PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 1 din 7

DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

DATA 23.03.2009 Exemplar nr. 1 SEMNATURA

Responsabil calitate laborator ing. chimist Maria Cohl
ELABORAT
Responsabil analize AP- ing. chimist Maria Popa
VERIFICAT Responsabil calitate laborator ing. chimist Maria Cohl
APROBAT Director General - dr. ing.Ion Toma

1. SCOPUL
Procedura este destinat modului de determinare a continutului de nitriti din apa potabil, ape
brute i ape uzate.
Principiul metodei const n reacia ionilor nitrii din proba de analizat, la pH de 1,9 cu 4-amino
benzen sulfonamid, n prezena acidului ortofosforic pentru a forma o sare de diazoniu i apoi
un complex de culoare roie cu N (1-naftil)-etilen-diamina diclorhidrat, a cruii absorban se
masoara la lungimea de und de 540 nm.

2. DOMENIUL DE APLICARE
Procedura descrie metoda colorimetric de determinarea a continutului de nitriti conform SR EN
26777 ISO 6777:2002.
Metoda se aplica pentru concentratii ale nitriilor n ap de pana la N = 0,25 mg/l, utiliznd un
volum de prob de maximum 40 ml. Prin diluarea corespunztoare a probelor, metoda se aplic
i n cazul apelor cu coninut mai mare de nitrii.
Limita de detecie gsit utiliznd cuve cu drum optic de 40 mm i un volum de prob de 40 ml
se situeaz n intervalul 0,001 N 0,002 mg/l.
Sensibilitate:
n general utiliznd un volum de prob de 40 ml i cuve cu do de 40 mm, o concentraie de N =
0,062 mg/l d o absorban de aproximativ 0,66 uniti.
n general utiliznd un volum de prob de 40 ml i cuve cu do de 10 mm, o concentraie de N =
0,25 mg/l d o absorban de aproximativ 0,67 uniti.

3. REFERINTE NORMATIVE
3.1. Documente de referin
3.1.1. SR EN 26777 ISO 6777:2002 Calitatea apei. Determinarea coninutului de nitrii.
Metoda prin spectrometrie de absorbtie moleculara;
3.1.2. SR EN ISO 17025:2005 Cerine generale pentru competena laboratoarelor de ncercri
i etalonri ;
3.2. Documente conexe
3.2.1. SR EN ISO 5667-1/AC/ 2007 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 1: Ghid general pentru
stabilirea programelor i a tehnicilor de prelevare;
3.2.2. SR EN ISO 5667-1/ 2008 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 1: Ghid general pentru
stabilirea programelor i a tehnicilor de prelevare;
3.2.3. SR EN ISO 5667-3/2004 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 3: Ghid de conservare i
manipularea probelor de ap;
3.2.4. SR ISO 5667-4/2000 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 4: Ghid de prelevare a apelor
din lacuri naturale i artificiale;
3.2.5. SR ISO 5667-5: 1998 - Calitatea apei. Partea 5: Ghid pentru prelevarea apei potabile i
apei utilizate in industria alimentar i de buturi;
3.2.6. SR ISO 5667-6:1997 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 6: Ghid pentru prelevarea
probelor din ruri i cursuri de ap;

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 2 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

3.2.7. SR ISO 5667-10:1992 Calitatea apei Prelevare. Partea 10. Ghid general pentru
prelevarea apelor uzate;
3.2.8. SR ISO 5667-11:2000 - Calitatea apei. Prelevare. Partea 11: Ghid general pentru
prelevarea apelor subterane;
3.2.9. Instruciune de lucru pentru Spectrofotometrul CADAS100 (ILL LAA -14);
3.2.10. Instruciune de lucru pentru Balana analitic PRECISA 220A (ILL-LAA - 3);
3.2.11. Instructiuni de lucru pentru Balanta electrinic PRECISA XT 1200C (ILL-LAA - 4);
3.2.12. Instruciune de lucru pentru Spectrofotometrul CADAS100 (ILL-LAA -14);
3.2.13. Instruciune de lucru pentru Balana analitic KERN ALT 220 - 4K (ILLLAA - 16);
3.2.14. Instructiuni de lucru pentru Etuva MEMMERT ULE 400 (ILL-LAA - 8);
3.2.15. Instructiuni de lucru pentru Bidistilator GFL-2104 (ILL-LAA - 5).

