
1,50 951,09
0,63
1,51 950,46
0,64
1,53 949,82
0,64
1,54 949,18
1,46
1,47
1,49
1,50
1,51
1,53
1,54
1,55
1,57
42
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II

Tabelul coreciilor care se aplic triei alcoolice aparente pentru corectarea efectului temperaturii
Coreciile indicate mai jos se adun sau se scad din tria alcoolic aparent la t C (alcoolmetru din sticl obinuit)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
140
150
160
170
180
190
Se adun
Temperatura (0C)
0
0,76
0,81
0,85
0,88
0,90
0,91
0,92
0,91
0,89
0,86
0,82
0,78
0,72
0,66
0,59
0,51
0,42
0,33
0,23
0,12
1
0,77
0,83
0,87
0,91
0,92
0,93
0,94
0,93
0,91
0,88
0,84
0,79
0,74
0,67
0,60
0,52
0,43
0,33
0,23
0,12
2
0,82
0,87
0,92
0,95
0,97
0,98
0,98
0,97
0,94
0,91
0,87
0,82
0,76
0,69
0,62
0,53
0,44
0,34
0,23
0,12
3
0,87
0,92
0,97
1,00
1,02
1,03
1,02
1,01
0,98
0,95
0,91
0,86
0,79
0,72
0,64
0,55
0,46
0,35
0,24
0,12
4
0,95
1,00
1,04
1,07
1,09
1,10
1,09
1,07
1,04
1,01
0,96
0,90
0,83
0,76
0,67
0,58
0,48
0,37
0,25
0,13
Tria alcoolic aparent la t C

5
6
7
8
9 10 11
1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26
1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26
1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24
1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20
1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15
1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08
1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01
1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92
1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82
1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71
1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60
0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47
0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34
0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19
0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04
0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89
0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72
0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55
0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37
0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19
12
2,62
2,59
2,54
2,48
2,41
2,33
2,23
2,12
2,00
1,87
1,74
1,60
1,44
1,28
1,12
0,95
0,77
0,59
0,40
0,20
13
3,03
2,97
2,89
2,80
2,71
2,60
2,47
2,34
2,20
2,05
1,89
1,73
1,56
1,38
1,20
1,02
0,82
0,62
0,42
0,21
14
3,49
3,40
3,29
3,16
3,03
2,89
2,74
2,58
2,42
2,24
2,06
1,88
1,69
1,49
1,29
1,09
0,88
0,67
0,45
0,23
15
4,02
3,87
3,72
3,55
3,38
3,21
3,02
2,83
2,65
2,44
2,24
2,03
1,82
1,61
1,39
1,16
0,94
0,71
0,48
0,24
16
4,56
4,36
4,17
3,95
3,75
3,54
3,32
3,10
2,88
2,65
2,43
2,20
1,96
1,73
1,49
1,24
1,00
0,75
0,51
0,25
43
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
0
21
220
230
240
250
0,26
0,40
0,55
0,69
260
0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57
27
280
290
300
310
0
32
330
340
350
360
0
37
380
390
400
Se adun
Temperatura (0C)
TABELUL II
(continuare)
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16
0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26
0,27
0,41
0,56
0,71
1,03
1,21
1,39
1,57
0,28
0,42
0,58
0,73
1,07
1,25
1,43
1,61
0,29
0,44
0,60
0,76
1,11
1,29
1,47
1,66
0,30
0,45
0,62
0,79
1,15
1,33
1,52
1,72
0,31
0,47
0,64
0,82
1,19
1,38
1,58
1,78
0,32
0,49
0,67
0,85
1,23
1,43
1,63
1,84
0,34
0,51
0,70
0,89
1,28
1,49
1,70
1,91
0,36
0,54
0,73
0,93
1,34
1,55
1,76
1,98
0,37
0,57
0,77
0,97
1,40
1,62
1,84
2,07
0,39
0,60
0,81
1,02
1,46
1,69
1,92
2,15
0,41
0,63
0,85
1,07
1,53
1,77
2,01
2,25
0,44
0,66
0,89
1,13
1,60
1,85
2,10
2,35
0,47
0,70
0,94
1,19
1,68
1,93
2,19
2,45
0,49
0,74
0,99
1,25
1,76
2,02
2,29
2,56
0,52
0,78
1,04
1,31
1,84
2,11
2,39
2,67
1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94
1,94 2,00
2,20
2,41
2,62
2,06
2,27
2,48
2,70
2,13
2,34
2,56
2,78
2,20
2,42
2,64
2,86
2,27
2,50
2,72
2,95
2,35
2,58
2,81
3,05
2,44
2,67
2,91
3,16
2,53
2,77
3,02
3,27
2,63
2,88
3,13
3,39
2,74
2,99
3,25
3,51
2,86
3,12
3,38
3,64
2,97
3,24
3,51
3,78
3,09
3,37
3,65
3,93
3,22
3,51
3,79
4,08
2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37
3,13
3,36
3,59
3,82
3,23
3,47
3,70
3,94
3,33
3,57
3,81
4,06
3,43
3,68
3,93
4,18
3,54
3,79
4,05
4,31
3,65
3,91
4,17
4,44
3,78
4,03
4,30
4,57
3,91
4,17
4,44
4,71
4,04
4,31
4,58
4,86
4,18
4,46
4,74
5,02
4,33
4,61
4,90
5,19
4,49
4,77
5,06
5,36
4,65
4,94
5,23
5,53
44
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
00
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
140
150
160
170
180
190
Se adun
Temperatura (0C)
TABELUL II
(continuare)
14
3,49
3,40
3,29
3,16
3,03
2,89
2,74
2,58
2,42
2,24
2,06
1,88
1,69
1,49
1,29
1,09
0,88
0,67
0,45
0,23
15
4,02
3,87
3,72
3,55
3,38
3,21
3,02
2,83
2,65
2,44
2,24
2,03
1,82
1,61
1,39
1,16
0,94
0,71
0,48
0,24
16
4,56
4,36
4,17
3,95
3,75
3,54
3,32
3,10
2,88
2,65
2,43
2,20
1,96
1,73
1,49
1,24
1,00
0,75
0,51
0,25
17
5,11
4,86
4,61
4,36
4,11
3,86
3,61
3,36
3,11
2,86
2,61
2,36
2,10
1,84
1,58
1,32
1,06
0,80
0,53
0,27
18
5,65
5,35
5,05
4,77
4,48
4,20
3,91
3,63
3,35
3,07
2,80
2,52
2,24
1,96
1,68
1,40
1,12
0,84
0,56
0,28

19 20 21 22 23 24 25
6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07
5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62
5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18
5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74
4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31
4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89
4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47
3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05
3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64
3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23
2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83
2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43
2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04
2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65
1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26
1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88
1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50
0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12
0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74
0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37
26
8,20
7,75
7,31
6,86
6,43
6,00
5,58
5,15
4,74
4,32
3,91
3,50
3,10
2,71
2,31
1,92
1,53
1,14
0,76
0,38
27
8,30
7,85
7,40
6,97
6,53
6,10
5,67
5,24
4,81
4,39
3,98
3,57
3,16
2,76
2,36
1,96
1,56
1,17
0,78
0,39
28
8,36
7,91
7,47
7,03
6,59
6,16
5,73
5,30
4,87
4,45
4,03
3,62
3,21
2,80
2,39
1,98
1,58
1,18
0,79
0,40
29
8,39
7,95
7,51
7,07
6,63
6,20
5,77
5,34
4,92
4,50
4,08
3,66
3,25
2,83
2,42
2,01
1,60
1,20
0,80
0,40
30
8,40
7,96
7,53
7,09
6,66
6,23
5,80
5,37
4,95
4,53
4,11
3,69
3,27
2,85
2,44
2,03
1,62
1,21
0,81
0,41
45
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
210
220
230
240
250
260
270
280
290
300
310
320
330
340
350
360
370
380
390
400
Se adun
Temperatura (0C)
14
0,23
0,47
0,70
0,94
1,19
1,43
1,68
1,93
2,19
2,45
2,71
2,97
3,24
3,51
3,78
4,05
4,33
4,61
4,90
5,19
15
0,25
0,49
0,74
0,99
1,25
1,50
1,76
2,02
2,29
2,56
2,83
3,09
3,37
3,65
3,93
4,21
4,49
4,77
5,06
5,36
16
0,26
0,52
0,78
1,04
1,31
1,57
1,84
2,11
2,39
2,67
2,94
3,22
3,51
3,79
4,08
4,37
4,65
4,94
5,23
5,53
17
0,28
0,55
0,82
1,10
1,37
1,65
1,93
2,21
2,50
2,78
3,07
3,36
3,65
3,94
4,23
4,52
4,82
5,12
5,41
5,71
18
0,29
0,57
0,86
1,15
1,43
1,73
2,01
2,31
2,60
2,90
3,19
3,49
3,79
4,09
4,38
4,68
4,98
5,29
5,59
5,90
TABELUL II
(continuare)
19 20 21 22 23 24 25
0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37
0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74
0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10
1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46
1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83
1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19
2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55
2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90
2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26
3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62
3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98
3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33
3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68
4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03
4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38
4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73
5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09
5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43
5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78
6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13
26
0,38
0,75
1,12
1,50
1,87
2,24
2,61
2,98
3,34
3,70
4,07
4,43
4,79
5,15
5,50
5,86
6,22
6,57
6,93
7,28
27
0,38
0,76
1,15
1,53
1,90
2,28
2,66
3,03
3,40
3,77
4,15
4,51
4,88
5,25
5,61
5,97
6,33
6,69
7,06
7,41
28
0,39
0,78
1,17
1,55
1,94
2,32
2,70
3,08
3,46
3,84
4,22
4,59
4,97
5,34
5,71
6,08
6,44
6,81
7,18
7,54
29
0,39
0,79
1,18
1,57
1,97
2,35
2,74
3,13
3,51
3,90
4,28
4,66
5,04
5,42
5,80
6,17
6,54
6,92
7,29
7,66
30
0,40
0,80
1,19
1,59
1,99
2,38
2,77
3,17
3,55
3,95
4,33
4,72
5,10
5,49
5,87
6,25
6,63
7,01
7,39
7,76
46
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
Tabelul densitilor aparente ale amestecurilor de etanol i ap - aparate din sticl obinuit
Densiti la t C corectate pentru fora de ascensiune a aerului
t0
0
0 999,34
-0,09
1 999,43
-0,06
2 999,49
-0,05
3 999,54
-0,03
4 999,57
-0,02
5 999,59
0,00
6 999,59
0,01
7 999,58
0,03
8 999,55
0,04
9 999,51
0,06
10 999,45
0,07
11 999,38
0,09
12 999,29
0,09
13 999,20
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,52
1,51
1,51
1,51
1
997,82
-0,09
997,91
-0,06
997,97
-0,05
998,02
-0,03
998,05
-0,02
998,07
0,00
998,07
0,01
998,06
0,03
998,03
0,04
991,99
0,06
997,93
0,06
997,87
0,09
997,78
0,09
997,69
1,45
1,45
1,40
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
1,46
2
996,37
-0,09
996,46
-0,06
996,52
-0,04
996,56
-0,03
996,59
-0,02
996,61
0,00
996,61
0,01
996,60
0,03
996,57
0,04
996,53
0,06
996,47
0,06
996,41
0,09
996,32
0,09
996,23
1,39
1,40
1,40
1,40
1,40
1,40
1,41
1,41
1,41
1,41
1,41
1,42
1,42
1,42
3
994,98
-0,08
995,06
-0,06
995,12
-0,04
995,16
-0,03
995,19
-0,02
995,21
0,01
995,20
0,01
995,19
0,03
995,16
0,04
995,12
0,06
995,06
0,07
994,99
0,09
994,90
0,09
994,81
1,35
1,35
1,35
1,35
1,36
1,36
1,36
1,36
1,37
1,37
1,37
1,37
1,37
1,38
4
993,63
-0,08
993,71
-0,06
993,77
-0,04
993,81
-0,02
993,83
-0,02
993,85
0,01
993,84
0,01
993,83
0,04
993,79
0,04
993,75
0,06
993,69
0,07
993,62
0,09
993,53
0,10
993,43
1,29
1,29
1,30
1,30
1,30
1,31
1,31
1,32
1,32
1,32
1,33
1,33
1,33
1,33
Tria alcoolic n % voi.

5
6
992,34 1,24 991,10 1,18
-0,08
-0,07
992,42 1,25 991,17 1,20
-0,05
-0,05
992,47 1,25 991,22 1,21
-0,04
-0,03
992,51 1,26 991,25 1,21
-0,02
-0,02
992,53 1,26 991,27 1,22
-0,01
0,00
992,54 1,27 991,27 1,22
0,01
0,01
992,53 1,27 991,26 1,23
0,02
0,02
992,51 1,27 991,24 1,23
0,04
0,05
992,47 1,28 991,19 1,23
0,04
0,05
992,43 1,29 991,14 1,24
0,07
0,07
992,36 1,29 991,07 1,24
0,07
0,07
992,29 1,29 991,00 1,25
0,09
0,10
992,20 1,30 990,90 1,26
0,10
0,10
992,10 1,30 990,80 1,26
7
989,92
-0,05
989,97
-0,04
990,01
-0,03
990,04
-0,01
990,05
0,00
990,05
0,02
990,03
0,02
990,01
0,05
989,96
0,06
989,90
0,07
989,83
0,08
989,75
0,11
989,64
0,10
989,54
1,15
1,15
1,16
1,16
1,17
1,17
1,18
1,19
1,20
1,20
1,21
1,22
1,22
1,23
8
988,77
-0,05
988,82
-0,03
988,85
-0,03
988,88
0,00
988,88
0,00
988,88
0,03
988,85
0,03
988,82
0,06
988,76
0,06
988,70
0,08
988,62
0,09
988,53
0,11
988,42
0,11
988,31
9
1,09 987,68
-0,04
1,10 987,72
-0,02
1,11 987,74
-0,02
1,12 987,76
0,01
1,13 987,75
0,01
1,14 987,74
0,03
1,14 987,71
0,04
1,15 987,67
0,07
1,16 987,60
0,06
1,16 987,54
0,09
1,17 987,45
0,10
1,18 987,35
0,11
1,18 987,24
0,12
1,19 987,12
10
1,05 986,63
-0,03
1,06 986,66
-0,02
1,06 986,68
0,00
1,08 986,68
0,01
1,08 986,67
0,02
1,09 986,65
0,04
1,10 986,61
0,05
1,11 986,56
0,07
1,11 986,49
0,08
1,13 986,41
0,10
1,14 986,31
0,10
1,14 986,21
0,12
1,15 986,09
0,13
1,16 985,96
11
1,00 985,63
-0,02
1,01 985,65
-0,01
1,02 985,66
0,01
1,03 985,65
0,02
1,04 985,63
0,03
1,05 985,60
0,06
1,07 985,54
0,06
1,08 985,48
0,08
1,09 985,40
0,08
1,09 985,32
0,11
1,10 985,21
0,11
1,11 985,10
0,13
1,12 984,97
0,14
1,13 984,83
0,96
0,97
0,98
0,99
1,00
1,02
1,02
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
1,09
1,10
47
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
0
0,11
999,09
0,12
998,97
0,13
998,84
0,14
998,70
0,15
998,55
0,17
998,38
0,18
998,20
0,19
998,01
0,20
987,81
0,21
997,60
0,21
997,39
0,23
997,16
0,23
1,51
1,51
1,51
1,51
1,51
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1,50
1
0,11
997,58
0,12
997,46
0,13
997,33
0,14
997,19
0,15
997,04
0,16
996,88
0,18
996,70
0,19
996,51
0,20
996,31
0,21
996,10
0,21
995,89
0,23
995,66
0,23
1,46
1,46
1,46
1,46
1,47
1,47
1,47
1,47
1,46
1,46
1,47
1,47
2
0,11
996,12
0,12
996,00
0,13
995,87
0,14
995,73
0,16
995,57
0,16
995,41
0,18
995,23
0,19
995,04
0,19
994,85
0,21
994,64
0,22
994,42
0,23
994,19
0,23
1,42
1,42
1,42
1,42
1,42
1,42
1,42
1,42
1,43
1,43
3
0,11
994,70
0,12
994,58
0,13
994,45
0,14
994,31
0,16
994,15
0,16
993,99
0,18
993,81
0,19
993,62
0,20
993,42
0,21
993,21
0,22
1,38
1,38
1,39
1,39
1,39
1,39
1,40
1,40
1,40
1,40
1,43 992,99 1,40

0,23
1,43 992,76 1,41
0,24
4
0,11
993,32
0,12
993,20
0,14
993,06
0,14
992,92
0,16
992,76
0,16
992,60
0,19
992,41
0,19
992,22
0,20
992,02
0,21
991,81
0,22
991,59
0,24
991,35
0,24
1,34
1,34
1,34
1,35
1,35
1,35
1,35
1,36
1,36
1,37
1,37
1,37
Tria alcoolic n %
5
6
0,12
0,12
991,98 1,30 990,68
0,12
0,13
991,86 1,31 990,55
0,14
0,14
991,72 1,31 990,41
0,15
0,15
991,57 1,31 990,26
0,16
0,17
991,41 1,32 990,09
0,16
0,17
991,25 1,33 989,92
0,19
0,19
991,06 1,33 989,73
0,20
0,20
990,86 1,33 989,53
0,20
0,21
990,66 1,34 989,32
0,22
0,22
990,44 1,34 989,10
0,22
0,23
990,22 1,35 988,87
0,24
0,24
989,98 1,35 988,63
0,24
0,24
vol.
1,27
1,27
1,28
1,28
1,28
1,29
1,30
1,31
1,31
1,31
1,31
1,32
7
0,13
989,41
0,13
989,28
0,15
989,13
0,15
988,98
0,17
988,81
0,18
988,63
0,20
988,43
0,21
988,22
0,21
988,01
0,22
987,79
0,23
987,56
0,25
987,31
0,25
1,23
1,24
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,27
1,28
1,29
1,29
1,29
8
0,13
988,18
0,14
988,04
0,15
987,89
0,16
987,73
0,18
987,55
0,18
987,37
0,21
987,16
0,21
986,95
0,22
986,73
0,23
986,50
0,23
986,27
0,25
986,02
0,26
1,20
1,20
1,22
1,22
1,23
1,24
1,24
1,25
1,25
1,26
1,27
1,27
9
0,14
986,98
0,14
986,84
0,17
986,67
0,17
986,50
0,18
986,32
0,19
986,13
0,22
985,92
0,22
985,70
0,22
985,48
0,24
985,24
0,24
985,00
0,25
984,75
0,27
1,17
1,18
1,18
1,18
1,19
1,20
1,21
1,22
1,23
1,23
1,24
1,25
10
0,15
985,81
0,15
985,66
0,17
985,49
0,17
985,32
0,19
985,13
0,20
984,93
0,22
984,71
0,23
984,48
0,23
984,25
0,24
984,01
0,25
983,76
0,26
983,50
0,27
1,14
1,15
1,16
1,17
1,17
1,18
1,19
1,19
1,20
1,21
1,22
1,23
11
0,16
984,67
0,16
984,51
0,18
984,33
0,18
984,15
0,19
983,96
0,21
983,75
0,23
983,52
0,23
983,29
0,24
983,05
0,25
982,80
0,26
982,54
0,27
982,27
0,28
1,11
1,12
1,13
1,14
1,15
1,16
1,17
1,17
1,18
1,19
1,20
1,21
48
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
0
26 996,93
0,25
27 996,68
0,25
28 996,43
0,26
29 996,17
0,27
30 995,90
0,29
31 995,61
0,29
32 995,32
0,30
33 995,02
0,30
34 994,72
0,32
35 994,40
0,32
36 994,08
0,33
37 993,75
0,34
38 993,41
0,35
39 993,06
0,35
40 992,71
1,50
1,50
1,50
1,51
1,51
1,51
1,51
1,52
1,53
1,53
1,53
1,54
1,54
1,54
1,55
1
995,43
0,25
995,18
0,25
994,93
0,27
994,66
0,27
994,39
0,29
994,10
0,29
993,81
0,31
993,50
0,31
993,19
0,32
992,87
0,32
992,55
0,34
992,21
0,34
991,87
0,35
991,52
0,36
991,16
1,47
1,47
1,48
1,48
1,48
1,48
1,48
1,48
1,48
1,48
1,49
1,49
1,50
1,51
1,51
2
993,96
0,25
993,71
0,26
993,45
0,27
993,18
0,27
992,91
0,29
992,62
0,29
992,33
0,31
992,02
0,31
991,71
0,32
991,39
0,33
991,06
0,34
990,72
0,35
990,37
0,36
990,01
0,36
989,65
1,44
1,44
1,44
1,44
1,45
1,45
1,45
1,45
1,45
1,46
1,46
1,46
1,47
1,47
1,48
3
992,52
0,25
992,27
0,26
992,01
0,27
991,74
0,28
991,46
0,29
991,17
0,29
990,88
0,31
990,57
0,31
990,26
0,33
989,93
0,33
989,60
0,34
989,26
0,36
988,90
0,36
988,54
0,37
988,17
1,41
1,41
1,41
1,41
1,41
1,42
1,42
1,43
1,43
1,43
1,43
1,44
1,44
1,44
1,45
4
991,11
0,25
990,86
0,26
990,60
0,27
990,33
0,28
990,05
0,30
989,75
0,30
989,45
0,31
989,14
0,31
988,83
0,33
988,50
0,33
988,17
0,35
987,82
0,36
987,46
0,36
987,10
0,38
986,72
1,37
1,38
1,38
1,39
1,39
1,39
1,40
1,40
1,41
1,41
1,41
1,41
1,41
1,41
1,42
Tria alcoolic n %
5
6
989,74 1,35 988,39
0,26
0,26
989,48 1,35 988,13
0,26
0,27
989,22 1,36 987,86
0,28
0,28
988,94 1,36 987,58
0,28
0,28
988,66 1,37 987,29
0,30
0,30
988,36 1,37 986,99
0,31
0,31
988,05 1,37 986,68
0,31
0,31
987,74 1,37 986,37
0,32
0,33
987,42 1,38 986,04
0,33
0,33
987,09 1,38 985,71
0,33
0,34
986,76 1,39 985,37
0,35
0,35
986,41 1,39 985,02
0,36
0,36
986,05 1,39 984,66
0,37
0,37
985,68 1,39 984,29
0,38
0,38
985,30 1,39 983,91
vol.
7
1,33 987,06
0,26
1,33 986,80
0,28
1,34 986,52
0,28
1,34 986,24
0,29
1,34 985,95
0,31
1,35 985,64
0,31
1,35 985,33
0,32
1,36 985,01
0,33
1,36 984,68
0,33
1,36 984,35
0,34
1,36 984,01
0,35
1,37 983,65
0,36
1,37 983,29
0,37
1,37 982,92
0,38
1,37 982,54
8
1,30 985,76
0,27
1,31 985,49
0,28
1,31 985,21
0,29
1,32 984,92
0,29
1,32 984,63
0,31
1,33 984,31
0,31
1,33 984,00
0,33
1,34 983,67
0,33
1,34 983,34
0,33
1,34 983,01
0,35
1,35 982,66
0,36
1,35 982,30
0,37
1,36 981,93
0,37
1,36 981,56
0,38
1,36 981,18
9
1,28 984,48
0,28
1,29 984,20
0,28
1,29 983,92
0,29
1,29 983,63
0,30
1,30 983,33
0,32
1,30 983,01
0,32
1,31 982,69
0,33
1,31 982,36
0,34
1,32 982,02
0,34
1,33 981,68
0,35
1,33 981,33
0,36
1,33 980,97
0,38
1,34 980,59
0,38
1,34 980,22
0,39
1,35 979,83
10
1,25 983,23
0,29
1,26 982,94
0,29
1,27 982,65
0,30
1,28 982,35
0,31
1,29 982,04
0,32
1,29 981,72
0,33
1,30 981,39
0,34
1,31 981,05
0,34
1,31 980,71
0,34
1,31 980,37
0,36
1,32 980,01
0,36
1,32 979,65
0,38
1,32 979,27
0,38
1,33 978,89
0,39
1,33 978,50
11
1,24 981,99
0,29
1,24 981,70
0,30
1,25 981,40
0,31
1,26 981,09
0,32
1,27 980,77
0,32
1,27 980,45
0,34
1,28 980,11
0,34
1,28 979,77
0,35
1,29 979,42
0,35
1,30 979,07
0,37
1,31 978,70
0,37
1,32 978,33
0,38
1,32 977,95
0,39
1,33 977,56
0,39
1,33 977,17
1,22
1,23
1,23
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,28
1,29
1,29
1,30
1,31
1,31
1,32
49
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
10
0 986,63
-0,03
1 986,66
-0,02
2 986,68
0,00
3 986,68
0,01
4 986,67
0,02
5 986,65
0,04
6 986,61
0,05
7 986,56
0,07
8 986,49
0,08
9 986,41
0,10
10 986,31
0,10
11 986,21
0,12
12 986,09
0,13
13 985,96
0,15
14 985,81
0,15
15 985,66
0,17
16 985,49
0,17
1,00
1,01
1,02
1,03
1,04
1,05
1,07
1,08
1,09
1,09
1,10
1,11
1,12
1,13
1,14
1,15
1,16
11
985,63
-0,02
985,65
-0,01
985,66
0,01
985,65
0,02
985,63
0,03
985,60
0,06
985,54
0,06
985,48
0,08
985,40
0,08
985,32
0,11
985,21
0,11
985,10
0,13
984,97
0,14
984,83
0,16
984,67
0,16
984,51
0,18
984,33
0,18
0,96
0,97
0,98
0,99
1,00
1,02
1,02
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
1,09
1,10
1,11
1,12
1,13
12
984,67
-0,01
984,68
0,00
984,68
0,02
984,66
0,03
984,63
0,05
984,58
0,06
984,52
0,08
984,44
0,09
984,35
0,09
984,26
0,12
984,14
0,12
984,02
0,14
983,88
0,15
983,73
0,17
983,56
0,17
983,39
0,19
983,20
0,19
0,92
0,93
0,94
0,96
0,97
0,98
0,99
1,00
1,01
1,03
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
1,09
1,10
13
983,75
0,00
983,75
0,01
983,74
0,04
983,70
0,04
983,66
0,06
983,60
0,07
983,53
0,09
983,44
0,10
983,34
0,11
983,23
0,13
983,10
0,13
982,97
0,15
982,82
0,16
982,66
0,18
982,48
0,18
982,30
0,20
982,10
0,20
0,87
0,89
0,91
0,92
0,93
0,95
0,96
0,97
0,98
1,00
1,01
1,03
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
14
982,88
0,02
982,86
0,03
982,83
0,05
982,78
0,05
982,73
0,08
982,65
0,08
982,57
0,10
982,47
0,11
982,36
0,13
982,23
0,14
982,09
0,15
981,94
0,16
981,78
0,17
981,61
0,19
981,42
0,19
981,23
0,21
981,02
0,21
0,84
0,86
0,87
0,88
0,90
0,91
0,93
0,95
0,96
0,97
0,99
1,00
1,01
1,03
1,04
1,05
1,06
Tria alcoolic n %
15
16
982,04 0,81 981,23
0,04
0,05
982,00 0,82 981,18
0,04
0,06
981,96 0,84 981,12
0,06
0,08
981,90 0,86 981,04
0,07
0,08
981,83 0,87 980,96
0,09
0,11
981,74 0,89 980,85
0,10
0,11
981,64 0,90 980,74
0,12
0,14
981,52 0,92 980,60
0,12
0,14
981,40 0,94 980,46
0,14
0,15
981,26 0,95 980,31
0,16
0,17
981,10 0,96 980,14
0,16
0,17
980,94 0,97 979,97
0,17
0,19
980,77 0,99 979,78
0,19
0,20
980,58 1,00 979,58
0,20
0,22
980,38 1,02 979,36
0,20
0,22
980,18 1,04 979,14
0,22
0,23
979,96 1,05 978,91
0,23
0,24
vol.
17
0,77 980,46
0,07
0,79 980,39
0,08
0,81 980,31
0,10
0,83 980,21
0,10
0,85 980,11
0,13
0,87 979,98
0,13
0,89 979,85
0,15
0,90 979,70
0,16
0,92 979,54
0,16
0,93 979,38
0,18
0,94 979,20
0,19
0,96 979,01
0,21
0,98 978,80
0,21
0,99 978,59
0,23
1,00 978,36
0,24
1,02 978,12
0,25
1,04 977,87
0,25
0,75
0,77
0,79
0,81
0,83
0,84
0,86
0,88
0,90
0,92
0,93
0,95
0,96
0,98
0,99
1,01
1,02
18
979,71
0,09
979,62
0,10
979,52
0,12
979,40
0,12
979,28
0,14
979,14
0,15
978,99
0,17
978,82
0,18
978,64
0,18
978,48
0,19
978,27
0,21
978,06
0,22
977,84
0,23
977,61
0,24
977,37
0,26
977,11
0,26
976,85
0,27
19
0,73 978,98
0,11
0,75 978,87
0,12
0,77 978,75
0,14
0,79 978,61
0,14
0,81 978,47
0,16
0,83 978,31
0,17
0,85 978,14
0,19
0,87 977,95
0,19
0,88 977,76
0,20
0,90 977,56
0,21
0,92 977,35
0,23
0,94 977,12
0,24
0,96 976,88
0,24
0,97 976,64
0,26
0,99 976,38
0,27
1,00 976,11
0,28
1,02 975,83
0,29
20
0,72 978,26
0,13
0,74 978,13
0,14
0,76 977,99
0,16
0,78 977,83
0,16
0,80 977,67
0,18
0,82 977,49
0,19
0,84 977,30
0,20
0,85 977,10
0,21
0,87 976,89
0,22
0,89 976,67
0,23
0,91 976,44
0,25
0,93 976,19
0,26
0,95 975,93
0,26
0,97 975,67
0,27
0,98 975,40
0,28
0,99 975,12
0,30
1,01 974,82
0,30
21
0,70 977,56
0,15
0,72 977,41
0,17
0,75 977,24
0,18
0,77 977,06
0,18
0,79 976,88
0,20
0,81 976,68
0,21
0,83 976,47
0,22
0,85 976,25
0,23
0,87 976,02
0,24
0,89 975,78
0,25
0,91 975,53
0,27
0,93 975,26
0,27
0,94 974,99
0,28
0,96 974,71
0,29
0,98 974,42
0,30
1,00 974,12
0,31
1,01 973,81
0,31
0,70
0,72
0,74
0,76
0,79
0,81
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,92
0,94
0,96
0,98
1,00
1,02
50
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
10
17 985,32
0,19
18 985,13
0,20
19 984,93
0,22
20 984,71
0,23
21 984,48
0,23
22 984,25
0,24
23 984,01
0,25
24 983,76
0,26
25 983,50
0,27
26 983,23
0,29
27 982,94
0,29
28 982,65
0,30
1,17
1,17
1,18
1,19
1,19
1,20
1,21
1,22
1,23
1,24
1,24
1,25
11
984,15
0,19
983,96
0,21
983,75
0,23
983,52
0,23
983,29
0,24
983,05
0,25
982,80
0,26
982,54
0,27
982,27
0,28
981,99
0,29
981,70
0,30
981,40
0,31
1,14
1,15
1,16
1,17
1,17
1,18
1,19
1,20
1,21
1,22
1,23
1,23
12
983,01
0,20
982,81
0,22
982,59
0,24
982,35
0,23
982,12
0,25
981,97
0,26
981,61
0,27
981,34
0,28
981,06
0,29
980,77
0,30
980,47
0,30
980,17
0,32
1,11
1,13
1,14
1,14
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
1,20
1,21
1,22
13
981,90
0,22
981,68
0,23
981,45
0,24
981,21
0,25
980,96
0,26
980,70
0,27
980,43
0,28
980,15
0,29
979,86
0,29
979,57
0,31
979,26
0,31
978,95
0,33
1,09
1,11
1,12
1,13
1,14
1,15
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
1,21
14
980,81
0,24
980,57
0,24
980,33
0,25
980,08
0,26
979,82
0,27
979,55
0,28
979,27
0,29
978,98
0,30
978,68
0,30
978,38
0,32
978,06
0,32
977,74
0,34
1,08
1,09
1,10
1,11
1,13
1,14
1,15
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
Tria alcoolic n %
15
16
979,73 1,06 978,67
0,25
0,26
979,48 1,07 978,41
0,25
0,26
979,23 1,08 978,15
0,26
0,28
978,97 1,10 977,87
0,28
0,29
978,69 1,11 977,58
0,28
0,29
978,41 1,12 977,29
0,29
0,30
978,12 1,13 976,99
0,30
0,31
977,82 1,14 976,68
0,31
0,32
977,51 1,16 976,36
0,31
0,33
977,20 1,17 976,03
0,33
0,34
976,87 1,18 975,69
0,33
0,35
976,54 1,20 975,34
0,35
0,36
vol.
17
1,05 977,62
0,27
1,06 977,35
0,27
1,07 977,08
0,29
1,08 976,79
0,31
1,10 976,48
0,31
1,12 976,17
0,31
1,13 975,86
0,32
1,14 975,54
0,33
1,15 975,21
0,34
1,16 974,87
0,36
1,18 974,51
0,36
1,19 974,15
0,37
1,04
1,05
1,07
1,08
1,09
1,10
1,12
1,13
1,15
1,16
1,17
1,19
18
976,58
0,28
976,30
0,29
976,01
0,30
975,71
0,32
975,39
0,32
975,07
0,33
974,74
0,33
974,41
0,35
974,06
0,35
973,71
0,37
973,34
0,38
972,96
0,38
19
1,04 975,54
0,29
1,05 975,25
0,30
1,06 974,94
0,31
1,08 974,63
0,33
1,09 974,30
0,33
1,10 973,97
0,34
1,11 973,63
0,35
1,13 973,28
0,36
1,14 972,92
0,37
1,16 972,55
0,38
1,17 972,17
0,39
1,18 971,78
0,39
20
1,02 974,52
0,31
1,04 974,21
0,32
1,05 973,89
0,33
1,07 973,56
0,35
1,09 973,21
0,35
1,10 972,86
0,35
1,12 972,51
0,36
1,13 972,15
0,38
1,15 971,77
0,38
1,16 971,39
0,39
1,17 921,00
0,40
1,18 970,60
0,40
21
1,02 973,50
0,33
1,04 973,17
0,34
1,06 972,83
0,35
1,08 972,48
0,36
1,09 972,12
0,36
1,10 971,76
0,37
1,12 971,39
0,38
1,14 971,01
0,39
1,15 970,62
0,39
1,16 970,23
0,41
1,18 969,82
0,41
1,19 969,41
0,42
1,04
1,05
1,06
1,08
1,09
1,11
1,13
1,14
1,15
1,17
1,18
1,20
51
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
10
29 982,35
0,31
30 982,04
0,32
31 981,72
0,33
32 981,39
0,34
33 981,05
0,34
34 980,71
0,34
35 980,37
0,36
36 980,01
0,36
37 979,65
0,38
38 979,27
0,38
39 978,89
0,39
40 978,50
1,26
1,27
1,27
1,28
1,28
1,29
1,30
1,31
1,32
1,32
1,33
1,33
11
981,09
0,32
980,77
0,32
980,45
0,34
980,11
0,34
979,77
0,35
979,42
0,35
979,07
0,37
978,70
0,37
978,33
0,38
977,95
0,39
977,56
0,39
977,17
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,28
1,29
1,29
1,30
1,31
1,31
1,32
12
979,85
0,33
979,52
0,33
979,19
0,34
978,85
0,35
978,50
0,36
978,14
0,36
977,78
0,37
977,41
0,38
977,03
0,39
976,64
0,39
976,25
0,40
975,85
1,23
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,28
1,29
1,30
1,30
1,31
1,32
13
978,62
0,34
978,28
0,34
977,94
0,35
977,59
0,35
977,24
0,37
976,87
0,37
976,50
0,38
976,12
0,39
975,73
0,39
975,34
0,40
974,94
0,41
974,53
1,22
1,23
1,24
1,25
1,26
1,27
1,28
1,28
1,29
1,30
1,31
1,32
14
977,40
0,35
977,05
0,35
976,70
0,36
976,34
0,36
975,78
0,38
975,60
0,38
975,22
0,38
974,84
0,40
974,44
0,40
974,04
0,41
973,63
0,42
973,21
1,21
1,22
1,23
1,24
1,25
1,26
1,27
1,28
1,29
1,30
1,31
1,31
Tria alcoolic n %
15
16
976,19 1,21 974,98
0,36
0,37
975,83 1,21 974,62
0,36
0,37
975,47 1,22 974,25
0,37
0,38
975,10 1,23 973,87
0,37
0,39
974,73 1,25 973,48
0,39
0,40
974,34 1,26 973,08
0,39
0,40
973,95 1,27 972,68
0,39
0,40
973,56 1,28 972,28
0,41
0,42
973,15 1,29 971,86
0,41
0,42
972,74 1,30 971,44
0,42
0,43
972,32 1,31 971,01
0,42
0,43
971,90 1,32 970,58
vol.
17
1,20 973,78
0,38
1,21 973,41
0,38
1,22 973,03
0,39
1,23 972,64
0,40
1,24 972,24
0,41
1,25 971,83
0,41
1,26 971,42
0,42
1,28 971,00
0,43
1,29 970,57
0,43
1,30 970,14
0,44
1,31 969,70
0,45
1,33 969,25
18
1,20 972,58
0,38
1,21 972,20
0,39
1,22 971,81
0,40
1,23 971,41
0,41
1,24 971,00
0,42
1,25 970,58
0,43
1,27 970,15
0,43
1,28 969,72
0,44
1,29 969,28
0,44
1,30 968,84
0,45
1,31 968,39
0,47
1,33 967,92
19
1,19 971,39
0,40
1,21 970,99
0,40
1,22 970,59
0,42
1,24 970,17
0,42
1,25 969,75
0,43
1,26 969,32
0,44
1,27 968,88
0,44
1,28 968,44
0,45
1,29 967,99
0,46
1,31 967,53
0,46
1,32 967,07
0,48
1,33 966,59
20
1,19 970,20
0,42
1,21 969,78
0,42
1,23 969,36
0,43
1,24 968,93
0,43
1,25 968,50
0,45
1,27 968,05
0,45
1,28 967,60
0,45
1,29 967,15
0,46
1,30 966,69
0,47
1,31 966,22
0,48
1,33 965,74
0,49
1,34 965,25
21
1,21 968,99
0,43
1,22 968,56
0,43
1,23 968,13
0,45
1,25 967,68
0,45
1,27 967,23
0,45
1,27 966,78
0,47
1,29 966,31
0,47
1,31 965,84
0,47
1,32 965,37
0,48
1,33 964,89
0,49
1,34 964,40
0,50
1,35 963,90
1,21
1,23
1,24
1,26
1,27
1,29
1,30
1,31
1,32
1,34
1,36
1,37
52
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t0
10
29 982,35
0,31
30 982,04
0,32
31 981,72
0,33
32 981,39
0,34
33 981,05
0,34
34 980,71
0,34
35 980,37
0,36
36 980,01
0,36
37 979,65
0,38
38 979,27
0,38
39 978,89
0,39
40 978,50
1,26
1,27
1,27
1,28
1,28
1,29
1,30
1,31
1,32
1,32
1,33
1,33
11
981,09
0,32
980,77
0,32
980,45
0,34
980,11
0,34
979,77
0,35
979,42
0,35
979,07
0,37
978,70
0,37
978,33
0,38
977,95
0,39
977,56
0,39
977,17
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,28
1,29
1,29
1,30
1,31
1,31
1,32
12
979,85
0,33
979,52
0,33
979,19
0,34
978,85
0,35
978,50
0,36
978,14
0,36
977,78
0,37
977,41
0,38
977,03
0,39
976,64
0,39
976,25
0,40
975,85
1,23
1,24
1,25
1,26
1,26
1,27
1,28
1,29
1,30
1,30
1,31
1,32
13
978,62
0,34
978,28
0,34
977,94
0,35
977,59
0,35
977,24
0,37
976,87
0,37
976,50
0,38
976,12
0,39
975,73
0,39
975,34
0,40
974,94
0,41
974,53
1,22
1,23
1,24
1,25
1,26
1,27
1,28
1,28
1,29
1,30
1,31
1,32
14
977,40
0,35
977,05
0,35
976,70
0,36
976,34
0,36
975,78
0,38
975,60
0,38
975,22
0,38
974,84
0,40
974,44
0,40
974,04
0,41
973,63
0,42
973,21
1,21
1,22
1,23
1,24
1,25
1,26
1,27
1,28
1,29
1,30
1,31
1,31
Tria alcoolic n %
15
16
976,19 1,21 974,98
0,36
0,37
975,83 1,21 974,62
0,36
0,37
975,47 1,22 974,25
0,37
0,38
975,10 1,23 973,87
0,37
0,39
974,73 1,25 973,48
0,39
0,40
974,34 1,26 973,08
0,39
0,40
973,95 1,27 972,68
0,39
0,40
973,56 1,28 972,28
0,41
0,42
973,15 1,29 971,86
0,41
0,42
972,74 1,30 971,44
0,42
0,43
972,32 1,31 971,01
0,42
0,43
971,90 1,32 970,58
vol.
17
1,20 973,78
0,38
1,21 973,41
0,38
1,22 973,03
0,39
1,23 972,64
0,40
1,24 972,24
0,41
1,25 971,83
0,41
1,26 971,42
0,42
1,28 971,00
0,43
1,29 970,57
0,43
1,30 970,14
0,44
1,31 969,70
0,45
1,33 969,25
18
1,20 972,58
0,38
1,21 972,20
0,39
1,22 971,81
0,40
1,23 971,41
0,41
1,24 971,00
0,42
1,25 970,58
0,43
1,27 970,15
0,43
1,28 969,72
0,44
1,29 969,28
0,44
1,30 968,84
0,45
1,31 968,39
0,47
1,33 967,92
19
1,19 971,39
0,40
1,21 970,99
0,40
1,22 970,59
0,42
1,24 970,17
0,42
1,25 969,75
0,43
1,26 969,32
0,44
1,27 968,88
0,44
1,28 968,44
0,45
1,29 967,99
0,46
1,31 967,53
0,46
1,32 967,07
0,48
1,33 966,59
20
1,19 970,20
0,42
1,21 969,78
0,42
1,23 969,36
0,43
1,24 968,93
0,43
1,25 968,50
0,45
1,27 968,05
0,45
1,28 967,60
0,45
1,29 967,15
0,46
1,30 966,69
0,47
1,31 966,22
0,48
1,33 965,74
0,49
1,34 965,25
21
1,21 968,99
0,43
1,22 968,56
0,43
1,23 968,13
0,45
1,25 967,68
0,45
1,27 967,23
0,45
1,27 966,78
0,47
1,29 966,31
0,47
1,31 965,84
0,47
1,32 965,37
0,48
1,33 964,89
0,49
1,34 964,40
0,50
1,35 963,90
1,21
1,23
1,24
1,26
1,27
1,29
1,30
1,31
1,32
1,34
1,36
1,37
53
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t
20
0 978,26
0,13
1 978,13
0,14
2 977,99
0,16
3 977,83
0,16
4 977,67
0,18
5 977,49
0,19
6 977,30
0,20
7 976,10
0,21
8 976,89
0,22
9 976,67
0,23
10 976,44
0,25
11 976,11
0,26
12 975,93
0,26
13 975,67
0,27
14 975,40
0,28
15 975,12
0,30
16 974,82
0,30
0,70
0,72
0,75
0,77
0,79
0,81
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,93
0,94
0,96
0,98
1,00
1,01
21
977,56
0,15
977,41
0,17
977,24
0,18
977,06
0,18
976,88
0,20
976,68
0,21
976,47
0,22
976,25
0,23
976,02
0,24
975,78
0,25
975,53
0,27
975,26
0,27
974,99
0,28
974,71
0,29
974,42
0,30
974,12
0,31
973,81
0,31
0,70
0,72
0,74
0,76
0,79
0,81
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,92
0,94
0,96
0,98
1,00
1,02
22
976,86
0,17
976,69
0,19
976,50
0,20
976,30
0,21
976,09
0,22
975,87
0,23
975,64
0,24
975,40
0,25
975,15
0,26
974,89
0,27
974,62
0,28
974,34
0,29
974,05
0,30
973,75
0,31
973,44
0,32
973,12
0,33
972,79
0,33
0,69
0,72
0,74
0,77
0,79
0,81
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,93
0,95
0,97
0,99
1,00
1,02
23
976,17
0,20
975,97
0,21
975,76
0,23
975,53
0,23
975,30
0,24
975,06
0,25
974,81
0,26
974,55
0,27
974,28
0,28
974,00
0,29
973,71
0,30
973,41
0,31
973,10
0,32
972,78
0,33
972,45
0,33
972,12
0,35
971,77
0,35
0,70
0,72
0,75
0,77
0,79
0,81
0,84
0,86
0,88
0,90
0,92
0,94
0,96
0,98
1,00
1,02
1,03
24
975,47
0,22
975,25
0,24
975,01
0,25
974,76
0,25
974,51
0,26
974,25
0,27
973,97
0,28
973,69
0,29
973,40
0,30
973,10
0,31
972,79
0,32
972,47
0,33
972,14
0,34
971,80
0,35
971,45
0,35
971,10
0,36
970,74
0,37
0,72
0,74
0,76
0,78
0,81
0,83
0,85
0,87
0,89
0,91
0,93
0,95
0,97
0,99
1,01
1,03
1,05

25
26
974,75 0,72 974,03 0,74
0,24 0,75
0,27 0,77
974,51
973,76
0,26
0,29
974,25 0,78 973,47 0,79
0,27
0,29
973,98 0,80 973,18 0,82
0,28
0,30
973,70 0,82 972,88 0,84
0,28
0,30
973,42 0,84 972,58 0,86
0,30
0,33
973,12 0,87 972,25 0,88
0,30
0,32
972,82 0,89 971,93 0,91
0,31
0,33
972,51 0,91 971,60 0,93
0,32
0,34
972,19 0,93 971,26 0,95
0,33
0,35
971,86 0,95 970,91 0,97
0,34
0,36
971,52 0,97 970,55 0,99
0,35
0,37
971,17 0,99 970,18 1,01
0,36
0,38
970,81 1,01 969,80 1,02
0,37
0,38
970,44 1,02 969,42 1,04
0,37
0,39
970,07 1,04 969,03 1,06
0,38
0,40
969,69 1,06 968,63 1,08
0,38
0,40
27
973,29
0,30
972,99
0,31
972,68
0,32
972,36
0,32
972,04
0,33
971,71
0,34
971,37
0,35
971,02
0,35
970,67
0,36
970,31
0,37
969,94
0,38
969,56
0,39
969,17
0,39
968,78
0,40
968,38
0,41
967,97
0,42
967,55
0,42
0,77
0,79
0,82
0,84
0,86
0,88
0,91
0,93
0,95
0,98
1,00
1,02
1,03
1,05
1,07
1,09
1,11
28
972,52
0,32
972,20
0,34
971,86
0,34
971,52
0,34
971,18
0,35
970,83
0,37
970,46
0,37
970,09
0,37
969,72
0,39
969,33
0,39
968,94
0,40
968,54
0,40
968,14
0,41
967,73
0,42
967,31
0,43
966,88
0,44
966,44
0,43
0,80
0,83
0,85
0,87
0,89
0,92
0,94
0,96
0,98
1,00
1,02
1,04
1,06
1,08
1,10
1,12
1,13
29
971,72
0,35
971,37
0,36
971,01
0,36
970,65
0,36
970,29
0,38
969,91
0,39
969,52
0,39
969,13
0,39
968,74
0,41
968,33
0,41
967,92
0,42
967,50
0,42
967,08
0,43
966,65
0,44
966,21
0,45
965,76
0,45
965,31
0,45
30
0,83 970,89 0,87
0,85
0,37 0,89
970,52
0,38
0,87 970,14 0,92
0,38
0,89 969,76 0,94
0,39
0,92 969,37 0,96
0,40
0,94 968,97 0,98
0,41
0,96 968,56 1,00
0,41
0,98 968,15 1,02
0,42
1,01 967,73 1,04
0,43
1,03 967,30 1,06
0,43
1,05 966,87 1,08
0,44
1,07 966,43 1,09
0,44
1,09 965,99 1,11
0,45
1,11 965,54 1,13
0,45
1,12 965,09 1,15
0,47
1,14 964,62 1,17
0,47
1,16 964,15 1,19
0,47
31
970,02
0,39
969,63
0,41
960,22
0,40
968,82
0,42
968,40
0,41
967,99
0,43
967,56
0,43
967,13
0,44
966,69
0,45
966,24
0,45
965,79
0,45
965,34
0,46
964,88
0,47
964,41
0,47
963,94
0,49
963,45
0,49
962,96
0,49
0,90
0,93
0,96
0,98
1,00
1,02
1,04
1,06
1,08
1,09
1,11
1,13
1,15
1,17
1,19
1,20
1,22
54
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t
20
17 974,52
0,31
18 974,21
0,32
973,89
19
0,33
20 973,56
0,35
21 973,21
0,35
22 972,86
0,35
23 972,51
0,36
24 972,15
0,38
25 971,77
0,38
26 971,39
0,39
27 971,00
0,40
28 970,60
0,40
29 970,20
0,42
30 969,78
0,42
31 969,36
0,43
1,02
1,04
1,06
1,08
1,09
1,10
1,12
1,14
1,15
1,16
1,18
1,19
1,21
1,22
1,23
21
973,50
0,33
973,17
0,34
972,83
0,35
972,48
0,36
972,12
0,36
971,76
0,37
971,39
0,38
971,01
0,39
970,62
0,39
970,23
0,41
969,82
0,41
969,41
0,42
968,99
0,43
968,56
0,43
968,13
0,45
1,04
1,05
1,06
1,08
1,09
1,11
1,13
1,14
1,15
1,17
1,18
1,20
1,21
1,23
1,24
22
972,46
0,34
972,12
0,35
971,77
0,37
971,40
0,37
971,03
0,38
970,65
0,39
970,26
0,39
969,87
0,40
969,47
0,41
969,06
0,42
968,64
0,43
968,21
0,43
967,78
0,45
967,33
0,44
966,89
0,46
1,04
1,06
1,07
1,09
1,11
1,12
1,13
1,15
1,17
1,18
1,20
1,21
1,23
1,24
1,25
23
971,42
0,36
971,06
0,36
970,70
0,39
970,31
0,39
969,92
0,39
969,53
0,40
969,13
0,41
968,72
0,42
968,30
0,42
967,88
0,44
967,44
0,44
967,00
0,45
966,55
0,46
966,09
0,45
965,64
0,48
1,05
1,07
1,09
1,10
1,11
1,13
1,15
1,16
1,18
1,20
1,21
1,23
1,24
1,25
1,27
24
970,37
0,38
969,99
0,38
969,61
0,40
969,21
0,40
968,81
0,41
968,40
0,42
967,98
0,42
967,56
0,44
967,12
0,44
966,68
0,45
966,23
0,46
965,77
0,46
965,31
0,47
964,84
0,47
964,37
0,49
1,06
1,08
1,10
1,11
1,13
1,15
1,16
1,18
1,19
1,21
1,22
1,24
1,26
1,27
1,29

25
26
969,31 1,08 968,23 1,10
0,40
0,42
968,91 1,10 967,81 1,11
0,40
0,42
968,51 1,11 967,39 1,13
0,41
0,42
968,10 1,13 966,97 1,14
0,42
0,44
967,68 1,15 966,53 1,17
0,43
0,44
967,25 1,16 966,09 1,19
0,43
0,45
966,82 1,18 965,64 1,20
0,44
0,46
966,38 1,20 965,18 1,22
0,45
0,46
965,93 1,21 964,72 1,24
0,46
0,48
965,47 1,23 964,24 1,25
0,46
0,48
965,01 1,25 963,76 1,27
0,48
0,49
964,53 1,26 963,27 1,28
0,48
0,49
964,05 1,27 962,78 1,29
0,48
0,50
963,57 1,29 962,28 1,31
0,49
0,51
963,08 1,31 961,77 1,32
0,50
0,51
27
967,13
0,43
966,70
0,44
966,26
0,45
965,81
0,45
965,36
0,46
964,90
0,46
964,44
0,48
963,96
0,48
963,48
0,49
962,99
0,50
962,49
0,50
961,99
0,50
961,49
0,52
960,97
0,52
960,45
0,52
1,12
1,14
1,16
1,17
1,19
1,21
1,23
1,24
1,26
1,27
1,28
1,30
1,32
1,33
1,34
28
966,01
0,45
965,56
0,46
965,10
0,46
964,64
0,47
964,17
0,48
963,69
0,48
963,21
0,49
962,72
0,50
962,22
0,50
961,72
0,51
961,21
0,52
960,69
0,52
960,17
0,53
959,64
0,53
959,11
0,54
29
1,15 964,86
0,47
1,17 964,39
0,47
1,18 963,92
0,48
1,20 963,44
0,49
1,22 962,95
0,49
1,23 962,46
0,50
1,25 961,96
0,51
1,27 961,45
0,51
1,28 960,94
0,52
1,30 960,42
0,52
1,31 959,90
0,53
1,32 959,37
0,54
1,34 958,83
0,54
1,35 958,29
0,55
1,37 957,74
0,56
30
1,18 963,68
0,48
1,19 963,20
0,49
1,21 962,71
0,50
1,23 962,21
0,50
1,24 961,71
0,51
1,26 961,20
0,52
1,28 960,68
0,53
1,29 960,16
0,53
1,31 959,63
0,53
1,32 959,10
0,53
1,33 958,57
0,55
1,35 958,02
0,55
1,36 957,47
0,56
1,38 956,91
0,56
1,39 956,35
0,57
31
1,21 962,47
0,50
1,23 961,97
0,50
1,24 961,47
0,52
1,26 960,95
0,52
1,28 960,43
0,52
1,29 959,91
0,53
1,30 959,38
0,54
1,32 958,84
0,54
1,33 958,30
0,55
1,35 957,75
0,55
1,37 957,20
0,56
1,38 956,64
0,56
1,39 956,08
0,58
1,41 955,50
0,58
1,43 954,92
0,58
1,24
1,26
1,28
1,29
1,31
1,32
1,33
1,34
1,36
1,38
1,40
1,41
1,43
1,44
1,45
55
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
t
20
32 968,93
0,43
33 968,50
0,45
34 968,05
0,45
35 967,60
0,45
36 967,15
0,46
37 966,69
0,47
38 966,22
0,48
39 965,74
0,49
40 965,25
1,25
1,27
1,27
1,29
1,31
1,32
1,33
1,34
1,35
21
967,68
0,45
967,23
0,45
966,78
0,47
996,31
0,47
965,84
0,47
965,37
0,48
964,89
0,49
964,40
0,50
963,90
1,25
1,27
1,29
1,30
1,31
1,32
1,34
1,36
1,37
22
966,43
0,47
965,96
0,47
965,49
0,48
965,01
0,48
964,53
0,48
964,05
0,50
963,55
0,51
963,04
0,51
962,53
1,27
1,28
1,30
1,31
1,32
1,34
1,35
1,36
1,38
23
965,16
0,48
964,68
0,49
964,19
0,49
963,70
0,49
963,21
0,50
962,71
0,51
962,20
0,52
961,68
0,53
961,15
1,28
1,30
1,31
1,32
1,34
1,36
1,37
1,38
1,39
24
963,88
0,50
963,38
0,50
962,88
0,50
962,38
0,51
961,87
0,52
961,35
0,52
960,83
0,53
960,30
0,54
959,76
1,30
1,31
1,32
1,34
1,36
1,37
1,39
1,40
1,41

25
26
962,58 1,32 961,26 1,33
0,51
0,52
962,07 1,33 960,74 1,35
0,51
0,52
961,56 1,34 960,22 1,37
0,52
0,54
961,04 1,36 959,68 1,38
0,53
0,54
960,51 1,37 959,14 1,39
0,53
0,55
959,98 1,39 958,59 1,40
0,54
0,55
959,44 1,40 958,04 1,42
0,54
0,56
958,90 1,42 957,48 1,43
0,55
0,56
958,35 1,43 956,92 1,45
27
959,93
0,54
959,39
0,54
958,85
0,55
958,30
0,55
957,75
0,56
957,19
0,57
956,62
0,57
956,05
0,58
955,47
1,36
1,37
1,38
1,40
1,42
1,43
1,44
1,45
1,47
28
958,57
0,55
958,02
0,55
957,47
0,57
956,90
0,57
956,33
0,57
955,76
0,58
955,18
0,58
954,60
0,60
954,00
29
1,39 957,18
0,56
1,40 956,62
0,56
1,41 956,06
0,58
1,42 955,48
0,59
1,44 954,89
0,58
1,45 954,31
0,59
1,46 953,72
0,60
1,48 953,12
0,61
1,49 952,51
30
1,40 955,78
0,58
1,42 955,20
0,58
1,44 954,62
0,59
1,45 954,03
0,60
1,46 953,43
0,60
1,48 952,83
0,60
1,49 952,23
0,61
1,50 951,62
0,62
1,51 951,00
31
1,44 954,34
0,59
1,45 953,75
0,60
1,47 953,15
0,60
1,48 952,55
0,61
1,49 951,94
0,61
1,50 951,33
0,61
1,51 950,72
0,62
1,52 950,10
0,64
1,54 949,49
1,47
1,48
1,49
1,50
1,51
1,52
1,54
1,55
1,56
56
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL IV
Tabel comparativ cu indicii de refracie pentru amestecurile pure de etanol i ap i pentru distilailor
la 20 C i, respectiv, tria alcoolic la 20 C
57
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.2.2. GOST R 51653-2000

2.2.3. GOST R 51822-2001
58
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.3. EXTRACTUL TOTAL I SEC NEREDUCTOR

2.3.1. MA-MD-AS2-03-EXTSEC
1. DEFINIIE
Extractul total include toat materia nevolatil n condiiile fizice specificate. Aceste
condiii fizice trebuie s fie de aa natur nct materia care formeaz extractul s fie alterat ct
mai puin posibil n timpul ndeplinirii testului.
Extractul sec nereductor reprezint diferena dintre extractul total i totalul zaharurilor.
Extractul sec este diferena ntre extractul total i totalul zaharurilor care depesc 1 g/l,
sulfatul de potasiu care depete de 1 g/l, manitolul prezent n orice concentraie i orice alte
substane chimice care au fost adugate vinului.
Extractul rezidual este fr zahr minus aciditatea fix exprimat ca acid tartric.
Extractul se exprim n grame pe litru i trebuie determinat cu o precizie de 0,5 g.
2. PRINCIPIUL METODEI
Metod unic: msurarea cu un densimetru.

Extractul total este calculat indirect din greutatea specific a mustului i, pentru vin, din
greutatea specific a vinului dezalcoolizat.
Extractul total este exprimat prin cantitatea de zaharoz care, dizolvat n ap pn la
volumul de un litru, ofer o soluie cu aceeai greutate specific ca i mustul sau vinul
dezalcoolizat. Aceast cantitate este prezentat n tabelul I.
3. METODA DE CALCUL
Greutatea specific, dr 20/20 a vinului dezalcoolizat, este calculat utiliznd formula de

mai jos: (1)
dr = dv da + 1,000
unde:
dv = greutatea specific a vinului la 20 C (corectat pentru aciditatea
volatil) (1)
da = greutatea specific la 20 C a amestecului ap-alcool cu aceeai trie alcoolic a
vinului.
(1) nainte de efectuarea acestui calcul greutatea specific (sau densitatea) a vinului msurat
conform specificaiei de mai sus trebuie corectat pentru efectul aciditii volatile utiliznd
formula:
dv = d
20 0 C
0,0000086a
20 0 C
sau v = 20 -0,0000086a
unde a este aciditatea volatil exprimat n miliechivaleni per litru.
59
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
dr poate fi calculat, de asemenea, din densitile la 20 C, v pentru vin i a pentru

amestecurile de alcool i ap utiliznd formula:
dr = 1,0018 (v - a) + 1,000
unde coeficientul 1,0018 aproximeaz la 1 cnd v este sub 1,05, care este cazul cel mai frecvent.
4. EXPRIMAREA REZULTATELOR
Tabelul 1 trebuie utilizat pentru calcularea extractului total n g/l din greutatea specific d
20/20 a vinului dezalcoolizat sau din greutatea specific d 20 C/20 C a mustului.
Extractul total este exprimat n g/l, cu o cifr zecimal.
Tabelul I
pentru calcularea coninutului extractului total (g/l)
Greutatea
specific,
cu dou
zecimale
1,00
1,01
1,02
1,03
1,04
1,05
1,06
1,07
1,08
1, 09
1,10
1,11
1,12
1,13
1,14
1,15
1,16
1,17
1,18
1,19
1,20
0
25,8
51,7
77,7
103,7
129,8
155,9
182,1
208,4
234,7
261,0
287,4
313,9
340,4
366,9
393,6
420,3
447,1
473,9
500,9
527,8
2,6
28,4
54,3
80,3
106,3
132,4
158,6
184,8
211,0
237,3
263,6
290,0
316,5
343,0
369,6
396,2
423,0
449,8
476,6
503,5
-
A treia cifr zecimal a greutii specifice

2
3
4
5
6
7
Grame de extract per litru
5,1
7,7
10,3
12,9
31,0
33,6
36,2
38,8
56,9
59,5
62,1
64,7
82,9
85,5
88,1
90,7
109,0 111,6 114,2 116,8
135,0 137,6 140,3 142,9
161,2 163,8 166,4 169,0
187,4 190,0 192,6 195,2
213,6 216,2 218,9 221,5
239,9 242,5 245,2 247,8
266,3 268,9 271,5 274,2
292,7 295,3 298,0 300,6
319,2 321,8 324,5 327,1
345,7 348,3 351,0 353,7
372,3 375,0 377,6 380,3
398,9 401,6 404,3 406,9
425,7 428,3 431,0 433,7
452,4 455,2 457,8 460,5
479,3 482,0 484,7 487,4
506,2 508,9 511,6 514,3
-
15,4
41,3
67,3
93,3
119,4
145,5
171,6
197,8
224,1
250,4
276,8
303,3
329,8
356,3
382,9
409,6
436,4
463,2
490,1
517,0
-
18,0
43,9
69,9
95,9
122,0
148,1
174,3
200,5
226,8
253,1
279,5
305,9
332,4
359,0
385,6
412,3
439,0
465,9
492,8
519,7
-
20,6
46,5
72,5
98,5
124,6
150,7
176,9
203,1
229,4
255,7
282,1
308,6
335,1
361, 6
388,3
415,0
441,7
468,6
495,5
522,4
-
23,2
49,1
75,1
101,1
127,2
153,3
179,5
205,8
232,0
258,4
284,8
311,2
337,8
364,3
390,9
417,6
444,4
471,3
498,2
525,1
-
60
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabel de interpolare
A patra cifr
zecimal a
greutii
specifice
Grame de
extract
per litru
A patra cifr
zecimal a
greutii
specifice
Grame de
extract
per litru
A patra cifr
zecimal a
greutii
specifice
Grame de
extract
per litru
1
2
3
0,3
0,5
0,8
4
5
6
1,0
1,3
1,6
7
8
9
1,8
2,1
2,3
2.3.2. SM GOST R 51620-2000
61
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4 Zaharurile
2.4.1 MA-MD-AS311-01- SUCRED
1. DEFINIIE
Zaharurile reduse cuprimd toate zharurile care conin funcii aldehidice i cetonice i sunt
determinate dee aciunea de reducere a soluiei alcaline de sulfat de cupru.
2.1 Clasificare
2.1.1 Metoda de referin: dup neutralizare i nlturarea alcoolului, vinul este trecut printr-o
coloan de schimbare a ionilor n care anionii sunt schimbai cu ionii acetat, urmat de limpezirea
cu acetat de plumb neutru.
2.1.2 Metode obinuite: vinul este tratat cu unul dintre urmtorii reactivi:
2.1.2.1 acetat neutru de plumb;
2.1.2.2 Ferocianur (II) de zinc (hexacianoferat (II) de zinc).
2.2 Determinarea
2.2.1 Metoda unic: vinul limpetit sau mustul reacioneat cu o cantitate specific de soluie
alcalin de sulfat de cupru i ionii de cupru n exces sunt determinai prin iodometrie.
3. LIMPEZIREA
Coninutul de zahr al lichidului n care este determinat trebuie s fie cuprins ntre
0,5-5,0 g/l.
Vinurile seci nu trebue diluate n timpul limpezirii; vinurile dulci trebue diluate n timpul
limpezirii, n scopul aducerii nivelului zahrului n limitele precizate n tabelul urmtor
Denumirea
Coninutul n zaharuri
produsului
(g/l)
Must i mistel
>125
Vinuri dulci, alcoolizate
25-125
sau nu
Vinuri demidulci
5-25
Vinuri seci
<5
Densitatea
Diluarea
necesar (%)
>1,038
1
1,005-1,038
4
0,997-1,005
<0,997
20
fr diluare
3.1 Metoda de referin

3.1.1 Aparate i reactivi
Soluie de acid clorhidric 1 M (HCl).
Soluie de hidroxid de sodiu 1 M (Na OH).
Soluie de acid acetic 4 M (CH3COOH).
Soluie de hidroxid de sodiu 2 M (Na OH).
Rin de shimb anionic (Dowex 3 (20-50 mesh) sau rin echivalent).
Pregtirea coloanei de schimb cu rion anionic
La partea inferioar a biuretei, se fixeaz un dop de vat de sticl i 15 ml de rin de
schimb anionic.
Rina se activeaz prin dou cicluri complete de regenerare cu trecerea alternativ a
soluiilor molare M de acid clorhidric i hidroxid de sodiu.
62
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.1 MA-MD-AS311-01- SUCRED
Dup splarea cu 50 ml de ap distilat rina se trece ntr-un vas cilindric , se adaug 50 ml

soluie M de acid acetic i se agit coninutul vasului timp de 5 minute.
Se reumple dinnou biureta i se trece prin coloan 100 ml soluie molar M de acid acetic.
Este preferabil de avut un stoc de rin n soluie de acid aceti de 4M pstrat ntr-un balon cu
dop rodat . Se spal coloana cu ap distilat pn la reacia neutr a apei de splare.
Regenerarea rinei.
Se trec 150 ml soluie de 2M hidroxid de sodiu prin coloan pentru a nltura acizii i
substanele colorante reinute pe rin. Se cltete cu 100 ml de ap, se trece 100 ml soluie de
acid acetic de 4M. Se spal coloana pn la reacia neutr a apei de splare.
Soluia de acetat de plumb neutru (aproximativ saturat).
acetat neutru de plumb, Pb (CH3COO)2 x 2H2 O ........................250 g
ap fierbinte (q.s.p) .....................................................................500 ml
se agit pn la dizolvare.
Carbonat de calciu, CaCO3
3.1.2 Metoda de lucru
Vinuri seci
50 ml de vin se trec ntr-un vas cilindric cu diametrul 10-12 cm i se adaug 0,5 (n-0,5) ml
soluie M de hidroxid de sodiu (n- volumul de hidroxid de sodiu de 0,1 M utilizat la
determinarea aciditii totale a 10 ml de vin) se evapor pe o baie de ap fierbnd , ndreptnd
un curent de aer cald pn volumul lichidului nu se va reduce aproximativ cu 20 ml.
Se face ca lichidul s traverseze o coloan cu rin schimbtoare de anioni sub form de
acetat, rezonabil 3 ml n 2 minute. Se culege apa de splare ntr-un balon cotat de 100 ml.
Se spal de 6 ori vasul i coloana cu cte 10 ml de ap distialt.
Se adaug agitnd 2,5 ml soluie saturat de acetat de plumb i 0,5 g carbonat de calciu; se
agit n mai multe reprize i se las n repauscel puin pe 15 minute. Se aduce la semn cu ap
distilat i se filtreaz.
1 ml de filtrat corespunde la 1 ml de vin.
Musturi, misteluri, vinuri dulci i demidulci
Produsele se dilueaz n felul urmtor:
1 caz - Musturi i mistele. Se dilueaz lichidul de analizat n proporie de 10 :100. Din
proba diluat se iau 10 ml.
2 caz - Vinuri dulci, cu densitatea 1,005-1,038. Se dilueaz lichidul de analizat n
proporie de 20 :100. Din proba diluat se iau 20 ml.
3 caz - Vinuri demidulci, cu densitatea 0,997-1,005 Se iau 20 ml de vin fr diluare.
Volumul de
vin sau de must indicat mai sus se trece printr-o coloan cu rin
schimbtoare de anioni sub form de acetat, rezonabil 3 ml n 2 minute. Se culege apa de
splare ntr-un balon cotat de 100 ml.Se spal de 6 ori vasul i coloana cu cte 10 ml de ap
distialt.
Se adaug 1,0 ml soluie saturat de acetat de plumb i 0,5 g carbonat de calciu; se
agit ; se las n repaus cel puin pe 15 minute agitnd periodic. Se aduce la semn cu ap distilat
i se filtreaz.
1 caz : 1 ml de filtrat corespunde la 0,01 ml de must sau mistel;
2 caz : 1 ml de filtrat corespunde la 0,04 ml de vin dulce;
3 caz : 1 ml de filtrat corespunde la 0,2 ml de vin demidulce;
63
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.1. MA-MD-AS311-01-SUCRED
4 DETERMINAREA
4.1 Reactivi
4.1.1 Soluie alcalin dce sare de cupru:
Sulfat de cupru pur (CuSO4 x 5H2 O) .................................. .25 g
Acid citric (C6 H8 O7 , H2 O ) ................................................ 50 g
Carbonat de sodiu cristalizat (Na2 CO3 ,10 H2 O) ................. 388 g
Ap q.s.p ..................................................................................1000 ml
Se dizolv sulfatul de cupru n 100 ml de ap, acidul citric n 300 ml de ap i carbonatul
de sodiu n 300-400 ml de ap cald. Se amestec soluia de acid citric i soluia de carbonat
de sodiu. Se adaug apoi soluia de sulfat de cupru i se aduce volumul la un litru.
4.1.2 Soluie de iodur de potasiu de 30 p. la 100 .
Iodur de potasiu (KI) ................................................
30 g
Ap q.s.p.
..........................................................
100 ml
Soluia se pstreaz tr-un flacon de sticl colorat.
4.1.3 Acid sulfuric 25 p la 100.
Acid sulfuric pur 20 = 1,84 g/ml ...............................
25 g
Ap q.s.p
.........................................................
100 ml
Se toarn acidul n ap, se las s se rceasc i se aduce volumul la 100 ml.
4.1.4 Soluie de amidon de 5 g/l.
Se dilueaz 5 g de amidon n aproape 500 ml de ap. Se fierbe agitnd timp de 10 minute.
Se adaug 200 g de clorur de sodiu. Dup rcire volumul se aduce la un litru.
Soluie de tiosulfat de sodiu , soluie de 0,1 M.
Soluie de zahr invertit de 5 g/l, soluia se utilizeaz pentru verificarea tehnicii de
determinare.
ntr-un balon cotat de 200 ml se iau :
Zaharoz pur i uscat ...............................................
4,75 g
Ap (aproximativ) .......................................................
100 ml
Acid clorhidric pur ( 20 = 1,16 -1,19 g/ml) ................
5 ml
Se plaseaz balonul pe o baie de ap cu temperatura de 60 0 C , cnd temperatura soluiei
atinge 500 C se menine la aceast temperatur exact 15 minute. Dup aceea balonul se las timp
de 30 minute la rcire spontan, apoi se rcete prin imersie la o baie de ap rece. Se trece ntrun balon cotat de 1 l i se aduce la semn. Aceast soluie poate fi pstrat timp de o lun. nainte
de utilizare cantitatea necesar pentru analiz (aciditatea acestei soluii este de aproape 0,06 M )
se neutralizeaz cu soluie de hidroxid de sodiu.
4.2 Motoda de lucru
ntr-un balon conic de 300 ml se iau 25 ml soluie cupro-alcalin, 15 ml de ap i 10 ml
soluie limpezit . Acest volum de soluie de zahr nu trebuie s conin mai mult de 60 mg de
zahr invertit.
Se adaug cteva granule de piatr ponce. Balonul se adapteaz la un frigider n reflux
i se pune la fierbere care trebuie s se nceap peste 2 minute. Se fierbe exact 10 minute.
ndat se rcete sub un flux de ap rece. Dup rcirea complet se adaug 10 ml soluie
de iodur de potasiu de 30 p la 100, 25 ml de acid sulfuric de 25 p la 100 i 2 ml de clei de
amidon.
Se titreaz cu soluie de 0,1 M de tiosulfat de sodiu. n numrul de ml utilizai.
64
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.1. MA-MD-AS311-01-SUCRED
Paralel se efectueaz o determinare martor n care 25 ml de ap snt nlocuite cu 25 ml

soluie de zahr. n, - volumul de tiosulfat utilizat.
4.3 Exprimarea rezultatelor
4.3.1 Calcule
Coninutul de zahr exprimat n zahr invertit, care se conine n soluie luat pentru analiz
se ia din tabel unde este dat n funcie de numrul n, -n mililitri de tiosulfat utilizai.
Coninutul de zahr n vin exprimat n zahr invertit se calculeaz pn la o zecimal innd
cont de diluarea efectuat la limpezire i de volumul soluiei luat pentru analiz.
4.3.2 Repetabilitatea
r = 0,015 xi
xi - concentraia de zahr invertit prob, g/l
4.3.3 Reproductibilitatea
R = 0,058 xi
xi - concentraia de zahr invertit prob, g/l
Relaia dintre volumul soluiei de tiosulfat de sodiu 0,1 M, (n,-n )ml i cantitatea de
zahruri reductoare n miligrame (mg)
Na2S2O3
Zahr
Diff
Na2S2O3
Zahr
Diff
(ml 0,1 M)
reductor
(ml 0,1 M)
reductor
(mg)
(mg)
1
2,4
2,4
13
33,0
2,7
2
4,8
2,4
14
35,7
2,8
3
7,2
2,5
15
38,5
2,8
4
9,7
2,5
16
41,3
2,9
5
12,2
2,5
17
44,2
2,9
6
14,7
2,6
18
47,2
2,9
7
17,2
2,6
19
50,0
3,0
8
19,8
2,6
20
53,0
3,0
9
22,4
2,6
21
56,0
3,1
10
25,0
2,6
22
59,1
3,1
11
27,6
2,7
23
62,2
12
30,3
2,7
65
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.2. MA-MD-AS 2-02 SUCREF
Indicile de refracie la 200 C, exprimat fie ca valoare absolut, fie ca procent din masa
de zaharoz se raporteaz pe un tabel corespunztor pentru a obine coninutul zharurilor n
grame pe litru i n grame pe kilogram pentru mustul de struguri, mustul de struguri concentrat
i mustul de struguri concentrat rectificat.
2. APARATE
- Refractometru Abbe
- Refractometrul utilzzat trebuie s fie prevzut cu cu o scar ce indic;
- fie procentajul din masa de zaharoz cu precizie de 0,1 %,
- fie indici de refracie cu patru zecimale.
Refractometru trebuie s fie prevzut de asemenea cu un termometru pentru msurri la
temperatura de + (15 - 25 )0 C i un dispozitiv de circulaie a apei care s poermit
efectuarea determinrilor la o temperatur de 200 C 50 C .
Instruciunea de operare a instrumentului trebuie strict respectate n special cuprivire la
calibrare i la sursa de lumin.
3. PREGTIREA PROBEI
3.1 Must i must concentrat

Dac este necesar, se trece mustul printr-un tifon mpturit n patru
primelepicturi de lichid au fost eliminate, se efectueaz determinarea pe acesta.
i,
dup ce
3.2 Zahrul n struguri

n funcie de concentraie, se utilizeaz fie mustul concentrat rectificat, fie o soluie obinut
prin completarea a 200 g must concentrat rectificat cu 500 g de ap, toate cntririle fiind
efectuate cu exactitate.
4 . MODUL DE OPERARE
Se aduce proba la temperatura aproiat de 20 0 C. Pe prizma inferioar a refractometrului

se pune un volum mic din proba de testare, avnd grij ca lichidul testat s acopere uniform
suprafaa sticlei (deoarece prismele sunt ferm presate una pe cealalt). Determinrile se
efectueaz n conformitate cu instruciunile de funcionare ale instrumentului utilizat.
Se citete procentul de zaharoz dn mas cu o precizie de 0,1 % sau secitete indicele de
refracie cu patru zecimale.
Se efectueaz cel puin dou msurri pe aceeai prob pregtit.
Se noteaz temperatura t 0C.
5. CALCULARE
5.1 Corecii detemperatur

5.1.1 Instrumentele gradate n procente pe mas de zaharoz: pentru obinerea coreciilor
de temperatur se utilizeaz tabelul 1.
5.1.2 Instrumentele gradate n indice de refracie: se afl indicele msurat la t oC n tabelul
II (coloana I) pentru a se obine valoarea corespunztoare a procentului din mas de zaharz la t
o
C. Ceast valoare este corectat pentru temperatur i este exprimat sub formde concentraie
la 20 oC cu ajutorul tabelului 1.
66
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.2. MA-MD-AS2-02-SUCREF
5.2 Concentraia de zahr din must i must concentrat

Se afl din tabelul II procentul din mas de zaharoz la 20 oC i se citete pe acelai rnd
concentraia de zahr n grame pe litru i gramepe kilogram. Concentraia de zahr este exprimat
cu o zecimal, ca zahr invertit.
5.3 Concentraia de zahr n mustul concentrat rectificat
Se afl din tabelul III procentul din mas de zaharoz la 20 oC i se citete pe acelai rnd
concentraia de zahr n grame pe litru i gramepe kilogram. Concentraia de zahr este exprimat
cu o zecimal.
n cazul n care determinarea a fost efectuatpe mustconcentrat rectificat i diluat,
rezultatulse nmulete cu factorul de diluie.
5.4 Indicile de refracie al mustului, mustului concentrati mustuluiu concentrat
rectifiucat
Se afl din tabelul II procentul din mas de zaharoz la 20 oC i se citete pe acelai rnd
indicele de refracie la 20 oC Acest indiceeste exprimat cu patru zecimale.
TABELUL I
Corecii care trebuie operate cnd procentul de mas de zaharoz a fost determinat la o alt
temperatur dect la 20 C
Temperatura C
15
16
17
18
19
0,25
0,21
0,16
0,11
0,06
21
22
23
24
25
0,06
0,12
0,18
0,24
0,30
Zaharoz, n grame/100 g produs

10 15 20 30 40 50 60 70
Scdere
0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36
0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31
0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20
0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12
0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07
Adunare
0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14
0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22
0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29
0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36
75
0,36
0,23
0,17
0,09
0,05
0,07
0,14
0,22
0,29
0,37
Temperaturile nu trebuie s se abat de la 20 C cu mai mult de 5 C.
67
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
Tabelul concentraiilor de zahr (1) din must i must concentrat n grame pe litru i grame pe
kilogram, determinate cu ajutorul refractometrului gradat fie n procente din masa de zaharoz la
20 C, fie n indice de refracie la 20 C. Este dat, de asemenea, densitatea la 20 C
Zaharoz
% (m/m)
10.0
10.1
10.2
10.3
10.4
10.5
10.6
10.7
10.8
10.9
11.0
11.1
11.2
11.3
11.4
11.5
11.6
11.7
11.8
11.9
12.0
12.1
12.2
12.3
12.4
12.5
12.6
12.7
12.8
12.9
13.0
13.1
13.2
13.3
13.4
13.5
13.6
13.7
13.8
13.9
14.0
14.1
14.2
14.3
14.4
14.5
14.6
14.7
14.8
14.9
Indicele de
refracie la 20 C
Densitatea la 20 C
1.34781
1.34798
1.34814
1.34830
1.34845
1.34860
1.34875
1.34890
1.34906
1.34921
1.34936
1.34952
1.34968
1.34984
1.34999
1.35015
1.35031
1.35046
1.35062
1.35077
1.35092
1.35108
1.35124
1.35140
1.35156
1.35172
1.35187
1.35203
1.35219
1.35234
1.35249
1.35266
1.35282
1.35298
1.35313
1.35329
1.35345
1.35360
1.35376
1.35391
1.35407
1.35424
1.35440
1.35456
1.35472
1.35488
1.35503
1.35519
1.35535
1.35551
1.0390
1.0394
1.0398
1.0402
1.0406
1.0410
1.0414
1.0419
1.0423
1.0427
1.0431
1.0435
1.0439
1.0443
1.0447
1.0452
1.0456
1.0460
1.0464
1.0468
1.0473
1.0477
1.0481
1.0485
1.0489
1.0494
1.0498
1.0502
1.0506
1.0510
1.0514
1.0519
1.0523
1.0527
1.0531
1.0536
1.0540
1.0544
1.0548
1.0552
1.0557
1.0561
1.0565
1.0569
1.0574
1.0578
1.0582
1.0586
1.0591
1.0595
Zahr
n g/l
82.3
83.4
84.5
85.6
86.6
87.6
88.6
89.7
90.8
91.8
92.9
94.0
95.0
96.1
97.1
98.2
99.3
100.3
101.4
102.5
103.6
104.7
105.7
106.8
107.9
109.0
110.0
111.1
112.2
113.2
114.3
115.4
116.5
117.6
118.6
119.7
120.8
121.8
122.9
124.0
125.1
126.2
127.3
128.4
129.5
130.6
131.6
132.7
133.8
134.9
Zahr
n g/kg
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
79.2
80.2
81.3
82.2
83.2
84.1
85.1
86.1
87.1
88.1
89.1
90.0
91.0
92.0
92.9
94.0
95.0
95.9
96.9
97.9
98.9
99.9
100.8
101.9
102.9
103.8
104.8
105.8
106.8
107.8
108.7
109.7
110.7
111.7
112.6
113.6
114.6
115.6
116.5
117.5
118.5
119.5
120.5
121.5
122.5
123.4
124.4
125.4
126.3
127.3
4,89
4,95
5,02
5,09
5,14
5,20
5,26
5,33
5,39
5,45
5,52
5,58
5,64
5,71
5,77
5,83
5,90
5,96
6,02
6,09
6,15
6,22
6,28
6,35
6,41
6,47
6,53
6,60
6,66
6,73
6,79
6,86
6,92
6,99
7,05
7,11
7,18
7,24
7,30
7,37
7,43
7,50
7,56
7,63
7,69
7,76
7,82
7,88
7,95
8,01
68
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
(1) - concentraia de zahr este exprimat cazahr invertit.

TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
% (m/m) refracie la 20 C
Zahr Zahr Tria alcoolic

n g/l n g/kg % vol. la 20 C
15.0
15.1
15.2
15.3
15.4
15.5
15.6
15.7
15.8
15.9
16.0
16.1
16.2
16.3
16.4
16.5
16.6
16.7
16.8
16.9
17.0
17.1
17.2
17.3
17.4
17.5
17.6
17.7
17.8
17.9
18.0
18.1
18.2
18.3
18.4
18.5
18.6
18.7
18.8
18.9
19.0
19.1
19.2
19.3
19.4
19.5
19.6
19.7
19.8
19.9
136.0
137.1
138.2
139.3
140.4
141.5
142.6
143.7
144.8
145.9
147.0
148.1
149.2
150.3
151.5
152.6
153.7
154.8
155.9
157.0
158.1
159.3
160.4
161.5
162.6
163.7
164.8
165.9
167.0
168.1
169.3
170.4
171.5
172.6
173.7
174.9
176.0
177.2
178.3
179.4
180.5
181.7
182.8
183.9
185.1
186.3
187.4
188.6
189.7
190.8
1.35567
1.35583
1.35599
1.35615
1.35631
1.35648
1.35664
1.35680
1.35696
1.35712
1.35728
1.35744
1.35760
1.35776
1.35793
1.35809
1.35825
1.35842
1.35858
1.35874
1.35890
1.35907
1.35923
1.35939
1.35955
1.35972
1.35988
1.36004
1.36020
1.36036
1.36053
1.36070
1.36086
1.36102
1.36119
1.36136
1.36152
1.36169
1.36185
1.36201
1.36217
1.36234
1.36251
1.36267
1.36284
1.36301
1.36318
1.36335
1.36351
1.36367
1.0599
1.0603
1.0608
1.0612
1.0616
1.0621
1.0625
1.0629
1.0633
1.0638
1.0642
1.0646
1.0651
1.0655
1.0660
1.0664
1.0668
1.0672
1.0677
1.0681
1.0685
1.0690
1.0694
1.0699
1.0703
1.0707
1.0711
1.0716
1.0720
1.0724
1.0729
1.0733
1.0738
1.0742
1.0746
1.0751
1.0755
1.0760
1.0764
1.0768
1.0773
1.0777
1.0782
1.0786
1.0791
1.0795
1.0800
1.0804
1.0809
1.0813
128.3
129.3
130.3
131.3
132.3
133.2
134.2
135.2
136.2
137.2
138.1
139.1
140.1
141.1
142.1
143.1
144.1
145.0
146.0
147.0
148.0
149.0
150.0
151.0
151.9
152.9
153.9
154.8
155.8
156.8
157.8
158.8
159.7
160.7
161.6
162.6
163.6
164.6
165.6
166.6
167.6
168.6
169.5
170.5
171.5
172.5
173.5
174.5
175.5
176.5
8,08
8,15
8,21
8,27
8,34
8,41
8,47
8,54
8,60
8,67
8,73
8,80
8,86
8,93
9,00
9,06
9,13
9,20
9,26
9,33
9,39
9,46
9,53
9,59
9,66
9,73
9,79
9,86
9,92
9,99
10,06
10,12
10,19
10,25
10,32
10,39
10,46
10,53
10,59
10,66
10,72
10,80
10,86
10,93
11,00
11,07
11,13
11,21
11,27
11,34
69
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
Zahr
n g/l
20.0
20.1
20.2
20.3
20.4
20.5
20.6
20.7
20.8
20.9
21.0
21.1
21.2
21.3
21.4
21.5
21.6
21.7
21.8
21.9
22.0
22.1
22.2
22.3
22.4
22.5
22.6
22.7
22.8
22.9
23.0
23.1
23.2
23.3
23.4
23.5
23.6
23.7
23.8
23.9
24.0
24.1
24.2
24.3
24.4
24.5
24.6
24.7
24.8
24.9
191.9
193.1
194.2
195.3
196.5
197.7
198.8
200.0
201.1
202.2
203.3
204.5
205.7
206.8
207.9
209.1
210.3
211.4
212.5
213.6
214.8
216.0
217.2
218.3
219.5
220.6
221.7
222.9
224.1
225.2
226.4
227.6
228.7
229.9
231.1
232.3
233.4
234.6
235.8
237.0
238.2
239.3
240.3
241.6
243.0
244.0
245.0
246.4
247.7
248.7
1.36383
1.36400
1.36417
1.36434
1.36451
1.36468
1.36484
1.36501
1.36518
1.36534
1.36550
1.36568
1.36585
1.36601
1.36618
1.36635
1.36652
1.36669
1.36685
1.36702
1.36719
1.36736
1.36753
1.36770
1.36787
1.36804
1.36820
1.36837
1.36854
1.36871
1.36888
1.36905
1.36922
1.36939
1.36956
1.36973
1.36991
1.37008
1.37025
1.37042
1.37059
1.37076
1.37093
1.37110
1.37128
1.37145
1.37162
1.37180
1.37197
1.37214
1.0817
1.0822
1.0826
1.0831
1.0835
1.0840
1.0844
1.0849
1.0853
1.0857
1.0862
1.0866
1.0871
1.0875
1.0880
1.0884
1.0889
1.0893
1.0897
1.0902
1.0906
1.0911
1.0916
1.0920
1.0925
1.0929
1.0933
1.0938
1.0943
1.0947
1.0952
1.0956
1.0961
1.0965
1.0970
1.0975
1.0979
1.0984
1.0988
1.0993
1.0998
1.1007
1.1011
1.1016
1.1022
1.1026
1.1030
1.1035
1.1041
1.1045
Zahr
n
g/kg
177.4
178.4
179.4
180.4
181.4
182.3
183.3
184.3
185.3
186.2
187.2
188.2
189.2
190.2
191.1
192.1
193.1
194.1
195.0
196.0
196.9
198.0
199.0
199.9
200.9
201.8
202.8
203.8
204.8
205.8
206.7
207.7
208.7
209.7
210.7
211.6
212.6
213.6
214.6
215.6
216.6
217.4
218.2
219.4
220.5
221.3
222.1
223.2
224.4
225.2
Tria alcoolic
% vol. la 20
C
11,40
11,47
11,54
11,60
11,67
11,75
11,81
11,88
11,96
12,01
12,08
12,15
12,22
12,29
12,35
12,42
12,49
12,56
12,63
12,69
12,76
12,83
12,90
12,97
13,04
13,11
13,17
13,24
13,31
13,38
13,45
13,52
13,59
13,66
13,73
13,80
13,87
13,94
14,01
14,08
14,15
14,22
14,28
14,35
14,44
14,50
14,56
14,64
14,72
14,78
70
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
25.0
25.1
25.2
25.3
25.4
25.5
25.6
25.7
25.8
25.9
26.0
26.1
26.2
26.3
26.4
26.5
26.6
26.7
26.8
26.9
27.0
27.1
27.2
27.3
27.4
27.5
27.6
27.7
27.8
27.9
28.0
28.1
28.2
28.3
28.4
28.5
28.6
28.7
28.8
28.9
29.0
29.1
29.2
29.3
29.4
29.5
29.6
29.7
29.8
29.9
1.37232
1.37249
1.37266
1.37283
1.37300
1.37317
1.37335
1.37353
1.37370
1.37387
1.37405
1.37423
1.37440
1.37457
1.37475
1.37493
1.37510
1.37528
1.37545
1.37562
1.37580
1.37598
1.37615
1.37632
1.37650
1.37667
1.37685
1.37703
1.37721
1.37739
1.37757
1.37775
1.37793
1.37810
1.37828
1.37846
1.37863
1.37881
1.37899
1.37917
1.37935
1.37953
1.37971
1.37988
1.38006
1.38024
1.38042
1.38060
1.38078
1.38096
Densitatea la 20
Zahr
n g/l
1.1049
1.1053
1.1057
1.1062
1.1068
1.1072
1.1076
1.1081
1.1087
1.1091
1.1095
1.1100
1.1106
1.1110
1.1114
1.1119
1.1125
1.1129
1.1133
1.1138
1.1144
1.1148
1.1152
1.1157
1.1163
1.1167
1.1171
1.1176
1.1182
1.1186
1.1190
1.1195
1.1201
1.1205
1.1209
1.1214
1.1220
1.1224
1.1228
1.1233
1.1239
1.1244
1.1250
1.1254
1.1258
1.1263
1.1269
1.1273
1.1277
1.1282
249.7
250.7
251.7
253.0
254.4
255.4
256.4
257.8
259.1
260.1
261.1
262.5
263.8
264.8
265.8
267.2
268.5
269.5
270.5
271.8
273.2
274.2
275.2
276.5
277.9
278.9
279.9
281.3
282.6
283.6
284.6
286.0
287.3
288.3
289.3
290.7
292.0
293.0
294.0
295.3
296.7
298.1
299.4
300.4
301.4
302.8
304.1
305.1
306.1
307.4
Zahr
n
g/kg
226.0
226.8
227.6
228.7
229.9
230.7
231.5
232.6
233.7
234.5
235.3
236.4
237.5
238.3
239.2
240.3
241.4
242.2
243.0
244.1
245.2
246.0
246.8
247.9
249.0
249.8
250.6
251.6
252.7
253.5
254.3
255.4
256.5
257.3
258.1
259.2
260.3
261.0
261.8
262.9
264.0
265.1
266.1
266.9
267.7
268.8
269.9
270.6
271.4
272.5
Tria alcoolic
% vol. la 20
C
14,84
14,90
14,96
15,03
15,11
15,17
15,23
15,32
15,39
15,45
15,51
15,60
15,67
15,73
15,79
15,88
15,95
16,01
16,07
16,15
16,23
16,29
16,35
16,43
16,51
16,57
16,63
16,71
16,79
16,85
16,91
16,99
17,07
17,13
17,19
17,27
17,35
17,41
17,47
17,55
17,63
17,71
17,79
17,85
17,91
17,99
18,07
18,13
18,19
18,26
71
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
% (m/m) refracie la 20 C Densitatea la 20 C
Zahr
n g/l
30.0
30.1
30.2
30.3
30.4
30.5
30.6
30.7
30.8
30.9
31.0
31.1
31.2
31.3
31.4
31.5
31.6
31.7
31.8
31.9
32.0
32.1
32.2
32.3
32.4
32.5
32.6
32.7
32.8
32.9
33.0
33.1
33.2
33.3
33.4
33.5
33.6
33.7
33.8
33.9
34.0
34.1
34.2
34.3
34.4
34.5
34.6
34.7
34.8
34.9
308.8
310.0
311.2
312.4
313.6
314.8
316.0
317.2
318.4
319.6
320.8
322.0
323.2
324.4
325.6
326.8
328.1
329.3
330.5
331.7
332.9
334.2
335.5
336.7
338.0
339.3
340.6
341.9
343.1
344.4
345.7
346.9
348.1
349.3
350.5
351.7
352.9
354.1
355.3
356.5
357.7
359.0
360.3
361.5
362.8
364.1
365.4
366.7
367.9
369.2
1.38114
1.38132
1.38150
1.38168
1.38186
1.38204
1.38222
1.38240
1.38258
1.38276
1.38294
1.38312
1.38330
1.38349
1.38367
1.38385
1.38403
1.38421
1.38440
1.38458
1.38476
1.38494
1.38513
1.38531
1.38550
1.38568
1.38586
1.38605
1.38623
1.38642
1.38660
1.38678
1.38697
1.38715
1.38734
1.38753
1.38771
1.38790
1.38808
1.38827
1.38845
1.38864
1.38882
1.38901
1.38919
1.38938
1.38957
1.38975
1.38994
1.39012
1.1288
1.1293
1.1298
1.1302
1.1307
1.1312
1.1317
1.1322
1.1327
1.1332
1.1336
1.1341
1.1346
1.1351
1.1356
1.1361
1.1366
1.1371
1.1376
1.1380
1.1385
1.1391
1.1396
1.1401
1.1406
1.1411
1.1416
1.1422
1.1427
1.1432
1.1437
1.1442
1.1447
1.1452
1.1457
1.1461
1.1466
1.1471
1.1476
1.1481
1.1486
1.1491
1.1496
1.1501
1.1506
1.1512
1.1517
1.1522
1.1527
1.1532
Zahr
n
g/kg
273.6
274.5
275.5
276.4
277.3
278.3
279.2
280.2
281.1
282.0
283.0
283.9
284.9
285.8
286.8
287.7
288.6
289.6
290.5
291.5
292.4
293.4
294.4
295.4
296.4
297.3
298.3
299.3
300.3
301.3
302.3
303.2
304.1
305.0
305.9
306.9
307.8
308.7
309.6
310.5
311.4
312.4
313.4
314.3
315.3
316.3
317.3
318.2
319.2
320.2
Tria alcoolic
% vol. la 20
C
18,35
18,42
18,49
18,56
18,63
18,70
18,77
18,85
18,92
18,99
19,06
19,13
19,20
19,27
19,35
19,42
19,49
19,56
19,64
19,71
19,78
19,86
19,93
20,00
20,08
20,16
20,24
20,31
20,38
20,46
20,54
20,61
20,68
20,75
20,82
20,90
20,97
21,04
21,11
21,18
21,25
21,33
21,41
21,48
21,55
21,63
21,71
21,79
21,86
21,94
72
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
35.0
35.1
35.2
35.3
35.4
35.5
35.6
35.7
35.8
35.9
36.0
36.1
36.2
36.3
36.4
36.5
36.6
36.7
36.8
36.9
37.0
37.1
37.2
37.3
37.4
37.5
37.6
37.7
37.8
37.9
38.0
38.1
38.2
38.3
38.4
38.5
38.6
38.7
38.8
38.9
39.0
39.1
39.2
39.3
39.4
39.5
39.6
39.7
39.8
39.9
370.5
371.8
373.0
374.3
375.6
376,9
378.1
379.4
380.7
381.9
383.2
384.5
385.8
387.0
388.3
389.6
390.9
392.2
393.4
394.7
396.0
397.3
398.6
399.8
401.1
402.4
403.7
405.0
406.2
407.5
408.8
410.1
411.3
412.6
413.9
415.2
416.4
417.7
419.0
420.2
421.5
422.8
424.1
425.3
426.6
427.9
429.2
430.5
431.7
433.0
1.39031
1.39050
1.39069
1.39087
1.39106
1.39125
1.39144
1.39163
1.39181
1.39200
1.39219
1.39238
1.39257
1.39276
1.39295
1.39314
1.39332
1.39351
1.39370
1.39389
1.39408
1.39427
1.39446
1.39465
1.39484
1.39504
1.39523
1.39542
1.39561
1.39580
1.39599
1.39618
1.39637
1.39657
1.39676
1.39695
1.39714
1.39733
1.39753
1.39772
1.39791
1.39810
1.39830
1.39849
1.39869
1.39888
1.39907
1.39927
1.39946
1.39966
1.1537
1.1543
1.1548
1.1553
1.1558
1.1563
1.1568
1.1573
1.1579
1.1584
1.1589
1.1594
1.1599
1.1604
1.1610
1.1615
1.1620
1.1625
1.1630
1.1635
1.1641
1.1646
1.1651
1.1656
1.1661
1.1666
1.1672
1.1677
1.1682
1.1687
1.1692
1.1698
1.1703
1.1708
1.1713
1.1718
1.1723
1.1728
1.1733
1.1739
1.1744
1.1749
1.1754
1.1759
1.1764
1.1770
1.1775
1.1780
1.1785
1.1790
Zahr
n
g/kg
321.1
322.1
323.0
324.0
325.0
325.9
326.9
327.8
328.8
329.7
330.7
331.6
332.6
333.5
334.5
335.4
336.4
337.3
338.3
339.2
340.2
341.1
342.1
343.0
344.0
344.9
345.9
346.8
347.7
348.7
349.6
350.6
351.5
352.4
353.4
354.3
355.2
356.1
357.1
358.0
358.9
359.8
360.8
361.7
362.6
363.6
364.5
365.4
366.3
367.3
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
22,01
22,09
22,16
22,24
22,32
22,39
22,45
22,54
22,62
22,69
22,77
22,85
22,92
22,99
23,07
23,15
23,22
23,30
23,37
23,45
23,53
23,60
23,68
23,75
23,83
23,91
23,99
24,06
24,13
24,21
24,29
24,37
24,44
24,51
24,59
24,67
24,74
24,82
24,90
24,97
25,04
25,12
25,20
25,27
25,35
25,42
25,50
25,58
25,65
25,73
73
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
40.0
40.1
40.2
40.3
40.4
40.5
40.6
40.7
40.8
40.9
41.0
41.1
41.2
41.3
41.4
41.5
41.6
41.7
41.8
41.9
42.0
42.1
42.2
42.3
42.4
42.5
42.6
42.7
42.8
42.9
43.0
43.1
43.2
43.3
43.4
43.5
43.6
43.7
43.8
43.9
44.0
44.1
44.2
44.3
44.4
44.5
44.6
44.7
44.8
44.9
434.3
435.6
437.0
438.3
439.7
441.0
442.3
443.7
445.0
446.4
447.7
449.0
450.2
451.5
452.8
454.1
455.3
456.6
457.9
459.1
460.4
461.7
463.1
464.4
465.8
467.2
468.5
469.9
471.2
472.6
473.9
475.2
476.6
477.9
479.3
480.6
481.9
483.3
484.6
486.0
487.3
488.6
490.0
491.3
492.7
494.0
495.3
496.7
498.0
499.4
1.39985
1.40004
1.40024
1.40043
1.40063
1.40083
1.40102
1.40122
1.40141
1.40161
1.40180
1.40200
1.40219
1.40239
1.40259
1.40279
1.40298
1.40318
1.40338
1.40357
1.40377
1.40397
1.40417
1.40436
1.40456
1.40476
1.40496
1.40516
1.40535
1.40555
1.40575
1.40595
1.40615
1.40635
1.40655
1.40675
1.40695
1.40715
1.40735
1.40755
1.40775
1.40795
1.40815
1.40836
1.40856
1.40876
1.40896
1.40916
1.40937
1.40957
1.1796
1.1801
1.1806
1.1812
1.1817
1.1823
1.1828
1.1833
1.1839
1.1844
1.1850
1.1855
1.1860
1.1865
1.1870
1.1875
1.1881
1.1886
1.1891
1.1896
1.1901
1.1907
1.1912
1.1917
1.1923
1.1928
1.1934
1.1939
1.1945
1.1950
1.1956
1.1961
1.1967
1.1972
1.1977
1.1983
1.1988
1.1994
1.1999
1.2005
1.2010
1.2015
1.2021
1.2026
1.2032
1.2037
1.2042
1.2048
1.2053
1.2059
Zahr
n
g/kg
368.2
369.2
370.1
371.1
372.1
373.0
374.0
374.9
375.9
376.9
377.8
378.7
379.6
380.5
381.4
382.3
383.2
384.2
385.1
386.0
386.9
387.8
388.8
389.7
390.7
391.6
392.6
393.5
394.5
395.4
396.4
397.3
398.3
399.2
400.1
401.1
402.0
402.9
403.9
404.8
405.7
406.7
407.6
408.5
409.5
410.4
411.3
412.3
413.2
414.1
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
25,80
25,88
25,96
26,04
26,12
26,20
26,28
26,36
26,44
26,52
26,60
26,68
26,75
26,83
26,90
26,98
27,05
27,13
27,21
27,28
27,35
27,43
27,52
27,59
27,68
27,76
27,84
27,92
28,00
28,08
28,16
28,23
28,32
28,40
28,48
28,56
28,63
28,72
28,79
28,88
28,95
29,03
29,11
29,19
29,27
29,35
29,43
29,51
29,59
29,67
74
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
45.0
45.1
45.2
45.3
45.4
45.5
45.6
45.7
45.8
45.9
46.0
46.1
46.2
46.3
46.4
46.5
46.6
46.7
46.8
46.9
47.0
47.1
47.2
47.3
47.4
47.5
47.6
47.7
47.8
47.9
48.0
48.1
48.2
48.3
48.4
48.5
48.6
48.7
48.8
48.9
49.0
49.1
49.2
49.3
49.4
49.5
49.6
49.7
49.8
49.9
500.7
502.1
503.5
504.9
506.3
507.8
509.2
510.6
512.0
513.4
514.8
516.1
517.5
518.8
520.2
521.5
522.8
524.2
525.5
526.9
528.2
529.6
531.0
532.4
533.8
535.3
536.7
538.1
539.5
540.9
542.3
543.6
545.0
546.3
547.7
549.1
550.4
551.8
553.1
554.5
555.8
557.2
558.6
560.0
561.4
562.8
564.2
565.6
567.0
568.4
1.40977
1.40997
1.41018
1.41038
1.41058
1.41079
1.41099
1.41119
1.41139
1.41160
1.41180
1.41200
1.41221
1.41241
1.41262
1.41282
1.41302
1.41323
1.41343
1.41364
1.41384
1.41405
1.41425
1.41446
1.41466
1.41487
1.41508
1.41528
1.41549
1.41569
1.41590
1.41611
1.41632
1.41652
1.41673
1.41694
1.41715
1.41736
1.41756
1.41777
1.41798
1.41819
1.41840
1.41861
1.41882
1.41903
1.41924
1.41945
1.41966
1.41987
1.2064
1.2070
1.2076
1.2081
1.2087
1.2093
1.2098
1.2104
1.2110
1.2115
1.2121
1.2127
1.2132
1.2137
1.2143
1.2148
1.2154
1.2159
1.2165
1.2170
1.2175
1.2181
1.2187
1.2192
1.2198
1.2204
1.2210
1.2215
1.2221
1.2227
1.2232
1.2238
1.2243
1.2249
1.2254
1.2260
1.2265
1.2271
1.2276
1.2282
1.2287
1.2293
1.2298
1.2304
1.2310
1.2315
1.2321
1.2327
1.2332
1.2338
Zahr
n
g/kg
415.0
416.0
417.0
417.9
418.9
419.9
420.9
421.8
422.8
423.7
424.7
425.6
426.5
427.5
428.4
429.3
430.2
431.1
432.0
432.9
433.8
434.8
435.7
436.7
437.6
438.6
439.5
440.5
441.4
442.4
443.3
444.2
445.1
446.0
446.9
447.8
448.7
449.7
450.6
451.4
452.3
453.3
454.2
455.1
456.1
457.0
457.9
458.8
459.8
460.7
Zaharoz
% (m/m)
29,75
29,83
29,92
30,00
30,08
30,17
30,25
30,34
30,42
30,50
30,59
30,66
30,75
30,82
30,91
30,99
31,06
31,15
31,22
31,31
31,38
31,47
31,55
31,63
31,72
31,81
31,89
31,97
32,05
32,14
32,22
32,30
32,38
32,46
32,59
32,63
32,70
32,79
32,86
32,95
33,02
33,11
33,19
33,27
33,36
33,44
33,52
33,61
33,69
33,77
75
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
50.0
50.1
50.2
50.3
50.4
50.5
50.6
50.7
50.8
50.9
51.0
51.1
51.2
51.3
51.4
51.5
51.6
51.7
51.8
51.9
52.0
52.1
52.2
52.3
52.4
52.5
52.6
52.7
52.8
52.9
53.0
53.1
53.2
53.3
53.4
53.5
53.6
53.7
53.8
53.9
54.0
54.1
54.2
54.3
54.4
54.5
54.6
54.7
54.8
54.9
569.8
571.2
572.6
574.0
575.4
576.9
578.3
579.7
581.1
582.5
583.9
585.4
586.9
588.3
589.8
591.3
592.8
594.3
595.7
597.2
598.7
600.1
601.5
602.9
604.3
605.8
607.2
608.6
610.0
611.4
612.8
614.3
615.8
617.2
618.7
620.2
621.7
623.2
624.6
626.1
627.6
629.0
630.4
631.8
633.2
634.7
636.1
637.5
638.9
640.3
1.42008
1.42029
1.42050
1.42071
1.42092
1.42114
1.42135
1.42156
1.42177
1.42198
1.42219
1.42240
1.42261
1.42283
1.42304
1.42325
1.42346
1.42367
1.42389
1.42410
1.42431
1.42452
1.42474
1.42495
1.42517
1.42538
1.42559
1.42581
1.42602
1.42624
1.42645
1.42666
1.42686
1.42707
1.42727
1.42748
1.42769
1.42789
1.42810
1.42830
1.42851
1.42874
1.42897
1.42919
1.42942
1.42965
1.42988
1.43011
1.43033
1.43056
1.2344
1.2349
1.2355
1.2361
1.2366
1.2372
1.2378
1.2384
1.2389
1.2395
1.2401
1.2407
1.2413
1.2419
1.2425
1.2431
1.2437
1.2443
1.2449
1.2455
1.2461
1.2466
1.2472
1.2478
1.2483
1.2489
1.2495
1.2500
1.2506
1.2512
1.2518
1.2524
1.2530
1.2536
1.2542
1.2548
1.2554
1.2560
1.2566
1.2571
1.2577
1.2583
1.2589
1.2595
1.2600
1.2606
1.2612
1.2617
1.2623
1.2629
Zahr
n
g/kg
461.6
462.5
463.5
464.4
465.3
466.2
467.2
468.1
469.0
469.9
470.9
471.8
472.8
473.8
474.7
475.7
476.6
477.6
478.6
479.5
480.5
481.4
482.3
483.2
484.1
485.0
485.9
486.8
487.7
488.6
489.6
490.5
491.4
492.4
493.3
494.3
495.2
496.2
497.1
498.0
499.0
499.9
500.8
501.7
502.6
503.5
504.3
505.2
506.1
507.0
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
33,86
33,94
34,02
34,10
34,19
34,28
34,36
34,44
34,53
34,61
34,69
34,78
34,87
34,95
35,04
35,13
35,22
35,31
35,39
35,48
35,57
35,65
35,74
35,82
35,91
35,99
36,08
36,16
36,24
36,33
36,41
36,50
36,59
36,67
36,76
36,85
36,94
37,03
37,11
37,20
37,29
37,37
37,45
37,54
37,62
37,71
37,79
37,88
37,96
38,04
76
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
55.0
55.1
55.2
55.3
55.4
55.5
55.6
55.7
55.8
55.9
56.0
56.1
56.2
56.3
56.4
56.5
56.6
56.7
56.8
56.9
57.0
57.1
57.2
57.3
57.4
57.5
57.6
57.7
57.8
57.9
58.0
58.1
58.2
58.3
58.4
58.5
58.6
58.7
58.8
58.9
59.0
59.1
59.2
59.3
59.4
59.5
59.6
59.7
59.8
59.9
641.7
643.2
644.6
646.1
647.6
649.1
650.5
652.0
653.5
654.9
656.4
657.9
659.4
660.8
662.3
663.8
665.3
666.8
668.2
669.7
671.2
672.7
674.3
675.8
677.4
678.9
680.4
682.0
683.5
685.1
686.6
688.1
689.6
691.0
692.5
694.0
695.5
697.0
698.4
699.9
701.4
702.9
704.5
706.0
707.6
709.1
710.6
712.2
713.7
715.3
1.43079
1.43101
1.43123
1.43145
1.43167
1.43189
1.43210
1.43232
1.43254
1.43276
1.43298
1.43320
1.43342
1.43364
1.43386
1.43409
1.43431
1.43453
1.43475
1.43497
1.43519
1.43541
1.43563
1.43586
1.43608
1.43630
1.43652
1.43674
1.43697
1.43719
1.43741
1.43763
1.43786
1.43808
1.43831
1.43854
1.43876
1.43899
1.43921
1.43944
1.43966
1.43989
1.44011
1.44034
1.44056
1.44079
1.44102
1.44124
1.44147
1.44169
1.2635
1.2640
1.2646
1.2652
1.2658
1.2664
1.2670
1.2676
1.2682
1.2688
1.2694
1.2700
1.2706
1.2712
1.2718
1.2724
1.2730
1.2736
1.2742
1.2748
1.2754
1.2760
1.2766
1.2773
1.2779
1.2785
1.2791
1.2797
1.2804
1.2810
1.2816
1.2822
1.2828
1.2834
1.2840
1.2846
1.2852
1.2858
1.2864
1.2870
1.2876
1.2882
1.2888
1.2895
1.2901
1.2907
1.2913
1.2920
1.2926
1.2932
Zahr
n
g/kg
507.9
508.8
509.7
510.7
511.6
512.5
513.4
514.3
515.3
516.2
517.1
518.0
518.9
519.9
520.8
521.7
522.6
523.5
524.4
525.4
526.3
527.2
528.2
529.1
530.1
531.0
532.0
532.9
533.8
534.8
535.7
536.6
537.5
538.4
539.3
540.2
541.1
542.0
542.9
543.8
544.7
545.7
546.6
547.5
548.5
549.4
550.3
551.2
552.2
553.1
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
38,11
38,22
38,30
38,39
38,48
38,57
38,65
38,74
38,83
38,91
39,00
39,09
39,18
39,26
39,35
39,44
39,53
39,62
39,70
39,79
39,88
39,97
40,06
40,15
40,25
40,34
40,43
40,52
40,61
40,70
40,80
40,88
40,97
41,06
41,14
41,23
41,32
41,41
41,50
41,58
41,67
41,76
41,86
41,95
42,04
42,13
42,22
42,32
42,41
42,50
77
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Zahr
n g/l
60.0
60.1
60.2
60.3
60.4
60.5
60.6
60.7
60.8
60.9
61.0
61.1
61.2
61.3
61.4
61.5
61.6
61.7
61.8
61.9
62.0
62.1
62.2
62.3
62.4
62.5
62.6
62.7
62.8
62.9
63.0
63.1
63.2
63.3
63.4
63.5
63.6
63.7
63.8
63.9
64.0
64.1
64.2
64.3
64.4
64.5
64.6
64.7
64.8
64.9
716.8
718.3
719.8
721.2
722.7
724.2
725.7
727.2
728.6
730.1
731.6
733.1
734.7
736.2
737.8
739.4
740.9
742.5
744.0
745.6
747.1
748.6
750.2
751.7
753.3
754.8
756.3
757.9
759.4
761.0
762.5
764.1
765.7
767.3
768.9
770.6
772.2
773.8
775.4
777.0
778.6
780.1
781.7
783.2
784.8
786.3
787.8
789.4
790.9
792.5
1.44192
1.44215
1.44237
1.44260
1.44283
1.44306
1.44328
1.44351
1.44374
1.44396
1.44419
1.44442
1.44465
1.44488
1.44511
1.44533
1.44556
1.44579
1.44602
1.44625
1.44648
1.44671
1.44694
1.44717
1.44740
1.44764
1.44787
1.44810
1.44833
1.44856
1.44879
1.44902
1.44926
1.44949
1.44972
1.44996
1.45019
1.45042
1.45065
1.45089
1.45112
1.45135
1.45159
1.45183
1.45206
1.45230
1.45253
1.45276
1.45300
1.45324
1.2938
1.2944
1.2950
1.2956
1.2962
1.2968
1.2974
1.2980
1.2986
1.2992
1.2998
1.3004
1.3011
1.3017
1.3023
1.3030
1.3036
1.3042
1.3048
1.3055
1.3061
1.3067
1.3073
1.3080
1.3086
1.3092
1.3098
1.3104
1.3111
1.3117
1.3123
1.3130
1.3136
1.3143
1.3149
1.3156
1.3162
1.3169
1.3175
1.3182
1.3188
1.3195
1.3201
1.3207
1.3213
1.3219
1.3226
1.3232
1.3238
1.3244
Zahr
n
g/kg
554.0
554.9
555.8
556.7
557.6
558.4
559.3
560.2
561.1
562.0
562.8
563.8
564.7
565.6
566.5
567.4
568.4
569.3
570.2
571.1
572.0
572.9
573.8
574.7
575.6
576.5
577.4
578.3
579.2
580.1
581.0
582.0
582.9
583.8
584.8
585.7
586.6
587.6
588.5
589.4
590.4
591.3
592.1
593.0
593.9
594.8
595.7
596.6
597.5
598.3
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
42,59
42,68
42,77
42,85
42,94
43,03
43,12
43,21
43,29
43,38
43,47
43,56
43,65
43,74
43,84
43,93
44,02
44,12
44,21
44,30
44,39
44,48
44,57
44,66
44,76
44,85
44,94
45,03
45,12
45,21
45,31
45,40
45,49
45,59
45,69
45,79
45,88
45,98
46,07
46,17
46,26
46,35
46,45
46,53
46,63
46,72
46,81
46,90
46,99
47,09
78
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
Zahr
n g/l
65.0
65.1
65.2
65.3
65.4
65.5
65.6
65.7
65.8
65.9
66.0
66.1
66.2
66.3
66.4
66.5
66.6
66.7
66.8
66.9
67.0
67.1
67.2
67.3
67.4
67.5
67.6
67.7
67.8
67.9
68.0
68.1
68.2
68.3
68.4
68.5
68.6
68.7
68.8
68.9
69.0
69.1
69.2
69.3
69.4
69.5
69.6
69.7
69.8
69.9
794.0
795.6
797.2
798.8
800.4
802.1
803.7
805.3
806.9
808.5
810.1
811.6
813.2
814.8
816.3
817.9
819.4
820.9
822.5
824.1
825.6
827.2
828.8
830.4
832.0
833.7
835.3
836.9
838.5
840.1
841.7
843.4
845.1
846.7
848.4
850.1
851.8
853.5
855.1
856.8
858.5
860.1
861.7
863.3
864.9
866.6
868.2
869.8
871.4
873.0
1.45347
1.45371
1.45394
1.45418
1.45441
1.45465
1.45489
1.45512
1.45536
1.45559
1.45583
1.45607
1.45630
1.45654
1.45678
1.45702
1.45725
1.45749
1.45773
1.45796
1.45820
1.45844
1.45868
1.45892
1.45916
1.45940
1.45964
1.45988
1.46012
1.46036
1.46060
1.46084
1.46108
1.46132
1.46156
1.46181
1.46205
1.46229
1.46253
1.46277
1.46301
1.46325
1.46350
1.46374
1.46398
1.46423
1.46447
1.46471
1.46495
1.46520
1.3251
1.3257
1.3264
1.3270
1.3277
1.3283
1.3290
1.3296
1.3303
1.3309
1.3316
1.3322
1.3328
1.3335
1.3341
1.3347
1.3353
1.3360
1.3366
1.3372
1.3378
1.3385
1.3391
1.3398
1.3404
1.3411
1.3418
1.3424
1.3431
1.3437
1.3444
1.3450
1.3457
1.3464
1.3471
1.3478
1.3484
1.3491
1.3498
1.3505
1.3512
1.3518
1.3525
1.3531
1.3538
1.3544
1.3551
1.3557
1.3564
1.3570
Zahr
n g/kg
599.2
600.1
601.1
602.0
602.9
603.8
604.7
605.6
606.6
607.5
608.4
609.3
610.1
611.0
611.9
612.8
613.6
614.5
615.4
616.2
617.1
618.0
618.9
619.8
620.7
621.6
622.5
623.4
624.3
625.2
626.1
627.0
628.0
628.9
629.8
630.8
631.7
632.6
633.5
634.5
635.4
636.3
637.2
638.0
638.9
639.8
640.7
641.6
642.4
643.3
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
47,18
47,27
47,37
47,46
47,56
47,66
47,75
47,85
47,94
48,04
48,13
48,22
48,32
48,41
48,50
48,60
48,69
48,77
48,87
48,97
49,05
49,15
49,24
49,34
49,43
49,53
49,63
49,73
49,82
49,92
50,01
50,11
50,21
50,31
50,41
50,51
50,61
50,71
50,81
50,91
51,01
51,10
51,20
51,29
51,39
51,49
51,58
51,68
51,78
51,87
79
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL II
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
Zahr
n g/l
70.0
70.1
70.2
70.3
70.4
70.5
70.6
70.7
70.8
70.9
71.0
71.1
71.2
71.3
71.4
71.5
71.6
71.7
71.8
71.9
72.0
72.1
72.2
72.3
72.4
72.5
72.6
72.7
72.8
72.9
73.0
73.1
73.2
73.3
73.4
73.5
73.6
73.7
73.8
73.9
74.0
74.1
74.2
74.3
74.4
74.5
74.6
74.7
74.8
74.9
874.6
876.2
877.8
879.4
881.0
882.7
884.3
885.9
887.5
889.1
890.7
892.4
894.1
895.7
897.4
899.1
900.8
902.5
904.1
905.8
907.5
909.2
910.8
912.5
914.2
915.9
917.5
919.2
920.9
922.5
924.2
925.9
927.6
929.2
930.9
932.6
934.3
936.0
937.6
939.3
941.0
942.7
944.4
946.0
947.7
949.4
951.1
952.8
954.4
956.1
1.46544
1.46568
1.46593
1.46618
1.46642
1.46667
1.46691
1.46715
1.46740
1.46765
1.46789
1.46814
1.46838
1.46863
1.46888
1.46913
1.46937
1.46962
1.46987
1.47011
1.47036
1.47061
1.47086
1.47110
1.47135
1.47160
1.47185
1.47210
1.47234
1.47259
1.47284
1.47309
1.47334
1.47359
1.47384
1.47409
1.47434
1.47459
1.47484
1.47509
1.47534
1.47559
1.47584
1.47609
1.47634
1.47660
1.47685
1.47710
1.47735
1.47760
1.3577
1.3583
1.3590
1.3596
1.3603
1.3609
1.3616
1.2622
1.3629
1.3635
1.3642
1.3649
1.3655
1.3662
1.3669
1.3676
1.3683
1.3689
1.3696
1.3703
1.3710
1.3717
1.3723
1.3730
1.3737
1.3744
1.3750
1.3757
1.3764
1.3771
1.3777
1.3784
1.3791
1.3798
1.3804
1.3811
1.3818
1.3825
1.3832
1.3838
1.3845
1.3852
1.3859
1.3866
1.3872
1.3879
1.3886
1.3893
1.3900
1.3906
Zahr
n
g/kg
644.2
645.1
645.9
646.8
647.7
648.6
649.4
650.3
651.2
652.1
652.9
653.8
654.7
655.6
656.5
657.4
658.3
659.2
660.1
661.0
661.9
662.8
663.7
664.6
665.5
666.4
667.3
668.2
669.0
669.9
670.8
671.7
672.6
673.5
674.4
675.2
676.1
677.0
677.9
678.8
679.7
680.5
681.4
682.3
683.2
684.0
684.9
685.8
686.7
687.5
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
51,97
52,06
52,15
52,25
52,35
52,45
52,54
52,64
52,73
52,83
52,92
53,02
53,12
53,22
53,32
53,42
53,52
53,62
53,72
53,82
53,92
54,02
54,12
54,22
54,32
54,42
54,51
54,62
54,72
54,81
54,91
55,01
55,11
55,21
55,31
55,41
55,51
55,61
55,71
55,81
55,91
56,01
56,11
56,21
56,31
56,41
56,51
56,61
56,71
56,81
80
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1
TABELUL III
Tabelul concentraiilor de zahr ( ) din mustul concentrat rectificat, n grame pe litru i grame per
kilogram, determinate cu ajutorul refractometrului gradat fie n procente din masa de zaharoz la
20 C, fie n indice de refracie la 20 C. Este dat, de asemenea, densitatea la 20 C
Zaharoz
% (m/m)
50.0
50.1
50.2
50.3
50.4
50.5
50.6
50.7
50.8
50.9
51.0
51.1
51.2
51.3
51.4
51.5
51.6
51.7
51.8
51.9
52.0
52.1
52.2
52.3
52.4
52.5
52.6
52.7
52.8
52.9
53.0
53.1
53.2
53.3
53.4
53.5
53.6
53.7
53.8
53.9
54.0
54.1
54.2
54.3
54.4
54.5
54.6
54.7
54.8
54.9
Indicele de
Densitatea la
refracie la 20 C
20 C
1.42008
1.2342
1.42029
1.2348
1.42050
1.2355
1.42071
1.2362
1.42092
1.2367
1.42113
1.2374
1.42135
1.2381
1.42156
1.2386
1.42177
1.2391
1.42198
1.2396
1.42219
1.2401
1.42240
1.2406
1.42261
1.2411
1.42282
1.2416
1.42304
1.2421
1.42325
1.2427
1.42347
1.2434
1.42368
1.2441
1.42389
1.2447
1.42410
1.2454
1.42432
1.2461
1.42453
1.2466
1.42475
1.2470
1.42496
1.2475
1.42517
1.2480
1.42538
1.2486
1.42560
1.2493
1.42581
1.2500
1.42603
1.2506
1.42624
1.2513
1.42645
1.2520
1.42667
1.2525
1.42689
1.2530
1.42711
1.2535
1.42733
1.2540
1.42754
1.2546
1.42776
1.2553
1.42797
1.2560
1.42819
1.2566
1.42840
1.2573
1.42861
1.2580
1.42884
1.2585
1.42906
1.2590
1.42927
1.2595
1.42949
1.2600
1.42971
1.2606
1.42993
1.2613
1.43014
1.2620
1.43036
1.2625
1.43058
1.2630
Zahr
n g/l
627.6
629.3
630.9
632.4
634.1
635.7
637.3
638.7
640.4
641.9
643.4
645.0
646.5
648.1
649.6
651.2
652.9
654.5
656.1
657.8
659.4
661.0
662.5
664.1
665.6
667.2
668.9
670.5
672.2
673.8
675.5
677.1
678.5
680.2
681.8
683.4
685.1
686.7
688.4
690.1
691.7
693.3
694.9
696.5
698.1
699.7
701.4
703.1
704.7
706.2
Zahr
n g/kg
508.5
509.6
510.6
511.6
512.7
513.7
514.7
515.7
516.8
517.8
518.8
519.9
520.9
522.0
523.0
524.0
525.1
526.1
527.1
528.2
529.2
530.2
531.3
532.3
533.3
534.4
535.4
536.4
537.5
538.5
539.5
540.6
541.5
542.6
543.7
544.7
545.8
546.7
547.8
548.9
549.8
550.9
551.9
553.0
554.0
555.1
556.1
557.1
558.2
559.1
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
37,28
37,38
37,48
37,56
37,66
37,76
37,85
37,94
38,04
38,13
38,22
38,31
38,40
38,50
38,59
38,68
38,78
38,88
38,97
39,07
39,17
39,26
39,35
39,45
39,54
39,63
39,73
39,83
39,93
40,02
40,12
40,22
40,30
40,40
40,50
40,59
40,69
40,79
40,89
40,99
41,09
41,18
41,28
41,37
41,47
41,56
41,66
41,76
41,86
41,95
81
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
(1) - concentraia de zahr este exprimat cazahr invertit.

TABELUL III
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
55.0
1.43079
1.2635
55.1
1.43102
1.2639
55.2
1.43124
1.2645
55.3
1.43146
1.2652
55.4
1.43168
1.2659
55.5
1.43189
1.2665
55.6
1.43211
1.2672
55.7
1.43233
1.2679
55.8
1.43255
1.2685
55.9
1.43277
1.2692
56.0
1.43298
1.2699
56.1
1.43321
1.2703
56.2
1.43343
1.2708
56.3
1.43365
1.2713
56.4
1.43387
1.2718
56.5
1.43409
1.2724
56.6
1.43431
1.2731
56.7
1.43454
1.2738
56.8
1.43476
1.2744
56.9
1.43498
1.2751
57.0
1.43519
1.2758
57.1
1.43542
1.2763
57.2
1.43564
1.2768
57.3
1.43586
1.2773
57.4
1.43609
1.2778
57.5
1.43631
1.2784
57.6
1.43653
1.2791
57.7
1.43675
1.2798
57.8
1.43698
1.2804
57.9
1.43720
1.2810
58.0
1.43741
1.2818
58.1
1.43764
1.2822
58.2
1.43784
1.2827
58.3
1.43809
1.2832
58.4
1.43832
1.2837
58.5
1.43854
1.2843
58.6
1.43877
1.2850
58.7
1.43899
1.2857
58.8
1.43922
1.2863
58.9
1.43944
1.2869
59.0
1.43966
1.2876
59.1
1.43988
1.2882
59.2
1.44011
1.2889
59.3
1.44034
1.2896
59.4
1.44057
1.2902
59.5
1.44079
1.2909
59.6
1.44102
1.2916
59.7
1.44124
1.2921
59.8
1.44147
1.2926
59.9
1.44169
1.2931
Zahr
n g/l
707.8
709.4
711.0
712.7
714.4
716.1
717.8
719.5
721.1
722.8
724.5
726.1
727.7
729.3
730.9
732.6
734.3
736.0
737.6
739.4
741.1
742.8
744.4
745.9
747.6
749.3
751.0
752.7
754.4
756.1
757.8
759.5
761.1
762.6
764.3
766.0
767.8
769.5
771.1
772.9
774.6
776.3
778.1
779.8
781.6
783.3
785.2
786.8
788.4
790.0
Zahr Tria alcoolic

n g/kg % vol. la 20 C
560.2
42,04
561.3
42,14
562.3
42,23
563.3
42,33
564.3
42,44
565.4
42,54
566.4
42,64
567.5
42,74
568.5
42,83
569.5
42,93
570.5
43,04
571.6
43,13
572.6
43,23
573.7
43,32
574.7
43,42
575.8
43,52
576.8
43,62
577.8
43,72
578.8
43,81
579.9
43,92
580.9
44,02
582.0
44,12
583.0
44,22
584.0
44,31
585.1
44,41
586.1
44,51
587.1
44,61
588.1
44,71
589.2
44,81
590.2
44,91
591.2
45,01
592.3
45,11
593.4
45,21
594.3
45,30
595.4
45,40
596.4
45,50
597.5
45,61
598.5
45,71
599.5
45,80
600.6
45,91
601.6
46,01
602.6
46,11
603.7
46,22
604.7
46,32
605.8
46,43
606.8
46,53
607.9
46,64
608.9
46,74
609.9
46,83
610.9
46,93
82
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
60.0
1.44192
1.2936
60.1
1.44215
1.2942
60.2
1.44238
1.2949
60.3
1.44260
1.2956
60.4
1.44283
1.2962
60.5
1.44305
1.2969
60.6
1.44328
1.2976
60.7
1.44351
1.2981
60.8
1.44374
1.2986
60.9
1.44397
1.2991
61.0
1.44419
1.2996
61.1
1.44442
1.3002
61.2
1.44465
1.3009
61.3
1.44488
1.3016
61.4
1.44511
1.3022
61.5
1.44534
1.3029
61.6
1.44557
1.3036
61.7
1.44580
1.3042
61.8
1.44603
1.3049
61.9
1.44626
1.3056
62.0
1.44648
1.3062
62.1
1.44672
1.3068
62.2
1.44695
1.3075
62.3
1.44718
1.3080
62.4
1.44741
1.3085
62.5
1.44764
1.3090
62.6
1.44787
1.3095
62.7
1.44810
1.3101
62.8
1.44833
1.3108
62.9
1.44856
1.3115
63.0
1.44879
1.3121
63.1
1.44902
1.3128
63.2
1.44926
1.3135
63.3
1.44949
1.3141
63.4
1.44972
1.3148
63.5
1.44995
1.3155
63.6
1.45019
1.3161
63.7
1.45042
1.3168
63.8
1.45065
1.3175
63.9
1.45088
1.3180
64.0
1.45112
1.3185
64.1
1.45135
1.3190
64.2
1.45158
1.3195
64.3
1.45181
1.3201
64.4
1.45205
1.3208
64.5
1.45228
1.3215
64.6
1.45252
1.3221
64.7
1.45275
1.3228
64.8
1.45299
1.3235
64.9
1.45322
1.3241
Zahr
n g/l
791.7
793.3
795.2
796.9
798.6
800.5
802.2
803.9
805.5
807.1
808.7
810.5
812.3
814.2
815.8
817.7
819.4
821.3
823.0
824.8
826.6
828.3
830.0
831.8
833.4
835.1
836.8
838.5
840.2
842.1
843.8
845.7
847.5
849.3
851.1
853.0
854.7
856.5
858.4
860.0
861.6
863.4
865.1
866.9
868.7
870.6
872.3
874.1
876.0
877.8
Zahr Tria alcoolic

n g/kg % vol. la 20 C
612.0
47,03
613.0
47,12
614.1
47,23
615.1
47,34
616.1
47,44
617.2
47,55
618.2
47,65
619.3
47,75
620.3
47,85
621.3
47,94
622.3
48,04
623.4
48,14
624.4
48,25
625.5
48,36
626.5
48,46
627.6
48,57
628.6
48,67
629.7
48,79
630.7
48,89
631.7
48,99
632.8
49,10
633.8
49,20
634.8
49,30
635.9
49,40
636.9
49,50
638.0
49,60
639.0
49,71
640.0
49,81
641.0
49,91
642.1
50,02
643.1
50,12
644.2
50,23
645.2
50,34
646.3
50,45
647.3
50,56
648.4
50,67
649.4
50,77
650.4
50,88
651.5
50,99
652.5
51,08
653.5
51,18
654.6
51,29
655.6
51,39
656.7
51,49
657.7
51,60
658.8
51,71
659.8
51,81
660.8
51,92
661.9
52,03
662.9
52,14
83
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
65.0
1.45347
1.3248
65.1
1.45369
1.3255
65.2
1.45393
1.3261
65.3
1.45416
1.3268
65.4
1.45440
1.3275
65.5
1.45463
1.3281
65.6
1.45487
1.3288
65.7
1.45510
1.3295
65.8
1.45534
1.3301
65.9
1.45557
1.3308
66.0
1.45583
1.3315
66.1
1.45605
1.3320
66.2
1.45629
1.3325
66.3
1.45652
1.3330
66.4
1.45676
1.3335
66.5
1.45700
1.3341
66.6
1.45724
1.3348
66.7
1.45747
1.3355
66.8
1.45771
1.3361
66.9
1.45795
1.3367
67.0
1.45820
1.3374
67.1
1.45843
1.3380
67.2
1.45867
1.3387
67.3
1.45890
1.3395
67.4
1.45914
1.3400
67.5
1.45938
1.3407
67.6
1.45962
1.3415
67.7
1.45986
1.3420
67.8
1.46010
1.3427
67.9
1.46034
1.3434
68.0
1.46060
1.3440
68.1
1.46082
1.3447
68.2
1.46106
1.3454
68.3
1.46130
1.3460
68.4
1.46154
1.3466
68.5
1.46178
1.3473
68.6
1.46202
1.3479
68.7
1.46226
1.3486
68.8
1.46251
1.3493
68.9
1.46275
1.3499
69.0
1.46301
1.3506
69.1
1.46323
1.3513
69.2
1.46347
1.3519
69.3
1.46371
1.3526
69.4
1.46396
1.3533
69.5
1.46420
1.3539
69.6
1.46444
1.3546
69.7
1.46468
1.3553
69.8
1.46493
1.3560
69.9
1.46517
1.3566
Zahr
n g/l
879.7
881.5
883.2
885.0
886.9
888.8
890.6
892.4
894.2
896.0
898.0
899.6
901.3
903.1
904.8
906.7
908.5
910.4
912.2
913.9
915.9
917.6
919.6
921.4
923.1
925.1
927.0
928.8
930.6
932.6
934.4
936.2
938.0
939.9
941.8
943.7
945.4
947.4
949.2
951.1
953.0
954.8
956.7
958.6
960.6
962.4
964.3
966.2
968.2
970.0
Zahr
n g/kg
664.0
665.0
666.0
667.0
668.1
669.2
670.2
671.2
672.3
673.3
674.4
675.4
676.4
677.5
678.5
679.6
680.6
681.7
682.7
683.7
684.8
685.8
686.9
687.9
688.9
690.0
691.0
692.1
693.1
694.2
695.2
696.2
697.2
698.3
699.4
700.4
701.4
702.5
703.5
704.6
705.6
706.6
707.7
708.7
709.8
710.8
711.9
712.9
714.0
715.0
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
52,25
52,36
52,46
52,57
52,68
52,79
52,90
53,01
53,12
53,22
53,34
53,44
53,54
53,64
53,75
53,86
53,96
54,08
54,18
54,29
54,40
54,51
54,62
54,73
54,83
54,95
55,06
55,17
55,28
55,40
55,50
55,61
55,72
55,83
55,94
56,06
56,16
56,28
56,38
56,50
56,61
56,72
56,83
56,94
57,06
57,17
57,28
57,39
57,51
57,62
84
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
Zaharoz
Indicele de
Densitatea la 20 C
70.0
1.46544
1.3573
70.1
1.46565
1.3579
70.2
1.46590
1.3586
70.3
1.46614
1.3593
70.4
1.46639
1.3599
70.5
1.46663
1.3606
70.6
1.46688
1.3613
70.7
1.46712
1.3619
70.8
1.46737
1.3626
70.9
1.46761
1.3633
71.0
1.46789
1.3639
71.1
1.46810
1.3646
71.2
1.46835
1.3653
71.3
1.46859
1.3659
71.4
1.46884
1.3665
71.5
1.46908
1.3672
71.6
1.46933
1.3678
71.7
1.46957
1.3685
71.8
1.46982
1.3692
71.9
1.47007
1.3698
72.0
1.47036
1.3705
72.1
1.47056
1.3712
72.2
1.47081
1.3718
72.3
1.47106
1.3725
72.4
1.47131
1.3732
72.5
1.47155
1.3738
72.6
1.47180
1.3745
72.7
1.47205
1.3752
72.8
1.47230
1.3758
72.9
1.47254
1.3765
73.0
1.47284
1.3772
73.1
1.47304
1.3778
73.2
1.47329
1.3785
73.3
1.47354
1.3792
73.4
1.47379
1.3798
73.5
1.47404
1.3805
73.6
1.47429
1.3812
73.7
1.47454
1.3818
73.8
1.47479
1.3825
73.9
1.47504
1.3832
74.0
1.47534
1.3838
74.1
1.47554
1.3845
74.2
1.47579
1.3852
74.3
1.47604
1.3858
74.4
1.47629
1.3865
74.5
1.47654
1.3871
74.6
1.47679
1.3878
74.7
1.47704
1.3885
74.8
1.47730
1.3892
74.9
1.47755
1.3898
75.0
1.47785
1.3905
Zahr
n g/l
971.8
973.8
975.6
977.6
979.4
981.3
983.3
985.2
987.1
988.9
990.9
992.8
994.8
996.6
998.5
1 000,4
1 002,2
1 004,2
1 006,1
1 008,0
1 009,9
1 012,0
1 013,8
1 015,7
1 017,7
1 019,5
1 021,5
1 023,4
1 025,4
1 027,3
1 029,3
1 031,2
1 033,2
1 035,1
1 037,1
1 039,0
1 040,9
1 042,8
1 044,8
1 046,8
1 048,6
1 050,7
1 052,6
1 054,6
1 056,5
1 058,5
1 060,4
1 062,3
1 064,4
1 066,3
1 068,3
Zahr
n g/kg
716.0
717.1
718.1
719.2
720.2
721.2
722.3
723.4
724.4
725.4
726.5
727.5
728.6
729.6
730.7
731.7
732.7
733.8
734.8
735.9
736.9
738.0
739.0
740.0
741.1
742.1
743.2
744.2
745.3
746.3
747.4
748.4
749.5
750.5
751.6
752.6
753.6
754.7
755.7
756.8
757.8
758.9
759.9
761.0
762.0
763.1
764.1
765.1
766.2
767.2
768.3
Tria alcoolic
% vol. la 20 C
57,72
57,84
57,95
58,07
58,18
58,29
58,41
58,52
58,63
58,74
58,86
58,97
59,09
59,20
59,31
59,42
59,53
59,65
59,76
59,88
59,99
60,11
60,22
60,33
60,45
60,56
60,68
60,79
60,91
61,02
61,14
61,25
61,37
61,48
61,60
61,72
61,83
61,94
62,06
62,18
62,28
62,41
62,52
62,64
62,76
62,87
62,99
63,10
63,23
63,33
63,46
85
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.4.3. GOST R 51875-2002
2.4.4. GOST 13192-73
2.4.5. GOST 28562-90
86
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.5 Aciditatea titrabil

2.5.1 MA-MD-AS313-01-ACITOT
1. DEFINIIE
Prin aciditate titrabil sau aciditate total

a vinului se nelege suma substanelor cu
reacie acid (acizii organici, sruri acide) care se pot titra cu o soluie alcalin titrat.
Dioxidul de carbon nu este inclus n aciditatea total.
Titrarea poteniometric sau titrarea cu bromotimol albastru ca indicator i compararea cu

un standard de culoare de punct final.
3 . REACTIVI
3.1 Soluie tampon cu pH 7:

- fosfat monofosfatic (KH2 PO4) .......................... 107,3 g
- soluie de hidroxid de sodiu 1M (NaOH) ............ 500 ml
- ap pn la ........................................................... 1000ml
Ca alternativ, exist n comer soluii tampon gata preparate.
3.2 Soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (NaOH).
3.3 4 g/l soluie indicatoare de de bromtimol albastru:
- bromotimol albastru (C27H28Br2 O5S) ..................... 4 g
- etanol neutru , 96 % vol. ........................................... 200 ml
Se dizolv i se adaug:
- ap lipsit de CO2 ........................................................ 200 ml
- soluie de hidroxid de sodiu 1M suficient
pentru a produce culoare albastru-verde (pH 7).......... aproximativ 7,5 ml
ap pn la
........................................................1000 ml
4. APARATURA
4.1 Pomp de vid cu ap.

4.2 Balon de vid de500 ml
4.3 Poteniometru cu scal gradat pentru valori pH i electrozi. Electrodul de sticl
trebuie pstrat n ap distilat. Electrodul de calomel/clorur de potasiu saturat trebuie pstrat
n soluie saturat de clorur de potasiu. Un electrod combinat este folosit cel mai des i trebuie
pstrat n ap distilat.
4.4 Cilindri gradai de50 ml (pentru vin) i de 100 ml (pentru must concentrat rectificat).
87
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. METODA DE LUCRU
5.1 Pregtirea probei

5.1.1 Vinuri
Se elimin dioxidul de carbon. Se pun aproximativ 50 ml de vin ntr-un balon de vid; se
face vid n balon cu pompa de ap timp de 1-2 minute, agitnd n mod continuu.
5.1.2 Must concentrat rectificat
Se ntroduc 200 g must concentrat rectificat msurat cu precizie. Se completeaz pn la
cot cu 500 ml ap. Se omogenizeaz.
5.2 Titrarea poteniometric
5.2.1 Calibrarea pH-metrului
pH-metrul este calibrat pentru utilizare
productorului, cu soluie tampon pH 7,00 la 20 0 C.
la
20
C,
conform
instruciunilor
5.2.2 Metoda de determinare

ntr-un cilindru gradat (punctul 4.4) se ntroduce o cantitate din prob, preparat n
conformitatecu punctul 5.1, cantitate egal cu 10 ml. n cazul vinului, i cu 50 ml n cazul
mustuluiconcentrat rectificat. Se adaug circa 10 ml ap distilat i apoi seadaug soluie de
hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2) din biuret pn cnd pH-ul este egal cu 7 la 20 0C.
Hidroxidul de sodiu trebuie adugat ncet i soluia trebuie amestecat continuu. Se noteaz
cu n ml volumul de Na OH 0,1 M adugat.
5.3 Titrarea cu indicator
5.3.1 Test preliminar: determinarea culorii la punctul final ntr-un cilindru gradat
(punctul 4.4) se pun 25 ml ap distilat fiart, 1 ml soluie de bromotimol albastru i o cantitate
preparat n conformitate cu punctul (5.1) egal cu 10 ml, n cazul vinului, i 50 ml n cazul
mustului concentrat
rectificat. Se
adaug
soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M
(punctul 3.2) pn cnd culoarea devine albastru-verde. Apoi se adaug 5 ml soluie tampon
pH 7 (punctul 3.7).
5.3.2 Msurare
ntr-un cilindru gradat (punctul 4.4) se pun 30 ml ap distilat fiart, 1 ml soluie de
bromotimol albastru (3.3) i o cantitate din proba preparat n conformitate cu punctul (5.1)
egal cu 10 ml, n cazul vinului, i 50 ml n cazul mustului concentrat rectificat. Se adaug
soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2) pn cnd se obine aceeai culoare ca n
testul
preliminar de mai sus (punctul 5.3.1).Se noteaz cu n ml volumul de
hidroxid de sodiu 0,1 M adugat.
88
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.1 Metoda de calcul

6.1.1 Vinuri
Aciditatea total exprimat n miliechivaleni per litru este dat de formula:
A = 10 x n
Se noteaz cu o cifr zecimal.
Aciditatea total exprimat n grame de acid tartric pe litru este dat de
formula :
A = 0,075 A
6.1.2
Must concentrat rectificat

- Aciditatea total exprimat n miliechivaleni per kilogram de must concentrat
rectificat trebuie dat de a = 5 n.
- Aciditatea total exprimat n miliechivaleni per kilogram de zaharuri
totale
este dat de formula:
500 x n
A = ---------------P
P- procentul de concentraie (m/m) a zaharurilor totale.
6.2 Repetabilitatea (r) pentru titrare cuindicator:

r = 0,9 meq /l
r = 0,07 g acid tartric / l
6.3 Reproductibilitatea (R) pentru titrare cu indicator (punctul 5.3)
Pentru soiuri de vin alb i rose:
R = 3,6 meq /l
R = 0,3 g acid tartric / l
Pentru soiuri de vin rou:
R = 5,1 meq /l
R = 0,4 g acid tartric / l
89
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.5.2. SM GOST R 51621-2000
90
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.6 Aciditatea volatil

2.6.1 MA-MD-AS313-02-ACIVOL
1. DEFINIIE
Aciditatea volatil este constituit din acizii aparinnd seriilor acetice prezeni n
vin n stare liber i n combinaie, sub form de sare.
Titrarea acizilor volatili separai din vin printr-o distilare cu vapori de ap i titrarea
produsului de distilare.
Mai nti se elimin bioxidul de carbon din vin.
Aciditatea bioxidului de sulf liber i combinat, distilat n aceste condiii , trebuie
sczut din aciditatea produsului rezultat n urma distilrii.
Trebuie sczut de asemenea, aciditatea oricrui acid sorbic adugat eventual n
vin.
Not.
O parte din acidul saliilic, folosit n unele ri pentru a stabiliza vinurile naintea
analizei
este prezent n produsul rezultat n urma distilrii. Acesta trebuie
determinat i sczut din aciditate. Metoda de determinare se afl n punctul 7 din
prezentul capitol.
3. REACTIVI
Acid tartric cristalizat (C4H6O6).

Soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (NaOH).
Soluie de fenolftalein 1% n alcool neutru 96 %.
Acid clorhidric ( = 1,18 pn la 1,19 g/ml) diluat la (v/v).
Soluie de iod 0,005 M (I2).
Iodur de potasiu (KI) cristalizat.
Soluie de amidon 5 g/l.
Se amestec 5 g amidon cu aproximativ 500 ml ap. Se aduce la punctul de
fierbere,
amestecnd continuu, i se fierbe timp de 10 minute. Se adaug 200 g
clorur de sodiu. Cnd
s-a rcit, se completeaz la un litru.
Soluie saturat de borax (Na2B4O7 x 10 H2 O), adic aproximativ 55 g/l la20 0C.
4. APARATURA
4.1 Aparatul de distilare n vapori de ap este format din:

- generator de abur, aburul nu trebuie s conin bioxid de carbon;
- barbotor de sticl;
- coloan de rectificare;
- refrigerent
91
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Aceast instalaie trebuie s treac urmtoarele trei teste:

a) se pun 20 ml ap fiart n laborator. Se colecteaz 250 ml de produs distilat i se
adaug 0,1 ml soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2) i dou picturi de soluie de
fenolftalein (punctul 3.3). Nuana roz trebuie s se pstreze cel puin 10 secunde (aburul s nu
conin bioxid de carbon).
b) se pun n barbotor 20 ml soluie de acid acetic 0,1 M. Se colecteaz 250 ml de produs
distilat. Se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2): volumul utilizat trebuie
s fie de cel puin 19,9 ml ( cel puin 99,9 5 din acidul acetic a fost antrenat de vapori).
c) se pun n barbotor 20 ml soluie de acid lactic 1 M. Se colecteaz 250 ml de produs
distilat. Se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2).
Volumul de soluie de h idroxid de sodiu adugat trebuie s fie mai mic sau egal cu 1,0 ml
(nu se distileaz mai mult de 0,5 5 din acidul lactic).
Orice aparat sau procedeu care trece aceste teste n mod
condiiiloer cerute aparatelor i procedeelor oficiale internaionale.
satisfctor, ndeplinete
4.2 Pomp de vid cu ap

4.3 Balon de vid
5. METODA DE LUCRU
5.1 Pregtirea probei: eliminarea bioxidului de carbon. Se pun circa 50 ml vin n

balonul de vid; se face vid n balon cu pompa de ap timp de un minut sau dou,
agitndu-se continuu.
5.2 Distilarea cu vapori de ap
Se pun n barbotor 20 ml vin fr bioxid de carbon (punctul 5.1). Se adaug
aproximativ 0,5 g acid tartric (punctul 3.1). Se colecteaz cel puin 250 ml de produs distilat.
5.3 Titrarea
Se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M (punctul 3.2), folosindu-se 2 picturi de
fenolftalein (punctul 3.3) ca indicator. Se noteaz cu n ml cantitatea de hidroxid de sodiu
folosit.
Se adaug 4 picturi de acid clorhidric diluat 1/4 (3.4), 2 ml soluie de amidon (punctul 3.3)
i cteva cristale de iodur de potasiu (punctul 3.6). Se titreaz dioxidul de sulf liber cu o soluie
de iod 0,005 M (punctul 3.5). Se noteaz cu n' cantitatea folosit.
Se adaug soluie saturat de borax (3.8) pn cnd nuana roz reapare. Se titreaz dioxidul
de sulf combinat cu o soluie de iod 0,005 M (punctul 3.5). n' este cantitatea folosit.
92
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.
EXPRIMAREA REZULTATELOR
6.1. Metoda de calcul

Aciditatea volatil exprimat, cu o cifr zecimal, n miliechiva-leni pe litru este dat de
formula:
A = 5(n - 0,1 n' - 0,05 n").
Aciditatea volatil exprimat, cu dou zecimale, n grame de acid acetic pe litru este dat de
formula:
0,300 ( n - 0,1 n' - 0,05 n").
6.2.
Repetabilitatea (r)
r = 0,7 meq/l
r = 0,04 g acid acetic/l.
6.3.
Reproductibilitatea (R)
R = 1,3 meq/l
R = 0,08 g acid acetic/l.
6.4.
Vin n care exist acid sorbic
Deoarece 96 % din acidul sorbic este antrenat de vapori ntr-un volum distilat de 250 ml,
aciditatea trebuie sczut din aciditatea volatil, tiind c 100 mg acid sorbic corespunde unei
aciditide 0,89 miliechivaleni sau 0,053 g acid acetic i cunoscnd concentraia de acid sorbic
exprimat n mg/l determinat prin alte metode.
2.6.2. GOST R 51654-2000

2.6.3. GOST 13193-73
93
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.7 Dioxidul de sulf

2.7.1 MA-MD-AS33-04-DOSU
1.DEFINIII
Dioxidul de sulf liber este definit de dioxidul de sulf prezent n must sau vin in
urmatoarele forme:H2 SO3 , HSO3- .
Echilibrul dintre aceste forme este ofuncie a pH i temperaturii:
H2SO3
H+ + HSO3 -
H2 SO3 - reprezinta dioxidul de sulf molecular.

Dioxidul de sulf total este definit ca totalul tuturor formelor de bioxid de sulf prezente in
vin, fie in stare libera, fie combinata cu constituenii sai.
2.DIOXIDUL DE SULF LIBER I TOTAL
2.1. Principiul metodelor

2.1.1. Metoda de referina
Pentru vinuri i must
Dioxidul de sulf este transportat de un curent de aer sau azot; este fixat i oxidat
fiind trecut printr-o soluie diluata i neutra de apa oxigenata. Acidul sulfuric format este
determinat prin titrarea cu o soluie standard de hidroxid de sodiu. Dioxidul de sulf liber este
separat de vin prin antrenare la temperatura scazuta (10C).
Dioxidul de sulf total este separat de vin prin antrenare la temperatura ridicata
(aproximativ100C).
Pentru mustul concentrat rectificat
Dioxidul de sulf total se extrage din mustul concentrat rectificat diluat inainte prin
antrenare la temperatura ridicata (aproximativ 100C).
2.1.2. Metoda rapida de determinare (pentru vinuri i musturi)
Dioxidul de sulf liber este determinat prin titrare iodometrica directa.
Dioxidul de sulf combinat este determinat prin titrare iodometrica dupa hidroliza alcalina.
Cand este adaugat bioxidului de sulf liber, rezulta dioxidul de sulf total.
2.2. Metoda de referina
2.2.1. Aparatura
Aparatele utilizate trebuie sa fie conforme cu diagrama prezentata mai jos, in special
cu privire la refrigerator.
Tubul de alimentare cu gaz care ajunge la balonul B se termina intr-o mica sfera cu
diametrul de1cm cu 20 de orificii cu diametrul de 0,2 mm pe circumferina orizontala cea
mai mare. Alternativ,acest tub se poate termina intr-un vas de sticla care produce un numar
mare de bule foarte mici, care asigura contactul dintre fazele lichida i gazoasa.
94
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Dimensiunile sunt date in milimetri. Diametrele interioare ale

celor patru tuburi concentrice care formeaza condensatorul
sunt 45, 34, 27 i 10 mm.
Curentul de gaz ce traverseaza aparatele ar trebui sa fie de aproximativ 40 litri pe
ora. Sticla din dreapta diagramei are rolul de a limita reducerea presiunii produsa de apa
pompata la20-30cm.
Pentru reglarea vidului la valoarea corecta, trebuie instalat un debitmetru, cu un tub
semicapilar, intrevasul spalator i sticla.
Microbiureta.
2.2.2. Reactivi
Acid fosforic 85% (H3PO4 , 20 = 1,71 g/ml); soluie de 25 g la 100 (m/v)
Soluie de apa oxigenata, 9,1 g H2 O2 /litru (trei volume).
Reactivul indicator:
rou de metil ..................................................................... 100 mg
albastru de metilen............................................................50 mg
alcool, 50% vol...............................................................100 ml
Soluie de hidroxid de sodiu, NaOH, 0,01M.
2.2.3. Metoda de lucru
Determinarea bioxidului de sulf liber
Vinul se pastreaza intr-o sticla plina i inchisa cu dop, la20C, timp de doua zile
inaintea determinarii. Se pun 2-3 ml de soluie de apa oxigenata i doua picaturi din reactivul
indicator in balonul B i se neutralizeaza soluia de apa oxigenata cu soluie de hidroxid de
95
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
sodiu 0,01M . Se conecteaza balonul la aparate. Se introduc 50ml dinproba i 15 ml de acid

fosforic in balonul A al aparatului de antrenare.
Se conecteaza balonul la aparate. Bulele de aer (sau azot) traverseaza aparatele timp
de 15minute. Dioxidul de sulf liber transportat este oxidat la acid sulfuric.Se indeparteaza
balonul de aparat i se titreaza acidul care s-a format cu soluie de hidroxid de sodiu 0,01M . Se
noteaza cu n ml volum ulutilizat.
Exprimarea rezultatelor
Dioxidul de sulf eliberat este exprimat in mg/l, rotunjit la cel mai apropiat numar
intreg.
Calculare
Dioxidul de sulf liber, inmiligrame pe litru, este 6,4 n.
Determinarea bioxidului de sulf total
Pentru mustul concentrat rectificat, sefolosete soluia obinut prin diluarea probei
analizate la 40% (m/v), conform capitolului Acidi- tatea titrabil, seciunea 5.1.2. Se introduc
50ml din aceasta soluie i 5 ml de acid fosforic in balonul A de 250 ml al aparatului de
antrenare. Se conecteaza balonul la aparat.
Vinuri i must
Daca concentraia estimata in proba nu depaete 50 mg de SO2 total per litru, se pun 50
ml din proba i 15 ml de acid fosforic in balonul A de 250 ml al aparatului de antrenare. Se
conecteaza balonul la aparat.
Pentru analizarea bioxidului de sulf coninut de sucul de struguri, trebuie s se utilizeze 5
ml de soluie 25% (m/v) de acid fosforic .
Cand concentraia estimata in proba
depaete 50mg de SO 2 total pe litru, se pun
20ml din proba i 5 ml de acid fosforic in balonul A de 100 ml al aparatului de
antrenare. Se conecteaza balonul la aparat.
Se pun 2-3 ml soluie de apa oxigenata in vasul spalator B, neutralizat ca mai
inainte, i se aduce vinul din balonul A la fierbere utilizand o flacara mica de 4-5 cm in alime
care trebuie sa atinga direct fundul balonului. Nu se pune balonul pe o placa de metal, ci pe un
disc cu o deschizatura de aproximativ 30 mm diametru. Acest lucru este necesar pentru a evita
supraincalzirea substanelo rextrase din vin care sunt depozitate pe pereii balonului.
Se menine la fierbere in timp ce trece un curent de aer (sau azot). In 15 minute
dioxidul de sulf total a fost antrenat i oxidat. Se determin acidul sulfuric format prin titrarea
cusoluie de hidroxid de sodiu 0,01M .
Se noteaz cu n volumul utilizat.
Must i vinuri: Dioxidul de sulf total este exprimat in mg/l.
Mustul concentrat rectificat: dioxidul de sulf total este exprimat in
mg/kg din zaharurile totale.
Calculare
Pentru vinuri:
Dioxidul de sulf total in miligrame per litru:
- probe cuconinut scazut de bioxid de sulf (50 ml proba testata):
6,4 n
96
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
- alte probe (20 ml proba testata) :

16 n
Calculare
Pentru vinuri:
Dioxidul de sulf total in miligrame per litru:
- probe cuconinut scazut de bioxid de sulf (50 ml proba testata):
6,4 n
- alte probe (20 ml proba testata) :
16 n
Pentru mustul concentrat rectificat:
Dioxidul de sulf total in miligrame per kilogram din zaharurile totale [50ml proba
testata preparata]:
1600 n
P
unde
P = procentajul concentraiei (m/m) a zaharurilor totale.
Repetabilitatea (r)
50 ml proba testata < 50 mg/l;
Reproductibilitate (R)
r = 1 mg/l.
r = 6 mg/l.

R = 9 mg/l.
R = 15 mg/l.
3.DIOXIDUL DE SULF
MOLECULAR
3.1. Principiul metodei

Procentajul de bioxid de sulf molecular, H2 SO3 in dioxidul de sulf liber, se
calculeaz ca ofuncie a pH, a concentraiei alcoolice i a temperaturii.
Pentru o temperatur i concentraia alcoolica data:
H+ + HSO3 -
H2SO3
[H 2 SO3 ] =
cu
L
10
(1)
( pH pK M )+1
pK M = pK T
A21
I + B 21
L = [H 2 SO3 ] + HSO3
unde
I = puterea ionica,
97
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
A i B
KT
KM
= coeficieni care variaza infuncie de temperatura i concentraia alcoolica,

= constanta de disociere termodinamica: in tabelul 1 sunt date
valori ale pK pentru diferite temperaturi i tarii alcoolice,
= constanta de disociere mixt
Luand o valoare medie de 0,038 pentru fora ionica I, tabelul 2 prezint valori ale
lui
pKM pentru diferite temperaturi i concentraii alcoolice.
Coninutul de bioxid de sulf molecular calculat folosind expresia (1) este dat n
tabelul 3 pentru diferite valori ale pH-ului, temperaturii i concentraiei alcoolice.
3.2 Calculare
Pentru cunoaterea pH-ului vinului i a concentraiei alcoolice, procentul bioxidului
de sulf molecular este dat de tabelul 3 pentru o temperatura de T C. Se noteaza cu X %.
Dioxidul de sulf molecular n mg/l este:
XxC
unde
C = coninutul de bioxid de sulf liber n , mg/l.
TABELUL I
Valori ale constantei de disociere termodinamic pKT
25
2,000
Temperatura ( 0C )
30
2,219
35
2,334
40
2,493
1,897
2,098
2,299
2,397
2,527
10
1,997
2,198
2,394
2,488
2,606
15
2,099
2,301
2,503
2,607
2,728
20
2,203
2,406
2,628
2,754
2,895
Conc. alcool
% vol.
0
20
0,798
TABELUL II
Valori ale constantei de disociere mixt pKM (I= 0,038)
25
1,925
Temperatura ( 0C )
30
2,143
35
2,257
40
2,416
1,819
2,020
2,220
2,317
2,446
10
1,916
2,116
2,311
2,405
2,522
15
2,014
2,216
2,417
2,520
2,640
20
2,114
2,317
2,538
2,663
2,803
Conc. alcool
% vol.
0
20
1,723
98
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.7.1
MA-MD-AS33-04-DOSU
TABELUL III
Dioxidul de sulf molecular ca procent din dioxidul desulf liber

I=0,038
T=20 0C
SO2 molecular/
SO2 liber (%)
pH
Concentraia alcoolic, (% vol.)
0
5
10
15
2,8
7,73
9,46
11,55
14,07
2,9
6,24
7,66
9,40
11,51
3,0
5,02
6,18
7,61
9,36
3,1
4,03
4,98
6,14
7,58
3,2
3,22
3,99
4,94
6,12
3,3
2,58
3,20
3,98
4,92
3,4
2,06
2,56
3,18
3,95
3,5
1,64
2,04
2,54
3,16
3,6
1,31
1,63
2,03
2,53
3,7
1,04
1,30
1,62
2,02
3,8
0,83
1,03
1,29
1,61
T=25 0 C
2,8
11,47
14,23
17,15
20,67
2,9
9,58
11,65
14,12
17,15
3,0
7,76
9,48
11,55
14,12
3,1
6,27
7,68
9,40
11,55
3,2
5,04
6,20
7,61
9,40
3,3
4,05
4,99
6,14
7,61
3,4
3,24
4,00
4,94
6,14
3,5
2,60
3,20
3,97
4,94
3,6
2,07
2,56
3,18
3,97
3,7
1,65
2,05
2,54
3,18
3,8
1,32
1,63
2,03
2,54
T=30 0 C
2,8
18,05
20,83
24,49
29,28
2,9
14,89
17,28
20,48
24,75
3,0
12,20
14,23
16,98
20,71
3,1
9,94
11,65
13,98
17,18
3,2
8,06
9,48
11,44
14,15
3,3
6,51
7,68
9,30
11,58
3,4
5,24
6,20
7,53
9,42
3,5
4,21
4,99
6,08
7,63
3,6
3,37
4,00
4,89
6,16
3,7
2,69
3,21
3,92
4,95
3,8
2,16
2,56
3,14
3,98
20
17,09
14,07
11,51
9,36
7,58
6,12
4,92
3,95
3,16
2,53
2,02
24,75
22,71
17,18
14,15
11,58
9,42
7,63
6,16
4,55
3,98
3,18
35,36
30,29
25,66
21,52
17,88
14,75
12,08
9,84
7,98
6,44
5,19
99
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
TABELUL III
(continuare)
SO2 molecular/
SO2 liber (%)
pH
0
2,8
22,27
2,9
18,53
3,0
15,31
3,1
12,55
3,2
10,24
3,3
8,31
3,4
6,71
3,5
5,44
3,6
4,34
3,7
3,48
3,8
2,78
2,8
2,9
3,0
3,1
3,2
3,3
3,4
3,5
3,6
3,7
3,8
29,23
24,70
20,67
17,15
14,12
11,55
9,40
7,61
6,14
4,94
3,97
2.7.2. SM GOST R 51655-2000
T=35 0C
Concentraia alcoolic, (% vol.)

5
10
15
24,75
28,71
34,42
20,71
24,24
29,42
17,18
20,26
24,88
14,15
16,79
20,83
11,58
13,82
17,28
9,42
11,30
14,23
7,63
9,19
11,65
6,16
7,44
9,48
4,95
6,00
7,68
3,98
4,88
6,20
3,18
3,87
4,99
0
T=40 C
30,68
34,52
40,89
26,01
29,52
35,47
21,83
24,96
30,39
18,16
20,90
25,75
14,98
17,35
21,60
12,28
14,29
17,96
10,00
11,70
14,81
8,11
9,52
12,13
6,56
7,71
9,88
5,28
6,22
8,01
4,24
5,01
6,47
I=0,038
20
42,18
36,69
31,52
26,77
22,51
18,74
15,49
12,71
10,36
8,41
6,80
50,14
44,74
38,85
33,54
28,62
24,15
20,19
16,73
13,77
11,25
9,15
100
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.8 Zaharoza, glucoza, fructoza

2.8.1.MA-MD-AS311-03-SUCRES
1. DOMENIU DE APLICARE
Determinarea coninutului de fructoz, glucoz i zaharoz n vinuri i musturi prin metoda

cromatografiei lichide de nalt performan (HPLC).
2. PRINCIPIUL
Zaharurile i glicerina sunt determinate direct prin HPLC cu detectare refractometric.

3. REACTIVI. PREPARAREA SOLUIILOR DE REACTIVI
Ap demineralizat
Acetonitril minimum de transmisie la 200 nm, puritate >99%
Metanol - puritate >99%
Etanol 95-96%
Fructoz - puritate >99%
Glucoz - puritate >99%
Zaharoz D(+) - puritate >99%
Glicerin - puritate >99%
Azot - puritate >99%
Heliu - puritate >99%.
3.1 Apa demineralizat filtrat pe o membran de celuloz 0,45 m cu ajutorul sistemului
de filtrare ;
3.2 Eluentul: Cu ajutorul unui cilindru gradat de 1 l se plaseaz 800 ml de acetonitril ntrun flacon de 1 l , apoi se adaog 200 ml de ap (3.1). se degazeaz n permanen cu heliu . n
cazul sistemelor cu circuit nchis (rentoarcerea eluentului n flacon), amestecul este rennoit
sptmnal.
4. ECHIPAMENTE
Baloane conice de 100 ml

Vase cilindrice de 100 ml
Vase cilindrice de 50 ml
Pipete automate de 10 ml
Con de ajutaj
Baloane cotate de 100 ml
Cilindru cu capacitatea de 1 l
Flacon de 1 l
Sering de 20 ml
Sistem de filtrare
Port-filtre
Membrane de 0,45 m din celuloz
Membrane de 5,0 cm din celuloz
101
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.8.1. MA-MD-AS311-03-SUCRES
Prefiltre din celuloz

Cartu de filtrare din silice grefat cu grupri de octadecil (spre exemplu: Seppack C18)
Pelicul etirabil (care se terge), spre exemplu, Parafilm
fiole conice de 10 ml
Instalaie HPLC
Coloan alchilaminic de 5 m i 250x4 mm
Condiionarea coloanei: coloanele sunt umplute i testate cu hexan. Se spal cu 50 ml de
etanol, apoi cu 50 ml metanol , nainte de trecerea amestecului acetonitril/ap 80/20. Debitul
iniial este de 0,1 ml/min, ulterior acesta crete progresiv pn la 1 ml/min.
Detector refractometric - Se cltete celula de referin odat sau de dou ori n zi cu eluent se
las pe aproximativ un sfert de or pentru a stabili linia de fond. Se regleaz la zero
refractometrul.
Baie cu ultrasunete
5. PREGTIREA PROBELOR
Probele sunt n prealabil supuse degazrii cu azot sau ntr-o baie cu ultrasunete.
6. MODUL DE LUCRU
6.1. Pregtirea mostrei

6.1.1 Filtrarea
Se preleveaz cu ajutorul unei seringi 25 ml de produs i se filtreaz:
- vinul, printr-o membran de 0,45 m;
- mustul i vinul neclarificat (brut) - prin prefiltru i printr-o serie de filtre.
Mustul se dilueaz de 5 ori. Se iau 20 ml din vinul sau mustul filtrat (diluat) cu ajutorul unei
pipete automate de 10 ml, dotat cu con de ajutaj , se transfer cantitativ ntr-un balon cotat de
100 ml. Se aduce volumul la cot cu ap demineralizat, se nvelete balonul cu pelicul , se
omogenizeaz.
6.1.2. Eliminarea compuilor fenolici
Proba de vin sau must este trecut printr-un cartu de filtrare C18 .
Pregtirea cartuului C18 pentru filtrare
Se trec n contrasens 10 ml de metanol, apoi 10 ml de ap demineralizat.
Trecerea probei prin cartuul C18
Se cltete seringa de 10 ml cu aproximativ 2 ml de prob. Apoi se iau cam 9 ml din proba de
analizat, se unete cartuul cu captul ngust la sering, se trece proba prin cartu primii 3 ml se
elimin, iar urmtorii 6 se plaseaz ntr-o fiol conic de 10 ml.
Dup fiecare filtrare cartuul se cltete n contrasens cu 10 ml de metanol, apoi 10 ml de ap
demineralizat. n acest caz, el poate fi reutilizat.
102
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.1.3. Curirea veselei

Seringile i acul se cltesc cu ap demineralizat dup fiecare prob;
Port-filtrul se cltete cu ap cald, apoi cu metanol . Se usuc n condiii de camer.
6.2.
Analize
6.2.1. Condiii analitice

Faza mobil: eluie izocratic cu eluentul acetonitril/ap 80/20, v/v;
Debit: 1 ml/min;
Volum injectat 20 l;
Detectorul, reglat conform instruciunii aparatului.
6.2.2. Etalonare extern
Se prepar un ameste etalon sintetic din:
Fructoz 10 g/l 0,01 g/l;
Glucoz 10 g/l 0,01 g/l;
Zaharoz10 g/l 0,01 g/l;
Dac este necesar de determinat i glicerina, se adaog:
Glicerin 10 g/l 0,01 g/l.
RFi= Si/Ci ,
Calculul factorilor de rspuns:
unde Si este suprafaa picului produsului n soluia de calibrare;
Ci - concentraia produsului n soluia de calibrare.
7.
Calcularea concentraiei n proba de analizat:

Cpr. = Spr./RFi ,
unde Spr. Este suprafaa picului de produs n proba de analizat. Rezultatele se exprim n g/l.
Trebuie de luat n consideraie diluiile efectuate.
8.
CONTROLUL REZULTATELOR
Se efectueaz o testare prin metoda de referin, cu introducerea probelor de referin

printre cele de analizat.
9. PERFORMANA METODEI
Durata unei analize este de aproximativ 50 min. Influena diferitor constitueni ai vinului:
glicerina se separ n aceleai condiii, ca i zaharurile. Astfel, se recomand a o doza n cadrul
aceleai reprize. Nici unul dintre componenii vinului nu elueaz concomitent cu glucoza, fructoza
i zaharoza.
Analiza este sensibil la variaia temperaturii, coloanele trebuie protejate cu un nveli.
103
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
9.1. Limite de detectare i cuantificare

LDfructoza=0,12 g/l
LCfructoza=0,4 g/l
LDglucoza=0,18 g/l
LCglucoza=0,6 g/l
9.2. Fidelitatea metodei

9.2.1. Repetabilitatea
Diferena absolut ntre dou rezultate individuale pe acelai vin, efectuate de acelai
operator ntr-un interval scurt de timp nu va depi valoarea repetabilitii n mai mult de 5% de
cazuri (P=0,95).
Pentru glucoz +fructoz:
G+F > 5 g/l:
RSDr = 1%
Limita de repetabilitate r=3% (2,8 RSDr)
G+F cuprins ntre 2 i 5 g/l:
RSDr = 3%
Limita de repetabilitate r=8% (2,8 RSDr)
9.2.1. Reproductibilitatea
Diferena absolut ntre dou rezultate individuale pe acelai vin, obinute n dou
laboratoare nu va depi valoarea repetabilitii n mai mult de 5% de cazuri (P=0,95).
G+F > 5 g/l:
RSDR = 4%
Limita de reproductibilitate R=10% (2,8 RSDr)
G+F cuprins ntre 2 i 5 g/l:
RSDR = 10%
Limita de reproductibilitate r=30% (2,8 RSDr)
104
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.9 Glucoza i fructoza

2.9.1 MA-MD-AS311-02-GLUFRU
1 DEFINIIE
Glucoza i fructoza pot fi determinate individual printr-o metod enzimatic, avnd ca unic
obiectiv calcularea raportului glucoz/fructoz.
Glucoza i fructoza sunt fosforilate cu adenozin trifosfat (ATP) printr-o reacie enzimatic
catalizat de hexochinaz (HK), i produce glucoz 6-fosfat (G6P) i fructoz 6-fosfat (F6P):
glucoza + ATP G6P + ADP
fructoza + ATP F6P + ADP
Glucoz-6-fosfatul este oxidat ntr-o prim etap n gluconat 6-fosfat de ctre nicotinamid
adenin dinucleotid fosfat (NADP) n prezena enzimei glucoz-6-fosfat dehidrogenaz (G6PDH).
Cantitatea de NADPH redus produs corespunde celei de glucoz 6-fosfat i, astfel, glucozei.
G6P + NADP+ 6-fosfogluconat + NADPH + H+
Cantitatea nicotinamid adenin denucleotid redus se determin din absorbia la 340 nm. La
sfritul acestei reacii fructoza 6-fosfat este transformat n glucoz 6-fosfat prin aciunea
fosfoglucozei izomerizate (FGI):
F6P ---- G6P
Glucoza 6-fosfat reacioneaz din nou cu AFDN pentru a rezulta gluconatul 6-fosfat i
AFDN n cantitate redus i determinarea astfel a celui din urm.
3. APARATURA
Spectrofotometru pentru determinri la 340 nm, lungimea de und la care absorbia de

NADPH este maxim. Sunt incluse i msurtori absolute (adic nu sunt folosite diagrame de
calibrare, dar standardizarea se efectueaz pe baza coeficientului de extincie a NADPH) astfel
nct trebuie controlate scala lungimilor de und i valorile puterii de absorbie obinute de la
aparat. n cazul n care nu este disponibil, se poate folosi un spectrofotometru cu o surs cu
spectru discontinuu pentru determinri la 334 nm sau la 365 nm.
Cuve de sticl cu lungimea drumului optic de 1 cm sau cuve de unic folosin.
Pipete pentru soluiile testului enzimatic de 0,02 ml, 0,05 ml, 0,1 ml, 0,2 ml.
4. REACTIVI
4.1. Soluia 1: soluie-tampon (trietanolamin 0,3 M, pH 7,6, 4 10-3 M n Mg2+): se

dizolv 11,2 g de clorhidrat de trietanolamin [(C2H5)3N HCl] i 0,2 g MgSO4 H2O n 150 ml
de ap bidistilat. Se adaug aproximativ 4 ml de soluie de hidroxid de sodiu 5 M (NaOH)
pentru a obine
105
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
o valoare a pH-lui de 7,6 i se completeaz pn la 200 ml. Aceast soluie-tampon poate fi

pstrat timp de patru sptmni la + 4 C.
4.2. Soluia 2: soluia de NADPH (aproximativ 11,5 10-3 M): se dizolv 50 mg de sare
disodic a nicotinamid adenin dinucleotidului n 5 ml de ap bidistilat. Aceast soluie poate fi
pstrat timp de patru sptmni la temperatura de + 4 C.
4.3. Soluia 3: soluie adenozin trifosfat (aproximativ 81 10-3 M): se dizolv 250 mg de
sare disodic a adenozinului trifosfat i 250 mg bicarbonat de sodiu (NaHCO3) n 5 ml de ap
bidistilat. Aceast soluie poate fi pstrat patru sptmni la temperatura de + 4 C.
4.4. Soluia 4: hexochinaz/glucoz 6-fosfat dehidrogenat: se amestec 0,5 ml de
hexochinaz
(2 mg de protein/ml sau 280 U/ml) cu 0,5 ml glucoz 6-fosfat dehidrogenaz (1 mg de
protein/ml). Acest amestec se poate pstra timp de patru sptmni la aproximativ + 4 C.
4.5. Soluia 5: fosfoglucoizomeraz (2 mg de protein/ml sau 700 U/ml). Suspensia este
folosit nediluat. Aceast soluie poate fi pstrat timp de un an la aproximativ + 4 C.
Not: Toate soluiile folosite mai sus sunt disponibile n comer.
5. METODA DE LUCRU
5.1. Pregtirea probei

n funcie de cantitatea estimat de glucoz + fructoz pe litru, proba se dilueaz dup cum
urmeaz:
Msurare la 340 i 334 nm Msurare la 365 nm Diluie cu ap
pn la 4,0 g/l
0,8 g/l
pn la 0,4 g/l
8,0 g/l
1+9
pn la 10,0 g/l
20,0 g/l
1+24
40,0 g/l
1+49
pn la 20,0 g/l
pn la 40,0 g/l
80,0 g/l
1+99
peste 40,0 g/l
80,0 g/l
1 + 999
Factorul de diluie F
1
10
25
50
100
1000
5.2. Determinarea
Cu ajutorul spectrofotometrului reglat la o lungime de und 340 nm se efectueaz
msurri folosind aerul (fr cuv pe drumul optic) sau apa ca referin.
Temperatura de la 20 pn la 25 C.
n dou cuve cu drumul optic de 1 cm se introduc urmtoarele:
106
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Soluii
Soluia 1 (pct.4.1) (la 20 C)
Soluia 2 (pct.4.2)
Soluia 3 (pct. 4.3)
Prob pentru msurare
Ap bidistilat
Cuva de referin
2,50 ml
0,10 ml
0,10 ml
0,20 ml
Cuva prob
2,50 ml
0,10 ml
0,10 ml
0,20 ml
-
Se amestec i, dup aproximativ 3 minute, se citete absorbia soluiei (A1). Reacia se ncepe
prin adugarea:
Soluiei 4 (pct.4.4)
0,02 ml
Se amestec i se ateapt 15 minute; se citete absorbia i se verific
dac reacia s-a oprit n urmtoarele dou minute (A2). Se adaug imediat:
Soluia 5 (pct. 4.5)
0,02 ml
0,02 ml
0,02 ml
Se amestec i, dup aproximativ 3 minute, se citete absorbia soluiei (A1). Reacia

ncepe prin adugarea: Soluiei 4 (punctul 4.4) 0,02 ml Se amestec i se ateapt 15 minute; se
citete absorbia i se verific dac reacia s-a oprit n urmtoarele dou minute (A2).
Se adaug imediat: Soluia 5 (punctul 4.5) 0,02 ml Se amestec, se citete absorbia dup
10 minute i se verific dac reacia s-a oprit dup dou minute (A3).
Se calculeaz diferenele de absorbii:
A2 A1 corespunztoare glucozei,
A3 A2 corespunztoare fructozei,
pentru cuvele de referin i probe.
Se calculeaz diferenele de absorbie pentru cuva de referin ( AR) i cuva prob ( AS)
se obine:
pentru glucoz: AG = AS AR
pentru fructoz: AF = AS AR
107
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.10 Acizii organici

2.10.1 MA-MD-AS313-04-ACIORG
Acizii organici din vinuri pot fi separai simultan i determinai cantitativ prin
cromatografia lichid de nalt performan (HPLC).
1. Principiul metodei
Acizii organici din vin pot fi separai pe dou tipuri de faze staionare: silice grefat cu
octil i rini schimbtoare de ioni. Acizii sunt detectai ulterior cu ajutorul detectorului
spectrofotometric UV/vis.
Pentru dozarea acizilor tartric i malic este preferabil separarea pe coloan cu silice
grefat cu octil, iar pentru separarea acizilor citric i lactic separarea pe o coloan cu rini
schimbtoare de ioni. Analizele se efectueaz n raport cu un etalon extern (standard), care se
analizeaz n aceleai condiii.
Metoda permite de a efectua concomitent analiza coninutului de acizi ichimic, acetic,
succinic i fumaric.
Remarc: Pentru analiz pot fi luate diferite tipuri de coloane. Condiiile operatorii i
modul de lucru de mai jos sunt prezentate n calitate de exemplu.
2. Echipamente
Dispozitiv de filtrare pe membran de celuloz cu diametrul porilor 0,45 m
Coloan umplut cu silice grefat cu octadecil (ex.:Sep Pak WATERS ASS.)
Cromatograf lichid de nalt performan echipat cu:
- injector n bucl de 10l;
- dispozitiv de termostatare;
- detector spectrofotometric pentru msurarea absorbanei la 210 nm;
- sistem de nregistrare cu integrator.
Condiii operaionale
Separarea acizilor citric, lactic i acetic:
- coloan cu umplutur de rini schimbtoare de ioni (cationit) acid tare H+ (ex.: HPX87 H BIO-RAD, lungimea de 300 mm, diametrul intern 7,8 mm, particule de 9 m);
- phasa mobil : soluie de acid sulfuric 0,0125 M;
- debitul fazei mobile : 0,6 ml/min;
- temperatura: 60-65 C (conform caracteristicilor cationitului).
Separarea acizilor tartric, malic, lactic, ikimic, succinic i fumaric:
- dou coloane (lungimea - 250 mm; diametrul intern 4 mm) unite n serie, umplute cu
silice grefat cu octil, n form de particule sferice cu diametrul de 5 m;
- faza mobil: soluie titrant 70 g/l dihidrogenofosfat de potasiu, 14 g/l sulfat de
amoniu, ajustat la pH 2,1 cu ajutorul acidului ortofosforic;
- debitul fazei mobile : 0,8 ml/min;
- temperatura: 20 C.
108
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.10.1. MA-MD-AS313-04-ACIORG
3. Reactivi
-ap distilat sau de calitate HPLC
-metanol distilat
-acid tartric
-acid malic
-lactat de sodiu
-acid ikimic
-acetat de sodiu
-acid succinic
-acid citric
-acid fumaric
-acid sulfuric (=1,84 g/ml)
-soluie de acid sulfuric 0,0125 M
-dihidrogenofosfat de potasiu KH2PO4
-sulfat de amoniu (NH4)2SO4
-acid ortofosforic de 85% (=1,71 g/ml)
-soluie de referin format din: acid tartric (5 g/l), acid malic (5 g/l), lactat de sodiu (6,22 g/l),
acid ikimic (0,05 g/l), acetat de sodiu (6,83 g/l), acid succinic (5 g/l), acid fumaric (0,01 g/l) i
acid citric (5 g/l).
4. Modul de lucru
4.1 Prepararea probelor
Splai n prealabil un cartu cu 10 ml de metanol, apoi cu 10 ml de ap.
Degazai proba de vin sau must. Filtrai-l pe o membran (0,45 m). Prelevai 8 ml de eantion
filtrat ntr-o sering cltit n prealabil cu proba de analizat; transferai aceast cantitate n cartu.
Eliminai primii 3 ml i selectai urmtorii 5 ml (evitai de a aduce cartuul la sec).
4.2 Cromatografia
Injectai succesiv n cromatograf 10 l soluie de referin i 10 l de prob, preparat
conform p. 4.1. Repetai injectarea probelor de 3 ori n aceeai succesiune. nregistrai
cromatograma.
5. Calcule
5.1. Analiza calitativ
Determinai timpii de retenie pentru fiecare din compuii eluai. Acizii organici din
soluia de referin sunt separai n urmtoarea ordine:
Acizii citric, tartric, malic, succinic + ikimic, lactic, fumaric, acetic conform
metodei descrise n p. 2.3.1
Acizii tartric, malic, ikimic, lacti, acetic, citric, succinic i fumaric conform
metodei descrise n p. 2.3.2.
5.2. Analiza cantitativ
Se msoar suprafaa tuturor picurilor (media din trei msurri) pentru soluia de
referin i proba de analizat. Se calculeaz coninutul acizilor organici n proba de analizat.
109
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.l0.1. MA-MD-AS313-04-ACIORG
6. Exprimarea rezultatelor
Concentraia acizilor organici se exprim prin urmtoarele modaliti:
n g/l cu decimale pentru acizii tartric, malic, lactic i succinic;
n mg/l pentru acizii citric, acetic i fumaric.
110
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.11 Acidul citric

2.11.1 MA-MD-AS313-09-ACIENZ
Acidul citric este transformat n oxaloacetat i acetat n rezultatul reaciei catalizate de ctre
citrat-liaza (CL):
Citrat oxaloacetat + acetat

n prezena malat-deshidrogenazei (MDH) i a lactat-deshidrogenazei (LDH) oxaloacetatul i
derivatul su obinut n urma decarboxilrii, piruvatul, sunt redui n L-malat i L-lactat de ctre
nicotinamid-adenin-dinucleotid n form redus (NADH):
Oxaloacetat +NADH + H+ L-malat +NAD+
Piruvat +NADH + H+ L-lactat +NAD+

Cantitatea de NADH oxidat n NAD+ n aceste reacii este proporional coninutului de
citrat prezent n prob. Oxidarea nicotinamid-adenin-dinucleotidei (NADH) este msurat prin
diminuarea absorbanei msurate la 340 nm.
2. ECHIPAMENTE
Spectrofotometru care permite efectuarea msurrilor la 340 nm (maximum de absorbie a

NADH). n lipsa spectrofotometrului, se permite utilizarea unui fotometru cu spectru
discontinuu, care permite efectuarea msurrilor la 334 nm sau 365 nm.
Cuve din sticl cu parcursul optic de 1cm sau cuve de unic folosin.
Micropipete care permit prelevarea volumelor de la 0,02 pn la 2 ml.
3. REACTIVI
3.1 Soluie tampon cu pH 7,8 (glicilglicin 0,51 M; pH=7,8; Zn2+:0,6x10-3M):

Se dizolv 7,13 g de glicilglicin n circaca 70 ml de ap bidistilat. Valoarea pH se ajusteaz
la 7,8 cu aproximativ 13ml soluie de hidroxid de sodiu 5 M.
Se adaog 10 ml soluie de clorur de zinc ce conine 80 mg ZnCl2 n 100 ml i se aduce la
cot (100 ml) cu ap bidistilat. Soluia rmne stabil la +4C cel puin patru sptmni.
3.2 Soluia de nicotinamid-adenin-dinucleotid n form redus (NADH) 6x10-3 M: se dizolv
30 mg de NADH i 60 mg de NaHCO3 cu 6 ml de ap bidistilat. Soluia este stabil la +4C
timp de cel puin patru sptmni.
3.3
Soluie de malat-deshidrogenaz/lactat-deshidrogenaz (MDH/LDH), care conine 0,5 g
MDH + 2,5 mg LDH/ml : se prepar un amestec din 0,1 ml MDH
(5 g MDH/ml), 0,4 ml
soluie de sulfat de amoniu (3,2 M) i 0,5 ml LDH (5 mg/ml). Suspenzia obinut este stabil
timp de cel puin un an la +4C.
Soluie de citrat-liaz CL (5 mg de protein/ml). Se dizolv 168 mg de liofilizat ntr-un ml
3.4
de ap cu ghea. Soluia obinut este stabil timp de cel puin o sptmn la la +4C, iar n
form congelat poate fi pstrat cel puin 4 sptmni. Se recomand de a verifica activitatea
enzimei nainte de dozare.
3.5 Polivinilpolipirolidon (PVPP) (Conform Codex alimentarius)
Remarc: Setul de reactivi necesari pentru aceast dozare se afl n comer.
111
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4
PREGTIREA PROBELOR
Determinarea coninutului de acid citric se efectueaz direct n vin, fr

decolorare prealabil i fr diluie, n caz dac coninutul total de acid citric este inferior de 400
mg/l. n caz contrar, vinul se dilueaz n proporie, care s asigure un coninut de citrat situat ntre
20 i 400 mg/l (cantitatea de citrat ntr-o alicuot este cuprins ntre 5 i 80 g).
n cazul vinurilor roii, bogate n polifenoli, se recomand tratarea prealabil a probelor cu
PVPP: se las s se umecteze n ap timp de 15 minute cca 0,2 g de PVPP, se filtreaz (filtru de
hirtie), apoi se adaog cu o spatul la 10 ml de vin ntr-o fiol conic de 50 ml. Se agit 2-3
minute, apoi se filtreaz.
5.
MODUL DE LUCRU
Se regleaz spectrofotometrul la 340 nm. Msurarea absorbanei se

efectueaz n cuve de 1 cm, cu reglarea absorbanei la zero fa de aer (fr a plasa cuva n calea
traiectoriei luminii).
n cuvele de 1 cm se ntroduc:
Soluia
Proba martor
Proba de analizat
Tampon conform p. 3.1
NADH conform p. 3.2
Proba de analizat
Ap bidistilat
MDH/LDH conform p.3.3
1,0 ml
0,1 ml
2,0 ml
0,02 ml
1,0 ml
0,1 ml
0,2 ml
1,8 ml
0,02 ml
Se agit minuios; dup 5 minute se msoar absorbana soluiei martor i a soluiei

de analizat (A1). Apoi se adaog:
Soluia
Citrat liaza, conform p. 3.4
Proba martor
0,02 ml
Proba de analizat
0,02 ml
Se agit minuios; dup 5 minute se msoar absorbana soluiei martor i a soluiei

de analizat (A2).
Se determin diferenele de absorban pentru proba martor i proba de analizat, (A1-A2).
Deducei diferena absorbanelor martorului din diferena absorbanelor probei de analizat :
A = Aprobei de analizat Amartor.
Remarc: Timpul necesar pentru aciunea enzimelor poate s varieze de la un lot de reasctivi
la altul, astfel indicaiile de mai sus au titlu indicativ. Se recomand de a determina durata de
timp optimal pentru fiecare lot n parte.
112
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Concentraia acidului citric se exprim, de regul, n mg/l fr zecimale.

6.1. Modul de calcul
Concentraia n mg/l este calculat conform formulei urmtoare:
V M
A ,
v
unde: V - volumul final al probei (aici 3,14 ml);
v - volumul probei de analizat (aici 0,2 ml);
M masa molecular a substanei analizate (aici Macid citric=192,1);
parcursul optic al cuvei (aici 1 cm);
- coeficientul molar de absorbie al NADH (la 340 nm =6,3 l.mmol-1.cm-1).
nlocuind aceste valori, obinem:
C=
C= 479. A
Dac a fost efectuat vre-o diluie n timpul pregtirii probei, multiplicai rezultatul cu factorul
de diluie.
Remarc:
Pentru msurrile efectuate la 334 nm: C = 488. A (=6,3 l.mmol-1.cm-1).
Pentru msurrile efectuate la 365 nm: C = 887. A (=3,4 l.mmol-1.cm-1).
6.2. Repetabilitatea (r)
Pentru un coninut de acid citric inferior de 400 mg/l:
r=14 mg/l
Pentru un coninut de acid citric superior de 400 mg/l:
r=28 mg/l
6.3. Reproductibilitatea (R)
Pentru un coninut de acid citric inferior de 400 mg/l:
R=39 mg/l
Pentru un coninut de acid citric superior de 400 mg/l:
R= 65 mg/l
(1) L-malat + NAD+ L-MDH oxaloacetat + NADH + H+

(2) Oxaloacetat + L-glutamat GOT L-aspartat + ctoglutarat
2.11.2. GOST R 52391-2005
113
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.12 Acidul tartric

2.12.1 MA-MD-AS311-03-ACITAR
1.1. Metoda de referin
Acidul tartric, precipitat n form de racemat de calciu, se determin prin metoda
gravimetric. Analiza poate fi completat printr-o dozare volumetric de comparaie. Condiiile de
precipitare: pH, volumul total i concentraia ionilor precipitani sunt selectate astfel, nct
precipitarea racematului de calciu este total, n timp ce D(-) tartratul de calciu rmne n soluie.
Dac la vin a fost adugat acidul metatartric, care cauzeaz precipitarea incomplet a
racematului de calciu, este necesar un tratament prealabil prin hidroliz.
1.2. Metoda uzual
Acidul tartric, separat la trecere printr-o coloan de anionit, este dozat colorimetric din eluat
cu ajutorul acidului vanadic, cu care formeaz o culoare roie. Prezena n eluat a acizilor lactic i
malic nu geneaz dozarea acidului tartric.
2.1. Metoda gravimetric

2.1.1. Reactivi
- soluie de acetat de calciu, care conine 10 g/l de calciu:
carbonat de calciu...........................25 g
acid acetic (20=1,05 g/ml..............40 ml
Ap distilat ct este necesar pn la 1 l
- racemat de calciu cristalizat: CaC4O6H4.4H2O:
ntr-un pahar cilindric de 400 ml se ntroduc 20 ml soluie de acid L(+) tartric (5 g/l), 20 ml
soluie de D(-) tartrat de amoniu (6,126 g/l ) i 6 ml soluie de acetat de calciu
(10 g/l de
calciu). Se las s se precipite pentru 2 ore. Se separ precipitatul cu ajutorul unui creuzet filtrant
de porozitate nr. 4, se spal n trei reprize cu aproximativ 30 ml de ap distilat. Se usuc
la temperatura de 70 C pn la o mas constant. Masa racematului de calciu cristalizat
obinut din cantitile de reactivi indicate este de aproximativ 340 mg.
Soluie precipitant (pH=4,75):
D(-) tartrat de amoniu..........................................................150 mg
Soluie de acetat de calciu, care conine 10 g/l de calciu......8,8 ml
Ap distilat ct este necesar....................................... pn la 1 l
Se dizolv D(-) tartratul de amoniu n 900 ml de ap; se adaog 8,8 ml de soluie de acetat de
calciu i se aduce la cot (1 l). Racematul de calciu fiind puin solubil n aceast soluie, se
recomand de a introduce 5 mg de racemat de calciu la litru, de agitat soluia timp de 12 ore,
apoi de o filtrat.
114
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Remarc: soluia precipitant poate fi preparat i din acid D(-) tartric:

acid D(-) tartric....................................................................................122 mg
soluie de hidroxid de amoniu (20=0,97 g/ml) la 25% (v/v).................0,3 ml
Se dizolv acidul D(-) tartric, se adaog hidroxidul de amoniu i se aduce volumul la
aproximativ 900 ml. Se adaog 8,8 ml de soluie de acetat de calciu i, dup agitare, se ajusteaz
valoarea pH la 4,75 cu ajutorul acidului acetic, i se aduce la cot (1 l).
Se ntroduc 5 mg de racemat de calciu la litru, se agit soluia timp de 12 ore, apoi se
filtreaz.
2.1.2. Modul de lucru
- vinuri fr adaos de acid metatartric
ntr-un vas cilindric de 600 ml se introduc 500 ml de soluie precipitant i 10 ml de vin. Se
agit, apoi se iniiaz precipitarea prin aciunea extremitii unei baghete de sticl asupra pereilor
vasului. Soluia este lsat s se precipite pentru 12 h (pe a doua zi). Se separ precipitatul cu
ajutorul unui creuzet filtrant de porozitate nr. 4, cu splarea minuioas a vasului, n care s-a
efectuat precipitarea, pentru a diminua pierderile. Dup uscarea pn la o mas constant (70 C),
precipitatul se cntrete ( p masa racematului de calciu cristalizat CaC4O6H4.4H2O).
vinuri cu adaos de acid metatartric
Cnd este cunoscut, c la un vin s-a adugat acid metatartric, sau este bnuit acest fapt, se
efectueaz hidroliza acestui acid n modul urmtor. ntr-un balon conic de 50 ml se introduc 10 ml
de vin i 0,4 ml acid acetic pur. Balonul este nchis cu un dop traversat de un tub de
evacuare a vaporilor, adus la fierbere i tratat timp de 30 min prin fierbere. Ulterior, dup
rcire, lichidul este transferat cantitativ ntr-un vas cilindric i supus analizei confom procedurii
pentru vinuri fr adaos de acid metatartric. Acidul metatartric este considerat n rezultatele
dozrii drepr acid tartric.
2.1.3. Exprimarea rezultatelor
Un mol de racemat de calciu corespunde la 0,5 mol de acid L(+) tartric din vin. Cantitatea de
acid tartric dintr-un litru de vin, exprimat n miliechivaleni, este egal cu:
384,5p, se exprim cu zecimale.
Cantitatea de acid tartric dintr-un litru de vin, exprimat n grame de acid tartric, este egal cu:
28,84p, se exprim cu zecimale
egal cu:
36,15p, se exprim cu zecimale.
2.2. Dozarea volumetric de comparaie
2.2.1. Reactivi:
- acid clorhidric (20=1,18 1,19 g/ml), diluat 1/5 (v/v)
- soluie EDTA 0,05 M:
EDTA (complexon III)............................................................................18,61 g
ap distilat, pn la cot...............................................................................1 l
- soluie de hidroxid de sodiu de 40% (m/v):
hidroxid de sodiu...........................................................................................40 g
- indicator complexometric acid:
- acid calcon carbonic sau acid 2-hydroxy-4-sulfo-1-naftylazo-3-naphtoic..........1 g
-sulfat de sodium anhidru..................................................................................100
115
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

Dup cntrire, redizolvai precipitatul de racemat de calciu cu 10 ml de acid clorhidric diluat.
Splai creuzetul cu 50 ml de ap distilat. Adugai 5 ml soluie de hidroxid de sodiu de
40% i aproximativ 30 mg (un vrf de pincet) de indicator. Titrai cu soluie EDTA 0,05 M. Fie,
n este numrul de ml consumai la titrare.
Cantitatea de acid tartric dintr-un litru de vin, exprimat n miliechivaleni, este egal cu:
5n, se exprim cu zecimale.
Cantitatea de acid tartric dintr-un litru de vin, exprimat n grame de acid tartric, este egal cu:
0,375n, se exprim cu zecimale
Cantitatea de acid tartric dintr-un litru de vin, exprimat n grame de tartrat acid de potasiu,
0,470n, se exprim cu zecimale.
este egal cu:
3. METODA UZUAL
3.1. Echipamente
3.1.1. Coloan de sticl de 300 mm lungime cu diametrul interior de 10-11 mm cu
robinet;
Spectrofotometru care permite msurarea absorbanei la 490 nm, cu cuve de 10 mm.
3.2. Reactivi
3.2.1. Pentru tratarea preliminar a vinului
- acid acetic (20=1,05 g/ml) diluat la 30% (v/v)
- anionit bazic forte n form acetat. Se prepar o suspensie de anionit (aproximativ 100g) n
200 ml de acid acetic diluat la 30% (v/v). Se las pentru cel puin 24 ore nainte de utilizare;
pentru testrile ulterioare se pstreaz n soluie de acid acetic.
- acid acetic (20=1,05 g/ml) diluat la 0,5% (v/v)
- soluie de sulfat de sodiu cu un coninut de 7,1 g/100 ml (0,5 M)
Se dizolv 71 g de Na2SO4 anhidru n ap distilat i se aduce la cot (1 l).
3.2.2. Pentru determinarea acidului tartric
-soluie de acetat de sodiu de 27% (v/v). Se dizolv 270 g acetat de sodiu anhidru n ap
distilat i se aduce la cot (1 l)
-reactiv vanadic. Se dizolv 10 g metavanadat de amoniu
(NH4VO3) n 150 ml soluie de hidroxid de sodiu 1 M. Soluia se transfer ntr-un balon cotat de
500 ml, se adaog 200 ml acetat de sodiu de 27 %. Se aduce la cot cu ap distilat.
- soluie de acid sulfuric 1M
- soluie de acid sulfuric 0,5M
- soluie de acid sulfuric 0,05M
- soluie de acid periodic 0,05M. ntr-un balon cotat de 100 ml se plaseaz 10,696 g de
periodat de sodiu, 50 ml de acid sulfuric 0,5 M i se completeaz pn la cot (1 l) cu ap distilat.
116
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.12.1
MA-MD-AS311-03-ACITAR
- soluie de glicerin de 10% (m/v). ntr-un balon cotat de 100 ml se plaseaz 10 g de

glicerin, se completeaz pn la cot cu ap distilat
- soluie de sulfat de sodiu cu un coninut de 7,1 g/100 ml (0,5 M)
- soluie de acid tartric de 1 g/l. ntr-un balon cotat de 500 ml se introduc 0,5 d acid tartric,
6,66 ml soluie de hidroxid de sodiu 1M i se completeaz pn la cot cu soluie de sulfat de
sodiu 0,5M.
- soluie de hidroxid de sodiu 1M.
3.3 Modul de lucru
3.3.1. Pregtirea coloanei de anionit
ntr-o coloan de sticl introducei un tampon din vat de sticl. Impregnati-l cu ap distilat,
apoi turnai 10 ml de suspenzie de anionit. Dup decantarea apei, introducei un alt tampon din
vat de sticl pe suprafaa anionitului pentru a evita trecerea lui n suspensie la splarea ulterioar.
Anionitul servete doar pentru o singur operaie.
3.3.2. Separarea acizilor organici
Umplei coloana cu soluie de acid acetic de 0,5%, deschidei robinetul i lsai s se scurg
soluia pn ce nivelul lichidului este cu 2-3 mm mai sus de tamponul superior. Adugai 10 ml de
soluie de acid i splai anionitul pn la acelai nivel. Repetai operaia nc de 4 ori.
Dup ultima operaie de splare, turnai n coloan (robinetul fiind nchis) 10 ml de vin sau
must. Lsai s se scurg lichidul (1 pictur pe secund) i splai anionitul cu 10 ml acid acetic
0,5% n 7 reprize. La ultima splare lsai s se scurg soluia pn ce nivelul lichidului este cu 23 mm mai sus de tamponul superior.
Eluai acizii fixai pe anionit cu ajutorul soluiei de sulfat de sodiu de 7,1% ntr-un balon cotat
de 100 ml, aducei la cot.
3.3.3. Determinarea acidului tartric
Plasai n dou balonae conice cte 20 ml de eluat. Proba I servete pentru dozarea acidului
tartric, iar proba II, n care acidul tartric este distrus cu acidul periodic, constituie martorul.
Introducei n proba I:
2 ml de acid sulfuric 1M
5 ml de acid sulfuric 0,05 M
1 ml soluie de glicerin de 10%.
Introducei n proba II:
2 ml de acid sulfuric 1M
5 ml soluie de acid periodic 0,05 M. Se las pe 15 minute, apoi se adaog glicerina
1 ml soluie de glicerin de 10%, pentru a distruge excesul de acid periodic, se las pe
minute.
Dup 2 minute, se toarn prin agitare, iniial n proba II, apoi n proba I, cte 5 ml de reactiv
vanadic. Imediat se introduce cronometrul, iar soluiile sunt plasate n cuvele spectrofotometrului.
Exact peste 90 s se msoar absorbana probei I n raport cu martorul (proba II) la 490 nm.
n caz dac valoarea absorbanei este prea mare, se dilueaz eluatul cu soluie de sulfat de
sodiu de 7,1%, apoi se efectueaz msurrile pe soluia diluat.
117
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.12.1
MA-MD-AS311-03-ACITAR
Remarc: vinuri cu adaos de acid metatartric

Cnd este cunoscut, c la un vin s-a adugat acid metatartric, sau este bnuit acest fapt, se
efectueaz hidroliza acestui acid conform procedurii descrise n p. 2.1.2 (metoda de referin).
Dup rcire, coninutul probei, precum i apa distilat folosit la cltirea vasului (cte 5 ml de
dou ori) sunt trecute cantitativ n coloana de anionit, urmnd procedura descris n p. 3.3.2 i
3.3.4. Acidul metatartric este considerat n rezultatele dozrii drepr acid tartric.
3.3.5. Curba de etalonare
n balonae cotate de 100 ml se introduc respectiv 10,20,30,40 i 50 ml soluie de acid tartric
cu un coninut de 1 g/l; se aduc la cot cu soluie de sulfat de sodiu de 7,1%. Concentraiile
acestor soluii corespund eluatelor obinute din vinuri care conin respectiv 1,2,3,4 i 5 g/l de acid
tartric
n dou balonae conice se ntroduc cte 20 ml de aceste soluii i se efectueaz analiza conform
procedurii descrise pentru eluatul de vin n p.3.3.3. Curba de etalonare prezint o dreapt, care
poate fi extrapolat ctre zero. n caz de necesitate, repetai procedura pentru probe cu un
coninut de acid tartric inferior de 1,0 g/l.
Pentru a determina coninutul de acid tartric, se folosete curba de etalonare. Coninutul de
acid tartric se exprim n g/l vin, cu o zecimal.
118
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.13. Acidul lactic

2.13.1. MA-MD-AS313-07-ALAENZ
n prezena nicotinamid-adenin-dinucleotidei (NAD) acidul lactic total (L-lactat i D-lactat) este

oxidat n piruvat n rezultatul reaciei catalizate de L-lactat deshidrogenaz (L-LDH) i D-lactat
deshidrogenaz (D-LDH). Echilibrul reaciei este deplasat spre lactat. Eliminarea piruvatului
din mediul de reacie deplaseaz echilibrul n direcia formrii piruvatului.
n prezena L-glutamatului piruvatul este transformat n L-alanin printr-o reacie catalizat de
ctre glutamat-piruvat-transaminaza (GPT).
(1)
L-lactat + NAD+ piruvat +NADH + H+
(2)
D-lactat + NAD+ piruvat +NADH + H+
(3) Piruvat + L-glutamat L-alanin + -ketoglutarat
Cantitatea de NADH format, msuratde creterea absorbiei la lujimea de und de 340 nm, este
proporional cu cantitatea de lactat prezent iniial.
Not: Acidul L-lactic, poate fi determinat idependent utiliznd reaciile (1) i (3), iar acidul D-lactic
poate fi determinat n mod similar utiliznd reaiile (2) i (3).
1.2 Metoda uzual
Acidul lactic, separat prin trecerea printr-o coloan cu rin de schimb ionic, este oxidat la etanal
i determinat prin colorimetrie dup reacia cu nitroprusiat de sodiu i piperidin.
2.1 Reactivi
2.1.1 Soluie tampon, pH 10 (glicilglicin 0,6 mol/ ; L-glutamat 0,1 mol/l) :
Se dizolv 4,75 g de glicilglicin i 0,88 d de acid L-glutamic n aproximativ 50 ml de ap
bidistilat; se ajusteaz pH-ul la 10 cu civa mililitri de hidroxid de sodiu 10 M i se aduce la 60 ml
cu ap bidistilat. Acest soluie rmne stabil cel puin 12 sptmni la 4 C.
2.1.2 Soluie de nicotinamid adenin dinucleotid (NAD), aptoximativ 40 x 10-3 M: se dizolv 900
mg NAD n 30 ml ap bidistilat. Aceast soluie rmne stabil cel puin 4 sptmni la 4C.
2.1.3 Suspensie de glutamat piruvat transaminaz (GPT) 20 mg/ml. Suspensia rmne stabil cel
puin un an la 4C.
2.1.4 suspensie de L-lactat dehidrogenaz (L-LDH), 5 mg/ml. Aceast s uspensie rmne stabil
cel puin un an la 4C.
2.1.5 Suspensie de D-lactat dehidrogenaz (D-LDH), 5 mg/ml. Aceast s uspensie rmne stabil
cel puin un an la 4C.
Se recamand nainte de determinare verificarea activitii enzimei.
Not: Toi reactivii sunt disponibili n comer.
2.2 Aparatur
2.2.1 Un Spectrofotometru pentru determinri la 340 nm, lungimea de und la care absorbia
NADH este maxim.
n cazul n care acesta nu este disponibilse poate utiliza un spectofotometru cu o surs spectral
discontinu, care s permit msurtori la 334 nm sau 365 nm.
119
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Deoarece sunt incluse msurtori ale absorbiei absolute (adic nu sunt folosite curbe de
calibrare, dar standardizarea se face prin considerarea coeficientului de extincie a NADH ), trebue
verificate scalele de lungime de und i absorbia spectral a aparatului.
2.2.2. Cuve de sticl cu lungimea cii optice de 1 cm sau cuve de folosin unic.
2.2.3 Micropipete pentru pipetarea de volume n intervalul 0,02 la 2 ml.
2.3 Pregtirea probei

Not preliminar: Nici o parte a sticlriei care ntr n contact cu cu amestecul de reacie nu
trebue atins cu degetele, pentru c aceasta poate introduce acid L-lactic i poate astfel conduce la
rezultate eronate.
Determinarea lactatului este efectuat n mod normal direct pe vin , fr ndeprtarea prealabil a
pigmentaiei (coloraie) i fr diluare n cazul n care concentraia acidului lactic este mai mic de
100 mg/l. Dac, totui, concentraia acidului lactic se situeaz ntre:
- 100 mg/l i 1 g/l, se dilueaz 1/10 cu ap bidistilat,
- 1 g/l i 2,5 g/l, se dilueaz 1/25 cu ap bidistilat,
.
- 2,5 g/l i 5 g/l, se dilueaz 1/50 cu ap bidistilat.
2.4 Metoda de lucru
2.4.1 Determinarea acidului lactic total
Soluia tampon trebue s fie la o temperatur ntre 20 i 25 C nainte de a trece la determinare.
Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de und de 340 nm, se determin absorbia folosind cuve
cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standart de absorbie zero (referin) (fr cuv n drumul optic)
sau cu ap ca standard.
Se pun urmtoarele n cuv cu drum optic de 1 cm:
Cuv de referin
Cuv prob
(ml)
(ml)
1,00
1,00
Soluia 2.1.1
Soluia 2.1.2
0,20
0,20
Ap bidistilat
1,00
0,80
Suspensia 2.1.3
0,02
0,02
Proba de msurat
0,20
Se amestec folosind un agitator de sticl sau o baghet din material sintetic cu un capt turtit;
dup cinci minute se msoar absorbia soluiilor din cuvele de referin i pentru prob (A1).
Se adaug 0,02 ml soluie 2.1.4 i 0,05 ml soluie de la punctul 2.1.5, se omogenizeaz, se atept
terminarea reaciei (apoximativ 30 minute) i se determin puterea de absorbie a soluiilot din cuvele
de referin i pentru prob (A2).
Se calculeaz diferenele (A2 A1) dintre absorbiile soluiilor din cuvele de referin i pentru
prob, AR i AS.
La final se calculeaz diferena dintre ele :
A = AS - AR.
2.4.2 Determinarea acidului L-lactic i a acidului D-lactic
Determinarea acidului L-lactic i a acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicnd procedura
pentru determinarea acidului lactic total pn la determinarea A1 i continund apoi dup cum urmeaz :
120
Anexa 2 (ontinuare)
la reglementarea tehnic privind
fabricrii vinurilor
Se adaug 0,02 ml de soluie 2.1.4, se omogenizeaz, se apeapt pn la terminarea reaciei

(aproximativ 20 minute) i se determin absorbia din cuvele de referin i pentru prob (A2).
Se adaug 0,05 ml de soluie 2.1.5, se omogenizeaz, se apeapt pn la terminarea reaciei
(aproximativ 30 minute) i se determin absorbia din cuvele de referin i pentru prob (A3).
Se calculeaz diferenele (A2 A1) pentru acid L-lactic i (A3 A2) pentru acid D-lactic ntre
absorbiile soluiilor din cuvele de referin i pentru prob, AR i AS
La final se calculeaz diferena ntre acestea :
A = AS - AR.
Not : Timpul necesar pentru finalizarea aciunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea
de mai sus este dat numai orientativ i se recomand determinarea ei pentru fiecare lot. Cnd se
determin acidul L-lactic singur, timpul de ncubare poate fi redus la 10 minute.
Concentraia acidului lactic se red n grame la litru, cu o cifr zecimal.
2.5.1 Metoda de calcul
Formula general pentru calcularea concentraiei n g/l este
V x M
C = --------------------- x A
x d x x 1000
unde:
V volumul soluiei test n ml (V=2,24 ml pentru L-lactic, V = 2,29 ml pentru acidul D-lactic i
acid lactic total)
volumul proei n ml (aici, 0,2 ml )
M masa molecular a substanei de determinat (aici, pentru acid DL-lactic, M=90,08)
d drumul optic cuv n cm (aici, 1 cm)
coeficirntul de absorbie a NADH (la 340 nm = 6,3 mmol-1 x 1 x cm-1)
2.5.1.1 Acidul lactic total i acidul D-lactic
C = 0,164 x A
Dac proba a fost diluat n timpul pregtirii, rezultatul se nmulete cu factorul de diluare.
Not: determinarea la 334 nm: =0,167 x A, ( = 6,2 mmol-1 x 1 x cm-1).
Determinare la 365 nm: =0,303 x A, ( = 3,4 mmol-1 x 1 x cm-1).
2.5.1.2 Acid L-lactic
=0,160 x A
Dac proba a fost diluat n timpul pregtirii, rezultatul se nmulete cu factorul de diluare.
Not: determinare la 334 nm: =0,163 x A, ( = 6,2 mmol-1 x 1 x cm-1).
Determinare la 365 nm: =0,297 x A, ( = 3,4 mmol-1 x 1 x cm-1).
2.5.2 Repetabilitatea (r)
r = 0,02 + 0,07 xi g/l
xi este concentraia acidului lactic n prob n g/l
2.5.3 Reproductibilitatea (R)
R = 0,05 + 0,125 xi g/l
xi este concentraia acidului lactic n prob n g/l.
121
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.14
2.14.1
Acidul DL-malic
MA-MD-AS313-10-AMALTO
Acidul malic izolat cu ajutorul unei coloane de anionit este dozat colorimetric. Determinarea
coninutului de acid malic se efectueaz dup intensitatea culorii galbene, obinute prin tratatrea
eluatului cu acid sulfuric de 96% i acid cromotropic. Pentru a exclude interferenele posibile, o
prob similar celei analizate este tratat cu amestec de acid sulfuric (86%) i acid cromotropic,
iar absorbana obinut este sustras din absorbana iniial, diferena fiind atribuit n
exclusivitate acidului malic.
2. ECHIPAMENTE
2.1. Coloan de sticl de aproximativ 250 mm lungime i 35 mm diametrul interior, dotat cu

robinet.
2.2. Coloan de sticl de aproximativ 300 mm lungime i 10-15 mm diametrul interior, dotat
cu robinet.
2.3. Baie de ap.
2.4. Spectrofotometru care permite msurarea densitii optice la 420 nm dotat cu cuve de 10
mm.
3. REACTIVI
3.1. Anionit bazic tare (spre exemplu, Merck III)
3.2. Hidroxid de soiu de 5% (m/v)
3.3. Acid acetic de 30% (m/v)
3.4. Acid acetic de 5% (m/v)
3.5. Soluie de sulfat de sodiu de 10% (m/v)
3.6. Acid sulfuric concentrat de 95-97% (m/m)
3.7. Acid sulfuric de 86% (m/m)
3.8 Soluie de acid cromotropic de 5% (m/v). Se pregtete nainte de fiecare dozare prin
dizolvarea a 500 mg de cromotropat de sodiu (C10H6Na2O8S2.2H2O) n 10 ml de ap distilat.
3.9. Solution de acid DL-malic ce conine 0,5 g/l. Se dizolv 250 mg de acid malic
(C4H6O5) ntr-o cantitate suficient de soluie de sulfat de sodiu de 10% (p. 3.5) i se aduce
volumul la 500 ml cu aceast soluie.
3.1. Pregtirea anionitului
Se plaseaz n coloana de sticl 35 250 mm deasupra robinetului un tampon din vat
de sticl impregnat cu ap distilat. Se toarn anionitul n form de suspensie n coloan astfel,
nct s rmn un spaiu liber de 50 mm deasupra anionitului.
Se cltete anionitul cu 1000 ml de ap distilat, apoi se umple coloana cu soluie de 5%
de hidroxid de sodiu i se las s se scurg pn la 2-3 mm de la suprafaa anionitului. Se umple
din nou cu soluie de 5% de hidroxid de sodiu i se repet aceast operaie de 2 ori, apoi se las n
contact anionitul cu soluia pentru 1 or. Ulterior se spal anionitul cu 1000 ml de ap distilat.
Ulterior, se umple coloana cu soluie de acid acetic de 30%, se las s se scurg lichidul pn
la 2-3 mm de la suprafaa anionitului. Se repet operaia de 2 ori, apoi se las n contact pentru 24
ore
122
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.14.1. MA-MD-AS313-10-AMALTO
nainte de utilizarea coloanei. Ulterior coloana se pstrez cu soluie de 30% de acid acetic
pentru dozrile ulterioare.
4. MODUL DE LUCRU
4.2 Pregtirea coloanei de anionit
Se plaseaz n coloana de sticl 11 300 mm deasupra robinetului un tampon din vat
de sticl impregnat cu ap distilat. Se toarn n coloan anionitul, preparat conform p. 4.1, la o
nlime de 10 cm. Se las s se scurg acidul acetic de 30% pn la 2-3 mm deasupra anionitului,
apoi se spal anionitul cu 50 ml de acid acetic de 5%.
4.3 Separarea acidului DL-malic

n coloana pregtit conform p. 4.2 se toarn 10 ml de vin sau must. Se las s se scurg
vinul sau mustul (debitul mediu 1 pictur/s) pn la 2-3 mm deasupra anionitului, apoi se
spal anionitul cu 50 ml de acid acetic de 5% i cu 50 ml de ap distilat (debitul mediu 1
pictur/s).
Eluarea acizilor fixai pe coloan se efectueaz cu soluie de sulfat de sodiu de 10% (debitul
mediu 1 pictur/s). Eluatul este strns ntr-un balon cotat de 100 ml, volumul fiind adus la cot.
Regenerarea anionitului se efectueaz conform procedurii descrise n p. 4.1.
4.4 Dozarea acidului malic
Se iau dou eprubete de 30 ml cu dop rodat A i B . Se ntroduc n ambele eprubete
cte 1,0 ml de eluat, cte 1,0 ml soluie de acid cromotropic de 5%. Se adaog n eprubeta A
10,0 ml soluie de acid sulfuric de 86% (martor), iar n eprubeta B - 10,0 ml de acid sulfuric
concentrat, conform p. 3.6 (proba de analizat). Se nchid i se agit soluiile pentru a obine
omogenitate perfect, dar fr a nmuia rodajul.
Se plaseaz eprubetele pentru exact 10 minute n baia fierbnd, apoi se rcesc la 20 C
ntr-un loc ntunecos. Exact peste 90 minute de la nceputul rcirii, se msoar absorbana soluiei
B n raport cu soluia A (proba martor) la lungimea de und de 420 nm n cuve de 1 cm.
4.5. Pregtirea curbei de etalonare
Se iau respectiv 5, 10, 15 i 20 ml soluie de acid malic de 0,5 g/l, conform p. 3.9, se plaseaz
n baloane cotate de 50 ml i se aduce volumul la cot cu soluie de sulfat de
amoniu de 10%. Soluiile astfel preparate corespund coninutului de acid malic n vin (must) de
respectiv 0,5 ; 1,0 ; 1,5 i 2,0 g/l.
Analiza se efectueaz conform indicaiilor din p. 4.4. Valorile absorbanei obinute n funcie
de concentraia acidului malic formeaz o dreapt, care se extrapoleaz la origine.
Deoarece intensitatea culorii depinde esenial de concentraia acidului sulfuric, este necesar e
a verifica cel puin un punct pentru fiecare serie de msurri pentru a scoate n eviden o
eventual modificare parvenit din cauza acestui factor.
Coninutul de acid DL-malic din eluat este obinut din curba de etalonare, n g/l cu zecimale.
123
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.14.2. MA-MD-AS313-11-ALMENZ
n prezena nicotinamid-adenin-dinucleotidei (NAD) acidul L-malic (L-malat) este oxidat n

oxaloacetat n rezultatul reaciei catalizate de L- malatdeshidrogenaza (L-MDH).
Echilibrul reaciei este deplasat spre acidul malic. Eliminarea oxaloacetatului din mediul de
reacie deplaseaz echilibrul n sensul formrii oxaloacetatului. n prezena L-glutamatului
oxaloacetatul este transformat n L-aspartat, n rezultatul reaciei catalizat de glutamatoxaloacetat-transaminaza (GOT):
(1) L-malat + NAD+
L MDH
oxaloacetat + NADH + H+
GOT
L-aspartat + cetoglutarat
(2) Oxaloacetat + L-glutamat
Reacia este urmrit cantitativ prin formarea NADH, proporional cantitii de L-malat
prezent n prob, care se msoar spectrofotometric la lungimea de und de 340 nm.
2. ECHIPAMENTE
2.1. Spectrofotometru ce permite de a efectua msurri la 340 nm (maximum de absorbie a

NADH).
n lipsa unui asemenea echipament, msurrile pot fi efectuate cu ajutorul unui fotometru cu
spectru discontinuu ce permite de a efectua msurri la 334 nm i 365 nm.
2.2. Cuve cu drumul optic de 1 cm din sticl sau de unic folosint.
2.3. Micropipete ce permit de a preleva volume cuprinse ntre 0,01 i 2 ml.
3. REACTIVI
Ap bidistilat
3.1. Soluie tampon cu pH 10 (glicilglicin 0,60 mol/l, L-glutamat 0,1 mol). Se dizolv 4,75
g de glicilglicin i 0,88 g de acid L-glutamic n aproximativ 50 ml de ap bidistilat;se aduce
pH la 10 cu aproximativ 4,6 ml soluie de hidroxid de sodiu 10 M, se aduce volumul la 60 ml cu
ap bidistilat. Soluia este stabil cel mult 12 sptmni la temperatura de +4C.
3.2. Soluie de nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD) 0,047 M:
Se dizolv 420 mg de NADH n 12 ml de ap bidistilat. Soluia este stabil cel mult 4 sptmni
la temperatura de +4C.
3.3. Suspensie de glutamat-oxaloacetat-transaminas (GOT) de concentraia 2 mg/ml.
Suspensia este stabil cel mul un an la o temperatur de +4C.
3.4. Soluie de L-malat-dehidrogenaz (L-MDH) de concentraia 5 mg/ml. Soluia este
stabil cel mult un an la temperatura de +4C.
Remarc: Ansamblul de reactivi necesari pentru dozare este disponibil n comer.
4. PREGTIREA PROBELOR
Testarea D-malatului se efectueaz direct n vin, fr decolorare prealabil i fr diluie, n

caz dac coninutul de acid L-malic este inferior de 350 mg/l (pentru msurri efectuate la 365
nm). n cazul depirii acestei limite vinul se dilueaz cu ap bidistilat astfel, nct concentraia
L-malatului s fie cuprins ntre 30 i 350 mg/l (cantitatea de L-malat prezent n proba analizat
- 3-35 g ).
124
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
n caz dac concentraia L-malatului n vin este mai mic de 30 mg/l, volumul probei prelevate
poate fi mrit la 1 ml. Volumul apei de adugat este repectiv redus astfel, nct volumele totale s
fie identice n ambele cuve.
5. MODUL DE LUCRU
Spectrofotometrul se regleaz la 340 nm; msurarea absorbanei se efectueaz n cuve cu

drumul optic de 1 cm; absorbana zero se regleaz n raport cu aerul (fr cuv) sau n raport cu
apa distilat. n cuve cu drumul optic de de 1 cm se introduc:
Martor
Proba
Soluie 3.1 ............................................... 1,00 ml
1,00 ml
Soluie3.2 ............................................... 0,20 ml
0,20 ml
Ap bidistilat ......................................... 1,00 ml
0,90 ml
Suspensie 3.3 ........................................... 0,01ml
0,01 ml
0,10 ml
Prob ......................................................
Se omogenizeaz; dup aproximativ 3 minute, se msoar absorbana soluiilor martor i
prob (A1). Se adaug:
Soluie 3.4................................................. 0,01 ml
0,01 ml
Se omogenizeaz; se ateapt sfritul reaciei (aproximativ 5-10 minute ) i se msoar
absorbana soluiilor martor i prob (A2).
Se determin diferena absorbanelor (A2 A1) pentru prob ( Ap) i pentru martor
( Ac) .
Se calculeaz:
A = A p - A m
Remarc: Timpul necesar pentru reacionarea enzimelor poate varia de la un lot la altul. n
metod nu este dat dect ca un titru indicativ. Se recomand de a fi determinat timpul pentru
fiecare lot.
6
Concentraia de acid L-malic se exprim n grame pe litru (g/l) cu o zecimal.

