Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
5.1. INTRODUCERE
În capitolul precedent am arătat că, atunci când fasciculul laser este incident pe un ţesut
biologic, o parte din fascicul este reflectată, iar restul penetrează în ţesut. Radiaţia reflectată
are două componente: reflexia directă (Fresnel) şi reflexia difuză. Reflexia Fresnel are un
unghi de reflexie egal cu unghiul de incidenţă al radiaţiei şi are o valoare de câteva procente
(în funcţie de indicii de refracţie pentru ţesut şi pentru mediul înconjurător). Acest tip de
reflexie intervine datorită neadaptării
indicilor de refracţie. Restul
fasciculului ce pătrunde în ţesut
suferă procese de absorbţie şi
împrăştiere multiplă. În funcţie de
coeficientul de atenuare, o parte a
fasciculului poate fi transmisă prin
ţesut. Interacţiile posibile între
radiaţia laser şi ţesut sunt ilustrate în Fig. 5.1. Interacţia radiaţiei laser cu ţesutul biologic.
figura 5.1.
Energia radiaţiei laser absorbită este convertită în căldură, care determină creşterea
temperaturii ţesutului. Gradul de împrăştiere depinde de lungimea de undă a fasciculului
laser şi de proprietăţile optice ale ţesutului. O parte din radiaţia împrăştiată în ţesut este
îndreptată înainte (împrăştierea înainte) şi se adaugă radiaţiei transmise, iar o altă parte este
îndreptată înapoi (retroîmprăştierea), putând părăsi interfaţa ţesut-mediu înconjurător şi să
se adauge radiaţiei reflectate direct. Spre deosebire de aceasta, reflexia difuză are unghiuri
de reflexie aleatorii. Aşadar, măsurarea radiaţiei reflectate de ţesut include reflexia directă
a suprafeţei şi o parte din radiaţia retroîmprăştiată. În mod analog, măsurarea radiaţiei
transmise include fasciculul direct şi o parte din radiaţia împrăştiată înainte. Radiaţia laser
retroîmprăştiată sau împrăştiată înainte depinde de reflectanţa internă şi de proprietăţile de
absorbţie ale ţesutului. Aceste proprietăţi pot fi modificate de distrugerea termică a
ţesutului. De asemenea, proprietăţile termice ale ţesutului variază cu temperatura şi
conţinutul său de apă.
Laserii cu emisie în ultraviolet, ca de exemplu laserii cu excimeri ArF, KrF şi XeCl,
având lungimile de undă de 193 nm, 248 nm şi respectiv 308 nm, precum şi laserii din
infraroşu mijlociu, ca de exemplu laserii cu Er:YAG (2,94 µm), CO (5-6 µm) şi CO2 (9-11
µm) au proprietatea că radiaţia lor este puternic absorbită de ţesuturi. Adâncimea de
penetrare (adică adâncimea la care intensitatea radiaţiei este redusă la un factor 1/e datorită
absorbţiei şi împrăştierii) pentru aceste lungimi de undă este cuprinsă între 0,25 şi 35 µm
(figura 4.52). La aceste lungimi de undă, împrăştierea nu este semnificativă în comparaţie
cu absorbţia, după cum este ilustrat în figura 5.2a.
130 BIOFOTONICĂ
Pentru lungimile de undă cuprinse
între 450 şi 590 nm, care includ laserii
cu argon şi laserii cu coloranţi, zona
optică a fasciculului laser este
cuprinsă între 0,5 şi 1,5 mm. Atât
absorbţia cât şi împrăştierea sunt
substanţiale şi lumina în ţesut are o
componentă colimată puternic,
Fig. 5.2. Împrăştierea şi absorbţia radiaţiei laser: înconjurată de o regiune în care lumi-
(a) absorbţie dominantă; (b) împrăştiere şi na este multiplu împrăştiată (figura
absorbţie egale; (c) împrăştiere dominantă. 5.2b). Componenta retroîmprăştiată a
luminii este o componentă majoră a
reflectanţei totale măsurate: valori de 15-40 % din fasciculul incident sunt tipice pentru
aceste lungimi de undă.
Între 590 nm şi 1,5 µm, domeniu care include laserii cu coloranţi, laserii cu He-Ne,
diodele laser şi laserii cu Nd:YAG cu emisie la 1,06 µm sau 1,32 µm, împrăştierea domină
asupra absorbţiei şi zona optică variază între 1 şi 8 mm. În timp ce lumina trece prin ţesut,
structura colimată a fasciculului este înlocuită de lumina complet difuză, după cum se vede
în figura 5.2c. Retroîmprăştierea creşte semnificativ şi lumina reflectată măsurată
reprezintă 35-70 % din radiaţia incidentă (Yoon et al. 1987). Pentru un fascicul incident
normal, reflectanţa totală este datorată în primul rând retroîmprăştierii, cu excepţia cazului
când absorbţia este mult mai mare decât împrăştierea, caz în care se observă în principal
reflexia Fresnel. Gradul de retroîmprăştiere este funcţie de proprietăţile optice dependente
de lungimea de undă ale ţesutului.