4. TERMENI / DEFINIII
Nitriii sunt componeni naturali ai solului provenini din mineralizarea substanelor organice
azotoase de origine vegetal i animal. O parte este antrenat de apele de suprafa sau de
cele care traverseaz solul, regsindu-se n apele de suprafa i subterane.

5. ABREVIERI
5.1. LAA - Laborator analize ape;
5.2. PSA-LAA - Procedur specific de analiza;
5.3. ILL-LAA - Instruciune de lucru laborator;
5.4. EM/A/EL - Echipament de msurare/analiz/echipament de lucru;
5.5. PSL-LAA - Procedur specifica de laborator;
5.6. SL/RCL - Sef laborator/Responsabil calitate laborator;
5.7. RA - Responsabil analize ;
5.8. CLL - Caiet lucru laborator;
5.9. RAL - Registru analize laborator;
5.10. RRP - Registru recepie probe;
5.11. BA - Buletin de analiza;
5.12. SMCL - Sistem Management Calitate Laborator;
5.13. FE - Fisa echipament.

6. RESPONSABILITATI
6.1. Sef Laborator/ Responsabil Calitate Laborator
- coordoneaza activitatea de analiza;
- verific/ supervizeaz documentele SMCL, efectuarea analizelor, inregistrarea corecta si
reala a rezultatelor obtinute;
- verifica prin supraveghere i control corecta utilizare a EM/A/EL;
- verifica efectuarea corect i in timp util a analizelor conform frecventei stabilite/graficului de
prelevari;
- valideaz buletinele de analiz;
- asigur condiiile materiale i de mediu corespunztoare desfurrii analizei;
- gestioneaz, completeaz i verific registrele de comenzi externe i rezultatele pentru
clieni externi;
- organizeaz, coordoneaz si aproba participarea la programele de intercomparare/
interlaboratoare i pstrez nregistrrile si rezultatele obtinute;
- verific rezultatele activitilor de SMCL, a calitii rezultatelor n laborator i stabilete
aciuni preventive/corective, mpreun cu RA;

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 3 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

- analizeaz semnificaia i cauzele eventualelor defeciuni ale EM/A/EL i ia masuri cu privire

la scoaterea din functiune a acestora;
- analizeaz mpreun cu RA efectul defeciunilor asupra rezultatelor analizelor anterioare.
6.2. Responsabil Analize
- stabilete efectuarea operaiilor de prelevare/analiz ; codifica;si repartizeaz probele;
- participa si raspunde de efectuarea la timp a analizei;
- asigur executantului analizei documentaia si reactivii necesari efecturii analizei;
- raspunde de prepararea reactivilor si de calitatea acestora;
- rspunde de buna functionare/etalonarea si corecta utilizare a EM/A/EL;
- verific/semneaza rezultatele analizelor n CLL;efectueaz/verifica transferul datelor n RAL;
- elaboreaz sub semnatura buletinele de analiz;
- gestioneaz, completeaz i verific registrele de comenzi externe i rezultatele pentru
clieni interni/externi;
- stabilete si urmrete colectarea i distrugerea reziduurilor/deseurilor de laborator;
- difuzeaz, retrage, elimina i pred spre arhivare documente:caietel/registre;
- stabilete i urmrete punerea n practic de aciuni preventive/corective.
6.3. Personal executie/Executant analize
- preleveaz probele conform procedurii;
- nregistreaz probele n registrul de recepie probe;
- efectueaza analiza i face nregistrrile n CLL;
- pregateste cu atentie sticlaria necesara pentru probe/reactivi/analize,
marcheaza/eticheteaza recipientele/sticlaria de laborator;
- prepar (cand este cazul) soluiile necesare pentru analize.

