Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Cap. 1. Introducere
1.1. Generaliti
Se vorbete de o analiz chimic atunci cnd activitatea depus, de
o persoan, grup sau organizaie, are drept rezultat cel puin o caracteristic
chimic calitativ (adic o proprietate ce indic prezena sau absena unei
specii chimice) sau cel puin o cifr care indic un coninut dintr-o specie
sau material dat. Ansamblul de operaii i msurtori, plus condiiile
experimentale, menite s dea, mcar n parte, compoziia fizico-chimic a
unei "probe" din material, produs sau esut biologic, convenim s-l numim
sistem analitic.
Supunnd un material (numit prob) operaiilor unui sistem analitic,
consumnd reactivi i materiale auxiliare (de exemplu detergeni), energie
i manoper (lucrul efectiv), se obine rspuns la una din ntrebrile:
a) Este prezent specia (caracteristica) X n prob ?
b) n ce cantitate este prezent specia X ?
A rspunde doar la ntrebarea (a) nseamn a face o analiz chimic
calitativ iar a rspunde la ntrebarea (b) nseamn a executa o analiz
chimic cantitativ. A rspunde la ambele ntrebri pentru toate speciile
cunoscute constituie analiza complet.
Dac se urmrete evoluia unei anumite mrimi analitice, n timp,
spunem c se realizeaz monitorizarea acesteia. Deci, numim
monitorizarea factorilor poluani, msurarea periodic, la intervale
predeterminate de timp, a concentraiei unuia dintre factorii poluani ai
mediului.
P E R T U R BA I I
X1 X2 Xn
Parametri
fizico-chimici
Exactitatea,
Precizia,
Selectivitatea,
Sensibilitatea,
Limita de detecie,
Durata,
Costul.
1 RSD este prescurtarea din l. engl. a termenului relative standard deviation folosit n
literatura de specialitate internaional.
Noiuni fundamentale 5
ntrebri de verificare
1. Poate o metod imprecis s fie exact ?
2. Care sunt principalele caracteristici ale unei metode de analiz
instrumentale ?
2
A transvaza nseamn a trece prin turnare (manual sau instrumental) un
lichid dintr-un vas n altul.
10 Cap. 1. Introducere
Cap 2. Proba
I II III IV
Impuritate
Analit
Tampoane din
vat de sticl
Fig. 2.6. Reinerea analiilor din gaze pe suporturi
solide, adsorbeni sau lichide fixate pe suport
prezentat n fig. 2.6 unde tubul (4 x 100 mm), iniial nchis la cele dou
capete (la flacr), conine mai muli adsorbeni, fiecare destinat unui
anumit compus. Varietatea suporturilor folosite este limitat doar de
imaginaia analistului. De exemplu acestea pot fi diferite sortimente de
crbune poros (activ), grafit, polimeri organici poroi avnd fixate prin
legturi chimice diferite funciuni precum i adsorbeni mbibai cu
soluii de reactivi sau chiar coninnd reactivi solizi. O pomp cu debit
controlat asigur aspirarea unui anumit volum. Dup nchiderea cu
capace etane tubuorul este transportat n laborator. Aici, compuii
adsorbii sunt recuperai, fie prin extracie ntr-un solvent (de preferat
CS2) fie prin desorbie termic, simultan cu splarea realizat cu un
gaz inert. Marele avantaj al ultimei metode, este acela c proba nu se
dilueaz nainte de introducerea n analizor (gaz cromatograf). Totul se
realizeaz prin utilizarea unui mic cuptora, nclzit rapid la circa 300
o
C, timp de cteva secunde.
O alternativ la soluia tehnic de mai sus s-a materializat n
existena unor tubuoare pentru retenie, de dimensiuni mici, care pot fi
n ntregime introduse ntr-un injector cromatografic modificat (v. pag.
209). n aceste cazuri, recuperarea compuilor se consider
satisfctoare dac se face n proporie de 60%. Acest tip de prelevare a
probelor este specific igienei industriale i controlului polurii mediului.
Circulaia aerului n ultimul caz, la analiza aerului din mediu, se poate
face neforat, doar n funcie de curenii de aer.
Ca exemplu de astfel de prelevare a probelor putem da cazul
determinrii aldehidei formice din aer. Aceasta provine din degradarea
rinilor ureoformaldehidice. n contact cu reactivul 2-
hidroximetilpiperidin aceasta conduce prin reacie chimic la
oxazolidine, combinaii stabile care pot fi ulterior desorbite i analizate.
ntrebri de verificare
1. Cu ce se preleveaz probele solide?
2. n ce const metoda cuartrii?
3. Ce se nelege prin dezagregarea unei probe n vederea unei analize?
4. Care constitueni devin insolubili la tratarea metalelor cu ap regal?
5. De ce este periculos acidul percloric n calitate de reactiv pentru
dezagregare?
6. La ce distan maxim fa de monitor trebuie s se afle gura pentru
luarea probei de ap din mediu?
Luarea probei n cazul aplicrii metodelor instrumentale de monitorizare
25
3.1. Gravimetria
n gravimetrie analiza chimic se bazeaz pe cntrirea exact a
unei substane solide, pure, provenite din analit, folosind procedee
specifice. Este vorba, n primul rnd, de separarea prin precipitare a unui
ion aflat ntr-o soluie rezultat din prob sau, mai rar, de ndeprtarea
26 Cap. 3. Metode chimice de analiz Interferene cu analizele instrumentale
Oxidare Precipitare
Fe2+ Fe3+ Fe(OH)3
Prob
(soluie) (soluie) Calcinare
Fe2O3
Dac notm cu M Fe2O3 masa unui mol de oxid de fer (III) i cu MFe masa
atomic a ferului avem (v. fig. 3.1) corespondenele:
M Fe2O3 . . . . . . . . 2MFe
Mppt . . . . . . . . . . x
x = mppt2MFe/ M Fe2O3
8. Calculul.
3.3. Volumetria
n volumetrie, denumit i analiz volumetric sau titrimetrie,
concentraia analitului din prob se determin msurnd precis volumul
de reactiv consumat - reactiv aflat sub form de soluie. Operaia de
msurare a volumului se numete titrare.
Titrarea este operaia de adugare treptat, n poriuni mici,
utiliznd o biuret, a reactivului pn la terminarea reaciei, cnd se
atinge aa-numita echivalen, adic reactivul cu care se titreaz este
n cantitate echivalent cu analitul din prob. Reactivii folosii sunt
soluii diluate a cror concentraie se exprim molar sau normal, de
exemplu: 0,1 molL-1 (sau 0,1 M) respectiv 0,1 eL-1 (sau 0,1 N). n
vederea utilizrii analitice, soluiei i se determin (sau calculeaz) titrul,
notat T adic masa, exprimat n grame, coninut ntr-un mililitru.
Evident, reacia care are loc este una precis cunoscut i este
cantitativ, iar concentraia reactivului (titrul) este de asemenea stabilit
cu exactitate, nainte de efectuarea analizei. Reactivul utilizat poart i
numele de titrant i se prepar fie cntrind la balana analitic o
Volumetria 31
unde v este volumul unei picturi (0,03 ml), iar V volumul de reactiv
utilizat pn la punctul de echivalen. Se poate observa c cu ct
valoarea V este mai mare cu att eroarea de picurare, p%, scade. De
aceea titrrile trebuie reglate astfel nct s se utilizeze aproape ntreaga
scal a biuretei. De asemenea, prin folosirea unor orificii ct mai nguste
ale biuretelor i hidrofobizarea poriunii de la ieirea acestora, volumele
picturilor pot fi i mai mult reduse.
Eroarea de curgere se datorete aderenei neuniforme a
lichidului la pereii vaselor de msurare a volumelor. n general, aceast
eroare crete o dat cu murdrirea pereilor, dar i cu creterea raportului
suprafa/volum.
Prima cauz se ndeprtez prin tehnicile de curire a vaselor de
laborator, astfel ca lichidul, practic, s nu adere la perei.
Pentru a nelege factorii de care depinde a doua cauz, s
considerm aria lateral, S, a lichidului dintr-o biuret, de raz r, pentru
nlimea h. Aceasta este:
S = 2rh
iar volumul, V de lichid evacuat corespunztor acestei nlimi este:
V = r2h.
Din aceste dou ecuaii eliminnd rh se obine:
2V 4V
S= =
r D
Se poate observa c pentru a se
realiza o suprafa mai mic, la 39
acelai volum de titrare, este
necesar un diametru ct mai mare
al biuretei. De aceea biuretele
1
nguste nu sunt avantajoase.
n vederea diminurii
acestei erori se ateapt 30 s dup
cderea ultimei picturi nainte de
citire. 40
Eroarea de paralax (de
citire) este eroarea care apare 2
datorit poziiei nclinate a
biuretei sau a citirii incorecte, Fig.3.2. Eroarea de paralax
adic dintr-un unghi diferit de 90o crete citind incorect diviziunea:
fa de aceasta (fig. 3.2). 1 = corect; 2 = incorect
34 Cap. 3. Metode chimice de analiz Interferene cu analizele instrumentale
ntrebri de verificare
1. Ce se nelege prin metod absolut de analiz chimic?
2. Ce este gravimetria? Ce instrument important folosete aceast
metod?
3. n gravimetrie specia chimic se separ (izoleaz) de regul prin
4. Ce condiii trebuie s ndeplineasc reaciile folosite n gravimetrie?
5. Ce exemple de reacii de precipitare cunoatei?
6. Ce este factorul gravimetric?
7. Cum se calculeaz factorul gravimetric n cazul determinrii ferului
sub form de Fe2O3?
8. Care sunt etapele analizei gravimetrice?
9. Care sunt etapele analizei volumetrice?
10. Ce este titrul real i ce este titrul teoretic?
11. Unde se amplaseaz o balan analitic n cadrul unui laborator?
Volumetria 39
n care electrodul indicator, cel din stnga, este un metal care are
potenialul sensibil la ionii proprii, Mz+, electrodul de referin fiind, n
acest caz, aa-numitul "electrod de argint-clorur de argint", aflat n
contact cu o soluie saturat de ioni Cl- (n conformitate cu denumirea).
Acesta, dup cum se va arta n continuare, ar fi, n absena unei soluii
saturate de KCl, sensibil la concentraia ionilor clorur, lucru evitat prin
realizarea diafragmei i a contactului cu soluia saturat, a crei
concentraie n Cl- este meninut "automat" constant.
V V
= 0 +
RT H [ ]
+
ln 1/2
F pH
2
+
pH = - log[H ]
2
1
st =st0 + RT ln a(2)
H+
F
unde primul termen - st - include toate constantele ce mai intervin n
0
4.3. Conductometrie
4.3.1. Conducia curentului prin soluii. Metoda se bazeaz pe
fenomenul de conducie a curentului electric manifestat de electrolii
49 Conductometrie
=1/Rl/s
Dac R se exprim n , l n m i s n m2, unitatea pentru conductivitate
devine -1m-1 sau (pentru c -1 = S, de la Siemens) unitatea de
conductivitate este Sm-1 (siemens per metru). Se mai folosesc adesea i
uniti derivate din aceasta ca Scm-1 sau dSm-1. Se pune problema:
care ion sau care substan conduce cel mai bine curentul? Kohlrausch
(1876) a gsit potrivit pentru exprimarea calitii de a conduce curentul
electric n soluii mrimea "conductivitate echivalent", simbolizat
(lambda mare - n l. greac veche). Astfel, conform definiiei:
= 1000 /Cn
unde cu Cn s-a notat concentraia normal a soluiei. S-a constatat c
aceast mrime depinde de natura, dar i de concentraia soluiei,
crescnd cu diluia. S-a adoptat de aceea conductivitatea echivalent la
diluie infinit, simbolizat , care nu mai depinde de concentraie i
permite evaluarea sau compararea contribuiei independente, la
conducia total, a fiecrui ion. n tabelul 4.3.1. se prezint comparativ
valorile conductivitilor echivalente ale ctorva cationi, notate + ,
respectiv a ctorva anioni, -, la diluie infinit. Se pot remarca
conductivitile ridicate ale ionilor HO- respectiv H+, comparativ cu ale
celorlali ioni monovaleni.
