Insulina

Structur, sintez, depozitare, eliberare, metabolizare.

Insulina este secretat de celulele B pancreatice.Ea aparine familiei peptidelor
numite factori de cretere de tip insulinic Molecula are Mr de aproximativ 6.000 i
const din 2 lanuri polipeptidice - A (21 aminoacizi) i B (30 aminoacizi) legate
prin dou puni disulfidice. Insulina rezult din precursori. Din pre-proinsulin se
formeaz iniial proinsulina prin ruperea unui segment peptidic ataat la captul lanului
B. Insulina rezult din proinsulin prin ruperea unui lan peptidic (peptida C), nterpus
ntre lanurile A i B.
Pancreasul endocrin secret circa 50 U insulin/zi. O unitate internaional
prezint o activitate de scdere a glicemiei la iepure, egal cu cea a 0,04167 mg /41,67
micrograme preparat standard internaional. In celulele B preproinsulina se formeaz
prin sintez direct de ctre ADN/ARN. Ea trece n proinsulin, un singur lan proteic
lung. Proinsulina este prelucrat n aparatul Golgi i mpachetat n granule, unde este
hidrolizat prin endoproteaz n insulin i un segment rezidual, peptida C, prin
scoaterea a 4 aminoacizi. Insulina i peptida C sunt secretate ca rspuns la substanele
ce stimuleaz eliberarea, n special glucoza. Granulele din celulele B pancreatice
stocheaz insulina n cristale care sunt formate din 6 molecule de insulin i 2 ioni de
zinc.
Secreia de insulin
La nivel circadian are 2 componente majore:
-secreia bazal care se desfoar interprandial, nocturn i n perioadele de
post. Este de aproximativ 1 u/or (Uuniti internaionale; standardul gravimetric actual
este de 28,7 U/mg insulin. Secreia este pulsatorie;
-secreia prandial este declanat de ingestia mai ales a hidrailor de carbon i
crete de 5-10 ori fa de nivelul bazal.
Secreia de insulin este reglat nu numai de glucoz, dar i de unii hormoni ct i
de sistemul vegetativ. Glucoza crescut n snge ptrunde n celulele beta pancreatice
prin intermediul proteinei transportoare GLUT2. Intracelular glucoza este metabolizat
de o glucokinaz cu formarea i creterea ATP n aceste celulele, cu blocarea canalelor
de K+ dependente de ATP. Scderea efluxului de K + prin aceste canale determin
depolarizarea membranei i deschiderea canalelor de Ca 2+ voltaj dependente.
Creterea Ca2+ i.c. determin exocitoza pulsatil a insulinei.
Epurarea insulinei se face n ficat i rinichi prin hidroliza conexiunilor disulfidice
ntre lanurile A i B sub aciunea glutation insulintranshidrogenazei (insulinaza); n faza
urmtoare se produce degradarea prin proteoliz.
Circa 60% din insulina secretat de pancreas este degradat n ficat i 35 40%
se elimin prin rinichi.Totui, din insulina administrat ca medicament la diabetici 60%
se elimin prin rinichi i 30 40% se degradeaz n ficat. T1/2 plasmatic este de 5 6
minute. La nivel renal insulina este filtrat glomerular, se reabsoarbe tubular i apoi este
degradat n rinichi.In celulele hepatice complexul insulin-receptor se internalizeaz n
mici vezicule numite endozomi, unde este iniiat degradarea.