6.1 Modul de calcul
Concentraia n grame pe litru este calculat cu formula general:
V PM
C=
A
v 000
V = volumul testului n ml (aici 2,22 ml)

v = volumul probei n ml (aici 0,1 ml)
PM = masa molecular a substanei determinate (aici acidul L-malic =134,09)
= drumul optic a cuvei n centimatri (aici 1 cm)
= coeficientul de absorbie a NADH la 340 nm,
= 6,3 mmol-1 x l x cm-1 astfel se obine pentru l-malat:
C = 0,473 x A
125
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Dac n timpul preparrii probei s-a efectuat diluii, n acest caz rezultatul se nmulete la
factorul de diluie.
Remarc:
Pentru msurri la 334 nm , = 6,2 ( mmol-1 x l x cm-1 )

C = 0,482 x A
Pentru msurri la 365 nm , = 3,4 ( mmol-1 x l x cm-1 )
C = 0,876 x A
6.2 Repetabilitatea (r)

r = 0,03 + 0,034 xi
xi - concentraia de acid malic n prob n g/l
6.3 Reproductibilitatea (R)
R = 0,05 + 0,071 xi
xi - concentraia de acid malic n prob n g/l
2.14.3. MA-MD-AS313-12-ADMENZ
n prezena D-malat-dehidrogenazei (D-MDH), acidul D-malic (D-malat) este oxidat de ctre
nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD) n oxalo-acetat. Oxalo-acetatul format se transform n
piruvat i dioxid de carbon, conform ecuaiei:
(1) D-malat + NAD + D-MDH pyruvat + CO2 + NADH + H+
Formarea NADH poate fi urm cantitativ prin msurarea absorbanei la lungimile de und de 334,
340 sau 365 nm, aceasta fiind proporional cantitii de D-malat prezent n mediul de reacie.
2. Reactivi
Reactivii pentru efectuarea a 30 determinri se afl n comer n form de seturi, care includ :
Flaconul 1, care conine 30 ml de soluie tampon Hepes acid, pH = 9,0
[N-(2-hidroxietil)piperazin-N-2-etan sulfonic i stabilizatori ;
Flaconul 2, care conine aproximativ 210 mg de liofilizat de NAD ;
Flaconul 3 (trei buci), fiecare coninnd liofilizat de D-MDH, pentru titrarea a
aproximativ 8 uniti.
Prepararea soluiilor:
Se va utiliza flaconul 1 fr diluare. Soluia este adus la temperatura camerei (20-25 C)
nainte de a fi folosit ;
Se dizolv coninutul flaconului 2 n 4 ml de ap bidistilat;
Se dizolv coninutul flaconului 3 (unul dintre flacoane) n 0,6 ml de ap bidistilat.
Soluia este adus la temperatura camerei (20-25 C) nainte de a fi folosit.
126
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Stabilitatea soluiilor :
Coninutul flaconului 1 se pstreaz cel puin un an la + 4 C ; soluia 2 se pstreaz
aproximativ 3 sptmni la la + 4 C, iar la 20 C se pstreaz 2 luni; soluia 3 se pstreaz 5
zile la + 4 C.
3. Echipamente
3.1. Spectrofotometru ce permite de a efectua msurri la 340 nm (maximum
de absorbie a NADH). n lipsa unui asemenea echipament, msurrile pot fi efectuate cu
ajutorul unui fotometru cu spectru discontinuu la 334 nm i 365 nm.
n caz dac se opereaz msurri absolute ale absorbanei, cu referin la coeficientul de extincie
al NAGH, lungimile de und indicate ale aparatului urmeaz a fi verificate.
3.2. Cuve cu parcursul optic de 1 cm din sticl sau jetabile.
3.3. Micropipete ce permit de a preleva volume cuprinse ntre 0,01 i 2 ml.
4. Pregtirea mostrelor
Testarea D-malatului se efectueaz de regul direct n vin, fr decolorare prealabil. Deoarece
cantitatea de D-malat prezent n cuv trebuie s fie cuprins ntre 2 g i 50 g, este necesar de
a dilua vinul astfel, nct concentraia s varieze ntre 0,02 i 0,5 g/l sau 0,02 i 0,3 g/l (conform
echipamentului utilizat).
Tabelul de diluie:
Cantitatea estimat, g D-malat/L
Diluarea cu ap
Factorul de diluie
365
<0,5
0,5 -5,0
1:9
10
Msurri la (nm):
340 sau 334
< 0,3
0,3 3,0
5. Modul de lucru
Spectrofotometrul se regleaz la lungimea de und 340 nm, msurrile se efectueaz cu ajutorul
unei cuve cu traseul optic de 1 cm. Absorbana zero se regleazn raport cu aerul (nu se pune
cuva n calea undei) sau n raport cu apa bidistilat.
n cuvele cu traseul optic de 1 cm se introduc:
Soluii
Martor
Proba
Soluia 1
1,00 ml
1,00 ml
0,10 ml
Soluia 2
0,10 ml
Ap bidistilat
1,80 ml
1,70 ml
Proba
0,10 ml
Se agit minuios. Dup aproximativ 6 minute, se msoar absorbana soluiei martor i a probei
(A1).
127
Anexa 2 (ontinuare)
la reglamentarea tehnic privind
fabricrii vinurilor
Se adaog:
Martor
Proba
Soluii
Soluia 3
0,05 ml
0,05 ml
Se agit minuios. Dup aproximativ 20 minute (sfritul reaciei) se msoar absorbana soluiei
martor i a probei (A2).
Se calculeaz diferena absorbanelor (A2 - A1) martorului (m) i probei (pr.). Se deduce
diferena lor :
= m pr.
Remarc: Timpul necesar pentru aciunea enzimelor poate varia de la un lot la altul, se recomand
de a fi determinat pentru fiecare lot de reactivi. Acidul D-malic reacioneaz rapid. O activitate
suplimentar a enzimei, care poate s transforme acidul L-tartric, poate fi nregistrat, dei viteza
acestei reacii este cu mult mai redus. Aceast contribuie poate fi corectat prin extrapolarea
datelor (anexa 1).
6. Exprimarea rezultatelor :
Concentraia (mg acid D-malic/l) se calculeaz din relaia :
C=
V M ac.malic
A ,
NADH l v
unde :
V este volumul testului n ml (aici 2,95 ml) ;
v - volumul probei n ml (aici 0,1 ml) ;
M masa molar a substanei de analizat (aici acidul D-malic, M=134,09);
- coeficientul molar de absorbie al NADH:
la 340 nm = 6,3 (l/ mmol. cm),
la 365 nm = 3,4 (l/ mmol. cm),
la 334 nm = 6,18 (l/ mmol. cm).
Dac a fost efectuat vre-o diluie la pregtirea probelor, se multiplic rezultatul cu factorul de
diluie. Concentraia acidului D-malic se indic n mg/l, fr zecimale.
7. Fidelitate :
Datele referitor la testele interlaboratoriale privind fidelitatea metodei sunt prezentate n anexa 2.
Valorile indicate ale fidelitii din testele interlaboratoriale pot varia n afara gamei de
concentraii i a matricei utilizate n testele indicate.
7.1. Repetabilitate :
Diferena absolut ntre dou rezultate individuale, obinute pe materiale identice, de ctre acelai
operator, cu aceleai echipamente, la intervale de timp scurte, nu va depi valoarea repetabilitii
r n mai mult de 5% din cazuri. (r= 11 mg/l)
7.2. Reproductibilitate :
128
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Diferena absolut ntre dou rezultate individuale, obinute pe materiale identice, n dou
laboratoare diferite, nu va depi valoarea reproductibilitii R n mai mult de 5% din cazuri.
(R= 20 mg/l)
8. Remarc :
Lund n consideraie precizia metodei, se recomand pentru valori ace acidului D-malic
inferioare de 50 mg/l de a fi reconfirmate printr-o alt metod de analiz.
Valori ale acidului D-malic inferioare de 100 mg/l nu trebuie interpretate ca o adiie a acidului
D,L-malic n vin.
Volumul probei de vin prelevate n cuv nu trebuie s depeasc 0,1ml, pentru a evita o
eventual inhibare a activitii enzimatice de ctre polifenoli.
129
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.15 Acid sorbic

2.15.1 MA-MD-AS313-14-ACISOR
1.1 Metoda de dozare prin spectrofotometrie cu absorbie n ultrafiolet.

Acidul sorbic (acid trans, trans-hexa-2,4-) se extage prin antrenarea cu vapori de ap i se
dozeaz distilatul de vin n spectofotometrul cu absorbie n ultrafiolet. Substanele interferente
la msurarea absorbanei n ultrafiolet sunt eliminate n vapori pn la uscat a probei de distilat
uor alcanizat n o soluie de hidroxid de calciu. Coninutul mai puin de 20 mg/l trebue s se
confirme prin caracterizarea cromatografic n strat subire (sensibilitatea: 1 mg/l ).
1.2 Metoda de dozare prin cromatografie gazoas.
Acidul sorbic exrtas cu eter etilic i dozat prin cromatografie cu faz gazoas n prezena unui
etalon intern.
1.3 Metoda de cercetare cu agutorul cromatografiie cu strat subire
Acidul sorbic extras n eterul etilic este separat prin cromatografia n strat subire i
concentraia este evaluat semi-cantitativ.
1.1. METODA DE DOZARE PRIN SPECTROFOTOMETRIE CU ABSORBIE N
ULTRAFIOLET
1.1.1 Aparate
Aparat de antrenate cu vopori de ap.
Baie de ap cu 100 C.
Spectrofotometru ce permite msurarea la lungimea de und 256 nm n cuve de cuar cu
grosimea stratului de 1 cm.
1.1.2 Reactive
Acid tartaric cristalizat.
Soluie de hidroxid de calciu cu concentraia molar de aproximativ 0,02 mol/dm3
Soluie de referin de acid sorbic de 20 mg/l.
Se divolv 20 mg acid sorbic n 2 ml soluie de hidroxid de sodiu cu concentraia molar de
0,1 mol/dm3 . Apoi se toarn ntr-un balon cu capacitatea de 1000 cm3 i se aduce pn la cot cu
ap distilat. La fel se dizolv 26,8 mg sorbat de potasiu n ap, apoi se toarn ntr-un balon cu
capacitatea de 1000 cm3 i se aduce pn la cot cu ap distilat.
1.1.3 Metoda de operare
Distilarea
Se ntroduce pentru barbotare ntr-un aparat de antrenare cu vapori de ap 10 cm3 de vin i se
adaug apoximativ 1 g de acid tartric. Se recolteaz 250 ml de distilat.
Curba de etalonare
Se prepar prin diluare n ap a patru soluii de referin
Pentru pregtirea soluiilor de control se dilueaz n ap 0,5; 1,0; 2,5 i 5,0 mg de acid sorbic,
apoi se trec respectiv n baloane cotate cu capacitatea de 1000 cm3; se msoar la
spectrofotometru cu absorbie la lungimea de und 256 nm n raport cu apa distilat. Se primete
o curb liniar cu absorbii diferite n raport cu concentraiile soluiilor.
130
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Dozarea
ntr-o capsul cu diametrul de 55 mm se ntroduce5 ml de distilat, se adaug 1 ml de soluie
de hidroxid de calciu. Evaporarea se efectueaz la o baie de ap. Apoi restul se cltete cu civa
mililitri de ap distilat i se trece cantitativ ntr-o fiol de 20 ml. Se cltete de cteva ori cu ap
distilat.
Msurarea absorbanie la spectrofotometru la lungimea de und = 256 nm a
acidului sorbic n comparaie cu o soluie tampon obinut prin diluarea a 20 ml de ap distilat
cu 1 ml soluie de hidroxid de calciu. Valorile de absorban msurate n etaloane, se deduc n
concentraiile C a soluiilor de acid sorbic.
Not: Din practica curent, astfel de evaporri pot fi negligate. Efectuarea msurrilor de
absorban n distilatul diluat de n raport cu apa distilat.
Calculul:
Concentraia acidului sorbic n vin exprimat n miligram pe litru este egal cu:
100 x C,
n care C - concentraia acidului sorbic n soluia analizat la spectrofotometriu, exprimat n
miligram pe litru.
1.2. METODA DE DOZARE PRIN CROMATOGRAFIE CU FAZ GAZOAS

1.2.1. Aparate
Cromatograful cu faz gazoas nzestrat cu detecror ionizat cu flacr i cu o coloan de
oet inoxidabil (4 m x 1/8 pouce) tratat cu dimetildiclorosil i nzestrat cu faz staionar,
constitue un amestec de deitilenglicol succinic (5%) i acid fosforic (1%)
(DEGS H3PO4) i un amestec de deitilenglicol adipos (7%) i acid fosforic (1%)
(DEGS H3PO4) fixat n Gascrom Q 80-100 mesh.
Pentru tratarea cu dimetildiclorosil (DMDCS), cu faz de azot, la fel examinat i cu un nou azot.
Dup ntrebuinarea .
Condiiile de operare:
Temperatura cuptoruluii: 175 C.
Temperatura de injectare i n detector: 230 C.
Gaz purttor: azot (20 ml/min.).
Microsering de 10 microlitre cu capacitatea de gradare de 0,1 microlitre.
Reactive
Eter etilic distilat n momentul de utilizare.
Soluie de etalon intern: soluie de acid undecanoic n etanol de 95 n 100 vol. titrant 1 g ntrun litru.
Soluie apoas de acid sulfuric, ( 20 = 1,84 g/ml) diluarea 1/3 (v/v).
131
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.2.3. Metoda de determinare

Prepararea mostrei analizate.
ntr-un tub cotat cu capacitatea de 40 ml i cu dop rodat se ntroduc 20 ml de vin, se adaug
2 ml soluie de etalon interni 1 ml soluie diluat de acid sulfuric. Dup ce se agit puternic,
se adaug continuu n tub 10 ml eter etilic. Extracia acidului sorbic n faz organic prin
agitarea n tub dureaz 5 minute. Se las s se deconteze.
Prepararea soluiei de referin
Se selecioneaz un vin a crui cromatogram a extraciei de eter nu conine acid sorbic;
apoi se adaug n acest vin acid sorbic cu concentraia de 100 mg la litru. Se trateaz 20 ml de
mostr la fel preparat ca n metoda de determinare 3.3.1.
Cromatografierea
Ingectarea succesiv n cromatograf a acidului cu o microsering de 2 l a fazei subtile
obinute conform 3.3.2. i 2 l a fazei subtile obinute conform 3.3.1.
Se nregistreaz cromatograme respective; se verific identitatea n timp de reinere a acidului
sorbic i a etalotului intern. Se msoar nlimea (la fel i suprafaa) fiecrui pic nregistrat.

Calculul:
Concentraia de acid sorbic n vinul analizat, exprimat n miligram pe litru este egal:
h
I
100 x --- x --- ,
H
i
n care H - nlimea picului a acidului sorbic n soluia de referin;
h - nlimea picului a acidului sorbic n mostra analizat;
I - nlimea picului a etalotului intern n soluia de referin;
h - nlimea picului a etalonului intern n mostra analizat.
Note: Concentraia acidului sorbic poate fi determinat de aceleai pri gsite a suprafeelor
picurilor msurate.
1.3. METODA DE DETERMINARE ACIDULUI SORBIC PRIN
CROMATOGRAFIE N STRAT SUBIRE
1.3.1. Aparate
Plcile pentru cromatografie n strat subire utilizate, 20 x 20 cm acoperite cu gel de
poliamid (grosimea 0,15 mm) adiionat cu un indicator de fluorescen.
Cuve pentru cromatografie n strat subire.
Micropipete i microseringi cu volumul de 5 l 0,1 l.
Lamp cu radiaie ultrafiolet (254 nm).
132
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.3.2. Reactive
Eter etilic
Soluie apoas de acid sulfuric ( 20 = 1,84 g/ml) diluarea 1/3 (v/v).
Soluie de referin a acidului sorbic ntr-un amestec de hidroetanolic cu 10 % etanol
aproximativ 20 mg pe litru.
Faza mobil: hexan-pentan-acid acetic (20:20:3)
1.3.3. Modul de determinare

Prepararea mostrei analizate
ntr-un tub cotat cu capacitatea de 25 ml i cu dop rodat se ntroduc 10 ml de vin, se adaug
1 ml soluie de acid sulfuric diluat cu 5 ml eter etilic.Se agit puternic, apoi se las s se
deconteze.
Prepararea soluiei de referin
Dup diluarea soluiilor conform 4.2.3. se prepar cinci soluii de referin respectiv 2,4,6,8
i 10 mg acid sorbic ntr-un litru.
Cromatografie
La distana de 2 cm de marginea inferioar a placii, se pun 5 l de acid cu o microserind sau
cu o micropipet de fazei eterificat obinut conform 4.3.1 i se adaug cte 5 l de fiecare
soluie de referin.
Se trece faza mobil n cuv pentru cromatografie la o nlime aproximativ de 0,5 cm, apoi se
stabilete atmosfera cuvei ca s se mbogzeasc cu vapori solveni. Se trece placa n cuv.
Lansarea desfurrii cromatogramei pe 12 i 15 cm (durata desfurrii este de apoximativ 30
minute). Placa se usuc sub un curent de aer rece. Se examineaz cromatograma cu o lamp
radioactiv ultrafiolet la lumgimea de und de 254 nm.
Spoturile indicnd prezena acidului sorbicapar violet nchis pe fondul galben fluoriscent al plcii.
1.3.4 Exprimarea rezultatelor

Compararea intensitii mostrelor analizate i intensitii soluiilor de referin permit
evaluarea semicantitativ a concentraiei de acid sorbic ntre 2 i 10 mg pe litru. O concentraie
egal de 1 mg pe litru poate fi determina de o depunere de 10 l de soluie de mostr analizat.
Concentraiile superioare de 10 mg pe litru poate fi determinate conform unui volum de depunere
a soluiei analizane inferiuor de 5 l (msurarea acidului cu o microsering).
2.15.2. GOST R 52052-2003

2.15.3. SM 215-2001
133
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.16 Acidul L-ascorbic

2.16.1 MA-MD-AS313-13-ALASCO
Metodele propuse permit de a determina coninutul de acid ascorbic (AA) i acid

dehidroascorbic (DHA) prezent n vin i n must.

Acidul L-ascorbic (AA) este oxidat prin aciunea crbunelui activ n acid dehidroascorbic
(DHA). Acesta formeaz un compus fluorescent prin reacia cu ortofenilenediamina (O.P.D.A.).
O prob martor n prezena acidului boric permite de a determina fluorescena de fond (prin
formarea unui complex acid boric DHA) i de a o sustrage din rezultatul dozrii fluorimetrice.
1.2. Metoda uzual
Acidul L-ascorbic (AA) este oxidat prin aciunea iodului n DHA. Acesta este precipitat cu
2,4dinitro- fenilhidrazin n bis (2,4 dinitrofenilhidrazon). Dup separarea prin cromatografie
n strat subire i solubilizarea n mediu acetic, acest compus colorat n rou este dozat prin
spectrofotometria UV/vis, la lungimea de und de 500 nm.
1.1. METODA DE REFERIN (METODA FLUORIMETRIC)
1.1.1. Echipamente
Fluorimetru
Se utilizeaz un spectrofotometru echipat cu lamp ce emite un spectru continuu, plasat la
puterea minim a lampei. Lungimile de und de excitare i emisie optimale se determin n
prealabil n funcie de aparatul folosit. n general, lungimea de und pentru excitare se afl n
apropiere de 350 nm, iar pentru emisie n apropiere de 430 nm. Se folosesc cuve de 1 cm.
Filtre din sticl cu gradul 3 de porozitate.
Eprubete (diametrul : 10 mm).
Agitator pentru eprubete.
1.1.2.Reactivi
Soluie de dihidroclorur de orto-fenilendiamin (C6H10Cl2N2), de 0,02%, preparat
naintea experimentului.
Soluie de acetat de sodiu trihidrat de 500 g/l.
Soluie mixt de acid boric i acetat de sodiu. Se dizolv 3 g de acid boric n 100 ml soluie de
acetat de sodiu de 500 g/l.Soluia trebuie preparat naintea experimentului.
Soluie de acid acetic (20 = 1,05 g/ml) diluat la 56% (v/v), cu un pH aproximativ de 1,2.
Soluie de referin de acid L-ascorbic (AA) cu un coninut de 1 g/l. Se dizolv, la momentul
analizei, 50 mg de AA , prealabil deshidratat ntr-un exicator ferit de lumin, n 50 ml soluie de
acid acetic.
134
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Crbune activ extra pur pentru analiz. Se plaseaz 100 g de carbon activ ntr-o fiol conic cu
volumul de 2 l, se adaog 500 ml soluie de acid clorhidric(20 = 1,19 g/ml) de 10% (v/v). Se
aduce la fierbere, apoi se filtreaz printr-un filtru de sticl cu gradul 3 de porozitate.
Crbunele este plasat din nou n fiola conic de 2 l, se adaog 1 l de ap, se agit i se filtreaz
prin filtrul de sticl cu gradul 3 de porozitate. Operaia se repet de dou ori. Ulterior crbunele se
plaseaz ntr-o etuv ventilat, reglat la 115 5 C pentru 12 ore (pentru o noapte, spre
exemplu).

Pregtirea mostrelor pentru analiz
Se preleveaz o alicot de vin sau must i se dilueaz pn la 100 ml ntr-un balon cotat.
Diluarea se efectueaz cu soluie de acid acetic de 56%. Concentraia AA n soluia obinut
astfel trebuie s varieze n intervalul 0 - 60 mg/l. Coninutul balonului se omogenizeaz prin
agitare. Se adaog 2 g de crbune activ i se las n contact pentru 15 minute, agitnd periodic. Se
filtreaz printr-un filtru de hrtie, nlturnd primele picturi.
n dou baloane cotate de 100 ml se introduc cte 5 ml de filtrat, apoi n primul se adaog 5
ml soluie mixt de acid boric i acetat de sodiu (proba martor), iar n al doilea 5 ml soluie de
acetat de sodiu (proba de analizat). Se las n contact timp de 15 minute, agitnd periodic, apoi se
aduce la cot cu ap distilat.
Se ia cte o alicot de 2 ml din fiecare balon, se plaseaz n eprubete, apoi se adaog cte 5 ml
soluie de orto-fenilendiamin i se amestec cu ajutorul agitatorului ; se las pentru ca reacia s
decurg timp de 30 minute ntr-un loc ferit de lumin, apoi se efectueaz msurrile
spectrofotometrice.
Courba de etalonare
n trei baloane cotate de 100 ml se plaseaz respectiv cte 2, 4 i 6 ml soluie de referin de
AA, se aduce la cot cu soluie de acid acetic. Se omogenizeaz prin agitare. Soluiile de referin
astfel preparate conin respectiv 2, 4 i 6 mg de acid ascorbic/100 ml. Se adaog cte 2 g de
crbune activ n fiecare balon i se las n contact timp de 15 minute, agitnd periodic. Se filtreaz
printr-un filtru de hrtie, nlturnd primele picturi.
Se plaseaz respectiv cte 5 ml din fiecare filtrat n trei baloane cotate de 100 ml (prima serie,
martor). Se repet operaia pentru a doua serie. n balonaele cu soluii din prima serie se introduc
cte 5 ml de soluie mixt de acid boric i acetat de sodiu, iar n cele din seria a doua cte 5 ml
soluie de acetat de sodiu. Se las n contact timp de 15 minute, agitnd periodic, apoi se aduce la
cot cu ap distilat.
Se ia cte o alicot de 2 ml din fiecare balon, se plaseaz n eprubete, apoi se adaog cte 5 ml
soluie de orto-fenilendiamin i se amestec cu ajutorul agitatorului ; se las reacia s decurg
timp de 30 minute ntr-un loc ferit de lumin, apoi se efectueaz msurrile spectrofotometrice.
Determinrile fluorimetrice
Pentru fiecare din probele supuse analizei, fie pentru curba de etalonare, fie pentru testri pe
vin sau must, se stabilete scara de msurare la zero, folosind soluia martor respectiv.
Ulterior se efectueaz msurarea intensitii fluorescenei.
Curba de etalonare trebuie s fie linear i s treac prin origine. Concentraia sumar
AA+DHA n probele de analizat se determin din curba de etalonare (C).
135
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Coninutul de acid L-ascorbic + acid dehidroascorbic n vin sau must, exprimat n mg/l, va fi
calculat din relaia :
Cx F,
unde F - este factorul de diluie.
1.2. METODA UZUAL (COLORIMETRIC)
1.2.1. Echipamente
. Centrifug de laborator i eprubete de 50 ml cu dop pe lif .
. Baie de ap pentru rcire i termostatare ntre 5 i 10 C.
Baie de ap termostatat la 20 C.
Plci pentru cromatografia n strat subire de 20 20 cm, acoperite cu gel de silice G
(grosimea
0,25 - 0,3 mm).
Cuve pentru cromatografie.
Micropipete care permit de a preleva volume de 0,2 ml.
Spectrofotometru care permite de a msura absorbana la 500 nm, cuve de 1 cm.
1.2.2. Reactivi
Soluie de acid metafosforic de 30% (m/v). Se cntresc 30 g de acid metafosforic, n prealabil
mrunit ntr-un mojar. Se spal rapid cu ap distilat, apoi se dizolv ntr-un balon cotat de 100
ml, se duce la cot cu ap distilat.Soluia obinut conine aproximativ 30% de acid metafosforic.
Solution d'acide mtaphosphorique 30 p. 100 (m/v)
Soluie de acid metafosforic de 3% (m/v). Se prepar naintea experienei prin diluare 1/10
cu ap distilat a soluiei de 30% (p. 3.2.1).
Soluie de acid metafosforic de 1% (m/v). Se prepar naintea experienei prin diluare 1/30
cu ap distilat a soluiei de 30% (p. 3.2.1).
Suspensie de poliamid. Se prepar o suspensie din 10 g de poliamid pentru cromatografie i
60 ml de ap distilat, se las n contact pentru 2 ore. Cantitatea astfel preparat este suficient
pentru 4 determinri.
1.2.3. Tiouree
Soluie 0,05 M de iod
Soluie de 2,4-dinitrofenilhidrazin de 6 % (m/v). Se prepar o suspensie din 6 g de 2,4dinitrofenilhidrazin n 50 ml de acid acetic cristalizabil (20 = 1,05 g/ml) ; se adaog 50 ml de
acid sulfuric (20 =1,84 g/ml). 2,4-dinitrofenilhidrazina se dizolv prin agitare.
Acetat de etil, pregtit cu acid acetic cristalizabil de 2% (v/v) (20 = 1,05 g/ml).
Cloroform.
Soluie de amidon de 0,5 % (m/v).
Faza mobil : acetat de etil, cloroform, acide acetic cristalizabil (50:60:5). Se las amestecul
de solveni nainte de a fi utilizat pentru 12 ore.
Acid acetic cristalizabil (20 = 1,05 g/ml).
Soluie de acid L-ascorbic (AA) cu un coninut de 1 g AA/100 ml acid metafosforic de 1%.
136
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

.Oxidarea acidului L- ascorbic (AA) n acid dehidroascorbic (DHA).
ntr-un balon cotat de 100 ml se plaseaz o alicuot de 50 ml de vin, se adaog 15 ml
suspensie de poliamid i se aduce la cot cu soluie de acid metafosforic de 3%. Se las n
contact pentru o or, agitnd periodic. Se filtreaz printr-un filtru de hrtie. Se plaseaz 20 ml de
filtat ntr-o eprubet pentru centrifugare, se adaog 1 ml soluie 0,05 M de iod. Se omogenizeaz
prin agitarea eprubetei cu dopul nchis. Peste 1 minut se reduce excesul de iod prin adugarea a
aproximativ 25 mg de tiouree.
Formarea i extracia bis (2,4 dinitrofenilhidrazonei) i acidului dicetogulonic.
Eprubeta se introduce ntr-o baie rcit la 5 - 10 C, se adaog 4 ml soluie de 2,4
dinitrofenilhidrazin. Se omogenizeaz coninutul eprubetei, fr a nmuia dopul de sticl.
Eprubeta nchis cu atenie este lsat ntr-o baie de ap la 20 C pentru 16 ore (pe a doua zi, spre
exemplu). Se adaog la coninutul eprubetei 15 ml soluie de acetat de etil, se nchide, se agit
timp de 30 sec., apoi se centrifughez 5 min. prin aplicarea unei fore centrifuge de 300-350 g.
Se plaseaz cu ajutorul unei pipete 10 ml de acetat de etil de extracie ntr-un balon conic cu
dop pe lif . Se adaog la coninutul eprubetei pentru centrifugare 5 ml de acetat de etil. Se
nchide i se agit 30 sec. i se centrifughez 5 min. n condiii identice. Apoi se iau 5 ml de
acetat de etil de extracie i se adaog acest volum la soluia de la prima extracie din balonul
conic. Amestecul se omogenizeaz prin agitare.
.Separarea prin cromatografie a bis (2,4 dinitrofenilhidrazonei)
Se efectueaz ntr-un interval de timp ce nu depete 2 ore dup extracie. Se las o margine de 2
cm n partea de jos i lateral a plcii, i se depune linear pe suprafaa plcii 0,2 ml acetat de
etil de extracie.
Faza mobil se toarn n cuva pentru cromatografie la o nlime de 1 cm i se las un timp
pentru ca atmosfera din cuv s fie saturat de vapori de solveni. Se introduce placa, se las s
migreze solventul pna la marginea superioar a plcii. Placa se usuc timp de o or n atmosfer
ventilat.
Se separ cu ajutorul unei spatule, perpendicular zonei de migrare, zona de culoare roie,
caracteristic pentru bis (2,4 dinitrofenilhidrazon). Substratul este trecut cantitativ ntr-un
balon conic cu dop n lif. Se adaog 4 ml de acid acetic, se las n contact pentru 30 min.,
agitnd frecvent. Se filtreaz printr-un filtru de hrtie direct n cuva spectrofotometrului. Filtratul
obinut trebuie s fie limpede.
Scara spectrofotometrului se regleaz la zero cu soluie de acid acetic, apoi se msoar
absorbana soluiei de analizat.
1.2.5. Curba de etalonare
n trei baloane cotate de 100 ml se plaseaz respectiv cte 5, 10 i 15 ml soluie de AA de 1
g/l, se aduce la cot cu soluie de acid metafosforic de 1%. Soluiile obinute astfel conin
respectiv 50, 100 i 150 mg AA/litru. Se trateaz cte 50 ml din aceste soluii conform modului
operator descris n p. 3.3.1, 3.3.2 i 3.3.3. Se traseaz curba de etalonare, care trebuie s fie linear
i s treac prin origine.

Coninutul de acid L-ascorbic + acid dehidroascorbic n vin sau must, conform procedurii
descrise n p. 3.3.3 se determin din curba de etalonare (C), i se exprim n mg/l.
137
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
n caz dac concentraia de acid L-ascorbic + acid dehidroascorbic depete 150 mg/l, se
reduce volumul alicuotei de vin la 25, 20 sau 10 ml de vin i se multiplic rezultatul obinut cu
factorul de diluie F.
138
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.17 Aciditatea ionic (pH)

2.17.1 MA-MD-AS313-15-pH
Msurarea diferenei de potenial ntre doi electrozi cufundai n must i n vin. Un electrod
are un potenial, care are o funcie ce definete pH n lichid, cellalt are un poteniol fix i
cunoscut i constitue un electrod de referin.
2. APARATE
2.1. pH metru etalonat n unirea pH permite msurarea de aproape 0,05 uniti sau mai
puin.
2.2. Electrozi:
Electrod de sticl, pstrat n ap distilat;
Electrod de referin n colomel-clorur de potasiu saturat i pstrat n soluie
saturat de clorur de potasiu;
Electrod combinat i pstrat n ap distilat.
3. REACTIVE
3.1.Soluii tampon:
Soluie saturat de tartrat acid de potasiu. Soluie cu o capacitate mai mic de 5,7 g/l de
hidrogenotartrat de potasiu (HOOC C2H4O2 COOK) la 20 C. Aceast soluie poate fi pstrat 2
luni n prezena a 0,1 g timol n 200 ml.
3,57 la 20 C
3,56 la 20 C
3,55 la 20 C
Soluie de ftalat acid de potasiu de 0,05 M . Soluie cu o capacitate de 10,211 g/l de
hidrogenoftalat de potasiu (HOOC C6H4 COOK) la 20 C.
Durata maximal de pstrare 2 luni
pH
pH
3,999
4,003
4,008
4,015
la 15 C
la 20 C
la 25 C
la 30 C
Soluie cu capacitate:
Dihidrogenofosfat de potasiu, KH2PO4 ---------------------- 3,402 g
Hidrogenofosfat de potasiu, KH2PO4 ---------------------- 4,354 g
Ap distilat
----------------------- 1 l
Durata maximal de pstrare 2 luni
pH
6,90
6,88
6,86
6,85
la 15 C
la 20 C
la 25 C
la 30 C
139
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.17.1. MA-MD-AS313-15-pH
Not: La fel pot fi utilizate soluiile tampon de referin din comer.

4. MODUL DE DETERMINARE
4.1. Aducerea aparatului la zero

Aducerea la zero se efecrueaz fa de toate msurrile, conform indicaiilor primite de
la aparatul utilizat.
4.2.Etalonarea pH-metrului
Etalonarea se efectueaz la 20 C n conformitate cu indicaiile primite de la aparatul utilizat
n soluiile tampon cu pH 6,88 i 3,57 la 20C. Utilizarea soluiilor tampon cu pH 4,00 la 20 C
pentru a controla scara de calibrare.
4.3.Msurarea
Se cufund electrodul n vin sau n must la o temperatur cuprins ntre de 20 i 25 C
Se citete scara de valori a pH-metrului.
Se efectueaz mai puin de 2 determinri n acela vin.
Se ia rezultatul ca mediea aritmetic a dou determitri.
5. EXPRIMARAE REZULTATELOR
pH-ul n must i n vin este exprimat cu 2 zecimale.
140
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.18 DIOXIDUL DE CARBON
2.18.1 MA-MD-AS 314-01-DIOCAR

1.1.1. Vinuri nespumoase (CO2 sub presiune 0,5 105 Pa) (1) Volumul de vin luat din
prob este rcit la aproximativ 0 C i amestecat cu o cantitate suficient de hidroxid de sodiu
pentru a obine un pH de 10-11. Titrarea este efectuat cu o soluie acid n prezena anhidrazei
carbonice. Coninutul de bioxid de carbon este calculate din volumul de acid necesar schimbrii
pH de la 8,6 (forma bicarbonat) la 4,0 (acid carbonic). n aceleai condiii se efectueaz i o
titrare test, pe vin decarbonatat, n scopul de a ine cont de volumul de soluie de hidroxid de
sodiu absorbit de acizii din vin.
1.1.2. Vinuri spumante i petiante
Proba de vin de analizat este rcit aproape de punctul de nghe. Dup nlturarea unei
cantiti utilizate ca blanc dup decarbonatare, restul coninutului sticlei este alcalinizat pentru a
fixa tot dioxidul de carbon sub forma Na2CO3. Titrarea este efectuat cu o soluie acid, n
prezena anhidrazei carbonice. Coninutul de bioxid de carbon este calculat din volumul soluiei
acide necesar pentru schimbarea pH de la 8,6 (form bicarbonat) la 4,0 (acid carbonic). n
aceleai condiii se ntreprinde i o titrare blanc, pe vin decarbonatat, n scopul de a ine cont de
volumul de soluie de hidroxid de sodiu absorbit de acizii din vin.
2.1. Vinuri nespumoase (CO2 sub presiune 0,5 105Pa)

2.1.1. Aparatura
2.1.1.1. Agitator magnetic.
2.1.1.2. pH metru
2.1.2. Reactivi
2.1.2.1. Soluie de hidroxid de sodiu NaOH 0,1 M.
2.1.2.2. Soluie acid sulfuric H2SO4 0,05 M.
2.1.2.3. Soluie anhidraz carbonic 1 g/l.
Se rcete proba de vin la aproximativ 0 C mpreun cu pipeta utilizat pentru eantionare. Se
pun 25 ml de soluie de hidroxid de sodiu (punctul 2.1.2.1) ntr-un pahar de laborator de 100 ml;
se adaug dou picturi de soluie apoas de anhidraz carbonic (punctul 2.1.2.3). Se introduc
10 ml de vin, utiliznd pipeta rcit la 0 C. Se pune paharul pe agitatorul magnetic, se instaleaz
electrodul pH i se agit moderat. Cnd lichidul a ajuns la temperatura camerei, se titreaz ncet
cu soluia de acid sulfuric (punctul 2.1.2.2) pn cnd pH-ul ajunge la 8,6. Se noteaz valorile
citite pe biuret.
Se continu titrarea cu acid sulfuric (punctul 2.1.2.2) pn cnd pH-ul atinge valoarea 4,0. Se
noteaz cu n ml volumul utilizat ntre pH 8,6 i 4,0.
Se nltur CO2 din aproximativ 50 ml de prob de vin prin agitarea n vid timp de trei
minute, balonul fiind nclzit ntr-o baie de ap la aproximativ 25 C. Se repet procedura de mai
sus pe 10 ml de vin decarbonatat. Se noteaz cu n ml volumul utilizat.
141
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

1 ml de soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M titrat corespunde la 4,4 mg de CO2. Cantitatea
de CO2 din vin, n grame per litru, este dat de formula:
0,44 (n n)
Se evalueaz cu dou zecimale.
Not: Cnd vinurile conin puin CO2 (CO2 < 1 g/l) nu este necesar adugarea anhidrazei
carbonice pentru catalizarea hidratrii CO2.
2.2. Vinuri spumante i petiante
2.2.1. Aparatura
2.2.1.1. Agitator magnetic.
2.2.1.2. pH metru
2.2.2. Reactivi
2.2.2.1. Hidroxid de sodiu NaOH 50 % (m/m).
2.2.2.2. Soluie de acid sulfuric H2SO4 0,05 M.
2.2.2.3. Soluie de anhidraz carbonic 1 g/l.
Se noteaz nivelul vinului n sticl i se rcete pn cnd ncepe s nghee. Se las sticla s
se nclzeasc uor, n timp ce se agit, pn cnd dispar cristalele de ghea. Se scoate dopul
rapid i se pun 45-50 ml de vin n cilindrul pentru titrarea blanc. Volumul exact nlturat, v ml,
este determinat prin citirea valorilor pe cilindrul gradat dup de vinul a ajuns la temperatura
camerei.
Imediat dup ce proba blanc a fost nlturat, se adaug 20 ml de soluie de hidroxid de
sodiu (punctul 2.2.2.1) ntr-o sticl cu capacitatea de 750 ml. Se ateapt pn cnd vinul ajunge
la temperatura camerei. Se pun 30 ml de ap distilat fiart i dou picturi de soluie de
anhidraz carbonic (punctul 2.2.2.3) ntr-un pahar de laborator de 100 ml. Se adaug 10 ml de
vin care a fost alcalinizat.
Se pune paharul pe agitatorul magnetic, se instaleaz electrodul i tija magnetic i se agit
uor. Se titreaz uor cu soluie de acid sulfuric (punctul 2.2.2.2), pn cnd pH atinge 8,6. Se
noteaz valorile citite pe biuret. Se continu uor titrarea cu acid sulfuric (punctul 2.2.2.2), pn
cnd pH ajunge la valoarea 4,0. Se noteaz cu n ml volumul utilizat ntre 8,6 i 4,0.
Se nltur CO2 din v ml de vin pus deoparte pentru titrarea blanc prin agitarea trei minute n
vid, balonul fiind nclzit la aproximativ 25 C ntr-o baie de ap. Se nltur 10 ml de vin
decarbonatat i se adaug la 30 ml de ap distilat fiart; se adaug dou-trei picturi de soluie
de hidroxid de sodiu (punctul 2.2.2.1) pentru aducerea pH la 10-11. Urmai apoi procedura de
mai sus. Se noteaz cu n ml volumul de acid sulfuric 0,05 M adugat.
1 ml de acid sulfuric 0,05 M corespunde cu 4,4 mg de CO2.
Se golete sticla de vin care a fost calinizat i se determin, cu precizie de 1 ml, volumul
iniial de vin prin completarea cu ap pn la cot. Se noteaz cu V ml.
142
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Cantitatea de CO2, exprimat n grame per litru de vin, este dat de urmtoarea formul:
(V v + 20)
0,44 n n , x
V v
Rezultatul se noteaz cu dou zecimale.

2.3. Calculul suprapresiunii teoretice
Presiunea n exces la 20 C (Paph20), exprimat n pascali, este dat de formula:
Q
Paph20 =
Patm
5
1,951x10 (0,86 0,01A)(1 0,00144S )
unde:
Q = coninutul de CO2 al vinului, n g/l,
A = tria alcoolic a vinului la 20 C,
S = coninutul n zahr al vinului, n g/l,
Patm = presiunea atmosferic, exprimat n pascali.
3 MSURAREA SUPRAPRESIUNII VINURILOR SPUMANTE I PETIANTE
1. PRINCIPIU
Dup stabilizarea termic i agitarea sticlei, suprapresiunea se msoar cu ajutorul unui

afrometru (manometru). El se exprim n pascali (Pa) (metoda de tipul I). Metoda se poate aplica
i vinurilor spumoase i vinurilor perlante.
2. APARATURA
Aparatul care permite msurarea suprapresiunii din sticlele cu vin spumant i petiant se
numete afrometru. Acesta are diferite forme, corespunztor modului n care este astupat sticla
(capsul metalic, capac, dop din plut sau plastic).
2.1. Pentru sticlele dotate cu o capsul
Este format din trei pri (a se vedea figura 1):
-partea superioar (urub port-ac) se compune din manometru, inel de strngere manual, un
urub melcat care culiseaz n partea median i un ac care traverseaz capsula. Acul este
dotat cu o deschidere lateral care comunic presiunea la manometru. O garnitur asigur
contactul etan cu capsula sticlei;
- partea median (sau piuli) servete la centrarea prii superioare. Ea se nurubeaz pe
rtea inferioar, meninnd ferm pe sticl ntreaga instalaie;
- partea inferioar (sau etrier) este prevzut cu o ghear care se prinde sub capul sticlei,
fixnd instalaia. Exist capete adaptate pentru fiecare tip de sticl.
2.2. Pentru sticlele prevzute cu dop

Se formeaz din dou pri (a se vedea figura 2):
- partea superioar este identic cu aparatul precedent; cu toate acestea, acul este mai lung.
Acesta este format dintr-un tub lung gurit, cu un vrf la unul din capete, pentru a traversa dopul.
Vrful este detaabil I cade n vin dup traversarea dopului;
143
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
- partea inferioar este format dintr-o piuli i o baz care se aeaz pe dop. Aceasta este
prevzut cu patru uruburi de strngere pentru meninerea ntregii instalaii pe dop.
Observaii privind manometrele cu care sunt dotate cele dou tipuri de aparate:
- manometrele pot fi fie mecanice cu tub Burdon, fie digitale cu senzori piezoelectrici. n
primul caz, tubul Burdon trebuie obligatoriu s fie din oel inoxidabil;
- sunt gradate n pascali (Pa). Pentru vinurile spumante este mai practice s se utilizeze, ca
unitate, 105 Pa sau kilopascalul (kPa);
- se mpart n diferite clase. Clasa unui manometru este dat de precizia citirii, n raport cu o
citire pe ntreaga scal, exprimat ca procentaj (de exemplu, un manometru de 1 000 kPa din
clasa I nseamn o presiune maxim de 1 000 kPa i o citire n intervalul 10 kPa).
Instrumentele din clasa I se recomand pentru msurtori de precizie.
2. METODA DE LUCRU
Determinrile trebuie efectuate pe sticle a cror temperatur a fost stabilizat cel puin 24 de
ore. Dup ce a fost strpuns capsa, dopul din plut sau din plastic, sticla trebuie agitat puternic,
pn cnd presiunea este constant, n scopul efecturii citirii.
144
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.1. n cazul sticlelor nchise cu o capsul

Se fixeaz gheara etrierului sub capul sticlei. Se strnge piulia pn ce aparatul este fixat
ferm pe sticl. Apoi se nurubeaz partea superioar n piuli. Pentru a se evita eliminarea de
gaz, strpungerea capsulei trebuie efectuat ct mai rapid posibil, pentru a pune n contact
garnitura i sticla.
Sticla trebuie apoi agitat puternic, pn la o presiune constant, n scopul efecturii citirii.
3.2. n cazul sticlelor prevzute cu dop
Se poziioneaz vrful acului. Aparatul se aeaz n poziie pe dop. Se strng cele patru
uruburi pe dop. Se nurubeaz partea superioar (acul traverseaz dopul). Vrful trebuie sa
cad n interiorul sticlei pentru a permite manometrului s transmit presiunea. Se efectueaz
citirea dup
agitarea sticlei pn la o presiune constant. Dup citire, se recupereaz vrful.
Suprapresiunea la 20 C (Paph20) se exprim n pascali (Pa) sau n kilopascali (kPa). Ea

trebuie s fie n concordan cu precizia manometrului (de exemplu, 6,3 105 Pa sau 630 kPa i
nu 6,33 105 Pa sau 633 kPa, pentru un manometru din clasa I cu o scal complet de citire de 1
000 kPa).
Dac temperatura la care se efectueaz msurtoarea este diferit de 20 C, trebuie efectuat
o corecie, prin nmulirea presiunii msurate cu coeficientul corespunztor (vezi tabelul 1)
Tabelul 1
Raportul dintre suprapresiunea Paph20 ntr-un vin petiant sau
spumant la 20 C i suprapresiunea Papht, la temperatura t
0
C
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
1,85
1,80
1,74
1,68
1,64
1,59
1,54
1,50
1,45
1,40
1,36
1,32
145
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul 1
(continuare)
0
C
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
1,28
1,24
1,20
1,16
1,13
1,09
1,06
1,03
1,00
0,97
0,95
0,93
0,91
0,88
4. CONTROLUL REZULTATELOR
Metoda de determinare direct a parametrilor fizici (metod criteriu de tip I)

Verificarea afrometrelor
Afrometrele trebuie verificate cu regularitate (cel puin o dat pe an). Verificarea se face cu
ajutorul unei pompe de presiune pentru etalonare. Acesta permite compararea manometrului de
testat cu un manometru de referin, de clas superioar, racordat la etaloanele naionale, montate
n paralel. Controlul este utilizat pentru a confrunta valorile indicate de cele dou aparate pentru
presiuni n cretere, apoi n descretere. n cazul n care apare o diferen ntre cele dou, un
urub de reglaj permite efectuarea coreciilor necesare, Laboratoarele i organismele autorizate
sunt toate dotate cu astfel de pompe de presiune pentru etalonare; acestea se pot obine i de la
productorii de manometre.
2.18.2. GOST 12258-79
146
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.19 Metanolul
2.19.1 MA-MD-AS312-03-METHAN
Metoda recomandat: Metanolul se determin prin cromatografie n faz gazoas n

distilate de vin cu adaos de etalon intern.
Metoda obinuit: Metanolul se oxideaz n metanal n prezena permanganatului de
potasiu i a acidulului fosforic n distilatul de vin cu diluarea ce conine 5% vol. Metatalul
se coloreaz n violet, n prezena acidului sulfuric cu acidul cromotropic. Intensitatea culorii
se determin la spectrofotometrul cu lungimea de und 575 nm.
2. METODA RECOMANDAT
2.1 Aparate
Cromatograf n faz gazoas cu detector de ionizare n flacr.
Coloane:
Carbowax 1540, acoperite cu 10 p. 100 greutate la Chromosotb W, 60-80 mesh, n coloana cu
acid inoxidat cu lungimea de 7,5 m i 1/8 din diametru.
Carbowax 400 cu 5p. 100 i Hallcomid M. OL cu 1. 100 acoperit pe Chromosorb W, 60-80
mesh, n coloana cu acid inoxidat cu lungimea de 7,5 m i 1/8 din diametru.
n ambele cazuri , Chromosorb W n prealabil activeaz nclzirea n baia de aburi pn la
750-800 C timp de 4 h (ore).
Not: Alte tipuri de coloan pot permite o separare bun. Modul de operare descris mai jos
acord cteva exemple.
2.2 Metoda de determinare
Se prepar o soluie hidroalcoolic 1 g/l de etalon intern (4-metilpentanol-2) n alcool cu
10% vol.
Se prepar soluia n care se adaug 5 ml de soluie hidroalcoolic n 50 ml de distilat de vin
la fel cum se indic n capitolul Titrul alcoometricSe prepar o soluie de referin de metanol 100 mg/l n etanol cu 10% vol. Se adaug 5 ml
soluie de etalon intern n 50 ml de soluie pregtit. Apoi se injecteaz n cromatograf 2 l
soluie de referin, adugndu-se etalon intern.
Temteratuta n cuptor este de 90 C i consumul de gaz purttor este de 25 ml/min.
2.3 Exprimarea rezultatului:
Coninutul de metanol, exprimat n miligrame pe litru (mg/l), se calculez cu formula:
I
Sx
100 x --- x ----i
S
in care:
S suprafaa picului de metanol n soluia de referin,
Sx - suprafaa picului de metanol n soluia dozat,
i - suprafaa picului de etalon intern n soluia dozat,
147
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
- suprafaa picului de etalon intern n soluia de referin.

3. METODA OBINUIT
3.1 Reactive
3.1.1 Acidul chromotropic
Acidul 4,5-dihidroxinaftalin-2,7-sulfuric 2,7 ( C10H8O8S2, 2H2O) cu greutatea molecular
356,34 g.
Este un praf alb sau cafeniu strlucitor, solubil n ap. Se ntrebuineaz la fel ca sarea
disodic acest acid, care se prezint sub forma unui produs galben sau cafeniu strlucitor
foarte solubil n ap.
Purificacitatea Acidul chromotropic este un colorant nensemnat n proba alb
(necunoscut). Reactivii preparai din acest acid. n caz contrar, s-ar putea s fie purificat
conform procedeelor:
Se dilueaz 10 g acidul chromotropic sau de sare n 25 ml ap distilat. Apoi n aceast sare,
se adaug 2 ml acid sulfuric concentrat (20=1,84 g/l). Se adaug 50 ml metanol, se nclzete
se ajit, apoi se filtrez. Se adaug 100 ml 2-propanol n precipitatul acidului liber i se
cristalizeaz, se las s se usuce, apoi se centrifugeaz.
Reacie Adugarea clorurei de fer III (1pictur) n 10 ml de soluie cu 0,1 g d o
culoare verde.
Prob sensibil Se dilueaz 0,5 ml soluie farmaceutic de formaldehid n balon cu
capacitatea de 1000 ml i se aduce la cot cu ap distilat. La 5 ml soluie cu 0,05 p. 100 acid
chromotropic cu acid sulfuric de 75% (v/v)., se adaug 0,1 ml soluie de formaldehid i se
nclzete la temperatura de 70 C timp de 20min. Astfel primim o culoare fiolet.
3.1.2 Soluie de acid cromotropic cu 0,05 p. 100 cu acid sulfuric de 75% (v/v).
Se dizolv 50 ml acid chromotropic sau sarea de sodium cu 35 ml ap distilat. Se plaseaz
soluia primit la o baie de ap cu ghea i se adaug cu precauie n mici porii 75 ml acid
sulfuric concentrat concentrat (20=1,84 g/l) i se agit.
Aceast soluie este necesar de a fi preparat n momentul utilizrii.
3.1.3 Soluie etalon de metanol de 5 g/l n alcool de 5% vol.
Metanol pur (E760 = 64,7 0,2 C) ------------------------------ 0,5 g
Alcool total (fr metanol) ------------------------------------ 50 ml
Ap distilat ------------------------------------------------------ 1 l
3.1.4 Soluia dilurii
Alcool total (fr metanol) ------------------------------------ 50 ml
Ap distilat ------------------------------------------------------ 1 l
3.1.5 Soluie de acid fosforic n 50 p.100 (m/v)
3.1.6 Soluie de permanganat de potasiu n 5 p.100 (m/v)
3.1.7 Soluie de sulfit de sodiu neutru n 2 p.100 (m/v)
Soluia se oxidez repede n aer. Se verific titrul prin titrare cu iod.
148
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.2 Metoda de determinare

Distilatul de vin diluat ( n capitolul Titrul alcoometric) readuce titrul alcoometric la
5 % vol. ntr-un balon cu dop rodat se ntroduce 0,5 ml de acest distilat diluat, se adaug o
pictur de acid fosforic de 50 p. 100, dou picturi de soluie permanganat de potasiu de 5 p.
100, se agit ise las pe 10 min.
Se decolorez cu 4 picturi de permanganat, soluie de 2 p. 100 sulfit de sodium neutru (a se
evita toate surplusurile). Se adaug 5 ml soluie sulfuric a aciduluicromotropic de 0,05 %. Se
pune la o bae de ap la 70 C timp de 20 min. Se las s se rceasc.
Se determin absorbana As la 570 nm, se regleaz absorbana la zero cu soluia martor cu
0,5 ml soluie de diluare.
Construirea curbeide etalonare.
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 50 ml se iau 2,5-5-10-15-20-25 ml soluie de
metanol de 0,5 g/l n alcool n proporie de 5/100. Se aduc la semn cu soluie hidroalcoolic de
diluare n proporie de5/100. n aa fel se obin soluii cu coninutul de alcool de 5% vol.,
respectiv 25-50-100-150-200-250 mg de metanol la litru.
Se trateaz 0,5 ml de soluie hidroalcoolic de diluare cu 0,5 ml orice soluie etalon,
concomitent ca i la distilatul de vin, care aduce la coninutul de alcool de 5 % vol.
Se determin absorbana n aceste soluii la 570 nm.
Reprezentarea curbei absorbanei cu soluiile etalon
3.3 Calculul
Determinarea coninutului de metanol, exprimat n miligram pe litru n distilatul de vin readus
la un titru alcoometric la 5 % vol.
La exprimarea coninutul de vin n mg/l se ia n consideraie diluarea efectuat pentru
readucerea titrului vinului la 5% vol.
2.19.2. SM 139-1997
149
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.20. Glicerol, butan-2,3 -diol

2.20.1.MA-MD-AS 312-04 GLYBUT
Dup tratarea prealabil a vinului pe o coloan de anionit n scopul de a fixa zaharurile i

eventual manitolul i sorbitolul, glicerina i butan-2,3-diolul sunt oxidate cu acid periodic.
Compusul format prin aciunea floroglucinei asupra metanalului format la oxidarea glicerinei este
testat colorimetric la 480 nm. Compusul piperidinei i nitroprusiatului de sodiu cu etanalul obinut
la oxidarea butan-2,3-diolului se determiun colorimetric la 570 nm.
2. Echipamente
Coloan din sticl cu lungimea de aproximativ 300 mm i diametrul interior de 10-11 mm,
dotat cu sistem de reglare a debitului (robinet).
Spectrofotometru UV/vis care permite efectuarea msurrilor n diapazonul 300-700 nm ;
cuve cu traseul optic de 1 cm.
3. Reactivi
Glicerin, C3H8O3
Butan-2,3-diol, C4H10O2
Anionit puternic bazic, spre exemplu anionit III de Merck sau amberlit IRA 400.
Polivinilpirolidon polymerizat (PVPP). (Conform Codex oenologic international).
Soluie de acid periodic 0,1 M n acid sulfuric 0,05 M :
Se cntresc 10,696 g de metaperiodat de sodiu (NaIO4) ; se dizolv ntr-un balon cotat de 500
ml cu 50 ml de acid sulfuric 0,5 M ; se aduce la cot cu ap distilat.
Soluie de acid periodic 0,05 M n acid sulfuric 0,025 M :
Se dilueaz soluia preparat conform p.3.5 cu ap distilat n raport 1 + 1.
Soluie de acid sulfuric 0,5 M.
Soluie de hidroxid de sodiu 1 M.
Soluie de hidroxid de sodiu de 5% (m/v).
Alcool de 96% vol.
Soluie de floroglucin de 2% (m/v), renoit zilnic.
Soluie de acetat de sodiu anhidru, Na CH3COO de 27% (m/v).
Soluie de nitropentacianoferrat II (nitroprussiat) de sodiu, Na2Fe(CN)5NO.2H2O de 2% (m/v),
renoit zilnic.
Soluie de piperidin C5H11N de 25% (v/v) ; renoit zilnic.
Soluie etalon de Glicerin :
Se prepar o soluie ce conine 250 mg n 100 ml de glicerin i se stabilete titrul glicerinei n
proba astfel pregtit prin metoda enzimatic sau periodimetric (conform p. 6). Ulterior se
pregtete soluia etalon de glicerin prin cntrirea a 250 mg de glicerin pur ntr-un balon cotat
de 100 ml, se aduce la cot cu ap distilat.
Soluie etalon de butan-2,3-diol
Se prepar o soluie ce conine 250 mg n 100 ml de butan-2,3-diol i se stabilete titrul butan2,3-diolului n proba astfel pregtit prin metoda enzimatic sau periodimetric (conform p. 6).
Ulterior se pregtete soluia etalon de butan-2,3-diol prin cntrirea a 250 mg de butan-2,3-diol
pur ntr-un balon cotat de 100 ml, se aduce la cot cu ap distilat
Soluie cupro-alcalin.
150
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Soluie cupric A:
Sulfat de cupru, CuSO4.5H20 ......................................... 40 g
Acid sulfuric (r=1.84 g/mL) ........................................... 2 ml
Ap distilat, pn la cot.1000 ml
Soluie tartro-alcalin B:
Tartrat de sodiu i de potasiu, KNaC4H4O6.4H2O ................. 200 g
Hidroxid de sodiu ............................................................. 150 g
Ap distilat, pn la cot.1000 ml
Soluia cupro-alcalin se obine prin amestecare, la momentul utilizrii, a soluiilor A i B n pri
egale.
4. Modul de lucru
4.1. Pregtirea coloanei de anionit
Anionitul, care se afl, de regul, n forma C1 trebuie pstrat ntr-un recipient, umplut cu
ap distilat decarbonizat. Se plaseaz 30 ml de anionit n coloan. n partea superioar a
coloanei se introduce un tampon din vat de sticl, pentru a evita incluziunile de aer n stratul de
rin. Se trec 150 ml de hidroxid de sodiu de 5% cu un debit de 3,5-5 ml/min., urmat de trecerea
unui volum similar de ap distilat decarbonizat pn la reacia neutr sau slab alcalin a
fenolftaleinei. Anionitul astfel tratat este pregtit pentru lucru.
Anionitul astfel pregtit servete doar pentru un ciclu. Ulterior anionitul se regenereaz cu
ajutorul unei soluii de acid clorhidric de 5% timp de cteva ore i se spal cu ap pn la
nlturarea clorurilor (filtratul se verific la prezena clorurilor, cu soluie de AgNO3 de 1%, spre
exemplu).
Se dilueaz vinul n raport de 1/5 (10 ml/50 ml). Pentru vinul puternic colorat, se efectueaz
n prealabil decolorarea cu ajutorul PVPP : Se introduc 10 ml de vin ntr-un balon cotat de 50 ml,
se dilueaz cu 20 ml de ap apoi se adaog 300 mg de PVPP. Se agit periodic timp de 20 minute,
se aduce la cot apoi se filtreaz printr-un filtru din hrtie plisat.
Se preleveaz 10 ml de vin diluat (tratat sau nu n prealabil cu PVPP) i se introduc n
coloana de anionit pregtit conform p. 4.1. Se trece prin coloan cu un debit ce nu depete 2
ml/min.Cnd nivelul vinului diluat atinge 5-10 mm deasupra tamponului din vat de sticl, se
adaog ap distilat i se las s treac prin coloan cu un debit de 2-3 ml/min. pn ce volumul
eluatului atinge 100 ml.
Este necesar de a verifica absena zaharurilor n eluat. Pentru aceasta, 5 ml de eluat se aduce
rapid la fierbere cu 5 ml soluie cuproalcalin. Lipsa precipitatului sau a culorii atest lipsa
zaharurilor.
4.3. Dozarea glicerinei.
4.3.1. Dozarea fotometric
ntr-un balon conic de 100 ml cu dop rodat se introduc 10 ml de eluat i se adaog succesiv 10
ml de ap distilat, apoi 10 ml de soluie 0,05 M de acid periodic. Se agit minuios i se las
pentru exact 5 minute s se oxideze, apoi se adaog succesiv : 10 ml soluie de hidroxid de sodiu
151
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1M i 5 ml de alcool (96% vol.). Se agit minuios dup adugarea fiecrui reagent. n continuare
se adaog 10 ml soluie de floroglucin. Se agit rapid i se tranvazeaz soluia n cuva
spectrofotometric (1 cm).
Culoarea violet obinut variaz rapid. Intensitatea culorii trece prin maximum la 50-60 sec.,
apoi scade. Notai valoarea maxim a absorbanei, msurat la 480 nm n raport cu aerul.
4.3.2. Trasarea curbei de etalonare
Plasai n baloane cotate de 100 ml respectiv cte 3,0 ; 4,0 ; 5,0 ;6,0 ; 7,0 i 8,0 ml soluie etalon
de glicerin. Aducei la cot cu ap distilat. Soluiile corespund, conform condiiilor descrise n
p. 4.2, concentraiilor urmtoare :
3,75 5,00 6,25 7,50 8,75 i 10,00 g/l de glycerin.
Efectuai msurrile absorbanei conform condiiilor descrise n p. 4.3.1, nlocuind eluatul de
fiecare dat cu soluia etalon respectiv. Dreapta de etalonare nu trece prin origine.
4.4. Dosarea butan-2,3-diolului
4.4.1. Dozarea fotometric
ntr-un balon conic de 100 ml dop rodat se introduc 20 ml de eluat i se adaog succesiv 5 ml
de soluie de acetat de sodiu, apoi 5 ml de soluie 0,1M de acid periodic. Se agit minuios i se
las pentru exact 2 minute s se oxideze, apoi se adaog succesiv : 5 ml soluie de
nitropentacianoferrat II (nitroprusiat) i 5 de soluie de piperidin.
Se agit rapid i se
tranvazeaz soluia n cuva spectrofotometric (1 cm).
Culoarea violet obinut variaz foarte rapid. Intensitatea culorii trece prin maximum la 30-40
sec., apoi scade. Notai valoarea maxim a absorbanei, msurat la 570 nm n raport cu aerul.
4.4.2. Trasarea curbei de etalonare
Introducei 10,0 ml soluie etalon de butan-2,3-diol ntr-un balon cotat de 100 ml i aducei la
cot cu ap distilat. Apoi pregtii soluiile de lucru, introducnd n baloane cotate cu volumul de
100 ml volumele respective din soluia pregtit : 2,0 4,0 6,0 8,0 i 10,00 ml. Aducei la
cot cu ap distilat.
Soluiile corespund, conform condiiilor descrise n p. 4.2, concentraiilor urmtoare :
0,25 0,50 0,75 1,00 et 1,25 g/l de butan-2,3-diol.
Efectuai msurrile absorbanei conform condiiilor descrise n p. 4.4.1, nlocuind eluatul de
fiecare dat cu soluia etalon respectiv. Dreapta de etalonare nu trece prin origine.
5. Calculul i exprimarea rezultatelor

5.1. Glicerina
5.1.1. Modul de calcul
Valoarea coninutului de glicerin se determin din curba de etalonare. Rezultatul se exprim n
g/l cu o zecimal.
5.2. Butan-2,3-diolul
152
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Valoarea coninutului de Butan-2,3-diol se determin din curba de etalonare. Rezultatul se

exprim n g/l cu dou zecimale.
6. Titrarea Periodimetric a glycerinei i butan-2,3-diolului

6.1. Reactivi
Soluie de hidroxid de sodiu 1 M
Soluie de acid sulfuric 0,5 M
Soluie de acid periodic 0,025 M
Soluie de hidrogenocarbonat de sodiu, NaHCO3 de 8% (m/v).
Soluie de arsenit de sodiu 0,025 M.
ntr-un balon cotat de 1000 ml se dizolv 2,473 g de anhidrid arsenoas (As2O3) cu 30 ml de
hidroxyd de sodiu 1 M, se adaog 35 ml de acid sulfuric 0,5 M i se aduce la cot cu ap
distilat.
Soluie de iod 0,025 M.
Soluie de iodur de potassiu de 10% (m/v).
Soluie de amidon de 2% (m/v).
6.2. Modul de lucru
ntr-un balon conic de 300 ml se plaseaz :
5 ml din soluia probei de glicerin (p.3.15); 45 ml de ap distilat, sau 25 ml din soluia probei
de butan-2,3-diol (3.16) i 25 ml de ap distilat. Apoi se adaug :
20 ml soluie de acid periodic 0,025 M, se las pentru 15 minute (agitnd din timp n timp) ;
Apoi : 10-20 ml de soluie hidrogenocarbonat de sodiu,
20 ml de soluie de arsenit de sodiu, dup care se las pentru 15 minute (agitnd din timp n timp).
Apoi : 5 ml soluie de iodur de potassiu, 2 ml soluie de amidon.
Ulterior se titreaz excesul de arsenit de sodiu cu soluia de iod 0,025 M.
n paralel se efectueaz o titrare oarb, folosind 50 ml de ap distilat i aceleai cantiti de
reageni.
6.3. Modul de calcul
6.3.1. Glicerina :
1 ml de acid periodic 0,025 M oxideaz 1,151 mg de glicerin. Coninutul glicerinei n soluia
(3.15) va fi (g/l):
( X B).1,151
G=
Coninutul n % a glicerinei n proba de glicerin (3.1) este:

G
100 , unde:
2,5
X = ml soluie de iod 0,025 M, consumai pentru soluia de glicerin (3.15) ;
B = ml soluie de iod 0,025 M, consumai pentru titrarea oarb ;.
a = ml soluie de glicerin folosit (3.15) ( egal cu 5 ml).
153
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.3.2. Butan-2,3-diol
1 ml de acid periodic 0,025 M oxideaz 2,253 mg de butan-2,3-diol. Coninutul de 2,3-butandiol
(g/l) a soluiei (3.16.) va fi :
( X 1 B 1 ).2,253
BD =
b
Coninutul n % a butan-2,3-diolului n proba (3.2) este :
BD
100 , unde
2,5
X = ml soluie de iod 0,025 M, consumai pentru soluia de butan-2,3-diol (3.16) ;
B = ml soluie de iod 0,025 M, consumai pentru titrarea oarb ;.
B = ml soluie de butan-2,3-diol (3.16) folosit (egal cu 25 ml).
2.20.2 MA-F-AS312-05-GLYENZ
1.
PRINCIPIUL METODEI (METODA UZUAL)
Glicerochinaza (GK) catalizeaz cu adenozin-5, -trifosfatul (ATF) phosphorylation du

glicerol n glycerol-3-fosfat (1) :
GK
Glicerina + ATF
glicerol-3-fosfat + ADF
(1)
Adenozin-5, -fosfatul (ADF) format din nou este transformat de fosfoenol-piruvat (FEP)
n ATF n prezena piruvat-khinazei (PK) cu formarea de piruvat (2)
PK
ADF + FEP
ATF + piruvat
(2)
Piruvatul este redus n lactate de nicodinamid-adenin dinucleotid redus (NADN) n
prezena lactate-dehidrogenazei (LDH) (3):
LDH
piruvat + NADN + H+
lactate + NAD +
(3)
Cantitatea format de NAD + n timpul reaciei este proporional cu cantitatea de glicerin.
Oxidarea NADN este msurat prin diminuarea extinciei la lungimea de und 334 nm, 340
nm i 365 nm.
3. APARATE
2.1
Spectrofotometru de absorbie atomic, care permite de a efectua msurrile la
lungimea de und 340 nm, maximum de absorbie a NADN.
n lipsa spectrofotometrului fotometru cu spectru discontinuu, care permite de a efectua
msurrile la lungimea de und 334 nm i 365 nm.
2.2 Cuv de sticl cu grosimea stratului de 1 cm sau cuve de folosin unic.
154
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Micropipete care permite prelevarea unui volum de la 0,02 pn la 2,0 ml.