I II III
4.4. Coulometria
Se cunosc dou categorii de
metode ce intr n aceast clas i anume
coulometria la potenial controlat
(denumit i coulometrie poteniostatic)
i coulometria la curent controlat (sau ER EL EA
amperostatic). Ambele metode au la
baz legea lui Faraday i ambele
necesit un circuit cu trei electrozi, redat
schematic n fig. 4.4.1, adic cu un
electrod de lucru (EL), un electrod
auxiliar (EA) i un electrod de referin
(ER) - de regul un electrod de Fig. 4.4.1. Celul cu trei
argint/clorur de argint. electrozi util n coulometrie
Metodele se utilizeaz atunci
cnd reacia necesar unei analize se petrece cu un randament de curent
100 %. De aceea, la analize de probe cu compoziia total necunoscut,
metoda trebuie utilizat cu rezerve, ntruct se poate suprapune peste
reacia de interes i una neateptat.
Electrodul de lucru este n
mod obinuit o sit cilindric de
platin. n aceast variant
electrodul secundar trebuie plasat
ntr-un compartiment separat de
restul celulei, prin intermediul
unei frite poroase tot din sticl.
Soluia trebuie deoxigenat, de
regul prin barbotare de N2 (v.
fig. 4.4.2), mai ales atunci cnd
procesul chimic pe care se Fig. 4.4.2. Schia unei celule n
coulometrie
bazeaz determinarea este unul de
reducere. De asemenea, soluia trebuie agitat.
Cap. 4. Metode electrochimice 56
I 222
44
h nlimea
h undei
nlimea
undei
1
5
3 E(V)
E
E1/2 Potenial de semiund (V)
Fig. 4.5.1. Unda polarografic i mrimile
semnificative analitic ale acesteia : E1/2 i h
2
Informaii se mai pot gsi n: http://www.epsilon-web.net/Ec/faq/faqtec.html#Cvrev
Cap. 4. Metode electrochimice 64
4.5.6. Voltametria
Potenial, V de redizolvare anodic
Fig. 4.5.6 Forma semnalelor (stripping voltammetry).
obinute n voltametria ciclic Metoda bazat pe
redizolvarea depozitului
obinut prin electroliz,
dizolvare de regul anodic (dar mai rar i catodic) constituie un
ansamblu de tehnici foarte sensibile, utilizate pentru determinarea
urmelor de metale n mediul ambiant, datorit limitelor de detecie foarte
joase i a preciziei relativ ridicate 1-2%. Metoda lucreaz n dou etape:
1. Prima etap este depunerea. Pe un electrod meninut la un potenial
controlat, constant, scufundat ntr-o soluie agitat, se depune prin
electroliz timp de 1 30 minute o fraciune din analitul electroactiv
de regul un metal (fig. 4.5.7). Acest electrod este constituit de cele
mai multe ori dintr-o pictur de mercur suspendat (electrod de
mercur nepicurtor) sau dintr-un electrod de crbune sticlos acoperit
cu mercur. n urma electrolizei din soluia agitat se concentreaz
65 Metode electrolitice(voltametrice)
4.5.7. Aplicaii
Polarografia i variantele sale sunt metode de analiz chimic
att calitativ ct i cantitativ a amestecurilor de compui organici sau
anorganici, cu condiia ca acetia s fie electroactivi. Limitele de
concentraie la tehnica obinuit cea n curent continuu - sunt 10-2 -
10-5 mol.L-1, adic are un domeniu dinamic larg, i se caracterizeaz
printr-o precizie de 1 - 3 %. Aspectul unei polarograme pentru un
amestec Cd2+, Zn2+ este
redat prin curba 1 din
fig. 4.5.9. Dac soluia
conine i titan, mai
apare o und redat prin
curba 2 de pe aceeai
figur.
n analiza
chimic, se lucreaz
printr-una din cele dou
metode cunoscute
Fig. 4.5.9 Aspectul polarogramelor
metoda curbei de
amestecurilor de ioni: 1= Cd2+, Zn2+; 2
etalonare sau metoda
= Ti3+, Cd2+, Zn2+
adaosului standard. n
prima se utilizeaz o
curb de etalonare n coordonate semnal (nlimea undei) - concentraie,
67 Metode electrolitice(voltametrice)
h1
ntrebri de verificare
1. Care este ecuaia care red factorii de care depinde potenialul de
electrod?
2. Ce electrozi de referin cunoatei?
3. Ce tip de electrod, dintre cele 4 tipuri cunoscute, este electrodul de
argint clorur de argint?
4. Din ce categorie de electrozi face parte electrodul de sticl?
5. Care electrod se folosete, n caz de litigiu, pentru evaluarea pH-
ului?
6. De ce tip este un electrod de platin scufundat ntr-un amestec de
ioni Ti4+, Ti3+ ?
7. Ce form are curba de titrare poteniometric?
8. Ce unitate se utilizeaz pentru exprimarea conductanei?
9. n ce tehnic se utilizeaz electrodul picurtor de mercur?
10. Cum se numete semnalul analitic n polarografie i ce caracteristici
are?
11. Prin ce se deosebete voltametria ciclic de polarografie ?
69 Metode electrolitice(voltametrice)
5.1 Termometrie
Temperatura de topire a substanelor (respectiv cea de
solidificare) sau cea de fierbere, fiind nite constante fizice, pot servi la
determinarea puritii. Astfel, n cazul unei sinteze organice, punctul de
topire este prima dovad c s-a obinut produsul dorit. n cazul aliajelor
binare (formate doar din dou metale) curbele de rcire prezint nite
schimbri de vitez de rcire ce permit determinarea compoziiei
acestora. Determinarea temperaturii critice a soluiei formate din dou
lichide diferite, parial miscibile, permite de asemenea determinarea
compoziiei amestecurilor binare. De exemplu, dou lichide separate
1
http://www-2.cs.cmu.edu/~sef/
Cap 5. Metode termice de analiz 71
CRETE TEMPERATURA
ntrebri de verificare
1. Cum se pot defini metodele termice de analiz?
2. Ce metode termometrice putei aminti ?
3. Ce mrimi se msoar n analiza termogravimetric i la ce poate
servi metoda ?
4. Ce deosebire exist ntre curbele DTG i DTA ?
5. Care este etalonul cel mai utilizat pentru analiza termodiferenial ?
6. De ce ntre dou fenomene termice n tehnica DTA curba este practic
orizontal?
7. n ce const diferena dintre tehnicile DSC i DTA?
78 Cap. 6. Metode optice de analiz
1
Metode optice se consider cele care lucreaz n domeniul UV, vizibil i IR iar
tehnicile care aplic tot principii optice dar n alte domenii (X, etc.) se consider
metode spectrale.
80 Cap. 6. Metode optice de analiz
ntrebri de verificare
1. Ce este o cuant de energie?
2. Ce devine, n cele din urm, orice energie furnizat materiei?
3. Pe ce interval de lungimi de und se gsete domeniul de radiaii
vizibile?
4. Cnd nu poate o radiaie interaciona cu materia, trecnd practic
neabsorbit prin aceasta?
5. Ce sunt razele Rntgen?
6. n ce secol a aprut spectrometria de emisie?
7. Ce tranziii au loc n domeniile vizibil i UV?
8. Ce fel de tranziii au loc n cazul apariiei unui spectru IR?
9. Care radiaii au energie mai ridicat, razele X sau cele ?
10. Din ce domeniu spectral face parte metoda care se bazeaz pe
modificri ale strii de rotaie a spinului electronic?
Principii generale 83
1
a substanei de analizat sau a unei combinaii realizate intenionat.
2
mai precis, care absoarbe lumina pe acel domeniu.
84 Cap. 7. Spectrometria de absorbie n UV-VIS
3
Unele lucrri mai vechi utilizeaz i termenul de densitate optic, n locul absorbanei
i aceasta se noteaz cu D (din l. francez: densit optique).
Legea lui Lambert Beer 87
A = kl.
unde A este absorbana, k - coeficientul de absorbie iar l - lungimea
parcurs de lumin prin mediul "colorat" sau lungimea celulei.
maximului. Pot exista unul sau mai multe maxime de absorbie. Numrul
de maxime precum i forma general a curbei, reprezint caracteristica
calitativ dup care se pot identifica substanele. De exemplu, n fig 7.5
am prezentat spectrul de absorbie n UV al benzenului, aflat n soluie.
Maximele acestuia sunt inconfundabile i acesta poate servi, la nevoie,
pentru identificarea sau analiza benzenului din soluii.
ct picurile sunt mai nguste se pot mai bine deosebi dou substane cu
spectre avnd aspecte apropiate. Tot pentru a se evita suprapunerile, n
cazul existenei mai multor maxime de absorbie, se prefer lucrul la
maximele de absorbie cu lungimile de und cele mai mari.
Nivele de
rotaie Nivel S1
Tranziii
..
electronice
Nivel S0
Nivele de vibraie
Stare fundamental
Fig. 7.8. Diagram energetic corespunznd
variantelor tranziiilor de rotaie, vibraie i
electronice posibile pentru o molecul dat
7.5. Instrumentaia
Aa cum am artat n 7.1., orice spectrofotometru reprezint o
reuniune de 4 pri componente distincte: (1) sursa, (2)sistemul
dispersiv sau monocromatorul, (3) detectorul i (4) nregistratorul.
Instrumentaia 95
filtru colorat din sticl sau material plastic transparent dar i un filtru cu
interferen, iar n UV-VIS o prism confecionat din cuar sau, n
ultimul timp, sisteme bazate pe reele plane sau concave cu circa 1200
trsturi per mm. Aceste reele sunt integrate n monocromatoare care
permit extragerea unei zone nguste din spectrul UV-VIS, printr-o
simpl deplasare a oglinzii (fig.7.12).
celula de referin care conine proba martor. Se cunosc cel puin dou
variante de astfel de montaje. n una dintre acestea (fig.7.16), montajul
folosete pentru desprirea fascicolului metoda amintit anterior, n
cazul spectrometrelor monocanal - oglinda semitransparent - iar
detectoarele (dou fotodiode) sunt montate n opoziie. Avantajul const
n faptul c rspunsul detectorului este meninut constant, n funcie de
, prin reglarea automat a intensitii de intrare n monocromator
(printr-un mecanism de feed-back).
100 Cap. 7. Spectrometria de absorbie n UV-VIS
5
C. Haisch and R. Niessner, Light and sound photoacoustic spectroscopy,
Spectroscopy Europe14/5, 10-15 (2002)
Introducere 103
1
http://www.engr.wisc.edu/ie/faculty/box_george.html
104 Cap. 8. Spectrometria de absorbie n IR
1
= .
Pe acest grafic de disting mai multe maxime mai nguste linii sau
mai largi benzi. Pe axa ordonatelor, n loc de T poate aprea T% sau A
absorbana - dar n mod obinuit se utilizeaz numrul de und n cm-1
(sau Kaysers) din necesitatea de a nu se apela la numere att de mari ca
frecvenele - exprimate n Hz - sau lungimile de und - exprimat n nm.
Exist la ora actual o diversitate de metode de analiz bazate pe
spectrele IR. Astfel exist spectrometre bazate pe dispersie dup
lungimea de und, sau bazate pe transformata Fourier, diverse analizoare
industriale simple, nedispersive ultimele specializate doar pe anumite
combinaii chimice precum i spectrometre de proces care fac analize,
n mod continuu, pe anumite linii tehnologice de gaze sau lichide. n
fine, exist spectrometre IR portabile care permit analiza unor poluani ai
mediului.
