ffiffiffi

Cititorii i colaboratorii notri ne pot contacta scriindu-ne pe adresa: Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar din Cluj-Napoca, Str.Manastur 3-5, Disciplina de Reproducie, Obstetric i Ginecologie Veterinar a Facultii de Medicin Veterinar.

V ATEPTM!

FONDATOR

PROF.DR.IOAN BOITOR
COLEGIUL DE REDACIE DIRECTOR Prof.Dr.IOAN GROZA DIRECTOR ADJUNCT Prof.Dr.IONEL PAPUC REDACTOR EF Prof.Dr.CLAUDIUS LISOVSCHI CHELEANU REDACTOR EF ADJUNCT Prof.Dr.DOREL MOISE SECRETARI Sef lucr.Dr.SIMONA CIUPE Asist.dr.MIHAI CENARIU Conf.Dr.DANA PUSTA Drd.LAURA CTAN CONSILIUL STIINTIFIC COORDONATOR Prof.Dr. VASILE COZMA MEMBRI Prof.Dr.DR.h.c. ERONIM UTEU Prof.Dr.DR.h.c.AL. IOAN BABA Prof.Dr.MIRCEA MUNTEAN Prof.Dr.GHEORGHE RPUNTEAN Prof.Dr.ROMAN MORAR Prof.Dr.MARINA SPNU Prof.Dr.NICOLAE MATE Prof.Dr.DANIEL TAINTURIER Ecole Nationale Vtrinaire de Nantes, Frana Med.vet.JOSEPH BLETHON, Frana Prof.Dr. MIGUEL MORENO MILLAN Universidad de Cordoba, Spania Prof.Dr. CHRISTIAN HANZEN Universite de Liege, Belgia FRANOISE GIMET Director Comercial i de Comunicaii, grupul Agena, Frana

CUPRINS I. II. EDITORIAL Facultatea de Medicin Veterinar Cluj-Napoca prezent i viitor....................................................................................................... REFERATE - LUCRRI TIINTIFICE 3

1. UTEU LENUA - Analiza filierei pentru producia de lapte materie prim i organizarea unei zone de colectare i transport al acestuia 2. SPNU MARINA, BRUDAC Gh. F., ANDRU CARMEN, NICULAE MIHAELA, TEFAN R., KAROLYI S.Activitatea imunologic a adjuvanilor 16 neconvenionali.. 3. BRUDAC Gh.F., SPNU MARINA, ANDRU CARMEN DANA, NICULAE MIHAELA, RINDT KRISZTINA, TEFAN R., KAROLYI S., POPESCU RODICA, POPESCU M..- Proprieti i funcii imunologice ale extractelor de echinacea species .......................................................................................................... 4. ANDRU CARMEN DANA, BRUDAC Gh.F., SPNU MARINA, UNGVARI A., CADAR D., NICULAE MIHAELA, URICARU A., CZIRJAK G.- Extracte vegetale i funcii biologice ale acestora: CALENDULA OFFICINALIS.. 5. TMA M., VOTINARU O., CRISTINA MOGOAN - Obinerea i caracterizarea unor extracte vegetale cu potenial de adjuvantare pentru 40 animale....................................................................................... 6. VOTINARU O., CRISTINA MOGOAN, STELIANA GHIBU, TMA M.Cercetri farmacologice asupra aciunii diuretice, saluretice i uricozurice a unor 7. CRCIUN extracte C., SPNU din M., specii MIHALI ale genului L.Epilobium 46 Cercetri (Onagraceae) C., BARBU-TUDORAN electronomicroscopice asupra timusului, splinei, suprarenalelor i ficatului 53 65 34 24 8

puilor de gin tratai cu extracte vegetale de Calendula Officinalis i Echinacea Angustifolia 8. ROTARU O. Relatare de caz. ALARIA ALATA, un parazit practic necunoscut n Romnia....................................................................................................

TABLE OF CONTENTS I. EDITORIAL Faculty of Veterinary Medicine Cluj Napoca Present and Future................................................................................................. II. REPORTS, SCIENTIFIC PAPERS 1. UTEU LENUA . The analysis of raw-milk production chain and the organization of an area for milk gathering and carrying................................... 2. SPNU MARINA, BRUDAC Gh. F., ANDRU CARMEN, NICULAE MIHAELA, TEFAN R., KAROLYI S. the immunological activity of non- conventional adjuvants 3. BRUDAC Gh. F., SPNU MARINA, ANDRU CARMEN DANA, NICULAE MIHAELA, RINDT KRISZTINA, TEFAN R., KAROLYI S., POPESCU RODICA, POPESCU M. Properties and immunological fuctions of Echinacea species extracts.. 4. ANDRU CARMEN DANA, BRUDAC Gh. F., SPNU MARINA, UNGVARI A., CADAR D., NICULAE MIHAELA, URICARU A., CZIRJAK G. Vegetal extracts and their biological functions: CALENDULA OFFICINALIS 5. TMA M., VOTINARU O., CRISTINA MOGOAN Obtainment and 40 characteristics of vegetal extracts with adjuvant potential for animals. 6. VOTINARU O., CRISTINA MOGOAN, STELIANA GHIBU, TMA M. Pharmacological researches on diuretic, saluretic and uricosuric activity of extracts from various species of Epilobium (Onagraceae) 7. CRCIUN chickens C., SPNU M., extracts MIHALI C., BARBU-TUDORAN officinalis L. Electronomicroscopic research on thymus, spleen, adrenals and liver in treated with of calendula and echinacea 53 65 angustifolia.. 8. Rotaru O. Case study. ALARIA ALATA a parasite unknown in Romania.............. 46 34 24 16 8 3

Facultatea de Medicin Veterinar Cluj Napoca, prezent i viitor

Groza I., Papuc I Facultatea de Medicin Veterinar Cluj Napoca
Educaia a ocupat i va ocupa ntotdeauna un rol important n viaa oamenilor, constituind una din forele motrice ale oricrei societi moderne. Modernitatea unei ri este dat de politica educaional a acelei ri, care trebuie s constituie o preocupare i o practic de baz. Schimbrile din spaiul educaional n ara noastr, denumite generic reforma nvmntului, au demarat acum optsprezece ani. n tot acest timp au existat cu adevrat ncercri de construire a unor politici educaionale coerente pe termen lung, ns de cele mai multe ori ele au fost ignorate de factorii decizionali aflai n posturi cheie. Au fost i perioade cnd reforma n planul conceptual i al aciunii, a fost una coerent, intens i apropiat de standardele avansate ale reformelor contemporane n educaie. ns a vorbi astzi n Romnia despre existena unui management educaional care s cuprind toate sferele procesului educativ, de la nivelul conducerii instituionale pn la cel de profesor manager, este mai mult o premis O teoriei, teoretic parte i a utopic dect una concret i bine ancorat n realitate. mare cadrelor i didactice practici manifest o puternic reinere n aplicarea metodologiei managementului n activitatea educaional, considernd c acesta i are relevan doar n domeniul economic nu i n cel educaional. Muli profesori consider c managemntul educaional este o art care se bazeaz pe anumite caracteristici de personalitate i pe anumite aptitudini cu care se nate profesorul, prin urmare acest lucru nu poate fi nvat. Aceti profesori ajuni n funcii de conducere vor dezvolta n activitatea lor un stil managerial cu coninut preponderent empiric, vor aciona dup principiul vznd i fcnd, neavnd obiective clar stabilite pe baza unor planuri i programe, iar evoluia viitoare a organizaiei educaionale nu o pot concepe dect pe baza experienei trecute. Reforma din nvmntul romnesc ncearc s schimbe tocmai acest aspect, punnd accentul pe latura formativ din cadrul procesului educativ, latur mult rmas n urm comparativ cu ceea informativ. Cele dou laturi ale educaiei, formativ i informativ, se poteneaz una pe alta i vin s ntregeasc personalitatea celui cuprins n procesul educativ, prin armonizarea laturii sale afectiv-atitudinal-comportamental cognitiv. coala, indiferent de nivelul luat n considerare, trebuie privit ca o instituie social cu multiple funcii i roluri, capabil s rspund n mod adecvat i eficient nevoilor sociale, psihologice ale celui cuprins n dezvoltarea personalitii proprii. Ea trebuie s previn i s elimine tulburrile de adaptare ale fiecrei etape de via, conform vrstei, i s fac din cel supus colarizrii un individ responsabil al societii civile. cu ceea

Este bine tiut faptul, c astzi omul triete aproximativ dou treimi din viaa sa ntr-o realitate virtual oferit de mass-media i c procesul educaional, implicit, se desfoar i n cadrul acestei realiti, colii rmnndu-i doar o treime din viaa unui individ pentru a-l pregti i a-l transforma n vederea adaptrii la noile exigene impuse de tipul de societate democratic spre care tind toate riile lumii, inclusiv Romnia. mvmntul, pentru a deveni eficient, trebuie s iniieze reforme profunde. Primii chemai n aplicarea reformei sunt managerii care trebuie s dispun de mult mai multe caliti de conducere dect nainte. Schimbarea nu poate fi fcut dect de acei mediu manageri bazat care pe au convingerea c potenialul uman se dezvolt doar ntr-un ncredere, nvare, demnitate, participare i angajament. Parafrazndu-l pe Karl Popper, putem afirma c ceea mai bun dintre cile de urmat ale nvmntului romnesc, care s asigure att responsabilitatea social, ct i cererea pieei de munc, este calea care se bazeaz pe comunicare, participare, dedicare i asumare a responsabilitii. Gsirea cilor spre succesul educaional va diminua sau nc va elimina i empirismul va forma managerial, existent,

conduce prin exemplul personal; face super investiii n oameni; face din cei mai inventivi angajai, eroi; utilizeaz cele mai simple metode pentru a stimula nelegerea i participarea celorlali;

Boyer (1997) Secretar de Stat n probleme de educaie ale guvernului SUA afirma dac dorim s avem centre de excelen n cercetare, trebuie s avem centre de excelen n slile de clas. Responsabil de centrele de excelen n slile de clas este profesorul, iar evaluarea activitii sale trebuie fcut sub dou aspecte: predare i cercetare, accentul s cad pe activitatea de predare. Druker (1993) consider c o organizaie este bolnav dac: pentru personalul su, promovarea devine mai important dect realizarea sarcinilor muncii sale; este mai preocupat s evite greelile dect s i asume riscuri; anuleaz slbiciunile personalului su, n loc s pun accent pe aptitudinile acestora; relaiile umane dect bune devin mai i importante realizrile. Plecnd de la aceste premise, Facultatea de Medicin Veterinar din Cluj-Napoca, vine n ntmpinarea tinerilor ce doresc s devin medici veterinari, cu o ofert educaional atractiv. Facultatea de Medicin Veterinar din ClujNapoca, din anul 2008 este o facultate acreditat, iar oferta sa educaional n spaiul Uniuni Europene ncurajeaz mobilitatea tinerilor i le pune la dispoziie informaii performana

profesioniti n educaie, ce se vor baza n activitatea lor pe raionalitate i creeativitate. Managerii viitorului sunt acei manageri care au ca latur dominant a activitii lor orientarea Watermann mine: spre excelen. Peters i (1983) evideniaz cteva

caracteristici de baz ale managerului de

punctuale despre oportunitatea de a studia n ar sau n strintate. Oferta educaional n spaiul european poate fi accesat pe site-ul: http://www.euroguidancefrance.org/f/182/etudier-enroumanie.htm. n afara acestui site mai exist i alte siteuri i anume: http://www.onisep.fr/onisepportail/portal/mediatype/html/group/gp/page/ unde ara noastr are posibilitatea de a-i face public oferta educaional. Portalul Ofertelor de Educaie din Spaiul European (PLOTEUS), site dezvoltat, pentru a rspunde concluziilor Consiliilor Europene de la Lisabona i Stockholm (martie 2000 i martie 2001), care invitau Comisia European i statele membre s creeze un serviciu cu acoperire european pentru informaii despre oportunitiile de munc i educaie, reprezint o alt cale prin care Romnia, respectiv Facultatea Napoca adecvat de n Medicin poat ceea ce Veterinar o privete Clujoferta s-i face prezentare

facultii, cel mai n potrivit a lmuri problemele ridicate. ntrebrile i rspunsurile, structurate sub forma unui interviu au fost prezentate integral reportaj. Profesor univ. doctor tefan Ioan Groza, decanul Facultatea de Medicin Veterinar Cluj Napoca I: Domnule decan, ce ne putei spune n legtur cu evenimentele ce au avut loc n universitatea noastr, legat de Facultatea de Medicin Veterinar? R: Trebuie s v informez c profesia de medic veterinar, este una din grupul celor reglementate, adic pe lng respectarea legislaiei naionale i internaionale pe linia medical veterinar pe care profesia le respect, mai intervin i o serie de reglementri de ordin intern, respectate de toi medicii veterinari din Comunitatea European. Asociaia veterinarilor din nvmntul superior din Europa (EAEVE), are sediul la Bruxelles i o sucursal la Viena, se ocup cu evaluarea nvmntului medical veterinar din rile C.E. i cele care tind s adere la Comunitatea European. Aceast categorie n urma dorinei libere exprimate, i va depune documentele de intrare n programul de evaluare. Structura EAEVE este constituit dintr-un birou executiv din care fac parte: preedintele, doi vicepreedini i trezorierul. De asemenea, comisia de evaluare este compus din nou membri i un preedinte ales n mod democratic. n paginile revistei studeneti Reflexe n numrul inaugural, la rubrica

educaional. Primii interesai de aceste aspecte, cum e i firesc, sunt studenii. nmatriculat ca student al unei faculti de medicin veterinar automat i pun ntrebrile: Mi se potrivete? Ce anse am s m angajez n domeniul ales?. Profitnd de prezena board-ului Asociaiei Veterinarilor din nvmntul Superior din Europa (EAEVE) la Cluj Napoca, studenii au adresat numeroase ntrebri despre profesie domnului Prof. dr. Ioan Groza, decanul

Pentru prima dat, Romniei i revine sarcina de a prezida un astfel de grup, acest prilej revenindu-i se Facultii ntlnete de Medicin n Veterinar Cluj. Asociaia semestrial diverse faculti din Europa, pentru a pregti activitatea curent. De aceast dat ntlnirea a avut loc la Cluj, facultatea noastr deinnd preedenia pe timpul desfurrii lucrrilor. Este un eveniment deosebit, edina a avut loc ntr-un cadru festiv, prilej cu care am decernat titlul de Doctor Honoris Causa domnului profesor Hans Dietz de la Universitatea din Copenhaga i domnului profesor Marcel Wanner, Berna, Elveia. I: Care este importana primirii unei faculti de Medicin Veterinar ntr-o astfel de asociaie? R: Importana este covritoare deoarece facultiile se supun unei evaluri naionale n primul rnd i pentru c odat cu intrarea n UE trebuie s ne comparm cu colegii de aici. Este o modalitate de a-i evalua forele i de a corecta unele lucruri. ntr-un final, ntreaga Comunitate European s se compare cu universiti de pe alte continente. Profesia este unic, dar nivelul de calitate este diferit, EAEVE are tendina de a aprecia minimul de condiii, iar facultile ce le ndeplinesc devin membre. n Romnia sunt dou faculti de medicin veterinar acreditate (Cluj i Bucureti), Clujul avnd ansa de a fi una din cele mai bune faculti din zon nu numai din Romnia. I: Care sunt condiiile aderrii ntr-o astfel de asociaie? R: Principalele condiii privind pregtirea unei faculti de medicin veterinar sunt

obligatoriu

fi

respectate.

curricul

adaptat peste 80% la condiiile Comunitii Europene pentru c mergem spre CE, apoi trebuie s-i prezinte numrul de studeni, modul de finanare, numrul de studeni pregtii la capacitatea facultii, calitatea profesorilor i apoi calitatea absolvenilor pe piaa muncii, randamentul pe care l dau. Aa se face c o universitate dac are intenia de a nfiina o astfel de secie se va putea supune evalurii dup minumum 8-10 ani de activitate. Procesul de evaluare, pe lng faptul c facultatea-i va prezenta evaluarea, implic i prezena unei comisii EAEVE, ce va analiza fiecare nucleu ce activeaz n aceea facultate, prilej cu care comisia i formeaz o prere ce va fi pus n boardul facultii. I: Care sunt criteriile de acreditare a unei faculti? R: Criteriile de acreditare sunt exigene ce noi nu ni le-am putut imagina acum 6-7 ani. Universitatea trecnd printr-un proces de dezvoltare i implicit i Facultatea de Medicin Veterinar. Aceste criterii sunt bazate pe metoda de finanare sau viteza de dezvoltare. Sunt de asemenea importante schimbarea mentalitii corpului didactic i al studeniilor, vis a vis de momentul ce-l triete Romnia ca membru al Comunitii Europene. Se pune problema dac un student absolvent la Cluj, este sau nu capabil s ocupe un loc de munc ntr-o ar a CE i s nu pun n pericol aceast comunitate. n acest an Facultatea de Medicin Veterinar Cluj Napoca, datorit performanelor absolvenilor ei, a ocupat cca. EAEVE, apoi devine de drept

41 de locuri pe piaa muncii n Comunitatea European. I: Ce implicaii au cadrele didactice din FMV din Romnia la activitatea EAEVE? R: ara noastr este reprezentat la acest for European de 11 membri, de la Facultatea de Medicin Veterinar din Cluj fcnd parte: Profesor Universitar Doctor Vasile Cozma de la parazitologie, Profesor Universitar Doctor Maria Spnu, Confereniar Dana Pusta, Profesor Universitar Doctor Cornel Ctoi,

schimbat

se

schimb

continuare.

Studenii la Medicin Veterinar trebuie s fi vzut c s-au schimbat clinicile de animale mari, morfopatologia, la fel clinica de animale mici. Se observ mbuntiri foarte mari. Este mai mult echipament astzi dect n 2004, cnd acesta aproape nu exista. Acest lucru nseamn c studenii veterinari din Romnia pot acum s munceasc n UE, iar de aici rezult oportuniti foarte bune pentru ca acetia s poat lucra pe tot Globul. Profesor Marcel Wanner, Berna, Elveia I: Ce dorii s le transmitei cititorilor notri? R: A vrea s le spun c pentru ei, ca viitori absolveni ai acestei faculti, graniele sunt deschise. Putei merge s lucrai oriunde n Europa sau n lume i trebuie s profitai de aceast ocazie. Nu stai numai n ar, mergei afar, nvai, acumulai experien, iar apoi ntoarcei-v i folosii ceea ce ai nvat pentru a mbunti condiiile de via din ara dumneavoatr. Reportaj realizat de studenii: D. Neagu, D. Dulfu, L. Moldovan

Confereniar Iancu Morar i subsemnatul. Profesor Hans Dietz, Faculty of Life Sciences, Copenhaga, Danemarca. I: D-le profesor ce putei s ne spunei despre procesul prin care a trecut facultatea noastr n vederea obinerii acreditrii? R: Ceea ce s-a fcut din 2004 pn n 2008 pentru facultatea dumneavoastr este extraordinar. Am fost aici n 2004, iar atunci am vzut o facultate foarte veche, ntr-o form deloc bun. Am evideniat aceste lucruri, iar decanul din acea vreme a rmas dezamgit. Cnd am revenit n 2008 am vzut c s-au fcut schimbri enorme i, dac ai fost student aici, trebuie s fi observat c lucrurile s-au

ANALIZA FILIEREI PENTRU PRODUCIA DE LAPTE MATERIE PRIM I ORGANIZAREA UNEI ZONE DE COLECTARE I TRANSPORT AL ACESTUIA THE ANALYSIS OF RAW-MILK PRODUCTION CHAIN AND THE ORGANIZATION OF AN AREA FOR MILK GATHERING AND CARRYING
uteu Lenua* *Inspector-ef Adjunct, OJPC Cluj, Str. Nvodari 2, Cluj-Napoca, 400117 cluj@opc.ro Cuvinte cheie: filiera lapte materie-prim, colectare, procesare, transportare, transabilitat. Key words: raw-milk chain, gathering, processing, carrying, origin.