Mecanism de aciune
Insulina acioneaz asupra unor receptori specifici membranari pe celule int,
n special din ficat, muchi, esut adipos. Cantitatea acestora este controlat de nivelul
hormonului. Receptorul insulinic este format din 2 heterodimeri, fiecare conine o
subunitate la exteriorul membranei i constituie locul de recunoatere a insulinei i

care traverseaz membrana i conine o tirozinproteinkinaz. Cnd

insulina se leag la subunitatea este stimulat activitatea proteinkinazei n
subunitatea . Fosforilarea poriunii a receptorului caracterizeaz agregarea
heterodimerilor i stabilizarea strii active a tirozinhidroxilazei din receptor (efect
o subunitate

autocatalitic). Au fost identificate 9 substraturi pentru receptorul insulinic activat. Primele

proteine fosforilate de ctre tirozinkinaza activat din receptor se numesc substratul-1
insulin receptor (IRS-1), care are peste 22 locuri de fosforilare a tirozinei i substratul-2
insulin receptor (IRS-2). Dup fosforilarea tirozinei n diferite locuri critice, IRS-1 i IRS2 se leag i activeaz alte kinaze cu fosforilri ulterioare. Fosforilarea altor proteine
n cascad n celule este efect major i reprezint mesajul secund deoarece se
produce o translocare a unor proteine spre suprafaa celulei i ca atare glucoza este
transportat n celul. In final complexul insulin-receptor este internalizat.
Au fost descrise influene asupra procesului de transcripie i translaie i
creterea consecutiv a sintezei proteice. Rspunsul terminal al aciunii insulinei
include:
-o modificare a membranei care permite o cretere a vitezei de intrare a glucozei,
aminoacizilor i ionilor de potasiu, magneziu i fosfat n celul;
-o cretere a utilizrii glucozei care poate fi folosit pentru a stoca energie (sinteza
de glicogen, lipide i proteine) sau poate fi folosit pentru ardere;
-o reglare a transcripiei unor gene specifice (exemplu inhibiia transcripiei
fosfoenolpiruvat carboxikinaz prin insulin explic aciunea sa de inhibare a
gluconeogenezei).
Deci, prin legarea insulinei de receptorul su se activeaz transportorul pentru
glucoz GLUT-4 n muchi i esutul adipos, se acumuleaz K i fosfat n celul, ceea
ce se coreleaz cu transportul glucozei n unele esuturi i sunt inhibate metabolismele
ce depind de adenilatciclaz: lipoliza, proteoliza, glicogenoliza.
Unii hormoni ca hidrocortizonul scad afinitatea receptorilor pentru insulin,
hormonul de cretere n exces crete aceast afinitatea.

Efectele insulinei asupra celulelor int

Aciunea insulinei asupra transportorilor glucozei

Transportor

esut

Km glucozei
(mmol/L)

Funcie

GLUT 1

GLUT 4

toate esuturile, n
12
special hematii,
creier
celulele beta- pan15 20
creatice, ficat,
rinichi, stomac
creier, rinichi, placent,
1
alte esuturi
muchi, esut adipos
5

GLUT 5

intestin, rinichi

GLUT 2
GLUT 3

12

captarea bazal a glucozei;

transportul prin bariera hemato-encefalic
reglarea eliberrii de insulin, alte aspecte ale homeostaziei glucozei
captare n neuroni, alte esuturi
captarea glucozei mediat
de insulin
absorbia fructozei

Transportorii de glucoz
Insulina are un rol important asupra moleculelor de transport care faciliteaz
micarea glucozei prin membranele celulare. Aceti transportori sunt implicai n
etiologia i manifestrile diabetului. GLUT 4, cantitativ cel mai important n scderea
glucozei din snge, este nclus n membranele celulelor musculare i adipocitelor prin
insulin de la veziculele de stocaj intracelulare. Deficitul de GLUT 2, care mediaz
transportul glucozei n celulele B pancreatice poate contribui la reducerea secreiei de
insulin n diabetul de tip 2.
Aciunea insulinei la nivelul ficatului
-inverseaz aspectele catabolice ale deficitului de insulin
inhib glicogenoliza,
inhib conversia acizilor grai i aminoacizilor n cetoacizi (cetogeneza),
inhib conversia aminoacizilor n glucoz (gluconeogeneza).
Aceste efecte sunt realizate direct prin fosforilri induse de insulin, cu activarea
piruvatkinazei, fosfofructokinazei i glucokinazei, cu reprimarea enzimelor