7. RESURSE MATERIALE SI UMANE

7.1. Resurse materiale
7.1.1. Echipamente
- Balanta analitica PRECISA 220A (clasa de precizie / domeniul de aplicare: 0,01..220g;
e=0,001g);
- Balanta tehnica PRECISA XT 1200C (clasa de precizie / domeniul de aplicare: 0,5..1200g;
e=0,1g);
- Balanta analitica KERN ALT 220 4K (clasa de precizie / domeniul de aplicare: 0,01..220g;
e=0,001g);
- Spectrofotometrul UV-VIS CADAS 100, echipat cu cuve cu drumul optic de 10 mm i 40 (50)
mm (clasa de precizie / domeniul de aplicare: =200..900 nm; precizie 0,1 nm);
- Etuva MEMMERT ULE 400 (reglare si control electronic; cu ventilator);
- Bidistilator GFL-2104 (capacitate de distilare 4l/h; apa distilata: 25= 2,1 S/cm; apa
bidistilata: 25= 1,6 S/cm);
7.1.2. Reactivi
- Acid ortofosforic, solutie de 15 mol/l (= 1,70 g/ml);
- Acid ortofosforic, solutie de aproximativ 1,5 mol/);
- Reactiv de culoare
- Nitrit, soluie etalon N = 100 mg/l ;
- Nitrit, soluie etalon N = 1000 mg/l ;
7.1.3. Sticlarie i materiale de laborator
- spatul;
- fiole de cntrire;
- biuret de precizie, cu capacitate de 25 0.03 ml, 50 0.05 ml clas A;
- baloane cotate clas A de : 50 ; 100 0,25ml, 2500 m 0,25 ml, 1000 0,4 ml;

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 4 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

- pipete gradate clas A de : 1 0,06ml , 5 0,05 ml, 10 0,05 ml;

- vase conice, Erlenmeyer cu capacitatea de 50ml, 300 ml;
- cilindru gradat clas A de 50 0,5 ml, 100 0,4 ml, 250 1 m ;
- par de cauciuc pentru pipete ;
- sticle brune cu dop rodat de 500 ml, 1000 ml ;
- pipete cotate 100 0,08 ml ml;
- cuve cu drum optic de 10 mm, 40 mm (50 mm);
- exicator;
- hartie indicatoare pH;
- eprubete 25 ml;
- plnie;
- hrtie de filtru cu fibr de sticl cu dimensiunea porilor de 0,45 m;
- exicator;
Sticlaria de laborator necesara analizei este de clasa A.
7.1.4. Materiale de referinta / etaloane
- Nitrit, soluie etalon N = 100 mg/l ;
- Nitrit, soluie etalon N = 1,00 mg/l ;

7.2. Resurse umane

Analiza este efectuata de catre executant, verificata prin sondaj de catre SL/RA, iar rezultatele
obtinute sunt inregistrate de catre cei care le executa si validate de catre SL/RA.

8. DESCRIEREA ACTIVITATII
8.1. Aciuni prealabile
8.1.1.Modul de analiz, acceptare i nregistrare a comenzii se face conform PSL-LAA-4.4,
Analiza comenzii, ofertei sau contractului de analiz.
8.1.2. Prelevarea probei.
Probele de apa sunt prelevate n vase de sticl, splate n prealabil. Determinarea trebuie
fcut ct mai repede posibil, n maximum 24 ore de la prelevarea probei.. Pn la efectuarea
analizei probele se vor conserva prin pastrare la temperatura de 25 C.
8.1.3. Pregatirea probei.
Analizele sunt efectuate cu o serie de substane ntlnite frecvent n probele de ap. Printre
substanele supuse analizei, doar cloramina, clorul, tiosulfatul, polisulfatul de sodiu i fier (III)
interfer n mod semnificativ.
Materiile n suspensie prezente n ap se las s sedimenteze sau se filtreaz prin hrtie de
filtru cu fibr de sticl.
Dac alcalinitatea probei este ridicat, pH-ul dup tratarea probei i diluarea la 40 ml este mai
mare de 1,9 0,1 , se adaug un exces de soluie de acid ortofosforic 1,5 mol/l, nainte de
diluare, astfel nct s se obin pH-ul specificat. Metoda permite totui, o alcalinitate sub form
de HCO-3 mai mic de 300 mg/l la o prob de 40 ml fr s se produc abateri n raport cu pH-
ul specificat.
8.1.4. Pregatirea echipamentelor.
Spectrofotometrul CADAS 100 se conecteaz la sursa de tensiune de 220 V, se asteapta
ora pentru ncalzirea i autocalibararea aparatului.
8.1.5. Pregatirea sticlariei.
Sticlaria se spal bine cu solie de acid clorhidric aproximativ 2 mol/l i se cltete din
abunden cu ap distilat i bidistilat.
8.1.6. Prepararea solutiilor.