Abstract The processing, gathering and carrying of raw-milk are very important in preserving the sanitation and quality of milk [1, 4, 6]. Thus, in accordance with the European Regulations, the Romanian Law stipulates certain general and specific requirements for the economic units that carry on the above specified activities [3, 7, 9]. For this study, 3 farms were considered: one with 150 cows, one of 90 cows and one householdss collectivity of 20 cows. In addition, 3 collecting centers and 1 processing Introducere Datorit nsuirilor sale organoleptice i compoziionale, laptele este un aliment biologic de cea mai mare nsemntate [5, 10, 11]. Calitatea i integritatea acestui aliment reprezint o problem important de snatate public. n toate comunitile umane laptele se

unit, that processes 120.000 l/day of milk, were included in the analysis. The processing unit has 4 sub-units in Cluj County and has contracts with 8 transportation companies for milk carrying [8, 12]. The analysis shows that due to this aspect, the processing unit does not have a direct control on milks quality and sanitation. The processing unit has problems with milks adulteration because the gathering and carrying of raw-milk is done by different economic entities, whose employees dont always respect the required norms. obine i se valorific n cadrul unor sisteme tehnico-economice organizate i gestionate, denumite filiere de lapte, care cuprind n structura lor sursa primar de producere a laptelui, sistemul de colectare i transport al acestuia, precum i unitile de procesare i de valorificare la nivelul consumatorului [8, 11]. n

acest context, studiul de fa i propune o analiz de calitate a produciei de lapte realizat ntr-o etap important a filierei Material i metod n cadrul filierei laptelui existena la nivelul unei uniti adminsitrative teritoriale centrat pe o unitate de procesare a laptelui i produselor lactate de mare capacitate, s-au luat n studiu mai multe categorii de surse de lapte dup cum urmeaz: o exploataie de vaci cu lapte de mrime mare cu o capacitate de 150 vaci lactante; o exploataie de capacitate medie cu 90 vaci lactante; o exploataie cu 20 de vaci n sistem gospodresc; trei centre de colectare lapte materie prim. Toate sursele menionate furnizeaz laptele materie prim pentru o unitate de procesare cu o capacitate de 120000 l lapte. La nivelul de surselor colectare menionate i transport i a s-a sistemului

laptelui - producia, colectarea i transportul, din lanul alimentar general, de la ferm la mas. condiiile colectare autorizarea de a funcionare laptelui acestora a centrelor prim de i

materie potrivit

cerinelor

legislaiei specifice. Rezultate i discuii Pentru a putea fi autorizat un centru de colectare, el trebuie s ndeplineasc anumite condiii: centrul de colectare lapte materie prim trebuie s dispun de spaiu de lucru de mrime suficient pentru ca activitatea s se desfoare n condiii igienice adecvate. El trebuie s fie conceput i realizat astfel nct s exclud contaminarea materiilor prime i a produselor. Acesta trebuie s cuprind un spaiu destinat recepiei laptelui, n care sunt primii productorii, care aduc laptele pentru livrare spre procesare; un spaiu pentru rcirea i pstrarea laptelui rcit, pn la livrarea sa spre unitatea de procesare. Acest spaiu trebuie s fie dotat cu rcitor pentru lapte i s dispun de sursa de ap cald i rece necesar pentru igienizare; un spaiu de mrime suficient, dotat cu (halat, dulapuri bonet, pentru ort, pstrarea nclminte), echipamentului de protecie sanitar dulap pentru pstrarea ustensilelor i

procedat la o analiz i evaluare a riscurilor ce pot s greveze calitatea laptelui. Pentru obinerea unui lapte de calitate i salubru, necesar procesrii i obinerii de produse conforme i de calitate, Romnia i-a mbuntit cadrul legislativ n domeniul alimentar, care s aib n vedere toate aspectele produciei alimentare, respectiv tot lanul de la productor (fermier, cresctor), pn la consumator. O alt aciune i msura intreprins a fost controlul modului n care sunt ndeplinite

materialelor folosite la operaiunile de igienizare i dezinfecie (glei, mturi, detergeni), dulap pentru pstrarea reactivilor pentru i substanelor folosite de efectuarea analizelor

adecvat i corelat cu cantitatea de lapte recepionat pentru livrare la procesare; intrarea n sala de recepie a laptelui trebuie s fie protejat mpotriva intemperiilor, transportul de la rcitoarele de lapte spre centrul de colectare se face numai n recipiente prevzute cu capac; geamurile i uile deschise vor fi prevzute cu plasa mpotriva ptrunderii insectelor, instrumentele i echipamentele de lucru care vin n contact cu materiile prime, vor fi confecionate din materiale rezistente, necorodabile, uor de igienizat i dezinfectat; apele reziduale vor fi evacuate direct prin sifonul de pardoseal racordat la sistemul de canalizare, acesta mai departe la o fos septic vidanjabil sau la reeaua de canalizare a localitii, acolo unde aceasta exist; sursa de ap potabil trebuie s respecte calitatea utilizrii cerinele apei n stabilite de privind industrie potabile destinat

laborator (efectuarea procentului de grsime i a densitii, temperature, impurificare), dulap pentru pstrarea evidenelor centrului; spaiile centrului de colectare trebuie s aib pardoseala care s rezistent, faciliteze impermeabil, uor de igienizat i dezinfectat, scurgerea apei, prevazut cu inclinaie i sifon, perei rezisteni, uor de curat, placai cu faian, cu inlimea de cel puin 1.70 m, tavanul uor de igienizat (tencuit, zugrvit), ui din materiale iluminare facilitate necorodabile, natural pentru sau ventilaie artificial, i pentru evacuarea aburilor i vaporilor, igienizarea conduse la nivelul

dezinfecia minilor cu ap cald i rece, robineii este de preferat sa nu fie actionai manual; facilitate pentru igienizarea uneltelor, echipamentelor i instalaiilor (ap cald, apa rece, detergeni, substane dezinfectante dezinfecia pentru splarea de rcire, i a tancului

unitile

alimentar i n fermele de cretere a animalelor; existena unui vestiar filtru cu un dulap folosit n exclusivitate pentru pstrarea echipamentului de protecie sanitar i a mbrcmintei de strad, acesta va fi prevzut cu dou pentru compartimente igienizare i distincte, un dulap pentru pstrarea materialelor ntreinere, detergeni, substane

galactometrului, recipientelor utilizate la manipularea laptelui, agitatoare, furtunuri de racord la cistern, filtre metalice etc); capacitatea tancurilor de rcire i pstrare a laptelui trebuie s fie

10

dezinfectante, care se va ine strict sub cheie. Pe lng aceste cerine generale exist i cerine speciale pentru aprobarea centrelor de colectare: echipament de rcire sau mijloace corespunztoare pentru rcirea laptelui i dac laptele este depozitat n centrul de colectare, o instalaie de depozitare la rece, o instalaie de centrifugare i orice alte aparate necesare purificrii fizice a laptelui, dac laptele este purificat la centrul de colectare. n funcie de aceste condiii generale i cerine speciale, Autoritatea Sanitar Veterinar i Pentru Sigurana Alimentelor a autorizat din totalul centrelor de colectare lapte (282), doar 196, nefiind autorizate un numr de 86 centre. Cele 196 sunt dotate cu sisteme de rcire. Au intrat n programul de restructurare un numr de 184 centre, 86 nefiind incluse n acest program. Condiiile de transport reprezint un factor important n meninerea calitii i salubritii laptelui. Transportul de la centre se face cu cisterne, o atenie deosebit trebuind acordat splrii, dezinfectrii i rcirii cisternei, nainte de introducerea laptelui. Cisternele trebuie umplute la volumul total pentru evitarea agitrii laptelui i formarea spumei. Materialele din care sunt confecionate trebuie s fie uoare, inerte fa de lapte (aluminiu, inox, polstif), izolate termic, compartimentate cu cca 3-4 compartimente, prevzute cu capac de vizitare i conducte de evacuare a laptelui. Unitatea de procesare luat n studiu nu-i transport laptele materie prima. Aceast activitate este contractat cu 8 societi comerciale de prestri servicii pentru

colectarea i transportul laptelui materie prim la fabric. Societile n cauz au n subordine personalul de la centrele de colectare (laptaricolectori) care au urmat un curs de instruire i perfecionare privind recepia laptelui materie prim din punct de vedere al cantitii i calitii. Managerii celor 8 societi comerciale de prestri servicii, de colectare i transport, sunt de profesie ingineri zootehniti, medici i tehnicieni veterinari, tehnicieni de industrie alimentar, care fac recepia laptelui materie prim la centrele de colectare, respectiv analiza senzorial a laptelui, aspect, gust, miros, culoare, gradul de impurificare, densitatea, grsimea, determinarea aciditii i temperatura de rcire. De la centrele de colectare, rcire i depozitare lapte, se vor preleva probe de lapte materie prim, lunar; ntr-un trimestru fiind acoperite toate centrele de colectare. n cazul unor rezultate de laborator necorespunztoare va fi reconsiderat frecvena de recoltare a probelor, n cadrul programelor de autocontrol ale unitilor care proceseaz laptele provenit de la centrele de colectare respective, pn la identificarea i eliminarea cauzei. De la unitatea de procesare lapte consum i produse lactate cu o capacitate de prelucrare mai mare de 2.000.000 l/an se preleveaz probe din materiile prime i din produsele finite pe toat perioada activitii. ntr-un trimestru sunt acoperite toate rutele la materia prim, lunar pentru produsele proaspete produse. i trimestrial pentru celelalte

11

Prin recoltarea i analizarea probelor de la Iar o unitate are aprobat un proiect de productor la centrele de colectare i la construcie pentru un obiectiv nou n Programul recepia n unitatea de procesare se Sapard. Unitatea de procesare luat n studiu pentru a urmri modul de respectare a aciunilor salubritii pentru laptelui mbuntirea materie calitii i prim pentru analizeaz urmtorii parametrii la probele de lapte materie prim n cadrul programelor de autocontrol: numrul total de germeni, numrul de celule somatice, punctul crioscopic i grsimea. Pentru asigurarea unui autocontrol privind sigurana alimentelor conform prevederilor legale, agenii economici au incheiat contracte cu laboratoarele centrale, zonale i judeene ale ANSVSA n scopul efecturii de analize pentru produsele supuse supravegherii i controlului din Programul de supraveghere i control n domeniul siguranei alimentelor pentru anul 2008. Prin laboratoarele acreditate din judeul Cluj, laptele materie prim pentru unitile de procesare este analizat ncepnd de la productor, centru de colectare, unitate de procesare i ca lapte de consum i ca produs finit. n laboratorul din Floreti pentru controlul calitii laptelui, sunt analizai 8 parametrii de calitate a laptelui materie prim pentru unitile de procesare, astfel: NTG, numrul de celule somatice, punctul crioscopic, lactoza, proteine, substana antibioticele uscat ca i negras, inhibitori. n grsimea, prezent,

procesare lapte consum i produse lactate, prelucreaz zilnic peste 120.000 l lapte, la o capacitate construit de prelucrare de 180000 l lapte. De la centrele de colectare, laptele este transportat ctre unitatea de procesare, pe una din cele 8 rute organizate prin contractele de prestri servicii de colectare i transport cu societi comerciale. La centrele de colectare se efectueaz recepia calitativ a laptelui (gust, lactofiltrul, miros, din prospeime, lapte, urmeaz densitate, cu recepia impurificrile determinate

grsimea),

cantitativ, prin msurarea cantitii de lapte, tratarea preliminar prin strecurare, rcire i transportul la fabric. Condiiile de transport reprezint un factor foarte important n meninerea calitii laptelui. Acesta se face cu ajutorul cisternelor, care sunt verificate cu o deosebit atenie dac sunt splate, dezinfectate, laptelui, rcite de nainte de introducerea ctre persoana

calificat pentru acest activitate. Unitatea de procesare este evaluat n permanen constituit de din echipa medici de evaluatori, ingineri veterinari,

laboratorul analizeaz pentru ase judee probe pentru: exploataii de animale, uniti de procesare, dar nu toate, cresctorii de vaci n sistem individual gospodresc. n judeul Cluj sunt autorizate 9 uniti de procesare lapte consum, produse lactate proaspete, brnzeturi, lapte praf, unt, ngheat.

tehnologi absolveni de industrie alimentar, biologi i chimiti, pentru urmrirea ntregii activiti de prelucrare pornind de la materiile prime, urmrirea fazelor pe flux tehnologic

12

pn la produsul finit nainte de livrarea spre valorificare. Controlul de calitate n unitatea de procesare se face la recepia laptelui de ctre personal calificat i responsabil cu calitatea, persoana care este independent de produs. Analizele care se urmresc la recepia laptelui la fabric sunt: determinri fizico-chimice determinare grsimii, pH-ului, gradului de impurificare, densitii, aciditii, substanei uscate, gustul, prospeimii, mirosul. n se privina urmrete determinrile determinrilor gradul de organoleptice - se verific aspectul, culoarea, microbiologice

Unitatea de procesare se confrunt n prezent cu falsificrile laptelui materie prim, avnd n vedere ca transportul i colectarea laptelui se face prin activitatea de prestri servcii, ncheiat cu cele 8 societi comerciale, a cror personal sunt foti angajai ai unitii de procesare, preluai cu contract, dedai cu astfel de practice. Cele mai frecvente falsificri ale laptelui depistate de unitate sunt: diluarea laptelui, adugarea de lapte smntnit, adugarea de substane conservare chimice pentru neutralizare i (antibiotice, antiseptice),

adugarea de ngrminte chimice etc. Au existat cazuri de refuz la recepia laptelui, cantitatea de lapte fiind imputat persoanei vinovate, au fost luate msuri de renunare la servicii prin clauze contractuale, laptele fiind clasat ca subprodus. Conducerea a asigurat fondurile necesare pentru instruirea personalului privind auditul intern, care trebuie s identifice punctele critice, s mbunteasc nivelele de siguran i calitate, s motiveze dac este cazul, necesitatea investiiilor, s fac schimb de cele mai bune practici. Unitatea are n vedere un set de standarde pentru materia prima achiziionat, pentru materiale, ambalaje i ingrediente care asigur procesarea, depozitarea i distribuia. Standardele folosite n ce privete sigurana alimentului, sunt cele prevazute n Codex Alimentarius, n prevederile naionale aliniate la directivele UE. Att materia prim ct i produsele finite, sunt sub controlul asigurat de principiile HACCP, urmrind toate riscurile care pot s apar, pentru a interveni spre acele zone. Se

contaminare a laptelui, prin inseminri pe medii nutritive solide i numrarea coloniilor rezultate sau prin prelevri de probe din fiecare cistern de pe cele 8 rute, probe care sunt analizate n Laboratorul Extern de Control al Calitii Laptelui de la Floreti. Unitatea are incheiat contract pentru efectuarea de analize i pstrarea confidenialitii privind rezultatele. Laboratorul pentru analize este proiectat, dotat, ntreinut i prezint spaiu suficient pentru operaiunile care se execut, inclusiv disponibiliti de inscriere i nregistrareadepozitare a documentelor. Exist un plan de prelevare de eantioane din lapte materie prim, din produse intermediare i finite, produse vrac, probe de lux, probe de mediu, eantioane care sunt analizate n laboratoare pentru luarea de msuri privind mbuntairea calitii i pentru asigurarea unei baze ntemeiate la acceptarea sau refuzul materiei prime sau produselor finite.

13

urmrete n principal dup recepia materiei prime calitatea microbiologic, pasteurizarea laptelui, prevenirea i-a recontaminrii retehnologizat de laptelui, linia de a dup pasteurizare, sterilizare i bactofugaie. Unitatea pasteurizare-bactofugare, ambalare

La construirea diagramei pe flux, echipa desemnat stabilete riscurile care pot s apar fie de la materia prim, fie de la nerespectarea tehnologiei de fabricaie. n acest caz echipa stabilete un plan de aciuni corective i un sistem de monitorizare i pstrare a nregistrrilor i documentelor . Prin programul de autocontrol unitatea dispune de o echip format din medici veterinari, chimiti, ingineri i biologi, care fac randomizat prelevri de probe din laptele materie prim, att de la centrele de colectare de pe rute, ct i din cisterne, probe care sunt dirijate spre laboratoarele externe (Laboratorul Controlului Calitii Laptelui din Floreti).

laptelui de consum, a produselor lactate acide i a ngheatei prin Program SAPARD, prin dotri cu aparatura nou i modern. Exist o echip format din persoane cu experien n domeniu, care verific n teren i pe fluxul tehnologic fiecare produs, identificarea utilizrii intenionate, vrst, este vorba cu de produse cu destinaii preponderant copiilor, persoanelor n persoanelor diferite afeciuni, sportivilor, persoanelor sedentare. Concluzii i recomandri 1. Analiza pentru produse modului consum din i de obinere, n procesare i valorificare a laptelui prelucrare lapte, demonstreaz

verigilor filierei a codului bunelor practici de lucru, a codului bunelor practici de igien i implementarea HACCP pentru gestionarea riscurilor; 4. Analiza de risc la nivelul filierei a demonstrat c exist un potenial de risc crescut n ceea ce privete sntatea laptelui la nivelul centrelor de colectare, situaie ce a impus msuri n consecin; 5. O a doua verig cu potenial de risc ridicat s-a dovedit a fii transportul laptelui materie prim din exploataii ctre centrele de colectare i de la centre ctre unitile de procesare;
6.

necesitatea constituirii pe circuitul de la ferm la mas a unui sistem intregat de filier a laptelui; 2. Filiera laptelui, bazat pe exploataii de producere a laptelui, uniti de colectare, valorificare alimentare: transport, asigur principiul procesare i respectarea precauiei,

principiilor de baza ale securitii transabilitatea, stabilirea ofertei de lapte pentru consum i calitatea igienic a acestuia; 3. Filiera laptelui ofer condiii optime de gestionare corect a calitii laptelui prin implementarea la nivelul

n situaia dat i analizat la nivelul filierei laptelui, singura soluie viabil pentru obinerea unui lapte de calitate este stabilirea tuturor actorilor din filier: productori, colectori,

14

transportatori, procesatori, printr-un sistem de contracte cu rspundere global fa de calitatea produsului, dezvoltarea unui sistem de autocontrol i achiziionare a laptelui Bibliografie 1. Banu, C. - Procesarea industrial a laptelui. Ed. Tehnica Bucureti, p. 250253, 1998. 2. Banu, C., - Principii de drept alimentar. Ed. Agir, p. 142-156, 2003. 3. Barzoi, D., S. Apostu, - Microbiologia Produselor alimentare. Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, p. 212-230, 2002. 4. Grecu, G., D. Cosarca, G. Duicu, Sorina Petru, Claudia Alexandru, Hilda GiebSchramm - Ghid de Bune Practici de Igien i de Producie Bucuresti, p. 70-88, 2007. 5. Gu, Camelia, - Laptele i Derivatele Sale. Ed.Risoprint Cluj, p. 25-49, 2007; 6. Mihaiu, M., R. Fratil, (1995) - Dinamica numrului de celule somatice din lapte n funcie de producia obtinu. Buletin USAMV, p. 49 si 563-567; 7. Munteanu, M., I. Groza, I. Morar, L. Bogdan (2004), Importana Probelor de Sanitaie n Eteopatogenia Mamitelor Subclinice la Vac, Buletinul USAMV Timioara, p. 35; n Industria Laptelui i Produselor Lactate, Edit. Afir, 9.

pe baza unui pre stabilit n urma unor indicatori de calitate technologic i igienic a laptelui materie prim.

8. Rotaru, O., M. Mihaiu - Controlul sanitar veterinar al salubritii produselor de origine O.G. animal, Lucrri practice Tipo 21/1992 924/2005 privind privind protecia aprobarea igiena Agronomia Cluj-Napoca, p. 38-45, 2004. consumatorilor, republicat n 2007. 10. H.G. Regulilor 11. H.G. generale pentru

produselor alimentare. 925/2005 pentru pentru a se aprobarea asigura Regulilor privind controalele oficiale efectuate verificarea conformitii cu legislaia privind hrana pentru animale i cea privind alimentele i cu regulile de sntate i de protecie a animalelor. 12. uteu, Lenua, (2006) - Producia, transportul i depozitarea laptelui i a produselor supraveghere din i lapte, calitate, condiii, Referat

Doctorat, USAMV Cluj, p. 34-56.

15

ACTIVITATEA IMUNOLOGIC A ADJUVANILOR NECONVENIONALI THE IMMUNOLOGICAL ACTIVITY OF NON-CONVENTIONAL ADJUVANTS

Spnu Marina, Brudac Gh.F., andru Carmen, Niculae Mihaela, tefan R., Karolyi S. Facultatea de Medicin Veterinar, Cluj-Napoca marinaspinu@yahoo.com Cuvinte cheie: adjuvani, ne-convenionali, activitate immunologic. Key words: adjuvants, non-conventional, immunological activity.

Abstract Nowadays dimensional progress in engineering. vaccinology immunology Maybe the encountered to the and most genetic important changes subsequent

augment the immune response by inducing simultaneously Non-conventional lypopeptids, activating minimal side-effects such is as essential for an adjuvant to be appropriate. adjuvants nanoparticles, factors for Rho imidazoguanin

criterion in selecting the adjuvant suitable to a certain vaccine type is its capacity to stimulate the most efficient mechanisms of protection at different anatomic levels. The possibility to Vaccinologia ultimelor decenii a cunoscut modificri dimensionale consecutiv progreselor realizate n imunologie i ingineria genetic [21, 22, 23]. Pe lng meninerea vaccinurilor de tip vechi, se nregistreaz o explozie de produse conceptual noi, aplicabile n inducerea rspunsului imun [3, 4, 15, 25, 26]. Depistarea utilizarea clonelor de imunodeterminanilor monoclonali T, sau limfocite modelarea prin a pe anticorpilor

quinolones, starch microparticules, polyacrilat, triphoshatases, are discussed. au facilitat o manier nou de abordare. S-au deschis astfel posibiliti pentru obinerea antigenelor parazitare prin tehnica ADN recombinat, a vaccinurilor anti-idiotipice i a vaccinurilor sintetice. Producerea antigenelor, cu originea n organisme cultivate n culturi celulare, cunoate schimbri consecutiv introducerii unor noi linii celulare, a unor promotori de cretere, automatizrii [29]. Dificultile nregistrate n producerea antigenelor vaccinale, cum sunt cele parazitare sau cele care s protejeze n urma vaccinrii emulsifiers (Span or Tween)

calculator i tehnicile de imagistic molecular

16

mpotriva bolilor cronice sau persistente au impus necesitatea modificrii strategiei vaccinale. Sensul nnoirii a fost acela al identificrii i selectrii antigenelor eseniale pentru infecie al (de ex., n vaccinurile acestora subunitare), prezentrii

tipuri de adjuvani sau imunomodulatoare, studii detaliate au demonstrat c efectele de stimulare ale acestora se rsfrng nu numai asupra subpopulaiilor celulare int, ci i asupra sintezei unor citokine cu efecte secundare pronunate (TNF, IL-1 sau IL-6). Aceste constatri sugereaz investigarea n profunzime a compuilor alei ca adjuvani, evalundu-se comparativ eficiena lor stimulatoare i/sau modulatoare i efectele adverse, respectiv eficiena i costurile de producie [10,18]. Selectarea adjuvanilor pentru vaccinurile veterinare etice. este limitat ca i n cazul vaccinurilor utilizate la om, de constrngeri Diversitatea efectelor secundare manifestate de anumii adjuvani, cum sunt inducerea limiteaz granuloamelor, utilitatea pirogenicitatea, chiar din inducerea artritelor sau chiar uveitelor, citoliza acestora considerente economice [1]. Poate cel mai important deziderat n alegerea adjuvantului adecvat unui anumit tip de vaccin este stimularea de ctre acesta a mecanismelor cu eficien protectoare maxim i care acioneaz la diferite nivele anatomice [5]. Adjuvanii, imunopotenatoarele, sunt compui care adugai la vaccinuri, cresc imunogenitatea antigenului, prin augmentarea rspunsului imun umoral fa de acesta [17]. Unii adjuvani stimuleaz de asemenea rspunsul imun celular. Avantajul urmrit prin includerea unui adjuvant n vaccin vizeaza posibilitatea diminurii cantitii de antigen necesare. Alegerea adjuvantului pentru un anumit tip de vaccin trebuie s se bazeze pe

organismului vaccinat ntr-o form imunogen (de ex., nglobate n lipozomi - 13) i suplimentarea cu un imunomodulator corespunztor (adjuvant) [7]. Obinerea de adjuvani noi pentru vaccinuri, prezentnd eficien crescut, pentru a induce un rspuns imun intens la nivel sistemic sau al mucoaselor, rmne n continuare o provocare att pentru cercetare ct i pentru industria vaccinurilor. Abordrile convenionale din trecut, n marea lor majoritate empirice, s-au bucurat de mai mult sau mai puin succes. Progresele referitoare de noi inte realizate n la pentru cunoaterea semnalele adjuvanii sistemului imun ct i descoperirile recente, ndeosebi biologice proinflamatorii timpurii, au dus la identificarea vaccinali. O mai bun nelegere a receptorilor "Toll-like", a subpopulaiilor de limfocite T neconvenionale, a memoriei limfocitelor T i B, a celulelor T reglatoare i a imunitii la nivelul mucoaselor are implicaii profunde n abordarea modern a obinerii adjuvanilor. Tot mai mult teren ctig adjuvanii sintetici, care au drept int molecule biologice [4]. Adjuvanii au fost pentru prima dat definii de ctre Ramon [8] ca fiind compui care, utilizai n combinaie cu antigenul, augmenteaz nivelul rspunsului imun peste acela obinut prin administrarea antigenului singur. innd cont de existena diferitelor