Absorbia n IR se datorete interaciunilor dintre radiaia
electromagnetic incident i anume componenta electric a acesteia, cu
dipolii electrici ai unei molecule. Se admite astzi c energia radiaiilor
IR provoac o amplificare a energiei de vibraie a moleculelor datorit
faptului c dipolul corespunztor legturii oscileaz cu o frecven
apropiat cu cea a componentei electrice amintite. Amintim c ntr-o
molecul, n mod natural, atomii componeni execut micri de vibraie
de-a lungul legturii n timp ce molecula se rotete. O intensificare a
micrii de vibraie duce la o alungire i simultan, la o slbire a legturii
dar i la o intensificare a micrii de rotaie. n acest fel se explic de ce,
n absena oricrui dipol permanent, nu apare nici un cuplaj cu unda
electromagnetic i nu are loc nici o diminuare a intensitii radiaiei IR
incidente. Sau, altfel spus, gazele monoatomice (gazele rare) i
substanele cu moleculele simetrice (ca de exemplu O2, N2, Cl2), avnd
legturi nepolare, sunt perfect transparente la radiaiile din domeniu IR.
n moleculele poliatomice posibilitile de apariie ale spectrelor IR sunt
mai mari deoarece aici vibraiile asimetrice pot duce, chiar n moleculele
nepolare, la apariia unor dipoli electrici, iar posibilitile de apariie ale
unor vibraii de deformare (de modificare a unghiurilor dintre legturi n
afara celor de alungire) se mresc.
2
Numrul de und (notat uneori i ~ ) se exprim prin relaia = /C unde este
frecvena iar C viteza luminii. Se observ c este proporional cu frecvena.
Introducere 105
3
n afar de cei trei termeni amintii, mai exist energia micrii de translaie
(necuantificat) i energia nucleelor. Doar termenii amintii sunt ns importani pentru
producerea spectrelor optice.
4
Conform acestei teoreme deplasarea electronilor are loc independent de deplasrile
nucleelor.
106 Cap. 8. Spectrometria de absorbie n IR
Deformare ()
ntindere ()
5
Legea lui Hooke, se refer la oscilaia unui resort elastic i se exprim: F=kx unde k
este o constant de for iar x distana sau elongaia deplasrii.
Bazele fizice ale spectrometriei IR 107
6
n mecanica cuantica soluiile matematice apar prin rezolvarea ecuaiei lui
Schrdinger iar soluiile prezentate n diferite lucrri reprezint aproximaii plauzibile.
7
Regulile de selecie au fost la nceput impuse de constatrile experimentale. n ultimul
timp, aceste reguli au o fundamentare teoretic (mecanic-cuantic) i nu mai sunt
absolute. Adic chiar tranziiile interzise din vechile reguli, devin tranziii cu o
probabilitate mic i corespund unor linii de intensitate sczut.
108 Cap. 8. Spectrometria de absorbie n IR
2
1 h22 1
EVIB = h V + V +
2 4D 2
unde V este tot numrul cuantic de vibraie iar D reprezint energia de
disociere a moleculei, E(fig. 8.3).
j=4
j=3
V=1
j=2
j=1
V=1 j=0
j=4 j=4
j=3 j=3
V=0
j=2 j=2
j=1 j=1
V=0 j=0 j=0
a b c
Fig.8.4. Reprezentarea schematic a nivelelor: de vibraie (a)
a poziiei relative pentru cele de rotaie (b) i a dispunerii
nivelelor de vibraie-rotaie suprapuse, formate din a + b (c)
j=3
V=0
j=2
j=1
j=0
R3 R2 R1 R0 Q P1 P2 P3 P4
A
seria R Q seria P
Fig. 8.5. Explicarea apariiei seriilor R , P i a liniei Q ale structurii
fine a spectrelor de vibraie-rotaie datorate regulilor de selecie
Transmitana relativ
0,8
0,6
0,4
8.3. Aparatura
Primele instrumente comerciale pentru domeniul IR au aprut
nc din anii 1940. Diversitatea extraordinar de aparate utilizate astzi
n cele mai diferite domenii se poate mprii n trei categorii:
(1) Fotometre nedispersive bazate pe filtre simple formate uneori chiar
din gazele de analizat. Aceste pot fi monocanal sau comparative.
(2) Spectrometre bazate pe dispersia luminii (folosind prisme sau
monocromatoare bazate pe difracie i interferen) i care pot fi
prevzute cu dou canale sau monocanal (cu sau fr chopper).
(3) Spectrometre bazate pe transformata Fourier, care permit intrarea n
celul a ntregului domeniu spectral i care sesizeaz interferometric
liniile caracteristice de absorbie. Aceste instrumente, datorit unei
112 Cap. 8. Spectrometria de absorbie n IR
C R D
S
L Chopp. M
Prob Martor
Prob Martor
Chopper sau
Monocromator alt separator
Detector Monocromator
Detector
nregistrator
nregistrator
Tc
A
C
O O O O
F2
O O
S R2
Ob F1 R1
C
O O
A
O
Fig. 8.9. Schema de principiu a unui spectrometru cu
reea. S surs, O oglinzi, C cuve, A atenuatoare,
F1, F2 fante, R1,R2 reele, Tc - termocuplu
ntrebri de verificare
1. Care este domeniul de numere de und ai spectrometriei IR ?
2. La ce servete domeniul IR apropiat?
3. Care dintre cele trei domenii IR: apropiat, mediu i ndeprtat este
cel mai bogat n informaii structurale?
118 Cap. 8. Spectrometria de absorbie n IR
1
http://www.science.org.au/academy/memoirs/walsh2.htm
2
AAS = prescurtarea denumirii n l. engl., Atomic Absorption Spectrometry.
120 Cap. 9. Analiza prin absorbie atomic
Tabelul 9.1. Raportul dintre numrul de atomi din strile excitat, N1,
respectiv fundamental, N0, la dou temperaturi, 2000, respectiv 4000 K
Element E Lungime de und N1/N0
(eV) (nm)
2000 K 4000 K
3
hallow cathode lamp n limba englez.
Principiul metodei 123
9.3. Aparatura
Schema de principiu, ilustrat anterior pentru spectrometrul de
absorbie atomic (vezi fig. 9.4), poate fi completat cu mai multe
amnunte (fig. 9.5). ntre electrozii lmpii cu catod cavitar se aplic 400
V i un curent de 10 - 40 mA, foarte bine stabilizat, pentru a emite un
flux luminos de intensitate constant. Soluia coninnd proba etalon, sau
cea de analizat, este transformat ntr-un aerosol fin, n interiorul unei
incinte numite sistem de pulverizare, sau pulverizator (nebulizor).
124 Cap. 9. Analiza prin Absorbie Atomic
Aer + propan sau Li, Na, K, Mg, Ca, Mn, Fe, Co, Ni, Cu,
Aer + oxid de carbon Zn, Ga, As, Mo, Ag, Au, Pb, Bi
Aer + acetilen Aceleai ca mai sus dar Cr, Co, Au, Fe,
Mg se determin mai bine n flacar aer -
acetilen
Aer + hidrogen sau Ca, Sn
Oxigen + hidrogen
Oxigen + acetilen Be, B, Al, Ti, V, Nb, Y, Sn, La i lantanide
(flacr bogat n
acetilen)
Protoxid de azot - Al, Si, B, Zr
Acetilen (N2O + C2H2)
raze este trimis alternativ prin flacr i pe un drum care ocolete flacra,
constituind raza de referin. Detectorul primete, cu frevena dictat de
chopper, att semnalul de referin ct i cel de msur, iar raportul celor
dou raze se nregistreaz dup corecia de fond, sub form de
absorban.
Un alt mare avantaj al metodei analizei prin AA l constituie
posibilitatea de a utiliza solveni organici pentru concentrarea probei.
Acetia, prin posibilitatea lor de a extrage doar anumii ioni din soluie
apoas, ntr-un volum mic, mresc i sensibilitatea i specificitatea
metodei. Cei mai adecvai solveni par a fi esterii i cetonele alifatice.
ntrebri de verificare
1. Ce surs de radiaie folosete analiza prin absorbie atomic?
2. Care este principiul inversiei liniilor spectrale descoperit de
Kirchhoff?
3. n ce stare se gsesc atomii probei n AA?
4. Ce linie este selectat, de regul, cu ajutorul monocromatorului ?
5. Ce lege este utilizat pentru analiza cantitativ ?
6. Cum se liniarizeaz legea lui Lambert-Beer ?
7. Ce fel de metode se aplic pentru determinri cantitative prin AA?
130 Cap. 9. Analiza prin absorbie atomic
1
OES = Optical Emission Spectroscopy
132 Cap. 10. Spectrometria de emisie
10.2. Instrumentaia
Aparatura, cunoscut sub denumirea de spectometru de emisie
atomic, se compune din urmtoarele pri:
Instrumentaia 133
Cu 3247,5 Mo 3788,3
2136,9 2816,2
Fe 3719,9 Ni 3414,8
2382,0 2287,1
3
ICP-OES reprezint, n literatura internaional, prescurtarea denumirii din l. engl.:
Inductively Coupled Plama Optical Emission Spectrometry
Plasma cuplat inductiv 141
Argon + aerosol
Debit: 1 Lmin-1
- spre plasma de argon -
ntrebri de verificare
1. Care sunt domeniile de lungimi de und n care se pot obine linii
spectrale n spectrometria de emisie?
2. Care sunt elementele pentru care nu este recomandat
spectrometria de emisie?
3. Ce este un etalon intern i care este rolul su?
4. Care este cea mai veche surs spectral cunoscut n
spectrometria optic de emisie optic?
5. Sub ce form se poate plasa proba n arcul electric?
6. Cum se introduce proba n spectrometria cu plasm cuplat
inductiv?
7. Ce este spectrometria cu descrcare aureolar?
8. Care este fenomenul care genereaz plasma, cel mai frecvent?
9. De ce se utilizeaz sursa de excitare cu laser?
10. Ce avantaj prezint flacra n calitate de surs de excitare?
11. Ce este un tampon spectral?
12. Care este forma ecuaiei utilizate n analiza cantitativ?
13. Care sunt elementele pentru care metoda spectrometriei n flacr
este recomandabil?
14. Cum se aduce proba lichid n flacr n aceast metod?
15. Ce fenomene secundare diminueaz semnalul n fotometria de
flacr?
16. Ce factor mrete, pentru aceeai prob, numrul atomilor
excitai?
Fluorescen, luminescen, fosorescen 147
Excitare
Fluorescen
Dezexcitare
neradiativ
alt parte, luminescena este tot o reemisie de lumin dar aceasta are la
origine energia unei reacii. Aceast energie nu se degaj sub form de
cldur (ca n majoritatea cazurilor) ci sub form de energie radiant. De
fapt o putem considera ca pe o excitare a electronilor cu ajutorul cldurii
de reacie.
Timpul de via a unei specii moleculare excitate, 0, se definete
chiar cu ajutorul constantei de vitez kf din relaia precedent:
0 = 1/kf
Dup acest timp intensitatea rezidual nu reprezint dect 36,7% din cea
iniial adic peste 60% dintre moleculele excitate au revenit la starea
neemisiv. De aceea fluorimetria lucreaz n regim staionar - excitarea
avnd loc pe tot parcursul msurtorii - pe cnd fosforescena, la care
diminuarea intensitii n timp este mult mai lent, se studiaz doar dup
ce a ncetat faza de excitare.
Fluorescena, riguros vorbind, implic emisia de radiaie prin
tranziia ntre dou niveluri care au aceeai multiplicitate (de exemplu
singlet la singlet sau triplet la triplet). Dac tranziia are loc ntre dou
niveluri de multiplicitate diferit, aceasta poart numele de
luminescen.
Metodele de analiz bazat pe fluorescen nu sunt general
aplicabile oricror substane. Dar, toate metodele analitice bazate pe att
pe fluorescen ct i pe i luminescen pe lng c sunt foarte specifice
sunt i foarte sensibile. De exemplu, putem aminti c limita de
determinare a unei metode fluorimetrice, pentru o anumit combinaie
chimic, este de circa 1000 de ori mai cobort dect cea a unei metode
prin absorbie n vizibil sau n ultraviolet. De aceea, din aceast categorie
de metode exist cteva extrem de utile n analiza i monitorizarea unor
poluani ai mediului.