4. REACTIVI
3.1 Soluie tampon (glicilglicin 0,75 M, Mg 2+ 10-3 M, pH-7,4): Se dizolv 10,0 g de

glicilglicin i 0,25 g sulfat de magneziu, Mg SO4 7H2 O n aproximativ 80 ml de ap bidistilat;
se adaug n jurul a 2,5 ml de Na OH (5M) pentru a obine un pH de 7,4, i se aduce la
volumul de 100 ml. Aceast soluie poate fi pstrat pn la trei luni la temperatura de +40 C.
3.2 (NADN 8,2 10-3 M, ATF 33 10-3 M, FEP 46 10-3 M)
Se dizolv:
42 mg nicotinamid-adenin-dinucleotid redus-Na2,
120 mg adenozin-5, -fosfat, Na2 H2,
60 mg fosfoenolpiruvat, Na i
300 mg hidrogenocarbonat de sodiu (NaHCO3) n 6 ml de ap bidistilat.
Aceast soluie poate fi pstrat pn la 2-3 zile la temperatura de +40 C.
3.3 Piruvat-kinaz/lactat-dehidrigenaz (PK/LDN)
(PK 3 mg/ml, LDN 1 mg/ml)
Se utilizeaz suspenzia fr diluare.
Amestecul poate fi pstrat pn la 1 an la temperatura de +40 C.
3.4 Clicerochinaza (GK 1 mg/l)
Suspenzia poate fi pstrat pn la 1 an la temperatura de +40 C.
Not. Toi reactivii necesari pentru determinarea glicerinii snt disponibili n comer.
4. PREGTIREA PROBEI
ntr-un balon cotat cu capacitatea de 20 ml se iau 1 ml de vin, 2 ml soluie 3.3 i se aduce

la semn cu ap distilat. Vinul diluat 1/20 conine 5 g lantan la litru
Determinarea glicerinei n general se efectueaz direct n vinul diluat cu ap bidistilat n aa
fel ca concentraia glicerinei s se situieze ntre 30 i 500 mg/l. (cantitatea de glicerin luat n
prob s fie cuprins ntre 3 i 50 g). Factorul de diluie 50 (2 ml n 100 ml) n general esre
suficient.
5. MSURAREA.
La spectrofotometru se selecteaz lungimea de und de 340 nm . Msurrile absorbanei se

efectueaz n cuve din sticl optic cu lungimea stratului de 1 cm. Absorbana zero se regleaz n
comparaie cu aerul (cu cuv din sticl optic).
n cuve din sticl optic de 1 cm se iau:
Martor
Proba
Soluia 3.1
Soluia 3.2
Proba
Ap
Suspenzie 3.3
1,00 ml
0,10ml
2,00 ml
0,01 ml
1,00 ml
10,10 ml
0,10 ml
1,90 ml
0,01 ml
155
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Se amestec, aproximativ dup 5 minute se citete absorbana (A1). Se declaneaz reacia

adugnd:
Suspenzia 3.4
0,01 ml
0,01ml
Se amestec, se ateapt sfritul reaciei (aproximativ 5 -10 minute) i
se citete
absorbana soluiilor (A2). Dac reacia nu s-a terminat dup 10 minute, se citete absorbaa din
2 n dou minute pn nu se constat o descretere constant timp de 2 minute.
Se determin diferena absorbanei A2 - A1 pentru martor i pentru prob.
Se calculeaz diferena absorbanei pentru martor ( Am) i pentru prob ( Ap) i se
stabilete:
A = ( Ap) - ( Am)
6 EXPRIMAREA REZULTATELOR
6.1 Calculul
Concentraia n grame la litru se calculeaz cu formula general:
C=
V
V
GM
d
V x GM
------------------------- x
x d x v x 1000
volumul testului n ml (aici 3,12 ml);

volumul probei n ml ( aici 0,1 ml);
greutatea molecular a substanei determinate (aic glicerina = 92,1)
lungimea stratului cuvei ( aici 1 cm)
coeficientul de absorbie al NADN ls 340 nm:
= 6,3 (mmol -1 x 1 x cm -1)

Se obine:
C = 0,456 x A x F
F- factorul de diluare
Not:
- pentru msurrile efectuate la 334 nm,
= 6,2 (mmol -1 x 1 x cm -1)
C = 0,463 x A x F
- pentru msurrile efectuate la 365 nm,
= 3,4 (mmol -1 x 1 x cm -1)
C = 0,845 x A x F
156
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.21 Fierul
2.21.1. MA-MD-AS322-05-FER
Metoda de referin
Dup diluarea corespunztoare a vinului i eliminarea alcoolului, fierul este determinat direct
prin spectrofotometria de absorbie atomic.
Metoda obinuit
Dup mineralizarea vinului cu ap oxigenat , form bivalen a Fe (II), se determin
datorit culorii roii care o formeaz cu ortofenantrolina.
2.1 Aparatura
Evaporator rotativ, cu baie c reglaj termostatic.
Spectrometru de absorbie atomic, nzestrat cu arztor aer-acetilen.
Lamp cu catod tubular pentru fier.
2.2. Reactivi
Soluie etalonconcentrat de fier fier (III) de 1 g / l.
Se utilizeaz soluie etalon cu concentraia de fier de (1 g/l) din comer. Aceast soluie
poate fi preparat prin dizolvarea a 8,6341 g de sulfat de fier (III) i amoniu
[FeNH4(SO4)2
12H 2O] n ap distilat, acidulat uor cu acid clorhidric de 1M, i adus la volumul de 1 litru.
Soluie etalon diluat, de fier de 100 mg/l.
2.3. Modul de lucru
2.3.1. Pregtirea probei
Se elimin alcoolul din vin prin concentrarea volumului probei la jumtate din volumul iniial
utiliznd un evaporator rotativ (50-60 C). Se readuce pn la volumul iniial cu ap distilat.
Dac este cazul, se dilueaz nainte dedeterminare.
2.3.2. Calibrarea
ntr-un set de baloane cotate de 100 ml se iau 1, 2, 3, 4 i 5 ml soluie de fier de 100 mg/l i
se aduce pn la 100 ml cu ap distilat. Soluiile astfel preparate conin 1, 2, 3, 4 i 5 mg/l fier.
Soluiile preparate se pstreaz n flacoane de polietilen.
2.3.3. Determinarea
Se selecteaz lungimea de und 248,3 nm. Se regleaz pe scara absorbanei valoarea zero
cu ap distilat. Se aspir proba diluat direct n arztorul spectrofotometrului, urmat succesiv
de cele cinci soluii etalon (punctul 2.3.2). Se citesc valorile absorbanei. Msurrile se
efectueaz n dou repetri. .
157
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.21.1. MA-MD-AS322-05-FER

Se traseaz curba de calibrare - absorbana n funcie de concentraia de fier n soluiile
etalon. Se raporteaz pe aceast curb valoarea medie a absorbanei vinului diluat i se determin
concentraia de fier C.
Concentraia de fier n mg /l n vin se calculeaz cu formula
F x C,
n care F - factorul de diluare.
Calculul se efectueaz pn la zecimale.
2.21.2. GOST 30178-96

2.21.3. GOST 13195-73
158
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.22 CUPRUL
2.22.1. MA-MD-AS322-06-CUIVRE
Metoda se bazeaz pe utilizarea spectrofotometriei de absorbie atomic.

2. APARATURA
Capsul de platin.
Spectrofotometru de absorbie atomic.
Lamp catodic pentru cupru.
Surse de gaz: aer-acetilen sau oxid nitros/acetilen.
3. REACTIVI
. Cupru metalic.
Acid nitric, concentraie 65 %, HNO3, 20 = 1,38 g/ml.
Acid nitric diluat 1:2 (v/v).
3.4. Soluie coninnd cupru 1 g/l.
Se utilizeaz o soluie standard de cupru. Aceast soluie poate fi preparat prin cntrirea a
1,000 g cupru metalic i transferarea, fr pierderi, ntr-un balon cotat de 1 000 ml. Se adaug
acid nitric diluat 1:2 (punctul 3.3) n cantitate suficient pentru dizolvarea metalului, 10 ml acid
nitric concentrat (punctul 3.2) i se completeaz pn la cot cu ap bidistilat.
3.5. Soluie coninnd cupru 100 mg/l.
Se introduc 10 ml de soluie, preparat corespunztor punctului 3.4, ntr-un balon cotat de 100 ml
i se completeaz pn la cot cu ap bidistilat.
4. METODA DE LUCRU
4.1. Pregtirea probei i determinarea cuprului

Dac este necesar, se prepar o soluie diluat corespunztor cu ap bidistilat.
4.2. Calibrarea
Se pipeteaz 0,5, 1 i 2 ml de soluie de la punctul 3.5 (100 mg Cu per litru) ntr-un balon
cotat de 100 ml i se completeaz volumul cu ap bidistilat; soluia astfel obinut conine 0,5, 1
i 2 mg de cupru per litru.
4.3. Se msoar absorbia la 324,8 nm. Se regleaz valoarea zero cu ap bidistilat. Se
msoar direct absorbia soluiilor standard successive preparate la punctul 4.2. Se execut dou
determinri pentru fiecare soluie.

Se traseaz un grafic al variaiilor absorbiei n funcie de concentraiile
de cupru n soluiile standard.
159
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.22.1. MA-MD-AS322-06-CUIVRE
Utiliznd absorbia msurat a probelor, se citete concentraia C, n mg/l, de pe curba de

calibrare. Dac F este factorul de diluare, concentraia cuprului prezent este dat, n miligrame
per litru, de F C. Se noteaz cu dou zecimale.
Note:
(a) Pentru curba de calibrare i a diluiilor probei, se aleg soluiile corespunztoare sensibilitii
aparatului utilizat i concentraiei cuprului prezent n prob.
(b) Cnd se prevd concentraii de cupru foarte sczute n proba analizat, se procedeaz dup
cum urmeaz. Se pun 100 ml de prob
2.22.2. GOST 30178-96

2.22.3. GOST 26931-86
2.22.4. SM GOST R 51301-2003
160
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.23 ZINCUL
2.23.1. MA-MD-AS322-08-ZINCUL
1 PRINCIPIUL METODEI
Dup nlturarea alcoolului, zincul se determin direct n vin prin spectrofotometria de

absorbie atomic.
2 REACTIVI
Apa utilizat n aparate din sticl borosilicat trebuie s fie bidistilat sau cu un grad echivalent
de puritate.
Soluie standard coninnd 1 gram de zinc la litru: se utilizeaz o soluie de zinc standard, din
comer. Aceast soluie poate fi preparat dizolvnd 4,3975 g de sulfat de zinc (ZnSO4 7H2O) n
ap i completnd volumul pn la un litru.
Soluie standard diluat ce conine 100 mg zinc per litru.
3. APARATURA
Evaporator rotativ, cu baie de ap controlat termostatic.

Spectrometru de absorbie atomic echipat cu arztor aer-acetilen.
Lamp catodic pentru zinc.
4. METODA DE LUCRU
Se nltur alcoolul din 100 ml de vin prin reducerea volumului probei la jumtate din volumul
iniial utiliznd un evaporator rotativ (50-60 C). Se completeaz volumul iniial de 100 ml cu ap
bidistilat.
4.2. Calibrarea
Se pun 0,5, 1, 1,5 i 2 ml de soluie coninnd 100 mg zinc per litru (punctul 2.2) n fiecare
balon cotat dintr-un set de 100 ml i se completeaz pn la cot cu ap bidistilat. Soluiile astfel
preparate conin 0,5, 1, 1,5 i 2 mg de zinc per litru.
4.3. Determinarea
Se regleaz lungimea de und la 213,9 nm. Se regleaz absorbia la zero utiliznd ap
bidistilat. Se aspir vinul direct n arztorul spectrofotometrului, urmat succesiv de cele patru
soluii standard. Se citesc valorile absorbiei. Se repet fiecare msurtoare.
.

Se traseaz graficul variaiei absorbiei n funcie de concentraia de zinc din soluiile
standard. Se noteaz pe grafic valoarea medie a absorbiei obinut cu proba de vin diluat i se
determin concentraia de zinc, cu precizie de o zecimal.
161
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.23.2. GOST 30178-96

2.23.3. SM GOST R 51301-2003
162
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.24 CADMIUL
2.24.1. MA-MD-AS322-10-CADMIU
Cadmiul se determin direct n vin prin spectrofotometrie de absorbie atomic fr flacr .

2. APARATURA
Toat aparatura din sticl trebuie splat nainte de utilizare n acid azotic concentrat, nclzit
la temperature de 70-80 C, i cltit cu ap bidistilat.
Spectrofotometru de absorbie atomic nzestrat cu un cuptor de grafit, corector de linie de
baz (liniei de referin) i multi-poteniometru.
Lamp cu catod tubular pentru cadmiu.
Micropipete de 5 l, dotate special pentru determinarea absorbiei atomice.
3. REACTIVI
Apa utilizat trebuie s fie bidistilat n aparat din sticl borosilicat sau ap de puritate
similar.
Toi reactivii trebuie s aib calitatea analitic recunoscut i, n special, s nu conin
cadmiu.
Acid fosforic 85 % (20 = 1,71 g/ml).
Soluie de acid fosforic obinut prin diluarea a 8 ml de acid fosforic cu ap, pn la 100 ml.
Soluie de sare disodic a acidului etilendiaminotetraacetic de 0,02 M (EDTA).
Soluie tampon pH 9: ntr-un balon cotat de 100 ml, se dizolv 5,4 g clorur de amoniu n
civa mililitri de ap, se adaug 35 ml de soluie de hidroxid de amoniu (20 = 0,92 g/ml) diluat
la 25 % (v/v) i se aduce la semn cu ap.
Eriocrom negru T: 1 % (m/m) soluie solid n clorur de sodiu.
Sulfat de cadmiu (3CdSO4 8H2O).
Titrul sulfatului de cadmiu trebuie verificat utiliznd urmtoarea metod: Se cntresc exact
102,6 mg de prob de sulfat de cadmiu, se trec cantitativ ntr-un vas cilindric cu puin ap , se
agit pn la dizolvare; se adaug 5 ml de soluie tampon pH 9 i aproximativ 20 mg de eriocrom
negru T. Se titreaz cu soluia de EDTA pn cnd indicatorul ncepe s vireze n albastru.
Volumul de EDTA adugat trebuie s fie de 20 ml. Dac volumul este puin diferit, se
corecteaz n mod corespunztor greutatea sulfatului de cadmiu utilizat pentru prepararea soluiei
de referin.
Soluie de referin de cadmiu, 1 g / l.
Se utilizeaz o soluie standard din comer. Aceast soluie poate fi obinut prin dizolvarea a
2,2820 g de sulfat de cadmiu n ap i completare pn la un litru. Soluia se pstreaz ntr-un
recipient de sticl borosilicat cu dop rodat .
163
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.24.1. MA-MD-AS322-10-CADMIU
Soluie de referin de cadmiu, 1 g / l.
Se utilizeaz o soluie standard din comer. Aceast soluie poate fi obinut prin
dizolvarea a 2,2820 g de sulfat de cadmiu n ap i completare pn la un litru. Soluia se
pstreaz ntr-un recipient de sticl borosilicat cu dop rodat .
4. MOD DE LUCRU

Se dilueaz vinul 1:2 (v/v) cu soluiae de acid fosforic.
4.2. Prepararea soluiilor pentru domeniul de calibrare
Utiliznd soluie de referin de cadmiu, se prepar prin diluare succesiv soluii de 2,5, 5,
10 i 15 g /l de cadmiu.
4.3. Determinarea
Programarea cuptorului (doar cu caracter orientativ):
Uscarea la 100 C
timp de 30 de secunde.
Mineralizarea la 900 C
timp de 20 de secunde.
Atomizarea la 2 250 C
timp de 2-3 secunde.
Fluxul de azot (gazul de antrenare):
6 litri/minut.
Not:
La finalul operaiei (analizei) se ridic temperatura la 2 700 C pentru curirea cuptorului.
Determinarea absorbanei atomice:
Se selecteaz lungimea de und 228,8 nm. Se regleaz valoarea zero pe scara absorbaniei cu
ap bidistilat. Cu micropipeta se injecteaz n cuptor trei alicote de 5 l din fiecare soluie din
domeniul de calibrare i din soluia de analizat. Se nregistreaz valorile absorbanei msurate. Se
calculeaz valoarea medie a absorbanei din rezultatele celor trei alicote.
5.1. Mod de calcul

Se traseaz curba de etalonare absorbana n funcie de concentraia de cadmiu din soluiile
din domeniul de calibrare. Variaia este liniar. Se raporteaz pe curba de etalonare valoarea
medie a absorbanei soluiei probei i se citete concentraia de cadmiu C.
Concentraia de cadmiu, exprimat n micrograme pe litru de vin, este egal cu: 2 C.
2.24.2. GOST 30178-96

2.24.2. SM GOST R 51301-2003
164
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.25 Plumbul
2.25.1. MA-MD-AS322-11-PLOMB
1. PRINCIPIUL
Plumbul este determinat direct n vin utiliznd spectrofotometria de absorbie atomic fr

flacr.
2. APARATURA
Toat aparatura de sticl trebuie splat naintea utilizrii cu acid nitric concentrat nclzit la
70-80 C i cltit cu ap bidistilat.
Spectrofotometru de absorbie atomic echipat cu cuptor de grafit, corector de absorbie
nespecific i un multi-poteniometru.
Lamp catodic pentru plumb.
Micropipete de 5 l cu vrfuri speciale pentru determinarea absorbiei atomice.
3. REACTIVI
Toi reactivii trebuie s aib calitatea recunoscut de reactivi analitici i, n special, s fie
lipsii de plumb. Apa utilizat trebuie s fie bidistilat utiliznd aparatur din sticl borosilicat sau
ap de puritate echivalent.
Acid fosforic 85 % (20 = 1,71 g/ml).
Soluie de acid fosforic obinut prin diluarea a 8 ml de acid fosforic cu ap, pn la 100 ml.
Acid nitric (20 = 1,38 g/ml).
Soluie de plumb 1 g pe litru.
Se utilizeaz o soluie standard de calitate comercial. Aceast soluie poate fi obinut prin
dizolvarea a 1,600 g de nitrat de plumb (II), Pb(NO3)2 n acid nitric la 1 % (v/v) i completat
pn la un litru. Soluia se pstreaz ntr-un flacon de sticl borosilicat, cu dop de sticl lefuit.
4. METODA DE LUCRU
Se dilueaz vinul 1:2 sau 1:3 cu soluie de acid fosforic, funcie de concentraia de plumb
presupus.
4.2. Pregtirea gradului de calibrare a soluiilor
Utiliznd o soluie pentru domeniul plumbului, se pregtesc soluii succesive cu titruri de 2,5,
5, 10 i 15 g plumb la litru prin diluarea cu ap bidistilat.
4.3. Determinarea
Programarea cuptorului (doar cu caracter orientativ):
Uscare la 100 C timp de 30 de secunde
Mineralizare la 900 C timp de 20 de secunde
Atomizarea la 2 550 C timp de 2-3 secunde
Flux de azot (gazul de antrenare): 6 litri/minut.
Not: La finalul procedurii, se ridic temperatura la 2 700 C pentru curarea cuptorului.
165
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.25.1.
MA-MD-AS322-11-PLOMB
4.3.2. Determinri
Se regleaz lungimea de und la 217 nm. Se regleaz scala absorbiei la zero cu ap
bidistilat. Utiliznd o micropipet, se introduc n cuptorul programat trei alicote de 5 l din
fiecare soluie din intervalul de calibrare i din soluia prob analizat. Se noteaz valorile
absorbiei msurate. Se calculeaz valoarea medie a absorbiei din rezultatelepentru cele trei
alicote.
Se traseaz curba variaiei absorbiei n funcie de concentraiile de plumb n intervalul de
calibrare. Variaia este liniar. Se plaseaz valoarea medie a absorbiei soluiei prob, pe curba de
calibrare, derivnd din aceasta concentraia de plumb C. Concentraia de plumb, exprimat n
micrograme pe litru de vin, este egal cu:
C F,
unde
F = factorul de diluare.
2.25.2. GOST 30178-96

2.25.3. SM GOST R 51301-2003
166
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.26 Arseniul
2.26.1 MA-MD-AS323-01-ASSAA
Prin spectrometrie de absorbie atomic, cu formare de hidrur dup evaporarea alcoolului
etilic i reducerea arseniului V n arseniu III
2. APARATE
2.1. Vesel:
Baloane cotate de 50, 100 ml (clasa A)
Pipete gradate de 1.5.10.25 ml (clasa A)
Baie de ap la 100 0 C
Filtre fr cenu
2.2. Spectrofotometru:
Spectrofotometru de absorbie atomic
Parametri instumentali:
flacr oxidant aer-acetilen
lamp cu catod tubular pentru arseniu
lungimea de und : 193,7 nm
limea fantei (fisurii) : 1 nm
intensitatea lmpii cu catod tubular : 7 mA
corecia absorbiei nespecifice cu lamp de deuterium
2.3 Accesorii (Piese auxiliare):
Celul de absorbie a hidrurii , plasat pe arztor aer-acetilen
Generator de vapori ( separator gaz-lichid)
Gaz neutru (argon)
Figura 1 Generator de hidrur
3. REACTIVI
3.1 Ap demineralizat ultra-pur
3.2 Acid azotic de 65%, ultra-pur
3.3 Iodur de potasiu KI
3.4 Iodur de potasiu de 10 %, (m/v)
3.5 Acid clorhidric concentrat (R)
3.6 Acid clorhidric de 10 % (R)
3.7 Borohidrur de sodiu Na B H4
3.8 Hidrohid de sodiu Na OH
3.9 Borhidrur de sodiu de 0,6 % (coninutul de hidroxid de sodiu 0,5 % (m/v))
3.10 Clorur de calciu CaCl2 (se utilizeaz ca deshidratant (sicativ))
3.11 Soluie pur de arseniu de 1 g/l:
Se dizolv 1,5339 g de As2 O5 ntr-un litru de ap demineralizat.
3.12 Soluie de arseniu de 10 mg/l:
Se ia 1 ml de soluie pur (3.11) ntr-un balon de 100 ml (2.1.1);
167
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.26.1 MA-MD-AS323-01-ASSAA
se adaug 1 % de acid azotic (3.2), se aduce la semn cu ap demineralizat (3.1).

3.13 Soluie de arseniu de 100 g/l:
Se ia 1 ml de soluie de arseniu de 10 mg/l (3.12) ntr-un balon de 100 ml (2.1.1);
se aduce la semn cu ap demineralizat (3.1).
3.14 Soluii pentru etalonare: 0, 5, 10, 25 g/l
Se iau succesiv 0, 5, 10, 25 ml soluie de arseniu de 100 g/l (3.13) n patru baloane de 100
ml (2.1.1); se adaug n fiecare balon 10 ml iodur de potasiu de 10 % (3.4) i 10 ml de acid
clorhidric concentrat (3.5); se las n repaus timp de 1 or, se aduce la semn cu ap
demineralizat.
4 PREGTIREA PROBELOR
25 ml de vin se evapor pe baie de ap la 100 0 C i se readuce la 50 ml n prezena

a 5 ml iodur de potasiu de 10 % i 5 ml acid clorhidric concentrat ; se las n repaos timp de
1 hor; se filtreaz printr-un filtru fr cenu.
Paralel se pregtete o soluie martor.
5 MSURAREA
Pompa peristaltic aspir soluia de borohidrur, soluia de acid clorhidric de 10 % i

etalonul sau proba.
Succesiv se aspir soluiile pentru etalonare (3.14); se citete absorbana timp de 10
secunde;
se efectuaz dou repetri; aparatul stabilete curba de etalonare (absorbana n dependen
de concentraia de arseniu n g/l ).
Se aspir probele (4); aparatul d concentraia de arseniu n probe n g/l; se calculeaz
concentraia de arseniu n probe lund n consideraie factorul de diluare .
2.26.2. GOST 26930-86

2.26.3. GOST R 51766-2001
168
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.27. Mercurul sau Hidrardiul

2.27.1 MA-MD-AS323-06-MERCUR
1. DOMENIUL DE APLICAREA
Metoda se utilizeaz pentru determinarea mercurului n vin cu concentraia 0-10 g/l

2. DESCRIEREA METODEI
2.1. Principiul metodei

2.1.1.Mineralizarea vinului se efectueaz n mediu acid, prin nclzire n reflux. Mineralizarea se
finalizeaz cu permanganat de potasiu.
2.1.2 Reducerea permanganatului n exces cu clorghidrat-hidroxilamina
2.1.3. Reducerea mercurului II pn la mercur metalic cu clorur de staniu II.
2.1.4. Antrenarea mercurului cu un curent de argon, la temperatura mediului ambiant.
2.1.5. Determinarea mercurului n stare de vapori monoatomici prin spectrofotometriede
fluorescen atomic, la lungimea de und de 254 nm: atomii de mercur sunt excitai de o lamp
de vapori de mercur; atomii astfel excitai emit o radiaie fluorescent care permite determinarea
mercurului prezent cu ajutorul unui detector fotonic situat sub un unghi de 90 n raport cu
fluxul de excitare ; determinarea prin fluorescen atomic permite de a obine o linearitate
suficient i exclude efectul de memorie.
2.2 Principiul analizei ( figura Nr.1)
2.2.1. Pompa perestaltuic aspit soluia de clorur de etan II, referina (ap demineralizat ce
conine 1 % de acid azotic) i etalonul sau proba de vin mineralizat.
Mercur este antrenat ntr-un separator gaz-lichid cu ajutorul unuicurent de argon.
Dup deplasarea printr-o capsul a unui usctor, mercurulse determin prin fluorescen.
Apoi, pentru a antrena mercurul, curentul gazos trece o soluie de permanganat de potasiu .
3. REACTIVI I PREPARAREA SOLUIILOR DE REACTIVI
3.1 Ap demineralizat ultra-pur.

3.2 Acid azotic ultra-pur de 65%
3.3 Blanc
Ap demineralizat (3.1) cu coninut de acid azotic 1% (3.2)
3.4 Soluie de acid azotic de 5,6 M :
ntr-un balon de 1000 ml se iau 400 ml acid azotic (3.2); Se completeaz cu ap
demineralizat (3.1).
169
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Membran
hidroscopic
Etalonul sau proba

Valv deschis
pentru
poziionarea
probei
Debitmetru
de argon
Figura
Deversor
Detector cu
fluorescen
Separator
gaz-lichid
Nr 1 Schema analitic pentru determinarea mercurului
3.5 Acid sulfuric (d=1,84)

3.6 Soluie de acid sulfuric 9M.
ntr-un balon de 1000 ml se iau 200 ml ap demineralizat (3.1) apoi 500 ml acid sulfuric
(3.5); dup rcire se completeaz cu ap demineralizat (3.1).
3.7 Permanganat de potasiu KMnO4
3.8 Soluie de permanganat de potasiu de 5% (m/v):
ntr-un balon de 1000ml s e dizolv n ap demineralizat (3.1) 50g de permanganat de
potasiu (3.7).Volumul se completeaz cu ap dimeneralizat.
3.9 Clorhidrat de hidroxilamin NH2OH, HCl
3.10 Soluie reductoare
Se dizolv 12 g clorur de hidroxilamin (3.9) n 100 ml ap demineralizat (3.1)
3.11 Clorur de staniu II (SnCl2, 2H2O)
3.12 Acid clorhidric concentrat
3.13 Soluie de clorur de staniu II:
Se dizolv 40 g clorur de stamiu (3.11) n 50 ml de acid cloridric (3.12) ; se completeaz
cu ap demineralizat (3.1).
3.14 Soluie de baz de mercur 1 g/l,
Se prepar dizolvnd 1,708 g de Hg(NO3)2 H2O n soluie apoas de acid azotic de 12 %.
170
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.15 Soluie-etalon demercur de 10 mg/l

ntr-un balon cotat de 100 ml se ia 1 ml soluie de baz de mercur (3.14), se adaug5 ml
de acid azotic (3.2), se completeaz volumulcu ap demineralizat (3.1).
3.16 Soluie demercur de 50 g/l:
ntr-un balon de 200 ml se ia 1 ml soluie de 10 mg/l (3.15); se adaug 2 ml acid azotic
(3.2); se completeaz olumul cuap demineralizat.
4. ECHIPAMENT
4.1 Vesel :
4.1.1 Baloane 100, 200 i 1000 ml (Clasa A)
4.1.2 Pipete gradate de 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 ;10 i 20 ml (Clasa A)
4.1.3 Precautii: nainte de utilizare, vesela trebuie s fie splat cu acid azotic de 10%, se
las pentru 24 de ore apoi se spal cu ap demineralizat.
4.2 Aparat pentru mineralizare (figura Nr 2)
4.3 Balon pentru nclzire cu temperatur controlat
4.4 Pompa peristaltica
4.5 Generator de abur rece
4.5.1 Separator gazo-lichid
4.6 Desicant
(Membrana higroscopic) acoperit de un curent de aer (furnizat de ctre un
compresor), i plasate nainte de detector
4.7 Spectrofluorimetru:
4.7.1 Lamp de vapori de mercur, reglat la lungimea de und de 254 nm
4.7.2 Detector specific de fluorescen atomic
4.8 Micro-computer
4.8.1 Reglarea logic a parametrilor generatorului de vapori i a detectorului de
fluorescen atomic i calibrarea i operarea rezultatelor.
4.8.2 Iimprimant pentru arhivarea rezultatelor
4.9 Butelii de gaz inert (argon)
5. PREPARAREA CURBEI DECALIBRARE I A PROBELOR
5.1 Curba de etalonare: 0, 0,25, 0,5 i 1,0 mg / l

n 4 baloane de 100 ml se iau 0, 0.5, 1.0, 2.0 ml soluie de mercur de 50 mg / l (3.16.), se
adaug acid azotic 1% (3.2). se completeaz pn la semn cu ap demineralizat(3.1.).
5.2 Pregtirea probelor (figura Nr 2)
Vinul este mineralizat ntr-un aparat de sticl Pyrex format din -trei elemente unite ntre
ele prin rodaj sferic: un balon de 250 ml; o camer de recuperare a vaporilor, un agent frigorific.
Cu ajutorul unei pipete se iau 20 ml de vin n balonul de reacie de 250 ml, se asambleaz
la aparatul de mineralizare.
Se adaug foarte ncet 5 ml de acid sulfuric (3.6.) i 10 ml de acid azotic (3.4.) ; se las pe o
noapte.
Se nclzete ncet, n reflux pn la dispariia vaporilor de azot; se las s se rceasc.
Se recupereaz vaporii condensai n n balonul de reacie. a vaporii condensate n
balonul de reacie.
171
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Se cltete aparatul cu ap demineralizat.

Se transfer coninutul balonului de reacie ntr-un balon cotat de 100 ml. Se adaug
soluie de permanganat de potasiu (3.8.) p n la o culoare persistent
Se dizolv precipitatul (MnO2) cu soluie de reducere (3.10.). Se completeaz la semn cu
ap demineralizat. (3.1.).
A face oprob blanc pe ap demineralizat.
6 MODUL DE LUCRU
6.1 Determinarea analitic

Conectai fluorometerul:aparatul se stabilizeaz n timp de 15 minute. Pompa peristaltica
aspir proba martor. (3.3.) , soluie de clorur de staniu II (3.13.) i standardele sau probele
(5.1.) sau (5.2.).
Se verific dac apare barbotarea n separatorul gaz-lichid.
Se introduce succesiv soluiilor de calibrare (5.1.) se declaneaz programa
generatorului de vapori. Software-ul de la calculator stabilete curba de etalonare (procentul de
fluorescen, n dependen de concentraia de mercur n g / l).
Apoi, introduce probele (5.2.).
Condensator sferic
Circulaia apei reci
Camera de reinere a
vaporilor
ntroducerea vinului
i a reactivilor
Balonul de reacie
(vin + acid sulfuric +
acid azotic)
Balon de nclzire
Figura .2 Aparat pentru mineralizarea vinului
172
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.2.Autocontrolul
Toate cele cinci determinri, analiz martor i standardul sunt analizate pentru a corecta
o posibil deriv a spectrofluorimetrului.
Rezultatele sunt date de programele calculatorului i exprimate n g /l. Concentraia de

mercur n vin se deduce n g / l , lund n considerare diluarea 1 / 5.
8. CONTROLUL REZULTATELOR
Controlul calitii se realizeaz prin ntroducerea dup soluiile de calibrare i a tuturor

cinci eantioanelor , un material de referin cu coninut de mercur cunoscut cu certitudine.
Material de referin este un vin rou, un vin alb sau vin alb dulce.
O hart de control se stabilete pentru fiecare material de referin folosit.
Limitele de control sunt stabilite la +/-2SR ( SR: deviaia standard a reproductibilitii).
Calculul incertitudinii efectuat folosind hrile de control a stabilit :
Vin rosu de referin:
3.4+/-0,8 g / l
Vin alb sec de referin: 2.8+/-0,9 g / l.
2.27.2. GOST 26927-86
173
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.28 Sodiul
2.28.1 MA-MD-AS322-03-SODIUM
1 PRINCIPIUL METODELOR
1.1 Metoda de referin : spectrometrie de absorbie atomic

Sodiul se determin direct n vin prin spectrometrie de absorbie atomic dup
adugarea soluiei tampon de clorur de ceziu pentru evitarea ionizrii sodiului.
1.2 Metoda obinuit : fotometrie cu flacr
Sodiul se determin prin fotometrie cu flacr direct n vinul diluat nu mai puin de 10 ori.
2 METODA DE REFERIN
2.1 Aparate
- Spectrofotometru de absorbie atomic nzestrat cu arztor cu flacr aer-acetilen
- Lamp cu catod tubular pentru sodiu.
2.2 Reactivi
2.2.1 Soluie de sodiu cu concentraia 1 g/l.
Se utilizeaz soluie standard de sodiu de 1 g/l din comer. Aceast soluie se poate prepara
dizolvnd 2,542 g de clorur de sodiu (Na Cl), uscat , ntr-un litru ap distilat.
Aceast soluie se pstreaz n flacon (butelie ) de polietilen.
2.2.2 Soluie model
3,5 g
Acid citric, (C6 H8 O7 *H2 O) ..............................................
Zaharoz
..............................................
1,5 g
Glicerin
..............................................
5,0 g
Clorur de calciu anhidr , (Ca Cl2) ...................................
50 mg
Clorur de magneziu anhidr , (Mg Cl2) ...........................
50 mg
Alcool absolut
..............................................
50 ml
Ap q.s.p
.................................................
500 ml
2.2.3 Soluie de clorur de ceziu 5 % (recalculat n ceziu)
Se dizolv 6,330 g clorur de ceziu (CsCl) n 100 ml ap distilat.
2.3 Mod de lucru
2.3.1 Pregtirea probei.
ntr-un balon cotat cu capacitatea de 50 ml se iau 2,5 ml de vin, 1 ml soluie clorur de ceziu
i se aduce la semn cu ap distilat.
2.3.2.Calibrarea
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 5 ml soluie model (2.2.2) i
0 - 2,5 -5-7,5-10 ml soluie de sodiu cu concentraia 1 g/l n prealabil diluat 1/100. n toate
baloanele se adaug 2 ml soluie de clorur de ceziu i se aduce volumul pn la 100 ml cu ap
distilat.
174
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.28.1 MA-MD-AS322-03-SODIUM
Soluiile etalon preparate conin respectiv 0-0,25-0,50-0,75-1,00 mg sodiu i 1 g ceziu la

litru. Aceste soluii se pstreaz n flacoane de polietilen.
2.3.3 Msurarea.
Se selecteaz lungimea de und de 589 nm . Pe scara absorbanei se regleaz zero cu soluia
model cu coninutul n ceziu
1 g/l. Se
aspir (absoarbe)
direct n arztorul
spectrofotometrului vinul diluat, apoi succesiv soluiile etalon.
Se noteaz absorbana.
Determinrile se repet de dou ori.
2.4.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei absorbanei n funcie de concentraia de sodiu a
soluiior etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a absorbanei obinute pentru prob i se
determin concentraia de sodiu C n miligrame pe litru.
Concentraia de sodiu , exprimat n miligrame la litru de vin (fr zecimale) va fi:
20 * C
r = 1 + 0,024 * x i, unde
xi - concentraia sodiului n prob, mg/l.
2.4.3 Reproductubilitatea (R)
R = 2,5 + 0,05 * x i, unde
3 METODA OBINUIT
3.1 Aparate
- Fotometru cu flacr alimentat cu un amestec aer-butan.
3.2 Reactivi
3.2.1 Soluie model de sodiu
Alcool absolut
..............................................
10 ml
700 mg
Zaharoz
..............................................
300 mg
Glicerin
..............................................
1000 mg
Tartrat acid de potasiu
..............................................
481,3 mg
Clorur de calciu anhidr , (Ca Cl2) ...............................
10 mg
10 mg
Clorur de sodiu uscat
.................................................
50,84 mg
Ap q.s.p.
.................................................
1l
3.2.2 Soluie pentru diluare
Alcool absolut
..............................................
10 ml
700 mg
Zaharoz
..............................................
300 mg
175
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
MA-F-AS322-03-SODIUM
Glicerin
..............................................
1000 mg
Tartrat acid de potasiu
..............................................
481,3 mg
10 mg
Clorur de magneziu anhidr, (Mg Cl2)
...........................
10 mg
Ap q.s.p.
.................................................
1l
Pentru prepararea soluiilor 3.2.1 i 3.2.2 se dizolv tartratul acid de potasiu n aproximativ
500 ml de ap fierbinte , se amestec soluia cu restul componenilor dizolvai n prealabil n
400 ml ap distilat i se aduce la volumul de 1 l.
La soluii se adaug 2 picturi de izotiocianat de etil i se pstreaz n flacon (butelie )
depolietilen.
3.3 Mod de lucru
3.3.1
Etalonarea
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 5-10-15-20-25 ml soluie de
sodiu de 20 mg/l se aduc la semn cu soluie de diluare. n aa fel se obin soluii cu coninutul de
sodiu respectiv 1-2-3-4-5 mg la litru.
3.3.2 Msurarea .
Msurrile se efectueaz la lungimea de und 589 nm . Se regleaz emisia spectral de
100 % cu ap distilat. Se aspir (absoarbe) direct n arztorul fotometrului mai nti
soluiile-etalon , apoi vinul diluat cu ap distilat n proporie 1/10 i se msoar procentul
emisiei spectrale. Dac este necesar , vinul se dilueaz n proporie 1/10 cu soluie de diluare.
3.4.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei procentului emisiei spectrale n funcie de
concentraia de sodiu a soluiilor etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a emisieu spectrale obinute pentru prob
i se determin concentraia de sodiu C.
Concentraia de sodiu , exprimat n miligrame la litru de vin (fr zecimale) va fi:
C * F , unde
F - factorul de diluare
Vinuri licoroase
r = 2,0 mg/l
Cu excep ia vinurilor licoroase r = 1,4 mg/l
R = 4,7 + 0,08 * x i, unde
2.28.2. SM EN 1134:22
176
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.29 Potasiul
2.29.1 MA-MD-AS322-02-POTAS
1 PRINCIPIUL METODELOR
1.1 Metoda de referin : spectrometrie de absorbie atomic
Sodiul se determin directn vin prin spectrometrie de absorbie atomic dup adugarea
soluiei tampon de clorur de ceziu pentru evitarea ionizrii potasiului.
1.2 Metoda obinuit : fotometrie cu flacr
Sodiul se determin prin fotometrie cu flacr direct n vinul diluat.
Not. Cntrirea tetrafenilboratului de potasiu precipitat n soluia cenuii vinului este un
procedeu obligatoriu la determinarea potasiului. El este descris n anex.
2
METODA DE REFERIN
2.1 Aparate
- Lamp cu catod tubular pentru potasiu.
2.2 Reactivi
2.2.1 Soluie de potasiu cu concentraia 1 g/l.
Se utilizeaz soluie standard de potasiu de 1 g/l din comer. Aceast soluie se poate prepara
dizolvnd 4,813 g de tartrat acid de potasiu, ntr-un litru ap distilat.
2.2.2 Soluie model
3,5 g
..............................................
1,5 g
Zaharoz
Glicerin
..............................................
5,0 g
50 mg
Clorur de magneziu anhidr , (Mg Cl2)..........................
50 mg
Alcool absolut
..............................................
50 ml
Ap q.s.p
.................................................
500 ml
2.2.3 Soluie de clorur de ceziu 5 % (recalculat n ceziu)
Se dizolv 6,330 g clorur de ceziu (CsCl) n 100 ml ap distilat.
2.3 Mod de lucru

2.3.1 Pregtirea probei.
ntr-un balon cotat cu capacitatea de 50 ml se iau 2,5 ml de vin, 1 ml soluie clorur de ceziu
(2.1.3) i se aduce la semn cu ap distilat.
2.3.2 Calibrarea
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 5 ml soluie model (2.2.2) i
0 - 2,0 -4,0-6,0-8,0 ml soluie de potasiu cu concentraia 1 g/l (n prealabil diluat 1/10), n toate
baloanele se adaug 2 ml soluie de clorur de ceziu (2.1.3) i se aduce volumul pn la 100 ml cu
ap distilat.
177
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Soluiile etalon preparate conin respectiv 0-2-4-6-8 mg de potasiu la litru 1 g de ceziu la

litru. Aceste soluii se pstreaz n flacoane de polietilen.
2.3.3 Msurarea.
Se selecteaz lungimea de und de 589,9 nm . Pe scara absorbanei se regleaz zero cu
soluia
model cu coninutul de ceziu 1 g/l. Se aspir (absoarbe) direct vinul diluat n arztorul
spectrofotometrului , apoi succesiv soluiile etalon. Se noteaz absorbana. Determinrile se
repet de dou ori.

2.4.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei absorbanei n funcie de concentraia de potasiu
a
soluiior etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a absorbanei obinute pentru prob diluat
i se determin concentraia de potasiu C n miligrame la litru.
Concentraia de potasiu , exprimat n miligrame la litru de vin (fr zecimale) va fi:
F * C , unde
F- factorul de diluie (aici 200)

r = 35 mg/l
R = 66 mg/l
2.4.4 Alte exprimri a rezultatelor:
- n miliechivaleni la litru : 0,0256 * F*C
- n tartrat acid de potasiu n miliechivaleni la litru :4,813*F*C
3 METODA OBINUIT
3.1 Aparate
- Fotometru cu flacr alimentat cu un amestec aer-butan.
3.2 Reactivi
3.2.1 Soluie de referin de 100 mg de potasiu la litru.
Alcool absolut
..............................................
Zaharoz
..............................................
Glicerin
..............................................
Clorur de sodiu uscat , (Na Cl ) ...................................
10 ml
700 mg
300 mg
1000 mg
10 mg
178
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Clorur de calciu anhidr , (Ca Cl2)

...........................
10 mg
10 mg
Tartrat acid de potasiu uscat ..............................................
481,3 mg
Ap
q.s.p
................................................. 1000 ml
3.2.2 Soluie pentru diluare
Alcool absolut
..............................................
10 ml
700 mg
Zaharoz
..............................................
300 mg
Glicerin
..............................................
1000 mg
Clorur de sodiu uscat, Na Cl ...........................................
50,8 mg
10 mg
Clorur de magneziu anhidr , (Mg Cl2)
...........................
10 mg
Tartrat acid de potasiu uscat
..............................................
383 mg
Ap q.s.p
.................................................
1000 ml
Pentru prepararea soluiilor 3.2.1 i 3.2.2 se dizolv tartratul acid de potasiu n aproximativ
500 ml de ap fierbinte , se amestec soluia cu restul componenilor dizolvai n prealabil n
400 ml ap distilat i se aduce la volumul de 1 l.
La soluii se adaug 2 picturi de izotiocianat de etil i se pstreaz n flacon (butelie )
depolietilen.
3.4 Mod de lucru

3.3.1Etalonarea
n patru baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 25-50-75-100 ml soluie de referin
i se aduc la semn cu soluie de diluare. n aa fel se obin soluii cu coninutul de potasiu
respectiv 25 50 -75-100 mg la litru.
3.3.2 Msurarea .
Msurrile se efectueaz la lungimea de und 766 nm . Se regleaz emisia spectral de
100 % cu ap distilat. Se aspir (absoarbe) direct n arztorul fotometrului succesiv
soluiile-etalon , apoi vinul diluat cu ap distilat n proporie 1/10 eme i se msoar
procentul emisiei spectrale. Dac este necesar , vinul de acum diluat se dilueaz n
proporie 1/10 eme cu soluie de diluare.
3.4.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei procentului emisiei spectrale n funcie de
concentraia de potasiu a soluiilor etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a emisiei spectrale obinute pentru prob
de vin diluat i se determin concentraia de potasiu C.
Concentraia de potasiu , exprimat n miligrame la litru de vin (fr zecimale) va fi:
C * F, unde
179
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
F - factorul de diluare
r = 17 mg/l
R = 66 mg/li
3.4.4 Alte exprimri a rezultatelor:
- n miliechivaleni la litru : 0,0256 * F*C
- n tartrat acid de potasiu n miliechivaleni la litru :4,813*F*C
ANEX
Determinarea potasiului prin cntrirea tetrafenilborurii sedimentate
1 Reactivi i materiale
1.1 Soluie de tetrafenilborur de sodiu
Se dizolv 3 g tetraborur de sodiu ntr-o cantitate de ap suficient pentru a obine 100
ml
de soluie, se adaug cteva santigrame oxid neutru de aluminiu (Al2 O3) i se filtreaz.
1.2 Soluie apoas saturat de verde de bromcrezol.
1.3 Soluie de acid sulfuric de 10 % vol.
1.4 Soluie de 1M i 0,1M hidroxid de sodiu (fr potasiu).
1.5 Soluie pentru splare. ntr-un balon cotat cu capacitatea de 1000 ml se iau 20 ml soluie
de tetrafenilborur de sodiu (1.1) i se aduce la semn cu ap distilat.
1.6 Aceton.
1.7 Baie de ap cu temperatur programabil.
1.8 Dulap de uscat cu temperatura 100-110 0 C.
1.9 Creuzet pentru filtrare cu porozitatea n0 4.
1.10 Sob electric cu temperatur reglabil.
2.29.2. SM EN 1134:22
180
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.30 Calciul
2.30.1 MA-MD-AS322-04-CALCIU
1
PRINCIPIUL METODEI
Calciul se determin direct n vinul, convinabil diluat, prin spectrometrie de absorbie

atomic dup adugarea soluiei tampon special.
2
APARATE

- Lamp cu catod tubular pentru calciu.
3
REACTIVI
3.1 Soluie etalon de calciu cu concentraia 1 g/l.

Se utilizeaz soluie standard de sodiu de 1 g/l din comer.
Aceast soluie se poate prepara dizolvnd 2,5 g carbonat de calciu (Ca CO3), ntr-o
cantitate suficient pentru dizolvare de acid clorhidric diluat 1/10 (v/v) i adus la volumul
de 1 l cu ap distilat.
Aceast soluie se pstreaz n flacon (butelie ) de polietilen.
3.2 Soluii etalon diluate de calciu cu concentraia 50 mg la litru.
Not. Soluiile etalon de calciu se pstreaz n flacoane de polietilen.
3.3 Soluie de clorur de lantan cu concentraia de 50 mg/l ( recalculat n lantan)
Se dizolv 13,369 g de clorur de lantat La Cl3 7H2O n ap distilat , se adaug 1 ml acid
clorhidric diluat 1/10 (v/v) i se aduce la volumul de 100 ml cu ap distilat.
4. MOD DE LUCRU
4.1 Pregtirea probei.
ntr-un balon cotat cu capacitatea de 20 ml se iau 1 ml de vin, 2 ml soluie 3.3 i se aduce
la semn cu ap distilat. Vinul diluat 1/20 conine 5 g lantan la litru
Not. Pentru vinurile dulci, concentraia de 5 g la litru de lantan este suficient la coninutul
de zahar 2,5 i mai puin g la litru. Pentru vinurile cu coninutul de zahr mai mare e necesar
de utilizat coninutul de lantan de 10 g la litru.
4.2 Calibrarea
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 0-5-10-15 i 20 ml soluie 3.2,
se aduce la semn cu ap distilat. Soluiile etalon preparate conin respectiv 0-2,5-5 -7,5 i 10
mg calciu i 5 g lantan la litru. Aceste soluii se pstreaz n flacoane de polietilen.
181
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.30.1 MA-MD-AS322-04-CALCIU
4.3 Msurarea.
Se selecteaz lungimea de und de 422,7 nm . Pe scara absorbanei se regleaz zero cu
soluia model cu coninutul de lantan de 5 g/l. Se aspir (absoarbe) direct n arztorul
spectrofotometrului vinul diluat, apoi succesiv soluiile etalon preparate conform p 4.2. Se
noteaz absorbana. Determinrile se repet de dou ori.
5
5.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei absorbanei n funcie de concentraia de calciu
n soluiile etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a absorbanei obinute pentru proba de vin
diluat i se determin concentraia de calciu C n miligrame pe litru.
Concentraia de calciu , exprimat n miligrame la litru de vin (fr zecimale) va fi:
20 * C

coninut < 60 g/l
coninut > 60 g/l
r = 2,7 mg/l
r = 4,0 mg/l
5.3 Reproductibilitatea (R)

R mg/l
= 0,114 x i - 0,5, unde
xi - concentraia de calciu n prob, mg/l.
2.30.2. SM EN 1134:22
182
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.31 Magneziul
2.31.1 MA-MD-AS322-07-MAGNES
Magneziul se determin prin spectrofotometrie de absorbie atomic.direct n vinul diluat

corespunztor
2
APARATE

- Lamp cu catod tubular pentru magneziu.
3
REACTIVI
3.1 Soluie etalon de magneziu cu concentraia 1 g/l.

Se utilizeaz soluie etalon de magneziu de 1 g/l din comer.
Aceast soluie se poate prepara dizolvnd 8,3646 g clorur de magneziu
(MgCl2 x 2H2O) n ap distilat aducnd volumul la 1 l.
3.2 Soluie etalon diluat de magneziu cu concentraia 5 mg la litru.
Not. Soluiile etalon de magneziu se pstreaz n flacoane de polietilen.
4. MOD DE LUCRU
4.1 Pregtirea probei.
Vinul se dilueaz n proporie de 1:100 cu ap distilat.
4.2 Calibrarea
ntr-o serie de baloane cotate cu capacitatea de 100 ml se iau 5-10-15 i 20 ml soluie 3.2, se
aduce la semn cu ap distilat. Soluiile etalon preparate conin respectiv 0,25-0,5-0,75 -1 mg
demagneziu la 1 litru.
Aceste soluii se pstreaz n flacoane de polietilen.
4.3 Msurarea.
Se selecteaz lungimea de und de 285 nm . Pe scara absorbanei se regleaz zero cu
ap distilat . Se aspir direct n arztorul spectrofotometrului vinul diluat, apoi succesiv
soluiile etalon preparate conform p 4.2.
Se noteaz absorbana; determinrile se repet de dou ori.
183
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.31.1 MA-MD-AS322-07-MAGNES
5
5.1 Calculul
Se traseaz curba de etalonare a variaiei absorbanei n funcie de concentraia magneziu
n soluiile etalon.
Se raporteaz la aceast curb valoarea medie a absorbanei obinute pentru proba de vin
diluat i se determin concentraia de magneziu C .
Concentraia de magneziu, exprimat n miligrame la litru de vin va fi:
100 x C
r = 2,7 mg/l
5.3 Reproductubilitatea (R) R = 8 mg/l
2.31.2. SM EN 1134:22
184
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.32 ACETALDEHID
2.32.1 MA-MD-AS315-01-ETHANA
Etanalul (Aldehida acetic) se determin din vinul decolorat cu crbune activ datorit culorii
care variaz de la verde la violet , care o formeaz cu nitro pentacianoferatul II de sodiu i
piperidina. Intensitatea culorii formate se msoar la 570 n.
2 APARATURA
Spectrofotometru care permite msurarea absorbanei la lungimea de und la 570 n n

cuve cu drumuloptic de 1 cm.
3
REACTIVI
3.1 Soluie de piperidin (C5H11N) 10 p. 100 (v/v)

Se prepar naintea fircrei determinri amestecnd 2 ml de piperidin cu 18 ml
distilat.
ap
Soluie de nitroprusiat de sodiu de 0,4 p 100.

ntr-un balon cotat de 250 ml se dizolv 1 g de praf nitroprusiat de sodiu, Na2 [ Fe (CN)5
NO] 2H2O.Se completeaz cu ap distilat.
3.3. Crbune activ
3.4 Acid clorhidric diluat 25p 100 (v/v), (aproximativ 102 g/l)
3.5 Soluie alcalin
Se dizolv 8,75 g acid boric n 400 ml soluie molar M de hidroxid de sodiu. Se
completeaz pn la 1 l cu ap distilat.
4. MODUL DE LUCRU
4.1 Determinarea
ntr-un balon conic de 100 ml se iau aproximativ 25 ml de vin, se adaug 2 g de crbune
activ. Se amestec energic timp de cteva secunde, se las n repaus 2 minute, se filtreaz printrun filtru gofrat pentru a obine un filtrat limpede.
ntr-un balon conic de 100 ml se iau 2 ml de filtrat incolor , agitnd se adaug 5 ml de
nitroprusiat de sodiu i 5 ml soluie de piperidin, se amestec i imediat se trece n cuva
spectrofotometrului cu drumul optic de 1 cm. Culoarea obinut care variaz de la verde la violet
se msoar n raport cu un drum echivalent de aer la lungimea de und de 570 n . Aceast
culoare crete ca apoi rapid s scad. Se ia ca valoare final a absorbanei, valoarea maximal
obinut dup aproximativ 50 secunde.
Coninutul de etanal n lichidul analizat se citete de pe curba de etalonare.
Not. n czuri excepionale, dac n lichidul analizat se conine etanal liber e necesar n prealabil
de a-l lega cu dioxidul de sulf.n acest scop n lichidul de analizat se adaug un surplus de dioxid
de sulf i se las pe cteva ore nainte de determinare.
185
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.32.1 MA-MD-AS315-01-ETHANA
4.2
Stabilirea curbei de etalonare
4.2.1 Soluie etalon de baz de acetaldehid combinat cu dioxid de sulf.

Se prepar o soluie de 5-6 % de dioxid de sulf i i se determin concentraia
titrnd cu o soluie de iod de 0,05M.
exact
ntr-un balon cotat de 1 l, se ia un volum de aceast soluie care corespunde la 1500 mg de

dioxid de sulf. Se ntroduce n balon cu ajutorul unei plnii apoximativ 1 ml de etanal proaspt
distilat i colectat ntr-un vas rcit. Volumul se completeaz pn la 1l i se las n repaos pe o
noapte.
Coninutul exact a etanalului combinat n soluia etalon de baz se determin n felul
urmtor:
ntr-un balon conic se iau 500 ml soluie 4.2.1, se adaug 20 ml acid clorhidric diluat i
100ml de ap. Se oxideaz dioxidul de sulf liber cu soluie de iod de 0,05 n prezena amidonului
pn la apariia culorii albastru deschis.
Se adaug 100 ml de soluie alcalin - culoarea albastr dispare. Se titreaz pn la culoarea
albastru deschis cu soluie de iod de 0,05 M dioxidul de sulf combinat cu etanalul : n numrul
de mililitri folosii la titrare,
Soluia de etanal combinat cu SO2 conine 44,05 n mg de etanal la litru..
4.2.2 Prepararea soluiilor etalon de acetaldehid de diferite concentraii
n baloane cotate de 100 ml se iau succesiv 5, 10, 15, 20 i 25 ml de soluie -etalon. Se aduc
lacot cu ap distialt. n aceste soluii concentraia de etanal este corespunztor 40, 60,
120,160 i 200 mg/l. Concentraia exact a aldehidei acetice n soluiile etalon se calculeaz n
dependen de concentraia ei n soluia etalon de baz..
Reprezentarea grafic a dependenei absorbanei acestor soluii de concentraia aldehidei
aceticeeste o dreapt care trece prin origine.
2.32.2. GOST 12280-75
186
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.33. Alcoolii superiori
2.33.1. SM 152:1996
187
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.34 OXIMETILFURFURAL
2.34.1 MA-MD-AS315-05-HYDMFF
1.1 Metoda colorimetric
Aldehidele, derivate ale furanului, principala fiind 5-hidroximetil-furfuralul, reacioneaz cu
acidul barbituric i p-toluidina formnd un compus rou, care este determinat prin colorimetrie
la 550 n.
Acidul sulfuros liber mpiedic determinarea; dac coninutul lui depete 10 mg /l, este
necesar eliminarea lui prin cimbinarea cu acetaldehida excesul creea nu mpiedi determinarea.
1.2. Metoda prin cromatografie lichid de nalt performan
Separarea se efectueaz cu coloan cu faz invers la 280 nm. Condiiile de operare descrise
mai jos sunt date ca exemplu.
2. METODA COLORIMETRIC
2.1. Aparatura
2.1.1. Spectrofotometru care permite msurri ntre 300 i 700 nm.
2.1.2. Cuve de sticl, cu drumul optic = 1 cm.
2.2. Reactivi
2.2.1. Acid barbituric, soluie de de 0,5 p. la 100 (m / v).
Se dizolv 500 mg de acid barbituric, C4O3N2H4 n ap distilat la nclzire pe o baie de ap
la temperature 100 C ; se aduce la volumul 100 ml cu ap distilat. Soluia se va pstra
aproximativ 1 sptmn.
2.2.2. p-toluidin, soluie 10 p.la 100 (m / v).
10 g de p-toluidin, C6H4 (CH3) NH2 sunt plasate ntr-un balon 100 ml, se adaug 50 ml
izopropanol i 10 ml de acid acetic glacial, ( 20 = 1,05 g / ml); se completeaz pn la 100 ml cu
izopropanol.. Aceast soluie se prepar n fiecare zi.
2.2.3. Etanal , soluie apoas 1 p. 100 (m / v). Se prepar extemporal.
2.2.4. 5-hidroximetilfurfural C6O3H6 , soluie apoas de 1 g / l.
Se prepar succesiv soluii care conin 5, 10, 20, 30 i 40 mg / l. Soluia la 1 g / l i diluiile
trebuie s fie proaspt preparate.
188
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.3. Modul de lucru

2.3.1.Prepararea probei
- Dioxid de sulf liber mai mic de 10 mg / l.
Se iau direct 2 ml de vin sau must , se filtreaz, dac este necesar.
- Dioxid de sulf liber mai mare de 10 mg / l.
15 ml de prob care urmeaz s fie analizate sunt plasate ntr-un balon cotat de 25 ml, se
adaug 2 ml soluie de etanal. Se amestec. Se las pe 15 min. Se completeaz pn la semn cu
ap distilat. Se filtreaz, dac este necesar. Se efectueaz determinrile n 2 ml soluie.
2.3.2. Msurri colorimetrice
n 2 baloane 25 ml cu dop rodat A i B de se iau cite 2 ml de prob preparat cum e descries
n p. 2.3.1. n fiecare balon se adaug cite de 5 ml soluie de p-toluidin; se amestec. Se
adaug n balonul B ( control) 1 ml de ap distilati n balonul A 1 ml soluie de acid barbituric.
Se amestec pentru omogenizare. Se trece coninutul baloanelor n cuvele spectofotometrului
cu drumul optic 1 cm.
Zero pe scara de absorban se stabilete cu soluia din balonul b la lungime de und de
550 nm, apoi variaia
absorbanei cu soluia din balonul A; se fixeaz valoarea maxim
atins ntre 2 i 5 min.
Probele cu coninutul de 5-hidroximetil-furfurol este mai mare de 30 mg / l trebuie s fie
diluate nainte de analiz.
2.3.3. Stabilirea curbei de calibrare
ntr-o serie de baloane 25 ml se iau cite 2 ml de fiecare dintre soluiile de 5-hidroximetilfurfural de 5, 10, 20, 30 i 40 mg / l i se trateaz cum e descries la p. 2.3.2.
Reprezentarea grafic a absorbanei n funcie de coninutul de 5-hidroximetil-furfurol n
soluiile standard, n mg / l , este o dreapt care trece prin origine.
2.4. Calculul
Coninutul de 5-hidroximetil-furfurol este obinut prin trasarea curbei absorbana de calibrare
determinat pe aceast prob care urmeaz s fie analizat lund n seama de orice diluri fcute.
Este dat n miligrame pe litru (mg / l), cu o zecimal.
3. METODA PRIN CROMATOGRAFIE LICHID DE NALT PERFORMAN
3.1 Aparatura
3.1.1. Cromatograf n faz lichid de nalt performan echipat cu:
- injector de 5 sau 10 l,
- detector spectrofotometric care permite msurtori la 280 nm;
189
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
- coloan silice sferice octadecil,

- nregistrator, eventual, un integrator.
- debitul fazei mobile: 1,5 ml / min.
3.1.2. Dispozitiv pentru filtrare cu membrane (0,45m).
3.2. Reactivii
3.2.1. Ap bidistilat.
3.2.2. Metanol distilat sau de calitate HPLC.
3.2.3. Acid acetic (20 = 1,05 g / ml).
3.2.4. Faza mobil: ap-metanol-acid acetic n prealabil filtrat prin membran (0,45 m), (40
: 9: 1 v / v). Aceast faz mobil trebuie s fie pregtit de zi cu zi i degazat nainte de utilizare.
3.2.5. Soluie de referin de 5-hidroximetil-furfurol de 25 mg / l (m / v).
Se iau ntr-un balon de 100 ml, 25 mg de 5-hidroximetil-furfurol, exact cntrite i
completeaz volumul cu metanol. Se dilueaz aceast soluie 1:10 cu metanol i se filtreaz
printr-o membran (0,45 m).
Aceast soluie se pstreaz n frigider ntr-o sticl brun, bine nchis 2 - 3 luni.
3.3. Modul de lucru
Se injecteaz n cromatograf 5 (sau 10) l de prob de analizat i 5 (sau 10) l de soluie de
referin de 5-hidroximetil-furfurol. Se nscrie cromatograma. Timpul de reinere al 5hidroximetil-furfurol este in jur de 6-7 minute.
Coninutul de 5-hidroximetil-furfurol este exprimat n miligrame pe litru (mg / l),
2.34.2. GOST 29032-91
190
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.35 Derivaii cianici

2.35.1 MA-MD-AS315-06-DERCYA
4
PRINCIPIUL METODEI
Acidul cianuric liber i total n vin este eliberat prin hidroliza acidului i separat prin
distilare. Dup reacia cu cloramin T i piridin, dialdehidele glutaconice formeaz i dozeaz prin
colorimetrie datorit culorii albastre, care l d cu acidul dimetil 1,3 barbituric.
2. APARATE
2.1 Aparate de distilare.
Utilizarea aparatelor de distilare descrise pentru determinarea alcoolului n vin.
2.2. Balon cotat cu capacitatea de 500 ml.
2.3. Baie de ap, termostat la 20 C.
2.4. Spectrofotometru ce permite msurarea absorbanei la lungimea de und 590 nm.
2.5. Cuve de sticl sau cuv cu grasimea stratului optic.de 20 mm.
3. REACTIVE
3.1 Acid fosforic (H3PO4) n 25 p. 1000 (m/v).
3.2. Soluie de cloramin T (C7H7CINNa O2S, 3H2O) 3 p. 100 (m/v).
3.3. Soluie de acid 1,3-dimetilbarbituric: se diluaz 3,658 g de acid 1,3-dimetilbarbituric
(C6H8N2O3) n 15 ml pirid i 3 ml acid clorhidric (= 1,19 g/ml), apoi se se toarn ntr-un balon
cu capacitatea de 50 ml i se aduce pn la cot cu ap distilat.
3.4. Cianur de potasiu (KCN).
3.5. Soluie de iodur de potasiu (KI) 10 p. 100 (m/v).
3.6. Soluie de azotat de argint (AgNO3), 0,1 M.
4. METODA DE DETERMINARE
4.1. Distilarea
ntr-un balot cotat cu capacitatea de 500 ml (2.2.) de ntroduc 25 ml vin, 50 ml ap distilat, 1
ml acid fosforic (3.1.) i cteva perle de sticl. Apoi balonul se plasez imediat la aparatul de
distilare. Distilatul se colecteaz printr-un tub de sticl ascuit i captul lui se afund ntr-un
balon cota de 50 ml, care conine 10 ml ap. Balonul cotat se pune n ap cu ghea. Se
recolteaz 30-35 ml de distilat (sau apoximativ 45 ml de lichid total n fiola msurat). Captul
tubului de sticl a dispozitivului de rcire se cltete cu civa mililitru de ap distilat. Apoi
balonul se aduce la semn cu ap distilat cu temperatura de 20,0 0C.
4.2. Msurarea:
Se ntroduce 25 ml de distilat ntr-o fiol conic cu dop rodat, se adaug 1 ml soluie de
cloramin T (3.2.) i se nchide ermetic. Dup exact 60 minute se adaug 3 ml soluie de acid
dimetil-1,3 barbituric (3.3.), se nchide ermetic i se las pe 10 minute. Apoi se msoar
absorbana n raport cu soluiea martor (25 ml de ap distilat n loc de 25 ml de distilat) la o
lungime de und de 590 nm n cuv cu grosimea optic de 20 mm.
191
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.35.1 MA-MD-AS315-06-DERCYA
5. NTOCMIREA CURBEI DE ETALONARE

5.1. Titrare argentimetric a cianurii de potasiu.
ntr-un vas de 300 ml se dilueaz aproximativ 0,2 g de KCN (3.4.) n 100 ml de ap distilat.
Se adaug 0,2 ml soluie de iodur de potasiu (3.5.) i se titreaz cu o soluie de azotat de argint
de
0,1 M (3.6.) pn primim o culoare galben stabil. 1 ml soluie de azotat de argint consumat,
corespunde la 13,2 mg KCN. Se calculeaz titrul soluiei de cianur de potasiu.
5.2 Curba de etalonare.

5.2.1. Prepararea etaloanelor.
Cunoscnd titrul soluiei etalon de baz 5.1. de KCN, se prepar soluia etalon de lucru, care
s conin 30 mg/l acid cianhidric (30 mg HCN 72,3 mg KCN). Soluia etalon de baz se
dilueaz cu ap distilat 1:10.
Etaloanele se pregtesc n 5 baloane cotate de 100 ml, n care se adaug urmtoarele volume
din soluia etalon de lucru: 1,0-2,0-3,0-4,0 i 5 ml . Se aduc pn la cot cu ap distilat. Soluiile
preparate astfel conin 30-60-90-120 i 150 mg/l acid cianuric.
Se preleveaz cte 25 ml soluii obinute conform 4.1. i 4.2.
Pe baza valorilor absorbanelor i conoscnd coninutul acidului cianhidric din fiecare etalon
se face curba de etalonare, care este o dreapt ce trece prin originea axelor.
6. EXPRIMARE REZULTATELOR
Acidul cianhidric este exprimat n micrograme pe litru (mg/l) fr zecimale.
6.1. Calculul.
Absorbana probei de vin se raporteaz la curba de etalonare i se stabilete coninutul n acid
cianhidric total.
Exactitatea metodei:
Vinurile albe:
repetabilitatea r = 3,1 g/l HCN, respectiv 6% *Xi ;
reproductibilitatea R = 12 g/l HCN, respectiv 6% *Xi
Vinurile roii:
repetabilitatea r = 6,4 g/l HCN, respectiv 8% *Xi ;
reproductibilitatea R = 23 g/l HCN, respectiv 29% *Xi.
Xi cancentraia medie de HCN din vin.
192
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.36 Diglucozidul malvidolului

2.36.1 MA-F-AS315-03-DIGMAL
Diglicozid malvidolul se oxideaz n prezena acidul nitric, i se transform ntr-o substan

cu mediul amoniacal, care formeaz un compus fluorescent, n lumina ultraviolet d o
fluorescen de culoare verde. Intensitatea fluorescenei a compuilor formai se msoar prin
compararea fluorescenei soluiilor titrate cu sulfat de chinin, care d o intensitate de
fluorescen i se folosete ca etalon. ntruct dioxidul de sulf liber atenueaz intensitatea
fluorescenei, este eliminat n prealabil cu etanalul n exes.
2. DETERMINAREA CALITATIV
2.1. Aparate
2.1.1. Lamp de radiaie ultraviolet de 365 nm..
2.2. Reactive
2.2.1. Soluie de etanal
Paraldehid cristalizat --------------------------------- 10 g
Alcool etilic de 96% vol. -------------------------------- 100 ml.
2.2.2. Acid clorhidric M
2.2.3. Soluie de nitrit de sodiu de 10 g/l
2.2.4. Alcool de 96% vol. ce conine 5 p. n 100 amoniac concentrat ( 20 = 0,92 g/l) .
2.2.5. Vin martor, care conine 15 mg/l diglicozid malvidol.
2.3. Metoda de determinare
ntr-un flacon se iau: 10 ml de vin martor i 1,5 ml soluie de etanal.
Se agit i se las pe 20 minute.
ntr-o eprubet de centrifug cu capacitatea de 20 ml se ntroduce: 1 ml de vin tratat cu etanal,
o pictur de acid clorhidric de 1M i 1 ml soluie de nitrit de sodiu. Agitm coninutul eprubetei
i ateptm 2 minute (maximum 5 minute), apoi adugm 10 ml de alcool amoniacal.
ntr-o alt eprubet de centrifug, tratm 10 ml de vin martot care conine 15 mg/l diglicozid
malvidol. Agitm, ateptm 10 minute i centrufugm.
Se deconteaz lichidele limpezi din cele dou eprubete n dou eprubete calibrate cu dop
rodat. Examinm fluorescena n lumina ultrafiolet la 365 nm, a probei de vin analizate,
comparativ cu vinul martor.
Pentru vinurile roze cu un coninut mai mic de antociani, se poate mri sensibilitatea metodei,
dac:
- 5 ml de vin tratat cu etanal,
- 0,2 ml de acid clorhidric 1 M,
- 1 ml soluie de nitrit de sodiu,
- 5,8 ml alcool amoniacal.
Se trateaz n paralel proba de vin martor.
193
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.36.1 MA-MD-AS315-03-DIGMAL
2.4. Interpretare.
Vinurile care nu dau fluorescen sau au o fluorescen net inferioar vinului martor, sunt
considerate ca fiind lipsite de diglicozid malvidol; n cazul unei fluorescene uor inferioare, egal
sau superioare celei a vinului martor, se inpune determinarea cantitativ a diglicozid
malvidolului.
3. DETERMINAREA CANTITATIV
3.1. Aparate.
3.1.1. Aparat pentru msurarea fluorescenei:
- lungimea de und de exitaie 365 nm,
- lungimea de und a radiaiei fluorescente 490 nm.
3.1.2. Cuve de cuar cu traectul optic de 1 cm.
3.2. Reactive
3.2.1. Martor calitativ
3.2.2. Soluie de sulfat chinin de 2 mg/l
Prepararea soluiei n felul urmtor: 10 mg de sulfat de chinin se dizolv n 100 ml de acid
sulfuric de 0,1 M. Se dilueaz 20 ml de aceast soluie ntr-un balon cotat cu capacitatea de 1litru
i se aduce la semn cu soluie de 0,1 M acid sulfuric.
3.3. Modul de determinare
Proba de vin se pregtete n acelai mod ca la Determinarea calitativ, n toate cazurile
(vinuri roii sau roze), se ia 1 ml de vin din proba tratat cu etanal.
Se ntroduce 2 mg/l soluie de sulfat de chinin n cuva de cuar, pentru reglarea
fluoriscimetrului i acionm asupra lrgirii fantei pn ce transmisia T este egal cu 100 %. Apoi
nlocuim cuva cu cea, care conine proba de vin i citim valoarea transmitaiei T1.
Dac valoarea T1 este mai mare de 35%, proba de vin trebue diluat cu un vin lipsit de
diglicozid malvidol.
Not: Acidul salicilic (sau salicilatul de sodiu) adugat n proba de vin pentru conservare pn
la analiz, produce o fluorescen parazitar. Aceasta se elimin prin extracia acidului salicilic
din vin cu eter.
O fluorescen parazit poate da i caramelul adugat n vin.
Calculul rezultatelor.
Intensitatea fluorescenei de 1 corespunde, pentru un vin ce nu conine SO2, n condiiile de
determinare descrise mai sus, i tratat cu etanal n exces, cu 0,426 mg de diglicozid malvidol
ntr-un litru de vin.
Vinurile roii i roze, care nu conin diglicozid malvidol, au o fluorescen ce corespunde
valorii T de 6 p. 100.
194
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.36.1 MA-MD-AS315-03-DIGMAL
Coninutul vinului n miligrame de diglicozid malvidol pe litru (mg/l) este de:

11,5
Malvina = (T1- 6) x 0,426 x ------ = (T1 - 6) x 0,49,
10
n care T1
transmisia citit la proba de vin n %,
0,426 - constanta, intensitii fluorescenei egal cu 1 (adic 0,426 mg malvin pe litru),
6
- transmisia vinului lipsit de malvin, n %.
Dac proba de vin a fost diluat, rezultatul se nmulete cu factorul de diluie.