17

date experimentale legate de testare, natura antigenului i doza de administrat, calea de administrare i eventualele contraindicaii [14, 27, 28]. Posibilitatea augmentrii rspunsului imun cu inducerea concomitent de efecte secundare minime este esenial pentru ca un adjuvant s fie corespunztor. Evaluarea comparativ a unor adjuvani convenionali (adjuvantul hidroxidul pentru Freund de complet i i a incomplet, a altora aluminiu) lor de

sodiu. Nici taurina i nici litiul, cu toate c au determinat antigenul comparabile titruri singur, crescute nu au comparativ indus cu nivele anterior.

cu cele

menionate

Aceste rezultate sugereaz disponibilitatea saponinei sau a fluorurii de sodiu ca adjuvant pentru Un antigenele studiu administrate asupra pe cale digestiv [12]. efectuat eliminarii anticorpilor de tip IgY prin ou, n urma imunizrii orale la gini, efectuat cu IgG uman n asociere cu diferii adjuvani (lactidco-glicolid, microsferule, subunitatea B a toxinei holerice -CTB, CTB conjugat cu glutaraldehid, dimetil dioctadecil bromur de amoniu -DDA i Softigen - pC8/C10 mono/di glicerid) comparativ cu un lot la care adjuvantul utilizat a fost convenional (adjuvant Freund incomplet emulsionat n ser fiziologic) a determinat titruri crescute de anticorpi ovulari la psrile imunizate cu antigenul combinat cu glutaraldehid conjugat cu CTB ca i la cele imunizate cu antigen n combinaie cu Softigen [10]. Interesul crescnd fa de anticorpii eliminai prin ou subliniaz necesitatea utilizrii unor adjuvani cu capacitate crescut de stimulare a rspunsului imun i care s nu reprezinte un risc pentru imunizarea adjuvani de tehnologic a ginilor mpotriva bolilor curente. Lipopeptidele reprezint ultim generaie, agreai adtorit structurii lor chimice convenabile acestei funcii. Astfel de lipopetide pot fi: Pam3Cys-Ser-(Lys)4 (PCSL), conjugatul P-Th1, format din lipopeptidul P3CS cu epitopul Th1 al limfocitului T-helper i conjugatul P-Th2 al lipopeptidului P3CSS cu

neconvenionali (monofosforil lipidul, ADN) capacitatea augmenta rspunsul imun umoral fa de un antigen standard (antigenul de suprafa al virusului hepatitei B, de ex.) i efectele locale, a demonstrat c potenialul stimulator maxim i efectele secundare locale minime le-a avut amestecul de gel de aluminiu isotipurilor de i ADN. Cuantificarea anticorpi

postvaccinali a indicat prezena rspunsului Th2 n cazul tuturor adjuvanilor, cu excepia monofosforil lipidului i ADN, n cazul crora rspunsul a fost mixt Th1/Th2 (IgG1 i IgG2a). Rspunsuri crescute Th1 (predominant IgG2a) s-au obinut n cazul combinrii ADN cu ali adjuvani [32]. n cazul imunizrii orale, ncercrile de a aduga ca adjuvant antigenului nereplicativ fluorur de sodiu, a mbuntit substanial rspunsul n anticorpi IgG la puii de gin. Estimarea eficienei taurinei, litiului sau saponinei, comparativ cu fluorura de sodiu a demonstrat c titrul maxim de anticorpi dup imunizarea digestiv s-a observat n cazul saponinei, acesta fiind elevat comparativ cu cel indus de antigen n asciere cu fluorura de

18

epitopul Th2 al limfocitului T-helper. Toi aceti adjuvai au stimulat rspunsul imun precum i eliminarea IgY prin ou, efectele PCSL sau a combinaiei PCSL cu IFN gamma recombinant de pui fiind maxime. Utilizarea de epitopi limfocitari n combinaie cu adjuvantul PCSL a sporit suplimentar titrul de anticorpi, chiar dup a doua administrare a antigenului. Concentraia IgY a fost crescut n ou la psrile de cinci luni (9.4 mg/mL seric i 10.1 mg/mL n glbenu) comparativ cu cele de nou luni (5.9 mg/mL seric i 5.1 mg/mL n glbenu). Aceste rezultate susin utilizarea lipopetidelor ca adjuvani n scopul sporirii eficienei producerii de IgY ca reagent pentru diagnostic [6]. Asocierea PCSL cu un nou lipopeptid (PCSTH16) nu a determinat o cretere semnificativ a titrului de anticorpi n cadrul rspunsului primar comparativ cu martorii crora li s-a administrat un singur adjuvant [11]. Testarea nanoparticulelor rspndit. adjuvanilor este din de ce de n ce tip acest tipul mai sunt

specifici, att n rspunsul imun primar ct n cel secundar. Comparativ cu adjuvantul Freund complet, acesta a indus nivelele cele mai ridicate pentru IgG murin. SLN cu diametrul particulelor peste 100 nm au exprimat o activitate clar de adjuvantare, n timp ce particulele SLN cu dimensiuni sub 100 nm, n diferite concentraii, au manifestat o activitate de adjuvantare mai redus. Din punct de vedere al reaciilor locale, rezultatele examinrilor microscopice pledeaz cert pentru SLN n comparaie cu adjuvantul Freund complet [20]. Imiquimod i resiquimod, care fac parte din grupa imidazo-quinolonelor modific rspunsul imun i induc sinteza de citokine in vitro i in vivo. Aceti compui s-au dovedit a avea o activitate antiviral i antitumoral puternic, exercitnd i un efect de adjuvant pentru vaccinarea cu antigene proteice. Imiquimod crete numrul i statusul de maturitate al celulelor dendritice n ganglionii limfatici CD4(+) care i dreneaz CD8(+) zona inoculrii, specifice, amplific rspunsurile mediate de limfocitele T antigen determinate prin expansiune clonal, precum i cantitatea i cinetica produciei de citokine, att n ganglionii limfatici ct i n splina animalelor dup vaccinare. O cretere substanial n producia de IFN-gamma, n comparaie cu IL-4 sugereaz o conversie a rspunsului imun ctre predominana limfocitelor Th1. Analogul resiquimod a avut un efect redus de aproximativ de zece ori, comparativ cu imiquimod, dar orientat n aceeai direcie. Aceste studii sugereaz c ambii compui pot fi adjuvani adecvai pentru

Adjuvanii

biocompatibili i stabili, bazai pe nanoparticule lipidice solide cu suprafaa modificat (SLN), obinute din parafin sau gliceride biodegradabile i care se amestec pur i simplu cu antigenele nainte de administrare. Diferite formule de astfel de adjuvani au fost bine tolerate n culturi celulare de fibroblaste i macrofage umane. Imunizrile efectuate pe pui folosind antigen Mycoplasma bovis i IgG murin, n combinaie cu diferite formule de adjuvantare utiliznd nanoparticule, au dus la o producie semnificativ crescut de anticorpi

19

vaccinurile ADN care necesit inducerea unor rspunsuri T citotoxice puternice [30]. Microparticulele de amidon poliacrilat au fost conjugate cu toxina difteric (CRM197), n scopul utilizrii ca adjuvant pentru vaccinarea pe calea mucoaselor la oareci. Acest adjuvant i-a atins scopul doar la administrarea peroral a vaccinului conjugat [24]. Modul n care adjuvanii particulai stimuleaz activitatea fagocitar a putut fi monitorizat la nivelul celulelor dendritice, celule prezentatoare de antigen cu rol esenial [9]. Factorul citotoxic necrozant al tumorilor 1 (CNF1), existent n E. coli uropatogen face parte din familia de factori de activare a Rho GTP-azelor (Rho guanin trifosfatazelor), care crete rspunsul imun la ovalbumin, att la nivel local (mucoase) ct i sistemic. Manipularea proteinelor Rho ofer posibilitatea unei noi abordri pentru obinerea de noi adjuvani pentru vaccinurile cu administrare pe calea mucoaselor [19]. AS02A, un adjuvant care conine monofosforil lipid A (MPL), QS21 i o emulsie ulei-n-ap, a indus un rspuns rapid i viguros fa de antigen, att la nivel umoral ct i al limfocitelor T helper (Th1). Cu toate c AS02A induce reacii locale i generale mai frecvent dect ali adjuvant, totui posibilitile sale imunomodulatoare i profilul de securitate au dus la acceptarea sa ca adjuvant potenial pentru vaccinurile subunitare [31]. Conductivitatea, vscozitatea i rata de eliberare a antigenului variaz n limite largi cu echilibrul hidrofil/hidrofob al emulgatorilor utilizaii pentru omogenizarea adjuvantului cu antigenul vaccinal. Din acest punct de vedere

adjuvanii cu emulgatori de tip Span sau Tween [16,33]. O mai bun nelegere a interaciunilor dintre celulele sistemului imun i a proceselor imunofiziologice care guverneaz rpunsurile difereniate la adjuvanii asociai vaccinurilor poate orienta interveniile de profilaxie i control a bolilor infecioase n medicina veterinar. Bibliografie 1. Allison, A.C., N.E. Byars, (1986) An adjuvant formulation that selectively elicits the formation of antibodies of protective isotypes and cell-mediated immunity. 168. 2. Brewer, J.M., M. Concher, A. Satoskar, H. Blauthann, J. Alexander, (1996) - In IL-4-deficient mice, alum not only generates T helper 1 responses equivalent to complete Freunds adjuvant, but continues to induce Thelper 2 citokine production, European Journal of Immunology, vol. 26, nr. 9, pag. 2062-2066. 3. Bror, M., Maria Villacres-Eriksson, A. Sjlander, Karin Lvgren Bengtsson, (1996) - Novel adjuvants and vaccine delivery Immunology pag. 373-384. 4. Burdin, N, B. Guy, P. Moingeon, (2004) - Immunological foundations to the quest for new vaccine adjuvants, BioDrugs.;18 (2):79-93. systems, and Veterinary Immunopathology, J.Immunol.Meth., 95:157induc rspunsuri imune similare

20

5. Castro, A.P., A.P. Agnas, M.T. Silva, (1993) - Adjuvant treatment increases the resistance to Mycobacterium avium infection of mycobacteria-susceptible BALB/C mice, Clinical & Experimenthal Immunology, vol. 92, nr. 3, pag. 466472. 6. Erhard, MH, P. Schmidt, P. Zinsmeister, A. Hofmann, U. Munster, B. Kaspers, KH. Wiesmuller, WG. Bessler, M. Stangassinger, (2000) Adjuvant effects of various lipopeptides and interferon-gamma on the humoral immune response of chickens, Poult Sci;79(9):1264-70. 7. Ghergariu, S., S. Leucua, I. Baba, A. Pop, G. Giurgiu, Spnu Marina, O. Spnu (1990) - Observaii privind efectul unor imunorestauratori (emulsie ap n ulei, microsferule de gelatin) la porcii p.86. 8. Gupta, R.K., E.R. Relyved, E.B. Lindblad, B. Bizzini, (1993) - Adjuvants - a balance between toxicity and adjuvanticity. Vaccine 11(4). 9. Handley, M. E., Gabriele Pollara, B. M. Chain, D. R. Katz, (2005) - The use of targeted microbeads for quantitative analysis of the phagocytic properties of human cells, monocyte-derived Journal of dendritic Immunological nrcai, Tertium Simp. Biopharm. Pharmacocin, Cluj-Napoca,

immunisation of chickens using cholera toxin B subunit and Softigen as adjuvants results in high antibody titre in the egg yolk. In vivo;15(5):381-4. 11. Hofmann, A, M. Erhard, P. Schmidt, W. Bessler, (1996) H. M. Wiesmuller, Stangassinger, Lipopeptides P. U. as Zinsmeister, Losch,

adjuvants for the immunisation of laying hens ALTEX.;13(5):26-29. 12. Hoshi, S, A. Uchino, N. Saito, KI. Kusanagi, T. Ihara, S. Ueda, (1999) Comparison of adjuvants with respect to serum IgG antibody response in orally 9. 13. Lachman, L.B., B. Ozpolat, X.M. Rao, (1996) Cytokine-containing liposomes as vaccine adjuvants. Eur Cytokine Netw ;7(4):693-8. 14. Laval, A., V. Ganne, J. Aucouturier, S. Deville, D. Levy, (1998) Assessement of a new adjuvant range in a model for athrophic rhinitis, IPVS Proceedings 15th Congress, Birmingham, England, 248. 15. Leemars, P.P, C.F. Hendriksen, A.F. Angulo, M.A. Koedam, E. Cloosen, (1994) - Evaluation of several adjuvants as alternative to the use of Freunds adjuvant in rabbits, Veterinary Immunology and Immunopathology, vol. 40, nr,. 3, pag. 225-241. 16. Miles, A.P., Holly A. McClellan, Kelly M. Rausch, Daming Zhu, Michael D. Whitmore, Sanjay Singh, Laura B. immunized chickens. Comp Immunol Microbiol Infect Dis.; 22(1):63-

Methods, Volume 297, Issues 1-2 , February, Pages 27-38. 10. Hedlund, GP, J. Hau, (2001) Oral

21

Martin, Yimin Wu, Birgitte K. Giersing, Anthony W. Stowers, Carole A. Long, Allan Saul, (2005) - Montanide 720 vaccines: quality of and emulsions, antigens, stability

22. Pandey, R., S. Hglund, G. Prasad, (1993b) Veterinary remarks on vaccines, Vaccine Introductory

ISA of

control

Development, Springer Verlag, New York Inc., p. VII-VIII. 23. Pandey, R., S. Hglund, G. Prasad, editors 1993c - Veterinary Vaccines, Springer-Verlag, New-York, pag. 1-18. 24. Rydell, N., I. Sjholm, (2005) Mucosal vaccination against diphtheria using starch microparticles as adjuvant for cross-reacting material (CRM197) of diphtheria toxin, Vaccine, Volume 23, Issue 21, Pages 2775-2783. 25. Sonberbielle, B.E., B.C. Knignt, W.J. Marrow, D. Darling, M. Frauziano, J.B. Marriott, S. Cookson, F. Farzaneh, A.G. Dalgleish, (1996) - Comparison of the IL-2 and IL-4 transfected B16-F10 cells with a novel oil-microemulsion

formulated comparative

immunogenicity of vaccine formulations, Vaccine, Volume 23, Issue 19, Pages 2530-2539. 17. Mohanna, C., Y. Nys, (1999) Effect of dietary zinc content and sources on the growth, body zinc deposition and retention, zinc excretion and immune response in chickens, Br Poult Sci., Mar; 40(1):108-14. 18. Morein, B., K. Lovgren, S. Hoglund, B. Sundquist, (1987) The ISCOM: An immunostimulating complex, Immunol. Today, 8:333-338. 19. Munro, P., G. Flatau, Anjure Fabienne, Hofman Vronique, C. Czerkinsky, E. Lemichez, (2005) - The Rho GTPase activators CNF1 and DNT bacterial toxins have mucosal adjuvant properties, Vaccine, Volume 23, Issue 20 , Pages 2551-2556. 20. Olbrich, C., R.H. Muller, K. Tabatt, O. Kayser, C. Schulze, R.Schade, (2002) - Stable biocompatible adjuvants - a new type of adjuvant based on solid lipid nanoparticles: a study on cytotoxicity, compatibility and efficacy in chicken, Altern Lab Anim;30(4):443-58. 21. Pandey, R., S. Hglund, G. Prasad, (1993a) - Veterinary vaccines, Series preface, Springer Verlag, New York Inc., p. V-VI.

adjuvant for B16-F10 whole cell tumor vaccine, Gene Therapy, vol. 3, nr. 10, pag. 853-858. 26. St Louis, J., S. Uniyal, L. Xu, E. Chan, B. Singh, B.M. Chan., G.H. Strejan, (2001) -Tolerance induction by acylated peptides: suppression of EAE in the mouse with palmitoylated PLP peptides, J Neuroimmunol, 115 (1-2) : 79-90. 27. Stewart-Tull, D.E.S., (1985) Immunopotentiating conjugates, Vaccine, 3:40-44. 28. Stewart - Tull D.E.S., (2003) Adjuvant formulations for experimental vaccines, Methods Mol Med.;87:175-94. 29. Talwar, G. P., - Progress in

22

vaccinology, Verlag, 1989.

New

York,

Springer-

30. Thomsen, LL, P. Topley, M.G. Daly, S.J. Brett, J.P. Tite, 2004 - Imiquimod and resiquimod in a mouse model: adjuvants for DNA vaccination by particle-mediated immunotherapeutic

delivery, Vaccine, 22(13-14):1799-809. 31. Vandepapelire, P., Barbara Rehermann, Marguerite Koutsoukos, P. Moris, (2005) against Nathalie Garon, Martine Wettendorff, Geert Leroux-Roels,

Potent enhancement of recombinant hepatitis B

cellular and humoral immune responses antigens using AS02A adjuvant in healthy adults, Vaccine, Volume 23, Issue 20 , 8 April, Pages 2591-260. 32. Weeratna, RD, MJ. McCluskie, Y. Xu, HL. Davis, (2000) - CpG DNA induces stronger immune responses with less toxicity than other adjuvants. Vaccine;18(17):1755-62. 33. Yang, Ya-Wun, An-Chi Wei, Shan Shan emulsion Shen, (2005) effect The of is immunogenicity-enhancing vaccine

adjuvants

independent of the dispersion type and antigen release rate a revisit of the role of the hydrophilelipophile balance (HLB) value, Vaccine, Volume 23, Issue 20: 2665-2675.

23

PROPRIETI I FUNCII IMUNOLOGICE ALE EXTRACTELOR DE ECHINACEA SPECIES PROPERTIES AND IMMUNOLOGICAL FUNCTIONS OF ECHINACEA SPECIES EXTRACTS
Brudac Gh.F., Spnu Marina, andru Carmen Dana, Niculae Mihaela, Rindt Krisztina, tefan R., Karolyi S., Popescu Rodica, Popescu M. Facultatea de Medicin Veterinar, Cluj-Napoca florinbrudasca@yahoo.com

Cuvinte cheie: Echinacea spp., compoziie, activiti biologice, imunomodulare. Key words: Echinacea spp., composition, biological activities, immune modulation. Abstract The article summed up researches on taxonomy, biological composition and active compounds. Non-immunological activities as well as immunological effects of Echinacea Comparativ cu alte specii cu utilizare medical, istoria Echinacei este relativ scurt. Planta este orginar din America de Nord i a servit n medicina tradiional a indienilor nativi. Exist date referitoare la utilizarea acestei plante n scopuri medicinale de ctre triburile nord-americane Cheyenne, Dakota, Fox, Kiowa, Crow, Delaware, Comanchee i altele. Este probabil ca Echinacea folosit de acetia s fi aparinut speciilor E. angustifolia, E.purpureea sau E. pallida. Primele date arheologice privitoare la utilizarea plantei n scopuri terapeutice dateaz din secolul XVIII. Sub denumirea de Echinacea sunt cuprinse mai multe plante din familia Asteraceae: Echinacea purpurea (L.) Moench, Echinacea angustifolia DC. i Echinacea pallida (Nutt.) Nutt. Primul preparat din Echinacea, cunoscut sub denumirea de Meyers Blood Purifier, a fost comercializat n jurul anului 1880, avnd ca indicaii reumatismul, nevralgia i mucturile de arpe. La nceputul secolului XX, Echinacea a fost utilizat ca preparatul vegetal cel mai cunoscut n SUA. Cultivarea comercial a nceput n Germania n jurul anului 1939 iar ncepnd cu 1950, Vogel a cultivat planta n Elveia [6]. O medicinale Statele perioad ndelungat utilizarea de lor timp, fiind speciile de Echinacea au fost privite ca plante esoterice, Unite. restrns la cteva zone din Germania i Datorit necunoaterii mecanismului (mecanismelor) de aciune, nu s-au fcut corelaii ntre activitatea sa n spp., such as influences of various Echinacea spp. extracts on innate and adaptive branches and effectors of the immune system are reviewed.

24

vindecarea rnilor sau efectul anti-venin de arpe i farmacologia modern. Chimitii i farmacologii au nceput s manifeste interes pentru Echinacea cum [10]. fiind sunt Extractele izolai numeroi constitueni alchilamidele polizaharidele, au dovedit

folosit sub form de past sau macerat, mai rar infuzie. Taxonomia acceptat n prezent pentru speciile de Echinacea este bazat pe studiile morfologice McGregor i anatomice efectuate de [7]. Conform acestor date, genul sp. are o compoziie

echinacosidele, acidul cicoric, cetoalchenele i capacitate imunostimulatoare i sunt utilizate n principal n profilaxia i terapia rcelilor, influenei i tulburrilor septice, cu toate acestea identitate principiilor activi nu este bine cunoscut [14]. Studiile amnunite efectuate n ultimii zece ani au subliniat c substanele active din plant au efecte benefice asupra sistemului imun nespecific. Stabilirea, fr dubiu, a identitii botanice a plantei i identificarea efectelor componentelor izolate, posibile n cadrul unor experimente in vivo i in vitro, permit definirea mai precis a activitii imunomodulatoare [22]. Tradiional, Echinacea a fost prescris extern n diferite stri, cum sunt: rnile, arsurile, tumefaciile pielii sau ganglionilor limfatici, nepturile de insecte. Rdcinile au fost utilizate pentru combaterea durerilor dentare i cervicale. Intern, a dat rezultate in cefalei, crampele digestive, tuse, rceal, rujeol, gonoree sau intoxicaii diverse (inclusiv muctura de arpe). Rdcinile reprezint partea cea mai utilizat a plantei. Planta proaspt a fost

cuprinde nou specii i dou varieti (tabel 1). Echinacea complex. Constituenii chimici au fost mai mult sau mai puin caracterizai de-a lungul anilor, reuindu-se prin determinri chimice chiar identificarea diferitelor specii de Echinaceea, greu de difereniat din punct de vedere botanic. Diferitele preparate din plante aparinnd genului Echinacea trebuie clasificate dup specia de plant (Echinacea purpurea, E. pallida sau E. angustifolia), poriunea procesat din plant (rdcin, partea aerian sau ntreaga plant) i modul de procesare. Efecte farmacologice semnificative au fost descrise, att in vivo ct i in vitro pentru extractul din prile aeriene ale E. purpurea i pentru extractele alcoolice din rdcinile de E. pallida, E. angustifolia i E. purpurea. Aceast activitate este dirijat n principal ctre sistemul imun celular nespecific. Componentele active ale acestor plante sunt polizaharidele, glicoproteinele, derivaii acidul cafeic (acidul cicoric) i alcamidele [5].