Dei am amintit la nceput c fluorescena apare n strile lichid
i solid, anumite gaze, de exemplu aflate n atmosfera terestr, pot fi
determinate cantitativ prin fluorescena indus de excitarea cu un puls de
durat foarte mic (1 sec) cu ajutorul unui laser de mare putere
(dispozitiv cunoscut sub denumirea de lidar).
ntruct nivelul radiaiei de luminescen nu este ntotdeauna
foarte ridicat, exist dou tipuri de instrumente diferite: fluorimetre i
spectrometre de chemiluminescen. Ultimele i-au gsit aplicaii n
domeniul analizelor N sau S din materiale precum i n monitorizarea
NOx, H2S din aer precum i n studiile, respectiv analizele fenomenelor
de mbtrnire a materialelor plastice.
Fluorescen, luminescen, fosorescen 149
V4
V3
S0 V2 S0
V1
V0
1
S0, S1, T1 ... reprezint stri (nivele energetice) electronice, iar V0, V1, ...nivele
energetice de vibraie caracterizate fiecare de un numr cuantic de vibraie uneori notat
tot V0, V1,... . S i T sunt prescurtri amintind sensurile de singlet, respectiv de triplet.
150 Cap. 11. Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen
O NH2 OH
N
F F
C C
10 -5
510 -5 10-5 10 -4
10 -3
10-2
11.4. Aparatura
Deoarece proba spus analizei emite radiaia de fluorescen n
toate direciile, pe fotodioda sau fotomultiplicatorul instrumentului
folosit cad doar radiaiile care vin n direcia acestuia, n timp ce restul se
pierd. De aceea suprafaa senzorului care preia radiaia trebuie s fie ct
mai mare. n general se msoar radiaia care prsete celula sub un
unghi de 90o fa de radiaia incident. Pentru soluii cu absorban
ridicat studiul se poate realiza i n prelungirea fascicolului incident.
Pentru soluii semiopace se preconizeaz o observare sub un unghi
variabil ntre 90 180o. Geometria fluorimetrelor poate fi sintetizat prin
schema din fig. 11.6.
Monocromator (1)
Surs - de excitare Celul
Unghiul:
90 180o
Monocromator (2) F Detector
- de emisie
Fig. 11.6. Geometria unui spectrofluorimetru actual. Unghiul
preferat de observare a fluorescenei este 90o, F = fanta
Sursele optice ale fluorimetrelor actuale emit un spectru luminos
continuu. Au devenit uzuale urmtoarele lmpi folosite n calitate de
surse:
154 Cap. 11. Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen
Surs de xenon
Oglind
semitransparent
Referin
Prob
Mono-
cromator-1
Fotodiod 1 Fotodiod 2
Mono-
cromator-2
Calcul
raport Rezultat, F
11.5. Aplicaii
Exist un numr mic de molecule care posed o fluorescen
natural. Acestea pot fi analizate cantitativ prin fluorimetrie dac se
dispune de substana pur (etalon). Numrul acestora este foarte mic (5
8% din total). Pe de alt parte, aa cum exist reactivii de culoare, exist
i o serie de reactivi de fluorescen care duc, n urma unei reacii
chimice, la produi fluoresceni. Din primul grup de metode amintim
analiza hidrocarburilor policiclice aromatice din ape, n urma separrii
acestora prin cromatografie. Tot n categoria acestui prim grup intr i
determinarea aflatoxinelor nite ageni cancerigeni prezeni n alimente
dar i o serie de alte substane importante cum ar fi steroizi i vitamine.
Din a doua grup de metode amintim determinrile unor cationi metalici
cum ar fi Be2+ cu reactivul morin sau unii compleci ai metalelor
trivalente cu oxina (8 oxichinoleina).
Determinarea dioxidului de sulf (SO2) prin fluorimetrie n
UV se bazeaz pe excitarea moleculelor de SO2 din prob cu o lamp
UV pulsatorie (avnd o frecven de 20 kHz) cu < 214 nm. Moleculele
de SO2 emit prin excitare o fluorescen cu lungimea de unda de 214 nm,
foarte specific. Aceast metod st la baza celor mai performanre
analizoare de SO2 permind determinarea 1 ppb n aer. Mai mult,
156 Cap. 11. Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen
Lamp
UV
Fotodetector de
SO2 control
Fotomultiplicator
11.6. Chemiluminescena
Exist reacii chimice care sunt nsoite de emisie luminoas. O
astfel de substan este luminol-ul care poate reaciona cu ferul (II) i
permite punerea n eviden a unor concentraii mici din acest element.
O astfel de reacie este i cea utilizat pentru determinarea
monoxidului de azot, NO n amestec cu dioxidul de azot, NO2. Aceti
oxizi rezult prin arderea combustibililor la temperaturi ridicate n
prezena azotului din aer i constituie poluani ai aerului. Metoda are la
baz reacia de oxidare a NO cu ozon rezultnd, ntr-o prim faz, NO2*
(adic o form excitat a dioxidului de azot) o specie chimic
luminescent. Pentru determinarea compoziiei amestecului NO plus
NO2 se procedeaz astfel. Pe o fraciune cunoscut din proba de aer (1
pe fig. 11.8) tot dioxidul de azot este redus la monoxid i n urma
reaciei cu ozonul se determin NO + NO2. Pe o alt fraciune, (2), se
determin prin aceeai metod doar NO (NO2 prezent, nefiind n stare
excitat, nu prezint luminescen). Apoi, prin diferen se determin
NO.
Chemiluminescena 157
Evacuare
Aer pur C
NO
Uscare (pe sit Generator B
molecular) Ozon (O3)
NOx
Prob V Mo Conver-
tizor
Fil NO NOx
NOx
ntrebri de verificare
1. Ce este fluorescena?
2. Prin ce se deosebete fluorescena de fosforescen?
3. Ce este un reactiv de fluorescen?
4. Ce fenomen fizic st la baza luminescenei?
5. Ce avantaje i ce dezavantaje prezint metodele fluorimetrice?
6. Care fenomen este situat la lungimi de und mai mici, pentru aceeai
substan, absorbia sau fluorescena?
7. Care sunt principalele reguli care guverneaz apariia fluorescenei?
8. Ce este intensitatea fluorescenei i care sunt factorii care o
determin?
9. n ce coordonate se construiete o curb de etalonare n fluorimetrie?
10. Ce surse optice se folosesc n fluorimetrie? Dar n metodele prin
luminescen?
11. Ce tipuri de instrumente analitice cunoatei n fluorimetrie?
ntrebri de verificare 159
Nefelometrie
Id
1
Un astfel de sistem (coloidal) are dimensiunile particulelor n domeniul 10-6 - 10-9 m.
Principii generale 161
Nv 2
Id = I0k
4R 2
unde Id este intensitatea radiaiei difuzate, I0 - intensitatea radiaiei
incidente, N numrul de particule din unitatea de volum, v volumul
unei particule, lungimea de und a radiaiei, R distana pn la
observator iar k este o valoare dependent de unghiul sub care se
privete radiaia care prsete celula - coninnd un lichid cu indicele de
refracie, n . Valoarea k se poate exprima:
9 n 2 - n 12
k= (1 + cos 2 )
2 n 2 + 2n 12
unde cu n i n1 s-au notat indicii de refracie ai particulei respectiv ai
mediului n care este suspendat particula. Se poate observa c relaia
permite calculul valorii N cnd s-ar cunoate toi ceilali parametri. Cum
N este proporional cu concentraia se poate trage concluzia c
intensitatea luminii difuzate, Id, este proporional cu concentraia
particulelor, respectiv cu cea a soluiei din care provin acestea.
n afar de cele dou tehnici amintite exist i alte aplicaii
importante ale difuziei luminii n evaluarea cantitativ a maselor
moleculare ale substanelor macromoleculare (polimerilor) din soluie
sau n analiza granulometric a pulberilor suspendate n lichide sau chiar
n gaze.
12.2. Nefelometria
Nefelometria este o tehnic de analiz instrumental bazat pe
msurarea intensitii luminii difuzate, Id datorate unei anumite specii
chimice, greu solubil n mediul lichid i avnd o granulaie fin (sistem
coloidal). Lucrnd la un unghi cunoscut, pe un amestec cunoscut de
substane i ntr-un mediu cu indice de refracie constant, la o finee
ridicat a particulelor (la o dimensiune apropiat de lungimea de und a
luminii incidente) ecuaia lui Rayleigh devine:
Id = I0Kcv2
unde c este concentraia substanei n suspensie, v volumul particulelor
iar K o constant de proporionalitate. n vederea analizei chimice,
2
http://hyperphysics.phy-astr.gsu.edu/hbase/atmos/blusky.html#c2
162 Cap. 12. Nefelometria i turbidimetria
12.3. Turbidimetria
Tubidimetria este tehnica nefelometric n care unghiul de
observaie este zero - adic msurarea se face n lumina transmis.
Pentru aceste determinri pot fi folosite tot spectrofotometrele din
domeniul vizibil dar sunt preferate instrumente specializate denumite
turbidimetre. Pn nu demult, se utilizau ca surse luminoase lmpi cu
filament din W, dar acestea consum o cantitate mare de energie. n
Turbidimetrie 163
dx
= k [c ] 0 [ R ] 0
dt
unde k este constanta de vitez iar cu [c]0 s-a notat concentraia iniial
a substanei (ionului) de analizat iar cu [R]0 concentraia iniial a
reactivului de precipitare.
De regul, n aceast variant se msoar viteza reaciei n
momentul iniial, cnd concentraia x este joas, pn n momentul
atingerii unei variaii de concentraii fixate x. n aceste condiii se
poate scrie relaia aproximativ:
x = k [c]0 [R]0 t
Msurndu-se de fiecare dat timpul i absorbana, pn la atingerea
unei valori fixate a acesteia, intervalul de timp t va fi proporional cu
x, deci i cu concentraia ionului precipitat [c]0. Lucrndu-se pe soluii
cunoscute, se construiete mai nti o curb etalon t = f(c). Msurnd i
n cazul probei necunoscute intervalul de timp t, pn la atingerea
aceleiai turbiditi (sau aceleiai absorbane, n cazul utilizrii unui
spectrofotometru), n condiii absolut identice, se poate evalua din curba
de etalonare proba necunoscut.
O a doua variant foarte mult aplicat este titrarea
turbidimetric. n aceast metod se msoar turbiditatea, S, n timpul
adugrii cu vitez constant a soluiei coninnd reactivul de
precipitare, ntr-un volum V. Se reprezint grafic curba S = f(V).
Graficul are o form apropiat de cele reprezentate n fig. 12.2. Din
discontinuitatea observat se determin volumul de echivalen, care
S S
Ve Ve V
V
Fig. 12.2. Dou variante ale aspectului curbelor de titrare
turbidimetric. Ve reprezint volumul de echivalen
3
Ionul comun introdus n soluie, datorit constanei produsului de solubilitate,
micoreaz n general solubilitatea unui precipitat.
4
Unitile FNU sau, mai recent NTU, reprezint uniti standardizate, introduse de
USEPA i recunoscute de standardele europene ISO, mai concret ISO - 70227
Turbidimetrie 167
ntrebri de verificare
1. Pe ce fenomen general se bazeaz att nefelometria ct i
turbidimetria?
2. Ce mrime se determin n cazul nefelometriei i ce mrime n cazul
turbidimetriei?
3. Care trebuie s fie relaia ntre diametrul particulelor i lungimea de
und n cazul metodei nefelometrice?
4. Cnd este recomandat examinarea la unghiuri apropiate de 180o ?
5. n ce const titrarea turbidimetric?