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 5 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

Se folosesc numai reactivi de calitate analitic recunoscut i ap distilat sau de puritate

echivalent.
- Acid ortofosforic, soluie aproximativ 1,5 mol/l: Cu o pipet se adaug 25 ml acid
ortofosforic soluie 15 mol/l n 150 25 ml ap distilat. Se omogenizeaz i se rcete la
temperatura camerei. Se aduce la semn cu ap distilat ntr-un balon cotat de 250 ml. Se
conserv soluia ntr-un flacon de culoare brun. Este stabil minim 6 luni.
- Reactiv de culoare
Avertisment acest reactiv este periculos. Trebuie evitat contactul cu pielea sau ingestia
reactivului ori a componentelor sale.
Se dizolv 40,0 0,5 g 4-amino benzen sulfonamid (NH 2C6H4SONH2) ntr-un amestec format
din 100 1 ml acid ortofosforic soluie 15 mol/l i 500 50 ml ap distilat.
Se dizolv 2,00 0,02 g N (1 naftil) etilen diamin diclorhidrat (C 10H7NH-CH2-CH2-NH2 x 2
H2O n soluia obinut. Se transfer ntr-un balon cotat de 1000 ml i se completeaz volumul
de ap. Se omogenizeaz bine. Se conserv soluia ntr-un flacon de culoare brun. Este
stabil cel puin o lun dac se conserv la 2...5 0C.
- nitrit de sodiu, soluii etalon, N = 100mg/l:
Se dizolv 0,4922 0,0002 g nitrit de sodiu (uscat la 105 0C minim 2 ore) n 750 ml ap. Se
transfer cantitativ soluia ntr-un balon cotat de 1000 ml i se completeaz volumul cu ap
distilat. Se conserv soluia ntr-un flacon nchis de culoare brun, la temperatura de 2...5 0C.
Este stabil minim o lun.
- nitrit de sodiu, soluii etalon, N = 1,00mg/l:
Intr-un balon cotat de 1000 ml se introduc cu ajutorul unei pipete10 ml nitrit de sodiu solutie
etalon 100 mg/l i se aduce la semn cu ap bidistilat.
1 ml soluie etalon B conine 0,0005 mg No2-.
Soluia se prepar n ziua respectiv si se arunc dup folosire.
Verificarea soluiei etalon de nitrit, N = 100mg/l. Soluiile etalon de nitrit fiind instabile,
concentraia soluiei etalon, N = 100 mg/l poate fi verificat conform metodei: cu o pipet se
iau 50 ml dintr-o soluie titrat de permanganat de potasiu, C(1/5 KmnO 4) = 0,01 mol/l i se
introduc ntr-un balon cotat de 250 ml. Se adaug (10 1) ml dintr-o soluie de acid sulfuric
C(H2SO4) = 2,5 mol/l i se omogenizeaz cu atenie. Se umple o biuret de 50 ml cu o soluie
etalon de nitrit, N = 100mg/l i se regleaz biureta astfel nct ea s ptrund n suprafaa
soluiei de permanganat acid coninut n balonul cotat. Se titreaz pn se decoloreaz soluia.
Atunci cnd virajul spre incolor este pe punctul de a fi obinut, se nclzete soluia cu
aproximativ 40 0C i se continu titrarea lent pn la momentul cnd decolorarea
permanganatului este corect obinut.
Se noteaz volumul soluiei etalon de nitrit utilizat la titrare. 50 ml din soluia titrat de
permanganat de potasiu C(1/5 KmnO4) = 0,01 mol/l, corespunde la 3,502 mg de azot.
De asemenea, pentru soluia etalon de nitrit N = 100mg/l, volumul utilizat la titrare trebuie s fie
de 35,02 ml. Soluia etalon de nitrit se consider bun numai dac volumul utilizat la titrare este
situat n gama 35,02 0,40 ml.
8.2. Actiuni preventive
Personalul trebuie s poarte obligatoriu echipament de protecie i s respecte instruciunile de
lucru/SSM din laborator.

8.3. Mod de lucru

8.3.1. ntr-un balon cotat de 50 ml, se msoar cu pipeta volumul ales de prob i dac este
necesar se completeaz la (40 2) ml cu ap distilat.

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 6 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

Not: este important s ajustm volumul la (40 2) ml pentru a ne asigurac pH-ul adecvat
pentru reacie este atins (dup adugarea reactivului).