Tabel 1. Taxonomia genului ECHINACEA [7] Tabel 1. ECHINACEA taxonomy Echinacea angustifolia DC. Var.angustifolia Sinonime: Brauneria angustifolia, Echinaceea pallida var. angustifolia (DC) Cronq Echinacea angustifolia DC. Var. strigosa, McGregor Echinacea alrorubens Nutt Sinonime: Rudbeckia alrorubens Nutt.

25

Echinacea levigata (Boynton & Beadle) Blake Sinonime: Brauneria levigata Boynton & Beadle, Echinaceea purpureea (L.) Moench var.levigata Cronq Echinacea pallida (Nutt.) Nutt. Sinonime: Echinaceea angustifolia Hooker, Rudbeckia pallida Nutt.,Brauneria pallida Britton, Echinaceea pallida (Nutt.) Nutt. F. albida Steyerm. Echinacea paradoxa (Norton) Britton var. paradoxa Sinonime: Brauneria paradoxa Norton, Echinaceea atrorubens Nutt. Var.paradoxa (Norton) Cronq. Echinacea paradoxa (Norton) Britton var.neglecta McGregor Echinacea purpureea (L.) Moench Sinonime: Rudbeckia purpureea L., Rudbeckia hispida Hoffmgg., Rudbeckia serotina Sweet, Echinaceea purpureea (L.) Moench var, arkansana Steyerm., Echinaceea purpureea (L.) Moench f. ligettii Steyerm., Echinaceea speciosa Paxton, Echinaceea intermedia Lindley, Brauneria purpureea (L.) Britton. Echinacea simulata McGregor Sinonime: Echinaceea speciosa McGregor. Echinacea sanguinea Nutt Echinacea tennesseensis (Beadle) Small Sinonime: Brauneria tennesseensis Beadle, Echinaceea angustifolia DC. Var. tennesseensis (Beadle) Blake Principalii constitueni activi biologic sunt: echinacoside (E. pallida), verbascozid (E. angustifolia, E. pallida), derivaii acidului quinic (cinarina)(E. angustifolia, E. tennesseensis), acidul cicoric (E.purpureea), flavonoide, uleiuri eseniale, poliacetilene, alchilamide, alcaloizi, polizaharide, ali constitueni (rezine, acizi: oleic, linoleic, cerotic, palmitic, etc.) Determinrile HPLC au indicat activi compuilor chimice repartiia n efectuate de difereniat fragmentrea lor caracteristic. Toate extractele din rdcini i frunze ale celor trei plante au dovedit [15, 24]. Efecte biologice. Pn n 1930, extractele de Echinacea au fost utilizate n experimente de o acuratee tiinific variabil, prin n tratamentul septic, abceselor, tifosului, septicemiei, malariei, tuberculozei, a septicemiei E. ocului puerperale, uremiei, proprieti antioxidante n testul radicalilor liberi i n testul de peroxidare lipidic

rdcinile

angustifolia, E. purpurea i E. pallida. Acidul tetanosului sau altor toxiemii bacteriene [7]. cicoric i verbascozidele au predominat n extractele de E. purpurea n timp ce cinarina i bine Dup 1940, studiile clinice au devenit mai circumscrise, a sau n baza de administrrii Echinacea a Myoextractului

isobutilamidul acidului dodeca-2E,4E,8Z,10Z/E- intravenoase tetraenoic a fost o component major a EchinacinR extractului de E. angustifolia. Echinacozidul i Echinacin 6-O-cafeoil-echinacozidul extractele din au predominat de E. rdcinile
R

intramusculare

, mai rar oral, a picturilor sau

n extern, a unguentelor. Acestea au avut diferite

pallida. indicaii, astfel au fost utilizate n terapia

Alcamidele caracteristice au fost de asemenea arsurilor termice sau chimice, degerturilor, examinate prin spectrometrie de mas prin ulcerelor prin iradiere, a rnilor post-operatorii electrospray tandem (MS/MS), find dovedit ale esuturilor moi, a rnilor atone ale esuturilor

26

moi i oaselor, a ulcerelor decubitale la parametrii fiziologici de exerciiu i performan vrstnici, n stri septice, artrite reumatoide sau sportiv [18]. cazuri de antibiotico-rezisten. Nu rareori astfel de extracte i-au gsit aplicaii n infecii (tuse convulsiv, cronice infecios, ale grip, infecii catarale, tractusului respirator anexit Activitatea antiinflamatorie Factorul o A, un compus izolat cu din a

infecii extractele apoase de Echinacea purpureea, superior, prezint activitate asemntoare

endodermite, parametrite, tratament post avort cortizonului iar un amestec de polizaharide din pelviperitonit, cronic, E. angustifolia prezint efecte n modelul bolii la obolan. O fraciune osteomielit cronic. Rezultate foarte bune au edematoase tratamentele dermatologice

fost obinute prin utilizarea Echinacinului n alchilamidic a fost gsit de asemenea (psoriasis responsabil pentru efectele antiinflamatoare arthropathica, psoriasis vulgaris, eritrodermii de [3]. S-a observat c efecte antiinflamatoare diferite origini, pemphigus vulgaris, eczeme exercit i fraciunea polizaharidic izolat din endogene, ulcere cutanate atone (ulcus cruris, E. angustifolia [29]. ulcere de iradiere, ulcere decubitale). Extractul crud de Echinacea (Echinacina B) inhib edemul auricular indus la oareci prin A) Alte activiti biologice dect cele aplicarea a 0.015 ml dintr-o emulsie de 0.25% asupra sistemului imun Activitatea tisular local ulei de croton n ap, n perioada de evoluie maxim a acestuia (6 h) sau n perioada de

Iniial, extractele de Echinaceea au fost declin (18 h), prin aplicare topic, efectul fiind utilizate pentru proprietile lor cicatrizante. direct proporional cu doza aplicat. Mai mult Folosindu-se aciunea asociat hialuronic EchinacinulR, alte s-a a efecte, observat chiar, acest efect antiedematos s-a dovedit a fi acestuia, mai puternic dect cel al benzidaminei, un antidatorit inflamator topic non-steroidic. Administrarea i.v. prin carrageenan 1% n cantitate de 0.05 ml, n antihialuronidazic probabil cu -

interveniei indirecte asupra sistemului acid cu o or nainte de inocularea unui extract de hialuronidaz, exprimat modificrile survenite la nivelul fibroblastelor pernia plantar posterioar la obolan, a [17]. Se pare c EchinacinulR induce sinteza inhibat edemul n faza histaminic ca i unor mucopolizaharide mezenchimale, procesul flogistic [28, 29]. Activitatea antiviral, antibacterian, antifungic, oncolitic i insecticid Echinacosidele izolate din tulpinile de E. la limita inferioar a activitii antibioticelor. sugerndu-se de asemenea ca int a influenei i axul hipofizar-suprarenal [17]. Extractul de Echinacea, utilizat n hrana agent haematinic, crescnd de oxigen, mbuntind calitatea

ecvinelor timp de 42 de zile acioneaz ca angustifolia au activitate antistafilococic, situat sngelui, transportul concentraia augmentnd de Compui poliacetilenici din rdcinile de E. astfel dezvoltarea bacteriilor (E. coli, Pseudomonas

hemoglobin i numrul de eritrocite i implicit angustifolia i E. purpureea s-au dovedit a stopa

27

aeruginosa) i fungilor. Diluii mari (1:1000) dintr- de aciune ale compuilor activi, un extract de E. angustifolia a inhibat total apariiei celulelor noi in situ [26]. creterea lui Epidermophyton interdigitale. Sunt menionate i efecte antiparazitare ale acestor angustifolia inhib slab dezvoltarea Toxicitate

stimularea

Testele de toxicitate acut efectuate de

extracte, astfel in vitro, un extract alcoolic de E. Lorke [7] la oareci, folosind dou dintre lui polizaharidele din Echinacea, au dus la moarte n urma inoculrii intraperitoneale a peste 5000 fa de virusurile pronunat alveolar i interstiial cu Trichomonas vaginalis. dovedit eficace

EchinacinR, extractul deja menionat, s-a mg/kg-1, dar natura leziunilor histologice (edem encefalomiocarditei i a stomatitei veziculoase, leucodiapedez localizat), sugereaz colaps n culturi celulare. Extractele de E.purpureea circulator acut (oc decompensat), cauzat de au redus numrul plajelor n culturi celulare respectiv virus al stomatitei veziculoase Aceast interferon. Tratamentul sptmni cu peroral extract de timp de Echinacea, activitate a fost descris [7]. natura siropoas a extractului neutre i din nu E. tratate cu virus al influenei, herpesvirus i polizaharidelor vegetale n sine. Polizaharidele drept purpureea au fost testate pentru eventuala Nu au aprut schimb de cromatide surori sau patru aberaii cromozomale nici n experimentele de n lung nici n cele de scurt durat. B) Investigaii imunologice O trecere n n revist a cercetrilor efectelor sau

interferon-like, dar fr a induce sinteza de genotoxicitate n culturi de limfocite umane [7].

combinaie cu Eupatorium perfoliatum i Thuja occidentalis (complexul Echinacea), la pacieni

supui intervenie chirurgicale n urma unor boli efectuate n ultimii 40 de ani (ianuarie 1966-iulie tumorale, nu a determinat activarea populaiilor 1999), vederea ale confirmrii leucocitare sau a limfocitelor i nici amplificarea imunostimulatoare extractelor

secreiei citokinelor IL-1-, IL-1-, IL-2, IL-6, componentelor purificate din Echinacea, a TNF-, sau IFN- n supernatantele culturilor relevat o lips de concordan ntre rezultatele din snge integral stimulate, comparativ cu lotul obinute de diferite grupe de lucru, existnd de pacieni netratat [8, 9, 11]. Preparatele Echinacea efectorilor fitochimice prin obinute (microacioneaz, imunitii argumente pro i contra activitii din imunomodulatoare dar nu i a securitii i Dup unii cu autori utilitate [30], n influena deficienele

stimularea utilizrii acestor extracte [12].

nespecifice

macrofage), n prima linie a aprrii mpotriva imunomodulatoare a extractelor de Echinacea celulelor infectate/transformate viral. Nivelul este global, crescut al acestor celule n mduva osoas imunitare, ndeosebi n combinaie cu extracte consecutiv tratamentului efectuat pe obolani, din Epilobii herba, Usnea barbata, Urticae indic drept cel puin unul dintre mecanismele folium, Alcemillae herba, Hyperici herba, Crataegi folium cum flores.

28

Corelnd

rezultatele

obinute

cu atributele

eficacitii

imunostimulatoare

compoziia diferitelor pri ale plantei sau cu extractului din Echinacea purpurea [1]. cea a diferitelor specii de Echinacea, se poate afirma c efectele imunostimulatoare ale Influena la nivelul sistemului fagocitar Efectele pozitive ale extractelor de

extractelor alcoolice sau apoase depind foarte Echinacea asupra fagocitozei au fost urmrite mult de aciunea conjugat a constituenilor lor. pe ficatul izolat de obolan [4]. Pentru a stabili Majoritatea analizelor chimice au fost efectuate eventualele diferene existente ntre extractele pe Echinacea angustifolia, ndeosebi cele mai provenite din plante aparinnd unor specii vechi, n timp ce activitatea imunobiologic a diferite, s-a efectuat testul de incluzie a fost testat n special pe Echinacea purpurea particulelor de carbon i au fost testate [23]. Influena la nivelul sistemului complement Datorit rolului fiziologic extrem extractele de E. purpurea, E. angustifolia i E. pallida. Fagocitoza a fost amplificat n prezena extractelor alcoolice cu 20-30%, la de doze de 10-2 pn la 10-4. Extractul de E. iar cele prin

important al sistemului complement, modularea purpurea s-a dovedit a fi cel mai activ, un obiectiv de interes n elaborarea diferitelor etanolic au sunt cunoscute a avea activiti de modulare a corelate mod clasic nu permite ns diferenierea ntre inhibitorii datorit sau activatorii hemolizei reduse. cu fost cele mai eficace in dect vivo

(inhibarea sau stimularea) acestuia, reprezint fraciunile extrase cu cloroform din extractul medicamente. Unele polizaharide din plante hidrofilice. Rezultatele acestui test in vitro sunt obinute complementului. Testul de hemoliza, utilizat n administrarea oral a extractului alcoolic. Dintre compuii izolai, acidul cicoric a o cretere semnificativ a complementului, determinat

Evaluarea fagocitozei, activitate confirmat prin testul de Fraciunea polizaharidic acioneaz

comparativ a efectelor de inhibare respectiv incluzie a particulelor de carbon. activare, prin utilizarea heparinei (inhibitor) i a unui arabinogalacatan din extractul de favorabil asupra fagocitozei, dup inoculare

Echinacea purpurea, a demonstrat c acesta intravenoas (EchinacinR ), efect demonstrat din urm este un activator de complement, att prin evaluarea procentului de limfocite i n calea clasic ct i n cea alternativ, prin granulocite marcate cu timidin tritiat, n varierea timpilor de incubare cu complementul. Eliminarea lanurilor laterale ale experimentul lui Cohne [7]. Investigaii in vitro efectuate folosind un

arabinogalactanului testat a redus considerabil amestec foarte bogat n polizaharide din prile activitatea de stimulare a complementului, aeriene ale E. purpurea au demonstrat influena dovedind c structura tridimensional este o predilect a acestuia asupra subsistemului component esenial a potenialului activator. celular Intervenia arabinogalactanului n mononuclear. macrofagele Acelai n amestec eliberarea activarea stimuleaz

complementului poate reprezenta unul dintre interleukinei 1, dar nu induce proliferarea

29

limfocitelor T [2]. Stimularea macrofagelor si

Aceste

studii a

subliniaz

activitatea din

inducerea secreiei de citochine sunt datorate imunostimulatoarea glicoproteice [3]. Extractele din Echinacea purpurea,

polizaharidelor

nu numai fraciunii polizaharidice ci i celei Echinacea, att la animalele sntoase ct i la cele imunosupresate [19]. Un studiu comparativ, efectuat pentru

stabilizate, sunt bine tolerate, reaciile alergice, investigarea efectelor imunobiologice ale unor ndeosebi cele cutanate apare familia ndeosebi Compositae. c la Date reversibile, putnd componente din extractul de Echinacea (acidul persoane cu cicoric, polizaharidele si alchilamidele) a

hipersensibilitate de contact fa de plante din demonstrat eficacitatea maxim a alchilamidelor farmacologice n doz de 12 g/kg greutate corporal/zi n obinute din creterea semnificativ a activitii fagocitare ca sugereaz preparatele

Echinacea prin presare la rece stimuleaz i a indicelui fagocitar al macrofagelor alveolare. sistemul imun nespecific i cresc rezistena la Simultan, macrofagele alveolare obinute de la infeciile respiratorii prin stimularea untului acest grup au produs semnificativ mai mult TNF- oxidativ i modularea secreiei de monokine i oxid nitric dup stimularea in vitro cu LPS dect [3,6,16]. Aceste afirmaii sunt susinute de n cazul oricrui alt component sau al martorului. stimularea activitii celulelor natural ucigae Nici unul dintre componentele investigate, n nici [2]. utiliznd una dintre concentraii, nu a indus eliberarea O serie de studii efectuate pe oareci, TNF-, IFN- i IL-2 de ctre splenocite. Efectele polizaharide purificate din culturi imunomodulatoare ale alchilamidelor par a fi mai pulmonare dect asupra celor splenice [13]. Analiza prin Western blot a efectelor in celulare de Echinacea, au dovedit un efect pronunate asupra celulelor imunocompetente imunostimulator n culturi celulare provenite de la oareci sau la Aceste animalele efecte injectate intraperitoneal.

includ vivo ale extractului din Echinacea purpurea (L.)

amplificarea activitii fagocitare, chemotaxiei i Moench a artat c acesta induce alturi de a untului respirator al neutrofilelor respectiv variaii ale rspunsului la lipopolizaharid (LPS), macrofagelor. Macrofagele peritoneale de la exprimarea ciclooxigenazei-2 (COX-2) indus animalele tratate au produs cantiti crescute de IFN- i a sintezei oxidului nitric (iNOS) la de factor de necroz al tumorilor (TNF), macrofagele peritoneale. Astfel, tratmentul cu interleukine (IL-1, IL-6 i IL-10) i au fost mai 100 mg kg(-1) de extract de Echinacea a redus active n distrugerea celulelor tumorale din linia doar Leishmania enriettii sau Candida albicans. Efecte similare, dupa administrarea exprimarea COX-2, demonstrnd ca WEHI 164 ca i a celulelor infectate cu efectul antiinflamator al extractului poate fi datorat acestui mecanism [20]. Influena asupra imunitii specifice Numeroase efecte imunomodulatoare au fost atribuite extractelor din Echinacea

extractelor de Echinacea au fost observate mediate umoral chiar i la oarecii supresai prin utilizarea ciclofosfamidei sau ciclosporinei.

30

angustifolia, cu toate acestea puine se cunosc crescute fa de un antigen timodependent, referitor la stimularea imunitii antigen-specifice. hematiile de oaie [2]. n unele lucrri este Studii efectuate pe obolani lmuresc parial semnalat o slab stimulare a limfocitelor T, dar astfel de aspecte, indicnd augmentarea sintezei acestea nu sintetizeaz cantiti crescute de ILde imunoglobuline prin creterea rspunsului 2, [21]. unor preparate din Echinacea, diferite IFN-2, sau IFN-. Hipersensibilitatea imun IgG primar i secundar fa de antigen ntrziat, o reacie mediat de limfocitele T nu este afectat de tratamentul cu extract de Contrar acestor rezultate, administrarea Echinacea. Aceste date indic aciunea strict a ca polizaharidelor purificate din E. purpurea asupra provenine (produse de serie sau oficinale) la laturii nespecifice a rspunsului imun, respectiv obolani (masculi i femele), reduce concentraia a fagocitelor, mai degrab dect asupra laturii de imunoglobuline antigen-specifice (cele de specifice a imunitii [19]. Alte lucrari [31, 32, serie) sau nu au nici un efect (cele oficinale) la 33] sugereaz c n amestec cu extracte din alte femele, fiind ns neutre ca eficacitate la masculi plante (Glycyrrhiza glabra), sub forma unor [25]. mediate celular tablete (Revitonil), extractul de Echinacea Influena asupra imunitii specifice purpurea exercit un efect stimulator remarcabil att asupra activitii fagocitare, msurate prin Dei extractul de Echinacea acioneaz testul de nglobare al particulelor de carbon imunostimulator, nu toate categoriile celulare respectiv prin chemiluminescen, ct i asupra sunt stimulate. Astfel, limfocitele B nu sunt limfocitelor T (30-50%), n biotestul CD69 , la o activate i nici produc anticorpi n concentraii concentraie de 100 microg-1/ml. Bibliografie 1. Alban, S., B. Classen, G. Brunner, W. Blaschek, (2002) Differentiation between the complement modulating effects of an arabinogalactan-protein from Echinacea purpurea and heparin, Planta Med.;68(12):1118-24. 2. Barrett, B., (2003) - Medicinal properties of Echinacea: a critical review, Phytomedicine. Jan;10(1):66-86. 3. Bauer, R., (2002) - New knowledge regarding the effect and effectiveness of Echinacea purpurea extracts, Wien Med Wochenschr.;152(15-16):407-11. 7. 4. Bauer, R., (1996)- Echinacea drugs effects and active ingredients, Z Arztl Fortbild (Jena); 90(2):111-5. 5. Bauer, R., O. Hoheisel, I. Stuhlfauth, H. Wolf, (1999) - Extract of the Echinacea purpurea herb: an allopathic Wien Med phytoimmunostimulant,

Wochenschr.; 149 (8-10): 185-9. 6. Bauer, R., K. Jurcic, J. Puhlmann, H. Wagner, (1988) - Immunologic in vivo and in vitro studies on Echinacea extracts, Feb;38(2):276-81. Bauer, R., H. Wagner, fur (1990), Arzte, Echinaceea, Handbuch Arzneimittelforschung.