6. Ce parametru se msoar n cinetica turbidimetric?
7. Cu ce reactiv se poate determina sulfatul din ape, tubidimetric?
8. Ce este formazina i la ce se folosete?
9. Cu ce ecuaie se aseamn ecuaia utilizat n turbidimetrie pentru
analiza cantitativ?
168 Cap. 13. Refractometria i polarimetria
1
Amestecuri formate doar din dou substane diferite, fiecare avnd un indice de
refracie n specific.
Refractometria 171
13.2. Polarimetria
Studiul fenomenelor optice n lumin polarizat poart numele
de polarimetrie. Practic se determin rotaia planului luminii polarizate
n plan, ceea ce se numete unghi de rotaie. Unele substane "optic
active" au proprietatea de a roti sau modifica planul de polarizare a
luminii la trecerea luminii prin acestea. De exemplu n fig. 13.3. (c) s-a
ilustrat rotaia cu un unghi a planului unei raze ce vine spre noi
dinspre planul hrtiei fig. 13.3 (b) comparativ cu o raz de lumin
nepolarizat fig. 13.3. (a).
Activitatea optic a substanelor cristaline este strns legat de
structura lor cristalin. Alteori la baza rotaiei stau asimetriile
moleculare. Astfel, prin topire sau dizolvare disprnd structura dispare
i activitatea optic a substanelor cristaline. La alte substane activitatea
optic este legat de structura lor molecular (chiral) i la acestea
activitatea se pstreaz i n soluie (de exemplu la zaharoz). Dac
rotaia are loc n sensul acelor de ceasornic substana o numim
dextrogir iar unghiul de rotaie se consider pozitiv. La rotaia n sens
opus denumirea substanei este de substan levogir iar unghiul se
consider negativ. n afar de natura substanei unghiul de rotaie
depinde i de lungimea de und a radiaiei, lungimea parcursului optic,
de concentraie i temperatur. n cazuri excepionale variaz i cu
timpul, caz n care vorbim de mutarotaie. Pentru face comparabile
msurtorile de rotaie pentru diferite substane se fac raporturi ale
unghiului msurat la lungimea drumului optic, la densitatea soluiei i se
172 Cap. 13. Refractometria i polarimetria
ntrebri de verificare
1. Indicele de refracie se msoar n lumin alb sau n lumin
monocromatic?
2. La ce unghi de inciden se petrece reflexia total?
3. Care sunt cele mai cunoscute refractometre?
4. Cum se numete indicele de refracie ntre un mediu dat i vid? Prin
ce se deosebete fa de cel determinat n aer?
5. Ce este refracia molar i la ce servete aceasta? Ce proprietate are
refracia molar la soluii?
6. Ce relaie exist ntre indicele de refracie n i constanta dielectric
a materialului ?
7. Cu ce aparate se poate determina indicele de refracie? Dar rotaia
specific?
8. Ce msoar elipsometria?
9. Cum se calculeaz rotaia specific pentru o soluie, dup ce se
msoar unghiul de rotaie ?
174 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
1
Denumirea de radiaie Rntgen se folosete mult n literatura internaional n onoarea
fizicianului german K. Rntgen descoperitorul acestor raze.
2
XRF este prescurtarea din l. engl. a denumirii internaionale: X-Ray Fluorimetry.
Principiul metodei 175
Apoi, unii atomi absorb doar anumite radiaii i acest lucru determin o
influen a compoziiei chimice a probei asupra rezultatelor valorii
intensitii msurate. Efectele de matrice - denumire dat totalitii
efectelor provocate de ctre elementele nsoitoare asupra rezultatului
analitic, pentru un element dat - fac necesare, n cazul analizelor
cantitative, precauii deosebite n pregtirea probelor (vezi 14.6).
Spectrometrele cu dispersie dup lungimea de und lucreaz cel
mai des n vid i mai rar n atmosfera format din amestecuri aer
metan, tocmai pentru a elimina efectele atmosferei.
Exist dou posibiliti de analiz a semnalelor (msurate ca
intensiti de radiaii X):
cu dispersie dup lungimea de und i
cu dispersie dup energie.
Fiecare are avantaje i dezavantaje proprii. n prima variant, lungimile
de und se analizeaz pe baza dispersiei realizate cu un dispozitiv optic -
bazat pe difracie i interferen. A doua grup de metode selecteaz
liniile analitice dup energia acestora. Ceea ce este comun tuturor este
durata mic necesar analizei la elementele majore i de asemenea la
elementele grele. La cele uoare, mai ales la concentraii joase, durata se
poate mri considerabil comparativ cu precedentele. La analizoarele
multicanal, o analiz complet, fr prepararea probei, dureaz 1-2 min.
4
Este vorba de o difracie, n toate direciile i o interferen care poate fi constructiv,
la unghiul care respect ecuaia lui Bragg, sau distructiv la celelalte
Aparatura pentru dispersia dup lungimea de und 181
cu spectru larg, sau se pot folosi pe lng acestea filtre (de obicei foi
subiri metalice) sau inte secundare (tot metalice) pentru a se obine o
radiaie incident care poate fi denumit radiaie semi-monocromatic.
n cazul celor cu int secundar (EDXRF) geometria preferat este cea
din fig. 14.8. n cazul particular al instrumentelor portabile de teren, n
special al celor utilizate pentru detecia n serie a acelorai elemente, se
mai folosesc, n calitate de surse, izotopi radioactivi. De asemenea, se
mai poate utiliza radiaia unor sincrotroane.
Detectorii folosii cel mai frecvent sunt detectorii pe baz de
semiconductori Si(Li) adic formai din siliciu dopat cu litiu. Acetia
nregistreaz un semnal avnd nlimea proporional cu energia
fotonului incident, n urma unei descrcri n avalan la care particip
electronul i golul aprut (v. fig. 14.9).
La ptrunderea unui foton X n interiorul unui cristal, acesta
provoac, n urma coliziunilor cu atomii componeni ai reelei, eliberarea
unor fotoelectroni cu energie ridicat care i pierd, prin ciocniri, energia
n urma unor interaciuni multiple. Aceste interaciuni promoveaz
electroni din banda de valen n banda de conducie, lsnd n urma
acestor promovri goluri n banda de valen. Perechile electron - gol
sunt colectate de tensiunea nalt (-1000 V), ceea ce duce la apariia unui
puls de curent cu totul analog celui din contorul proporional. Colectarea
sarcinilor este ns mai eficient dect ntr-un gaz.
5
1 ppb = o parte per miliard (109 pri). Din l. engl. part per billion.
Aparate de analiz XRF care utilizeaz filtre 185
elementul j;
excitaia secundar a radiaiei caracteristice a elementului i de
ctre radiaiile caracteristice ale elementului j;
creterea fondului radiaiei caracteristice, pentru un element i,
datorit prezenei radiaiilor altor elemente j, care sunt reflectate
aproximativ sub acelai unghi. Primele dou efecte - numite
uzual, interaciuni - sunt luate n considerare prin valoarea
coeficientului mi. Cel de al treilea efect, numit efect de
suprapunere, este luat n considerare prin valoarea coeficientul de
suprapunere, bij.
Efectul de matrice poate fi modelat matematic cu ajutorul ecuaiei lui
Lucas-Tooth i Paine (preferat pn la apariia calculatoarelor
moderne):
Ci =ai +bi Ii 1+kij I j
j
unde: Ci este concentraia cunoscut a elementului; i, bij sunt coeficieni
explicai mai sus; iar Ii i Ij sunt intensitile msurate pentru elementele
i, respectiv j. n situaia n care coeficienii sunt stabilii pe baza unor
msurtori efectuate pe un numr de probe standard, cunoscute precis
prin analize chimice clasice sau prin cntrire, concentraiile Ci pot fi
calculate, ntr-o a doua etap, cu ajutorul intensitilor brute, Ii, respectiv
Ij, determinate pe probele necunoscute. n ultimul timp prin ptrunderea
calculatoarelor pe scar larg, ecuaia preferat n analizoarele moderne
a devenit ecuaia lui Sherman (vezi anexa 2) care ia n considerare att
absorbia ct si intensificarea fluorescenei. O form simplificat a
ecuaiei lui Sherman este cea a lui LaChance i Trail care folosete
coeficienii alfa determinai experimental cu ajutorul unui set de probe
etalon cunoscute:
Ci = R i 1 + ijC j
i j
unde Ri este intensitatea relativ (adic Ri=Ii/I0 cu Ii valoarea msurat
pentru elementul i pe o prob i I0 valoarea msurat pentru acelai
element i, pur, Ci concentraia elementului pentru care se face
etalonarea iar Cj concentraia tuturor elementelor, astfel nct :
C j =1
j
188 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
14. 6. Aplicaii
Marele succes al acestei metode de analiz provine din faptul ca
eantioanele nu se distrug n urma analizei iar probele, n special cele
metalice sau pulberile, nu necesit un tratament chimic prealabil. Natura
probelor analizate poate fi foarte diferit: metale, aliaje, materiale
ceramice sticl pulberi de orice tip. La nceput, metoda a fost preferat n
industriile de mare tonaj (minier, siderurgic, ciment, ceramic, sticl
etc.) dar n ultimul timp, datorit comoditii i ridicrii performanelor
instrumentaiei, aplicaiile s-au extins i n alte domenii (fotografie,
semiconductori, industria petrolier, geologie, papetrie, toxicologie sau
controlul poluanilor mediului). n fine, cuplajul acestei tehnici cu
microscopia electronic a condus la microanaliza X (sau microsonda
electronic) care permite pentru probe care, n mod ideal sunt
conductori, s se realizeze o adevrat cartografie a compoziiei
chimice pe fiecare element macro- sau micro-structural din materialul
studiat. Cu progresele recente n domeniul detectorilor, elementele
analizate s-au extins astfel nct, cu anumite precauii, acestea pot fi
determinate de la numrul atomic Z = 5 (B) la Z = 92 (U). n oricare din
aplicaii analiza pe elemente se face indiferent de natura legturilor
chimice ale atomilor elementului respectiv deoarece fenomenul de
fluorescen se datoreaz electronilor interiori pe cnd legturile
chimice, electronilor exteriori ai atomilor. Pentru a se analiza i tipurile
de structuri dintr-un material s-au introdus analizoarele de fluorescen
X i, simultan, de difracie de raze X, care dau att compoziia pe
substane chimice (minerale, compui intermetalici) ct i pe elemente.
Probele destinate analizelor cantitative trebuie s aib
Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF) 175
ntrebri de verificare
1. Ce particule interacioneaz cu proba de analizat n analiza
chimic prin XRF?
2. Cum se numesc n XRF radiaiile care poart informaii privind
compoziia chimic a probei?
3. Ce fel de particule sunt accelerate n cmpul electric al tubului de
raze X pentru generarea acestora?
4. Care sunt mrimile fizice care intervin n ecuaia lui Bragg?
5. Ce se nelege prin radiaia continu emis de tubul de raze X?
6. La ce servete cristalul analizor n dispersia dup lungime de
und?
7. Ce fel de elemente chimice pot fi analizate prin XRF?
8. Dai cteva exemple de cristale analizoare!
9. Prin ce se deosebete instrumentaia metodelor cu dispersie dup
lungimea de und fa de cele bazate pe dispersia dup energie ?
10. Ce provoac un foton X ntr-un contor proporional cu gaz?
11. Care este rolul litiului n semiconductorul dintr-un contor pe baz
de Si(Li)?
12. Ce avantaje prezint microsonda cu raze X?
13. La ce fel de determinri se preteaz metoda de analiz XRF care
utilizeaz filtre?
14. Ce se nelege prin termenul interaciuni n XRF?
15. Care metod de calcul ine cont de interaciunile element-matrice
n analiza chimic cantitativ prin XRF?