Cu ajutorul unei pipete se adaug 1 ml reactiv de culoare. Se omogenizeaz prin micri de

rotire i se completeaz volumul cu ap. Se omogenizeaz i se las n repaus. n acest
moment pH-ul trebuie s fie 1,9 0,1. Dupa 20 minute de la adugarea reactivului se msoar
absorbanta/concentraia solutiei obtinute, in cuve cu grosime potrivit, la lungimea de unda
corespuntoare absorbanei maxime (apriximativ 540 nm), folosind ca solutie de referinta apa
bidistilata tratat la fel ca etaloanele (prob martor).
Proba martor: se efectueaz o prob martor procednd ca mai sus,8.3.1., ns nlocuind proba
cu (40 2) ml ap distilat.
Lungimea de und corespunztoare absorbanei maxime trebuie verificat cnd metoda este
utilizat pentru prima dat i este folosit pentru dozrile urmtoare.
8.3.2. Trasarea curbei de etalonare: ntr-o serie de nou baloane cotate de 50 ml, se introduc cu
ajutorul unei biurete, volume de soluie etalon de nitrit N = 1,00mg/l, indicate n tabelul 1. Se
completeaz coninutul fiecrui balon cotat la volumul de (40 2) ml i se procedeaz cum se
descrie la 8.3.1. aliniatul 3, utiliznd cuve cu drumul optic specificat n tabelul 1.
Se msoar absorbana fiecrei soluii folosind ca soluie de referin proba martor. Se traseaz
o curb a absorbanei n funcie de cantitatea de nitrit, exprimat n azot
Curba trebuie s fie liniar i s treac prin origine.
Trasarea curbei de etalonare se face innd cont de recomandrile instruciunii de lucru pentru
spectrofotometrul CADAS 100 (ILL-LAA -14).
8.4. Exprimarea rezultatelor
Se citete direct pe curba de etalonare, coninutul de nitrii exprimat n azot, din proba de ap
analizat, corespunztor absorbanei probei, conform instructiunii de lucru pentru
spectrofotometrul CADAS 100 (ILL-LAA -14).
Dac este cazul, se amplific cu raportul de diluie a probei.
Rezultatul poate fi exprimat att sub form de concentraie n mas de azot, N, sau de nitrit,
NO2-, n miligrame pe litru, sau sub form de concentraie n cantitate de ion nitrit, C (NO 2-), n
micromoli la litru.
Factorii de transformare apropiai sunt indicai n tabelul 2.
Exemplu: unei concentraii de azot N = 1 mg/l i corespunde o concentraie de nitrit NO2- =3,29
mg/l.

Tabelul 1

Volumul soluiei etalon de Masa corespunztoare de Drum optic al cuvei

nitrit N = 1,00mg/l nitrit, exprimat n azot, mN
ml g mm
0,00 0,00 10 i 40 *)
0,50 0,50 40
1,00 1,00 10 i 40
1,50 1,50 40
2,00 2,00 40
2,50 2,50 10 i 40
5,00 5,00 10
7,50 7,50 10
10,00 10,00 10

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare
 PROCEDUR SPECIFIC DE ANALIZ: Pagina 7 din 7
DETERMINAREA CONINUTULUI DE
NITRII. METODA PRIN SPECTROMETRIE
DE ABSORBIE MOLECULAR
Cod document: PSA-LAA - 12 Versiunea : 1

Tabelul 2
N NO2- C (NO2-)
mg/l mg/l mol/l
N = 1 mg/l 1 3,29 71,4
NO2- = 1 mg/l 0,304 1 21,7
C (NO2-) = mol/l 0,014 0,046 1

9. RAPORTAREA REZULTATELOR/BULETIN DE ANALIZA

Buletinul de analiza trebuie sa contina urmatoarele date:
a. Denumirea laboratorului si locul in care a fost efectuata analiza ;
b. Identificarea unica a BA ;
c. Provenienta probei, data si ora prelevarii ;
d. Parametrii indicatori si rezultatele/valorile reale obtinute ;
e. Observatii, concluzii ;
f. Referire la standardul de determinare;
g. Modificareile aduse modului de lucru, care ar putea influienta asupra datelor;
h. Semnatura si data.

10. NREGISTRRI
10.1. Registru recepie probe;
10.2 Caiet lucru laborator;
10.3. Registru analize laborator
10.4. Buletine de analiz;
10.5. Caiet eviden cantariri/preparari reactiv/materiale de laborator;
10.6. Fie EM/A/EL;
10.7. Comand/solicitare extern/interna;
10.8. Comand anual;
10.9. Buletine de verificri metrologice.

11. ANEXE
Nu sunt.

12. ACTUALIZARI

Nr. Sinteza actualizarii Versiunea Data

cure
nta

Prezentul document reprezinta proprietatea SC APAVITAL SA Iasi

i se supune Legii nr. 8/1996 privind dreptul de autor si drepturile conexe
cu modificrile i completrile ulterioare