31

Apotheker

und

andere

function

in

normal

rats,

Int

Naturwissenschaftler,

Wissenschaftliche

Immunopharmacol.;2(2-3):381-7. 14. Hostettmann, K., (2003) - History of a plant: the example of Echinacea, Forsch Komplementarmed Naturheilkd.;10 Suppl 1:9-12. 15. Kahlos, K, L. Kangas, R. Hiltunen, (1989) - Ergosterol peroxide, an active compound from Inonotus radiatus, Planta Med.;55(4):389-90. 16. Kligler, B., (2003) - Echinacea, Am Fam Physician.;67(1):77-80. 17. Koch, C., (1986) - The alternative complement pathway in chickens. Purification of factor B and production of a monospecific antibody against it, Acta Pathol Microbiol Immunol Scand, 94(6):253-9. 18. O'Neill, W., S. McKee, A.F. Clarke, (2002) - Immunological and haematinic consequences of feeding a standardised Echinacea (Echinacea angustifolia) Klass

Verlagsgesellschaft, Stuttgart. 8. Block, K.I., MN. Mead, (2003) - Immune system effects of Echinacea, ginseng, and astragalus: a review, Integr Cancer Ther.;2(3):247-67. 9. Bodinet, C., J. Freudenstein, (1999) Effects of an orally applied aqueousethanolic extract of a mixture of Thujae occidentalis herba, Baptisiae tinctoriae radix, Echinaceae purpureae radix and Echinaceae pallidae radix on antibody response against sheep red blood cells in mice, Planta Med., Dec 65:8 695-9. 10. El-Gengaihi, S.E., A.S. Shalaby, E.A. Agina, S.F. Hendawy, (1998) Alkylamides of Echinacea sp. purpurea L. as influenced by plant ontogony and fertilization, J Herb Spices Med Plant, 5: 3541. 11. Elssser-Beile, U., W. Willenbacher, J. Schulte H.H. Bartsch, H. Gallati,

extract to healthy horses, Equine Vet J.;34(3):222-7. 19. Percival, Echinacea S. S., in (2000) medicine, Use of Biochem

Mnting S. Von Kleist, (1996) - Cytokine production in leukocyte cultures during therapy with Echinacea extract, Journal of Clinical Laboratory Analysis, Volume 10, Issue 6, Pages: 441-445. 12. Giles, JT, Palat CT 3rd, SH. Chien, Z.G. Chang, D.T. Kennedy, (2000) Evaluation of echinacea for treatment of the common cold, Pharmacotherapy.; 20(6):690-7. 13. Goel, V., C. Chang, J.V. Slama, R. Barton, R. Bauer, R. Gahler, T.K. Basu, (2002) - Alkylamides of Echinacea purpurea stimulate alveolar macrophage

Pharmacol., 60:2 155-8. 20. Raso, GM, M. Pacilio, G. Di Carlo, E. Esposito, L. Pinto, R. Meli, (2002) - In vivo and in vitro anti-inflammatory effect of Echinacea purpurea and Hypericum perforatum. J Pharm Pharmacol.; 54(10):1379-83. 21. Rehman, J., J.M. Dillow, S.M. Carter, J. Chou, B. Le, A.S. Maisel, (1999) Increased production of antigen-specific immunoglobulins G and M following in

32

vivo treatment with the medicinal plants Echinacea angustifolia and Hydrastis canadensis. Immunol Lett.;68(2-3):3915. 22. Schranner, I., M. Wurdinger, N. Klumpp, U. Loch, S.N. Okpanzi, durch (1989) Beeinflussung der aviaren humoralen Immunreaction Echinacea 353-364. 23. Schumacher, A., K.D. Friedberg, (1991) - The effect of Echinacea angustifolia on non-specific cellular immunity in the mouse, Arzneimittelforschung.; 41(2): 141-7. 24. Sloley, B.D., L.J. Urichuk, C. Tywin, R.T. Coutts, P.K. Pang, J.J. Shan, (2001) Comparison of chemical components and antioxidants capacity of different Echinacea species, J Pharm Pharmacol.;53(6):849-57. 25. South, EH, JH. Exon, (2001)- Multiple immune functions in rats fed Echinacea extracts, Immunopharmacol Immunotoxicol.; 23(3):411-21. 26. Sun, L.Z., N.L. Currier S.C., Miller, (1999) - The American coneflower: a prophylactic role involving nonspecific immunity, J Altern Complement Med.;5(5):437-46. 27. Tragni, E., A. Tubaro, S. Melis, C.L. Galli, (1985) - Evidence from two classic irritation tests for an anti-inflammatory action of a natural extract, Echinacina B, Food Chem Toxicol.; 23(2):317-9. Influex und angustifolia Extrakt,

28. Tragni, E., C.L. Galli, A. Tubaro, P. Del Negro, R. Della Loggia, (1988) - Antiinflammatory activity of Echinacea angustifolia fractions separated on the basis of molecular weight., Pharmacol Res Commun.;20 Suppl 5:87-90. 29. Tubaro, A., E. Tragni, P. Del Negro, C.L. Galli, R. Della Loggia, (1988) - Antiinflammatory activity of a polysaccharidic fraction of Echinacea angustifolia. Pharmacol Res Commun; 20 Suppl 5:87-90. 30. Vgi, vederea First Florentina, obinerii Ionescu Elena, Cojocaru Cristina, (1996) - Cercetri n fitocomplexului Drug research VOIMUN util n deficiene imunitare, The Symposium between information and life sciences, Bucharest, 3-4 October, 137. 31. Wagner, H., K. Jurcic, (2002) Immunological studies of Revitonil, a phytopharmaceutical containing Echinacea purpurea and Glycyrrhiza glabra root extract, Phytomedicine.;9 (5):390-7. 32. Wagner, H., A. Proksch, I. RiessMaurer, A. Vollmar, S. Odenthal, H. Stuppner, K. Jurcic, M. Le Turdu, J.N. Fang, (1985) - Immunostimulating action of polysaccharides (heteroglycans) from higher 33. Wagner, plants, H., Arzneimittelforschung.; (1991)Echinaceea 35(7):1069-75. Species as Potential Immunostimulatory Drugs, Economic and medicinal Plant Res., vol.5, Academic Press, London.

Zentralblt. Veterinar. Med. B, 36(5),

33

EXTRACTE VEGETALE I FUNCII BIOLOGICE ALE ACESTORA: CALENDULA OFFICINALIS VEGETAL EXTRACTS AND THEIR BIOLOGICAL FUNCTIONS: CALENDULA OFFICINALIS
andru Carmen Dana, Brudac Gh.F., Spnu Marina, Ungvari A., Cadar D., Niculae Mihaela, Uricaru A., Czirjak G. Facultatea de Medicin Veterinar, Cluj-Napoca sandrana@email.ro Cuvinte cheie: extracte vegetale, compoziie, imunomodulare, Calendula officinalis. Key words: vegetal extracts, composition, immune modulation, Calendula officinalis.

Abstract

shown anti-inflammatory, anti-viral and antibiological effects such as and

The interest towards various extracts genotoxic properties of therapeutic interest. increased lately, in connection with major Numerous veterinary medicine, this alternative could be antitumor, medical problems their use could solve. In antiinflamatory, antiviral, anti-genotoxic antimicrobial,

even more efficient, since a potential application immunemodulating activities as well as would as stress correctors and adjuvants for veterinary healing properties were described for various vaccines is also possible. Vegetal extracts could galenic perparations of Calendula officinalis. also prove useful in increasing resistance The remarkable fact is that these properties are against various infections, by partially or totally exerted both in vitro, and in vivo, the extracts restoring the protective potential in immune lacking citotoxic effects. Therefore, Calendula compromised hosts. Phytopharmacological officinalis could represent an important source studies of different Calendula extracts have of natural, bioactive principles. Interesul acordat n ultimul timp veterinar ar fi util cu att mai mult, n postura unor corectori ai strilor de stres i ca adjuvani ai diferitelor vaccinuri, n creterea rezistenei fa de diferite infecii, pentru restaurarea parial sau total a capacitii de aprare la organisme cu imunodeficite nnscute. Nu trebuie neglijate nici efectele antiinflamatoare sau desensibilizante pe care unele extracte le pot exercita.

preparatelor de extracie este n conexiune cu problemele majore pe care utilizarea lor le-ar putea rezolva [8, 23]. Asocierea lor cu preparatele folosite n protocoalele terapeutice clasice ar putea influena favorabil capacitatea nespecific de aprare a organismului, prin efectul imunostimulator complex pe care l exercit [10]. Aplicarea lor n medicina

34

Investigaiile

efectuate

pentru

stabilirea

Calendula officinalis face parte din Fam. Asteraceae (Compositae), specia cultivat fiind Calendula officinalis L. Numele deriv de la latinescul calendae i se datoreaz faptului c florile se deschid odat cu rsritul soarelui i se nchid la apus. De la glbenele, n scop medicinal, se recolteaz florile cu receptacul (Calendulae flos cum receptaculis) sau fr receptacul (Calendulae flos sine receptaculis) i mai rar Calendulae herba, adic planta ntreag, fr rdcin, n timpul nfloririi. Calendula officinalis [6, 7] este cunoscut ca plant medicinal din cele mai vechi timpuri. Preparatele propilenglicol, farmaceutice obinute din flori: de extracte alcoolice sau n ali solveni (etilenglicol, polipropilenglicol, miristat izopropil), tincturi, alifii, ceaiuri, preparate de tip instant au o larg utilizare [15]. Preparatele obinute din Calendula officinalis [11, 14] au fost mult studiate din punct de vedere al efectelor terapeutice. Astfel, au fost dovedite proprietile lor cicatrizante i utilitatea lor n tratamentul plgilor, al arsurilor i nepturilor de insecte. Tot datorit acestor proprieti, se folosesc n medicina uman, n tratamentul ulcerului gastric i duodenal, n ulceraii ale pielii, n tratamentul acneei. Extractele liofilizate din flori ligulate inhib Staphylococcus aureus i Candida albicans i sunt bacteriostatice pentru un numr mare de germeni Gram pozitivi. Datorit principiului amar din flori, preparatele din Calendula care l conin au efect colagog, stimulnd secreia biliar. Pe lng acestea, Calendula [9], posed sedativ, sudorific, estrogenic, i alte efecte: antiinflamator fungicid, hipolipemiant, hipotensor, antiviral,

efectelor unor extracte vegetale au la origine utilizarea empiric a diferitelor plante, sau componente ale lor, n medicina tradiional, al crei nceput se pierde n negura veacurilor. Efectele lor pozitive au asigurat perenitatea preparatelor magistrale pn n momentul n care evoluia civilizaiei umane a atras dup sine dezvoltarea mijloacelor de prelucrare sau de extracie a principiilor activi. Unele dintre aceste preparate (ceaiuri, decocturi, oeturi aromate, prinie, etc.) au fost preluate i chiar incluse n farmacopei, fr a suferi vreo modificare secole de-a rndul [2, 3]. n timp, numrul lor s-a redus, fiind preferate extractele purificate, substanele active, acolo unde a fost posibil obinerea lor. Altele au fost eliminate, demonstrndu-li-se eficacitatea terapeutic redus. Cu toate c are o tradiie ndelungat, utilizarea plantelor i a extractelor obinute din acestea [24], este departe de a fi un subiect epuizat. Interesul pe care medicina i biochimia l acord acestui domeniu este n continu cretere i are ca rezultat introducerea n practic de noi preparate, care dobndesc o importan tot mai mare n cadrul terapeuticii moderne. Calendula officinalis (glbenele, filimic) [19, 22] este una din plantele ce ocup o poziie privilegiat prin faptul c are att efectele terapeutice ale unei plante medicinale, ct i cele estetice ale unei plante de ornament. Florile sale, galben-portocalii, ce pot fi admirate din iunie pn toamna trziu, la sosirea primului ger, o fac s fie des folosit pentru spaiile verzi, parcuri i grdini.

hipocolesterolemiant, antiveninos,

35

imunostimulator, antitumoral. Ceaiurile i tincturile sunt folosite n forme inoperabile de cancer i n cancerele pielii. Datorit coninutului ridicat n pigmeni carotenoidici, Calendula officinalis a fost utilizat i ca aditiv n hrana psrilor, n scopul colorrii glbenuului oulor. n perioada 1960 1980 a fost intens studiat compoziia plantei, culminnd n 1992 cu editarea unei monografii referitoare la Calendula officinalis [14], care abordeaz att probleme de compoziie chimic i exploatare a plantei, ct i efecte terapeutice. Multitudinea de direcii de utilizare oferite de aceast plant motiveaz numrul mare de studii care i-au fost dedicate, precum i continuarea acestora n vederea cunoaterii i valorificrii ntro msur ct mai mare a potenialului su terapeutic. Compoziia chimic a speciei Calendula officinalis este complex, incluznd: triterpene simple i oligoglicozide i flavonol glicozide, flavonoide, saponine, carotenoide, acizi grai, proteine i polizaharide [18]. Dintre compuii izolai din Calendula officinalis o importan deosebit caroten licopina, prezint alfa, luteina, n pigmenii beta, zeaxantina, diclorometan carotenoidici: criptoxantina, eloxantina, din florile caroten

Calendula diol-3-O-laurat [13, 20]. Condiiile de extracie influeneaz substanial compoziia produsului obinut. Astfel, s-a demonstrat experimental c presiuni peste 300 bari duc la extragerea n proporie crescut a compuilor lipofilici din Calendula, n timp ce coninutul n compui polifenolici i glicozidici rmne redus chiar la 689 bari [2]. Efecte biologice. Experimente biotehnologice [25] au condus la obinerea unor produse bioactive din Calendula officinalis, a cror standardizare s-a realizat pe baza coninutului n oleanozide. imunosupresie Administrate indus n condiii de medicamentos, aceste

produse dovedesc o activitate imunostimulatoare, limfotrop i protectoare, astfel: previn sau reduc efectul timolitic i depleia limfocitar corticosteroizi; acioneaz nu numai ca protectoare ale limfocitelor T sau B ci amplific sinteza de imunoglobuline; corecteaz hiperglicemia acionnd insular la animalele la al diabetizate experimental prin tratament cu streptozotocin, nivelul esutului protector pancreatic, splenic, induse de

violaxantina, flavoxantina i mutatoxantina. Extractele uscate de Calendula officinalis conin opt triterpendiol monoesteri bioactivi, i anume faradiol - 3- O - palmitat, faradiol 3 - Omiristat, faradiol 3 O - laurat, arnidiol -3-Opalmitat, arnidiol 3 O - miristat, arnidiol 3 O - laurat, Calendula diol-3-O-palmitat i Calendula diol-3-O-miristat. Extractul lipofil din florile uscate din varietatea Calypso Orange Florensis conin de asemenea cantiti mici de

timusului, splinei i tiroidei. Testarea potenialului mutagen al extractului de Calendula officinalis prin aplicarea testului micronucleilor i testului aberaiilor cromozomiale nu au dovedit frecvena semnificativ crescut a eritrocitelor policromatofile cu micronuclei sau a celulelor cu aberaii cromozomale, n comparaie cu lotul martor. n schimb, valorile nregistrate la loturile tratate cu ciclofosfamid au fost net superioare. Datele susin concluzia c extractul

36

testat este lipsit de potenial mutagen i poate fi utilizat n terapie [1]. Studiul compoziiei chimice a florilor de Calendula arvensis var. eu arvensis Maire relev prezena saponinelor, plantei, care dar confer care proprieti hemolitice

Includerea in raie a luteinei din Calendula a stimulat reactivitate limfocitar la PHA, dar nu a influenat producerea de IL-2 sau citotoxicitatea limfocitar T [ 5]. Studii fitofarmaceutice asupra diferitelor extracte din Calendula officinalis au indicat proprieti de interes terapeutic antiinflamatorii, antivirale [17] i anti-genotoxice [21]. Evaluarea in vitro i in vivo a potenialului citotoxic anti-tumoral i a activitii imunomodulatoare a interesat i un extract apos de Calendula laser activat (LACE). Acest extract s-a dovedit capabil s inhibe semnificativ dezvoltarea in vitro a mai multor linii celulare tumorale umane i murine (leucemii, melanoame, fibrosarcoame, cancer mamar, de prostat, uterin, pulmonar, pancreatic i colorectal) prin perturbarea ciclului celular i prin inducerea apoptozei; efectul anticanceros a fost observat i in vivo pe modele tumorale murine. n contrast, extractul testat a determinat proliferarea i activarea limfocitelor periferice umane [16]. n concluzie, pentru diferitele preparate galenice obinute din Calendula officinalis sunt demonstrate o multitudine de efecte terapeutice: antiinflamatorii, cicatrizante, antivirale, antitumorale, antimicrobiene, anti-genotoxice,

influeneaz n acelai timp prin aciunea anti inflamatorie, reactivitatea antiedematoas la obolani [4]. Sterol glucozil-transferaza este localizat n structurile officinalis, membranare separat ale de plantei de C. cloroplaste i

mitocondrii, constnd probabil din fragmente ale aparatului Golgi. O parte minor a activitii enzimatice este asociat cu fraciunea microzomal. O serie de detergeni sintetici activeaz enzima, prin solubilizarea ei din membrane. Preparatul enzimatic purificat i concentrat de aproximativ 70 de ori este puternic inhibat de p-cloromercuribenzoat dar este stimulat de mercaptoetanol i ditiotreitol, i mai puin de ionii de Mg
2+

i Ca

2+

ca i de ageni

chelatani i reductori. UMP stimuleaz n timp ce UDP i UTP inhib pronunat activitatea enzimei [26]. Evaluarea efectelor luteinei din florile de Calendula dezvoltrii transplantabile demonstrat administrate tumorii i a per os asupra murine a mamare funciei

imunomodulatorii. Este de remarcat faptul c, n general, aceste proprieti se exercit att in vitro, ct i in vivo i c nu exercit citotoxicitate fa de esuturile normale. Din aceste considerente, Calendula officinalis poate reprezenta o surs important de principii naturali bioactivi. vegetale, The First Symposium Drug research between information and life sciences, Bucharest, 3-4 October, 49.

limfocitare

o cretere a latenei, reducerea

numrului i volumului tumorilor palpabile, dependent de doza de produs administrat. Bibliografie 1. Albulescu, Mihaela, R. Albulescu, D. Grui, (1996) -Studii privind potenialul mutagen al unor extracte

37

2.

Bezanger-Beauquesne, L., M. Pinkas, M. Torck F. Trotin, (1990) - Plantes mdicinales des rgions tempres, Ed. Maloine SA (ed.), 18.

regulators, Economic and Medicinal Plant Research, vol. V, Academic Press, London. 11. Gafieanu, E., I. Matei, I. Popoviciu, D. Lazr, I.M. Lazr, S. Drghici, (1987) Caracterizarea unor fraciuni extractive din nr.4. 12. Hamburger, M., D. Baumann, S.Adler, (2004) - Supercritical carbon dioxide extraction of selected medicinal plants: effects of high pressure and added ethanol 54. 13. Iatsyno, A.I., L.F. Belova , G.S.Lipkina , S.I. Sokolov , E.A. Trutneva, (1978) Pharmacology of calenduloside B, a new triterpene glycoside from the roots of Calendula officinalis, Farmakol Toksikol. ;41(5):556-60. 14. Isaac, O., (1992) - Die Rigelblume, Wissenschaftliche mbM, Stuttgart. 15. Istudor, V., M. Mntoiu, I. Bdescu, (1981) - Cercetri privind realizarea unui preparat tip instant (Ulcovex) n ulcerul gastric i duodenal. Contribuii la studiul chimic al produsului Calendulae flores, obinerea extractului de tip instant i stabilirea metodologiei de control a acestuia, Farmacia, vol. XXIV, nr.I. 16. Jimnez-Medina, Eva, A. Garcia Lora, Laura Paco, I. Algarra, Antonia Collado, F. Garrido, (2006) - A new Verlagsgeselschaft, on yield of extracted substances, Phytochem Anal.;15(1):46Calendula flos, utilizate n dermopreparate, Farmacia, vol.XXXV,

3.

Bezanger-Beauquesne L., (1993) Nouveautes en phytotherapie, Plantes medicinales at phytotherapie, 26 (3), 234 264.

4.

Chemli, R., A. Toumi, S. Oueslati, H. Zouaghi, K. Boukef, G. Balansard, (1990) - Calendula arvensis L. Impact of saponins on toxicity, hemolytic effect, and anti-inflammatory activity, J Pharm Belg.;45(1):12-6.

5.

Chew, B.P., M.W. Wong, T.S. Wong, (1996) - Effects of lutein from marigold extract on immunity and growth of mammary tumors in mice, Anticancer Res., 16 (6B): 3689-94.

6. 7.

Chiric, P. -- Medicina naturist, Ed. Medical Bucureti, 1987. Ciulei, I., E. Grigorescu, U. Stnescu Plante medicinale fitochimie i fitoterapie, vol.I i II, Ed. Medical, Bucureti, 1993.

8.

Clark, A.M., (1996) Natural products as a resource for new drugs, Pharm.res., 13:1133-44.

9.

Della Logia, R., A. Tubaro, S. Sosa, H. Becker, S.T. Saar O. Isaac, (1994) The role of triterpenoids in the topical anti inflamatory activity of Calendula officinalis flowers, Planta. Med., 60, 516 520.

10. Devlin, J.P., C. Carter, C.A. Homon, (1991) - High Capacity Screening Natural Products as Immune

38

extract of the plant Calendula officinalis produces a dual in vitro effect: cytotoxic anti-tumor activity and lymphocyte activation, BMC Cancer, 6, 119. 17. Kalvatchev, Z, R. Walder, D.Garzaro, (1997) - Anti-HIV activity of extracts from Calendula officinalis flowers, Biomed Pharmacother.;51:176180. 18. Kurkin, V. A., O. V. Sharova, 2007Flavonoids from Calendula officinalis flowers, Chemistry of Natural Compounds, Vol. 43, No. 2, 216-217. 19. Muntean, S. - Plante medicinale i aromatice cultivate n Romnia, Ed. Dacia, Cluj-Napoca 22, 270-271, 1990. 20. Neukirch, H., M. D'Ambrosio, J. Dalla Via, A.Guerriero, of eight officinalis (2004) Simultaneous determination of Calendula quantitative triterpenoid L. and

with

diethylnitrosamine.

Toxicol

in

Vitro.,16:253258 . 22. Popescu, H. - Resurse medicinal n flora Romniei, Ed.Dacia, ClujNapoca,1994. 23. Racz, K., E. Atilla, M. Peter, (1977)Extracte farmaceutice vegetale, 69114. 24. Stoian-Ionescu, S.T., E. Savopol Extracte farmaceutice vegetale, Ed.medical, Bucureti, 1977. 25. urcanu, Ludmila, A. Vamanu, Lidia Ghidel, Nua Rou, Angela Tomas, Ana Ilonca, Nina Slidan, I. Madar, C. Crciun, (1996) Cercetri i biotehnologice, biochimice

histoenzimatice, n scopul obinerii unor medicamente de origine vegetal, cu activitate imunostimulatoare i protectoare (antiimunosupresoare) n terapia cu hormoni glucocorticosteroizi, The First Symposium Drug research between information and life sciences, Bucharest, 3-4 October, 129. 26. Wojciechowski, some properties Z.A., of N.Van UDPG: Uon, sterol (1975) - Intracellular localization and glucosyltransferase 38. from Calendula

monoesters from flowers of 10 varieties characterisation of a new triterpenoid monoester, Phytochem Anal.; 15(1): 30-5. 21. Perez-Carreon, J.I., G. Cruz Jimenez, J.A. Licea-Vega, E. Arce-Popoca, S. Fattel-Fazenda, S. Villa-Trevino, (2002) Genotoxic of and anti-genotoxic officinalis properties Calendula

officinalis,.Acta Biochim Pol.;22(1):25-

extracts in rat liver cell cultures treated

39

OBINEREA I CARACTERIZAREA UNOR EXTRACTE VEGETALE CU POTENIAL DE ADJUVANTARE PENTRU ANIMALE OBTAINMENT AND CHARACTERISTICS OF VEGETAL EXTRACTS WITH ADJUVANT POTENTIAL FOR ANIMALS
Tma M., Votinaru O., Cristina Mogoan Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu Cluj-Napoca, Facultatea de Farmacie, Str. I. Creang nr. 12 mtbotanica@yahoo.com Cuvinte cheie : extract vegetal, Calendula officinalis, Vaccinium myrtillus, Hippophae rhamnoides, Echinacea purpurea, Echinacea pallid. Key words: vegetal extracts, Calendula officinalis, Vaccinium myrtillus, Hippophae rhamnoides, Echinacea purpurea, Echinacea pallid.