190 Cap. 15. Metode cromatografice Privire de ansamblu
2
Simbolurile utilizate n continuare sunt cele recomandate de IUPAC publicate n
Pure&Appl. Chem. 65(4), 819, (1993)
196 Cap. 15. Metode cromatografice Privire de ansamblu
1
y=
2
e 22 (15.3)
(p2-1)
j= 3. 3 (15.5)
2 (p -1)
n care cu p s-a simbolizat raportul presiunilor, iniial (pi) respectiv
final (pf), adic p=pi/pf. Cu ajutorul acestei mrimi semnale de retenie
din diverse condiii experimentale se pot face comparabile n CG mai
ales prin corecia volumului de retenie.
Volumul de retenie corectat, VRo definit prin produsul:
o
VR = j.VR (15.6)
unde j este factorul de corecie de mai sus iar VR volumul de retenie.
Acesta este utilizat doar n analiza calitativ prin CG.
Volumul de retenie net, VN, este volumul de retenie corectat
pentru cderea de presiune:
V N = jVR' (15.7)
Acesta este utilizat cu precdere n analiza calitativ cnd nu se mai
recurge la alte tehnici4.
Volumul de retentie specific, Vg. Prin mrirea cantitii de faz
lichid staionar, fie prin utilizarea unei cantiti (grosimi) mai mari fie
prin utilizarea unei coloane mai lungi, crete volumul de retenie. Pentru
a se lua n considerare i acest factor se definete volumul de retenie
specific (exprimat de regul n ml/g) cu ecuaia de definiie:
Vg = (273/Tc)(V N /mL) (15.8)
unde Tc este temperatura absolut a coloanei, VN - volumul de retenie
net al componentului i mL - masa fazei staionare lichide din coloan.
Factorul de retenie, RF reprezint raportul, subunitar, dintre
vitezele de deplasare prin coloan ale unui component i ale eluentului.
Cum vitezele amintite se pot calcula din raportul spaiului parcurs n
unitatea de timp, lungimea coloanei fiind notat LCOL, avem conform
definiiei:
Lcol o
Rf tR = tM = Von
= (15.9)
Lcol tR VR
tM
Coeficientul de distribuie, K (sau KD) este o mrime identic
celei din extracie (repartiia ntre faze) definit ntotdeauna prin raportul
4
Amintim c se practic, pentru o mai mare siguran, cuplajul GC cu spectrometria
de mas.
Mrimi i ecuaii caracteristice unei coloane 199
( )
N k
RS = 4 -1 1+ B .
kB
(15.23)
(2)
(1)
(3)
ntrebri de verificare
176 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
driftul este devierea liniei de baz ntr-un timp dat (1 or) exprimat n
unitile de msur uzuale ale semnalului nregistrat (mV, mA etc).
Semnal
de
ieire
3
PID este prescurtarea de la denumirea n l. engl. Photoionization Detector
178 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
lungimi ntre 5 - 100 m, separarea durnd ceva mai mult dect la cele cu
umplutur. Cu ct coloana este mai lung durata analizei crete.
Coloanele capilare se confecioneaz n ultimul timp mai ales din sticl
de cuar. n exterior acestea sunt mbrcate ntr-un polimer - poliamid -
pentru a rezista mai bine la ocuri mecanice respectiv la coroziune (n
ntrebri de verificare
1. Ce pri ale cromatografului se gsesc n etuva termostat?
2. Cu ce dispozitive se poate introduce proba ntr-un cromatograf de
gaze?
3. Ce este un septum i unde se gsete acesta n GC?
4. Denumii doi dintre cei mai utilizai detectori n GC.
5. Pe ce principiu funcioneaz catarometrul?
6. Ce componente nu pot fi analizate prin FID?
7. Care sunt mrimile preferate n analiza calitativ prin GC?
186 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
2
Este vorba de un ventil cu 6 ci prevzut cu o bucl cu volum cunoscut
3
http://hplc.chem.shu.edu/NEW/HPLC_Book/index.html
228 Cap. 17. Cromatografia de lichide de nalt performan
Pompelecupresiuneconstant,asemntoarecuosering
dar avnd o capacitate mai mare, pompeaz continuu pe toat
durata separrii, pistonul deplasnduse cu o vitez liniar
constantdardupfiecarecursestenecesaroprireadebituluii
reumplereacusolventacorpuluipompei.
Dei solvenii utilizai se degazeaz pentru a se reduce
efectele corozive ale oxigenului, datorit presiunilor ridicate la
careselucreaz,coroziuneaestetotuideosebit.Deaceeaaceste
pompe (corpul, cilindrii, garniturile i supapele) se execut din
materiale rezistente la coroziune: safir, agat, teflon sau aliaje
speciale.
Proba Proba
(soluie) (soluie)
Coloana Coloana
Ieire Ieire
exterioar exterioar
Pompa Pompa
Bucla Bucla
17.4. Coloanele n LC
Locul n care se petrece separarea propriu-zis i - n funcie de
calitatea acesteia - se mrete sau micoreaz raportul semnal/zgomot,
este coloana cromatografic. Dei muli autori denumesc coloana piesa
cea mai important dintr-un cromatograf, acesta din urm, fiind format
dintr-o serie de componente, rezult c fiecare compartiment n parte,
contribuie separat la obinerea rezultatului analitic. Pentru un practician
din domeniul LC ns, locul unde acesta intervine efectiv i unde se
concepe logic separarea este ntr-adevr coloana.
(a)
(b)
Cromatografie
Substan Ionic (IC)
ionic
Solubil n ap Cromatografie cu
Substan perechi de ioni
neionic
M<2000 Cromatografie:
Subst. polar cu faz invers
cu faz polar legat
lichid solid (CLS)
Solubil n excluziune steric
solveni organici
Prob CLS
Subst. nepolar IC
Excluziune steric
233
Fig. 17.7 Tipurile de mecanisme de separare cunoscute n LC
Coloanele n LC 235
OH
2 3
HO Si OH
OH
SiO2 coloidal
4
1 (Sol)
Compui ai Si(IV):
Si(OEt)4],
SiCl4,
Na2SiO3.
3 10
H H H
O O O
Si Si Si
I II III
Fig. 17.11. Principalele tipuri de grupri silanolice superficiale
Tabelul 17.2. Cteva dintre cele mai cunoscute tipuri de silicagel pentru
HPLC
Marca Diametrul Suprafaa pH-ul n Tipul
porilor specific suspensie particulelor
10%
Zorbax 300 30 39 5,4 Sferice
Vydac TP 32 82 4,1 Sferice
Hypersil 12,5 149 8,2 Sferice
Spherisorb 8 190 7 Sferice
Polysil 6 245 6,5 Neregulate
LiChrosorb 10 297 6,7 Neregulate
Rosil 8 357 8,4 Sferice
Rsil 6 433 8,0 Neregulate
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
4
Prin reacii de condensare se neleg procesele prin care se leag dou molecule mai
mari, eliminndu-se o molecul mic (HCl).
Coloanele n LC 239
dintre cei mai ntlnii solveni i ordinea n care crete tria lor relativ,
n cele dou tipuri de cromatografie de repartiie.
n cromatografia ionic (IC) se folosesc soluii diluate de
electrolii ca: NaOH, NaHCO3, HCl, iar n cea de excluziune steric
solveni simpli evident compatibili cu polimerii, separai unii de alii
dup dimensiuni.
O alt cale de mbuntire a separrilor existent n LC (cale
inexistent n GC) este folosirea gradienilor de eluie. De exemplu, n
GC, prin modificarea eluentului gazos nu se constat nici o mbuntire
a calitii separrii, n sensul mririi selectivitii. n HPLC, din contr,
solventul are o contribuie important n procesul de separare, dar nu
trebuie neglijat importana decisiv a cuplului faz mobil faz
staionar. Dei unii compui sunt reinui slab prin coloan, ieind
destul de repede, cei reinui puternic ies din coloan dup un timp
cteodat nepractic de lung, lucru care determin diluarea n eluent a
componentul n urma parcurgerii coloanei, aceasta micorndu-se
calitatea analizei. De aceea s-a recurs la introducerea treptat peste
primul solvent (eluent), a unui al doilea solvent mai tare sau a celui de-al
treilea, ceea ce n limbajul de specialitate se numete gradient de eluie
(sau de concentraie).
17. 5. Detectori
Tehnica HPLC s-a dezvoltat o dat cu perfecionarea detectorilor.
Am amintit (16.2) c detectorii n cromatografie sunt instrumente
analitice specializate, situate la ieirea eluentului dintr-o coloan i care
pot nregistra continuu substanele separate de ctre aceasta. Deci
detectorii constituie acea parte a instrumentaiei care permite s se
observe modul cum decurge separarea prin coloan fr a se vedea
componenii propriu zii ci doar semnalul lor. ntruct coloanele de
separare performante au capaciti de ncrcare mici, sistemul de detecie
trebuie s fie unul foarte sensibil. Totodat, pentru c n LC volumul de
prob este de ordinul microlitrilor (8-10 l), volumul detectorilor trebuie
s fie de volum apropiat pentru a se putea sesiza n mod continuu picul
cromatografic.
n calitate de instrumente se poate utiliza, n principiu, oricare
dispozitiv de analiz chimic cunoscut, pentru probe lichide, precum i
orice combinaii de instrumente fizice. De exemplu, n ultimul timp,
combinaia dintre un detector refractometric i unul bazat pe difuzia
luminii este extrem de eficace n analiza polimerilor n amestec cu
monomeri sau oligomeri dintr-un material. Exist chiar posibilitatea
creterii sensibilitii deteciei printr-o reacie chimic n urma adugrii,
cu un debit controlat, a unui reactiv potrivit. Tehnica se numete
derivatizare i se poate practica chiar nainte de introducerea probei n
coloan, dar i dup ieirea componentelor separate din coloan. Metoda
a fost utilizat pn n prezent n special legat de metodele
spectrofotometrice (colorimetrice) sau fluorimetrice mai ales pentru
analize de numeroi compui cu aceleai funciuni reactive (de exemplu
aminoacizi).
Caracteristicile detectorilor sunt asemntoare cu ale celorlalte
instrumente analitice i oarecum similare cu cele descrise la metoda GC
(v. cap. 16).
Lumin
doar eluentul pur, dar diferit n momentul n care n eluent mai apare un
component separat - antrenat de ctre eluent din coloan. n momentul
ieirii unui component are loc o deplasare a poziiei fascicolului
emergent din detector - deplasare care este proporional cu concentraia
i sesizat de ctre detectorul D. n cazul acestui tip de detector sunt
posibile i picuri negative, ceea ce face necesar aducerea liniei de baz
la jumtatea scalei lucru care, pe lng sensibilitatea relativ cobort (10-
5
molL-1), constituie un dezavantaj. Acest detector este universal, dar nu
poate fi utilizat n cromatografia cu gradieni deoarece, n acest caz,
compoziia eluentului la intrarea n coloan difer de cea de la ieire i se
modific continuu, neexistnd o linie de baz. De asemenea fenomenul
este foarte sensibil la temperatur (0,0001oC) fiind necesar
termostatarea, att a detectorului ct i a coloanei.
La coloan
Eluent
pur
Faz mobil
Faz mobil
plus prob
5
FT-IR reprezint prescurtarea denumirii, n l. engl. a Spectrometriei n IR cu
transformat Fourier.
6
Limita de detecie se calculeaz prin cantitatea de substan injectat care d un
semnal de 5 ori mai mare decr valoarea a zgomotului de fond pentru o substan cu
masa molar de 200 g.mol-1 injectat n 10 l pentru o coloan normal i n 1 l pentru
coloane capilare.
246 Cap. 17. Cromatografia de lichide de nalt performan
Spectrometria de capilare
Mas (MS) Necesar pulverizarea
Pre de cost ridicat
FT-IR 1 g Pre de cost ridicat Da
Difuzia luminii 10 g Adecvai pentru Da
macromolecule
Activitate optic 1 ng Pentru substane optic Nu
active
Electrozi ion 10 ng Doar pentru ioni sau Nu
selectivi compui ionizabili
Fotoionizare 1 pg 1ng - Nu
ntrebri de verificare
1. Care este locul HPLC n analizele instrumentale moderne?
2. Descriei prile componente ale unui cromatograf LC.
3. Cte tipuri de pompe se utilizeaz n HPLC?
4. Care este metoda cea mai folosit pentru introducerea probei n
HPLC?