gluconeogenetice (piruvat carboxilaza, fosfoenolpiruvat carboxikinaza, fructozobifosfataza i glucozo-6-fosfataza). Insulina exercit i efecte indirecte de scdere a
gluconeogenezei hepatice i cetogenezei prin reducerea fluxului de acizi grai spre ficat
datorit aciunii sale antilipolitice la nivelul esutului gras.
-aciune anabolic
promoveaz stocarea glucozei ca glicogen (induce glucokinaza i
glicogensintetaza, inhib fosforilaza).
-scade producerea ureei,
-scade catabolismul proteic, scade AMPC,
-promoveaz sinteza trigliceridelor i formarea de VLDL,
-crete captarea K+ i fosfatului n hepatocit. Creterea influxului K+ se
datoreaz stimulrii ATP-azei Na+/K+ membranare.
Scade eliberarea glucozei prin scderea gluconeogenezei i creterea sintezei
de glicogen.
Efecte la nivelul musculaturii:
-crete sinteza proteic prin:
creterea transportului aminoacizilor la nivelul muchilor,
stimularea activitii ribozomale,
scade catabolismul proteic i eliberarea de aminoacizi,
-crete intrarea de corpi cetonici n celul;
-crete sinteza de glicogen cu refacerea stocurilor de glicogen consumat n
activitate prin:
creterea transportului glucozei n celula muscular,
activarea glicogen sintazei i inhibarea fosforilazei;
In cazul unui brbat de 70 kg n esutul muscular este stocat aproximativ 500
600 mg. glicogen.
-crete intrarea K+ n fibra muscular.
Efecte la nivelul esutului adipos
Crete cantitatea de trigliceride prin:
inducerea i activarea lipoproteinlipaza cu hidroliza trigliceridelor din
lipoproteinele circulante,
favorizarea transportului glucozei n celul pentru a genera glicerofosfat
ca un produs metabolic, care permite esterificarea acizilor grai furnizai prin hidroliza
lipoproteinelor,
reducerea lipolizei trigliceridelor stocate i.c. prin inhibarea direct a
lipazei i.c. probabil prin suprimarea producerii de AMP C i defosforilarea lipazei.
Efecte generale
Stimuleaz creterea i diferenierea celular.
Diabetul zaharat se caracterizeaz printr-un deficit relativ sau absolut de
insulin.
Diabetul zaharat juvenil sau de tip 1 insulino-dependent este mai sever i se
datorete incapacitii pancreasului endocrin de a secreta insulina. Tratamentul cu
insulin este obligatoriu.
4

Diabetul zaharat al adultului, de tip 2 sau non-insulinodependent se

caracterizeaz printr-un nivel plasmatic normal al insulinei, dar un rspuns secretor
insulinic inadecvat la creteri ale glicemiei. In aceast form de diabet reglarea
glicemiei se poate face de multe ori prin diet sau diet plus antidiabetice orale.
Simptomele diabetului zaharat sunt determinate de consecinele metabolice ale
deficitului de insulin:
-insuficiena utilizrii glucozei hiperglicemie, hiperosmolaritate sanguin,
datorit caracterului osmotic al glucozei, glicozurie, diurez osmotic, deshidratare ce
duce la senzaia de sete i polidipsie, scderea producerii de energie;
-dac glicemia rmne crescut mai mult timp se realizeaz glicozilarea
neenzimatic a unei cantiti reduse de hemoglobin A, determin apariia
hemoglobinei glicozilate HbA1C ; nivelul hemoglobinei glicozilate este un parametru
utilizat n clinic, drept indice de control al DZ.
Hiperglicemia este nsoit paradoxal de un deficit intracelular de glucoz. Cu
toate acestea, celulele au nevoie de energie pentru buna lor funcionare. Creierul este
un organ foarte sensibil la variaii mari ale glicemiei, metabolismul su fiind dependent
de glucoz. In aceste condiii, nevoile energetice celulare sunt satisfcute prin
participarea rezervelor proteice, lipidice i n urma procesului de gluconeogenez
sinteza de glucoz din precursori nonglucidici.
-creterea glicogenolizei diminuarea depozitelor de glicogen la nivel hepatic i
muchi striai i hiperglicemie;
-scderea sintezei proteice, creterea gluconeogenezei pe seama aminoacizilor
hiperglicemie, azoturie, epuizare muscular,
-favorizarea lipolizei hiperlipemie:
-formararea unor cantiti crescute de corpi cetonici din Ac.CoA, prin stimularea
catabolismului lipidic, cetoacidoz, cetonurie,
-depleie de K+ intracelular kaliurie,
-hiperfagie, cu senzaia de foame i ingestia de alimente, care apasre n urma
unui deficit de glucoz la nivelul nucleului ventromedian din hipotalamus.
Insulina este medicamentul major al diabetului zaharat.