Abstract We have selected five vegetal products based on their content in active principles and biological properties, in order to obtain and characterize some vegetal extracts which will be subsequently used as adjuvants for various animal species of economic interest. These products are: Callendulae flos, Myrtilli fructus, Hippophae fructus, Echinaceae purpureae herba and Echinaceae pallidae in toto. Introducere Pe baza coninutului n principii active i a proprietilor biologice menionate n literatura de specialitate, au fost selecionate 5 produse vegetale n vederea obinerii i caracterizrii unor extracte pentru experimente pe animale n vederea evalurii proprietilor de adjuvant la specii de animale de interes economic. Aceste produse sunt: Callendulae flosinflorescene de glbenele, Myrtilli fructus-

fructe de afin, Hippophae fructus-fructe de ctin, Echinaceae purpureae herba-iarba de Echinacea purpurea i Echinaceae pallidae in toto-planta integral cu rdcini, tulpini, frunze i inflorescene de E. pallida. Calendula officinalis L. (Asteraceae) este o plant ierboas anual care se cultiv att n scopuri ornamentale ct i medicinale. De la aceast Conin ulei specie se recolteaz flavonoide, libere i n scopuri mucilagii, compui medicinale inflorescenele (Calendulae flos). saponine, carotenoide, compui fenil-propanici, rezine, volatil, triterpene poliacetilenici i polizaharide imunostimulatoare [8, 17, 21]. Se utilizeaz ca emolient, cicatrizant, antiinflamatoare, antimicrobian, spasmolitic fiind indicat n tratamentul ulcerelor, n stafilococii cutanate, arsuri, afeciuni bucale, colecistopatii [6, 8, 20].

40

Vaccinium myrtillus L., afinul (Ericaceae) este un arbust pitic rspandit n etajul molidului. De la acesta se recolteaz dou produse medicinale: frunzele (Myrtilli folium) i fructele (Myrtilli fructus) [8, 13]. Fructele de afin conin antociani, flavone, carotenoide, tanin, mucilagii, pectine, glucide, acizi organici, vitamine (C, B), microelemente (Mn, Cr, Fe, Mg, Co). Sunt indicate n tratamentul bolii diareice (Eridiarom), dizenterie, enterocolite, n tratamentul local al inflamaiilor mucoasei bucale i faringiene, n regenerarea purpurei retiniene (Difebion, maladiile i ameliorarea Diavit, ale acuitii vizuale n ca Difrarel, vasculare Myrtillene), diabeticilor L.,

de culoare roie-violacee. Rdcinile sunt firoase, fasciculate [12, 13]. Echinacea pallida Nutt. (Asteraceae) este o plant ierboas peren cu rdcini pivotante dar ramificate, mai cu groase, nguste 3 cu frunze la liniarspecia cu lanceolate, precedent, dect

nervuri

arcuate,

inflorescene ovoidal-conice, cu florile ligulate marginale pendente, mai lungi i de culoare roz. Cele dou specii de Echinacea au fost introduse n cultur n Romania din 1984, la Cluj-Napoca. De la E.pallida se utilizeaz ntreaga plant (in toto), ncepand cu al III-lea an de cultur, n timp ce de la E. purpurea se utilizeaza numai partea aerian (herba) [11, 12, 13, 18]. Ambele specii conin polizaharide imunostimulatoare, compui fenil-propanici

angioprotectoare [6, 8, 20, 21]. Hippophae spinos, cu rhamnoides ngust ctina cu (Elaeagnaceae) este un arbust stufos i frunze lanceolate numeroi peri stelai pe partea inferioar, cu fructe drupe false, portocalii cu smbure n interior [12, 13]. Fructele de ctin sunt considerate adevrate surse de polivitamine naturale, coninand att vitamine hidrosolubile (C, B1, B2, PP) ct i provitamine (A) sau vitamine liposolubile (D, E, K, F). Mai conin pectine, ulei gras, acizi triterpenici (n cuticul), acizi organici. Se utilizeaz ca vitaminizante, pentru convalescen, persoane n vrst iar uleiul gras ca i cicatrizant [5, 6, 8, 10, 20]. Echinacea de cultur, de purpurea origine L. Moench. (Asteraceae) este o specie ierboas peren, nord-american, introdus n cultur ca plant ornamental i medicinal. Frunzele sunt late, cu 5 nervuri arcuate, inflorescene disciforme, florile marginale avand ligula mai scurt i mai lat,

ntre care predomin acidul cicoric la E. purpurea i echinacozida la E. pallida. Mai conin ulei volatil, saponine, flavonoide, poliine i compui poliacetilenici. Extractele acestor specii cresc rezistena nespecific a organismelor, prezint aciune cicatrizant, stimuleaz fagocitoza, inhib hialuronidazele bacteriene. Ele sunt valorificate n numeroase produse fitoterapeutice (ex. Echinacea, Esberitox, Echinacin, Novastim, Imunogrip) [2, 3, 4, 14, 15, 16, 19]. Material i metod Ca urmare a substanelor active coninute de aceste plante i a proprietilor lor biologice, ne-am propus s obinem i s caracterizm fizico-chimic extractele obinute din acestea, ce urmeaz a fi administrate animalelor. Extractul fluid [1:2] din Callendulae flos sa obinut din florile de glbenele aduse la

41

gradul de finee al sitei IV (FR X), prin tehnica repercolrii dup Squibb, cu alcool etilic de 50 [7, 13]. Alegerea acestui solvent i
0

0,640 kg zahr, s-a agitat pn la dizolvare, apoi s-a suspus omogenizrii la un blender timp de 3x2 minute. Siropul este stabil, se poate conserva la rece (40C) i poate fi diluat n momentul administrrii. Pentru extractul fluid (1:1) din Echinaceae purpureae herba s-a utilizat material vegetal provenit din cultur (USAMV Cluj-Napoca), uscat i mrunit la gradul de finee al sitei IV. Extracia s-a realizat prin repercolare dup tehnica Squibb cu alcool de 600. Extractul fluid (1:1) de Echinacea pallida s-a realizat din produsul integral uscat, provenit din cultur n anul al III-lea de vegetaie (USAMV Cluj-Napoca), mrunit la gradul de finee al sitei IV (FR X) i extras cu alcool de 600, dup tehnica Squibb, prin repercolare. Determinarea coninutului n polifenoli de tip acid cafeic s-a realizat dup tehnica indicat de FR X la monografia Cynarae folium [1], iar coninutul n polizaharide imunomodulatoare dup tehnica spectrofotometric indicat de Tma i colab. [16]. Rezultate Principalele ale formelor caracteristici farmaceutice fizico-chimice preparate din

concentraiei a fost determinat de capacitatea de extragere a ct mai multor principii active (mucilagii, saponine, flavonoide, compui fenilpropanici, iar tehnica Squibb se motiveaz prin obinerea unui extract ct mai concentrat n principii active din care s se administreze cantiti ct mai mici. Determinarea cantitativ a flavonoidelor a fost realizat dup tehnica indicat de FR X pentru monografia Cynarae folium. Extractul din fructe de afin a fost obinut din fructe proaspete, prin tehnica macerrii la rece i adugarea unei cantiti de alcool care, innd cont de coninutul de ap (87,62%) s conduc n final la o concentraie de 25% alcool. Aceast concentraie asigur i o extracie bun a principiilor active dar i stabilitate n timp. Dup 10 zile de macerare, fructele se preseaz la o pres mecanohidraulic fructe i se filtreaz Coninutul prin de vat. Randamentul a fost de 2 l extract din 2kg proaspete. antociani exprimai n cianidin a fost determinat dup tehnica indicat de Markakis [9]. n ceea ce privete fructele proaspete de ctin, s-a realizat un sirop de fructe proaspete 36%. Acest procedeu are avantajul c folosete un extract integral din pulpa fructului, extracia se face la rece, menajnd vitaminele iar conservarea se realizeaz prin concentraia ridicat de zahr. Pentru realizarea siropului am utilizat un extract integral obinut cu ajutorul unui mixer de stors fructe. Din 1kg fructe proaspete s-a obinut 0,360 kg suc presat la care s-a adugat

speciile luate n studiu, precum i coninutul lor n principii active sunt prezentate n tabelul 1. Discuii n cazul extractului fluid 1 :2 din Calendulae flos, se remarc o valoare ridicat a n rutozid. rezidului uscat (12,30%) i coninutul de 14,28 mg flavonoide exprimate

42

Pentru extractul din Myrtilli fructus, se remarc un reziduu uscat de 7,00% i un coninut total de antociani de 50 mg/100 ml

ceea ce corespunde la 714,28 mg antociani pentru 100g reziduu uscat.

Tabel nr.1: Caracteristicile fizico-chimice ale formelor farmaceutice preparate din speciile vegetale luate n studiu Tabel no.1: Physical and chemical characteristic of pharmaceutics compounds prepaired from the studied vegetal species Produs vegetal Calendulae Echinaceae Myrtilli Hippophae Echinaceae pallidae in flos fructus fructus purpureae toto herba Forma Extract fluid Extract Sirop 36% Extract fluid Extract fluid farmaceutic 1:2 alcoolic 1:1 1:1 Aspect Lichid limpede Lichid Lichid vascos Lichid limpede Lichid limpede limpede Culoare Brun Violet nchis Portocaliu Brun verzui Brun verzui Gust Uor amar Uor Foarte dulce Uor amar Uor amar astringent Miros Aromat, Far Aromat Aromat Aromat caracteristic caracteristic caracteristic Densitate 0,9246 0,9764 1,1908 0,9442 0,9296 Reziduu uscat 12,30% 7,00% 83,57% 5,52% 8,71% Coninut n 45% 25% 54% 52% alcool Coninut n 64% zahr Coninut n 14,28 mg/100 1,20 mg/100 flavone g g Coninut n 50mg/100 ml antociani Coninut n 115 mg% 73 mg% polifenoli de tip ac.cafeic Coninut n 0,85% 1,20% polizaharide

n ceea ce privete fructele proaspete de ctin, deoarece extractele alcoolice au un randament sczut de extracie a principiilor activi i o mare selectivitate (nu extrag tot complexul de vitamine), iar fructele pierd un procent ridicat de vitamine prin procesul uscrii artificiale, devin brune i cleioase, dificil de prelucrat, iar extractele apoase la cald sunt ineficiente i greu de conservat, s-a realizat un Concluzii 1. Au fost obinute i caracterizate fizicochimic 4 extracte i un sirop din 5

sirop din fructele proaspete, cu o concentraie n flavonoide de 1,20 mg/100 g. Din analiza extractelor provenite de la cele dou specii de Echinacea, se poate constata c extractul din E. pallida are un coninut mai sczut de polifenoli (73 mg%) dect cel de E. purpurea, dar are un coninut mai ridicat (1,20%) de polizaharide imunomodulatoare. produse economic. vegetale n vederea

experimentrii pe animale de interes

43

2. Fiecare extract este caracterizat prin coninutul n principii active (flavonoide, antociani, polifenoli de tip acid cafeic, pozizaharide). 3. Standardizarea tehnologiilor de obinere a principiilor activi i coninutul Bibliografie 1. 2. ***Farmacopeea Romn, ed X, Ed. Medical, Bucureti, 1993. Bauer, R., H. Wagner, (1990) 9. Echinacea-Handbuch fur Arzt, Wiss Verl., Stuttgart. 3. Bauer, R., H. Wagner, as (1991) Echinacea and species potential Research 8.

principii

activi aciunii

asigur acestor

reproductibilitatea forme farmaceutice.

Istudor

Viorica

Farmacognozie, vol.I, Ed.

fitochimie,

fitoterapie,

Medicala, Bucuresti, 1998. Markakis, P., (1982) Anthocyanins as food colors, Academy Press, New York, 182-208. 10. Morar, R., Dana Pusta Diabetulalternative fitoterapeutice, Ed. Tedesco, Cluj-Napoca, 2004. 11. Muntean, L., M. Tma, (1998) Specii de Echinacea de perspectiva n Romania, Herba Romanica, 9, 79-85. 12. Muntean, L.S. - Tratat de plante medicinale cultivate i spontane, Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, 2007. 13. Tma, M. Botanic Farmaceutic, vol. III, Ed. Med. Univ. Iuliu Haieganu, Cluj-Napoca, 1999. 14. Tma, M., I. Cpuan, L. Constanea, R. Orasan V. cu Filipa, al (1989) Tratamentul herpetice local maladiilor Clujul

immunostimulatory drugs. In Economic Medicinal Plants (Wagner H., Farnsworth N.R Eds.), Acad. Press, 253-321. 4. Bojan, A., L. Petrov, I.D. Postescu, M. Tma, (2000) - Tratamentul adjuvant n perioada postchimioterapie la pancitopeniei bolnavii cu

limfoame maligne i mielom multiplu, Rev. Rom. De Oncol., 37(1), 45-51. 5. Grigorescu, E., (1964) Rspndirea i dinamica acumulrii izorhamnetolului i a flavonozidelor n Hippophae rhamnoides, Farmacia, 15 (3), 149154. 6. Grigorescu, E., M. Lazr, Ursula Stnescu, I. Ciulei - Index fitoterapeutic, Ed. Cantes, Iasi, 334-337, 2001. 7. Ionescu-Stoian, P., E. Savopol Extracte farmaceutice vegetale, Ed. Medical, Bucureti, 1976.

Novastim,

Medical, 62(1), 259-262. 15. Tma, M., V. Hodian, (1984) Actualiti n fitoterapie: Echinacea, Practica farmaceutica, 31:41. 16. Tma, M., M. Roca, L. Pop, P. Pcurar, (1991) - Izolarea i analiza polizaharidelor imunomodulatoare din

44

Echinacea angustifolia (DC) Much., St. cerc. Biochim, 34 (1-2), 49-52. 17. Tma, M., M. Roca, D. Trnoveanu, A. Meter, (1997) Repartizarea principiilor active n inflorescentele de Calendula officinalis, Clujul Medical, 70(1), 73-77. 18. Varban, I., (2001) Cercetari privind biologia si tehnologia de cultivare a unor specii de Echinacea, Teza de Doctorat, USAMV Cluj-Napoca.

19. Wagner, H., A.Proksch, I. Riess Maurer, A. Volmar, (1985) - Immunostimulieed wirkende polysaccharide (heteroglycane) aus hoheren Pflanzen, Arnzeim. Forsch., 35, 1069-75. 20. Weissr, F., V. Fintelmann, (2000) Herbal Medicine IInd ed. Ed. G. Thieme, Stuttgart-New York. 21. Wichtl, M., N.G. Bisset, (1994) Herbal Drugs and Phytopharmacology, MedPharm. Sci.Publ., Stuttgart.

45

CERCETRI FARMACOLOGICE ASUPRA ACIUNII DIURETICE, SALURETICE I URICOZURICE A UNOR EXTRACTE DIN SPECII ALE GENULUI EPILOBIUM (ONAGRACEAE) PHARMACOLOGICAL RESEARCHES ON DIURETIC, SALURETIC AND URICOSURIC ACTIVITY OF EXTRACTS FROM VARIOUS SPECIES OF EPILOBIUM (ONAGRACEAE)
Votinaru*O., *Cristina Mogoan, *Steliana Ghibu, Tma**M. *Catedra de Farmacologie, Facultatea de Farmacie, U.M.F. Iuliu Haieganu Cluj-Napoca **Catedra de Botanic Farmaceutic, Facultatea de Farmacie, U.M.F. Iuliu Haieganu Cluj-Napoca mtbotanica@yahoo.com

Cuvinte cheie : diuretic, saluretic, Epilobium hirsutum, Chamaerion angustifolium, Epilobium parviflorum, Epilobium montanum. Key words: diuretic, saluretic, Epilobium hirsutum, Chamaerion angustifolium, Epilobium parviflorum, Epilobium montanum.

Abstract Although several Epilobium species are widely used in traditional medicine for various diseases of lower urinary tract, no thorough investigation of their pharmacologic properties was performed till now in Romania. In this context, we have chosen four species from Epilobium Chamaerion genus (Epilobium hirsutum, Epilobium angustifolium,

Introducere Speciile de Epilobium sunt utilizate n medicina popular ca remedii pentru hiperplazia benign de prostat i alte afeciuni urinare, datorit proprietilor lor diuretice i antiinflamatoare [2, 5, 7, 8]. Pn n prezent ns nu s-au efectuat la noi n ar studii comparative farmacologice sau propus fitochimice testarea n vederea a stabilirii aciunii proprietilor lor. n acest context ne-am comparativ diuretice, saluretice i uricozurice a 4 specii din

parviflorum, Epilobium montanum) in order to test their diuretic, saluretic and uricosuric effects.

46

genul

Epilobium:

Epilobium

hirsutum, Epilobium

calculat indicele diuretic (I.D.) ca un raport ntre diureza animalelor tratate i diureza animalelor martor. S-a determinat concentraia ionilor de sodiu i potasiu din urina loturilor tratate printro metod poteniometric, cu un autoanalizor VITROS 250 Chemistry System (Johnson and Johnson Clinical Diagnostic), i s-a exprimat n mmol/kgcorp/24h. S-a raport calculat ntre s-a indicele

Chamaerion

angustifolium,

parviflorum, Epilobium montanum. Plantele au fost recoltate din zona Transilvaniei, partea aerian (herba) fiind utilizat la prepararea unor extracte hidroalcoolice obinute prin tehnica percolrii cu agitare mecanic. Material i metod Aciunea diuretic, saluretic i uricozuric a unor extracte vegetale obinute din 4 specii de Epilobium s-a testat pe obolani albi Wistar-Bratislava (masculi) cu greutatea medie de 150g, utiliznd tehnicile citate n literatur [1, 3, 4, 6]. Animalele au fost repartizate n loturi de cte 5 n aparate de diurez, model Modi. Aportul de hran i ap a fost suprimat cu 24 ore nainte de nceperea experimentului. Dup 24 de ore, fiecrui animal i s-a administrat prin gavaj pentru hidratare 2,5 ml/100g ser fiziologic la 37 C, iar apoi dup o or li s-au administrat prin gavaj urmtoarele substane, dup cum urmeaz: lotul I (martor) ap distilat 1ml/100g; lotul II (control) 10 mg/kgcorp furosemid; lotul III 1 ml/100g extract alcoolic 1,4% Epilobium hirsutum; lotul IV 1 ml/100g extract alcoolic 1,4% Chamaerion angustifolium; lotul V 1 ml/100g extract alcoholic 1,4% Epilobium parviflorum; lotul VI 1 ml/100 g extract alcoolic 1,4% Epilobium montanum. Urina animalelor a fost recoltat dup 24 ore din fiecare aparat de diurez, volumul obinut exprimndu-se n ml/kgcorp/24 ore. S-a
0

saluretic pentru ionul de sodiu, respectiv potasiu, martor. ca De un concentraia determinat acestora la loturile tratate, comparativ cu lotul asemenea, concentraia n acid uric (n mg/kgcorp/24 ore) printr-o metod colorimetric, la =670, n urma unei reacii enzimatice ce transform acidul uric ntr-un compus colorat, utiliznd aparatul mai sus menionat. Rezultate n ceea ce privete aciunea diuretic, animalele tratate cu furosemid (lotul II), excret un volum de urin de 44,254 ml/kgcorp/24h (ID=1,729), mult superior lotului martor care elimin 25,591 ml/kgcorp/24h. Dintre extractele vegetale din speciile de Epilobium, extractul din Epilobium hirsutum prezint cea mai intens aciune diuretic (38,637 ml/kgcorp/24h, cu ID=1,509), urmat de extractul din Chamaerion angustifolium (36,793 ml/kgcorp/24h, cu ID=1,437), respectiv de extractul din Epilobium parviflorum (36,450 ml/kgcorp/24h, cu ID=1,424) i de cel din Epilobium montanum (33,733 ml/kgcorp/24h, cu ID=1,318).

47

Animalele tratate cu furosemid excret o cantitate de ioni de sodiu de 8,138 mM/kgcorp/24h (INa=3,476), respectiv 4,459 mM/kgcorp/24h ioni de potasiu (IK=2,632). Lotul 6,367 tratat cu extract hidroalcoolic ioni de din sodiu Epilobium hirsutum excret o cantitate de mM/kgcorp/24h (INa=2,719), respectiv 2,980 mM/kgcorp/24h ioni de potasiu (IK=1,759), n timp ce lotul tratat cu extractul din Chamaerion angustifolium prezint valori de 4,161 mM/kgcorp/24h ioni de sodiu Lotul (INa=1,777), tratat cu respectiv din 2,826 Epilobium mM/kgcorp/24h ioni de potasiu (IK=1,668). extractul parviflorum elimin o cantitate de 5,451 mM/kgcorp/24h ioni de sodiu (INa=2,328) i 2,598 mM/kgcorp/24h ioni de potasiu

(IK=1,533) n timp ce lotul tratat cu extractul din Epilobium montanum elimin o cantitate de 3,997 mM/kgcorp/24h ioni de sodiu (INa=1,707) i 2,442 mM/kgcorp/24h ioni de potasiu (IK=1,441). n ceea ce privete efectul uricozuric, eliminarea urinar a acidului uric este cuprins ntre 6,228 mg/kgcorp/24h pentru lotul tratat cu extractul hidroalcoolic 1,4% din Epilobium hirsutum i 2,237 mg/kgcorp/24h pentru lotul tratat cu extractul hidroalcoolic din Chamaerion angustifolium. n toate cele patru cazuri, aciunea uricozuric este superioar lotului martor care elimin 1,653 mg/kgcorp/24h. Rezultatele obinute sunt prezentate n tabelele 1, 2 i 3. Interpretarea statistic a rezultatelor s-a realizat prin testul t Student.