5. Care sunt principalele mecanisme de separare n LC?
6. Prin ce se deosebete faza mobil n LC fa de GC?
7. Ce avantaj aduce utilizarea gradienilor de eluie?
8. Care este rostul unei precoloane?
9. Care sunt cele mai importante mecanisme de separare i care
dintre acestea este cel mai utilizat n practica curent?
10. Ce fel de grupri funcionale de pe suprafaa silicagelului
determin apariia unor cozi?
11. Cum se realizeaz fazele chimic legate pe silicagel?
12. Ce reprezint tria relativ a eluentului?
13. Cnd se folosete gradientul de eluie?
14. Ce dezavantaje au detectorii refractometrici?
15. Pentru ce substane se preteaz detectorii conductometrici?
Separarea prin schimb ionic 247
18.2. Detecia
La prsirea coloanei ionii nu pot fi detectai suficient de
sensibil, conductometric, n mod direct, deoarece au concentraii
coborte i sunt coninui n eluentul format dintr-un electrolit - cu o
concentraie comparabil sau chiar mai mare. De aceea s-a recurs la
"supresorul ionic". Acesta a fost realizat pentru prima dat de un grup de
cercettori american, n 1975 (H. Small i colab.) iar iniial a constat
dintr-o coloan-supresor, plasat n continuarea celei de separare, cu
rolul de a transforma eluentul (un acid sau o baz tare) n ap. De
exemplu, pentru eluentul amintit anterior - acidul clorhidric - coloana
supresor este umplut cu o rin schimbtoare de anioni, avnd o
capacitate de schimb mare (de tipul celei din fig. 18.1 dreapta) cu o
formul general: R-OH. Prsind coloana de separare eluentul,
coninnd acid clorhidric diluat, va ptrunde n coloana supresor unde se
va petrece reacia:
R-OH + (H+ + Cl-) R-Cl + H2O
prin care acidul utilizat drept eluent se transform n ap un
neelectrolit.
ntre timp, srurile se transform n hidroxizii corespunztori:
R-OH + (Na+ + Cl-) R-Cl + (Na+ + OH-)
+ -
R-OH + (K + Cl ) R-Cl + (K+ + OH-)
Apa fiind practic neionizat va permite detecia sensibil a hidroxizilor
total ionizai - ce au aprut din zonele formate iniial din cele dou
sruri. Schema unui cromatograf ionic este reprezentat n fig 18.2-a iar
n fig. 18.2-b este redat distribuia concentraiilor speciilor ionice la
ieirea din prima coloan, n punctul A (fig. 18.2-a). Pe aceeai figur
este prezentat conductan i la ieirea din supresorul ionic, n punctul
B. Semnalul (n S adic micro-Siemens) este cel care ar fi dat de ctre
un detector conductometric dac ar fi plasat n punctele A respectiv B.
Deoarece i eluentul este format din ioni care conduc curentul, nainte de
supresor semnalul va fi mai slab. Deci, cea de a doua cromatogram (fig.
18.2-b) este chiar semnalul detectorului din IC.
Dac se urmrete separarea a doi anioni, de exemplu Cl- i Br-,
eluentul ar putea fi, nu un acid ci o baz diluat, de ex. NaOH, sau
NaHCO3. n cazul acesta separarea se va realiza pe coloane de anionii i
250 Cap. 18. Cromatografia ionic (IC)
(a) (b)
Fig. 18. 2. Schema de principiu a cromatografiei
ionice (IC) (a) i a modului de aciune a
supresorului ionic (b). Aici RH este coloana de
separare iar ROH, coloana supresor
Membran semipermeabil
18.4. Aplicaii
Una din cele mai importante aplicaii este analiza speciilor
anorganice, cum ar fi analiza cationilor i anionilor din ape, soluii sau
fluide biologice dar i pentru analiza unor poluani (cum ar fi ionul NH4+
din apele naturale). Alte aplicaii imediate sunt analiza bilor de
galvanizare sau a lichidelor de natur apoas coninnd sruri: sucuri de
fructe, fluide industriale, alimente etc. Metoda permite i analiza unor
specii organice polare cum ar fi acizii sau aminele.
ntrebri de verificare
1. Care component a instrumentaiei este sediul separrii
cromatografice n cromatografia ionic?
2. Ce semnificaii au simbolurile GC, LC respectiv IC?
3. Care sunt eluenii folosii n IC?
3. Ce faze staionare utilizeaz cromatografia ionic?
4. Ce rezult din reacia RH + Na++ Cl- ? Dar din reacia ROH +
Na++ Cl- ?
5. Ce efect are supresorul ionic asupra deteciei? Ce rezultat are
acesta asupra semnalului?
6. Ce detector se utilizeaz cu precdere n cromatografia ionic?
7. Care este dezavantajul supresorului ionic cu schimbtori de ioni,
care a fost nlturat prin introducerea celui cu membran
schimbtoare (electrochimic)?
8. Cu ce tehnic se pot analiza anionii Cl- i SO42- din ape?
Supresorul electrochimic 253
O variant mai simpl a LC 253
Poziia final a
frontului la eluie
Linie de start
1 2 3 Et
Fig. 19.1. Placa cromatografic i poziiile relative ale
spoturilor pe linia de start, nainte de nceperea separrii. 1-3
reprezint probe necunoscute iar Et proba etalon, cunoscut
1
Din l. engl.
254 Cap. 19. Cromatografia planar
N S
A B
Fig. 19.4. Aspectul plcilor dup vizualizare. A) spoturi fluorescente
n lumin UV; B) spoturi vizualizate n lumin vizibil.
2
HPLC = High Performance Liquid Chromatography
175 Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF)
Aplicare Eluia 1
Rotire
Solvent 1
Eluia 2 Aspect final
Solvent 2
Fig.19.5. Modul de executare a cromatografiei n strat subire
bidimensionale
hn
H 2H
S/N = =
h n /2 h n
unde H este nlimea picului (semnalului) analitului iar hn - limea
domeniului n care variaz zgomotul de fond (intervalul 2).
O variant mai simpl dar mai laborioas de analiz cantitativ
const n splarea zonei corespunztoare analitului de pe suport ntr-un
Cap. 14. Spectrometria de fluorescen X (RXF) 178
I W
F
O D
MC Hg
P
Intensitatea fluorescenei
Intensitatea fluorescenei
1000 fg
800 fg 625 fg
750 fg 500 fg
250 fg
500
400
Cantitate Se , g
300
200
100
0 5 10 20 30 40 50
nlime , mm
ntrebri de verificare
1. Cu ce dispozitive se aplic probele pe placa cu strat subire n
PC?
2. Care adsorbeni se utilizeaz cu frecven maxim n PC?
3. Ce metode de separare cromatografice sunt aplicabile n PC?
4. Pe ce baz se realizeaz migrarea fazei mobile prin stratul subire
de adsorbent, n varianta clasic?
5. Ce sunt camerele de developare i de cte tipuri sunt acestea?
6. Unde se pot aplica probele pe plcile cromatografice n variantele
unidimensional i bidimensional?
7. De ce s-au introdus straturile subiri fluorescente?
8. Cum se pot observa componentele incolore pe placa
cromatografic dup eluare?
9. Ce este valoarea Rf?
10. Cum se realizeaz analiza calitativ n PC?
11. Care este cea mai exact variant de analiz cantitativ n PC?
Ce este o densitogram i la ce servete n analiza chimic?
264 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
X i
MA(X) = i =1
(20.1)
n
De exemplu pentru dou valori X1 i X2:
X + X2
MA(X) = 1
2
Media Geometric, MG(X), obinut din expresia:
n
MG(X) = n X
i =1
i = exp(MA(ln(X))
X i >0
(20.2)
1
http://www.emory.edu/CHEMISTRY/faculty/menger.html
2
alea = zar n l. latin
Valori medii i erori 265
X 2
i
ME(X) = i =1
= MA(X 2 )(20.4)
n
iar n cazul unui ir de dou valori X1 i X2 media eulerian se
calculeaz:
X 12 + X 22
ME(X)=
2
Mediana, m(X), este numrul:
X n + X n 2 , pentru n par
m( X ) = ( 2 ) ( +1)
2 (20.5)
X n +1 , pentru n inpar
( 2 )
aici nsemnnd c X este ir ordonat ale valorilor Xi adic valorile
sunt aranjate prealabil ntr-o ordine cresctoare.
n general, M(X) semnific oricare dintre valoarile medii
menionate
(20.1-20.5).
Moda X reprezint numrul care respect condiia ca frecvena sa de
apariie fi sa fie maxim:
X = {X i | f i = sup{ f j ,1 j n}} (20.6)
Anumite relaii statistice fac apel la aceast valoare.
n ncheiere trebuie menionat c valorile medii nu dau aceeai
valoare dar ntotdeauna acestea sunt poziionate astfele nct:
Aadar, limita preciziei acestei determinri este 7,7 (rotunjit 10) iar
rezultatul se va prezenta 2,74103. Dar cum n practic acest mod de a
proceda este incomod se poate renuna la aceast cale. Dar se va ine
cont c rezultatul trebuie s aib cel mult acelai numr de cifre
semnificative cu cele dou cifre supuse nmulirii. Sau i mai bine se
poate urma regula de rotunjire a rezultatului la acelai numr de cifre
semnificative cu cea mai imprecis dintre cantitile implicate n calcule.
Referitor la rotunjiri, dac dup ultima cifr semnificativ mai
apare un numr mai mare ca 5, aceasta se va rotunji prin adaus, dac
aceasta este o cifr mai mic dect 5, rotunjirea se face prin scdere.
Cnd ultima cifra este exact 5 se execut rotunjirea n funcie de cifra
precedent acesteia. Dac precedenta este impar se rotunjete prin
adaus iar dac cifra precedent este par, prin scdere, pentru a se media
efectele rotunjirilor.
3
Caracter aleator se atribuie unui fenomen ntmpltor sau supus legilor hazardului.
Elemente de statistic 269
Probabilitate
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 1 2 3 4 5 6
Eveniment
Fig. 20.1. Probabilitile de apariie a unuia dintre numerele
de pe feele unui zar cu 6 fee (1/6)
4
O msurtoare instrumental care duce la un rezultat este un eveniment aleator.
270 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
0.1
0.08
Probabilitate
0.06
0.04
0.02
0
0 1 2 3 4 5 6 7
Eveniment
Fig. 20.2. Variaia probabilitii de apariie a
mediei numerelor a de pe feele a dou zaruri
( x )2
1
P(x ) =
2 2
e (20.11)
2
unde x ia valori pe domeniul [-, +] iar valorile i sunt constante
pozitive. n statistic P(x) mai poart denumirea de densitate de
probabilitate. Aceast distribuie mai poate fi simbolizeaz N(x, , )
pentru o reprezentare prescurtat iar uneori notaia N(, ) se folosete
pentru a exprima faptul c o anumit funcie are proprietile amintite
mai sus. Valoarea constant poart numele de valoare medie (sau
medie), reprezentnd media tuturor evenimentelor iar poart numele
de deviaie (sau abatere) standard o msur a mprtierii valorilor x n
jurul mediei.
Elemente de statistic 271
0.1
P ( x)
0
20 x 20
Fig. 20.3. Aspectul unei distribuii normale Gauss
aici =0, =5. P(x) este probabilitatea de a se produce
evenimentul x. Suprafaa de sub curb este 1 adic
limita sumei tuturor probabilitailor
x i
= i =1
(20.12)
n
n
(x )
2
i (20.13)
= 2 ; 2 = i =1
n
unde xi este o determinare individual iar n reprezint numrul total de
determinri.