Coninutul diglicozid malvidolului este exprimat n miligram pe litru (mg/l), fr zecimale.
2.36.2 MA-MD-AS315-11-ANCYAN
1. APLICAII GENERALE
Metoda analitic include determinarea compoziiei relative a antocianelor din vinuri roii i
roze. Separarea este realizat printr-o coloan capilar (cromatografia lichid de nalt
performan HPLC) n faz inversat cu ajutorul unui detector UV- VIS. Deoarece
compoziia antocianelor din vinuri este complex, metoda estimeaz o procedur simpl, care
permite identificarea i determinarea a nou compui principali a antocianelor din vinuri.
Metoda const n separarea direct a antocianelor n form neesterificat (fig.1, pic.1-5) de

antocianele n form de esteri acilici (pic.6-9) prin metoda HPLC pe coloan n faz inversat
prin eluie cu gradient ap/acid formic/acetonitril cu detectare spectrofotometric la 518 nm.
3. REACTIVI I MATERIALE
Acid formic (98%);

Ap (grad de puritate HPLC);
Acetonitril (grad de puritate HPLC);
Solveni HPLC:
A ap/acid formic/acetonitril 87 : 10 : 3 (v/v/v);
B - ap/acid formic/acetonitril 40 : 10 : 50 (v/v/v);
Filtru cu membran pentru degazarea solvenilor HPLC i pentru prepararea probelor de
analizat;
Standarde (produse de referin) pentru identificarea picurilor:
Cyanidol-3-glucozid; M=484,84 g/mol;
Peonidol-3-glucozid; M=498,84 g/mol;
Malvidol-3-glucozid; M=528,84 g/mol;
Malvidol-3,5-diglucozid; M=691,04 g/mol;
195
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4. ECHIPAMENTE
Pentru efectuarea testrilor sunt necesare urmtoarele echipamente:

Sistem HPLC dotat cu:
pomp binar cu gradient i sistem de injectare a probelor n volume de la 10 pn la 200
mkL;
detector UV- VIS;
integrator sau calculator cu programa special;
termostat pentru coloane (40 C);
sistem de degazare a solvenilor;
coloan analitic, spre exemplu:
LiChrospher 100 RP 18 (5m) n LiChroCart 250-4;
precoloan: spre exemplu RP18 (30-40 mm) n cartu cu diametrul de 2 mm i lungimea de
20 mm.
5. PRODUCERI DE TESTARE
5.1. Prepararea probelor

Vinurile limpezi pot fi testate direct, iar probele tulburi necesit filtrare preventiv cu
ajutorul unui filtru cu membran de 0,45 m. Prima parte a filtratului se arunc.
Deoarece gama de linearitate a absorbiei n funcie de concentraia antocianelor este foarte
larg, volumele de prob injectat pot varia de la 10 pn la 200 l, n funcie de intensitatea
culorii vinului. Nici o diferen semnificativ nu este nregistrat pentru volume diferite de probe
injectate.
5.2. Analiza
Analiza antocianelor se efectueaz n urmtoarele condiii HPLC:
50 l (vin rou) pn la 200 l (vin roz)
Volumul probei injectat:
Debitul:
0,8 ml/minut
Temperatura coloanei:
40C
Durata de tranziie:
45 minute
5 minute
Revenirea la condiiile iniiale:
Detectare:
518 nm
Gradienii de eluie:
Timp (min)
0
15
30
35
41
Solvent A (%, v/v)

94
70
50
40
94
Solvent B (%, v/v)

6
30
50
60
6
Pentru
a asigura eficacitatea coloanei, numrul de talere teoretice (N), calculat n raport
cu malvidol-3-glucozid nu trebuie s fie inferior de 20.000, iar rezoluia (Rs) ntre peonidol-3-
196
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
cumaril glucozid i malvidin-3-cumaril glucozid nu trebuie s fie mai mic de 1,5. Sub limita
acestor valori se recurge la utilizarea altei coloane.
n figura 1 este prezentat o cromatogram tipic, unde sunt separate antocianele:
Grupa 1: antociane-3-glucozide neacilate:
No. Picului:
Delfinidol-3-glucozid
1
Ciainidol-3-glucozid
2
Petunidol-3-glucozid
3
Peonidol-3-glucozid
4
Malvidol-3-glucozid
5
Grupa 2: antociane-3-glucozide acilate:
No. Picului:
Peonidol-3-acetilglucozid
6
Malvidol-3-acetilglucozid
7
Grupa 3: antociane-3-glucozide cumarilice:
No. Picului:
Peonidol-3-cumarilglucozid
8
Malvidol-3-cumarilglucozid
9
Valorile sunt exprimate n uniti relative n raport cu totalitatea antocianelor determinate

prin aceast metod.
Validarea metodei se efectueaz n baza regulelor statistice generale. Fidelitatea metodei poate
fi calculat utiliznd datele prezentate n tabelul 2.
Tabelul 1. Rezumat a studiului performanei metodei
Suprafaa relativ a picului*,
%
Variaia RSDr, %
Variaia RSDR, %
>0,4-1,0
>1,1-1,5
>1,5-3,5
>3,5-5,5
>5,5-7,5
>10-14
>14-17
>50-76
6,8 - 22,4
4,2 - 18,1
2,1 - 7,7
2,7 - 5,7
2,4 - 3,9
1,1 - 2,9
1,0 - 3,9
0,3 - 1,0
20,6 - 50,9
11,8 - 28,1
10,6 - 15,6
18,7 7,5
6,5 - 10,0
3,7 - 9,2
3,2 - 5,4
2,1 - 3,1
*pentru toi compuii antocianici
197
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul 2. Rezultatele studiului performanei metodei

Antociane
Proba 1
Proba 2
Proba 3
Proba 4
Proba 5
Delfinidol-3-glucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
14
6,75
0,163
2,4
0,46
0,544
8,1
1,52
14
14,14
0,145
1,0
0,41
0,462
3,3
1,29
16
3,45
0,142
4,1
0,40
0,526
15,2
1,47
15
16,68
0,142
0,8
0,40
0,704
4,2
1,97
16
3,54
0,108
3,1
0,30
0,490
13,8
1,37
Ciainidol-3-glucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
16
2,18
0,086
4,0
0,24
0,460
21,2
1,29
17
1,23
0,053
4,3
0,15
0,211
17,2
0,59
16
0,61
0,043
7,1
0,12
0,213
34,9
0,60
15
1,46
0,110
7,5
0,31
0,180
12,3
0,50
14
0,34
0,031
9,2
0,09
0,158
46,7
0,44
Petunidol-3-glucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
15
10,24
0,233
2,3
0,65
0,431
4,2
1,21
17
14,29
0,596
4,2
1,67
0,996
7,02
2,79
16
5,75
0,157
2,7
0,44
0,495
6,6
1,39
14
12,21
0,097
0,8
0,27
0,469
3,8
1,31
15
6,19
0,169
3,2
0,550
0,404
6,5
1,13
16
11,88
0,241
2,0
0,68
0,981
8,3
2,75
15
6,23
0,166
2,7
0,47
0,560
9,0
1,57
17
13,75
0,144
1,0
0,40
1,227
8,9
3,44
17
7,44
0,232
3,1
0,65
0,602
8,1
1,69
16
4,12
0,174
4,2
0,49
0,532
12,6
1,49
Peonidol-3-glucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
198
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Antociane
Proba 1
Proba 2
Proba 3
Malvidol-3-glucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
16
55,90
0,545
1,0
1,53
2,026
3,6
5,67
15
55,04
0,272
0,5
0,76
2,649
4,8
7,42
17
76,11
0,251
0,3
0,70
2,291
3,0
6,41
Peonidol-3-acetilglucoside
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
14
1,16
0,064
5,5
0,18
0,511
43,9
1,43
Malvidol-3-acetilglucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
Peonidol-3-cumarilglucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
continuare
Proba 4
Proba 5
16
52,60
0,298
0,6
0,83
1,606
3,1
4,50
16
61,04
0,377
0,6
1,06
1,986
3,3
5,56
16
1,44
0,062
4,3
0,17
0,392
27,2
1,10
14
0,59
0,059
10,1
0,17
0,272
46,4
0,76
16
3,74
0,215
5,8
0,60
0,374
10,0
1,05
16
5,51
0,176
3,2
0,49
0,395
7,2
1,11
17
4,84
0,167
3,4
0,47
0,366
7,6
1,02
17
3,11
0,088
2,8
0,25
0,496
16,0
1,39
16
15,07
0,213
1,4
0,60
0,617
4,1
1,73
16
1,26
0,130
10,3
0,36
0,309
24,5
0,86
14
0,90
0,046
5,1
0,13
0,109
12,2
0,31
17
0,89
0,060
6,8
0,17
0,204
23,0
0,57
16
1,32
0,058
4,4
0,16
0,156
11,8
0,44
199
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Antociane
Malvidol-3cumarilglucozid
n
media
Sr
RSDr,%
r
S(R)
RSDR, %
R
Proba 1
Proba 2
17
4,62
0,159
3,4
0,45
0,865
18,7
2,42
17
2,66
0,055
2,1
0,15
0,392
14,7
1,10
Proba 3
Proba 4
17
4,54
0,124
2,7
0,35
0,574
12,6
1,61
continuare
Proba 5
16
4,45
0,048
1,1
0,13
0,364
8,2
1,02
unde n - reprezint numrul laboratoarelor participante (dup eliminarea datelor aberante);

Sr
- devierea standard a repetabilitii;
RSDr,% - devierea standard relativ a repetabilitii;
r
- repetabilitatea;
S(R)
- devierea standard a reproductibilitii;
RSDR, %- evierea standard relativ a reproductibilitii;
R
- reproductibilitatea
ANTHO13 #25 [modified by gyn]
0,0
2,5
5,0
7,5
10,0
12,5
4-98 4039
15,0
17,5
20,0
22,5
25,0
27,5
UV_VIS_1 WVL:518 nm
30,0
32,5
35,0
37,5
40,0
42,5
45,0
Figura 1
Separarea 9 antociane n vin rou.
200
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.37 Dietilenglicolul
2.37.1 MA-MD-AS315-09-DIEGLY
1
SCOPUL (PRINCIPIUL)
Determinarea dietilenglicolului n vinuri cu un coninut egal sau mai mare dect 10 mg/l.
2
PRINCIPIUL METODEI
Separarea dietilenglicolului n diferii componeni ai vinului prin cromatografie n faz

gazoas pe coloan capilar, detector cu ionizare n flacr.
Not: condiiile de operare sunt descrise n exemplele de mai jos.
3
APARATE
3.1 Cromatograf n faz gazoas pe coloan caplar:

- cu ingectare
- cu detector cu ionizare n flacr
- cu coloan de separare: coloan capilar acoperit cu o succesiune de polietilenglicol , cu
lumgimea de 50m i diametrul de 0,32mm.
Condiiile de lucru :
Tempetura de ingectare: 280C.
Temperatura la ingector: 270C.
Gaz purttor:
hidrogen
Debitul gazului purttor : 2 mi/min.
Scurgerea:
30 ml/min
Ingectarea -.
Volumul de ingectare:
2 l
Ingectarea la 35C - se sustrage nchis n timp de 40 c.
Programarea temperaturii: 120C -170 C
3.2 Centrifugarea
4
REACTIVI
4.1 Soluie de propan 1,3-diol pentru 1 g/l n alcool de 20 % vol. (tampon intern).
4.2 Soluie adaos dietilenglicol de 20 mg/l.
5
METODA DE DETERMINARE
ntr-un balon cotat cu capacitatea de 50ml, se ntroduc:

- 10 ml vin
- 1 ml de soluie de propan 1,3-diol
- 25 ml ester.
201
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.37.1 MA-MD-AS315-09-DIEGLY
Se agit i se o cantitate suficient de carbonat de potasiu neutru ntr-un amestec saturat.

Se agit. Se separ n dou faze prin centrifugare. Se efectuaz dou extracii.
Eliminarea eterului prin evaporare i rediluarea sedimentului cu 5 ml de etanol.
Randamentul extragerii este aproximativ de 90 p. n 100.
Procedura cromatografie n faz gazoas i condiiile ei sunt date n p. 3.1.
6
REZULTATELE
Identificarea dietilenglicolului se face cu ajutorul timpului de meninere comparativ cu

soluiile de referin, analizat n aseleai condiii ca la vin.
Dozarea se efectuaz comparativ ntre soluiile de referin conform principiilor metodei
de etalonare intern.
Se recomand prezena coninutului egal sau mai mic de 20 mg/l prin confirmarea prezenei
lor n spectromatria n mas.
202
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.38 Indicile Folin-Ciocalteu

2.38.1 MA-MD-AS2-04 INDFOL
1. DEFINIIE
Indicele Folin-Ciocalteu este rezultatul obinut din aplicarea metodei descrise mai jos.
Toi compuii fenolici coninui n vin sunt oxidai de reactivul Folin-Cioclteu. Acest reactiv
este format dintr-un amestec de acid fosfowolframic (H3PW12O40) i acidul fosfomolibdic
(H3PMo12O40) care, dup oxidarea fenolilor, este redus la un amestec de oxizi albatri de tungsten
(W8O23) i molibden (Mo8O23). Coloraia albastr produs are o absorbie maxim n zona 750 nm
i este proporional cu totalul cantitii de compui fenolici prezeni iniial.
3. REACTIVI
Acetia trebuie s aib calitatea de reactivi analitici. Apa utilizat trebuie s fie, ap distilat
sau de puritate echivalent.
3.1. Reactivul Folin-Cioclteu
Acest reactiv este disponibil n comer ntr-o form pregtit pentru utilizare. Poate fi preparat
dup cum urmeaz: se dizolv 100 g de wolframat de sodiu (Na2WO4 2H2O) i 25 g de molibdat
de sodiu (Na2MoO4 2H2O) n 700 ml de ap distilat. Se adaug 50 ml de acid fosforic 85 %
(20 = 1,71 g/ml) i 100 ml de acid clorhidric concentrat (20 = 1,19 g/ml). Se aduce la
temperatura de fierbere i se fierbe zece ore la reflux. Se adaug apoi 150 g de sulfat de litiu
(Li2SO4 H2O) i cteva picturi de brom i se fierbe timp de nc 15 minute. Se las s se
rceasc i se completeaz pn la un litru cu ap distilat.
3.2. Carbonat de sodiu anhidru Na2CO3 n soluie de 20 % m/v.
4. APARATURA
Aparatura normal de laborator, n special:

4.1. Baloane cotate de 100 ml.
4.2. Spectrofotometru care poate funciona la 750 nm.
5. METODA DE LUCRU
5.1. Vin rou

ntr-un balon cotat de 100 ml (punctul 4.1) se introduc urmtoarele, respectnd exact ordinea
dat:
1 ml de vin, diluat n prealabil 1:5,
203
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.38.1 MA-F-AS2-04 INDFOL
50 ml ap distilat,
5 ml reactiv Folin-Cioclteu (punctul 3.1),
20 ml de soluie de carbonat de sodiu (punctul 3.2).
Se completeaz pn la 100 ml cu ap distilat. Se amestec pentru omogenizare. Se ateapt

30 minute pentru stabilizarea reaciei. Se determin absorbia la 750 nm printr-un drum optic de 1
cm fa de un blanc pregtit cu ap distilat n locul vinului.
Dac absorbia nu este n jur de 0,3 trebuie fcut o diluare corespunztoare.
ntreprindei aceeai procedur cu 1 ml de vin nediluat.
5.3. Must concentrat rectificat

5.3.1. Pregtirea probei
Se utilizeaz soluia cu o concentraie a zahrului de 25 % (m/m) (25 Brix), pregtit
conform descrierii din capitolul pH seciunea 4.1.2.
5.3.2. Determinri
Se procedeaz conform descrierii din cazul vinului rou (punctul 5.1) utiliznd 5 ml de prob
preparat conform descrierii de la punctul 5.1.
5.3.1 i msurnd absorbia fa de un blanc, pregtit cu 5 ml de soluie de zahr invertit 25 %
(m/m).
Rezultatul este exprimat sub forma unui indice, obinut prin nmulirea absorbiei cu 100
pentru vinurile roii diluate 1:5 (sau cu factorul corespondent pentru alte diluii) i cu 20 pentru
vinurile albe. Pentru mustul concentrat rectificat, se nmulete cu 16.
6.2. Repetabilitatea
Diferena dintre rezultatele a dou determinri ntreprinse simultan sau foarte repede una dup
cealalt, de acelai analist, nu trebuie s fie mai mare de 1.
O bun repetabilitate a rezultatelor este obinut utiliznd aparatur curat foarte atent
(baloane cotate i cuve spectrometrice).
204
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.39. Caracteristicile cromatice

2.39.1
MA-MD-AS2-07-CARCHR
1.
VINURI I MUST
1.1. Definiii
Proprietile cromatice ale unui vin sunt definite ca fiind luminozitatea i cromatica.
Luminozitatea este reprezentat de transmitan i variaz invers cu intensitatea culorii
vinului.
Cromatica este reprezentat de lungimea de und dominant (care caracterizeaz
culoarea) i de puritatea culorii. Prin convenie i din motive practice, proprietile cromatice
ale vinurilor roii i ros sunt date ca intensitate a culorii i nuanei, n conformitate cu o
procedur adoptat ca metod obinuit.
1.2. Principiul metodelor
1.2.1. Metoda de referin
Aceasta este o metod spectrofotometric prin care este posibil determinarea valorilor
tristimulilor i coordonatelor tricromatice necesare pentru specificarea unei culori adoptate de
Comisia Internaional pentru Iluminare (CIE).
1.2.2. Metoda obinuit (aplicabil vinurilor roii i roz)
Aceasta este o metod spectrofotometric prin care proprietile cromatice sunt
exprimate, prin convenie, dup cum urmeaz: Intensitatea culorii este dat de suma valorilor
absorbiei la lungimile de und de 420, 520 i 620 nm pentru radiaia care traverseaz o cale
optic de 1 cm n prob. Coloritul este exprimat de rata absorbiei la 420 i 520 nm.
1.3.1. Aparatura
Spectrofotometru care permite efectuarea de msurri ntre 300 i 700 nm.
Perechi de cuve din sticl, avnd drumuri optice b egale cu 0,1;0,2;0,5; 1,2 i 4 cm.
P r e g t i r e a pr o b e i
Vinurile tulburi trebuie limpezite prin centrifugare. Se nltur cea mai mare parte din
bioxidul de carbon din vinurile noi i din cele spumante, prin agitarea n vid.
De t e r m i n a r e a
Drumul optic b, a cuvei de sticl trebuie ales astfel nct absorbia msurat s se situeze
ntre 0,3-0,7. Pentru alegerea corespunztoare a cii optice este oferit urmtorul ghid: pentru
vinurile albe se utilizeaz cuve cu drumul optic de 2 (sau 4) cm, 1 cm pentru vinurile ros i 0,1
(sau 0,2) cm pentru vinurile roii.
Determinrile spectrofotometrice trebuie efectuate utiliznd ap distilat, ntr-o cuv cu
acelai gdrum optic b, ca lichidul de referin pentru stabilirea valorii zero pe scara absorbiei, la
lungimile de und de 445, 495, 550 i 625 nm. Cele patru absorbii corespunztoare pentru vin se
determin, cu precizie de trei zecimale, pentru drumul optic b. Se noteaz cu A445, A495, A550 i
A625.
205
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.39.1 MA-MD-AS2-07-CARCHR
1.3.3 Calcularea
Se utilizeaz aceste valori ale absorbiei pentru grosimea optic b cm, mpreun cu
tabelul I, pentru obinerea transmitanei corespunztoare (T %). Se noteaz cu T445, T495, T550 i
T625.
Se calculeaz valorile tristimulilor X, Y i Z, exprimate ca fracii zecimale, din
urmtoarele expresii:
X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445
Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495
Z = 0,24 T495 + 0,94 T445
Se calculeaz coordonatele cromatice x i y din:
x=
X
Y
y=
X +Y + Z
X +Y + Z

Luminozitatea relativ este dat de valoarea lui Y, exprimat n procente. (Pentru
ntunecime total Y = 0 %; pentru lichide incolore Y = 100 %.)
Cromatica este exprimat de lungimea de und dominant i de puritate.
Determinarea acestor dou cantiti se face folosind diagrama cromatic de locurile
spectrale, aa cum reiese din figura 1. Punctul O trasat pe aceast diagram reprezint sursa de
lumin alb utilizat i are coordonatele sursei standard C, xo = 0,3101 i yo = 0,3163,
reprezentnd lumina zilei de intensitate medie.
Lungimea de und dominant se traseaz pe diagrama cromatic punctul C, avnd
coordonatele x i y.
Dac C este n exteriorul triunghiului AOB, se traseaz o linie dreapt care unete O cu
C i prelungii-o pn intersecteaz locul spectral n punctul S, care corespunde lungimii de und
dominante.
Dac C este n interiorul triunghiului AOB, se traseaz o linie dreapt de la C la O i
prelungii-o pn intersecteaz locul spectral ntr-un punct corespunztor lungimii de und a
culorii complementare cu aceea a vinului. Aceast lungime de und este denotat de valoare,
urmat de litera C.
Puritatea
Dac punctul C este n exteriorul triunghiului AOB, puritatea este dat, ca procent, de
relaia:
distana de la C la O
100 --------------------------------distana de la O la S
de relaia:
Dac punctul C este n exteriorul triunghiului AOB, puritatea este dat, ca procent,
distana de la C la O
100 ---------------------------------(1)
distana de la O la P
206
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
unde P este punctul n care linia dreapt OC intersecteaz linia purpuriului (linia AB).
Puritatea este, de asemenea, dat direct de diagramele cromatice din valorile cunoscute ale
lui x i y (figurile 2, 3, 4, 5 i 6).
Rezultate
Culoarea unui vin este definit complet de luminozitate, cromatic (exprimat de lungimea
de und dominant) i puritate.
Acestea trebuie indicate n raportul de analiz, cu valoarea drumului optic n care s-au
fcut determinrile.
TABELUL I
Transformarea absorbiilor n transmitan (T %)
Metoda de utilizare
Se gsete prima zecimal a absorbiei n prima coloan i se afl rndul corespunztor R. Se
gsete a doua zecimal a absorbiei n primul rnd i se afl coloana corespunztoare C. Se citete cifra
din cuva de la intersecia rndului R cu coloana C. Pentru calcularea transmisibilitii, aceast cifr se
mparte cu 10 dac absorbia este mai mic dect 1, cu 100 dac este ntre 1 i2i cu 1 000 dac este ntre
2 i3.
Not:
Cifra din colul din dreapta sus al fiecrei cuve permite luarea n considerare, prin interpolare, a
celei de-a treia zecimale a absorbiei.
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
100023
79418
63114
50111
398 9
316 7
251 6
199 4
158 3
126 3
1
97722
77618
61714
49011
389 9
309 7
245 5
195 5
155 4
123 3
2
95522
75917
60314
47911
380 9
302 7
240 6
190 4
151 3
120 3
3
93321
74117
58914
46811
371 8
295 7
234 5
186 4
148 4
117 2
4
91221
72416
57513
45710
363 8
288 6
229 5
182 4
144 4
115 3
5
89120
70816
56213
447 9
355 8
282 7
224 5
178 4
141 3
112 2
6
87120
69216
54913
436 9
347 8
275 6
219 5
174 4
138 3
110 3
Exemplu:
Absorbia
0,47
1,47
2,47
3,47
T%
33,9
3,4
0,3
0
Transmitan T % sunt exprimate prin rotunjire la cel mai apropiat
0,1 %.
7
85119
67615
53712
42710
339 8
269 6
214 5
170 4
135 3
107 2
8
83219
66115
52512
41710
331 7
263 6
209 5
166 4
132 3
105 3
9
81319
64615
51312
407 9
324 8
257 6
204 5
162 4
129 3
102 2
207
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Valorile lui x
FIG. 1
Diagrama cromatic, incluznd toate culorile spectrului
208
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Valorile lui x
FIG. 2
Diagrama cromatic pentru vinurile cu rou nefalsificate (rou strlucitor) i pentru vinurile roumaronii (roucrmiziu)
209
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
48
.49
.50
.51
.52
.53
.54
.55
.56
.57 .58
.59" .60
.61
.62
.63
.64
Valorile lui x
FIG. 3
Diagrama cromatic pentru vinurile cu rou nefalsificate (rou strlucitor) i pentru vinurile roumaronii (roucrmiziu)
210
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
FIG.4
Diagrama cromatic pentru vinurile cu rou nefalsificat (rou strlucitor) i pentru vinurile purpurii
211
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Valorile lui x
FIG. 5
Diagrama cromatic pentru vinurile cu rou nefalsificat (rou strlucitor) i pentru vinurile purpurii
212
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Valorile lui x
FIG. 6
Diagrama cromatic pentru vinurile cu rou maron (rou crmiziu) i pentru vinurile purpurii
213
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.40 Oxratoxina A
2.40.1 MA-F-AS315-10-OCHRAT
1. DOMENIU DE APLICARE
Acest document descrie o metod care se aplic la stabilirea ochratoxinei A (OTA) n vinurile
roii, roze i albe (inclusiv i n vinurile speciale), la concentraii de pn la 10 g / l, folosind o
coloan de "immunoaffinite i cromatografia lichid de nalt performan (CLHP) [1].
Aceast metod a fost validat ntr-un studiu n colaborare internaional care e bazat pe
dozarea OTA n vinurile roii i albe, prin analiza vinurilor naturale contaminate i a vinurilor
cu coninut de toxine n concentraii ce variaz de la 0,01 g / l, pn la 3,00 g / l.
Metoda poate fi aplicat la vinurile spumante i la vinurile petiante, cu condiia c probele au
fost anterior degazate (de exemplu, prin sonicare).
2. PRINCIPIUL
Eantioanele de vin au fost diluate cu o soluie, care conine polietilenglicol i bicarbonat de
sodium, apoi se filtreaz i se purific pe coloana immunoaffinite. OTA a fost eluat cu metanol i
separate prin HPLC cu faz invers cu detectare fluorimetric.
3. REACTIVI
Pe parcursul analizei, fr indicaiile contrare, se utilizeaz doar reactivii de calitate analitic
i ap distilat sau ap de calitate EN ISO 3696. Solvanii trebue s fie de calitate CLHP.
3.1 Clorur de sodium (NaCl)
3.2 Hidrogenocarbonat de sodium (NaHCO3)
3.3 Polietilenglicol (PEG 8000)
3.4 Metanol (CH3OH)
3.5 Acetonitril (CH3CN)
3.6 Ap purificat de laborator , caliatea EN ISO 3696
3.7 Acid acetic 85% (CH3COOH)
3.8 Soluie diluat (1 % PEG + 5% NaHCO3)
Se dizolv 10 g de PEG (3.3) i 50 g NaHCO3 (3.2) n 950 ml ap i se aduce pn la un 1
lutru cu ap.
3.9 Soluie de splare (2,5 % Na Cl +0,5% NaHCO3)
Se dizolv 25 g de NaCl (3.1) i 5 g NaHCO3 (3.2) n 950 ml ap i se aduce pn la un 1
lutru cu ap.
3.10 Faz mobil CLHP (ap: acetonitril: acid acetic glacial, 99:99:2, v/v/v)
Se amestec 990 ml ap cu 990 ml de acetonitril (3.5) i 20 ml de acid acetic glacial (3.7). Se
filtreaz printr-un filtru cu diametrul porilor 0,45m i se degazeaz (de exemplu, cu heliu).
3.11 Toluen
3.12 Amestec de solveni (Toluen: acid acetic glacial, 99:1, v/v ).
Se amestec 99 pri n volum de toluent (3.11) cu o parte de volum de acid acetic glacial
(3.7).
214
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.40.1 MA-MD-AS315-10- OHRAT
3.13 Soluie sroc de OTA

Se dizolv 1 mg de OTA sau coninutul unei fiole (n cazul n care OTA este obinut sub
forma unei pelicule dup evaporare) n amestecul de solvent (3.12) pentru a obine o soluie cu
coninutul de aproximativ 20 sau 30 g/l de OTA.
Pentru determinarea concentraiei exacte, se inregistreaz spectrul de absorbie al soluiei
ntre 300 i 370 nm, n cuva de cuar cu drumul optic de 1 cm, folosind amestecul de solvent
(3.12) ca reper. Identificarea maxim a absorbanei i calcularea concentraiei de OTA (c) n
g/ml este exprimat n ecuaia
C = Amax M 100 /
unde
Amax- absorbana, care determin lungimea de und maxim (aproximativ 333 nm)
M masa molecular a OTA = 403,8 g/mol
coefiucientil de extincie molar a OTA n amestecul de solvent (3.12) = 544/mol
- drum optic (cm)
Aceast soluie este stabil la temperatura de -18C timp de 4 ani.
3.14 Soluiestandard de OTA (2g/ml n toluent : acid acetic, 99:1.v/v)
Se dilueaz soluia stoc (3.13), cu amestecul de solvent (3.12) pentru a obine o soluie
standard de OTA cu concentraiea de 2 g / ml.
Aceast soluie poate fi pstrat la + 4 C n frigider. Stabilitatea trebue s fie testat regulat
.
4. ECHIPAMENT
Echipamentul de laborator este obinuit. Ele sunt urmtoarele:
4.1 Flacoane din sticl (4 ml)
4.2 Pomp n vid pentru pregtirea coloanelor immunoaffinite.
4.3 Rezervuar i tub de scurgere adaptate la coloanele immunoaffinite.
4.4 Filtre cu fibre de sticla (de exemplu, Whatman GE / A).
4.5 Coloana immunoaffinite special pentru OTA.
Coloana trebue s aib o capacitate total de legare de cel puin 100 ng de OTA i s permit
ca randamentul de purificare s fie egal cu 85%, atunci o soluie diluat de vin va conine 100 ng
OTA.
4.6. Evaporator rotativ
4.7 Cromatograf lichid, cu faza mobil, cu pomp capabil de a atinge un flux constant de
1ml/mn din isocratic.
4.8 Sisteme de injecie trebuie s fie echipat cu o bucl de 100 l.
4.9 Coloan CLHP analitic din oel 150 x 4.6 mm umplut cu faz staionar C18(5 m),
precedat de o pre-coloan sau pre-filtru (0,5 m), care conine o faz adecvat. Coloanele de
diferite dimensiuni pot fi folosite cu condiia ca acestea ofer o baz bun i zgomotul de fundal
pentru a detecta picul de OTA, printre alte picuri.
4.10 Detector de fluorescen conectat la coloan cu lungimea de und de excitaie este fixat
la 333 nm lungime de und de emisie la 460 nm.
4.11 Systeme Acquisition
4.12 Spectrometru .V.
215
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.40.1 MA-MD-AS315-10- OHRAT
5. MODUL DE DETREMINARE
5.1 Pregtirea probelor
Se toarn 10 ml de vin ntr-un balon conic de 100 ml. Se adaug 10 ml de soluie diluat (3.8).
Se amestec bine. Se filtreaz prin fibr de sticl (4.4) (filtrare este necesar pentru soluii tulbure
sau atunci cnd exist un precipitat, diluate).
5.2 Purificarea n coloana immunoaffinite
Se monteaz coloana immunoaffinity (4.5) pentru a pompa n vid (4.2), se fixeaz rezervorul
(4.3).
Se adaug 10 ml (echivalen a 5 ml de vin) de soluie diluat n rezervor i se trece n coloana
de immunoaffinity cu un debit de aproximativ 1 pictur pe secund. Se spal coloana
immunoaffinity cu 5 ml de soluie de splare (3.9) i apoi cu 5 ml de ap ntotdeauna debit de 1
pn la 2 picturi pe secund.
Se usuc coloana prin trecerea aerului. Se elueaz OTA n flacon de sticl (4.1) cu 2 ml de
metanol (3.4) la o vitez de 1 pictur pe secund. Eluatul se evapor pn la uscare la 50 C cu
azot. Se dizolv imediat n 250 l cu faz mobil CLHP (3.10) i stocate la 4 C pn la analiza
prin CLHP.
5. 3 analiza CLHP
Se injecteaz 100 l extract (echivalent a 2 ml de vin) n cromatograf n bucla de injectare.
Condiii de funcionare:
Flow: 1 ml / min.
Faza mobil: acetonitril: apa: acid acetic glacial
(99:99:2, v / v / v)
Fluorescen de detectare: lungime de und = 333 nm, stare de excitaie
lungime de und de emisie = 460 nm
Volumul de injecie: 100 l
6. CUANTIFICAREA OHRATOXINEI A (OTA)

Cuantificare de OTA trebue s se efectueze prin msurarea de arie a curbei (sau a nlimilor
picurilor), la timpul de retenie de OTA n comparaie cu curba de calibrare.
6.1 Curba de etalonare
Se pregtete o curb de etalonare n fiecare zi de analiz i ori de cte ori se schimb
condiiile n cromatograf. Se msoar 0,5 ml soluie standard de OTA (3.14) i 2 g / ml, ntr-un
flacon de sticl i evaporarea solventului sub azot.
Se dizolv n 10 ml de faz mobil CLHP (3.10), care anterior a fost filtrat prin filtru cu
diametrul porilor 0.45l. Aceasta ofer o soluie de OTA la 100 g/ml.
Se prepar 5 soluii de calibrare pentru CLHP n 5 flacoane a 5 ml, msurate n tabelul 1.
Se umple fiecare standard de pn la 5 ml cu faza mobil CLHP (3.10). Se injecteaz 100 l
din fiecare soluie n CLHP.
216
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.40.1 MA-MD-AS315-10- OHRAT
Tabelul 1
l faz mobil CLHP (3.10)

filtrat
l de soluie OTA, la 100 ng / ml:
Concentraia OTA (ng / ml)
Injectarea OTA (ng)
Std 1
Std 2
Std 3
Std 4
Std 5
4970
4900
4700
4000
2000
30
0,6
0,06
100
2,0
0,20
300
6,0
0,60
1000
20
2,00
3000
60
6,00
Not:
1. n cazul n care cantitatea de OTA n probe este n afara intervalului de calibrare, se face o
diluie corespunztoare, sau se injecteaz volume mai mici. n acest caz, calculul final (7) trebuie
s fie reanalizat de la caz la caz .
2. Din cauza variabilitate concentraiilor se recomand trecerea liniei de calibrare prin zero,
astfel n ct o cuantificare precis pentru concentraiile OTA ( mai puin de 0,1 g / l).
7. CALCULUL
Calcularea curbelor de calibrare cantitatea de OTA n poriune a soluiei testate i injectate n

coloana CLHP.
Se calculeaz concentraia de OTA (Cota), n ng / ml (echivalent cu g / l), folosind formula:
Cota =Ma x 2 / V1 x V3/V2

unde:
Ma este masa de ochratoxin A (ng) n poriune din matricea injectat n coloan i se
determin din curba de etalonare.
2 este factorul de diluie
V1 este volumul de prob (10 ml)
V2 este volumul soluiei testate, injectate n coloan (100 l)
V3 este volumul de soluie folosit pentru dizolvarea eluatul uscat (250 ml)
8. PERFORMANA METODEI N LABORATOR
Tabelul 2 indic listele de performan a metodei aplicate n vinurile albe, roze i roii, n
laboratoare care au participat la validarea metodei.
217
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.40.1 MA-MD-AS315-10- OHRAT
Tabelul 2. Extracia de eficien din vinuri supradozate cu ochratoxina A la diferite

concentraii
Vin rou
Suprancrcare
(g/l)
0,04
0,1
0,2
0,5
1,0
2,0
5,0
10,0
Media
Randamentul
SD*
(%)
96,72,2
90,82,6
91,30,6
92,30,4
97,82,6
96,51,6
88,11,3
88,90,6
92,83,5
Vin roz
RSD#
(%)
2,3
2,9
0,7
0,5
2,6
1,7
1,5
0,7
3,8
Randamentul
SD*
(%)
94,16,1
89,91,0
88,12,1
91,60,4
103,62,5
98,61,8
94,55,2
Vin alb
RSD#
(%)
6,5
1,1
2,4
0,4
2,5
1,8
5,5
Randamentul
SD*
(%)
91,68,9
88,40,2
95,12,4
93,00,2
100,71,0
98,01,5
94,54,1
RSD#
(%)
9,7
0,2
2,5
0,2
1,0
1,5
4,3
* SD = deviaia standard (n = 3 replic);

# RSD = deviaia standard relativ (coeficient de variaie).
9. STUDIU DE COLABORARE
Metoda a fost validat de studiu n colaborare cu participarea a 16 laboratoare din 8 ri, n

urma recomandrilor a protocolului pentru validarea metodelor analitice [2]. Fiecare participant a
analizat 10 vinuri albe, 10 roii, 5 vinuri fantom reprezentate n dou exemplare, contaminate.
Metoda de performan care rezult din acest studiu sunt raportate n anexele I i II.
2.40.2. Metoda enzimatic cu detectare spectrofotometric, aprobat de Agenia agroindustrial

1. Domeniu de aplicare
Acest document descrie o metod enzimatic cantitativ de determinare a coninutului de
ochratoxin A (OTA) n vinurile roii, roze i albe (inclusiv i n vinurile speciale), precum i a
berii n diapazonul de concentraii 0,2-25 g/L. n cazul concentraiilor, ce depesc aceast
limit se va efectua diluarea probelor conform unei instruciuni speciale.
Limita de sensibilitate a metodei este de 0,1 g/L, limita de cuantificare 0,2 g/L.
Metoda poate fi aplicat pentru dozarea OTA din vinuri spumante i petiante dup degazarea lor
prealabil.
218
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

2. Principiul
Metoda prezint un test direct imunosorbent cu legarea enzimelor (CD-ELISA), care permite
de a obine concentraii exacte n pri pe miliard (ppb).
Ochratoxina din mostre i substanele de control concureaz cu alte enzime conjugate pentru
locurile de legare a anticorpilor. Dup splare este adugat substratul, care reacioneaz cu
conjugatul legat i produce culoarea albastr. Intensitatea culorii este invers corelat coninutului
de OTA din prob. Rezultatele testului sunt examinate ntr-o microalveol pentru a verifica
densitile optice. Densitile optice ale probelor de control formeaz curba etalon, care permite
de a calcula concentraia exact de ochratoxin pentru fiecare serie de msurri.
Procedura este automatizat, calculul este efectuat direct de ctre aparatul NEOGENVERATOX, care prezint informaia n form de buletin de analiz cu trasarea curbei de
etalonare, cu indicarea coninutului de OTA i a fidelitii testului efectuat.
Not n cazul vinurilor roii se efectueaz suplimentar sedimentarea taninurilor cu ajutorul unui
set Veratox special.
2. Reactivi i materiale
3.1. Generaliti
n lipsa altor specificaii se folosesc doar reactivi de calitate analitic recunoscut i numai ap
distilat sau ap care s corespund cel puin calitii 1 de puritate conform EN ISO 3696.Se pot
folosi reactivi disponibili comercial cu proprieti echivalente celor enumrai.
3.2.
Reactivi i materiale livrate de provenien obligatorie
3.2.1. 48 de alveole acoperite cu anticorpi

3.2.2. 48 de alveole pentru amestecare marcate cu rou
3.2.3. 5 sticlue cu etichete galbene de 1.5 mL fiecare cu substane de control OTA de
0, 2, 5, 10 i 25 ppb (vezi precauiile de folosire a soluiei de metanol)
3.2.4. 1 sticlu cu etichet albastr cu 7 ml de soluie conjugat de OTA-HRP
3.2.5. 1 sticlu cu etichet verde cu 24 ml de soluie substrat K-Blue
3.2.6. 1 sticlu cu etichet roie de 32 de ml de soluie roie de oprire a reaciei
3.2.7. Set Mycotoxin Veratox pentru extracia OTA (Setul poate fi pstrat la
temperatura camerei - 18-300C):
3.2.7.1. 12 recipiente de extragere cu capace
3.2.7.2. 12 seringi filtru, fiecare dintre care conine 1 gram de material de
fibr de sticl
12 tuburi de colectare a mostrelor de 12x75 mm cu capace.
219
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.3.Ali reactivi i materiale
3.2.8. Materiale pentru extracia OTA (articolele c e sunt disponibile n setul de la
Neogen, articol nr. 8052):
3.2.8.1.
metanol de nivelul ACS
3.2.8.2.
cilindru gradat de 250 ml (articol Neogen nr. 9368)
3.2.8.3.
container cu capacitatea de 125 ml
3.2.8.4.
seringi Neogen cu filtru, sau hrtie-filtru vatman nr 1
3.2.8.5.
tuburi de colectare a mostrelor
3.2.9. Mixer cu vitez mare
3.2.10. Dispozitiv de citire a microalveolelor cu filtru de 650 nm (articole Neogen nr.
9301 i nr. 9302)
3.2.11. Dispozitiv de pipetare cu 12 canale (articol Neogen nr. 9273)
3.2.12. Dispozitiv de pipetare de 100l (articol Neogen nr. 9272)
3.2.13. Capsule pentru dispozitive de pipetare cu 12 canale i de 100l (articol Neogen
nr. 9410)
3.2.14. erveele de hrtie sau material absorbant echivalent
3.2.15. Cup de plastic pentru resturi
3.2.16. Suport pentru micro-alveole (articol Neogen nr. 9402)
3.2.17. Cronometru (articol Neogen nr. 9246)
3.2.18. Marcher rezistent la ap
3.2.19. Sticl de splare (articol Neogen nr. 9400)
3.2.20. 2 recipiente pentru reageni pentru dispozitivul de pipetare cu 12 canale (articol
Neogen nr. 9435)
3.2.21. Ap distilat sau deionizat
3.4. Cerine de pstrare a reactivilor

Setul de reactivi poate fi folosit pn la data expirrii imprimat pe etichet i pstrat la 2-80C
3.5. Precauiii
3.5.1. Soluiile de metanol sunt foarte inflamabile. inei containerul bine nchis i ferii-l
de cldur, scntei, foc deschis i nu fumai n apropierea lui. Este toxic, nu nghiii i nu inhalai
vaporii. Evitai contactul cu pielea.
3.5.2. Pstrai setul la temperatura de 2-80C (35-460F) atunci cnd nu este folosit.
3.5.3. Nu folosii componentele setului dup data expirrii.
3.5.4. Nu amestecai reagenii dintr-un set cu reagenii dintr-un set cu serie diferit.
3.5.5. Nu folosii mai mult de 24 alveole pentru un test.
3.5.6. Folosii tehnicile corespunztoare de pipetare, inclusiv desfacerea capsulelor.
220
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

3.5.7. Folosirea perioadelor de incubare diferite de cele specificate poate duce la rezultate
incorecte.
3.5.8. Setul trebuie s fie adus la temperatura camerei (18-300C, 64-860F) nainte de
folosire.
3.5.9. Evitai pstrarea ndelungat a setului la temperatura mediului nconjurtor.
3.5.10. Nu congelai seturile de testare.
3.5.11. Tratai toate lichidele folosite, inclusiv extrasul de mostr, i echipamentul de
laborator ca i cum ar fi contaminate cu ocratoxin. Trebuie s purtai ntotdeauna mnui i alte
msuri de protecie.
3.5.12. Pentru a evita contaminarea ncruciat, folosii capsule de pipetare i sticle curate
pentru fiecare mostr.
3.5.13. Produsele testate trebuie s aib pH-ul ntre 6 i 8. Pentru reglarea valorii pH
folosii o soluie tampon fosfat cu pH=7,2-7,4.
3.6. Not referitor la procedur
3.6.1 Substrat: Substratul K-Blue este gata de folosire. Substratul trebuie s fie de la
incolor pn la albastru foarte deschis aruncai-l dac a devenit albastru nchis. Turnai volumul
necesar de substrat n vasul cu reagent. Nu turnai substratul nefolosit napoi n sticl.
Acoperii vasul cu reagent pentru a proteja substratul de lumin pn cnd va fi necesar.
3.6.2. Alveolele cu anticorpi: Pstrai alveolele sigilate n folie pn ce vor fi necesare.
Scoatei alveolele din folie numai dup extragerea mostrelor i nceperea procedurii de testare.
3.7.
Prepararea mostrei i extracia
Preparai o soluie de metanol de 50 % prin amestecarea 1 pri de metanol de gradul ACS cu 1

parte de ap distilat sau deionizat pentru fiecare mostr ce urmeaz a fi testat.
Adugai 5 cm3 de mostr reprezentativ la 15 ml de soluie de metanol/ap de 50 % i 7
picturi soluie tampon cu pH-ul 7.2-7.4, agitai bine timp de 5 minute folosind recipientele de
extragere cu capace din setul Veratox pentru extracia OTA.
Filtrai extrasul prin turnarea a cel puin 5 ml prin hrtie de vatman nr. 1 (sau sering cu filtru
Neogen) i colectai filtratul ca mostr.
3.8
Procedura de testare
3.8.1. Lsai toi reagenii s se nclzeasc la temperatura camerei (18-300C) nainte de

folosire.
3.8.2. Scoatei o alveol de amestecare marcat cu rou pentru fiecare mostr ce urmeaz a fi
testat i 5 alveole marcate cu rou pentru substanele de control i plasai-le n
suportul pentru alveole.
3.8.3. Scoatei un numr egal de alveole acoperite cu anticorpi. Punei napoi n ambalajul de
folie cu absorbant de umezeal alveolele cu anticorpi ce nu vor fi folosite. Sigilai
napoi ambalajul de folie pentru a proteja anticorpii. Marcai un capt al benzii cu 1
i plasai banda n sportul de alveole cu captul marcat n stnga. Nu marcai partea
interioar sau fundul alveolelor.
3.8.4. Amestecai reagentul prin agitarea sticluei cu reagent nainte de folosire.
221
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

0
S8
2
S9
5
S10
10
S11
25
S12
S1
S13
S2
S14
S3
S15
S4
S16
S5
S17
S6
S18
S7
S19
Banda1
Banda2
3.8.5. Folosind un dispozitiv de pipetare cu 12 canale, amestecai lichidul din alveole prin
pipetarea lui n sus i n jos de 5 ori. Transferai 100 l n alveolele acoperite cu
anticorpi. Amestecai prin alunecarea suportului pentru micro-alveole napoi i nainte
pe o suprafa plat timp de 10-20 de secunde fr a vrsa reagenii din alveole.
Incubai timp de 10 minute la temperatura camerei (18-300C, 64-860F). Aruncai
alveolele de amestecare marcate cu rou.
3.8.6. Agitai coninutul alveolelor cu anticorpi. Umplei alveolele cu ap distilat sau
deionizat i descrcai-le. Repetai acest pas de 5 ori, apoi ntoarcei alveolele cu faa
n jos pe un erveel de hrtie pn ce va fi absorbit apa rmas.
3.8.7. Turnai volumul necesar de substrat din sticlua cu etichet verde n vasul cu reagent
cu etichet verde.
3.8.8. Cu capsule noi pe dispozitivul de pipetare cu 12 canale, umplei i pipetai 100 l de
substan n alveole. Amestecai prin alunecarea napoi i nainte pe o suprafa plat
timp de 10-20 de secunde.
3.8.9. Incubai amestecul timp de 10 minute.
3.8.10. Vrsai substana rmas i cltii vasul de reagent cu ap.
3.8.11. Turnai soluie de oprire a reaciei din sticlua cu etichet roie.
3.8.12. Scoatei excesul de substan din dispozitivul de pipetare cu 12 canale, umplei
capsulele i pipetai 100 l de soluie de oprire a reaciei n fiecare alveol.
Amestecai prin alunecarea napoi i nainte pe o suprafa plat timp de 10-20
secunde. Descrcai capsulele.
3.8.13. tergei suportul microalveolelor cu un erveel uscat i analizai cu dispozitivul de
citire folosind un filtru de 650 nm. Bulele de aer trebuie s fie eliminate, deoarece ele
pot afecta rezultatele analitice. Rezultatele trebuie s fie citite n timp de 20 de minute
dup adugarea soluiei de oprire a reaciei.
3.8.14. Citii i analizai rezultatele folosind instalaia Awareness Stat Fax Neogen.
3.9. Repetabilitate
Diferena absolut dintre dou rezultate de analiz independente, efectuate pe material
identic, de un operator, folosind acelai echipament, ntr-un interval de timp scurt, nu trebuie s
depeasc limita r a repetabilitii n mai mult de 5% din cazuri.
3.10. Reproductibilitate
Diferena absolut dintre dou rezultate de analiz, efectuate pe material identic, n dou
laboratoare, nu trebuie s depeasc limita R a reproductibilitii n mai mult de 5% din cazuri.
222
Anexa 2 (ontinuare)
la Reglamentarea tehnic privind
fabricrii vinurilor
2.41 Prezena coloranilor sintetici

2.41.1 MA-MD-AS315-08- COLSYN
Descriptori : Colorani de sintez cu caracter acid i bazic, extracie, separarea prin cromatografie
n strat subire
Vinul concentrat la din volum se alcalinizeaz cu o soluie diluat de hidroxid de
sodiu hidroxid de sodiu i se supune extraciei cu eter. Fracia eteric, splat cu ap, este supus
extraciei cu ajutorul unei soluii diluate de acid acetic, care ulterior este alcalinizat cu amoniac
i adus la fierbere n prezena unor fibre proteice, tratate cu sulfat de amoniu i tartrat acid de
potasiu. Colorantul eventual prezent se fixeaz pe fibra proteic. Colorantul este readus n soluie
prin tratarea fibrei cu soluie de acid acetic diluat. Dup evaporarea soluiei de acid acetic,
reziduul este dizolvat ntr-o soluie hidroalcoolic i analizat prin cromatografia n strat subire
pentru a caracteriza colorantul.
Faza apoas, rmas dup extracia n eter conine colorani cu caracter acid, eventual
prezeni eventual n vin. Extracia coloranilor este bazat pe afinizatea lor exclusiv pentru
fibrele de origine animal. Pentru a concentra colorantul, se efectueaz o dubl sau o multipl
fixare succesiv a colorantului pe fibrele proteice, care se iau din ce n ce mai mici. Dac fibra
este colorat, rezult c vinul conine un colorant sintetic, care poate fi caracterizat ulterior prin
cromatografia n strat subire.
2. Aparataj
Plci de sticl 20x20 acoperite cu pudr de celuloz;
Cuve pentru cromatografie
3. Reactivi
Eter sulfuric
Soluie de hidroxid de sodiu de 5%
Acid acetic cristalizabil (glacial) (20 =1,05 g/ml)
Acid acetic diluat: o parte de acid acetic glacial la 18 pri de ap distilat;
Acid clorhidric diluat: o parte de acid clorhidric concentrat (20 =1,19 g/ml) la 10 pri de ap
distilat ;
Soluie de amoniac (20 =0,92 g/ml)
Fibre proteice albe, n prealabil splate, degresate n eter i uscate
Fibre proteice albe, n prealabil splate, degresate n eter, uscate i mbibate conform
procedurii :
Se dizolv 1 g de sulfat de aluminiu cristalin - Al2(SO4)3.18 H2O i 1,2 g de tartrat
acid de potasiu n 500 ml de ap. Se plaseaz n soluia obinut 10 g de fibre
proteice albe, n prealabil splate, degresate n eter i uscate, se agit timp de 1 or,
apoi se las n baie pe 2-3 ore, dup ce se usuc la temperatura ambiant.
223
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Solventul nr.1 pentru analiza cromatografic a coloranilor cu caracter bazic, cu compoziia :

butanol-1......................................................................50 ml
etanol............................................................................25 ml
acid acetic glacial (20 =1,05 g/ml)...10 ml
ap distilat....25 ml
4. Modul de lucru
Analiza coloranilor sintetici de origine bazic
Extracia coloranilor
ntr-o fiol conic de 500 ml se plaseaz 200 ml de vin, se aduce la fierbere i se menine
pn ce volumul se reduce la din volumul iniial. Dup rcire, vinul concentrat este neutralizat
cu o soluie de hidroxid de sodiu de 5% pn la modificarea culorii naturale a vinului.
Se efectueaz extracia n eter dou reprize, a cte 30 ml de eter. Fazele eter, care conin
colorani bazici, eventual prezeni, sunt apoi reunite, iar reziduul de extracie este utilizat pentru
analiza coloranilor sintetici de origine acid.
Soluia eteric este splat de dou ori cu 5 ml de ap, pentru a elimina hidroxidul de
sodiu, apoi se agit minuios cu 5 ml soluie de acid acetic diluat. Dac faza apoas acid obinut
este colorat, acest lucru atest prezena n vin a unui colorant bazic de origine sintetic.
Prezena colorantului bazic de origine sintetic poate fi confirmat prin fixarea sa pe fibrele
proteice mbibate. Pentru aceasta, faza apoas acid obinut conform procedurii sus-indicate
este alcalinizat cu soluie de amoniac de 5%, apoi se introduc 0,5 g fibre proteice mbibate i se
fierbe timp de 5 minute. Fibrele sunt cltite sub un get de ap curgtoare. Dac fibrele rmn
colorate, vinul conine colorant bazic de origine sintetic.
Analiza cromatografic n strat subire
Faza apoas acid, care conine colorantul bazic este concentrat pn la 0,5 ml. Dac
colorantul a fost fixat pe fibrele proteice, acestea sunt tratate la fierbere cu 10 ml de ap distilat i
10 picturi de acid acetic (20 =1,05 g/ml). Dup nlturarea fibrelor, soluia este concentrat
pn la un volum de 0,5 ml.
Pe o plac de sticl acoperit cu celuloz se plaseaz 20 l de aceast soluie concentrat la
3 cm de marginea lateral i la 2 cm de marginea inferioar a plcii. Placa se introduce n cuve cu
solventul nr.1 n aa mod, nct marginea inferioar a plcii s fie scufundat n solvent de 1 cm.
Cnd frontul solventului migreaz pe 15-20 cm de nlime, se retrage placa i se las s se usuce
la aer.
Colorantul este identificat astfel. Se pregtesc soluii de colorani de sintez cu caracter
bazic, care se depun simultan pe placa cromatografic. Ulterior se compar semnalele i se
identific colorantul de sintez prezent n vin.
224
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4.2. Analiza coloranilor sintetici de origine acid

Extracia coloranilor
Pentru testare se folosete reziduul de vin concentrat la i neutralizat dup extracia n
eter (conform p. 4.1.1.). n caz dac testarea coloranilor bazici nu a fost efectuat, ntr-o fiol
conic de 500 ml se plaseaz 200 ml de vin, se aduce la fierbere i se menine pn ce volumul se
reduce la din volumul iniial.
n ambele cazuri, dup rcirea reziduului sau a concentratului de vin se adaog 3 ml de soluie
diluat de acid clorhidric i 0,5 g de ln alb, amestecul fierbe timp de 5 minute. Lichidul se
decanteaz, iar lna este splat sub un get de ap.
Fibrele splate sunt plasate n fiola conic, se adaog 100 ml de ap i 2 ml de acid
clorhidric diluat, apoi se fierbe timp de 5 minute. Se decanteaz lichidul acid, apoi procedura se
repet pn ce lichidul obinut la fierbere este incolor.
Dup ce fibra a fost bine splat pentru a elimina complet lichidul acid, aceasta se
plaseaz ntr-o fiol conic, se adaog 50 ml de ap distilat i 10 picturi de amoniac (20 =0,92
g/ml), apoi se fierbe lent timp de 10 minute, pentru dizolvarea colorantului acid, eventual fixat pe
fibr. Apoi nlturai fibra, fierbei lichidul pentru a evapoara amoniacul i aducei volumul pn
la 10 ml. Dup rcire acidulai cu 2 ml de acid clorhidric diluat (se verific cu ajutorul
indicatorului 1 pictur de lichid se plasez pe hrtia indicator).
n lichidul acidulat se plaseaz 60 mg (aproximativ 20 cm de fibr) proteic alb i se
fierbe timp de 5 minute, apoi se extrage firul i se cltete minuios sub un get de ap. n caz dac
fibra este colorat n rou (vin rou) sau n galben (vin alb), acest fapt demonstreaz prezena
coloranilor sintetici de natur acid.
Dac coloraia fibrei nu este clar, se efectueaz tratamentul cu amoniac i se repet
procedura cu alt fibr de 30 mg (aproximativ 10 cm de fibr). Apariia unei culori slabe, dar
clare, demonstreaz prezena colorantului sintetic.
Dac este necesar o fixare ct mai complet, se repet procedura de fixare-eluie de 4-5
ori, repetnd ntocmai protocolul experimental descris.
Analiza cromatografic n strat subire
La fibrele proteice colorate se adaog 10 ml de ap distilat i 10 picturi de amoniac
(20 =0,92 g/ml), apoi se trateaz la fierbere. Dup nlturarea fibrelor, soluia amoniacal este
concentrat pn la un volum de 0,5 ml.
Pe o plac de sticl acoperit cu celuloz se plaseaz 20 l de aceast soluie concentrat la
3 cm de marginea lateral i la 2 cm de marginea inferioar a plcii. Placa se introduce n cuva cu
solventul nr.2 n aa mod, nct marginea inferioar a plcii s fie scufundat n solvent de 1 cm.
Cnd frontul solventului migreaz pe 15-20 cm de nlime, se retrage placa i se las s se usuce
la aer.
Colorantul este identificat astfel. Se pregtesc soluii de colorani de sintez cu caracter
acid, care se depun simultan pe placa cromatografic. Ulterior se compar semnalele i se
identific colorantul acid de sintez prezent n vin.
2.41.2. GOST R 52470-2005
225
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.41.3. Metoda HPLC, aprobat de Departamentul

Agroindustrial Moldova-Vin12,12.2003
1. OBIECT I DOMENIU DE APLICARE
Prezenta metodic prevede metodele de determinarea prin cromatografie HPLC a

indicilor falsificrii colorani. n vinuri i vinuri materie prim.
2.1. Metoda HPLC de determinare a prezenei coloranilor sintetici prevede:

-nscrierea profilului cromatografic al vinului de analizat;
-compararea acestui profil cromatografic cu profilul cromatografic al vinului naturaletalon;
-compararea acestui profil cromatografic cu profilul cromatografic al colorantului sinteticetalon.
3. APARATUR, MIJLOACE DE MSURARE, MATERIALE, REACTIVI
3.1 Pentu determinarea prezenei coloranilor sintetici prin metoda HPLC se utilizeaz
urmtoarea aparatur, mijloace de msurare, materiale i reactivi:
-cromatograf lichid, nzestrat cu detector DAD;
-coloan Supelcosil LC 18 ( 150mm x 4,6mm ) ;
- microsering tip M 10 de 50 l cu valoarea diviziunii de 2 l
conform PT 2.833-105
- balane analitice de laborator de destinaie general conform GOST 24104 de clasa de
precizie 2 cu limita maxim de msurare 200 g.
- baloane cotate de 100 cm 3 conform GOST 1770.
- pahare pentru cntrit conform GOST 25336.
- pipete gradate de 25,0 ; 50,0 cm 3 conform GOST 29227.
- eprubete gradate sau cilindre de msurat conform GOST 1770.
- acid ortofosforic de 80% , pur pentru analiz conform GOST 6552;
- aceton pur pentru analiz. conform GOST 2603;
- ap distilat conform GOST 6709;
- soluii de colorant sintetic-etalon;
- vin natural (etalon).
Se admite folosirea altor echipamente, mijloace de msurare, vase, reactivi cu
caracteristicile tehnice nu mai joase dect cele indicate.
4. PREGTIREA PENTRU NCERCRI
4.1 Condiiile de lucru:
- temperatura aerului nconjurtor, o C
15-25;
- umiditatea relativ a aerului nconjurtor, %
30-80;
- presiunea atmosferic, mPa
84-106,7;
- tensiunea curentului alternativ care alimenteaz
cromatografele, V
22010;
- frecvena curentului din reea, Hz
501.
4.2 Pregtirea pentru ncercri. Determinarea coloranilor sintetici
4.2.1 Condiiile de cromatografiere la cromatograf-lichid
- coloan
Supelcosil LC 18 ( 150mm x 4,6mm )
- faza mobil
A - acid ortofosforic 8%
B soluia A:aceton (50:50)
226
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

-
temperatura termostatului coloanei

viteza flucsului
detectorul
lungimea undei
25 C0
0,75 ml/minut
DAD
520 n/620 n
4.2.2.Prepararea fazei mobile

Soluia A se prepar prin diluarea acidului ortofosforic concentrat cu ap distilat.
Soluia B se prepar din soluia A i aceton n proporie de 50:50.
Soluiile obinute se filtreaz prin filtru cu membran cu diametrul porilor 0,45
4.2.3 Prepararea soluiei de colorant sintetic-etalon.
n soluie de alcool etilic cu concentraia alcoolic de 10% vol se dizolv aa cantitate de
colorant sintetic ce corespunde culorii vinului de analizat. Soluia obinut se filtreaz prin filtru
cu membran cu diametrul porilor 0,45 .
4.2.4 Pregtirea probei de vin pentru analiz i a vinului-etalon
Proba de vin pentru analizat i proba de vin-etalon se filtreaz prin filtru cu membran cu
diametrul porilor 0,45 .
5.EFECTUAREA ANALIZEI
5.1 Analiza cromatografic cu ajutorul cromatografului-lichid.

5.1.1 n cromatograful adus n regim de lucru consecutiv se ingecteaz cte 50 l vin natural,
vin pentru analizat i soluie de colorant sintetic preparate conform pp 4.2.3-4.2.4
Cromatografierea se efectueaz n regimul descris n p. 4.2.1
5.1.2 Profilurile cromatografice obinute se compar ntre ele i se fac concluzii despre prezena
sau lipsa coloranilor sintetici.
6 . CONDIII PRIVIND SECURITATEA
6.1 La montarea, instalarea i deservirea cromatografelor se admit persoane cu gradul de

calificare nu mai mic de doi conform regulilor de exploatare tehnic i care au nsuit tehnica
securitii la manipularea cromatografului, altor aparate electrice (generatoare de hidrogen,
compresoare) i cu utilizarea gazelor comprimate.
227
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.42. Prezena ndulcitorilor sau edulcoranilor sintetici

1.
Principiul metodelor
Metoda de referin
Cercetarea saharinei (sulfimida benzoic) a dulcinei (p- etoxifeniluree),a ciclamatului(ciclohexilsulfanat) i a P-4000 (2N propoxi-2-amino-4-nitrobenzen).
n dependen de concentraia vinului, saharina, dulcina i P-1000 sunt extrase n mediu acid cu
benzenul;ciclamatul este extras din vin dup aceast extracie benzenic cu acetat de etil (este
necesar de a respecta ordinea acestor extracii). Resturile(rmiele) de evaporare a solvenilor
sunt supuse la cromatograf sub strat subire.
Saharina i ciclamatul sunt caracterizate prin cromatografia cu placa de celuloz (solvent :
aceton-acetat de etil-amoniac),prima n extract benzonic, a doilea n extract prin acetat de etil
dup purificare printr-o splare a eterului.
Aceti colorani, dezvluii prin pulverizarea unei soluii de benzidin-anilin-acetat de cupru,
se separ cu urmtoarele: Rf:0,29 pentru ciclamat,0,46pentru saharin.
P-4000 i dulcina sunt caracterizate prin cromatografia sub strat de poliamid, n extract
benzenic(solvent:toluen-metanol-acid acetic glacial).Aceti ndulcitori, pui n eviden prin
pulverizarea unei soluii de p-dimetilaminobenzaldehid,se separ cu urmtoarele: Rf:0,60 pentru
dulcin, 0,80 pentru P-4000.
Metoda uzual
Cercetarea saharinei, a dulcinei i a ciclamatului.
Aceti ndulcitori,extrai din vin printr-un schimbtor de ioni lichid, apoi reextrai cu
ajutorul amoniacului diluat, sunt caracterizate prin cromatografia sub strat subire de un amestec
de praf de celuloz i praf de poliamid (solvent:xilen-propanol, n-acid acetic cristalizabil-acid
formic).Ei sunt pui n eviden datorit fluorescenei lor albastr pe fon galben, care se observ n
lumina UV dup pulverizarea unei soluii de 2,7 diclorfluoroscein.
O pulverizare ulterioar a soluiei 1,4-dimetilaminobenzaldehid permite de a diferenia
dulcina, care singur d un spot oranj, vanilina i esterii acidului
p-hidroxibenzoic care
migreaz cu acelai Rf.
2.Metoda de referin
Cercetarea saharinei, ciclamatului, a dulcinei i P-4000
2.1 Utilaj
2.1.1 Cuv cromatografic
2.1.2 Seringi micrometrice sau micropipete
2.1.3 Tub separator cu de 15mm i lungimea de 180mm,nzestrat cu
un robinet.
2.1.4 Baie de ap la 1000C
2.1.5 Baie de aburi cu temperatura reglabil, care poate s ating 1250C
228
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

2.2 Reactive
2.2.1 Solveni de extracie
-benzen
-acetat de etil
2.2.2 Solveni pentru cromatografie
N01, de amestecat:
aceton....................................60 pri
acetat de etil............................30 pri
amoniac concentrat.................10 pri, (20=0,92g/ml)
N02, de amestecat:
toluen ...................................... 90 pri
metanol.....................................10 pri
acid acetic glacial .....................10 pri (20=1.05g/ml)
2.2.3 Plci pentru cromatografie (20x20cm);
- plci cu strat de praf de celuloz (ex.Watman cc 41)
- plci cu strat de pulbere de poliamid (ex. Merck)
2.2.4 Reactiv de revelaie (de descoperire) pentru saharin i ciclamat.
A pregtit:
- soluie alcoolic de benzidin de 250 mg n 100ml etanol,
- soluie sturat de acetat de cupru Cu(C2H3O2)2 x H2O,
- anilin recent distilat.
A amesteca: 15ml soluie benzidin, 1ml anilin i 0,75ml soluie saturat de acetat de cupru.
Aceast soluie trebuie s fie pregtit n mod extemporaneu. Ea cores-punde volumului necesar
pentru determinarea unei plci de 20x20cm.
2.2.5
Acid clorhidric diluat la (/),
2.2.6 Acid azotic n soluie 25 p.100 (/),
2.2.7
Reactiv pentru determinarea P-4000 i a dulcinei:se dizolv 1g
de1,4-p-dimetilaminobenzaldehid n 50 ml de metanol; se adaug 10 ml de 25% de acid azotic la
25p.100; se aduce nivelul la 100 ml cu metanol.Se utilizeaz 15 ml de acest reactiv pentru a
determina o plac de 20x20cm.
2.2.8
Soluie hidroalcoolic de ciclamat la 0,10g p.100
Se dizolv 100mg de sare de Na sau de Ca a acidului ciclohexilsulfamic n
100ml de amestec din pri egale de ap i etanol.
2.2.9
Soluie apoas de saharin la 0,05 g p.100(m/v)
2.2.10
Soluie de dulcin la 0,05g p/100 ml de metanol
2.2.11
Soluie de P-4000 la 0,05g n 100 ml de metanol
2.3
Mod de lucru
2.3.1 Extracia
100 ml de vin turnate ntr-un vas cilindric,sunt evaporate rapid la fierbere pn le
reducerea volumului la 30 ml, ndreptnd un jet de aer rece la suprafaa recipientului. Se las s se
rceasc.
Se aciduleaz cu 3 ml de acid HCl diluat la .Se trece (se transvazeaz) ntr-o fiol
conic de 500 ml nzestrat cu un dop rodat, se adaug 40 ml benzen i se agit cu un agitator
mecanic timp de 30 min.Se transvazeaz ntr-o fiol de decantare (limpezire) pentru a separa faza
organic care va fi centrifugat n caz de emulsie.
229
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

Faza organic se pune ntr-o fiol conic cu dop rodat. Vinul extras deja de benzen i care
corespunde stratului inferior n fiola de decantare, se toarn ntr-o fiol conic de 500 ml cu dop
rodat, cu 40 ml de acetat de etil.Se agit 30 min.i se separ faza organic ca n modul anterior,
avnd grij s se recupereze doar fracia organic fr vin (fr a trage vin).
Deasupra unei bi de ap la 100 0C, de a evapora (de a supune evaporrii) fiecare solvent
de extracie n capsule de 50-60 mm n diametru, n cantiti mici, lansnd un curent de aer rece pe
suprafaa capsulelor. De continuat evaporarea pn ce reziduul va avea o consisten siropoas (de
sirop), ntrerupnd nainte de evaporarea complet.
A relua reziduul din capsula unde s-a evaporat extractul benzenic cu 0,5 ml soluie etanolap (1:1).Se convine de a relua reziduul prima dat cu 0,25 ml soluie hidroalcoolic i apoi de a
spla capsula cu restul 0,25 ml de oluie.Se reunete extractul hidroalcoolic ntr-un tub mic cu dop
rodat
(extractul B).
Reziduul din capsula n care acetatul de etil (care conine ciclamatul) a fost evaporat, este
reluat cu 0,5 ml de ap pe care o toarn n tubul separator.Se spal capsula cu 10 ml eter etilic,
apoi eterul se adaug la coninutul tubului separator. Se agit energic timp de 2 min. i se separ
stratul inferior ntr-o eprubet n care a fost prealabil turnate 5 ml etanol.Se obine n total 1 ml
de soluie hidroalcoolic care conine eventual ciclamatul (extractul A).
2.3.2
Cromatografia
Saharina i ciclamatul
Pentru a determina saharina i ciclamatul se utilizeaz o plac de celuloz, o jumtate din
plac pentru a determina ciclamatul i cealalt jumtate pentru saharin.
Pentru aceasta se depune de la 5 la 10 l extract A i 5 l soluie etalon de ciclamat. Apoi
se depune pe a doua parte a plcii de la 5 la 10l extract B i 5l soluie etalon de saharin.Placa
astfel pregtit se pune n cuva cromatografic coninnd solventul n 01 (aceton-acetat de etilamoniac); se las s migreze pn la o nlime de la 10 la 12 cm.
Se scoate placa din cuv i se usuc cu aer cald, se pulverizeaz regulat i ncetior placa
cu reactiv cu benzidin (17-18 ml pentru fiecare plac). Se usuc placa cu aer rece.Apoi placa se
pune ntr-o baie de aburi meninut la 120-125 0C timp de 3 minute.Spoturile apar cenuiu nchis
pe fon maro (cafeniu) deschis; ele se nchid la culoare (se nnegresc) cu timpul.
P-4000 i dulcina
Se depune 5 l de extract B i 5l de soluii etalon de dulcin i P-4000 pe plac de
poliamid. Placa astfel pregtit se plaseaz n cuva cromatografic care conine solventul n02
(toluen-metanol acid acetic). Se las s migreze pn la o nlime de la 10 la 12 cm.
Se scoate placa din cuv;se usuc cu aer rece.Apoi se pulverizeaz cu 15 ml de reactiv cu
p-dimetilaminobenzaldehid, dup aceea se usuc cu aer rece pn ce apar spoturile de culoare
galben-oranj care corespund dulcinei i P-4000.
Sensibilitate (Precizie)
Reactivul cu benzidin permite de a pune n eviden spoturile ce corespund
la 2 g saharin i la 5 g ciclamat.
230
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

Reactivul cu P-dimetilaminobenzaldehid permite punerea n eviden a
0,3 g de dulcin i 0,5 g de P-4000.
Aceast metod permite de a determina (innd cont de randamentul anumitor extracii):
saharin.......................
2-3 mg/l
ciclamat....................... 40-50 mg/l
dulcin.........................
1 mg/l
P-4000......................... 1 la 1,5 mg/l
3.Metoda uzual
Determinarea saharinei, ciclamatului i a dulcinei.
Aparate
3.1
3.1.1 Dispozitiv pentru expunerea n strat subire
3.1.2. Plac de sticl 20x20 cm
Pregtirea plcilor: se mestec uor fr ap 9g de praf de celuloz i 6g de praf de
poliamid.Se adaug agitnd 60 ml de metanol.Se expune peplci sub o grosime de 0,25 mm.Se
usuc timp de 10 minute la temperatura de 700C . Cantitile alese sunt suficiente pentru a
pregti5 plci.
3.1.1. Baie de mare la temperatura reglabil sau evaporator rotativ.
3.2.2. Lamp cu raze UV pentru examinarea plcilor cromatografice.
3.1 Reactive
3.2.1. Ester de petrol (40-600)
3.2.2. Schimbtor de ioni lichid (ex.Amberlite (A-2) )
3.2.3.Acid acetic diluat la 1/5 (v/v)
3.2.4. Soluie de schimbtor de ioni : 5 ml de schimbtor de ioni sunt agitai minuios cu 95 ml
eter de petrol i 20 ml acid acetic diluat la 1/5 (v/v). Se utilizeaz faza superioar.
3.2.5. Acid azotic n soluie 1 M
3.2.6. Acid sulfuric la 10 p.100 (/)
3.2.7. Amoniac diluat la (/)
3.2.8. Praf de poliamid
3.2.9. Praf de celuloz
3.2.10. Solvent pentru cromatografie :
xilen....................................................... 45 pri
Propan-1-ol............................................
6 pri
Acid acetic cristalizabil.........................
7 pri (20=1,05 g/ml)
Acid formic 98-100%............................... 2 pri
3.2.11. Revelatori ( indicii ):
- soluie la 0,2g p.100 de 2,7-diclorfluoroscein n etanol (m/),
-soluie de p-dimetilaminobenzaldehid: se dizolv 1g de p-dimetilaminobenzaldehid
plasat ntr-o fiol cotat de 100 ml cu aproximativ 50 ml etanol. Se adaug 10 ml acid azotic
diluat la 25 p.100 (/) i se aduce la cot cu etanol.
231
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

3.2.12. Soluii etalon:
- soluie de dulcin la 0,1g p.100 ml n metanol;
- soluie de saharin la 0,1g p.100 ml ntr-un amestec de metanol i ap n pri egale;
- soluie de ciclamat:soluie ce conine 1g de sare de Na sau de Ca al acidului
ciclohexilsulfamic n 100 ml de amestec de metanol i ap n pri egale;
- soluie de vanilin la 1g p.100 ml ntr-un amestec de metanol i ap n pri egale;
- soluie de ester al acidului p-hidroxibenzoic la 1g p 100 ml n metanol.
3.2
Mod de lucru
50 ml de vin sunt turnate ntr-o fiol de decantare,se aciduleaz cu 10 ml acid sulfuric diluat
i extrase de 2 ori cte 25 ml ,de fiecare dat ,din soluie de schimbtor de ioni sunt splate n 3
etape ,de fiecare dat ,50 ml de ap care se vars , apoi n 3 etape,de fiecare dat ,15 ml de
amoniac diluat. Soluiile amoniacale reunite sunt mai apoi evaporate atent la 500C pn la uscare
deasupra unei bi de ap ntr-un evaporator rotativ. Reziduul este reluat cu 5 ml aceton i dou
picturi de acid azotic n soluie M, filtrat i din nou evaporat n sec la temperatura de 700C
deasupra bii de ap. Trebuie de evitat fierberea ndelungat i la temperaturi mai mari de 700C.
Reziduul este reluat cu 1 ml metanol.De la 5 la 10l de aceast soluie i 2 l de soluii etalon
sunt depuse pe plac. S migreze solventul (xilen-propanol-acid acetic-acid formic) la o nlime
n jur de 15 cm, ceea ce necesit aproape timp de 1 or.
Dup uscarea la aer, soluia de diclorfluoroscein este pulverizat pe plac. Saharina i
ciclamatul apar imediat sub form de pete clare (deschise) pe un fon de culoarea somonului. La
examenul n lumina UV (254 sau 360 nm), cei 3 ndulcitori apar fluoresceni albatri n fon
galben.
ndulcitorii se separ, din regiunea de jos n sus a plcii, n ordinea urmtoare: ciclamatul,
saharina, dulcina. Vanilina i esterii acidului p-hidroxibenzoic migreaz cu acelai rf ca i
dulcina. Pentru a identifica dulcina n prezena acestor substane, placa trebuie mai apoi
pulverizat cu o soluie de p-dimetil aminobenzaldehid. Dulcina apare sub forma de pat oranj,
n timp ce celelalte substane nu reacioneaz.
Sensibilitate (precizie) cantitatea limit determinat pe placa cromatografic este de 5 g pentru
toate 3 substane.
Aceast metod permite de a determina:
- saharina...........................10 mg/l
- ciclamatul........................50 mg/l
- dulcina.............................10 mg/l
232
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.43. Prezena aromatizatorilor sintetici

1. OBIECT I DOMENIU DE APLICARE
Prezenta metodic prevede metodele de determinarea prin gaz-cromatografie

falsificrii aromatizatori sintetici n vinuri i vinuri materie prim.
a indicilor
2.1 Metoda GH de determinare a prezenei aromatizatorilor sintetici prevede:

nscrierea aromogramei cromatografice a vinului de analizat;
compararea acestei aromograme cromatografice cu aromograma
cromatografic a vinului natural-etalon;
compararea acestei aromograme cromatografice cu aromograma
cromatografic a aromatizatorului sintetic-etalon.
3. APARATUR, MIJLOACE DE MSURARE, MATERIALE, REACTIVI
3.1 Pentru determinarea prezenei aromatizatorilor sintetici prin metoda GH se utilizeaz

urmtoarea aparatur, mijloace de msurare, materiale i reactivi:
- gaz- cromatograf de analiz nzestrat cu detector de ionizare cu flacr;
- coloan capilar HP INNOWax (Crosslinked Polyethilene Glicol) cu lungimea de 30 m
i diametrul 0,32 mm;
- microseringi
de 10 l cu valoarea diviziunii de 1-2 l, conform documentelor
normative de produs n vigoare;
- reductoare pentru oxigen, conform documentelor normative de produs n vigoare ;
- reductoare pentru hidrogen, conform documentelor normative de produs n
vigoare;
- balane analitice de laborator de destinaie general, conform GOST 24104 cu clasa de

exactitate 2 i limita maxim de cntrire 200 g;
- set de greuti de uz general G-2- 110 sau G-2-210, conform GOST 7328;
- cronometru conform documentelor normative de produs n vigoare;
- baloane cotate cu capacitatea 50, 100 cm 3, conform GOST 1770;
- phrele pentru cntrit, conform GOST 25336;
- pipete gradate cu capacitatea 0,2; 1,0; 5,0; 10,0 cm 3, conform GOST 29227;
- hidrogen tehnic de puritate superioar, conform GOST 3022. Se admite utilizarea
generatoarelor de hidrogen;
- azot gazos i lichefiat, conform GOST 9293. Se admite utilizarea generatoarelor de
hidrogen;
- aer comprimat, conform GOST 17433 . Se admite utilizarea compresoarelor de orice tip,
care asigur presiunea i puritatea necesar a aerului;
- ap distilat, conform GOST 6709.
- alcool etilic rafinat conform GOST 5962.
- eter dietilic chimic pur sau pur pentru analiz conform documentelor normative n
vigoare;
233
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

- soluii de aromatizator sintetic- etalon;
- vin natural (etalon).
Se admite folosirea altor echipamente, mijloace de msurare, vase, reactivi cu
caracteristicile tehnice nu mai joase dect cele indicate.
4. PREGTIREA PENTRU NCERCRI
4.1 Condiiile de lucru:
- temperatura aerului nconjurtor, o C
- umiditatea relativ a aerului nconjurtor, %
- presiunea atmosferic, mPa
- tensiunea curentului alternativ care alimenteaz
cromatografele, V
- frecvena curentului din reea, Hz
15-25;
30-80;
84-106,7;
22010;
501.
4.2. Pregtirea pentru ncercri determinarea aromatizatorilor sintetici

4.2.1. Condiiile de cromatografiere la gaz-cromatograf
Debit volumic de gaz, cm3/ minut
gaz-purttor (azot)
18-20
hidrogen
35
aer
350
Temperatura, o C
evaporizatorului
240
detectorului
250
coloanei:
nclzirea izotermic
35/ 10 minute
nclzirea cu viteza
10/minut, 35-235
nclzirea izotermic
235/10 minute
rcirea
235-35
Volumul probei injectate, l
Lungimea coloanei, cm
3000
Diametrul interior al coloanei, mm
0,32
Durata analizei, minute
40
234
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor

4.2.2. Prepararea soluiei de aromatizator sintetic-etalon.
n soluie de alcool etilic cu concentraia alcoolic de 10 % vol se dizolv aa cantitate de
aromatizator sintetic ce corespunde aromei vinului de analizat. 25 ml de soluie obinut se
ntroduc ntr-un cilindru cu dop lefuit, se adaug 6-8 g de NaCl cristalic, se amestec bine ,
apoi se adaug 2 cm3 ester dietilic. Se efectueaz extragerea timp de 10-15 minute .Se las pn la
stratificare. Pentru analiz se folosete stratul superior.
4.2.3. Pregtirea probei de vin pentru analiz i de vin-etalon
25 ml de vin se ntroduc ntr-un cilindru cu dop lefuit , se adaug 6-8 g de NaCl cristalic,
se amestec bine , apoi se adaug 2 cm3 ester dietilic. Se efectueaz extragerea timp de 10-15
minute .Se las pn la stratificare. Pentru analiz se folosete stratul superior.
5. EFECTUAREA ANALIZEI
5.1 Analiza cromatografic cu ajutorul gaz-cromatografului .