Tabel 1: Aciunea diuretic a extractelor vegetale din specii de Epilobium: Tabel 1:Diuretic action of vegetal extracts from Epilobium species: Nr. lot I II III Doza

Tratament
Ap distilat Furosemid Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium hirsutum Extract hidroalcoolic 1,4% Chamaerion angustifolium Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium parviflorum Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium montanum 1 ml/100g 10 mg/kg 1 ml/100g

Diureza (ml/kgcorp/24h) Xes 25,5912,177 44,2541,591 p=0,023 38,6372,059 p=0,041 36,7932,106 p=0,043 36,4501,803 p=0,036 33,7331,378 p=0,048

Indice diuretic 1,729 1,509

IV

1 ml/100g

1,437

1 ml/100g

1,424

VI

1 ml/100g

1,318

semnificativ statistic (p<0,05)

48

Tabel 2: Aciunea saluretic a extractelor vegetale din specii de Epilobium: Tabel 2: Saluretic action of vegetal extracts from Epilobium species:

Nr. lot
I II III

Tratament

Salureza Na+ (mmoli/kg/24h) Xes

2,3410,561 8,1380,910 p=0,003 6,3670,472 p=0,017 4,1610,371 p=0,043 5,4510,965 p=0,022 3,9970,587 p=0,06

Indice saluretic Na+

3,476 2,719

Salureza K+ (mmoli/kg/24h) Xes

1,6940,114 4,4590,502 p=0,002 2,9800,506 p=0,021 2,8260,325 p=0,023 2,5980,824 p=0,039 2,4420,519 p=0,07

Indice saluretic K+
2,632 1,759

Ap distilat Furosemid Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium hirsutum Extract hidroalcoolic 1,4% Chamaerion angustifolium Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium parviflorum Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium montanum

IV

1,777

1,668

2,328

1,533

VI

1,707

1,441

semnificativ statistic(p<0,05) Tabel 3: Aciunea uricozuric a extractelor vegetale din specii de Epilobium: Tabel 3: Uricozuric action of vegetal extracts from Epilobium species: Tratament Eliminarea urinar a acidului uric (mg/kg/24h) Ap distilat 1,6530,135 Furosemid 2,2870,572 p=0,12 Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium 6,2281,014 hirsutum p=0,012 Extract hidroalcoolic 1,4% Chamaerion 2,2370,292 angustifolium p=0,23 Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium 4,9750,682 parviflorum p=0,042 Extract hidroalcoolic 1,4% Epilobium 3,9970,946 montanum p=0,05

Nr. lot I II III IV V VI

Discuii Toate extractele vegetale luate n studiu au produs o diurez superioar lotului martor

(tabel 1), dar inferioar furosemidului, efectul maxim aprnd la lotul tratat cu extract hidroalcoolic 1,4% din Epilobium hirsutum (I.D.=1,509).

49

Actiunea diuretica a unor extracte din specii de Epilobium

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 Diureza (ml/kg/24h)
Extract Epilobium hirs utum Extract Chamaerion angustifolium Extract Epilobium parviflorum Extract Epilobium montanum F urosemid Martor

Fig. nr.1 : Aciunea diuretic a unor extractelor vegetate testate Fig. nr. 1 : Diuretic action of tested vegetal extracts

Sub aspectul aciunii saluretice (tabel 2), extractele vegetale obinute din cele 4 specii de Epilobium au prezentat o excreie urinar crescut a ionilor Na
+

saluretici cuprini ntre 1,707-2,719, precum i o eliminare crescut a ionului K+, indicii saluretici ai acestui ion fiind cuprini ntre 1,441-1,759.

prezentnd

indici

Actiunea saluretica a extractelor din specii de Epilobium 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 1 Salureza Na (mmoli/kg/24h)

Martor Furosemid Extract Epilobium hirsutum Extract Chamaerion angustifolium Extract Epilobium parviflorum Extract Epilobium mon tanum

Fig.nr.2: Salureza Na produs de extractele vegetale testate Fig.no. 2: Na salures produced by tested vegetal extracts

50

Actiunea saluretica a extractelor din specii de Epilobium 6 5 4 3 2 1 0 1 Salureza K (mmoli/kg/24h)

Ma rtor Fu rosemid Extract Epilobium hirsutum Extract Chamaerion an gustifolium Extract Epilobium parviflorum Extract Epilobium montanum

Fig.nr.3: Salureza K produs de extractele vegetale testate Fig no.3: K salures produced by tested vegetal extracts

Cel mai intens efect saluretic a fost produs de extractul hidroalcoolic 1,4% din Epilobium hirsutum. n ceea ce privete eliminarea acidului uric (tabel 3), loturile tratate cu extractele din Epilobium hirsutum, Epilobium parviflorum i Epilobium montanum au prezentat efecte uricozurice semnificative statistic. Concluzii 1. S-a testat aciunea diuretic, saluretic i uricozuric a genului unor extracte Epilobium: hidroalcoolice din 4 specii vegetale aparinand Bibliografie 1. Beaux, D., J. Fleurentin , F. Mortier, (1999) Effect of extracts of 3. Ortosiphon stamineus, Hieracium

Epilobium

hirsutum,

Chamaerion

angustifolium, Epilobium parviflorum, Epilobium montanum. 2. Toate extractele vegetale luate n studiu au produs efecte diuretice i saluretice superioare lotului martor dar inferioare furosemid. 3. De asemenea extractele din Epilobium hirsutum, Epilobium efecte statistic. fitochimie i fitoterapie, Ed. Medical, Bucureti, 646-647. Dirks, and 4. J.H., clinical A.L. use, Sutton W.B. (1986) Diuretics physiology, pharmacology Saunders, Epilobium montanum uricozurice parviflorum au i prezentat lotului control tratat cu

semnificative

pilosella, Sambucus nigra and A. Uvaursi in rats, Phytother. Res., 13(3):222225. 2. Ciulei, I., E. Grigorescu, Ursula Stnescu (1993) - Plante medicinale,

Philadelphia, 135-148. Schwab, T.R., F.G. Knox (1991) Laboratory experience for understanding the physiological basis

51

of diuretic therapy, Advan. Physiol. Ed., 5:10-13. 5. Tma, M. (1997) Plante medicinale i preparate fitoterapeutice utilizate n afeciuni 6. ale prostatei, Acta Phytotherapica Romanica, 2, 12-15. Walker, R.L., M.E. Olson (1995) Renal function in the laboratory rat, Advan. Physiol. Ed., 13(1):49-55.

7.

Weiss, R.F., V. Fintelmann (2000) Herbal Medicine, Thieme Verlag, Stuttgart, 238-239.

8.

Wichtl, M. (1994) Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals, Medpharm Sci. Publ., Stuttgart, 185-187.

52

CERCETRI ELECTRONOMICROSCOPICE ASUPRA TIMUSULUI, SPLINEI, SUPRARENALELOR I FICATULUI PUILOR DE GIN TRATAI CU EXTRACTE VEGETALE DE CALENDULA OFFICINALIS I ECHINACEA ANGUSTIFOLIA ELECTRONOMICROSCOPIC RESEARCH ON THYMUS, SPLEEN, ADRENALS AND LIVER IN CHICKENS TREATED WITH EXTRACTS OF CALENDULA OFFICINALIS AND ECHINACEA ANGUSTIFOLIA
Crciun, C., Spnu, M., Mihali, C., Barbu-Tudoran, L. UNIVERSITATEA BABES-BOLYAI ; UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN ccraciun@hd.ubbcluj.ro Cuvinte cheie: timus, splina, glande suprarenale, ficat, extracte vegetale, ultrastructura. Key Words: thymus, spleen, adrenal glands, liver, vegetal extracts, ultrastructure VETERINAR, CLUJ-NAPOCA

Abstract The researches were carried out to establish the immune stimulating influence of alcoholic extracts from Calendula officinalis and Echinacea angustifolia on chickens immune organs. The experiment was carried out on 28 Rock x Cornish chickens, divided into four equal groups (n=7), subjected each, for seven days (days 0 to 7), to a differentiated oral treatment, using the same pattern (0.5 ml/bird/day): group I saline treated, envinronmental control; group II 70% etilic alcohol, solvent control; group III alcoholic Calendula officinalis extraction; group IV alcoholic Echinacea angustifolia extraction. Samples from thymus, spleen, adrenal glands and liver, were processed for ultrastructural studies after 7 days of experiment.

The results in the alcohol treated group, compared with environmental control group, indicated alterations in all studied organs. Thus, in thymus, decrease of the thymocytes number, irregular outline of nuclei, and increase of the intracellular spaces were present. Fragmentation of some lymphocytes and accumulation of amorphous material in edematous spaces were observed in the spleen. The adrenal glands showed irregular shaped cells and altered steroid component of CSH at the fasciculate zone. Hepatocytes were filled with lipids, the nuclei having irregular outlines, while RER was proliferated. Similarly, an increased amount of collagen fibrils were observed in the Disse space. The alcoholic extraction treatment showed a protective effect in all organs against alterations induced by
53

alcohol. No side effects were noticed for any of the extractions. The images from thymus, spleen, adrenal glands and liver of the alcoholic extractions treated birds show an ultrastructure similar to the environment control group. It was concluded that both vegetal extractions, fed to chickens under the experimental conditions, showed beneficial effects at cellular and sub-cellular levels in all studied organs, with a slightly better effect of Calendula officinalis extractions. Therefore, we considered that both extractions could be used as immune adjuvants in birds. Introducere n ultimul timp o serie de produse naturale obinute din diferite plante medicinale tradiionale, au fost tot mai mult investigate din punct de vedere chimic i biologic, pentru efectele lor de stimulare a unor funcii ale organismului uman. n acest sens, o categorie aparte de astfel de extracte obinute din plante medicinale, ocup cele cu caliti i imunostimulatoare, imunomodulatoare

originare din America de Nord, au fost cunoscute i utilizate de diverse triburi de ameridieni ca plante medicinale n tratamentul febrei, gripei, rnilor, nepturilor de insecte, mucturilor de arpe, etc. Ca urmare a unor cercetri fitochimice i farmacologice efectuate n ultimele 3 decenii, acestor plante li s-au confirmat proprietile lor imunomodulatoare, n prezent fiind introduse n cultura multor ri europene, prin realizarea unor extracte i preparate farmaceutice. Toate aceste extracte au la baz ca i componente active, n principal polizaharide cu greutate molecular mare [22, 25], dar i fraciuni lipofilice (poliacetilene, alchilamide, uleiuri volatile, etc), care se gsesc n proporii diferite n prile anatomice ale speciilor de Echinacea [3, 13]. Farmacologia speciilor de Echinacea indic o stimulare imunitar prin intermediul leucocitelor PMN, limfocitelor, complementului acestor si macrofagelor, conferind plante

medicinale proprieti antiinflamatoare [23, 24], imunostimulatoare [4 - 8; 16 18; 20, 21; 25, 26], antitumorale [15] i hepatoprotectoare [1, 2, 9, 11, 12]. Scopul cercetrilor noastre experimentale a fost de a investiga efectele administrrii a dou extracte i alcoolice Calendula de Echinacea ca angustifolia organelor alcool. Material si metod Experimentele s-au efectuat pe 28 pui de gin din rasa Rock x Cornish n vrst de 4 officinalis,

antiinflamatoare i care n medicina tradiional a unor ri (India, China, Japonia) reprezint concepte de baz n tehnicile i metodologiile terapeutice ale unor boli. Multe plante tradiionale au fost utilizate din cele mai vechi timpuri pentru aciunile lor antialergice i antiinflamatoare, dar, din cele peste 300.000 de plante cunoscute, numai foarte puine au lor fost investigate pentru iar propietile imunostimulatoare,

poteniali ageni imunostimulatori ai funciilor sistemului endocrino-limfatic, dereglate experimental prin administrare de

mecanismele de aciune ale compuilor izolai, din pcate, nu sunt nici pe departe studiate i elucidate. Astfel, speciile din genul Echinacea,

54

6 sptmni, fiind mprii n 4 loturi, cte 7 pui in fiecare lot. Experimentul s-a desfurat pe o perioad de 7 zile, fiecrui pui fiindu-i administrat zilnic, peroral, cantitatea de 0,5 ml, astfel: lotul nr. 1, martor, ser fiziologic; lotul nr. 2, control, alcool etilic 70% in ap distilat; lotul nr. 3, tratat cu extract alcoolic de Calendula officinalis; lotul nr. 4, tratat cu extract alcoolic de Echinacea angustifolia. Extractele vegetale standardizate, au fost realizate n laboratorul de biochimie al Facultii de Farmacie din Cluj-Napoca. Dup o perioad de 7 zile de tratament, animalele au fost sacrificate i s-au prelevat probe de esut din urmtoarele organe: timus, splin, suprarenale i ficat. Aceste probe au fost prefixate ntr-o soluie de glutaraldehid 2,7% n tampon fosfat 0,1M, splate cu tampon fosfat n 4 bi succesive, cte o or n fiecare baie, postfixate ntr-o soluie de acid osmic 2% n tampon fosfat 0,15M, deshidratate n bi de aceton de concentraii succesiv cresctoare, infiltrate i incluse n rin epoxidic Epon 812, n conformitate cu metodologiile curent utilizate pentru studii de microscopie electronic de transmisie [10, 14, 19]. Seciunile ultrafine au fost obinute la un ultramicrotom de tip Leica UC 6, fiind apoi dublu contrastate cu acetat de uranil i citrat de plumb, iar n final au fost examinate la un microscop electronic de transmisie de tip Jeol JEM 1010.

Rezultate si discuii Investigaii asupra timusului. Timusul este un organ limfoid, de origine epitelial, infiltrat cu limfocite i celule mezenchimale. El ndeplinete un rol esenial n dezvoltarea aparatului imun, dar i n dobndirea i ntreinerea imunitii organismului prin formarea, diferenierea i maturarea limfocitelor T la acest nivel. Cu toate c producerea limfocitelor T este specific i zonelor periferice ale nodulilor splenici sau din alte organe limfopoietice, timusul reprezint principala surs pentru acest tip de celule, fiind deci principalul organ responsabil pentru aprarea organismului. Scopul prezentului studiu a fost punerea n eviden, la nivelul ultrastructurii timusului puilor de gin, a influenei tratamentului cu dou extracte vegetale (Calendula i Echinacea) comparativ cu timusul normal, netratat i cu cel provenit de la pui crora li s-a administrat alcool. Lotul martor (Fig. 1): La acest lot se remarca faptul c timocitele prezente n zona cortical sunt numeroase i dens mpachetate, cunoscut fiind faptul c aproximativ 90% dintre timocite sunt localizate n cortical. n funcie de stadiile lor de dezvoltare i de dimensiunile lor, ele pot fi mari, medii i mici. Cele mari au aspect de limfoblaste, fiind cele mai tinere, localizate spre periferia lobulilor timici. De asemenea, caracteristic pentru timocitele acestui lot, este faptul c nucleii sunt mari, ei ocupnd marea majoritate a volumului fiecarei celule, n timp ce citoplasma este reprezentat de o band relativ ngust dispus circular periferic n jurul nucleului. n

55

citoplasm se gsesc numeroi ribosomi, adesea asociai n polisomi, relativ puine mitocondrii, un complex Golgi, un centriol i cteva scurte profile de reticul endoplasmic granular. Printre timocite se mai gsesc celule epitelio-reticulare care, prin prelungirile lor, formeaz reeaua reticular n care sunt dispuse timocitele. Se gsesc, de asemenea, macrofage, de regul foarte active pentru captarea i distrugerea timocitelor mbtrnite sau moarte. Sunt semnalate relativ numeroase timocite aflate n diviziune. Lotul netratate, spaiilor populaiei tratat cu alcool c (Fig. 2): Comparativ cu timusul provenit de la animale constatm intercelulare de timocite. alcoolul induce i, o modificri alterative, evideniate prin creterea dintre De timocite asemenea, respectiv, o rarefiere, o scdere a numrului alterare a formei nucleilor timocitelor, care nu mai sunt sferici ci au conturul i forma neregulat. Timocitele aflate n diviziune sunt rare, ceea ce nseamn c alcoolul influeneaz negativ acest proces. Lotul tratat cu extract de Calendula (Fig. 3): Imaginile obinute din timusul acestui lot prezint o situaie foarte asemntoare cu cea descris pentru timusul martor. n corticala timusului se observ numeroase timocite normal conformate i dens mpachetate. Comparativ cu lotul martor, se remarc o

prezen mai mare a numrului de timocite aflate n diviziune, ceea ce indic o stimulare a acestui proces, respectiv o cretere a capacitii de producere de noi generaii de timocite. De asemenea, citoplasma timocitelor este electrondens deoarece sunt prezeni numeroi ribosomi asociai n polisomi, sugernd o intensificare a sintezei de proteine. Aspectele descrise mai sus indic faptul c extractul de Calendula a indus un efect benefic, de stimulare a activitii metabolice specifice la nivelul timusului. Lotul tratat cu extract de Echinacea (Fig. 4): Analiza ultrastructural a timusului puilor de gin provenii din acest lot ne indic o situaie apropiat de cea a timusului prezentat anterior, n sensul c aspectele ultrastructurale sunt normale sau uor stimulate fa de martor. Nu sunt indicii c extractul de Echinacea ar produce alterri. Din contr, se remarc o stimulare a procesului de proliferare celular la nivelul corticalei lobulilor timici, fiind prezente i la acest lot timocite aflate n diviziune, dar de o intensitate puin mai mic dect la lotul tratat cu extract de Calendula.

56

Fig. 1. Timus gin - Lot martor Fig. 1 - Hen thymus Witness batch

Fig. 2. Timus gin - Lot tratat cu alcool Fig. 2 - Hen thymus Alchool treated batch

Fig. 3. Timus gin - Lot tratat cu extract de Calendula Fig. 3 - Hen thymus Calendula treated batch

Fig. 4. Timus gin - Lot tratat cu extract de Echinacea Fig. 3 - Hen thymus Echinacea treated batch

Fig. 5. Splin gin - Lot martor Fig. 6. Splin gin - Lot tratat cu alcool Fig.5 Hen spleen - Witness batch Fig.6 Hen spleen Alchool treated batch (A se vedea n text explicaii detaliate ale figurilor)

Investigaii asupra splinei Lotul martor (Fig. 5): Pulpa alb este normal populat cu limfocite de dimensiuni

variate, dispuse la nivelul tecilor limfoide periarteriale i al foliculilor limfatici splenici.

57

Zona tecilor limfoide periarteriale prezint o populaie limfocitar normal, dispus n jurul arteriolelor, cu numeroase limfocite mici i medii, cu citoplasma electrondens datorit prezenei numeroilor ribosomi. Celelalte organite celulare, cu excepia mitocondriilor, sunt puine i greu de identificat. Sunt prezente i limfocite aflate n diviziune, cunoscut fiind faptul c la nivelul pulpei albe au loc intense procese de proliferare. Printre limfocite sunt prezente, ca i n cazul timusului, celule epiteliale reticulare, macrofage i plasmocite. Pulpa roie prezint numeroase sinusuri venoase normal structurate i spaii interstiiale populate cu eritrocite, dar i cu relativ puine macrofage, monocite, limfocite i plasmocite migrate aici. Lotul tratat cu alcool (Fig. 6) Investigaiile ultrastructurale indic o dilatare a spaiilor intercelulare, cu pierderea coeziunii dintre celule, ceea ce permite n unele cazuri o infiltrare cu eritrocite. Apare i un fenomen de pediculare i fragmentare a citoplasmei limfocitelor, cu acumulare de material amorf n spaiile edemaiate. Att n pulpa alb ct i n pulpa roie se remarc celule cu citoplasma mpuinat i srac n organite celulare, ceea ce sugereaz o diminuare cert a activitilor metabolice a acestui organ sub influena alcoolului. a

Loturile tratate cu extract de Calendula i extract de Echinacea (Fig. 7 i 8) La ambele loturi se remarc aspecte similare de hipertrofie i hiperplazie a pulpei albe. Astfel, n toate imaginile obinute apare pregnant creterea densitii celulare pe seama populaiei limfocitare, comparativ cu martorul, ceva mai intens n cazul tratamentului cu extract de Calendula. Este de remarcat prezena predominant limfocitelor tinere, cu nuclei mari, eucromatici, nucleoli proemineni i citoplasm bogat n organite celulare. Dei este greu de apreciat cantitativ raportul dintre limfocitele T i B aflat sub influena celor dou extracte vegetale, se pare c acest raport este in favoarea limfocitelor aparinnd liniei celulare B. Ambele extracte se pare c exercit o aciune stromei, stimulatoare concretizat i asupra celulelor i prin hiperplazia

hipertrofia celulelor reticulare, a fiboblastelor i macrofagelor splenice.

58

Fig. 7. Splin gin - Lot tratat cu extract de Calendula Fig. 7 Hen spleen Calendula treated batch

Fig. 8. Splin gin - Lot tratat cu extract de Echinacea Fig. 8 Hen spleen Echinacea treated batch

Fig. 9. Suprarenale gin - Lot martor Fig. 9 Hen suprarenal - Witness batch

Fig. 10. Suprarenale gin - Lot tratat cu alcool Fig. 10 Hen suprarenal Alchool treated batch

Fig. 12. Suprarenale gin - Lot tratat cu extract de Fig. 11. Suprarenale gin - Lot tratat cu extract Echinacea de Calendula Fig. 12 Hen suprarenal Echinacea treated batch Fig. 11 Hen suprarenal Calendula treated batch (A se vedea n text explicaii detaliate ale figurilor)

Este de remarcat prezena predominant a limfocitelor tinere, cu nuclei mari, eucromatici, nucleoli proemineni i citoplasm bogat n organite celulare. Dei este greu de apreciat cantitativ raportul dintre limfocitele T i B aflat sub influena celor dou extracte vegetale, se pare

c acest raport este in favoarea limfocitelor aparinnd liniei celulare B. Ambele extracte se pare c exercit o aciune stromei, stimulatoare concretizat i asupra celulelor i prin hiperplazia

hipertrofia celulelor reticulare, a fiboblastelor i macrofagelor splenice.