Specii de insuline
Preparatele obinuite se obin din pancreas de porc sau bovin. Insulina
bovin difer de insulina uman prin trei aminoacizi, iar cea de porc numai printr-un
singur aminoacid. In practic se utilizeaz aa numita insulin mixt (70% insulin
bovin i 30% insulin porcin). Preparatele monospecie, mai ales de origine porcin
i ndeosebi uman sunt mai puin imunogenice. Insulina uman tinde s nlocuiasc
insulina monospecie porcin.
Astzi sunt conturate tendine de restrngere progresiv a producerii de insuline
animale. Producia insulinelor bovine i a amestecurilor de insuline bovine i porcine a
fost sistat.
Insulinele tradiionale se obin prin recristalizri succesive, dar preparatele conin
impuriti, cu proprieti antigenice. Ele se pot purifica prin cromatografie pe gel
obinndu-se insuline cromatografice sau monopic (single peack insulin) sau i
mai bine pe coloan schimbtoare de ioni insuline monocomponente (single
monocomponent insulin) i sunt slab antigenice.

Insuline umane se obin prin tehnici de recombinare a ADN-ului. Se inser gena

proinsulinei umane n E. coli sau celule din drojdie de bere (Sacharomices cerevisae) i
se trateaz extractul de proinsulin cu clivarea peptidlului C pentru a forma molecule de
insulin uman.
Insulina uman din E. coli se numete Humulin (Lilly) i se gsete ca insulin
regular, izofan insulin (NPH neutral protamine Hagedorn), lent, ultralent.
Insulina uman din drojdia de bere este produs de Novo Nordisk i se gsete
ca insulin regular, lent i forme NPH: Novolin R, Monotard Human Insulin
(Novolin L) i Novolin N. Firma produce i Velosulin (regular) care conine soluie de
fosfat cu scopul de a reduce agregarea moleculelor de insulin cnd se folosesc
pompe de infuzie. Totui Velosulinul nu se amestec cu nici o insulin lent din cauza
tendinei fosfatului de a precipita ionii de zinc.
O formul premixat de 70% NPH i 30% insulin regular uman denumit
Novolin 70/30 i Humulin 70/30 se utilizeaz n diabetul de tip 2 mai ales la btrni.
Insulin uman se gsete i ntr-o formul premixat 50/50 de NPH i regular
insulin.
Analogi de insulin
Au un profil farmacodinamic, prandial i bazal, care este mai apropiat de dinamica
secreiei endogene de insulin.
Monomerii de insulin au tendina natural de a se asocia prin legturi
noncovalente i de a forma dimeri, tetrameri i hexameri, fenomen observat i n
granulele secretate de celulele B pancreatice. Dup injectarea s.c. insulina se dilueaz
mult n fluidele organismului pentru a se desface n monomeri i a se absorbi. Aceste
caracteristici agregante ale moleculelor de insulin determin o absorbie mai lent.
Modificri ale moleculei de insulin constituie oportuniti pentru modificarea
caracteristicilor agregrii i ale vitezei de absorbie a moleculei. Insulina lispro este
primul analog. La noi se import Humalog produs de Eli Lilly&Co i NovoRapid produs
de Novo Nordisk. Ali analogi de insulin glargin cu aciune ultralung.