5.2. n cromatograful adus n regim de lucru consecutiv se ingecteaz cte 2 l de extracte
obinut conform p.p. 4.3.2-4.3.3 . Cromatografierea se efectueaz n regimul descris n p. 4.3.1
5.3. Aromorgamele obinute se compar ntre ele i se fac concluzii despre prezena sau lipsa
aromatizatorilor sintetici.
6. CONDIII PRIVIND SECURITATEA
6.1 La montarea, instalarea i deservirea cromatografelor se admit persoane cu gradul de

calificare nu mai mic de doi conform regulilor de exploatare tehnic i care au nsuit tehnica
securitii la manipularea cromatografului, altor aparate electrice (generatoare de hidrogen,
compresoare) i cu utilizarea gazelor comprimate.
235
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.44 Analiza microbiologic a musturilor i vinurilor

2.44.1 MA-MD-AS4-01-ANMICR
1. OBIECT
Analiza microbiologic are ca scop urmrirea fermentrilor alcoolice i/sau malo-lactice i

depistarea riscurilor de contaminare microbian, cea ce permite de a detecta toate anomaliile, nu
numai n produsul finit, dar i de asemenea pe parcursul la diferite etape de fabricare.
Note:
Toate manipulrile trebuie se execut cu respectarea condiiilor aseptice uzuale la
lucrrile de microbiologie, utiliznd materiale sterile, n apropierea flcrii unui bec Bunsen sau
ntr-o camer cu flux laminar i prin flamarea orificiilor pipetelor, vilor, flacoanelor, etc ...
nainte de a efectua analiza microbiologic, este necesar de a preleva corect probele pentru
analiz.
2 DOMENIUL DE APLICARE
Analiza microbiologic poate fi aplicat vinurilor, musturilor, mistelelor i tuturor acelor

produse nu numai cnd ele snt alterate de o activitate microbian.
3 TEHNICILE DE ANALIZ MICROBIOLOGIC
n dependen de informaia care dorim s- o obinem, se poate efectua analiza

microbiologic recurgnd la urmtoarele tehnici:
3. 1 Analize cu meninere:
3.1.1 Analize cu meninere la aer
3.1.2 Analize cu meninere n etuve
3.2 Detectarea, identificarea microorganismelor i numrarea direct a drojdiilor:

3.2.1 Examenul microscopic al lichidelor i a depozitelor.
3.2.2 Colorarea cu albastru de metilen.
3.2.3 Colorarea Gram.
3.2.4 Cercetarea catalazelor.
3.2.5 Numrarea direct a drojdiilor la microscop.
3.3 Numrarea microorganismelor prin culturi:
3.3.1 Culturi n i pe mediu solid sau pe suport solid.
3.3.2 Culturi pe plac (suport).
3.3.3 Culturi pe membrane filtrante.
3.3.4 Culturi n medii lichide Numrul Probabil (NPP).
236
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4 MATERIALE
Camer cu flux laminar;

Microscop;
Etuv cu diapazonul ntre 20 i 35 C, reglat de un termometru;
Etuv pentru sterilizare la uscat, termostatat la 180 C, reglat de un termometru;
Etuv cu CO2 sau urcioare ermetice nzestrate cu un generator de CO2 sau de alte
dispozitive care distribuie o atmosfer mbogit cu CO2;
pH-metru etalonat n uniti de pH, care permite msurri cu 0,1 uniti;
Autoclav care permite sterilizarea potrivit cu vapori a materialelor i a mediilor de
cultur;
Centrifug;
Sistem de nclzire a anumitor preparate;
Aragaz;
Balan cu exactitatea de zecime de mg;
Hematimetru-numrtor de celule Neubauer sau echivalent;
Dispozitiv pentru filtrare steril cu membrane filtrante cu diametru de 13 mm sau 25 mm,
porozitate de 0,22 m, din esteri de celuloz sau fluorid de polivinilidin sau echivalente, cu
margini hidrofobe;
Becul Bunzen;
Fiole cu capacitatea de 100 i 1000 ml;
Erlenmeier de 100, 150, 300 i 1000 ml nchise cu dop din vat de bumbac, sterilizate;
Epruvete de 50, 100, 300, 500 i 1000 ml;
Pipete de 1, 10, 15, 20 i 25 ml, sterilizate;
evi centrifuge sterile;
evi pentru autoclave din sticl, fr margine, cu dimensiunile 160 x 16 mm i 18 x 18
mm, nchise cu dop din vat de bumbac, n prealabil sterilizate, sau dispozitiv echivalent;
Lame;
Lamele (foie);
Pipete Paster sterilizate;
Ans i miner sterilizate;
Hrtie de filtru;
Ulei de imersiune;
Alcool de 70 i 95 % vol.
Not:
Se pot folosi i alte echipamente cu condiia c ele vor avea caracteristici echivalente.
237
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. TEHNICA DE PRELEVARE A PROBELOR
Este necesar ca probele s fie reprezentative. Se utilizeaz pipete pentru butoi i tub lung
de sticl pentru putin. Trebuie de efectuat prelevrile n locuri n prealabil sterilizate pentru a
evita contaminrile exterioare care produce greeli pozitive. Aadar, pentru a efectua prelevrile
cu robinetul degusttor din butoaie (putin), este necesar de a lsa s curg cva litri de prob.
Trebuie de dezinfectat suprafeele de contact, de exemplu, cu alcool de 70 % n volume sau cu
flacr de gaz.
Analiza probelor trebuie efectuat ct mai posibil de rapid dup prelevare. n timpul
transportului i stocrii probele trebuie plasate la rece (4 5 C) pentru a stabiliza flora
microbian.
Experiene cu meninere:
Obiect:
Aceste experiene se efectueaz cu scopul de a prentmpina riscurile de alterare
microbian.
Principiul:
Aceast tehnic este bazat pe modificrile organoleptice (tulbureli, opalescen, depozite,
culori nedorite) prezente n vin cnd el este supus n anumite condiii de aerare i de temperatur,
care pot provoca activiti microbiene. Aceasta se confirm prin examenul microscopic asupra
verificrii naturii alterrii.
1. Modul de lucru:
1.1 Probe cu meninere la aer:
O mostr de 50 ml de vin dup filtrare grosier prin hrtie de filtru steril este plasat ntrun Erlenmeyer steril de 150 ml astupat cu dop din vat de bumbac i lsat la temperatura ambiant
n decurs de 3 zile. Limpiditatea, culoarea, prezena eventual a unei tulbureli, a unui sediment, a
unei opalescene sunt examinate n funcie de timp. Un examen microscopic este efectuat n cazul
unei tulbureli, unui sediment, unei opalescene sau unei culori nedorite.
1.2 Probe cu meninere n etuv:
O mostr de 100 ml de vin dup filtrare grosier prin hrtie de filtru steril este plasat ntrun Erlenmeyer steril, astupat cu dop din vat de bumbac, este ntrodus ntr-o etiv la 30 C i
este examinat dup cel puin 72 h. Alterarea organoleptic poate servi ca indice de dezvoltare
microbian. Atunci este necesar de efectuat un examen microscopic.
2. Detectarea, diferenierea microorganismelor i numrarea drojdiilor:
2.1 Examenul microscopic al lichidelor i al sedimentelor:
Obiectiv:
Examenul microscopic este necesar de efectuat cu scopul de a detecta i de a diferenia
drojdiile de bacteriile eventual prezente.
Totodat, examenul microscopic nu permite de a deosebi microorganismele vii de cele
moarte.
238
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Not:
Cu o colorare vital, se poate de efectuat o estimare a drojdiilor vii.
Principiul:
Aceast tehnic este bazat pe mrirea efectuat la microscop care permite de a observa
microorganismele, mrimea crora este de ordinea micronilor.
Modul de lucru:
Examenul microscopic poate fi efectuat direct la lichide sau la sediment.
Examinrile directe a lichidelor prezint interes doar numai cnd populaia este suficient de
nalt (plus 5 x 105 celule/ml).
Cnd vinul prezint o populaie de microorganisme mic, este necesar de efectuat o
concentraie. Astfel, se centrifugheaz circa 10 ml de vin la 3000 5000 rotaii pe minut timp de
5 15 minute. Apoi se decanteaz lichidul de la suprafa, i se efectueaz o omogenizare a
sedimentului cu lichidul care a rmas la fundul tubului de cerntrifug.
Pentru a realiza examenul microscopic, se plaseaz pe o lam de sticl portobiect, cu o
pipet Paster steril, o pictur din proba de lichidul i sedimentul omogenizate, se acoper cu o
lamel i se plaseaz sub platina microscopului. Se examineaz n cmp clar sau, de preferin n
contraste de faze, care permit de a observa mai detailat microorganismele. Se utilizeaz n
general o mrire de 400-1000 diametre.
2.2 Colorare vital cu albastru de metilen:
Obiectiv:
Colorarea vital cu albastru de metilen se face n scopul diferenierii drojdiilor vii de cele
moarte.
Principiul:
Aceast colorare este bazat pe prezena n celulele vii a enzimelor care efectueaz
reducerea colorantului. Ca exemplu, albastru de metilen este redus n leucoderivate
de
celulele vii care rmn incolore. Celulele moarte absorb colorantul i evident se coloreaz n
albastru.
Reactivi:
Soluie de albastru de metilen de 0,1 %.
Prepararea: se dizolv 0,1 g de albastru de metilen n 100 ml de ap distilat ntr-un
Erlenmeer. Se filtreaz prin hrtie. Soluia trebuie s fie proaspt (recent) preparat.
Modul de lucru:
Se plaseaz pe o lam o pictur de prob i o pictur de colorant. Se amestec cu un fir
(a, srm) i dup 5 minute se studiaz la microscop n cmp luminos.
Rezultatele:
Celulele vii rmn incolore i celulele moarte se prezint colorate n albastru.
Note:
Aceste metode de colorare nu snt cu siguran i se utilizeaz doar pentru numrri
aproximative, ele nu snt recomandate pentru bacterii. Pentru efectuarea diferenierilor ntre
239
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
microorganismele drojdii i bacterii vii i moarte, trebuie de aplicat nc i alte tehnici

mai avansate (plus) elaborate ca, de exemplu, acelea care utilizeaz microscopie epifluorescen.
2.3 Colorare dup Gram:
Obiectiv:
Colorarea dup Gram are ca scop diferenierea bacteriilor lactice (Gram pozitiv) de
bacteriile acetice (Gram negative) i deasemenea de a observa morfologia lor.
Note:
Trebuie de inut cont de faptul c colorarea dup Gram nu este conclisiv, deoarece alte
bacterii pot fi prezente n sedimentele cu bacterii lactice i bacterii acetice.
Principiul:
Aceast colorare se bazeaz pe diferena prezent ntre bacteriile Gram pozitive i Gram
negative datorat structurii i compoziiei chimice diverse a perilor lor celulari. n bacteriile
Gram negative pereii snt bogai n lipide i au o cantitate foarte redus de peptidoglucane, ceea
ce permite ptrunderea alcoolului care dizolv complexul violet de genian-iod care se formeaz
lsnd celulele incolore, care apoi se recoloreaz n rou de ctre sofranine. Din contra, pereii
celulelor de bacerii Gram-pozitive au o cantitate mare de peptidoglucane i o concentraie slab
de lipide. Astfel, grosimea pereilor de peptidoglucane i dehidratarea produs de alcool nu
permite ptrunderea alcoolului n celul, care conserveaz (pstreaz) colorarea violet n
albastru-nchis de complexul violet de genian-iod.
S-au efectuat multe modificri a tehnicii de colorare dup Gram. Colorarea dup Gram
perde semnificaia sa, dac este realizat asupra unei culturi foarte vechi (n vrst). Astfel, sua
care este n faza de cretere exponenial pe parcurs de 24 48 ore.
Soluii:
Apa se utilizeaz doar distilat.
1 Soluie de violet de genian:
Preparare: se cntresc 2 g de violet de genian )sau cristali violei), se nrdoduc ntr-un
Erlenmeer de 100 ml i se dizolv n 20 ml de alcool de 95 % vol. Se dizolv 0,8 g de exalat de
amoniu n 80 ml de ap distilat. Se amestec aceste dou soluii i se utilizeaz numai timp de 24
ore. Se filtreaz prin hrtie n momentul folosirii. Se pstreaz ferit de lumin n flacon nchis.
2 Soluie de lugol:
Preparare: Se dizolv 2 g de iodur de potasiu ntr-o cantitate mic de ap (4-5 ml) i, n
aceast soluie saturat, se dizolv 1 g de iod. Volumul se completeaz pn la 300 ml cu ap
distilat. Se pstreaz ferit de lumin n flacon nchis.
3 Soluie de safranine:
Preparare: se cntresc 0,5 g de safranine ntr-un Erlenmeer de 100 ml, se dizolv n 10 ml
de alcool de 95 % vol. i se adaog 90 ml de ap. Se agit. Se pstreaz ferit de lumin n flacon
nchis.
Modul de lucru:
Se efectueaz o rsdire (repicare, semnare) de bacterii n mediu lichid sau solid. Se
culeg bacterii de cultur tinere din sediment (dup centrifugarea culturii lichide) sau direct din
mediul solid cu o toart sau un fir i se amestec ntr-o pictur de ap steril. Se formeaz un
strat pe o lam prin expunerea unei picturi de suspensie microbian. Se las s se usuce stratul.
Apoi, se efectueaz o fixare, plasnd repede lama de 3 ori n interiorul unei flocri a unui bec
Bunsen sau printr-o tehnic echivalent.
Dup rcire se efectueaz colorarea.
240
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Colorare:
Se vars pe stratul fixat cteva picturi de soluie violet de genian. Se las s acioneze
timp de 2 minute i se spal cu ap.
Se vars 1 sau dou picturi de soluie de lugol. Se las s acioneze timp de 30 secunde.
Se spal cu ap i se usuc cu hrtie de filtru.
Se vars alcool de 95 % vol., se las s acioneze timp de 15 secunde. Se cltete cu ap i
se usuc cu hrtie de filtru.
Se vars cteva picturi de soluie de safranine, se las s acioneze timp de 10 secunde. Se
spal cu ap i se usuc cu hrtie de filtru.
Se instaleaz pe stratul colorat o pictur de ulei de imersie.
Se observ la microscop cu obiectivul de imersie n cmp luminos.
Rezultatele:
Bacteriile lactice rmn colorate de la violet pn la albastru nchis (Gram pozitive).
Bacteriile acetice snt colorate n rou (Gram negative).
2.4 Cercetarea catalazei:
Obiectiv:
Aceast cercetare este cu scopul de a face distincia dintre bacteriile acetice i bacteriile
lactice. Levurile i bacteriile acetice au o reacie pozitiv. Bacteriile lactice dau o catalaz
negativ.
Note:
Trebuie de inut cont de faptul c cercetarea catalazei nu este conclusiv, cci alte bacterii
care pot fi prezente independent de bacteriile lactice i acetice.
Principiul:
Cercetarea catalazei este bazat pe proprietatea c microorganismele aerobe descompun
peroxida de hidrogen cu eliberarea oxigenului:
catalaza
2 H2O2 _-------------- 2H2O + O2
Reactiv:
Soluie de peroxid de hidrogen de 3 % volume.
Prepararea: se msoar 10 ml de peroxid de hidrogen de 30 % volume ntr-o colb cu
capacitatea de 100 ml i se completeaz volumul cu ap distilat proaspt pregtit (fiart). Se
agit i se menine n frigider ntr-un flacon nchis. Soluia trebuie s fie proaspt (recent)
pregtit.
Modul de lucru:
Se plaseaz o pictur de peroxid de hidrogen de 3 % volume pe o lam (sticl) i pe
aceast pictur puin colonie tnr. Acestea liber se gazeaz, debutul cruia n cultur continu
catalasa. Uneori, este dificil de a observa direct degajarea gazoas, numit de colonia de bacterii,
este nc necesar de a efectua observaii la microscop (obiectiv x 10).
241
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.5 Numrarea direct a levurilor la microscop:

Obiectiv:
Numrarea direct cu microscopul are drept scop evaluarea populaiei totale de levuri (vii
i moarte).
Not:
Aceast tehnic nu este indicat numai pentru numrarea levurilor. Numrarea baceriilor
este dificil i aproximativ din motivul mrimii mici, i, principal din cauza prezenei
particulelor coloidale. Se poate de utilizat aceast tehnic pentru estimarea, cu mrire, celulelor
vii folosirea colorrii vitale cu albastru de metilen.
Principiul:
Tehnica este bazat pe numrarea microorganismelor ntr-un volum constant din eantion
cu ajutorul microscopului. Dispozitivele de msurare a acestui volum snt lamelele speciale de
tipul hematimetre sau numrtoare de celule.
Not:
Lamelele au o suprafa delimitat cadrilat, care, acoperit cu o lamel groas de aceeai
culoare, reine un volum anumit (cunoscut) de eantion.
Snt diverse numrtoare de celule. Ca exemplu, numrtoare de celule Nubaer, aici
considerat, conine o cavitate central de 0,1 mm adncime i de 1 mm2 de suprafa, al crui
fund este mprit n 400 mici ptrate (careuri). Astfel, volumul eantionului care corespunde unui
ptrat (careu) este de 1/400 mm3.
Modul de lucru:
Se plaseaz o pictur de eantion omogenizat pe planul central al cmpului cu evitarea
revrsrii. Se acoper cu o lamel groas cu evitarea bulelor de raz. Se las n repaus cteva
minute pentru a se fixa.
Concentraia nu trebuie s fie nici prea concentrat nici prea diluat. Cnd este vorba de o
concentraie foarte dens, eantionul trebuie diluat. Din contra, cnd numrul celulelor care se
conin este mic (slab), trebuie de efectuat o concentrare cu centrifuga.
Numrarea cu microscopul a microorganismelor, la ntmplare, astfel ca totalul este
cuprins ntre 200 i 500. de evitat numrarea acelorai celule de dou ori. n scopul obinerii unei
cifre reprezentative (veritabile), trebuie de efectuat numrarea n diferite locuri. Astfel, ca
exemplu, trebuie de numrat 5 mari ptrate (conin fiecare 16 mici ptrate), 1 din centru i 4 din
marginea planului cadrilat i 5 mari careuri pe diagonal.
Este necesar de efectuat numrrile de 2 ori. Se efectueaz media aritmetic a dou
numrri, rezultatele se raport la 400 mici ptrate i se nmulete cu 104 pentru al exprima n
celule pe mililitru. Dac, eventual a fost necesar de efectuat diluri sau concentrri, este necesar
de inut cont de factorul de diluare sau de concentrare.
3 Numrarea microorganismelor n cultur:
Obiectiv:
Numrarea microorganismelor n cultur are ca scop evaluarea nivelului de contaminare a
eantionului, aa sis de a determina stabilitatea sa microbian ntruct microorganismele vii snt
capabile de a altera produsul.
Referitor la mediile de cultur utilizate i condiiile culturii, se poate de numrat trei tipuri
de microorgamisme: levuri, bacterii lactice i bacterii acetice.
242
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.1 Cultur n mediu solid:

Aceast metod este bazat pesupunerea c un microorganism viu, cultuvat n sau pe
mediu sau suport solid nutritiv specific i n condiii convenabile, se multiplic cu obinerea n loc
a unei colonii vizibile cu ochiul liber.
3.1.1 Cultur pe suport:
Obiectiv:
Aceast tehnic este cu scopul numrrii microorganismelor cnd concentraia microbian
este mare, cu efectuarea dilurilor.
Materiale:
n afar de materialele precedent indicate, se disting:
Cutia Petri (suport) de 57 cm2 (plastic) sau de 65 cm2 (sticl Pirex).
Dilurile a mediilor solide de cultur (vezi anexele 4 i 5).
Modul de lucru:
Numrarea n cutia Petri poate fi realizat prin incorporare n mas sau pe suprafaa
mediului corespunztor dup incubarea necesar.
Efectuarea dilurilor:
Trebuie de realizat dilurile succesive, decimale i mari n aa mod ca s poat obine
numerele cele mai favorabile (ntre 30 i 300 colonii) pentru numrarea i diferenierea
coloniilor, ntruct ele nu vor duce la mrirea concentraiei microbiene.
Se poate de efectuat o estimare a dilurilor efectuate la microscop; nc, dn lotul unui
eantion omogenizat, se prepar o serie de diluri secimale (1:10) n acest diluant.
Se prelev 1 ml de eantion i se adaog 9 ml de diluant n primul tub. Se omogenizeaz.
Se prelev 1 ml din aceast diluare apoi se adaog 9 ml de diliant n al doilea tub. Se continu
acest protocol de diluri pn ce ultima diluare este convenabil, corespunztor populaia
microbial presumat, cu utilizarea de pipete sterile pentru fiecare diluare (vezi schemele de la
anexa 1).
Prepararea vaccinelor prin incorporare n mediu gele:
Se prepar n cutii Petru n alt mod care permite de a obine o diluare care d un numr
ntre 30 i 300 colonii.
Se inoculeaz 1 ml de eantion i 1 ml din fiecare diluare preparat i se aleg
corespunztor populaiei microbiene presumate, se omogenizeaz imediat, n respectiv dou cutii
Petri, cu utilizarea de diferite pipete sterile sau de pipete automate cu ntroducerea n autoclave
hidrofobe. Apoi, se ntroduc 15 ml de mediu de cultur gele propriu, la o temperatur de la 42
pn la 45 C, n prealabil lichefiate ntr-o baie n fierbere (sau ntr-un cuptor cu microunde sau
sub un agitator magnetic cald) cu evitarea unei nclziri ndelungate. Se omogenizeaz imediat i
ncet efectund multe micri circulare n dou direcii cu evitarea formrii bulelor de aer i
vrsrii. Se las s se rceasc pn la solidificare pe o suprafa plat.
Prepararea vaccinelor prin incorporare pe o suprafa de mediu gele:
Se plaseaz 0,1 sau 0,2 ml de diluri alese n modul care nu va avea o cantitate excesiv de
lichid la suprafaa geleului, ceea ce permite s aib loc o desfurare rea. Trebuie de utilizat
diluri de 10 ori plus concentrri ca n metoda de incorporare. Se efectueaz o distribuire
omogen pe suprafaa mediului nutritiv, n prealabil plasate i solidifiate pe suport cu ajutorul
unei aezri pe sticl, splate cu alcool i trecute prin flacr.
243
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Incubarea n etuve a suporturilor ntoarse:

Levirile -20 pn la 25 C, timp de 3 -10 zile, n aerobe.
(Not: pentru numrarea levurilor, incubarea timp de 3 zile este normal suficient. Dac se
presupune prezena de Dekkera Brettanomyces, incubarea trebuie de efectuat de la 7 pn la 10
zile).
Bacteriile lactice la 25 C timp de 4 10 zile n aenorobe sau microaerofilie.
Bacteriile acetice la 25 30 C timp de 2-4 zile n aerobe.
De efectuat numrarea coloniilor dezvoltate cu ochiul liber sau cu ajutorul unei lupe sau cu
un numrtor de colonii. Dac exist ndoieli, se confirm identitatea coloniilor (levuri sau
bacterii) cu microscopul.
Testarea sterilitii mediului, diluantului i a materialului se efectueaz o prob n alb cu
un eantion de ap steril pentru fiecare serie de probe.
Rezultatele:
Rezultatele se exprim n Unites Formant de Colonies/ml UFC/ml (sau loc de
microorganisme/ml, fiindc fiecare colonie poate fi rezultat dintr-un microorganism sau dintr-o
mulime), cu notarea tiinific cu o zecimal (ca exemplu 1100 raportat cum 1,1x103
UFC/ml).
Cnd numrul coloniilor este calculat cu estimare, rezultatele se exprim n UFCE/ml (E
estimare).
Se efectueaz numrarea pe suport care se conine ntre 30 i 300 colonii.
Se calculeaz UFC/ml nmulind media aritmetic a numerelor coloniilor cu referin la
factorul de diluare.
Se indic durata incubaiei.
Reglarea urmat de calcularea UFC prin numrare i prin estimare:

1 Se efectueaz lectura asupra cutiilor fiecrei diluri care conin ntre 30 i 300 colonii i
se calculeaz media aritmetic.
2 Dac este doar un borcan asupra la dou cutii preparate care conin ntre 30 i 300
colonii, se calculeaz media aritmetic a numerelor a dou cutii care corespunztoare acestei
diluri.
3 Aceste dou diluri consecutive prezentate de cutii ce conin ntre 30 i 300 colonii, se
efectueaz media aritmetic pentru a calcula, cu condiia c numerele foarte mari nu depesc de
dou ori pe cele mici.
Dac relaia numerelor, relativ la fiecare diluare, este mai mare de 2, un se utilizeaz dect
cele mai mici numere (de exemplu: 150 (diluare 10-1) i 350 (diluare
10-2); raportul 350/150
este mai mare de 2. Astfel, utiliznd cele mai mici numere, se are n vedere 150, i se calculeaz
UFC/ml cu nmulirea cu factorul de diluare.
4 n cazul n care toate cutiile au mai puin de 30 colonii, se consider numai cutiile unde diluarea
este mai nare. (mici diluri). Se determin media aritmetic i se raporteaz rezultatele cu
aproximaie (estimare).
5 n cazul n care cutiile cu toate dilurile nu conin colonii i ele nu au prezente substane
inhibatoare, se consider numrul ca < 1,0 dac factorul de diluare este mai mare i rezultatele
se raporteaz cu aproximaie (estimare) (ca exemplu: dac nu snt colonii n diluarea 10-2 (mai
mare), rezultatele trebuie raportate ca 1,0 x 10-2 UFCE/ml).
244
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6 Dac toate cutiile conin mai mult de 300 colonii, se consider numrarea mai aproape de
300 cu estimare. Astfel, se iau n consideraie numai cutiile cu diluare mai ridicat, aa zise mai
diluate i se raporteaz rezultatele cu estimare.
7 Dac numrul coloniilor n cutie depete cu mult 300 , rezultatul nu se va raporta ca
TNTC (too numerous to count). Dac snt mai puin de 10 colonii/cm2, coninute n 4 careuri
reprezentative, se calculeaz media aritmetic n careu i se efectueaz calculul cum este indicat
mai nainte. Factorul este 57 pentru cutiile cu suprafaa de 57 cm2 i de 65 pentru cutiile cu
suprafaa de 65 cm2. 8 Cnd este o suprapopulaie n cutii, mai mult de 100 colonii/cm2, se
raporteaz rezultatele cu aproximaie (estimare). Pentru a calcula, se nmulete 5700 sau 6500 cu
factorul de diluare mai ridicat. Ca exemplu, pentru o diluare de 106, UFCE snt raportate ca > 5,7
x 106 UFCE/ml sau ca > 6,5 x 106 UFCE/ml.
3.1.2 Metode de filtrare prin membrane:

Obiect:
Aceast tehnic are ca scop de a efectua numrarea microorganismelor cnd populaia
microbian este mic (slab). Se efectueaz o concentraie de microorganismelor care snt reinute
pe o membran de filtrare cu o porozitate convenabil dup filtrarea unui volum determinat de
eantion.
Materii:
Pomp de vid sau dispozitiv echivalent;
Asamblu pentru filtrare (filtru suport i plnie) pentru membrane de 47 mm n diametru.
Poate fi din oel inox, din Pyrex, din plastic autoclavabil sau steril nu autoclavabil;
Ramp pentru filtrare sau fiole (cap) de vid;
Capcan pentru nserare ntre fiol i pompa de vid;
Pincete pentru fixare;
Pincete cu margini rotungite pentru membrane;
Clete pentru ntroducerea ansamblului pentru filtraie atunci cnd se sterilizeaz (prin
flacr sau imersie sau fierbere n ap);
Membrane filtrante din esteri de celuloz de 47 mm n diametru, cu margini hidrofobe de
preferin albe, cadrilate de 0,2 m, 0,45 m sau 0,8 m porozitate. Se utilizeaz mai bine
membrane n ambalaj individual steril furnizate n comer. n caz contrar, se sterilizeaz n
autoclav timp de 10 minute la 121 C;
Cutii Petri sau sticl Pyrex sau plastic, sterile, de 60 mm;
Tampoane (dopuri) absorbante sterile.
Medii de cultur (a se vedea anexa 5):
Modul de lucru:
1. Prepararea plcilor:
Se prepar un numr de cutii Petri necesare cu mediu de cultur potrivit. Membranele
filtrante pot fi plasate pe mediu de gelatin adecvat sau pe un suport solid tampon
absorbant mbibat cu mediu nutritiv lichid potrivit.
245
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
a) Cutii Petri cu mediu de gelatin potrivit (a se vedea anexa 5):

pentru prepararea cutiilor, se ntroduce circa 6 ml de mediu solid n prealabil lichefiat n
bain-marie (sistem de nclzire a anumitor preparate) sau asemntoare i se las s se rceasc
pn la 45 C n cutiile Petri de 60 mm. Se las s se ntreasc (solidifieze) pe o suprafa
dreapt. Se rstoarn cutiile, n a le utiliza peste ctva timp apoi (minimum 2-3 ore). Se vor putea
utiliza cutiile deja preparate cu condiia ca ele s nu fie contaminate i ca ele s nu fie uscate.
b) Cutii Petri cu mediu lichid adecvat (a se vedea anexa 5):
Dac se va utiliza mediu nutritiv lichid, membranele snt instalate pe un tampon absorbant
mbibat cu mediu lichid n cutii Petri.
Pentru prepararea cutiilor cu mediu lichid, se dischid cutiile Petri i se ntroduce n interior
un tampon absorbant steril (este necesar nc de cutii sterile cu tampoane absorbante sterile). Se
utilizeaz n general fiole de vid de 2 ml cu mediu de cultur potrivit i se vars aproximativ 1,8
ml pe tamponul absorbant, cu repartizare pe toat suprafaa.
2 Filtrarea eantioanelor:
Se utilizeaz dispozitivele de filtrare autoclave cum se ncep o serie de filtrri. ntre
filtrri, pentru unuti din oel sau sticl Pyrex, cltite cu alcool i trecute prin flacra unui bec
Bunsen sau scufundate n ap clocotitoare timp de 5 minute. Pentru dispozitivele de plastic,
trebuie de utilizat mijloace de sterilizare alternative ca, de exemplu, o radiaie U.V. cu o expunere
de 2 minute sau de ali ageni chmici sau fizici potrivii.
Se utilizeaz o capcan ntre o fiol de vid i o pomp de vid. Se adapteaz ansamblu de
filtrare pe fiola de vid. Se fixeaz plnia pe suportul pentru filtrare cu un pincet (clete) de fixare
potrivit.
Se ntroduce cteva mililitri de ap steril pentru a provoca o bun aderen de membrana
suportului de filtrare i se las s curg total.
Se retrag membranele filtrante, de porozitatea adaptat pentru scopul dorit, n ambalajul
su individual steril cu un pincet trecut prin flacr i rcit mai nainte.
Se plaseaz pe baza suportului de filtrare membrana filtrant, care trebuie s fie n centru
cu cadrilajul su foarte nalt.
Se ntroduce un volum convenabil omogenizat de eantion cu o populaie presupus.
Cifrele apreciate pentru numrarea coloniilor se gsesc ntre 20 i 200. totui, ideal ar fi dac nu
se va depi de la 60 pn la 80 colonii ca s fie posibil o bun difereniere.
Obinerea vidului. Dup filtrare, vidul se ntrerupe cu grij pentru a evita refluxul.
(Volumul de filtrare variaz n general, ntre 25 i 500 ml. Trebuie de fiecare dat de vrsat un
volum determinat de eantion. Dac volumul de eantion este mai jos de 20 ml, se adaog n
prealabil un volum de ap steril n modul ca s acopere membrana i se vars apoi eantionul
pentru filtrare cu ajutorul unei pipete sterilizate.
Se retrage plnia i se apuc membrana cu un pincet trecut prin flacr i rcit i se
ntroduce pe mediul de cultur din cutia Petri, cadrilat foarte nalt.
Se evit formarea bulelor de aer ntre membran i mediu. Aceasta mpedic un contact
omogen i, ca urmare, o dezvoltare microbian corect.
Se rstoarn cutia i se incubeaz n etuv n dependen de timp i n condiii convenabile
pentru acele microorganisme pe care vrem s le detectm.
246
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Pentru drojdii:
Se utilizeaz membrane filtrante de la 0,45 m pn la 0,8 m porozitate, mediu YEPD
gelos (a se vedea anexa 5) i se incubeaz n aerobice, ntre 20 i 25 C, timp de la 3 pn la 10
zile. (Not: pentru numrarea drojdiilor, incubarea de 3 zile este normal suficient. Dac se
presupune o prezen de Dekkera Brettanomyces, incubarea trebuie s fie efectuat timp de la 7
pn la 10 zile).
Pentru bacterii lactice:
Se utilizeaz membrane filtrante de la 0,2 m pn la 0,4 m porozitate, mediu de cultur
de geloz adecvat (vezi anexa 5) i se incubeaz n condiii anaerobe sau microaerofilie la 25 C.
Durata incubrii poate atinge 10 zile.
Pentru bacterii acetice:
Se utilizeaz membrane filtrante de la 0,2 m pn la 0,4 m porozitate, mediu de cultur
de gelatin adecvat (vezi anexa 5) i se incubeaz n condiii aerobe de la 25 C pn la 30 C, timp
de la 2 pn la 4 zile.
Se face numrarea coloniilor dezvoltate cu ochiul liber sau cu ajutorul unei lupe sau cu un
numrtor de colonii. Conformarea identitii coloniilor (drojdii sau bacterii) la microscop, dac snt
indoieli.
Testarea sterilitii mediilor, membranelor filtrante i materialelor se efectueaz cu o
mostr n alb pe un eantion de ap steril pentru fiecare serie de mostre.
Rezultatele:
Se exprim rezultatele n Unites Formant de Colonies/ml-UFC/ml (sau rnd de
microorganisme/ml, fiindc fiecare colonie poate fi rezultat dintr-un microorganism sau dintr-o
mulime).
Cnd se filtreaz un volum mare de vin i astfel aceleai colonii dezvoltate snt n numr
foarte redus se poate de prezentat rezultatele relativ de volumele utilizate.
Dac nu a avut loc dezvoltarea coloniilor i dac nu snt prezente substane inhibitoare, se
atribuie rezultatele ca 1,0 UFC ctre un volum de vin mai mare filtrat.
Se numr toate coloniile de pe membran, cnd se obine un numr excesiv de colonii pe
membrane, poate fi posibil s se repete analiza eantionului cu o cantitate mai mare ca baz de
eantion.
Dac numrul coloniilor este foarte mare (superior la 200), trebuie de fcut numrrile
estimative cnd coloniile nu snt aglomerate i diluia este reprezentativ.
Dac aceasta nu este posibil, se raporteaz rezultatele ca TNTC (too numerous to
count).
Referire se face la porozitatea membranelor utilizate i la durata incubaiei.
3.2 Cultur n mediu lichid Nombre de Plus Probable (NPP):
Obiect:
Aceast tehnic are scopul de a efectua evaluarea numrului de microorganisme viabile n
vinuri, care cu un coninut mrit de particule solide n suspensie i/sau indici mrii de colmatare.
Principiul:
Aceast tehnic este bazat pe evaluarea numrului de microorganisme vii n mediu lichid,
ca urmare a principiului de a se distribui normal n eantion.
247
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Diluani i medii lichide de cultur (a se vedea anexele 4 i 5)

Modul de lucru:
Se prepar multe diluii cantitative i succesive i asupra acestei serii, dup incubare, o
oarecare parte din analize nu au avut cretere (analize negative) o alt parte este ntr-o origine de
dezvoltare (analize pozitive).
Dac eantionul i diluiile snt omogene i dac numrul de diluii este suficient de mare,
este posibil de a face calcul statistic al rezultatelor, utiliznd tabelele convenabile (tabele bazate pe
calculul probabilitilor McCrady) i de generaliza acest rezultat la eantionul general.
Prepararea diluiilor:
Prin urmare, dintr-un eantion de vin omogenizat, se prepar o serie de diluii decimale
(1:10) cu un diluant.
Se prelev 1 ml de vin i se adaog 9 ml de diluant n prima epruvet. Se omogenizeaz.
Se prelev 1 ml din aceast diluie, apoi se adaog 9 ml de diluant n a doilea epruvet. Se
continu acest protocol de diluii pn la ultima diluie convenabil, aceea cu o populaie
microbian dorit, utilizand pipete sterile pentru fiecare diluie. Diluiile trebuie s fie realizate cu
extincie, aa zisa lipsa dezvoltrii n ultimele diluii (a se vedea schema de la anexa 2).
Prepararea inoculaiilor:
Se inoculeaz 1 ml de vin i 1 ml din fiecare diluie preparat, omogeniznd pe un moment
n, respectiv, trei epruvete cu mediu de cultur potrivit (a se vedea anexa 5). Se omogenizeaz.
Se incubeaz epruvetele inolulate n etiv la 25 C, pentru drojdii (3 zile pn la 10 zile), n
condiii aerobice i, pentru bacteriile lactice, n condiii anaerobice sau microaerofilie (8 zile pn
la 10 zile), efectund observaiile periodic pn la ultima zi de incubare.
Rezultatele:
Se consider pozitive toate epruvetele care prezint o dezvoltare microbian caracteristic
prin formarea unui sediment alburiu, mai mult sau mai puin evident i/sau cu o tulbureal mai
mult sau mai puin accentuat. Trebuie de confirmat rezultatele cu observaii la microscop.
Referire se face la durata incubaiei.
Citirea epruvetelor se efectueaz cu notarea numrului tuburilor pozitive i negative de
fiecare combinaie de trei epruvete (de fiecare diluie). Ca exemplu 3-1-0 semnific: trei
epruvete pozitive n diluia 100 (vin), una n diluia 101 i sero n diluia 102.
Pentru un numr de diluii mai mare de trei, numai trei din aceste rezultate snt
semnificative. Pentru selecionarea rezultatelor adoptate la determinarea NPP este necesar de a
determina numrul caracteristic dup exemplele din tabelul urmtor.
248
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul 1
Numrul caracteristic
Numerele epruvetelor pozitive n fiecare diluie
Exemple
10
10
10
10
10
3-1-0
a
3
3
3
1
0
3-2-0
a
3
3
2
0
0
3-2-1
a
3
2
1
0
0
3-0-1
a
3
0
1
0
0
3-2-3
b
3
2
2
1
0
3-2-3
b
3
2
1
1
0
3-2-2
c
2
2
2
2
0
2-2-2
d
0
1
0
0
0
0-1-0
Exemplele a: a lua cele mai mari diluii n care toate tulburelile snt pozitive i ultimele
dou.
Exemplele b: dac un rezultat pozitiv este notat ntr-o diluie mai mare dect ultima
deasemenea selectat, trebuie de o adaugat i pe ea.
Exemplele c: dac nici una din diluii nu coin trei epruvete pozitive, se ia diluiile
corespunztoare la trei ultimele epruvete pozitive
Exemplele d: n cazul cnd numrul de epruvete pozitive este foarte redus, se
selecteaz numerele caracteristice n aa mod ca diluia pozitiv s
ocupe irul zecilor
Adaptat de Bourgeois, C.M. i Malcoste, R. n : Bourgeois, C.M. i Leveau, J.Y. (1991).
Calcularea Numerelor mai mult probabile (NPP)
innd cont de numerele caracteristice obinute, se determin NPP cu ajutorul tabelului A
(anexa 3) n baza calculelor probabilitilor McCrady, lund n consideraie diluiile efectuate.
Dac concentraiile snt de 100, 10-1, 10-2, cititul este direct. Dac concentraiile snt de 101, 100,
10-1, cititul este de 0,1 ori din valoarea aceasta. Dac concentraiile snt de 10-1, 10-2, 10-3, citirea
este de zece ori din valoarea aceasta.
Not:
Dac este necesar de a mri nivelul de detecie, trebuie de folosit concentraia de 101 de
vin. Pentru a obine aceast concentraie de microorganisme la 1 ml, se cetrifugheaz 10 ml de vin
i se prelev 1 ml de sediment (dup extragerea a 9 ml de lichid de la suprafa) care se
inoculeaz n modul descris mai sus.
Exprimarea rezultatelor:
Coninutul de microorganisme n vin trebuie de prezentat germeni pe mililitru, cu notarea
tiinific pn la o zecimal. Dac coninutul este inferior de 1,0 germeni la mililitru, rezultatul
trebuie de prezentat ca < 1,0 germeni pe/ml.
249
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Anexa 4 (OENO 8/95)
Diluani:
Diluanii snt indicai n calitate de exemple.
Apa utilizat trebuie s fie distilat, bidistilat sau dezionizat, fr urme de metale ,
inhibitori sau alte substane antimicrobiene.
1 Ap fiziologic:
Prepararea: se cntrete, ntr-o fiol cu capacitatea de 1000 ml, 8,5 g de clorur de sodiu.
Dup dizolvarea n ap, se ajusteaz pn la volumul de referin. Se omogenizeaz. Se filteraz.
Se ntroduce 9 ml ntr-o epruvet pentru pentru probe. Se nchide cu bumbac cardat i se
ntroduce n autoclav pentru 20 minute la 121C.
2 Soluie de Ringer de :
Preparare: se cntrete, ntr-o fiol cu capacitatea de 1000 ml, 2 250 g de clorur de sodiu,
0,105 g de clorur de potasiu, 0,120 g de clorur de calciu (CaCl26H2O), 0,050 g de
hidrogenocarbonat de sodiu. Dup dizolvare n ap, se ajusteaz pn la volumul de referin. Se
omogenizeaz. . Se ntroduce 9 ml ntr-o epruvet pentru pentru probe. Se nchide cu bumbac
cardat i se ntroduce n autoclav pentru 15 minute la 121C.
(Se poate de procurat aceast soluie din reeaua de comer).
Anexa 5 (OENO 8/95)
Medii de cultur
Mediile de cultur i antemicroniene snt indicate n calitate de exemple.
Apa utilizat trebuie s fie distilat, bidistilat sau dezionizat, fr urme de metale ,
inhibitori sau alte substane antimicrobiene.
1 Medii de cultur solide:
1.1 pentru drojdii:
Mediu YEPD (Yeast Extract, Peptone, Dextrose), geloze + cloramfenicol
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 10 g de extract de drojdie (Difco
sau echivalent), 20 g de pepton, 20 g de glucoz i 100 mg de cloramfenicol(1). Se dizolv n 450
ml de ap.
Separat, se dizolv 20 g de geloz cu 500 ml de ap, ntr-un Erlenmeer de
1000 ml,
ntr-o baie fierbinte, agitnd frecvent i evitnd o nclzire prelungit. Dup dizolvarea total, se
adaug soluia precedent i volumul se completeaz pn la 1000 ml cu ap i se amectec. Se
distribuie o porie de 15 ml (pentru enumrare pe suport) i 6 ml (pentru enumrare cu filtrare prin
membrane) n epruvetele pentru experiene. Se nchid cu bumbac cardat i se autoclaveaz timp
de 15 minute la 121C.
n locul cloramfenicolului se poate de adugat penicilin 20U/ml i streptomicin 40 U/ml
pe suprafa n momentul distribuie mediului.
250
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.2 Pentru bacterii lactice:

Mediu Lafon-Lafurcade i al. geloz + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 5 g de extract de drojdie, 10 g de
extract de carne, 15 g de pepton tripsic, 5 g de acetat de sodiu, 2 g de citrat de amoniu, 0,05 g de
sulfat de magreziu, 0,2 g de sulfat de mangan, 20 g de glucoz, 50 mg de actidion(2). Se dizolv n
400 ml de ap i se corecteaz pH la 5,4 cu o soluie de hidroxid de sodiu 1 N sau cu o soluie de
acid clorhidric de 1 N. Se adaug 1 ml de Tween 80.
1000 ml,
adaug soluia precedent i volumul se completeaz pn la 1000 ml cu ap. Se amectec i se
(1)
pentru a evita creterea majoritii bacteriilor.
(2)
pentru a evita dezvoltarea majoritii drojdiilor.
Mediu Dubois (Mediu 104), geloz + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 5 g de extract de drojdie (Difco),
5 g de pepton, 3 g de acid L-lactic, 0,05 g de sulfat de magneziu, 0,05 g de sulfat de mangan, 50
mg de actidion. Se dizolv n 200 ml de ap. Se adaug 250 ml de uc de tomate i se corecteaz
pH la 4,8 cu o soluie de hidroxid de sodiu 1 N sau cu o soluie de acid clorhidric de 1 N. Se
adaug o pictur de Tween 80.
1000 ml,
Mediu TJB (Tomato Luice Broth), geloz + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 5 g de glucoz, 2 g de tripton
(Difco), 5 g de pepton (Difco), 5 g extract de drojdie (Difco), 1 g de extract de ficat i 50 mg de
actidion. Se dizolv n 400 ml de suc de tomate. Se corecteaz pH la 5,5 cu o soluie de hidroxid
de sodiu 1 N sau cu o soluie de acid clorhidric de 1 N. Se adaug o pictur de Tween 80.
Separat, se dizolv 20 g de geloz cu 500 ml de suc de tomate, ntr-un Erlenmeer de 1000
ml, ntr-o baie fierbinte, agitnd frecvent i evitnd o nclzire prelungit. Dup dizolvarea total,
se adaug soluia precedent i volumul se completeaz pn la 1000 ml cu suc de tomate. Se
amectec i se distribuie o porie de 15 ml (pentru enumrare pe suport) i 6 ml (pentru enumrare
cu filtrare prin membrane) n epruvetele pentru experiene. Se nchid cu bumbac cardat i se
autoclaveaz timp de 20 minute la 121C.
Not:
Sucul de tomate utilizat este diluat de 4,2 ori i filtrat prin Watman n01 (1000 ml).
251
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.3 pentru bacteriile acetice:

Mediu G2, geloz + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 1,2 g de extract de drojdie, 2 g de
fosfat de amoniu, 50 mg de actidion. Se adaug 500 ml de cidre i se corecteaz pH la 5 cu o
soluie de hidroxid de sodiu 1 N sau cu o soluie de acid clorhidric de 1 N.
1000 ml,
distribuie 15 ml (pentru enumrare pe suport) i 6 ml (pentru enumrare cu filtrare prin
Mediu Carr, geloz + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 30 g de extract de drojdie, 50 mg
de actidion. Se adaug 500 ml de ap. Se adaug 1 ml de verde de bromcrezol de 2,2 %.
1000 ml,
distribuie 15 ml (pentru numrare pe suport) i 6 ml (pentru numrare cu filtrare prin membrane)
n epruvetele pentru experiene. Se nchid cu bumbac cardat i se autoclaveaz timp de 15 minute
la 121C. n momentul folosirii dup lichefiere i rcirii pn la 45 C, se adaog mediu de geloz
20 ml de alcool/litru sterilizat prin filtrare (membrane de fluorid de polivinilidin) i se amestec.
2 Medii lichide de cultur:
2.1 Pentru levuri:
Mediu YEPD ((Yeast Extract, Peptone, Dextrose) + cloramfenicol
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 10 g de extract de drojdie (Difco
sau echivalent), 20 g de pepton, 20 g de glucoz i 100 mg de cloramfenol. Se dizolv, se
completeaz volumul pn la 1000 ml cu ap i se amestec.
Se distribuie n porii de 5 ml de acest mediu n epruvete i se autoclaveaz timp de 15
minute la 121 C.
2.2 Pentru bacterii lactice:
Mediu MTJ (50 % Milieu MRS Lactobacilli Man Rogosa and Sharpe Broth + 50
% Milieu TJB Tomato Luice Broth) + actidion
Preparare: se cntrete, ntr-un Erlenmeer de 1000 ml, 27,5 g de MRS Lactobacilli Man
Rogosa and Sharpe Broth (Difco sau echivalent). Se adaug 500 ml de ap, nclzit pn la
fierbere pentru a permite dizolvarea total i se adaug 20,5 g de TJB Tomato Luice Broth
(Difco sau echivalent), se completeaz volumul pn la
1000 ml cu ap i se amestec. Se
adaug 50 mg de actidion. Se disolv cu ap aa ca s obin 1000 ml de soluie apoi se
corecteaz pH pn la 5,5 cu soluie de acid clorhidric de 1N i se amestec.
Se distribuie n porii de 10 ml de acest mediu(3) n epruvete i se autoclaveaz timp de 15
minute la 121 C.
252
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.45 IZOTIOCIANAT DE ALIL

Orice izotiocianat de alil prezent n vin este colectat prin distilare i identificat prin gaz
cromatografie gazoas.
2. Reactivi
2.1. Etanol absolut.
2.2. Soluie standard: soluie de izotiocianat de alil n alcool absolut, coninnd 15 mg de
izotiocianat de alil per litru.
2.3. Amestec de ngheare, constnd din etanol i ghea carbonic (temperatura- 60 C).
3. Aparatura
3.1. Aparat de distilare, aa cum se arat n figura de mai jos. Prin acesta trece un flux
continuu de azot.
3.2. Manta de nclzire, controlat termostatic.
3.3. Debitmetru.
3.4. Gaz-cromatograf cu detector spectrofotometric cu flacr, echipat cu filtru selector
pentru compui sulfuroi (lungimea de und = 394 nm) sau orice detector potrivit.
3.5. Coloan cromatografic din oel inoxidabil cu diametrul intern de 3 mm i lungimea de
3 m, umplut cu Carbowax 20 M 10 % pe Cromosorb WHP, 80-100 mesh.
3.6. Microsiring de 10 l.
4. Metoda de lucru
Se pun doi litri de vin n balonul de distilare, se introduc civa mililitri de etanol (punctul
2.1) n cele dou tuburi colectoare, astfel nct prile poroase ale inelelor dispersoare de gaz s
fie complet scufundate. Se rcesc cele dou tuburi din exterior, utiliznd amestecul de ngheare.
Se conecteaz balonul la tuburile colectoare i ncepei s alimentai aparatul cu azot la un debit
de trei litri pe or. Se nclzete vinul la 80 C cu mantaua de nclzire, se distileaz i se
colecteaz 45-50 ml de distilat.
Stabilizai cromatograful. Este recomandat utilizarea urmtoarelor condiii:
temperatura injectorului: 200 C,
temperatura coloanei: 130 C,
fluxul gazului purttor de heliu: 20 ml per minut.
Se introduce, cu microsiringa, un volum de soluie standard suficient pentru identificarea
uoar, pe cromatograma gazoas, a picului corespunztor izotiocianatului de alil. n acelai mod
se introduce n cromatograf un alicot de distilat. Se verific dac timpul de retenie al picului
obinut corespunde cu acela al picului izotiocianatului de alil.
n condiiile descrise mai sus, compuii prezeni n vin n mod natural nu
vor produce picuri care s interfere pe cromatograma soluiei prob.
253
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
2.45 IZOTIOCIANAT DE ALIL
Admisie N2
Debitmetru
3 000 ml
40 ml
100 ml
Manta de
nclzire
Tub pentru
dispersia gazului
Aparat pentru distilare cu un curent de azot
254
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3. METODE DE TESTARE A VINURILOR MATERIE
PRIM I A VINURILOR TRATATE LA TULBURRI FIZICO-CHIMICE, aprobate de
Ageniea Agroindustrial Moldova-Vin 15.08.08
Acest document stabilete succesiunea etapelor i metodelor de determinare a tulburrilor

fizico-chimice a materiei prime i vinurilor tratate la etapa de producere i pstrare.
1. APARATE I REACTIVI
Acid citric alimentar

1.2. Acid sulfuric, concentraia 100g/dm3;
1.3. Acid clorhidric, concentraia 20g/dm3 i 100 g/dm3;
1.4. Alcool tehnic;
1.5. Alcool etilic rectificat;
1.6. Ans microbiologic;
1.7. Ap distilat ;
1.8. Baie de ap;
1.9. Balan, limita de cntrire 1kg;
1.10. Bitartrat de potasiu
1.11. Cilindru gradat, capacitate 100cm3;
1.12. Colb cu tub, capacitatea 50,100cm3;
1.13. Colb cu fund plat, capacitatea 50,100cm3;
1.14. Criotermostate, 2 exemplare, pentru vinuri de mas i vinuri tari.
1.15. Eprubete pentru centrifugare, gradate, conice, 10cm3,
1.16. Fotocolorimetru;
1.17. Frigider;
1.18. Hexacianoferat (II) de potasiu (prusiat galben de potasiu),
concentraia 10 g/dm3;
1.19. Hidrogenosulfitul de natriu, NaHSO3;
1.20. Hrtie de filtru;
1.21. Lame 26x76mm, grosimea 1,1-4,4 mm;
1.22. Lamele 14x14mm sau 18x18mm, grosimea 0,15-17mm;
1.23. Lamp electric cu puterea de 40-60 Wt;
1.24. Microscop;
1. 25. Pahar de sticl, capacitatea
50, 100, 250, 500 cm3;
1. 26. Peroxid de hidrogen, concentraia 30 g/dm3;
1.27. Plnie Buchner, Nr. 2 i 3.
1.28. Picurtori;
1.29. Pompa lui Kamovski sau pompa electric n vid;
1.30. Plci filtrante pentru produse alimentare lichhide tipul T, C.F., etc;
1.31. Sulfat de hidrazin, N2H2H4SO4;
1.32. Spatul metalic;
1.33. Spirtier;
1.34. Tanin;
1.35. Termometru de laborator cu mercur, limite de msurare de la 0 pn la 1000C, de la -30
pna la 00C, cu gradiera de 10C.
1.36. Urotropina.
255
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
PRIM I A VINURILOR TRATATE LA TULBURRI
FIZICO-CHIMICE, aprobate de Ageniea Agroindustrial
2. PREGTIREA PROBEI PENTRU TESTARE
La lampa electric cu puterea de 40-60 W se determin limpiditatea vinurilor tratate. n

dependen de necesitate se filtreaz vinul cu ajutorul pompei electrice n vid, prin plci filtrante
de tipul T, folosind plniei Buchner i colbei Bunzen.
Preventiv, plcile filtrante sunt splate cu soluie de acid clorhidric de 20g/dm3, apoi cu ap cald,
ap rece, pn la reacia neutr. Dac dup trei filtrri vinul testat nu este limpede, stabilitatea
fizico-chimic nu se determin.
Vinul mbuteliat trebuie s fie limpede, fr sedimente i nu este supus filtrrii
suplimentare.
Testarea se efectueaz vizual la lampa electric.
3. TESTAREA LA TULBURELI PROTEICE
Vinul limpede se toarn n colb nu mai puin de 50ml i se nclzete la baia cu ap pn

la700C. timp de 10 minute.
Analiza rezultatelor :
Limpeditatea nu s-a schimbat vinul este stabil la tulburri proteice;
Vinul testat este opal sau s-a format un sediment uor vinul nu este stabil la tulburri proteice.
Recomandri: prelucrarea tehnologic suplimentar,
schema Nr. 1 i 2.(bentonit, jelatin).
4. TESTAREA LA SUPRADOZAREA CU JELATN
Testrii se supun vinurile albe tratate.

Vinul limpede, n volum de 50 ml, se toarn n colb, se adaug tanin 1g/dm3(pe vrful
spatulei) i se nclzete la baia cu ap pn la 700C, 10 minute. Dup 12-24 de ore la lampa
electric se determin limpeditatea vinului testat, drept control servete vinul nclzit, conform
punctului 4 (testarea la cald).
Analiza rezultatelor:
Vinul testat a rmas limpede - stabil la supradozarea cu jelatin;
Vinul testat s-a tulburat nu este stabil la tulburri proteice.
Recomandri: cleirea vinului dup schema 1,2( bentonit, jelatin)
Vinul cu tanin s-a tulburat, dar cel fr tanin a rmas limpede- nu este stabil la supracleere
cu jelatin (surplus de jelatin)
Recomandri: prelucrarea tehnologic suplimentar cu bentonit, schema Nr.1
256
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
FIZICO-CHIMICE aprobate de Ageniea Agroindustrial
5. TESTAREA LA TULBURRI COLOIDALE REVERSIBILE I TULBURPRI
CRISTALICE
5.1 Metoda dat se bazeaz pe sedimentarea substanelor coloidale i a cristalelor sub

influena temperaturilor joase
Vinul limpede, n volum de 100ml, se toarn n colb i se pune timp de 24-48 ore n
criotermostat:
- vinurile de mas la temperatura de (-3 ;- 40C);
- vinurile tari la temperatura de (-61)
a. Tulburri coloidale- la nclzire se dizolv, lichidul devine limpede
Recomandri: prelucrarea cu frig, schema Nr4, filtrarea la temperatura de rcire. n lipsa de frig
se prelucreaz dup schema 1, 2, 3;
b.Tulburri cristalice lichidul rmne limpede, dar pe fundul colbei se formeaz cristale.
Recomandri: prelucrarea cu frig, schema 4.
Identificarea cristalelor de bitartrat de calciu de bitartrat de potasiu. Reacia cu acid clorhidric
(vezi tab. 2)
5.2 Metoda dat se bazeaz pe adugarea microcristalelor de bitartrat de potasiu n materialul
vinicol testat, ulterior pus la frig.
Material vinicol limpede, n volum de 100ml, se toarn n colb, cu ajutorul micropipetei, se
adaug 1-2 picturi soluie concentrat de bitartrat de potasiu i se pune n criotermostat timp de
24-48 ore.
- vinurile de mas la temperatura de (-3 ;- 40C);
- vinurile tari la temperatura de (-61)
Material vinicol testat este limpede, nu s-a format sediment stabil la tulburri cristalice.
Material vinicol testat este limpede, dar pe fundul colbei s-au depus cristale nu este stabil la
tulburri cristalice.
Recomandri: vezi p.5.1
5.3 Metoda dat se bazeaz pe adugarea alcoolului etilic-rectificat n materialul venicol
testat, ulterior pus la frig.
Material vinicol limpede, n volum de 100ml, se toarn n colb, se adaug 10ml alcool etilic
rectificat, agit bine, apoi proba se pune n criotermostat timp de 24-48 ore.
Analiza rezultatelor: vezi p.5.2
Recomandri: vezi p.5.1
257
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6. TESTAREA LA CASAREA FIERIC
Vinul prelucrat cu frig, conform punctului 6.1, dac nu este limpede, se filtreaz prin plci
filtrante de tipul T. La filtratul obinut se adaug 5 picturi de peroxid de hidrogen cu
concentraia de 30g/dm3 (3%), se agit i se toarn n dou colbe de 50 ml, n una din colbe se
adaug acid citric 1g/dm3 (pe vrful spatulei). Ambele colbe se pun n criotermostat la
temperatura corespunztoare, timp de 24 de ore. Dup 24 de ore vinul testat se analizeaz la
lampa electric.
a.Vinul n ambele colbe este limpede este stabil la casarea feric.
b.Vinul cu acid citric este limpede, fr acid citric s-a tulburat nu este stabil la casarea feric.
Recomandri: materialul vinicol trebuie de acidulat.
Vinul n ambele colbe s-a tulburat- nu este stabil la casarea feric
Recomandri: prelucrarea cu hexocianoferat (II) de potasiu, schema Nr.1,2,3.
Reacia de identificare a casrii ferice: Sedimentul se dizolv n soluie de HCl de 100 g/dm3, dar
dac se adaug hexocianoferat (II) de potasiu cu concentraia de 10g/dm3 lichidul devine albastru
(vezi tab. 2).
7. TESTAREA LA CASAREA OXIDAZIC
* Testrii se supun vinurile tinere, care nu au o prelucrare tehnologic complet.