59

Investigaii asupra suprarenalelor Lotul martor (Fig. 9) Corticosuprarenala prezint cele trei zone ale sale bine delimitate. Celulele zonei fasciculate sunt mari i poligonale, cu nuclei sferici i avnd 1-2 nucleoli. n citoplasm, n mod caracteristic se gsesc numeroase mitocondrii globulare i cu criste tubulare. Reticulul endoplasmic este bine dezvoltat, n special cel neted, datorit implicrii acestuia n sintezele steroidice. Lotul tratat cu alcool (Fig. 10) Imaginile obinute nu indic modificri alterative majore. Se remarc, totui, faptul c nucleii celulelor zonei fasciculate prezint un contur neregulat, iar componenta steroidic a hormonului este uor alterat, indicnd o scdere a activitii de sintez hormonal. Se observ, totui, c n unele spongiocite, mitocondriile prezint un polimorfism accentuat, o parte din ele avnd matricea alterat, mielinizat. De asemenea, apar proliferri de colagen n spaiile intercelulare. n zona reticulat se constat lipsa granulelor secretoare. Loturile tratate cu extract de Calendula i cu extract de Echinacea (Fig. 11 i 12) Aspectele ultrastructurale sunt foarte apropiate ntre ele, att la cele provenite de la cele dou loturi tratate cu extracte vegetale, ct i cu cele de la lotul martor. Se constat c ambele extracte induc o stimulare a activitii metabolice a celulelor zonei fasciculate, cu prezena de numeroase mitocondrii cu criste tubulare, precum i reticul endoplasmic bine reprezentat. Sunt prezeni numeroi ribosomi liberi n citoplasm, iar granulele hormonale au structur nealterat.

Din analiza datelor investigaiilor efectuate la cele dou loturi se poate aprecia faptul c ambele stimulator suprarenale. Investigatii asupra ficatului Lotul martor (Fig. 13) Hepatocitele au un nucleu sferic situat preponderent central, uneori doi nuclei, cariolimfa preponderent eucromatic, n care se gsesc 1-3 nucleoli. Adesea, nucleolii sunt n contact cu membrana nucleului, sugernd o intens activitate de interrelaie nucleu-citoplasm. n citoplasm sunt prezente relativ numeroase mitocondrii normal structurate. Reticulul endoplasmic granular este predominant i se afl n pachete de profile nguste dispuse paralel, ct i n profile dispuse n jurul mitocondriilor. Prezena reticulului granular i a numeroilor ribosomi indic o bogat activitate de sintez proteic. Reticulul endoplasmic neted este discret reprezentat prin mici vezicule rspndite n citoplasm sau concentrate n zonele de aglomerare a particulelor de glicogen. Aparatul Golgi, prezent prin puine complexe Golgi, apare mai evident n jurul canaliculalor biliare. Particulele de glicogen, cel mai adesea, se asociaz n rozete dispuse fie printre organitele celulare, fie constituind plaje de glicogen de diferite dimensiuni. Picturile lipidice sunt puine i mici, ele fiind stocate la nivelul celulelor Ito depozitare de lipide i 6aflate la confluena dintre 2+3 hepatocite, la polul vascular al acestora. Lotul tratat cu alcool (Fig. 14) Se remarc faptul c alcoolul a indus o dereglare extracte vegetale au un efect asupra activitii glandelor

60

metabolismului

lipidic,

manifestat

prin

vegetale ne indic comparativ cu martorul o activitate mai intens a hepatocitelor, ceva mai bun n cazul extractului de Calendula, probabil i din cauza coninutului su n acid oleanolic. Mitocondriile prezint un aspect normal. Nucleolii hepatocitelor sunt uor dilatai i alipii de anvelopa nuclear, sugernd o intens activitate de sintez i transfer de ARNr din nucleu n citoplasm, aa cum au sugerat mai muli autori, care au raportat c n urma stimulrii activitii fiziologice a organismului are loc o cretere a sintezei de ARNr i un intens proces de transfer nucleucitoplasm. Reticulul endoplasmic granular este bogat reprezentat prin profile nguste avnd numeroi ribosomi ataai, semnificnd o intens activitate de sintez proteic. n cazul ambelor loturi tratate cu cele dou feluri de extracte vegetale nu se constat prezena picturilor lipidice n citoplasm, dect sub form de microparticule dispuse la polul vascular, n apropierea celulelor Ito. Acest lucru denot faptul c sinteza i transportul lipidelor se desfoar normal, lipidele fiind acumulate doar la nivelul celulelor Ito.

blocarea tranzitului acestora ctre celulele depozitare Ito i acumularea lor n citoplasma hapatocitelor. n acelai timp, lipidele lipsesc din celulele depozitare de lipide. De asemenea, nucleii prezint un contur neregulat i sufer un proces de hipertrofiere. n matricea citoplasmatic se gsesc mai puini ribosomi i mai puin reticul endoplasmic granular, ceea ce semnific o scdere a sintezelor proteice. n schimb, reticulul endoplasmic neted prolifereaz sub forma a numeroase vezicule dispuse n toat masa citoplasmei, activitate semnificnd de detoxifiere reacia din acestui partea organit n cazurile n care se impune o hepatocitelor, ca o reacie de aprare contra aciunii nocive a alcoolului. n spaiile Disse se observ i o uoar acumulare de fascicule de colagen. Apar i mici focare hemoragice, ceea ce demonstreaz faptul c alcoolul acioneaz brutal asupra vaselor ficatului de pasre, demonstrnd sensibilitatea fa de acest agent nociv. Loturile tratate cu extract de Calendula i cu extract de Echinacea (Fig. 15 i 16) Analiza ultrastructural a imaginilor provenite de la loturile tratate cu cele dou extracte

61

Fig. 13. Ficat gin - Lot martor Fig. 13 Hen liver - Witness batch

Fig. 14. Ficat gin - Lot tratat cu alcool Fig. 14 Hen liver Alchool treated batch

Fig. 16. Ficat gin - Lot tratat cu extract de Fig. 15. Ficat gin - Lot tratat cu extract de Echinacea Calendula Fig. 14 Hen liver Echinacea treated batch Fig. 15 Hen liver Calendula treated batch (A se vedea n text explicaii detaliate ale figurilor)

Concluzii 1. Rezultatele demonstreaz gin, n cercetrilor faptul c noastre ambele 2.

celular i subcelular asupra celor 4 organe studiate. Un efect mai bun s-a remarcat n cazul extractului de Calendula officinalis. 3. Considerm, ns, c ambele extracte vegetale pot fi utilizate ca imunoadjuvani la gini.

extracte vegetale administrate puilor de condiiile experimentelor noastre, au efecte benefice la nivel

Bibliografie 1. Ardelean, A., V. Miclu, A. Hermenean, C. Crciun, M. Bora, A. Dru, (2002) Testarea efectului protector al unor extracte rinichiului vegetale de asupra n structurii urma obolan 2.

Societii

Naionale

de

Biologie

Celular, Vol. VII, Nr. 1, Cap. III, 278286, Ed. Risoprint Cluj-Napoca. Ardelean, A., A. Hermenean, C Craciun., G.C Pribac, (2004) - Studii structurale i ultrastructurale la nivelul timusului sobolanilor Wistar tratati cu

tratamentului cu cisplatin. n: Analele

62

extracte de Echinacea . In Analele SNBC, Vol.IX, 1, Cap. 2, 193 201. 3. Bauer, R., H. Wagner, - Echinacea Handbuch, Wissnschftliche verlagsgesellschaft mbh Stuttgart, 1990. 4. Bauer, R., H. Wagner as (1991) Echinacea species potential

Cercetri histologice, histoenzimatice, histochimice i electronomicroscopice privind influena unui extract bioactiv de Berberis vulgaris asupra ficatului i rinichiului obolanilor intoxicai cu CCl4. n: Analele Societii Naionale de Biologie Celular, Vol. VIII, Cap. II, 131158, Ed. Risoprint Cluj-Napoca. 10. Hayat, M.A., - Principles and techniques electron microscopy. Biological Appl. Fourth Ed., Cambridge Univ. Press, 2000. 11. Hermenean, Testarea A., A. Ardelean, a C. Craciun, M. Borsa, V. Miclaus, (2002) comparative efectului imunomodulator a doua extracte de Echinacea in terapia cu ciclofosfamida la sobolani. In: Analele SNBC, vol. VII, (1), cap. III, 291-299. 12. Hermenean, A., A. Ardelean, C. Craciun, V. Miclaus, , M. Tamas, (2003) - Efectele administrarii extractelor de Echinacea ultrastructurii Wistar, asupra timusului consecutive structurii terapiei si cu sobolanilor

immunostimulatory drugs, Econ. Med. Res., 5, 253-321. 5. Bauer, V.R., K. Jurcic, J. Puhlmann, H. Wagner (1988) - Immunologie in vivo and in vitro studies on Echinacea extracts (Published in German). In : Arzeimittelforschung, 38 (2), 276-281. 6. Bauer, R., P. Remiger, H. Wagner (1989) Alkamides from the roots of Echinacea angustifolia, Phytochemistry, 28 (2), 505-508. 7. Bukovski, M., D. Kostalova, R. Magnusova, S. Vaverkova (1993) Testing for immunomodulating effects of ethanol-water extracts of the aboveground parts of the plants Echinacea (Moench) and Rudbeckia L. (Published in Slovak), In : Cesk. Farm., 42 (5) 228231. 8. Bukovski, activity of M., D. Kostalova, gloriosa DC S. L., and Vaverkova (1995) - Immunomodulating Echinacea angustifolia speciosa Echinacea Rudbeckia

ciclofosfamida. Analele SNBC, vol VIII, cap II, 190-199. 13. Hobbs, C., - Echinacea The immune herb, Botanica Press, Second ed., 1994. 14. Kay, D., - Techniques for electrom microscopy, Second Ed., Blackwell Sci. Publ. Oxford, 1967. 15. Lersch, K., M. Zeuner, A. Bauer, M. Siemens, R. Hart, M. Drescher, U. Fink, H. Dancygier, M. Classen (1992) Nonspecific immunostimulation with low doses of cyclophosphamide extracts

Wenderoth

ethanol-water extracts (Published in Slovak), In : Pol. J. Pharmacol, 47 (2) 175-177. 9. Ciobanu, C., A. Ardelean, M.A. Rusu, C. Crciun, C. Puic, R. Silai, I. Roman, L. Barbu-Tudoran, M. Tma, (2003) -

63

(echinacin) in patiens with far advanced colorectal cancers: preliminary results, In: Cancer Invest., 10(5), 343-348. 16. Melchart, D., Linde K., F. Worku, R. Bauer, H. Wagner, (1994) Immunomodulation with Echinacea: A systematic revue of controlled clinical trials, Phytomedicine, 1, 245-254; 17. Melchart, D., K. Linde, F. Worku, L. Sarkady, M. Holzmann, K. Jurcic, H. Wagner (1995) Results on activity of five the of randomized studies

immunosuppressed systemic infections

mice with

against Candida

albicans and Listeria monocytogenes, In: Int. J. Immunopharmacol., 15(5), 605-614. 22. Tamas, M., M. Rosca, L. Pop, P. Pacurar (1991) - Izolarea si analiza polizaharidelor imunomodulatoare din Echinacea angustifolia DC, St. Cerc. Biochim., 34, 1-2, 49-52. 23. Tragni, E., C.L. Galli, A. Tubaro, P. Del Negro, R. Della Loggia (1988) - Antiinflamatory activity of Echinacea angustifolia fractions separated on the basis of molecular weight, Pharmacol. Res. Commun., 20 Suppl. 5, 87-90. 24. Tubaro, A. (1987) - Anti-inflamatory activity of a polysaccharide fraction of Echinacea angustifolia root, J. Pharm. Pharmacol., 39, 567-569. 25. Wagner, H., H. Stuppner, W. Schfer, M.A. Zenk (1988) - Immunologically active polysaccharides of Echinacea purpurea cell cultures. Phytochemistry, 27, 119-126. 26. Wagner, H., K. Jurcic (1991) of Immunologic studies plant

immunomodulatory

preparations of Echinacea, J. Altern. Complement. Med., Summer 1 (2), 145160; 18. Melchart, D., E. Malther, K Linde., R. Brandmayer, Echinacea infections: controlled 19. Ploaie,P., C. root a Lersch, extracts (1988) for the

prevention of upper respiratory tract double-blind, placeboArch. randomized trial,

Pharm. Med., Nov-Dec. 7(6), 541-545. Z. Petre - Introducerea in microscopia electronica cu aplicatii in biologia celulara si moleculara. Ed. Acad., Bucuresti, 1979. 20. Schumacher, A., K.D. Friedberg (1991) The effect of Echinacea angustifolia on non-specific cellular immunity in the mouse (Published in German), In: Arzneimittelforschung, 41(2), 141-147. 21. Steinmueller, C., J. Roesler, E. Grottrup, G. Franke, H. Wagner, M.L. LohmannMatthes (1993) Polyssacharides isolated from plant cell cultures of E. purpures enhance the resistance of

combination preparations. In vitro and in vivo studies on the stimulation of phagocytosis (Published in German), In: Arzneimittelforschung, 1076. 41(10), 1072-

64

Relatare de caz Case study ALARIA ALATA, UN PARAZIT PRACTIC NECUNOSCUT N ROMNIA ALARIA ALATA A PARASITE UNKNOWN IN ROMANIA
Rotaru Ovidiu Facultatea de Medicin Veterinar Cluj-Napoca, ovirot@yahoo.com Cuvinte cheie: Alaria alata, parazitoz, miozit Key words: Alaria alata, parasitosis, miositis

noastr Abstract The paper presents a case study involving Alaria Alata parasite found in 2 cases of pork meat during the trichineloscopy examination made by dr. Dnu H. during December 2008 and January 2009. Multe din informaiile pe care le oferim studenilor, viitori medici veterinari, sunt catalogate de ctre acetia ca inutile deoarece noi ca dascli facem greeala de a preciza c respectivul agent patogen ori respectiva boal nu ar exista n zona noastr de competen. Dac ar fi s respectm un mare adevr care domin medicina nu ar trebui s ne facem reprouri. Acest adevr sun cam aa: Nu sunt boli ci bolnavi i nu sunt boli n afara celor pe care eu le cunosc i vreau s in seama de ele. Dac prima parte de adevr pare s fie benefic, cea de a doua parte este periculoas deoarece ne adoarme vigilena fa de apariia n zona patogeni

de i

competen a unor

unor

ageni ca

boli

declarate

inexistente. Ceva similar cred c s-a ntmplat i se ntmpl i cu Alaria Alata, motiv ce m-a determinat s procedez la relatarea de caz ce urmeaz: Alaria Alata sau Distomum musculosum suis, cum mai este denumit, este un parazit din clasa Trematoda (rud cu Fasciola, Dicrocelium holostomidae, i ali familia distomi) ordinul Diplostomidae,

subfamilia Alarinae). Dei ciclul biologic i stadiile preimaginale sunt similare Trematodelor Diplostomide: ou, miracidiu, cercar, metacercar etc., unele etape ale ciclului sunt nc puin cunoscute i cercetate. Ca adult, Alaria Alata ar parazita tubul digestiv al formeaz beneficieze carnivorelor miracidiu. de domestice, trebuie care s elimin n mediu prin fecale, ou din care se Oule mediu umed pentru

65

dezvoltarea miracidiului care este preluat la rndul s u de ctre molute acvatice. Molutele infestate pot fi consumate de ctre amfibieni care sunt consumai la rndul lor de roztoare. Carnivorele domestice se contamineaz ciclul se nchide. Dac lucrurile ar sta n realitate aa, aceast parazitoz am putea spune c nu exist dar din pcate lucrurile stau altfel. n alte ri au fost semnalate infestaii cu mezo-metacercari de Alaria Alata n musculatura bovinelor. Speciile bovine, porcine, de animale menionate, pentru ciclul constituie unor specii de animale furnizoare de carne, cazul porcinelor i consumnd roztoare

Toate aceste riscuri nu se produc dac carnea pe care o consumm este corespunztor preparat termic. Din informaiile de care dispun n acest moment, pot s afirm c Alaria Alata nu mai este i nu mai trebuie s fie pentru medicii veterinari din Romnia, o eventualitate necunoscut i ndeprtat. Sunt diagnosticate pn la aceast dat patru cazuri de carne de porcine domestice i slbatice (mistre) la care prezena metacercarilor s-a evideniat cu certitudine n cursul examenului trichineloscopic prin compresie. Dou cazuri au fost depistate la disciplina de Parazitologie a Facultii de Medicin Veterinar Cluj-Napoca iar doua au fost identificate de ctre medicul veterinar Dnu Horia, care lucreaz la un cabinet veterinar Romniei. Cele dou cazuri de infestaie a crnii de porc cu metacercari de Alaria Alata, semnalate de ctre dr. Dnu H., au fost descoperite la examenul trichineloscopic al crnii de la dou porcine sacrificate pentru consum familial, n perioada decembrieianuarie 2008-2009. Primul caz a fost carnea de la un porc n greutate de 130 kg, crescut i exploatat n sistem semideschis, tradiional, animalul avnd acces la zone umede inundabile sau parial inundabile. La examenul trichineloscopic, pe un cmp al compresorului, doctorul Dnu a sesizat n sucul de carne din jurul esutului muscular compresat, o formaiune foarte dintr-o localitate din nordul

acvatice, purttoare de metacercari i astfel

biologic al parazitului un impas biologic deoarece metacercarii traverseaz peretele tubului digestiv i prin circulaie ajung n esutul muscular unde se nchisteaz formnd granuloame n care metacercarii rmn viabili. Carnea cu miozit granu-lomatoas, consumat de un carnivor reface ciclul biologic firesc dar consumat de om, impasul biologic se menine i metacercarii viabili din carne depesc peretele intestinal uman i se orienteaz spre diverse esuturi i organe ca: ficat, pulmon, esut conjunctiv, glob ocular ori SNC. n aceste organe prezena metacercarilor produce inflamaii granu-lomatoase (granulom de corp strin viu). Cu timpul, metacercarii ncapsulai mor i granulomul devine cazeos, cazeopurulent sau cazeocalcar.

66

viabil i mobil care i schimba foarte rapid forma i care dup expresia sa, parc dorea s reintre ntre fibrele musculare i parc vrea s mute din ele. Sincer, doctorul nu i-a dat seama despre ce este vorba dar a reacionat precaut recomandnd prelucrarea termic riguroas a crnii. Situaia ns l-a preocupat dar nu a ncercat s fotografieze formaiunea. ntr-o convorbire (discuie) avut cu doctorul Dnu, acesta mi-a relatat cazul iar eu i-am precizat c s-ar putea s fie vorba de Alaria Alata. Pentru a fi mai sigur, i-am artat colegului o imagine a metacercarului prezentat pe internet. Confirmarea lui a fost fr reinere, ntr-adevr aceasta a vzut. mic

Sensibilizat, doctorul Dnu a urmrit mai atent examenul trichi-neloscopic i nu i-a fost surpriza s gseasc metacercarul la carnea unui porc domestic de 200 kg sacrificat n condiii normale, crescut n aceleai condiii ca i primul. De aceast dat, colegul nu a mai ratat, astfel c prezentm mai jos o imagine original cu metacercar de Alaria Alata n sucul de carne de la cmpul nr.17 al compresorului examinat pentru diagnosticul trichineloscopic.

Fig. 1 Metacercar de Alaria Alata evideniat la examenul trichineloscopic al unui eantion de carne de porc (pilier diafragmatic) Fig. 1 Alaria Alata found at trichineloscopy examination of an pork meat test sample (diaphragmatic pilier)

67

Toate informaiile cu privire la Alaria Alata pentru admind ncep cu precizarea de c carne. este o parazitoz rar semnalat i cu riscuri minime consumatorul n totalitate Chiar sentin aceast

animale furnizoare de carne cum este cazul porcinelor i bovinelor. nvtura care se desprinde din cele relatate i comentate mai sus este c pentru bovine i porcine, atunci cnd examinm carnea, s avem n vedere pe lng trichineloz, sarcocistioz, toxoplasmoz i prezena metacercarilor de Alaria Alata.

tiinific, ca medici de sntate public nu ne este permis s nu lum act de existena acestui parazit n esutul muscular a unor

68

Condiii de redactare a lucrrilor

Revista Clujul Medical Veterinar, revist n baz de date CABI, citat ISI, are o apariie semestrial. Cei care doresc s publice n aceast revist sunt rugai s trimit pn n data de 10 mai, respectiv 10 noiembrie a fiecrui an, articole ce pot fi lucrri tiinifice originale, articole de sintez, comunicri, anunuri, recenzii din domeniul medicinii veterinare. Pentru a asigura calitatea materialelor trimise redaciei spre publicare, v rugm s respectai urmtoarele dispoziii de redactare: materialul s nu depeasc 7 pagini; s fie redactat la un rnd i jumtate, cu caracter ARIAL 12, aliniere justify; pagina scris format A4, s aib margini de 2,5 cm; titlul lucrrii, n limba romn i englez, s fie boldat, cu majuscule, centrat, cu un 1,5 rnd pauz ntre ele; ntre titlul lucrrii i numele autorilor se va lsa 1,5 rnd pauz; numele autorilor se va scrie italic, aliniat dreapta, iar n rndul urmtor se va preciza instituia de provenien; se va preciza adresa de e-mail a primului autor; se las 1,5 rnd pauz ntre numele autorilor i cuvinte cheie; cuvintele cheie, n limba romn i englez, se scriu aliniat la un tab, boldat urmat de dou puncte, apoi se enumer cuvintele scrise normal (neboldat); se las 1,5 rnd pauz ntre cuvintele cheie i rezumatul n limba englez; rezumatul va fi numai n limbile englez, francez sau german i s cuprind explicit scopul lucrrii, material i metod, rezultate i discuii (obligatoriu pe o pagin A4); Abstract, Introducere, Material i metod, Rezultate i discuii, Concluzii i Bibliografie se vor redacta boldat, fr tab; explicaia figurilor i a tabelelor s fie fcut n limba romn i englez, la un rnd, italic, centrat; tabelele vor fi redactate la un rnd; bibliografia va fi citat n text numai prin inserarea numrului de ordine alfabetic n parantez dreapt; bibliografia se va redacta n ordine alfabetic, dup urmtorul model: Popescu, I., E. Grigorescu, Maria Stanescu, (1993), Titlul articolului, titlul revistei, volumul, pagina. Popescu, I., E. Grigorescu, Maria Stanescu, Titlul lucrrii , editura , anul apariiei. Materialul redactat se va trimite pe suport magnetic, CD sau dischet (inclusive ilustraia care trebuie inclus n text) i vor nsoi un exemplar din materialul scris. Articolele vor fi trimise la Facultatea de Medicin Veterinar Cluj-Napoca, Calea Mntur nr. 3-5, cod potal 400372, Disciplina de Reproducie, Obstetric i Ginecologie Veterinar, Prof. Dr. Ioan Groza.

Redacia

69