0.08
P ( x) 0.06
0.04
0.02
0 0
0 4 8 12 16 20 24 g
0
-3 -2 -1 x 24
2 3
(x )
n
2
i x
s2 = i =1
, s= s2 (20.15)
n 1
5
Vezi un manual didactic de statistic, de exemplu: Potra G. Teodor, Probabiliti i
Statistic Matematic. Procese Stochastice, TRANSILVANIA PRESS, Cluj-Napoca,
2003, p.111.
276 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
0.12
0.12 Date ndoielnice
0.1
0.08
P ( x) 0.06
0.04
0.02
0 0
0 4 8 12 16 20 24 g
0
-3 -2 -1 x 24
2 3
Fig. 20.5. Situaia probabilitii datelor ndoielnice
6
sinonim cu empirical modelling, curve fitting sau forecastig
280 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
7
H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of
Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999).
Regresia n analiza instrumental 281
d
i =1
2
i = minim (20.30)
b1 i
i =1
d = (y
i =1
2
i i b 0 b1x i )
2
(20.32)
b1 = i i2 i 2 i
n xy x y
(20.36)
n x i ( x i )
care prin mprirea numrtorului i numitorului cu n devine:
b1 =
x i y i x yi . (20.37)
x i2 x xi
inndu-se cont i de faptul c este adevrat relaia y = b 0 + b1 x , se
poate afla de aici b0:
b 0 = y b1 x . (20.38)
Aadar, se cunosc parametrii iniial necunoscui - b0 i b1 ai
ecuaiei dreptei de regresie prezentat prin modelul matematic formulat
prin ecuaia (20.27).
Regresia n analiza instrumental 283
8
Se renun la diferenialele de ordin superior.
284 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
V = V2 V1 (20.46)
Eroarea se va calcula, considernd din nou c erorile acioneaz n
acelasi sens:
V = V1 + V2 (20.47)
Dac considerm un caz i mai complicat, de exemplu y = a+b-c
cu incertitudinile respective notate sy, sa, sb, sc se va calcula
incertitudinea rezultatului din ecuaia:
s y = s a2 + s 2b + s c2 (20.48)
iar eroarea relativ, pentru cel mai fericit caz:
sy
y = (20.49)
a +bc
Se observa c valoarea erorii relative depinde mult de valoarea
rezultatului final. O valoare mic a rezultatului duce automat la erori
relative mari. De exemplu, s considerm cazul unei diferene de volum
mici. Dac avem, ntr-un prim caz, o eroare de citire de 0,02 ml la un
volum total de 40 ml, msurat prin diferen, nseamn c eroarea
relativ a msurtorii de volum este:
0,02 + 0,02 0,04
V = V = = = 0,01 sau 0,1%
V 40 40
Dac cu aceeai biuret msurm, ntr-un alt caz, doar 4 ml atunci:
0,02 + 0,02 0,04
V = V = = = 0,1 sau 1%
V 4 4
Sau, cu alte cuvinte, n acest ultim caz se face o eroare de 10 ori mai
mare. De aceea trebuie evitate msurtorile care implic obinerea unor
concentraii foarte mici chiar dac sunt obinute prin diferene ale unor
cifre mari. n cazurile monitorizrii poluanilor mediului aflai, prin
natura lor, n concentraii joase ne putem de aceea atepta la valori
extrem de mari ale erorilor.
Eroarea unui produs. S considerm cazul erorii aprute prin
calculul unui produs: y = x1x2. Aici, eroarea rezultatului se va calcula, n
urma aplicrii ecuaiei (20.41):
y = x1 x 2 + x 2 x 1 (20.50)
iar eroarea relativ:
y x1 x2
y = = + (20.51)
y x1 x2
286 Cap. 20. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori
9
n urma derivrii n raport cu variabila V, termenul al doilea ar avea semnul -.
Considerand cazul cel mai nefavorabil (erorile actioneaz n acelai sens) am scris
semnul + n loc de -.
Regresia n analiza instrumental 287
Anexa 1
Ecuaia lui Bragg
A
verticale din punctul A pe
razele incident i emergent
D B d
de pe planul al doilea de
C atomi (cu alte cuvinte trasnd
Fig. 2. Construcie ajuttoare pentru segmentele AD i AB, egale).
obinerea ecuaiei lui Bragg. Razele 2
Se poate remarca c diferena
i 3 sunt aceleai cu cele de pe fig. 1
Anexa 1 289
sin= CB = CB
AC d
unde d este distana dintre planele de atomi (AC = d).
De aici :
CB = dsin
Dar DC = CB = dsin. Deci, diferena de drum DC + CB se poate scrie:
DC + CB = 2dsin
Se mai cunoate din fizic condiia de interferen constructiv -
diferena de drum ntre cele dou raze s fie un numr ntreg de lungimi
de und (n). Scriind aceast condiie :
2dsin = n
am scris tocmai ecuaia lui Bragg, folosit mult att n XRF ct i n
difracia cu raze X.
290 Anexa 2
Anexa 2
2
1
PROBA
S C g (E i , Ii )i (E )
Ii = i i
4sin 1 (E) + (E i )
sin1 sin 2
unde : Ii este intensitatea observat pentru linia caracteristic a
elementului i, E energia radiaiei incidente, Ei energia liniei
caracteristice a elementului i msurat, S aria suprafeei iradiate a
probei, Ci concentraia elementului i n prob, gi o constant de
proporionalitate caracteristic elementului i, 1 unghiul dintre
suprafaa probei i radiaia X incident, 2 unghiul dintre suprafaa
probezi i detector, unghiul solid al radiaiei care ptrunde n
detector, (Ei, Ii) rspunsul instrumentului la energia Ei a liniei
caracteristice pentru elementul i, i(E) coeficientul de absorbie masic
al elementului i la o valoare a energiei radiaiei incidente E, (E)
coeficientul total de absorbie al probei pentru energia radiaiei incidente
E, (Ei) coeficientul total de absorbie al probei la valoarea energiei
liniei caracteristice a elementului i.
Mai trebuie amintit c
(E) = C j j (E)
j
13
Sherman, J., Spectrochim. Acta. 7, 283, 1955.
14
Shiraiwa, T., Fujino, N., Japanese Journal of Applied Physics, Vol. 5, No. 10, pg.
886-899, October 1966.
292 Anexa 3
Anexa 3
t M(1+k B)
= (8)
N
Scriind n ecuaia (1) diferena de la numrtor conform ecuaiei (2), i
nlocuind din ecuaia (8) se obine dup rearanjare ecuaia:
N kB kA
RS = (9)
4 1+ kB
nmulind n ecuaia (9) i numrtorul i numitorul cu kB se obine:
N kB kA kB
RS = (10)
4 1+ kB kB
expresie n care putem rearanja numrtorul convenabil:
N kB kB kA
RS = (11)
4 1+ kB kB
cu scopul de a separa cei trei factori amintii la nceput. mprind apoi
numrtorul i numitorul celui de-al treilea factor la kA i nlocuind n
expresia aprut raportul kB/kA cu coeficientul de selectivitate (v. ec.
15.14 de la 15.4), se obine ecuaia final:
N kB 1
RS = (12)
4 1+ kB
adic ceea ce era de demonstrat. Primul factor depinde de eficiena
coloanei, al doilea de capacitatea coloanei iar ultimul de selectivitatea
coloanei. Cu ct acetia vor fi mai mari fiecare cu att rezoluia unei
separri va fi mai bun.
Se poate remarca faptul c influena factorului de capacitate pare
redus. Acest lucru este adevrat n cazul coloanelor gaz-cromatografice
cu umplutur obinuit cnd k are valori cuprinse ntre 5 i 100. n
aceste condiii raportul k/(1+k) este foarte apropiat de 1 i ntr-adevr
contribuia factorului de capacitate a coloanei asupra rezoluiei este
neglijabil. Dar, la coloanele capilare unde k ia valori cuprinse ntre 0,1
i 5 datorit micorrii accentuate a volumului fazei staionare, efectul
factorului de capacitate devine important. Acest efect este mai clar
observat de pe graficul din figura 1.
294 Anexa 3
k
1+k
1
5 10
Anexa 4
SEMNAL DETECTOR
SEMNAL DETECTOR
X, E
S S
TIMP TIMP
Fig. 1. Cele dou probe executate pentru o analiz prin metoda adausului standard a
substanei X. Proba I (stnga) este obinut pe o prob necunoscute (X, N) iar
proba II (dreapta) este obinut folosind o prob etalon cunoscut (X, E). n
ambele cazuri este prezent standardul intern, cunoscut, n aceeai cantitate
Anexa 5
Selecia deviat
Selecia nedeviat
Fig. 1. Distribuia unei populaii statistice i aspectul unei
selecii ne-deviate i a unei selecii deviate. Se observ c
media unei selecii ne-deviate este practic identic cu a
ntregii populaii din care s-a fcut selecia
Un exemplu edificator
.12 Ansamblul populaiei n acest sens este nlimea
0.1 oamenilor (v. fig. 2). Se tie
f ( x)
femei brbai c nlimea populaiei umane
Frecven
Anexa 6
*
Ecuaii de regresie
Cel mai cunoscut model matematic de estimare a parametrilor
ecuaiilor de regresie este cel fundamentat de Kolmogorov prin
minimizarea riscului, un model cunoscut sub denumirea de metoda
celor mai mici ptrate:
K( X, Y, B) = ( y y) = ( b 0 + b 1 x y)
2 2
(1)
unde X,Y,B sunt vectorii coloan ai variabilei independente, variabilei
dependente respectiv a coeficienilor.
De menionat c au fost dezvoltate i alte metode de estimare a
parametrilor, bazate pe alte funcii de pierdere (sume de reziduuri) dup
cum urmeaz:
1. R. Fisher, 1912, metoda verosimilitii maxime:
F( X, Y, B) = 1 e = 1 e
2 2
( y y ) 2 ( b 0 + b1 x y ) 2
, (2)
2. J. Newman, A. Waad, metoda minimax:
NW( X, Y, B) = y y , (3)
3. Bayes, 1750, metoda probabilitii aposteriori maxime:
0, y y < D ( Y Y ) 2
NW( X, Y, B) = Y )
. (4)
1, y y
D( Y
2
j=1 i = 0
n cazul de mai sus, soluia dat de algebra liniar sistemului de ecuaii:
*
H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some
Applications of Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-
456 (1999).
300 Anexa 3
2
N p i i
k
b x j y j = 0, k = 0, p
b j=1 i = 0
este, dup aranjarea sumelor:
p
N k i N k
i=0
b i
x j x j = x j y j k = 0, p
j=1 j=1
dat de ecuaia:
B=CZ-1
unde:
N
Z = ( z ik ) 0 i p = ( x kj x ij ) 0 i p i
0 k p j=1 0 k p
N
C T = (c k ) 0 k p = ( x kj y j ) 0 k p
j=1
15
D. Lorber; K. Faber and R. Kowalski, Anal. Chem., 1983, 55, 643
Bibliografie 301
BIBLIOGRAFIE
abaterea standard, 5
analiz chimic, 1
calitativ, 1
cantitativ, 1
analize tehnice, 2
buletin de analiz, 8
eroare, 3
exactitate, 3
flux analitic, 2
funcie
de rspuns, 6
liniar, 6
limit de detecie, 6
matricea probei, 6
monitorizare, 1
precizie, 4
reacie specific, 5
reactivi, 9
de puritate analitica, 9
p.a., 9
registru de analize, 7
reproductibilitate, 4
RSD, 4
selectivitate, 5
sensibilitate, 5
substan
etalon, 3
extracia
cu solveni, 19
n stare supracritic, 19
lichid-solid, 18
Luarea probei
n metodele instrumentale de monitorizare, 20
pentru analiz, 11
luarea probelor
de aer, 22
pregtirea probei, 14
prob, 11
medie, 12
compoziie, 11
dezagregare, 15
gazoas - vapori, 23
oxizilor refractari, 17
reducerea, 13
reprezentativ, 13
sub form granular, 12
topirea cu fondani, 16
tratarea cu acizi, 15
solvent supracritic, 20
Reactivi i soluii etalon 3