Vinul limpede se toarn n colb, 2 din volum, se agit bine, pentru a se mbogi cu aer
3
i se las la lumin dispersat 24-48 de ore. Drept control servete vinul dat supus testrii conform
punctului 4.
Analiza rezultatelor: (shimbarea culorii)
Vinul nu i-a shimbat culoarea este stabil la casarea oxidazic;
Vinul i-a schimbat culoarea nu este stabil la casarea oxidazic.
Recomandri: sulfitarea n complex cu prelucrare tehnologic.
Vinul s-a tulburat de determinat tipul tulburrii, de exclus tulburarea microbiologic (vezi
tabelul 2).
8. METODA INSTRUMENTAL DE DETERMINARE A LIMPIDITII
PRODUCIEI VINICOLE CU FORMAZIN
Limpiditatea produciei vinicole poate fi determinat vizual sau instrumental cu ajutorul

fotocolorimetrului, limpiditatea se exprim n uniti formazinice.
8.1 Pregtirea reactivilor

Se cntrete 1 gram de sulfat de hidrazin i 1 g de urotropin. Ambele cantiti se transfer
n 2 balonae cotate de 100 cm3 i se dizolv n 60-80 cm3 de ap distilat, apoi se aduce pn la
258
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
cot, ambele soluii, dup dizolvarea complet, se transfer ntr-un balon de 500 cm3 i se
pstreaz 24 de ore la temperatura camerei, pn la
sedimentarea complet. Amestecul preparat reprezint suspensia iniial de formazin, care
conine 1000 de uniti de formazin (u.f.).
Termenul de pstrarea a suspensiei date este de trei luni, pentru a obine o suspensie cu o
concentraie mai mic se face diluarea trepteta cu ap distilat a suspensiei iniiale. Pentru a
determina limpiditatea vinurilor i a divinurilor se folosesc suspensii cu diferit grad de tulburare:
0,2; 0,4; 0,5; 0,8; 1,0; 2,0 u.f. Pentru vin materie prim i must se folosesc suspensii cu
urmtoarele grade de tulburare: 5; 10; 50; 100; 500; 1000 u.f.
8.2 MODUL DE LUCRU

Pentru trasarea graficului de calibrare se iau dou cuve cu grosimea de 3 i 10 mm. Alegerea
cuvelor depinde de intensitatea culorii i limpiditatea vinului testat:
- pentru vinuri albe 10mm;
- pentru vinuri roii 3mm;
- pentru vinuri albe i roze foarte tulburi 3mm.
Determinarea limpiditii se efectuiaz la o lungime de und de 670 nm. Drept control servete
vinul testat preventiv, filtrat prin plci filtrante sterile.
Analiza rezultatelor: Conform graficului de calibrare se determin limpeditatea lichidului
exprimat n u.f., iar conform scrii de limpiditate gradul de limpiditate.
Tabelul 1
Scara de limpiditate a vinurilor i divinurilor
a.
Gradul de limpiditate a vinurilor albe

0,9-4,0
Limpede fr
strlucire
Mai mult de 4
b.
Gradul de limpiditate a vinurilor roze
Pn la 0,4
0,4-1,0
Tulburarea, u.f.
Limpede cu
Gradul de
Limpede
strlucire
limpeditate
1,0-5,0
Limpede fr
strlucire
Mai mult de 5
c.
Gradul de limpiditate a vinurilor roii
Pn la 0.7
0,7-4,5
Tulburarea, u.f.
Limpede
cu
Gradul de
Limpede
strlucire
limpeditate
4,5-10,0
Limpede fr
strlucire
Mai mult de 10
Tulburarea, u.f.
Gradul de
limpeditate
Pn la 0.2
Limpede cu
strlucire
0,2-0,9
Limpede
Tulbure
Tulbure
Tulbure
259
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
FIZICO-CHIMICE. aprobate de Ageniea Agroindustrial
Tabelul 1
(continuare)
d.
Gradul de limpiditate a divinurilor
Pn la 0.2
0,2-0,4
Tulburarea, u.f.
Limpede cu
Gradul de
Limpede
strlucire
limpeditate
0,4-0,6
Limpede fr
strlucire
Mai mult de 0,6

Tulbure
Tabelul 2
Identificarea diverselor tipuri de tulburri n vinuri
Cauza
tulburrii
Aspectul
exterior
Reacia la
lumin,
temperat. i
aerare
Analiza
microsco-pic
Arderea i
colorarea
flcrii
Aciunea acizilor
i reactivilor
specifici
Tulburri biologice
Levuri,
bacterii
Casarea
oxidazic
Fierul i
substanele
fenolice
(casarea
feric)
Eliminarea
de CO2,
tulburarea
stabil,
sediment
amorf
Pelicul cu
irizaii,
sediment
cafeniu
La aerare
tulburarea se
intensific
Levuri i
bacterii
Aerarea
provoac
schimbaera
culorii, la
Particule
nclzire n
amorfe
lips de aer,
vinul se
limpezete
Casri metalice
Culoarea
Apare dup
ntunecat,
pasteurizare
neagr sau
sau la pstrarea
albastr,
cu acces de aer
sediment slab
Paricule de
culoare
galbencrmizie
Nu se dizolv n
10%HCl, n sol.
Arderea
complet, miros concentrat de
de ln ars
H2SO4 se
carbonizeaz
n 10% HCl i
H2SO4 nu se
dizolv
Ard parial
Se dizolv n 10%
HCl; H2SO4 i 5%
NaHSO3. La
adugarea n
soluia acidu-lat
a 1 % K4Fe(CN)6
devine albas-tru
sau verde
260
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul 2
(continuare)
Cauza
tulburrii
Aspectul
exterior
Casarea
alb
Sediment
amorf, grinchis cu
nuan
albastr sau
pelicul de
culoarea
vinului
Cupru
(casarea
cupric)
Aluminiu
(casarea
aluminic)
Sediment
dispers
rou,
pelicul
roiecafenie
Tulburri
albe
coloidale,
sediment
floculos
Reacia la
lumin,
temperat. i
aerare
La aerare se
intensific
Analiza
microsco-pic
Particule
amorfe mici
Arderea i
colorarea
flcrii
Aciunea acizilor
i reactivilor
specifici
Nu arde
Se dizolv n
10% HCl i
H2SO4 i 5%
NaHSO3. Soluia
aci-dulat mpreun cu 1 %
K4Fe(CN)6
devine albas-tru
sau verde
Se intensific
la lumina
solar
Particule
emorfe mici
Nu arde,
flacr se
coloreaz n
albastru sau
verde
Particule
amorfe
Nu arde
Se dizolv n
10% HCl i
H2SO4. Cu 1 %
K4Fe(CN)6 se
coloreaz n rou
brun sau se
formeaz
precipitat
Se dizolv n 10
%HCl, H2SO4 i
n 5% NaHSO3
261
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Tabelul 2
(continuare)
Cauza
tulburrii
Bitartrat
de potasiu
Tartrat de
calciu
Oxalat de
calciu
Aspectul
exterior
Precipitat
cristalic de
culoarea
vinului
Cristale
strvezii
Cristale
mrunte
greu
sedimentate
Reacia la
Aciunea acizilor
lumin,
Analiza
Arderea i
i reactivilor
temperat. i microsco-pic colorarea flcrii
specifici
aerare
Tulburri cristalice
Arde, flacr
colorat n
violet-pal
n acizi se
dizolv
Cristale
strlucitoare
cu suprfaa
neted
Arde, flacra se
coloreaz n
rou crmiZiu
n 10% HCl,
cristalele se
dizolv, n 10%
H2SO4 se dizolv
cu formarea
cristalelor
aceforme de gips
Cristale
mrunte de
form
octaedric
Aceeai
Aceeai
Apare la
rcire
Cristale
alungite cu
coluri ascuite
262
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4. INDICII DE CALITATE I METODA SPECIALE PENTRU ANALIZA MUSTULUI
CONCENTRAT RECTIFICAT
Definiii
1. Mustul de struguri este produsul lichid obinut, prin scurgere liber sau prin procedee
fizice, din struguri proaspei. Se admite ca mustul s aib un coninut n alcool dobndit de cel
mult 1% n volum.
2. Mustul tiat este mustul oprit s intre n fermentaie alcoolic, prin aplicarea unui procedeu
autorizat; coninutul su n alcool nu depete 1% n volume.
3. Mustul de struguri concentrat este produsul necaramelizat, obinut prin deshidratarea
parial a mustului proaspt sau tiat, efectuat printr-o metod autorizat, alta dect cea de
nclzire pe foc direct. El se obine din struguri de vin cu o concentraie n zahr de cel puin 145
g/l, are un coninut n zaharuri indicat printr-un indice refractometric determinat la 200 C de
minimum 50,9 % i poate avea un coninut n alcool dobndit de maximum 1 % n volume.
4. Mustul de struguri concentrat rectificat este produsul obinut prin deshidratarea parial a
mustului proaspt sau a mustului tiat, efectuat printr-o metod autorizat, alta dect cea de
nclzire pe foc direct, care a fost supus unor tratamente autorizate de dezacidificare i de
eliminare a altor compui dect zahrul. El se obine din struguri de vin cu o concentraii n zahr
de cel puin 145 g/l, are un coninut n zaharuri indicat printr-un indice refractometric determinat
la 200 C de minimum 61,7% i poate avea un coninut n alcool dobndit de maximum 1% n
volume.
Mustul de struguri concentrat rectificat trebuie s prezinte urmtoarele caracteristici: (Hotrre nr.
1134/2002 din 10/10/2002)
pH determinat la 25Brix
- maximum 5,;
densitate optic la 425 nm , grosimea stratului optic cm, la 25Brix - maximum 0,100
- maximum 7 g/l,;
coninut de zaharoz determinat la 25Brix
indicele Fol in - Ciocalteau, determinat la 25Brix
- maximum 6
aciditate titrabil de cel mult 15 miliechivaleni pe kilogramul de zaharuri totale;
dioxid de sulf - maximum 25 mg pe kilogramul de zaharuri totale;
cationi totali - maximum 8 miliechivaleni pe kilogramul de zaharuri totale;
conductivitate, la 25Brix i la 20C;
- maximum 120 micro-Siemens pe centimetru
hidroximetilfurfural de maximum 25 mg pe kilogramul de zaharuri totale;
prezena mezoinozitolului.
Inofensivitatea (conform SANPIN2.3.2 560-96, p. 6.6.1): a.
Plumb cel mult de 0,5 mg/kg
Arseniu cel mult de 0,2 mg/kg
Cadmiu cel mult de 0,03 mg/kg
Mercur cel mult de 0,02 mg/kg
Cupru cel mult de 5,0 mg/kg
inc cel mult de 10,0 mg/kg
263
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
4. INDICII DE CALITATE I METODA SPECIALE PENTRU
ANALIZA MUSTULUI CONCENTRAT RECTIFICAT
(a) CATIONII TOTALI

Proba este tratat cu un schimbtor de cationi puternic acid. Cationii sunt schimbai cu H+.
Cationii totali sunt exprimai de diferena dintre aciditatea total a efluentului i a probei.
2. APARATURA
2.1. Coloan de sticl avnd diametrul intern 10-11 mm i lungimea de aproximativ 300 mm,
cu robinet de golire.
2.2. pH metru, cu scala gradat cel puin n uniti 0,1 pH.
2.3. Electrozi:
- electrod din sticl, inut n ap distilat,
- electrod de referin calomel/clorur de potasiu saturat, inut n soluie saturat de clorur de
potasiu,
- sau electrod combinat, inut n ap distilat.
3. REACTIVI
3.1. Rin de schimb cationic puternic acid, n form H+ umflat prin scufundarea n ap n
timpul nopii.
3.2. Soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M.
3.3. Hrtie indicatoare pH.
4. METODA DE LUCRU

Se utilizeaz soluia obinut prin diluarea mustului concentrat rectificat la 40 % (m/v), n
conformitate cu capitolul Aciditatea total" seciunea 5.1.2.
4.2. Pregtirea coloanei de schimbare a ionilor
Se introduc n coloan aproximativ 10 ml de schimbtor de ioni n form prehidratat H+.
Se cltete coloana cu ap distilat pn cnd aciditatea a fost nlturat, utiliznd hrtia indicator
pentru a evidenia aceasta.
4.3. Schimbul de ioni
Trecei prin coloan 100 ml de must concentrat rectificat, pregtit n conformitate cu
punctul 4.1, cu un flux de o pictur pe secund. Se colecteaz efluentul ntr-un pahar de
laborator. Se spal coloana cu 50ml de ap distilat. Se titreaz aciditatea din efluent (incluznd
apa de cltire) cu soluie de hidroxid de sodiu 0,1 M, pn cnd pH este 7 la 20 C. Soluia
alcalin trebuie adugat ncet i preparatul agitat continuu. Se noteaz cu n ml volumul de
hidroxid de sodiu 0,1 M utilizat.
264
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Cationii totali sunt exprimai n miliechivaleni pe kilogram de zahr total, cu o cifr

zecimal.
5.1.Calculare
- aciditatea efluentului, exprimat n miliechivaleni per kilogram de must concentrat rectificat:
E = 2,5 n
- aciditatea total a mustului concentrat rectificat, n miliechivaleni per kilogram (a se vedea
Aciditatea total" seciunea 6.1.2):
a - cationii totali, n miliechivaleni per kilogram de zaharuri totale:
(2,5n-a) x 100/P,
unde P = concentraia procentual de zaharuri totale (m/m).
(b) CONDUCTIVITATEA
Conductivitatea electric a coloanei de lichid definit de doi electrozi din platin paraleli
este msurat la capete prin ncorporarea ntr-o punte Wheatstone. Conductivitatea variaz cu
temperatura i este deci exprimat la 20 C.
2. APARATURA
2.1. Conductimetru pentru determinarea conductivitii ntr-un interval de 1-1 000 microsiemens per cm (S cm-1).
2.2. Baie de ap pentru termostatarea probelor de analizat la aproximativ 20 C (20 2 C).
3. REACTIVI
3.1. Ap demineralizat, cu o conductivitate specific sub 2 S cm-1 la 20 C.

3.2. Soluie de referin de clorur de potasiu. Se dizolv 0,581 g de clorur de potasiu
(KC1), uscat n prealabil pn la o mas constant la o temperatur de 105 C, n ap
demineralizat (punctul 3.1). Se completeaz pn la un litru cu ap demineralizat (punctul 3.1).
Aceast soluie are o conductivitate de 1 000 S cm-1 la 20 C. Nu trebuie pstrat mai mult de
trei luni.
4. METODA DE LUCRU
4.1.Pregtirea probei de analizat

Se utilizeaz soluia cu o concentraie total a zahrului de 25 % (m/m) (25 0 Brix),
conform descrierii din capitolul pH" seciunea 4.1.2.
4.2.Determinarea conductivitii
Aducei proba analizat la 20 C prin scufundare n baia de ap. Meninei temperatura n
intervalul 0,1 C. Se cltete de dou ori celula conductiv cu soluia care trebuie analizat. Se
msoar conductivitatea i exprimai rezultatul n S cm-1.
265
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Rezultatul pentru soluia de must concentrat rectificat 25 % (m/m) (25 Brix) este exprimat
n micro-siemens per cm (S cm-1) la 20 C, rotunjit la cel mai apropiat numr ntreg.
5.1. Calculare
Dac aparatul nu este prevzut cu mijloace pentru controlul temperaturii, corectai conductivitatea
msurat utiliznd Tabelul I. Dac temperatura este sub 20 C, corecia se adun; dac
temperatura este peste 20 C, corecia se scade.
TABELUL I
Coreciile aduse conductivitii pentru temperaturi diferite de 20 C (S cm-1)

Conductivitatea
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
550
600
20,2 20,4
20,6
Temperatura
20,8 21,0 21,2 21,4
19,8 19,6
19,4
19,2 19,0 18,8 18,6
0 0
0 0
0 1
1 1
1 2
1 2
1 3
1 3
2 3
2 3
2 4
2 5
5
(1) Scdei corecia.
( 2 ) Adunai corecia.
0
1
1
2
3
3
4
5
5
6
7
7
8
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
0
1
2
3
4
5
7
8
9.
10
11
12
13
0
1
2
3
4
5
7
8
9
10
11
12
13
0
1
3
5
6
8
9
11
12
14
15
17
18
21,6
18,4
0
2
3
5
7
9
11
12
14
16
18
19
21
21,8 22,0
(1)
18,2 18,0
(2)
0 0
2 2
4 4
6 7
8 9
10 11
12 13
14 15
16 18
18 20
20 22
22 24
24 26
(c) HIDROXIMETILFURFURAL (HMF)

1.1.
Metoda colorimetric
Aldehidele derivate din furan, componenta principal fiind hidroximetilfurfuralul,
reacioneaz cu acidul barbituric i paratoluidina i dau un compus rou, care este determinat prin
colorimetrie, la 550 nm.
266
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
1.2. Cromatografa lichid de nalt performan (CLIP)

Separarea ntr-o coloan prin cromatografa de faz invers i determinarea la 280 nm.
2. METODA COLORIMETRIC
2.1. Aparatura
Spectrofotometru care permite efectuarea de msurtori ntre 300 i 700 nm.
Cuve din sticl, cu drum optic de 1 cm.
2.2. Reactivi
Soluie de acid barbituric 0,5 % (m/v).
Se dizolv 500 mg de acid barbituric (C403N2H4) n ap distilat i se nclzete uor
deasupra unei bi de ap la 100 C. Se completeaz pn la 100 ml cu ap distilat. Soluia se
pstreaz aproximativ o sptmn.
Soluie de paratoluidina 10 % (m/v).
Se pun 10 g de paratoluidin, C6H4(CH3)NH2, ntr-un balon cotat de 100 ml; se adaug 50 ml
de izopropanol, CH3CH(OH)CH3, i 10 ml de acid acetic glacial, CH3COOH (p20 = 1,05 g/ml).
Se completeaz pn la 100 ml cu izopropanol. Aceast soluie trebuie rennoit zilnic.
Soluie apoas de etanal (acetaldehid), CH3CHO, 1 % (m/v). Se prepar
imediat nainte de utilizare.
Soluie apoas de hidroximetilfurfural, C6O3H6, 1 g/l.
Se prepar diluii succesive, coninnd 5, 10, 20, 30 i 40 mg/l. Soluia de 1 g/l i soluiile
diluate trebuie s fe proaspt preparate.
2.3.
Metoda de lucru
Pregtirea probei
Se utilizeaz soluia obinut prin diluarea mustului concentrat rectificat la 40 % (m/v),
conform descrierii din capitolul Aciditatea total". Se execut determinarea pe 2 ml din aceast
soluie.
Determinarea colorimetric
Se pun n dou baloane cotate (a i b) de 25 ml fiecare, prevzute cu dopuri din sticl
lefuit, 2 ml de prob preparat n conformitate cu punctul 2.3.1. Se pun n fiecare balon 5 ml de
soluie de paratoluidin (punctul 2.2.2); se amestec. Se adaug 1 ml de ap distilat n balonul b
(control) i 1 ml de acid barbituric (punctul 2.2.1) n balonul a. Se agit pentru omogenizare. Se
transfer coninutul baloanelor n cuvele spectrofotometrului cu drumuri optice de 1 cm. Se
regleaz scala absorbiei la zero, utiliznd coninutul balonului b, la lungimea de und de 550 nm.
Se urmrete variaia puterii de absorbie a coninutului balonului a; se nregistreaz valoarea
maxim .4, care este atins dup dou-cinci minute.
Probele cu un coninut de hidroximetilfurfural de peste 30 mg/l trebuie diluate nainte de analiz.
267
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Obinerea curbei de calibrare

Se pun 2 ml din fiecare soluDie de hidroximetilfurfural cu 5, 10, 20, 30 i 40 mg/l
(punctul 2.2.4) n dou seturi de baloane de 25 ml a i b i tratai-le conform de scrierii de la
punctul 2.3.2. Graficul reprezentnd variaia absorbiei n funcie de concentraia
hidroximetilfurfuralului cu concentrau ia n mg/l este o linie dreapt trecnd prin origine.
Concentraia hidroximetilfurfuralului n mustul concentrat rectificat este exprimat n
miligrame per kilogram de zaharuri totale.
Metoda de calcul
Concentraia de hidroximetilfurfural C n mg/l n proba analizat este concentraia de pe
curba de calibrare corespunztoare absorbiei A, msurat pe prob.
Concentraia de hidroximetilfurfural, n miligrame per kilogram de zaharuri totale, este dat de
formula:
250 x C/P, unde
P = concentraia procentual (m/m) de zaharuri totale n mustul concentrat rectificat.
3. CROMATOGRAFA LICHID DE NALT PERFORMAN
3.1. Aparatura
.
Cromatograf lichid de nalt performant, echipat cu:
bucl de injecie de 5 sau 10 l,
detector spectrofotometru pentru efectuarea msurtorilor la 280 nm,
coloan de silice cu octodecil legat
un nregistrator, dac este posibil un integrator. Debitul fazei mobile: 1,5 ml/minut.
Aparat cu membran filtrant, diametrul porilor 0,45 m.
3.2. Reactivi
Ap bidistilat.
Metanol distilat (CH30H) sau de calitate CLIP
Acid acetic CH3COOH, (p = 1,05 g/ml).
Faza mobil: ap-metanol (punctul 3.2.2)-acid acetic (punctul 3.2.3), filtrat n prealabil printr-o
membran filtrant (0,45 pm), (40:9:1 v/v). Aceast faz mobil trebuie preparat zilnic i egazat
nainte de utilizare.
Soluie de referin de hidroximetilfurfural 25 mg/l (v/v). ntr-un balon cotat de 100 ml, se pun 25
mg de hidroximetilfurfural (C6H306), cntrit cu precizie, i se completeaz pn la cot cu
metanol (punctul 3.2.2). Se dilueaz aceast soluie 1:10 cu metanol (punctul 3.2.2) i se filtreaz
printr-o membran filtrant (0,45 pm). Dac este pstrat ntr-o sticl maro n frigider, aceast
soluie poate fi utilizat dou-trei luni.
268
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.3. Metoda de luciu

Pregtirea probei
Se utilizeaz soluia obinut prin diluarea mustului concentrat rectificat la 40 % (m/v),
conform descrierii din capitolul Aciditatea total" i se filtreaz cu o membran filtrant de 0,45
pm.
Determinarea cromatograflc
Injectai n cromatograf 5 (sau 10) pl din proba preparat n conformitate
hidroximetilfurfural (punctul 3.2.5). Se nregistreaz cromatograma. Timpul de retenie al
hidroximetilfurfuralului este de aproximativ ase la apte minute.
Concentraia de hidroximetilfurfural n mustul concentrat rectificat este exprimat n
miligrame per kilograme de zaharuri totale. 3.4.1. Metoda de calcul
Se noteaz cu C mg/l concentraia de hidroximetilfurfural n soluie de 40 % (m/v) din mustul
concentrat rectificat. Concentraia de hidroximetilfurfural, n miligrame per kilogram de zaharuri
totale, este dat de: 250 x C/P, unde
P = concentraia procentual (m/m) de zaharuri totale din mustul concentrat rectificat.
(d) METALE GRELE
I. Metoda rapid de evaluare a metalelor grele

Metalele grele sunt identificate, n mustul concentrat rectificat diluat corespunztor, de
coloraia produs de formarea de sulfuri. Acestea sunt evaluate prin compararea cu o soluie
standard de plumb, corespunznd concentraiei maxime admisibile.
II. Determinarea coninutului de plumb prin spectrofotometria de absorbie atomic
Chelatul format de plumb n combinaie cu pirolidinditiocarbamat de amoniu este extras cu
metilizobutilceton i absorbia msurat la 283,3 nm. Coninutul de plumb este determinat
utiliznd volume cunoscute de plumb ntr-un set de soluii de referin.
2. METODA RAPID DE EVALUARE A METALELOR GRELE
2.1. Reactivi
Acid clorhidric diluat 70 % (m/v)
Se iau 70 g de acid clorhidric HC1 (p20 = 1,16-1,19 g/ml) i se completeaz pn la 100 ml cu
ap
Acid clorhidric diluat 20 % (m/v).
Se iau 20 g de acid clorhidric HC1 (p20 = 1,16-1,19 g/ml) i se completeaz pn la 100 ml cu
ap.
Amoniac diluat. Se iau 14 g de amoniac NH3 (p20 = 0,931-0,934 g/ml) i se completeaz pn la
100 ml cu ap.
269
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Soluie tampon pH 3,5.

Se dizolv 25 g de acetat de amoniu CH3COONH4 n 25 ml de ap i se adaug 38 ml de acid
clorhidric diluat (punctul 2.1.1). Ajustai pH, dac este necesar, cu acid clorhidric diluat (punctul
2.1.2) sau amoniac diluat (punctul 2.1.3) i se completeaz pn la 100 ml cu ap.
Soluie de tioacetamid 4 % C2H5SN (m/v).
Soluie de glicerina 85 % C3H803 (m/v), (nD20c= 1,449 to 1,455).
Reactiv de tioacetamid.
Se adaug la 0,2 ml de soluie de tioacetamid (punctul 2.1.5) 1 ml de amestec de 5 ml ap, 15
ml de soluie de hidroxid de sodiu 1 M i 20ml de glicerina (punctul 2.1.6). nclzii 20 de
secunde ntr-o baie de ap la 100 C. Se prepar imediat nainte de utilizare.
Soluie coninnd 0,002 g/l plumb.
Se prepar o soluie de plumb de 1 g/l dizolvnd 0,400 g de nitrat de plumb Pb(N03)2 n ap i
completnd volumul pn la 250 ml tot cu ap. n momentul utilizrii se dilueaz aceast soluie
cu ap la dou pri la 1 000 (v/v) n scopul obinerii unei soluii de 0,002 g/l.

Se dizolv o prob de testare de 10 g de must concentrat rectificat n 10 ml de ap. Se adaug
2 ml de soluie tampon pH 3,5 (punctul 2.1.4); se amestec. Se adaug 1,2 ml de reactiv de
tioacetamid (punctul 2.1.7). Se amestec din nou. Se prepar martorul n aceleai condiii,
utiliznd 10 ml de soluie de plumb 0,002 g/l (punctul 2.1.8). Dup dou minute, coloraia maro
eventual a soluiei de must concentrat rectificat nu trebuie s fie mai intens dect aceea a
martorului.
2.3. Calculare
n aceleai condiii ca i ale procedurii de mai sus, proba martor corespunde unei concentraii
maxime admisibile de metale grele, exprimat ca plumb de 2 mg/kg al mustului concentrat
rectificat.
3. DETERMINAREA CONCENTRAIEI DE PLUMB PRIN SPECTROFOTOMETRIA
DE ABSORBIE ATOMIC
3.1. Aparatura
Spectrofotometru de absorbie atomic, echipat cu arztor cu aeracetilen.
Lamp catodic pentru plumb.
270
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
3.2.Reactivi
Acid acetic diluat.
Se iau 12 g de acid acetic glacial (p = 1,05 g/ml) i se completeaz pn la 100 ml cu ap.
Soluie de pirolidinditiocarbamat de amoniu C5H12N2S2 % (m/v).
Metilizobutilceton (CH3)2CHCH2COCH3.
Soluie coninnd plumb 0,010 g/l.
Se dilueaz soluia de plumb de 1 g/l (punctul 2.1.8) la 1 %. (v/v).
3.3.Metoda de lucru
Pregtirea soluiei de analiz
Se dilueaz 10 g de must concentrat rectificat ntr-un amestec de volume egale de acid acetic
diluat (punctul 3.2.1) i ap i se completeaz pn la 100 ml cu acest amestec. Se adaug 2 ml de
soluie de pirolidinditiocarbamat de amoniu (punctul 3.2.2) i 10 ml de metilizobutilceton
(punctul 3.2.3). Se agit 30 de secunde, n timp ce protejai de lumina puternic. Se las cele dou
straturi s se separe. Se utilizeaz stratul de metilizobutilceton.
Pregtirea soluiilor de referin
Se prepar trei soluii de referin care conin, n plus fa de 10 g de must concentrat rectificat,
1, 2 i 3 ml de soluie coninnd 0,010 g/l plumb (punctul 3.2.4). Se trateaz identic cu soluia
analizat.
Martorul
Se pregtete un martor, procednd n aceleai condiii ca i la punctul 3.3.1, dar fr
adugarea mustului concentrat rectificat.
Determinarea
Se regleaz lungimea de und la 283,3 nm. Se atomizeaz metilizobutilceton din proba martor
la flacr i aducei scala absorbiei la zero.
Se determin absorbanta soluiei analizate i a soluiilor de referin, utiliznd cu extractele n
solvent corespunztoare fiecrei soluii.
3.3.
Coninutul de plumb se exprim n miligrame per kilogram de must

concentrat rectificat, cu o cifr zecimal.
271
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Calculare
Se traseaz curba avnd variaia absorbiei n funcie de concentraia de plumb adugat
soluiilor de referin, concentraia zero corespunznd soluiei examinate. Se extrapoleaz linia
dreapt care unete punctele pn cnd intersecteaz partea negativ a axei concentraiei. Distana
punctului de intersecie de la origine permite calcularea concentraiei de plumb n soluia
analizat.
(e) DETERMINAREA CHIMIC A ETANOLULUI
Aceast metod este utilizat pentru determinarea triei alcoolice a lichidelor slab
alcoolizate, cum sunt musturile, musturile concentrate i mustul concentrat rectificat.
Simpla distilare a lichidului. Oxidarea etanolului n distilat cu dicromat de potasiu. Titrarea

excesului de dicromat cu o soluie de fier (II).
2. APARATURA
Se utilizeaz aparatura de distilare descris n capitolul Tria alcoolic n volum" seciunea
3.REACTIVI
Soluie de dicromat de potasiu.
Se dizolv 33,600 g de dicromat de potasiu K2Cr2O7 ntr-o cantitate suficient de ap pentru
prepararea unui litru de soluie la 20 C. Un mililitru de soluie oxideaz 7,8924 mg de alcool.
Soluie de sulfat de fier (II) i amoniu.
Se dizolv 135 g de sulfat de fier (II) i amoniu FeS04 x (NH4)2S04 x 6H2O ntr-o cantitate
suficient de ap pentru a obine un litru de soluie i se adaug 20 ml de acid sulfuric concentrat
H2SO4 (p20= 1,84 g/ml). Aceast soluie corespunde n momentul preparrii, mai mult sau mai
puin, cu jumtate din volumul de dicromat de potasiu. Ulterior, se oxideaz ncet.
Soluie de permanganat de potasiu.
Se dizolv 1,088 g de permanganat de potasiu KMnO4 ntr-o cantitate suficient de ap
pentru a prepara un litru de soluie.
Acid sulfuric diluat 1:2 (v/v).
Se adaug 500 ml de acid sulfuric H2SO4 (p20 = 1,84 g/ml), cte un pic i agitnd continuu, Ia
500 ml de ap.
272
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
Reactiv feros de ortofenantrolin.

Se dizolv 0,695 g de sulfat feros FeS04 x 7H2O n 100 ml de ap i se adaug 1,485 g
de monohidrat de ortofenantrolin C12H8N2 x H2O. nclzii pentru a ajuta dizolvarea. Aceast
soluie rou aprins se pstreaz bine.
4. METODA DE LUCRU
4.1.Distilarea
Se pun 100 g de must concentrat rectificat i 100 ml de ap n balonul de distilare. Se
colecteaz distilatul ntr-un balon cotat de 100 ml i se completeaz pn la cot cu ap.
4.2.Oxidarea
Se ia un balon cu dop din sticl lefuit i cu gt larg, care permite cltirea gtului fr
pierderi. Se pun n balon 20 ml de soluie de titrare de dicromat de potasiu (punctul 3.1) i 20 ml
de acid sulfuric diluat 1:2 (punctul 3.4) i se agit. Se adaug 20 ml de distilat. Se astup balonul
i se ateapt cel puin 30 de minute, agitnd din cnd n cnd. (Acesta este balonul pentru
msurat".) Se realizeaz titrarea soluiei de sulfat de fier (II) i amoniu (punctul 3.2) innd cont
de soluia de dicromat de potasiu, prin punerea ntr-un balon identic a acelorai cantiti de
reactivi, dar nlocuind cei 20 ml de distilat cu 20 ml de ap distilat. (Acesta este balonul
martor".)
4.3.Titrarea
Se adaug patru picturi de reactiv de ortofenantrolin (punctul 3.5) coninutului balonului
pentru msurat". Se titreaz excesul de dicromat prin adugarea de soluie de sulfat de fier (II) i
amoniu (punctul 3.2). Oprii adugarea cnd amestecul i schimb culoarea din gri-albstrui n
maro. Pentru a avea o precizie mai mare asupra punctului final, se schimb culoarea din maro n
gri-albstrui cu permanganat de potasiu (punctul 3.3). Se scade o zecime din volumul soluiei
utilizate din volumul soluiei de fier (II) adugate. Se noteaz diferena cu n ml. Se procedeaz
acelai mod cu balonul martor". Se noteaz diferena cu n' ml.
Etanolul se exprim n grame per kilogram de zahr i se noteaz cu o zecimal.

N' ml de soluie feric reduc 20 ml de soluie de dicromat, care oxideaz 157,85 mg de etanol
pur. Un mililitru de soluie feric (II) are aceeai putere de reducere ca i 157, 85/n' mg de etanol:
(n n')ml de soluie feric (II) au aceeai putere reductoare ca i 157, 85(n-n')/n' mg de etanol.
Concentraia de etanol, n g/kg de must concentrat rectificat, este dat de:
7,892 x {n'-n)/n
Concentraia de etanol, n g/kg de zaharuri totale, este dat de :
789,2 x {n'-n)/n'P,
unde P este concentraia procentual (m/m) de zaharuri totale.
273
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
(f) MEZOINOZITOLUL, SCILO-INOZITOLUL I ZAHAROZA
1. PRINCIPIUL
Cromatografia gazoas a derivailor silanizai.

2. REACTIVI
Etalon: xilitol (soluie gazoas de aproximativ 10 g/l, la care se adug un vrf de spatul de
azid)
Bi(Trimetilsilil)Ttriflueroacetamid-BSTFA-(C8H18F3NOS12).
Trimetilclorosilan (C3H9CISi)
Piridin p.A. (C5H5N)
Mezoinozitol (C6H12O6)
3. APARATURA
Gaz-cromatograf, echipat cu:

Coloan capilar (cum ar fi din silice topit, nvelit cu OV 1, grosimea filmului de 0,15 pm,
lungimea 25 m i diametrul intern de 0,3 mm).
CONDIII DE LUCRU:
gaz purttor: hidrogen sau heliu;

debitul gazului purttor: njur de 2 ml/minut;
temperatura injectorului i detectorului: 300 C;
programarea temperaturii: 1 minut la 160 C, 4 C per minut la 260 C, temperatur constant de
260 C timp de 15 minute;
raportul de divizare: n jur de 1:20.
Integrator
Microsering de 10 l.
Micropipete de 50, 100 i 200 L.
Balon de 2 ml cu dop din teflon.
Etuv.
4. METODA DE LUCRU
Se pun ntr-un balon de 50 ml o prob de aproximativ 5 g, cntrit cu atenie, de must

concentrat rectificat. Se adaug 1 l de soluie standard de xilitol (punctul 2.1) i se completeaz
pn la capacitate cu ap. Dup amestecare, se iau 100 l de soluie i se pun n balon (punctul
3.6), unde este uscat sub un curent uor de aer. Pentru facilitarea evaporrii se pot aduga, dac
este cazul, 100 l de alcool etilic pur. Se dizolv cu grij reziduul n 100 l de piridin (punctul
2.4) i se adaug 100 l de bi(trimetilsilil)trifluoroacetamid (punctul 2.2) i 10 l de
trimetilclorosilan (punctul 2.3). Se nchide balonul cu dopul din teflon i se nclzete timp de o
or, la 60 C. Se extrag 0,5 l de lichid limpede i se injecteaz utiliznd un ac nclzit, n
conformitate cu raportul de divizare specificat.
274
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. CALCULAREA REZULTATELOR
Se prepar o soluie coninnd: 60 g/l glucoza, 60 g/l fructoz, 1 g/l mezoinozitol i 1 g/l
zaharoz. Se cntresc 5 g de soluie i se urmeaz procedura de la punctul 4. Rezultatele pentru
mezoinozitol i zaharoz, innd cont de xilitol, sunt calculate din cromatogram. n cazul sciloinozitolului, care nu este disponibil n comer i are un timp de retenie ntre ultimul pic al formei
anomerice a glucozei i vrful mezoinozitolului (a se vedea diagrama de mai jos), este considerat
acelai rezultat ca i pentru mezoinozitol.
Mezoinozitolul i scilo-inozitolul sunt exprimate n miligrame per kilogram de zahr.

Zaharoz este exprimat n grame per kilogram de must.
Cromatograma, n faza gazoas, a mezoinozitolului, scilo-inozitolului si zaharozei
275
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. INDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE ACIDUL SORBIC
Acidul sorbic face parte din categoria conservanilor . El se utilizeaz n vinifcaie pentru
stabilizare sub form a srurilor lui de potasiu i sodiu.
Prezentul document conine caracteristicile de calitate ale acidului sorbic i stabilete metodele de
verificare a caracteristicilor de calitate.
Formulele:
empiric C6 H2 O2
de structur
CH3 CH = CH CH =CH COOH
Masa molecular: C6H8O 2 = 112,1
Tabelului 1
Caracteristici
1
Aspect
Miros
Solubilitatea:
n ap la 20 C, g/l
Condiii de admisibilitate
2
Praf sau granule de culoare alb Organoleptic
sau bej-deschis
Caracteristic pentru acidul sorbic Organoleptic
1,6
n ap la 100 C, g/l
38
n alcool de 40 % voi. la 26C,

g/l
n ester etilic, g/1
140
104
Caracteristici de identitate:
Punctul de topire,0 C
1342
Testul cu apa de brom
rezista
Absorbia maximal
256 nm
Umeditatea, %
max. 0,5
Coninutul substanei de baza

(acid sorbic), %
Coninutul n sulfai exprimat
n acid sulfuric, g /kg
Coninutul n cloruri exprimat
n acid clorhidric, g /kg
Coninutul n plumb, mg/kg
Max. 98
Coninutul n aldehide
exprimat n aldehida acetic,
g /kg
Metode de analiz
Max. 1,0
Max. 1,0
Max. 5,0
Max.1
Conform p. 1.1.1 al
dociument
Conform p. 1.1.2 al
dociument
Conform p. 1.1.3 al
dociument
Conform p. 1.1.4 al
dociument
prezentului
prezentului
prezentului
prezentului
Conform p. 1.2.1 al prezentului

dociument
dociument
dociument
Conform p. 1.3 al prezentului
dociument
Conform p.1.4.1-1.4.2 al
prezentului document
Conform p.1.5.1-1.5.2 al
document
document
document
276
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5.INDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE
ACIDUL SORBIC
1. METODE DE VERIFICARE
Not.. Lista reactivilor i modul lor de preparare snt expuse n anexa.

1.1.. Solubilitatea
1.1.1.Solubilitatea n ap la 20 C.
Se cntresc 0,16 g de aacid sorbic . Cantitatea cntrit de acid sorbic se dizolv n 100 cm3 de
ap la temperatura de 20 C.
1.1.2.Solubilitatea n ap la l00C.
Se cntresc 3,8 g de acid sorbic . Cantitatea cntrit de acid sorbic se dizolv n 100 cm3 de ap
la temperatura de 100 C.
1.1.3.Solubilitatea n alcool la 20C.
Se cntresc 14,0 g de acid sorbic Cantitatea cntrit de acid sorbic se dizolv n 100 cm3 de
alcool de 40 % la temperatura de 26 C .
1.1.4.Solubilitatean ester etilic la 200C.
Se cntresc 10,4 g de acid sorbic cu exactitate de pn la 0,0 lg Cantitatea cntrit de acid sorbic
se dizolv n 100 cm3 de ester etilic (R-18) Ia temperatura de 20 C
Rezultatele obinute conform p. 1.1.1-1.1.4 se exprim prin "mai puin" sau "egal" prin
comparaie cu valoarea condiiilor de admisibilitate.
1.2. Caracteristici de identitate.
1.2.1. Punctul de topire
Pentru determinarea punctului de topire se utuluzeaz orice tip de baie de nclzit, care
asigur tempraura nu mai joas de 140 C, nzestrat cu termometru.
Un capilar din sticl umplut cu cristale de acid sorbic se nclzete treptat la baia de nclzit. Se
fixeaz temperatura cnd pe suprafaa cristaleleor apare prima pictur de lichid.
1.2.2.Testul cu ap de brom
ntr-un balon cu capacitatea de 100 cm3 se iau 20 mg de acid sorbic se adaug 1 cm3 de ap
de brom (R-14 ) . Se consider, c produsul rezist la testare n cazul cnd culoarea dispare.
1.2.3. Absorbanta maximal.
Se prepar o soluie ce conine 4 mg de acid sorbic i 0,5 g de carbonat monosodic (R16) la 1 dm3 de ap. Cu ajutorul spectrofotometruiui se msoar absorbanta la 10-15 valori ale
intervalului lungimii de und 245-365 nm. Se determin lungimea de und la care soluia are
absorbanta maximal.
277
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
5. INDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE
ACIDUL SORBIC
1.3. Umeditatea.
Cantitatea de acid sorbic cu masa de aproximativ 1 g se trece ntr-un phrel adus pn la
greutate constant, se nchide cu capac i se cntrete cu o exactitate de pn la 0,01 g.
Cantitatea cntrit de acid sorbic se usuc ntr-un exicator cu acid sulfuric concentrat (R6 ) timp de ~ 24 h. Dup uscare phrelul cu acid sorbic se cntrete cu exactitate de pn la
0,01g.
Fracia masic de umeditate (X), exprimat n procente se calculeaz cu formula:
X=
m1 m2
*100
m1 m
|1|
n care,
m 1 - masa phrelului cu acid sorbic cntrit pn la uscare,g;
m 1 m 2 -masa phrelului cu acid sorbic cntrit dup scare,g;
m - masa phrelului gol,g ;
Calculul se efectueaz pn la 0,01 i se rotungete pn la 0,1. 1.4
1.4. Coninutul substanei de baz ( acidului sorbic)
Determinarea se efectueaz cu acid sorbic (analizat), uscat n exicator cu acid sulfuric concentrat
(R- 6) timp de 24 ore.
1.4.1 Determinarea coninutului substanei de baz (acidului sorbic) prin metoda gazcromatografic
Prepararea soluiei deacidsorbic (analizat) soluia A.
Se prepar o soluie de acid sorbic (analizat) cu concentraia aproximativ de 200 mg/dm3 n felul
urmtor: ntr-un balon cotat cu volumul de 100 cm3 se iau aproximativ 20 mg de acid sorbic
(analizat), se dizolv n 10 cm3 de alcool etilic pur (R-l l)f se adaug 2-3 picturi de acid
clorhidric cu concentraia 1,0 mol/dm3 (R- 3) i se aduce pn la semn cu ap distilat.
ntr-o eprubet gradat cu volumul de 15-20 cm3 se iau 10 cm3 de soluie preparat de
acid sorbic, se adaug 0,5 cm3 soluie aceton:ap n proporie 1:1, 0,1 cm3 etalon intern (acid nvalerianic) (R-8 ) i 2 cm3 de ester dietilic (R-18).
1.4.1.2. Prepararea soluiei etalon de acid sorbic (reactiv)- soluia B
ntr-o eprubet gradat cu volumul de 10 cm3 se iau 0,5 cm3 de soluie de acid sorbic
(reactiv) cu concentraia de 4g/ dm3 (R- 10 ) , 2-3 picturi de acid clorhidric cu concentraia 0,1
mol/dm3 (R- 4), 0,1 cm3 soluie de etalon intern (acid n-valerianic) (R- 8 ), 2 cm3 ester dietilic (R18) i se aduce pn la volumul de 10 cm3 cu soluie hidroalcoolic cu concentraia alcoolic 10 %
voi (R-12).
Concentraia acidului sorbic n soluiile A i B se determin prin metoda gazcromatografic conform SM 152.
Coninutul acidului sorbic C n procente (%) n preparatul analizat se determin cu
formula:
278
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
ACIDUL SORBIC
C=
n care
*100
1
|2|
C - concentraia acidului sorbic determinat prin gaz-cromatografie, mg/dm3

C1-concentraia soluiei de sorbat de potasiu pregtit, mg/dm3
1.4.2 Determinarea substanei de baz (acidului sorbic ) prin metoda titrometric.

Se cntaresc aproximativ 0,20 g de acid sorbic (analizat) i se dizolv n 20 cm3 de alcool
etilic pur; apoi se dilueaz pn la 100 cm3 cu ap distilat. Se titreaz aciditatea cu soluie de
hidroxid de sodiu cu concentraia de 0,1 mol/dm3 (R-21) n prezena soluiei de fenolftalein (R19).
Coninutul
substanei de baz (acidului sorbic ) n produsul analizat (X), n % se
calcileaz cu formula:
1.12 * n
|3|
X=
p
n care,
1,12 - masa acidului sorbic, corespunztoare la 100 cm3 de hidroxid de sodiu de 0,1 mol/dm3,
g;
n - volumul soluiei de hidroxid de sodiu de 0,1 mol/dm3 care a mers latitrare, cm3,
p - masa de acid sorbic luat pentru analiz, g 3.4.3 Aceeai operaie se efectueaz cu antrenarea
vaporilor de ap. Se Introduc 10 cm3 de soluie alcoolic ce conine aproximativ 0,2 g de acid
sorbic n barbotorul unui aparat de vapori de ap; se adaug un cristal ( circa 0,5 g ) de acid tartric
(R-) i se colecteaz 250 cm3 de distilat.
Aciditatea soluiei distilate se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu cu concentraia de 0,1
mol/dm3 (R-21).
Coninutul acidului sorbic n produsul analizat (X), n % se calculeaz cu formula !3!
1.5. Sulfaii
1.5.1 Prepararea soluiei pentru analize
Se amestec 0,5 g de acid sorbic cu 70 cm3 de ap fierbinte (fierbnd). Soluia se las s
se rceasc. Se filtreaz ntr-un balon cotat cu volumul de 100 cm3. Sedimentul se spal de mai
multe ori cu cantiti mici de ap pn se obine 100 cm3 de filtrat.
3.5.2 Determinarea sulfailor
La 20 cm3 soluie preparat conform p. 3.5.1 se adaug 1 cm3 de HC1 diluat de 10 % (R2), 2 cm3 soluie de clorur de bariu de 10 % (R-17). Amestecul trebuie s fie limpede sau
opalescena aprut peste 15 minute trebuie s fie mai slab dect cea a soluiei-martor preparat
n felul urmtor:
La 1 cm3 de acid sulfuric cu concentraia de 0,1 g/dm3 (R-7) (0,1 mg de H2SO4) se adaug
1 cm3 de acid clorhidric diluat (R- 2) i se aduce pn la volumul de 20 cm3 cu ap distilat. La
soluia obinut se adaug 2 cm3 de soluie de clorur de bariu de 10 % (R-17 ) (Soluia martr
obinut conine 100 g de H2S04).
279
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
ACIDUL SORBIC
1.6 Clorurile
La 10 cm3 soluie preparat conform p.3. 5.1 se adaug 5 cm3 ap, 5 cm3 acid azotic diluat
de
10 % (R-1) i 0,5 cm3 soluie de azotat de argint de 5 % (R-15 ). Amestecul trebuie s fie limpede
sau opalescena aprut peste 15 minute trebuie s fie mai slab dect cea a soluiei-martor
preparat n felul urmtor:
La 0,5 cm3 de acid clorhidric cu concentraia de 0,1 g/dm3 ( R-4) ( 0,05 mg de HC1) se
adaug 0,5 cm3 de acid azotic diluat (R- 1) i se aduce pn la pn la volumul de 20 cm3 cu ap
distilat La soluia obinut se adaug 0,5 cm3 soluie de azotat de argint de 5% (R-15). (Soluia
martr obinut conine 50 g de HC1).
1.7 Plumbul
Se cntresc aproximativ 0,2 g de acid sorbic i se dizolv n 20 cm3 de alcool pur; apoi se
dilueaz pn la 100 cm3 cu ap distlat. n soluia obint se determin concentrai n plumb prin
spectrofotometrie cu absorbie i emisie atomic (AAS).
Coninutul n plumb (X), n mg/kg se calculeaz cu formula:
1000 * n
X=
|4|
p
n care,
1000 - coeficientul de recalculare la 1 kg de produs;
n - cantitatea de plumb determinat la AAS, mg/l;
p- masa de acid sorbic luat pentru analiz, g
1.8 Aldehidele
ntr-un balon se pregtete o soluie saturat de acid sorbic amestecnd 1 g de acid sorbic cu
35 ml de ap foarte fierbinte. Astupnd balonul soluia se 1 as s se rceasc.
Soluia rcit se filtreaz trecnd-o cantitativ intr-un balon cotat cu volumul de 50 cm3.
Sedimentul i filtrul se spal de mai multe ori cu cantiti mici de ap pn se obine 50 cm3 de
filtrat. Se trateaz 1 cm3 de aceast soluie cu 0,5 cm3 de soluie de fuxin decolorat cu acid
sulfuros (R-20 ) i se compar dup 5 minute cu o soluie -martor obinut din 0,5 cm3 de acela
reactiv (de soluie de fuxin decolorat cu acid sulfuros) i 1 cm3 de soluie de aldehid formic cu
concentraia 20 g/cm3 (R-13). Culoarea trebuie s fie mai puin intensiv dect cea a soluieimartor.
280
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
ACIDUL SORBIC
LISTA REACTIVILOR UTILIZAI LA ERIFICAREA
CALITII ACIDULUI SORBIC I MODUL LOR DE PREPARARE
Indexul
RR-l
RR-2
RR-3
RR-4
RR-5
RR-6
RR-7
RR-8
RR-9
RR-10
RR-ll
RR-12
RR-13
RR-14
RR-15
RR-16
RR-17
RR-l 8
RR-I9
RR-20
RR-21
Denumirea reactivului
Acid azotic diluat
Modul de preparare
15,8 g acid azotic (HN03) (p = 1,39) i 82,4 g de ap
distilat. Densitatea soluiei obinute 204 = 1,056
Acid clorhidric diluat, 10,%
Soluie apoas ce conine 10 g de HC1 n 100 g de
soluie,
~ 1.0489
3
Acid clorhidric 1 mol/dm
80 cm de acid clorhidric ( ~ 1,19) se aduc la volumul
de
1 dm3 cu ap distilat.
Acid clorhidric 0,1 g/ dm3
0,27 cm3 de acid clorhidric ( ~ 1,19) se aduc la
volumul de 1 dm3 cu ap distilat.
Acid clorhidric 0,1 mol/ dmJ
Soluia se prepar din fixanale
Acid sulfuric concentrat
- 1,832
3
3
Acid sulfuric, 0,1 g/dm
0,54 cm de acid sulfuric concentrat se aduc la volumul
de
1 dm3 cu ap distilat.
Acid n-valerianic
1 cm3 de acid n-valerianic pur i 99 cm3 aceton.
Concentraia soluiei obinute - 18,8 g /dm3
Acid tartric
Cristale uscate
Acid sorbic de 4 %
0,2 g de acid sorbic se dizolv n 25 cm3 de aceton i se
aduc pn la volumul de 50 cm3 cu ap distilat
Alcool etilic pur
Alcool etilic cu concentraia alcoolic min 96,0% vol
Alcool etilic de 10 %.vol
~ 11 cm de alcool etilic rafinat se aduce pn la volumul
(souie hidroalcoolic)
de 100 cm3 cu ap distilat
Aldehid formica
Soluie apoas de aldehid formic care conine 20 g la
1 cm3.
Ap de brom
Soluie saturat de brom. Se dizolv aproximativ 3,5 g
de brom n 100 cm3 de ap la temperatura de 20 C.
Azotat de argint de 10 %
Soluie apoas care conine 10 g de azotat de argint uscat
n 100 g de soluie
Monocarbonat de sodiu
0,5 g de monocarbonat de sodiu se dizolv n 1 dm3 de
ap distilat.
Clorur de bariu 10%
Soluie apoas care conine 10 g de clorur de bariu n
100 g de soluie
Ester dietilic
Ester dietilic reactiv
Fenolftatein soluie
1 g de fenolftalein se dizolv n 100 cm3 de alcool etilic
cu concentraia de 90 % vol
Fuxin decolorat cu acid 8 g de metabisulfit de potasiu se dizolv n 150 cm3 de
ap distilat; se adaug 30 cm3 de soluie obinut
sulfuros
Hidrixid de sodiu , 0,1 mol/dm3 Soluia de hidroxid de sodiu cu concentraia de 0,1
g/dm3 se prepar din fixanale
281
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6. INDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE ACIDUL METETARTRIC
1 OBIECT I DOMENIU DE APLICARE
Acidul metatartric este un produs obinut prin deshidratarea acidului L-tartric prin nclzire
la tempetatura de 150-170C la presiunea atmosferic sau la o preciune mai joas.
Acidul metatartric se utilizeaz n vinificaie n scopiul prevenirii tulburelilor tartrice.
Componenii principali a acidului metatartric snt monoesterii i diesterii bitartrai n proporii
variabile, care provin de la combinarea a dou molecule de acid tartric cu perderea apei, amestec
de cantiti variabile de acid tartric, neesterificat, acid piruvatic i de acizi poliesteri puin
cunoscui.
2 CONDIII TEHNICE DE CALITATE
Tabelul 1
Caracteristici
Aspect
Miros
Solubilitatea
n ap
n alcool
Testul cu reactivul
sulforesorcinic
Testul cu acidul tartric
Cristale sa praf albisios sau
puin glbui
Slab de pine coapt sau
caramel
Foarte solubil
Foarte solubil
Rezist
Rezist
Coninutul acidului tartric

eterificat
Coeficientul de eterificare
Min 105
Max. 5
Min32
Metode de analiz
Organoleptic
Organoleptic
Conform punctului 3.1
al
Conform punctului 3.2 al

Conform punctului 3.4.2 al
Conform punctului 3.4.3 al
3 METODE DE VERIFICARE
3.1. Solubililatea
Se verific solubilitatea produsului n ap la temperatura de 20 C i n alcool etilic pur
la temperatura de 20 C.
3.2. Testul cu reactivul resorcinic
ntr-un tub ce iau 2 cm3 de acid sulfuric concentrat ( R-2) se adaug 1-10 mg de acid metatartric i
2 picturi de reactiv sulforesorcinic (R-7). Amestecul se nclzete pn la la temperatura de
150C. Se consider c produsul rezist la testare n cazul cnd apare o culoare violet intens
282
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
6.
INDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE

ACIDUL METETARTRIC
3.3. Testul cu acidul tartric

ntr-un cilindru de 100 cm3 se iau 2,5 cm3 soluie de acid tartric (lOg /100 cm3) (R-4) Se
adaug 10 mg acid metatartric (0,5 ml de soluie de 2 %), 40 cm3 ap i l cm3 soluie de acetat de
calciu (R- 1) (25 g ntr-o 100 ml). Se amestec. Un precipitat slab amorf, n suspenzie aprut n
unele probe indic concentraia nalt a esteilor, care conin o cantitate nensemnat de poliesteri
puin cunoscui. Se consider c produsul rezist la testare n cazul cnd timp de 24 ore n cilindru
se formeaz precipitat cristalic, n timp ce n amestecul de aceiai reactivi fr adugarea acidului
metatartric se formeaz un precipitat cristalic de la bun nceput.
3.4. Determinarea coninutului acidului total (liber i esterificat) i a coeficientului de esterificere
3.4.1. Prepararea soluiei pentru analize .
Se dizolv 20 g de acid metatartric n 1 dm3 de ap distilat.
3.3. Testul cu acidul tartric
ntr-un cilindru de 100 cm3 se iau 2,5 cm3 soluie de acid tartric (lOg /100 cm3) (R-4) Se
adaug 10 mg acid metatartric (0,5 ml de soluie de 2 %), 40 cm3 ap i l cm3 soluie de acetat de
calciu (R- 1) (25 g ntr-o 100 ml). Se amestec. Un precipitat slab amorf, n suspenzie aprut n
unele probe indic concentraia nalt a esteilor, care conin o cantitate nensemnat de poliesteri
puin cunoscui. Se consider c produsul rezist la testare n cazul cnd timp de 24 ore n cilindru
se formeaz precipitat cristalic, n timp ce n amestecul de aceiai reactivi fr adugarea acidului
metatartric se formeaz un precipitat cristalic de la bun nceput.
3.4. Determinarea coninutului acidului total (liber i esterificat) i a coeficientului de esterificere
3.4.1. Prepararea soluiei pentru analize .
Se dizolv 20 g de acid metatartric n 1 dm3 de ap distilat.
3.4.2. Determinarea coninutului acidului esterificat.
ntr-un balon conic cu capacitatea de 250 cm3 se i-au 50 cm3 soluie ( Preparat conform p. 3.4
1 g acid metatartric) proaspt preparat; se adaug 3 picturi soluie de albastru de bromtimol
(R-5) , soluie de hidrohid de natriu cu concentraia c(NaOH) = lmol/dm3 (R-6) pn la culoarea
albastru-verzue.
n acela balon se adaug 20 cm3 soluie de hidrohid de natriu cu concentraia c(NaOH) =
lmol/dm3, i se las pe 2 ore la temperatura ncperii. Excesul de hidroxid de natriu se titreaz cu
acid sulfuric cu concentraia c (H2SO4) = 0,5 mol/d m3 (1,0 N) (R-3). La 1 cm3 de soluie
dehidroxid de natriu cu concentraia c ( NaOH)= lmol/dm3 corespunde 0,075 g acid tartric.
Coninutul acidului total C,n% n produsul analizat se calculeaz cu formula:
C = 7,5x ( n + 20-n')
|1|
n care
n - volumul soluiei de hidrohid de natriu cu c( NaOH) = lmol/dm3 chieltuit la neutralizare
(pentru a obine culoarea amestecului albastru-verzue), cm3;
20 - volumul soluiei de hidrohid de natriu cu c ( NaOH) = lmol/dm3 adugat n exces, cm3;
n' - volumul soluiei de acid sulfuric c ( H2SO4) = 0,5 mol/dm3, chieltuit la titrare, cm3;
7,5 - coeficientul de recalculare n acid tartric
283
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
ACIDUL METETARTRIC
3.4.3. Determinarea coeficientului de esterficare.

Coeficientul de esterificare, n dependen de coninutul acidului tartric total,se calculeaz
cu formula.
100 (20 n)
K=
(n + 20 n)
n care cifrele i coeficienii conform p.3.4.1.
3.5. Plumbul
Se cntresc aproximativ 0, 2 g de acid metatartric . Acidul metatartric cntrit se dizolv n
10-20 cm3 de ap i se trece cantitativ ntr-un balon cu volumul de 100 cm3. Volumul balonului
se aduce pn la semn cu ap distilat.. In soluia obint se determin concentrai n plumb prin
spectrofotometrie cu absorbie i emisie atomic (AAS). Coninutul n plumb (X), n mg/kg se
calculeaz cu formula:
1000 n
X=
p
n care,
1000 - coeficientul de recalculare la kg de produs;
n
- cantitatea de plumb determinat la AAS, mg/1;
p - masa de acid metatartric luat pentru analiz, g
284
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
7. NDICII DE CALITATE I METODA VERIFICARE SORBATUL DE POTASIU
1 OBIECT I DOMENIU DE APLICARE
Sorbatul de potasiu este un agent conservator. El elibereaz 74 % de acid sorbic i se

utilizeaz n vinificaie pentru stabilizare
Prezentul document conine caracteristicile de calitate ale sorbatului de potasiu i stabilete
metodele de verificare a caracteristicilor de calitate.
Formulele: de empiric C6H7O2K
CH,-CH = CH-CH=CH COOK
de structur
Masa molecular: C6H7O2K = 150,2
2. CONDIII TEHNICE DE CALITATE
Tabelul 1
Caracteristici
1
Aspect
Solubilitatea;
n ap Ia 20 0 C, g/I
n alcool de 95 % voi, g/l
2
Praf sau granule albe sa bejdeschis
Foarte solubil ( 1993 g/l)
Puin solubil (-14 g/l)
n ester etilic, g/l
Insolubil
Caracteristici de identitate:
Testul cu fenolftalein
rezist
Testul cu rou de metilen
rezist
Testul cu apa de brom
rezist
Absorbia maximal
256 nm
Reacia calitativ la
prezena potasiului
Reacia calitativ
cu acizi
pozitiv
pozitiv
Metode de analiz
3
Conform p. 3.1.1 al
prezentului dociument
Conform p. 3.2.1 al
Conform p. 3.2.2 al
Conform p. 3.2.3 al
Conform p. 3.3.1 al
Conform p. 3.3.2 al
Conform p. 3.3.3 al
Conform p. 3.3.4 al
Conform p. 3.3.5 al
Conform p. 3.3.6 al
285
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
SORBATUL DE POTASIU
Prelungirea tabelului 1
Caracteristici
1
Umeditatea, %
2
Max. 1,5
Coninutul acidului sorbic

eliberat, %
Coninutul substanei de baz
(sorbatului de potasiu), %
Coninutul n sulfai exprimat n
acid sulfuric, g /kg
Coninutul n cloruri exprimat n
acid clorhidric, g /kg
Coninutul n aldehide exprimat
n aldehid acetic, g/kg
74
Max. 98
Max. 1,0
Max. 1,0
Max. 5,0
Max.l
Metode de analiz
3
document
document
document
document
Conform 3.8 al prezentului
document
document
document
3. METODE DE VERIFICARE
Not. Lista reactivilor i modul lor de preparare snt expuse n anexat

3.1. Aspect
Vizual se determin aspectul sorbatului de potasiu.
3.2. Solubilitatea
3.2.1. Solubilitatea n ap la 20 C.
Se cntresc 193,3 g de sorbat de potasiu . Cantitatea cntrit de sorbat de potasiu se
dizolv n 100 cm3 de ap la temperatura de 20 C.
3.2.2. Solubilitatea n alcool de 95 % vol.
Se cntresc 1,4 g de sorbat de potasiu . Cantitatea cntrit de sorbat de potaiu se dizolv
n 100 cm3 de alcool la temperatura de 20 C .
3.2.3 Solubilitatean ester etilic.
Se cntresc 0,1 g de sorbat de potasiu Cantitatea cntrit de sorbat de potasiu se dizolv
100 cm1 de ester etilic la temperatura de 20 C .
Rezultatele obinute conform p. 3.1.1-3.1.3 se exprim prin " foarte solubil" , "puin
solubil" sau "insolubil".
3.3 Caracteristici de identitate.
3.3.1 Testul cu fenolftalein
Se pregtete o soluie de sorbat de potasiu cu concentraia de 10 % . Se adaug cteva
picturi de fenolftalein (R-20 ). Se consider, c produsul rezist la testare n cazul cnd soluia
rmne incolor.
286
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
SORBATUL DE POTASIU
3.3.2. Testul cu rou de metilen

Se pregtete o soluie de sorbat de potasiu cu concentraia de 10 %. Se adaug cteva
picturi de rou de metil (R-21 ). Se consider, c produsul rezist la testare n cazul cnd culoarea
soluiei trece din rou n portocaliu.
3.3.3. Testul cu ap de brom
ntr-un balon cu capacitatea de 100 cm3 se iau 20 mg de sorbat de potasiu , se adaug 1
cm3 de ap de brom (R-14) i 1 pictur de acid acetic (R-l ). Se consider, c produsul rezist la
testare n cazul cnd culoarea dispare.
3.3.4. Absorbana maximal.
5 mg de sorbat de potasiu se dizolv n 10 cm3 de ap apoi volumul se aduce pnla
ldm 3 cu ap distilat . Cu ajutorul spectrofotometrului semsoar absorbanta la 10-15 valori
ale intervalului lungimii de und 245-265 nm. Se determin lungimea de und la care soluia are
absorbanta maximal.
3.3.5. Reacia calitativ la ionii de K+.
Se pregtete o soluie de sorbat de potasiu cu concentraia de 10 %. Cu ajutorul unei anse
curate se introduce n para focului o pictur din aceast soluie. Se consider c reacia calitativ
la ionii de K+ este pozitiva, cnd para focului se coloreaz n violet.
3.3.6. Reacia calitativ cu acizii.
Se pregtete o soluie de sorbat de potasiu cu concentraia de 10 %. La soluia obinut se
adaug 5 cm3 de soluie de acid clorhidric diluat (R- 4). Se consider c reacia calitativ cu acizii
este pozitiv, dac se formeaz un precipitat alb.
3.4. Umeditatea.
Cantitatea de sorbat de potasiu cu masa de aproximativ 1 g se trece ntr-un pahar , adus
pn la mas constant, i se cntrete cu o exactitate de pn la 0,01 g.
Cantitatea cntrit de sorbat de potasiu se usuc timp de 3 ore n etuv la temperatura
105 2 0 C. Dup uscare phrelul cu sorbatul de potasiu se cntrete cu exactitate de pn
la 0,01 g
Fracia masic de umeditate (X), exprimat n procente (%), se calculeaz cu formula:
n care,
X=
m1 m2
100
m1 m
(1)
m 1 - masa paharului cu acid sorbic cntrit pn la uscare,g;

m 2 - masa paharului cu acid sorbic cntrit dup la uscare
m - masa paharului gol,g ;
Calculul se efectueaz pn la 0,01 dup virgul i se rotungete pn la 0,1.
3.5 Coninutul acidului sorbic eliberat.
Coninutul acidului sorbic eliberat se determin prin metoda gaz-cromatografic.
3.5.1 Prepararea soluiei de sorbat de potasiu - soluia A.
Se prepar o soluie de sorbat de potasiu cu concentraia aproximativ de 200 mg/dm3 n
felul urmtor: ntr-un balon cotat cu volumul de 100 cm3 se iau aproximativ 20 mg de sorbat de
potasiu , 2-3 picturi de acid clorhidric cu concentraia 1,0 mol/dm3 (R- 6) i se aduce pn la
semn cu soluie hidroaicoolic cu concentraia alcoolic de 10 % (R-12 ).
287
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
SORBATUL DE POTASIU
ntr-o eprubet gradat cu volumul de 15-20 cm3 se iau 10 cm3 de soluie preparat de
sorbat de potasiu, se adaug 0,5 cm3 soluie acetoniap n proporie 1:1 , 0,1 cm3 etalon intern
(acid n-valerianic) (R- 9) i 2 cm3 de ester dietilic (R-19).
3.5.2 Prepararea soluiei etalon de acid sorbic (reactiv) - soluia B
ntr-o eprubet gradat cu volumul de 10 cm3 se iau 0,5 cm3 de soluie de acid sorbic cu
concentraia de 4g/ dnv (R-1 1 ) , 2-3 picturi de acid clorhidric cu concentraia 0,1 mol/dm'
(R- 6), 0,1 cm3 soluie de etalon intern (acid n- valerianic) (R-9 ), 2 cm3 ester dietilic (R-19) i se
aduce pn la volumul de 10 cm3 cu soluie hidroaicoolic cu concentraia alcoolic 10 % voi
(R-12 ).
Concentraia acidului sorbic n soluia A i B se determin prin metoda gaz-cromatografic
conform SM 152.
Coninutul acidului sorbic eliberat C n procente (%) n sorbatul de potasiu anaizat se
determin cu formula:
C
|2|
C= 100
C1
n care
C - concentraia acidului sorbic determinat prin gaz-cromatografie, mg/dm3

1 -concentraia soluiei de sorbat de potasiu pregtit, mg/dm3
3.6 Coninutul substanei de baz (sorbatului de potasiu).
Determinarea se efectueaz cu sorbat de potasiu , uscat n exicator cu acid sulfuric
concentrat (R-7) timp de 24 ore.
Se ntroduc aproximativ 0,20 g de sorbat de potasiu, 1 g de acid tartric (R- 10) i 10 cm3
de ap n barbotorul unui aparat de vapori de ap; se colecteaz 250 cm3 de distilat ( pn vaporii
nu antreneaz majoritatea acidului). Aciditatea soluiei distilate se titreaz cu soluie de hidroxid
de sodiu de 0,1 mol/dm3 (R-23).
Coninutul substanei de baz (sorbat de potasiu ) n produsul analizat (X), n % se
calcileaz cu formula:
1,502 n
|3|
X=
p
n care,
1,502 - masa de sorbat de potasiu , corespunztoare la 100 cm3 de hidroxid de sodiu de 0,1
mol/dm3, g;
n - volumul soluiei de hidroxid de sodiu de 0,1 mol/dm3, folosit la titrare, cm3,
p - masa de sorbat de potasiu luat pentru analiz, g
3. 7. Sulfaii
3.7.1. Prepararea soluiei pentru analize
Intr-un balon cotat cu volumul de 50 cm3 se dizolv 1,0 g de sorbat de potasiu n 40 cm3
de ap . Se adaug 0,5 cm3 de acid azotic concentrat (R- 2), se aduce la semn cu ap distilat i se
filtreaz.
3.7.2. Determinarea sulfailor
La 5 cm3 soluie preparat conform p. 3.7.1 se adaug 1 cm3 de HC1 cu concentraia de
10 %. ( R- 4 ), 14 ,0 cm3 de ap i 2,0 cm3 soluie de clorur de bariu de 10 % (R-18 ).
288
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
SORBATUL DE POTASIU
Amestecul trebuie s fie limpede sau opalescenta aprut peste 15 minute trebuie s fie
mai slab dect cea a martorului preparat n felul urmtor:
La 1 cm3 de acid sulfuric cu concentraia de 0,1 g/dm3 (R- 8 ) (0,1 mg de H2S04) se adaug 1
cm3 de acid clorhidric diluat (R-4) i se aduce pn la volumul de 20 cm3 cu ap distilat. La
soluia obinut se adaug 2 cm3 de soluie de clorura de bariu (R-18 ) (Soluia martr obinut
conine 100 ug de H2S04).
3.8 Clorurile
La 2,5 cm3 soluie preparat conform p. 3.7.1 se adaug 0, 5 cm3 de acid azotic diluat
(R- 3), 17,0 cm3 ap i 0,5 cm3 soluie de azotat de argint de 5 % (R-16). Opalescenta aprut
peste 15 minute trebuie s fe mai slab dect cea a martorului preparat n felul urmtor:
La 0,5 cm3 de acid clorhidric cu concentraia de 0,1 g/dm3 (R-5) ( 0,05 mg de HC1) se
adaug 0,5 cm3 de acid azotic diluat (R-3 ) i se aduce pn la pn la volumul de 20 cm3 cu ap
distilat. La soluia obinut se adaug 0,5 cm3 soluie de azotat de argint de 5% (R-16). (Soluia
martor obinut conine 50 g de HC1).
3.9 Plumbul
Se cntresc aproximativ 0, 2 g de sorbat de potasiu . Sorbatul de potasiu cntrit se dizolv
n 10-20 cm3 de ap i se trece cantitativ ntr-un balon cu volumul de 100 cm3. Volumul
balonului se aduce pn la semn cu ap distilat.. n soluia obint se determin concentrai;n
plumb prin spectrofotometrie cu absorbie i emisie atomic (AAS).
Coninutul n plumb (X), n mg/kg se calculeaz cu formula:
1000 n
|4|
X=
p
n care:
1000- coeficientul de recalculare la 1kg de produs;
n - cantitatea de plumb determinat la AAS, mg/l;
p
- masa de sorbat de potasiu luat pentru
analiz, g
3. 10 Aldehidele
Se iau 2,5 cm3 de soluie preparat conform p, 3.6.1 se adaug 0,5 cm3 de acid azotic
diluat cu concentraia de 10 % (R-3 ) i 17 cm3 de ap; 1 cm3 de aceast soluie se trateaz cu 0,5
cm3 de soluie de fuxin decolorat cu acid sulfuros (R-22 ). Se las n repaus pe 15 min , apoi se
compar cu o soluie martor obinut din 0,5 cm3 de soluie de fuxin decolorat cu acid sulfuros
(R- 22) i 1 cm3 de aldehid formiccu concentraia de 20 g/cm3 (R-13).
Culoarea trebuie s fie mai puin intensiv dect cea a soluiei-martor .
289
Anexa 2 (ontinuare)
fabricrii vinurilor
SORBATUL DE POTASIU
Lista reactivilor utilizai la verificarea caliteii

sorbatului de potasiu i modul lor de preparare
Indexul
Denumirea reactivului
R-l
Acid acetic
R-2
Acid azotic concentrat
R-3
Acid azotic diluat
R-4
Acid clor hid r ic diluat, 10,%
R-5
Acid clorhidric 0,1

g/ dm3
Acid clorhidric 0,lmol/dm3
Acid sulfuric concentrat
Acid sulfuric, 0,1 g/dm3
R-6
R-7
R-H
R-9
Acid n-valerianic
R-10
R-ll
Acid tartric
Acid sorbic de 4 %
R-l 2
Alcool etilic de 10 %.vol
R-13
Aldehid formic
R-l 4
Ap de brom
R-15
R-16
R-17
R-18
Clorur de bariu 10%
R-19
R-20
Ester dietilic
Fenolftalein soluie
R-21
Rou de metil
R-22
Fuxin decolorat cu acid

sulfuros
Hidrixid de sodiu, 0,lmol/dm3
R-23
Modul de preparare
p ~ 1,0492
Acidul azotic concentrat are concentraia aproximativ
63% (63 g n 100 g ) . = l , 3 9
15,8 g acid azotic (HN03) ( = 1,39) i 82,4 g de ap
distilat. Densitatea soluiei obinute 20 4 = 1,056
Soluie apoas ce conine 10 g de HC1 n 100 g de
soluie. ~ 1,0489
0,27 cm3 de acid clorhidric ( ~ 1,19) se aduc la
volumul de 1 dm3 cu ap distilat.
Soluia se prepar din fixanale
- 1,832
3
0,54 cm de acid sulfuric concentrat se aduc la volumul
de 1 dm3 cu ap distilat.
1 cm3 de acid n-valerianic pur i 99 cm3 aceton.
Concentraia soluiei obinute - 18,8 g /dm3
Cristale uscate
0,2 g de acid sorbic se dizolv n 25 cm3 de aceton i se
aduc pn la volumul de 50 cm3 cu ap distilat
~ 11 cm3 de alcool etilic rafinat se aduce pn la volumul
de 100 cm3 cu ap distilat
Soluie apoas de aldehid formic care conine 20g la
1 cm3.
Soluie saturat de brom. Se dizolv aproximativ 3,5 g
de brom n 100 cm3 de ap la temperatura de 20 C.
n 100 g de soluie
n 100 g de soluie
n 100 g de soluie
Soluie apoas care conine 10 g de clorur de bariu n
100 g de soluie
Ester dietilic reactiv
1 g de fenolftalein se dizolv n 100 cm3 de alcool etilic
cu concentraia de 90 % voi
0,1 g de rou de metil se dizolv n 100 cm3 de alcool
etilic cu concentraia de 90 % vol
8 g de metabisulfit de potasiu se dizolv n 150 cm3 de
ap distilat; se adaug 30 cm3 de soluie obinut
Soluia de hidroxid de sodiu cu concentraia de 0,1
g/dm3 se prepar din fixanale

Proiect HG RT Metode Fabricarea Vinului PDF

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Proiect HG RT Metode Fabricarea Vinului PDF

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Aprobat

prin Hotrrea Guvernului

n dependen de scopul aplicrii lor se clasific n:

1) Metode de referin criter - aceste metode asigur o repetabilitate nalt i sunt

- metode destinate pentru efectuarea analizelor uzuale

3) Metode analitice automatizate - metode relative i sunt admise pentru utilizare n

de litigiu metodele de referin criter

nu pot fi nlocuite cu metode

7. Prezenta Reglementare tehnic ntr n vigoare la data publicrii n Monitorul Oficial

2. Metode de analiz a vinurilor i mustului utilizate n laboratoarele

2.1. Densitatea i greutatea specific la 20oC

2.2. Concentraia alcoolic la 20 oC

2.3. Extractul total i sec nereductor

2.4.2. MA-MD-AS 2-02 SUCREF

2.5. Aciditatea titrabil

2.6. Aciditatea volatil

2.7. Dioxid de sulf

2.8. Zaharoza, glucoza, fructoza

2.9. Glucoza i fructoza

2.10 Acizi organici

2.12. Acidul tartric

2.13. Acidul lactic

2.14. Acidul malic

2.14.2.MA-MD-AS 313-11 ALMENZ

2.14.3.MA-MD-AS 313-12 ADMENZ

2.15. Acidul sorbic

2.16. Acidul L-ascorbic

2.17. Aciditatea ionic (pH-ul)

2.18. Dioxidul de carbon

2.20. Glicerol, butan-2,3-diol

2.20.2. MA-MD-AS 312-05 GLYENZ

2.27. Mercurul sau Hidrargiul

2.33. Alcooli superiori

2.35. Derivaii cianici

2.36.2. MA-MD-AS 315-11 ANCYAN

2.38. Indicele Folin-Cioclteu

2.39. Caracteristici cromatice

2.40.2. Metoda enzimatic cu detectare spectrofotometric, aprobat de

2.41. Prezena coloranilor sintetici

2.41.3. Metoda HPLC, aprobat de Departamentul Agroindustrial

2.42. Prezena ndulcitorilor sau edulcoranilor sintetici

2.43. Prezena aromatizatorilor sintetici

2.44. Analiz microbiologie a vinurilor i mustului

4. Indicii de calitate i metoda speciale pentru analiza mustului concentrat rectificat

5. Indicii de calitate i metodele de verificare acidul sorbic

6. Indicii de calitate i metodele de verificare acidul metatartric

7. Indicii de calitate i metodele de verificare sorbatul de potasiu

MA-MD-AS Metoda de analiz Moldova-Anexa, Secia

Densitatea i greutatea specific la 20 C se determin pe o prob de testare:

Un recipient izolat termic, bine ajustat pe corpul picnometrului.

a scalei termometrului. Se cntrete picnometrul umplut cu ap i se noteaz greutatea p', n

4.3. Metoda de determinare

5.1. Picnometria prin utilizarea balanei cu dou talere

17,8 o c = 0,99788 g/ml

Tabelul II permite calcularea 20 o c din t o c pe baza raportului:

5.2. Picnometria prin utilizarea balanei cu un singur taler

Tabelul II permite calcularea lui 20 C pe baza raportului:

Factorii F de multiplicare a masei de ap coninut n picnometrul Pyrex la t C, pentru calcularea

+ dac t C este peste 20 C

+ dac t C este peste 20 C

2.1.2. SM GOST R 51619-2000

2.2 CONCENTRAIA IA ALCOOLIC 20 C

2.1. Distilarea vinului alcalinizat cu o suspensie de hidroxid de calciu. Se determin