Figura 5.3 prezintă o schiţă a comportării spectrale a pielii la om. În conformitate cu
tabloul general deja prezentat, adâncimea de penetrare în ultraviolet este foarte mică, atinge
un maxim la 780-800 nm şi scade din nou la valori foarte mici în infraroşu mijlociu.
În medicina laser, dozimetria iradierii trebuie să includă toate măsurătorile sau deter-
minările necesare pentru a stabili cu exactitate ceea ce se întâmplă în ţesut şi nu numai la
suprafaţa sa prin parametrii de iradiere. O problemă importantă este de a decide care dintre
parametrii fizici de la suprafaţa ţesutului sunt adecvaţi pentru a caracteriza corect diferitele
efecte laser din ţesut. Dacă se defineşte doza numai ca o măsură a expunerii radiante pe
suprafaţa ţesutului, atunci diferitele efecte în ţesut, ca
de exemplu, cele fotochimice, fototermice
(fotocoagulare şi fotovaporizare), de fotoablaţie şi
fotomecanice (fotodistrugere) nu pot fi caracterizate
corespunzător.
Parametrul important care poate determina tipul de
interacţie între radiaţia laser şi ţesut este energia
depozitată pe unitatea de volum, în fiecare punct şi în
fiecare moment, după cum se poate observa din figura
5.4. Ea depinde de energia laser absorbită şi de
disiparea căldurii în ţesut. Dar, întrucât este dificil să
se determine în timp real energia efectivă pe volum şi
în timp, este necesar să se găsească alţi parametrii, mai
adecvaţi pentru caracterizarea procesului de interacţie.
Astfel, diversele modalităţi de afectare a ţesutului în Fig. 5.4. Energia depozitată pe
timpul unui tratament medical dat pot fi caracterizate unitatea de volum şi în timp este
de un parametru fizic efectiv, după cum rezultă din cel mai important parametru în
tabelul 5.1. interacţia laser-ţesut.
În afara acestui parametru fizic efectiv, timpul de iradiere determină regimul de in-
teracţie propriu-zis. Interacţia laser-ţesut este un proces optic, termodinamic şi biochimic
cuplat. Procesul depinde de parametrii laserului, ca şi de distribuţia şi absorbţia energiei
laser în mediu, geometria ţesutului şi proprietăţile optice şi termice ale ţesutului.
a) Parametrii laserului:
- lungimea de undă;
132 BIOFOTONICĂ
- parametrii fasciculului (puterea/energia, mărimea fasciculului de iradiere, iradian-
ţa/fluenţa, distribuţia intensităţii, divergenţa, calitatea fasciculului);
- timpul de expunere (timpul de iradiere, durata/forma impulsului, frecvenţa de repetiţie
a impulsurilor);
- unghiul de incidenţă al iradierii.
b) Caracteristicile ţesutului:
- proprietăţile optice (absorbţia, împrăştierea, anizotropia, reflexia, indicii de refracţie
ai ţesutului şi ai mediului înconjurător);
- proprietăţile termice (temperatura, capacitatea termică, difuzivitatea termică);
- proprietăţile mecanice (densitatea, elasticitatea, tonicitatea, anizotropia mecanică);
- compoziţia chimică (conţinutul de apă, prezenţa unor cromofori endogeni sau exogeni);
- anatomia ţesutului (microstructura, aranjamentul fizic al celulelor, organitelor şi ţe-
suturilor, structura omogenă sau heterogenă a ţesutului);
- fiziologia ţesutului (starea metabolică şi funcţiile ţesutului şi organismului, răspunsul
organismului la regenerare şi vindecare, fazele unor bioritmuri ale organului sau
organismului viu).
c) Caracteristicile interacţiei:
- tranziţiile de fază;
- distribuţia undelor de şoc şi de stres.
d) Caracteristicile mediului ambiant:
- condiţiile de graniţă la suprafaţa ţesutului;
- aerul, apa, sângele (perfuzia poate fi considerată ca un efect intern de răcire);
- presiunea;
- temperatura;
- umiditatea.
e) Caracteristicile produselor de ablaţie:
- compoziţia chimică;
- structura geometrică;
- proprietăţile optice.
În afară de faptul că procesul de interacţie între radiaţia laser şi ţesutul biologic depinde
de un număr foarte mare de parametri, o parte din aceşti parametri au în plus o comportare
dinamică, modificându-se odată cu încălzirea ţesutului. Aceste modificări pot fi reversibile
sau ireversibile.
Sintetic, procesul de interacţie este reprezentat în figura 5.5.
Constituentul major pentru cele mai multe ţesuturi biologice este apa. Astfel, corpul
vitros conţine 98 % apă, discurile intervertebrale 78-85 %, prostata de om 83 %, aorta 79 %,
corneea 78 %, cartilajul 65-75 %, pielea (derma) 62-70 %, ficatul de om 69 %, cristalinul
63 %, ţesutul adipos 20-40 %, osul 9-32 %, dentina 13,5 %, smalţul 2-3 %. Aceste procente
reprezintă greutatea apei din ţesuturile respective.
Predominanţa apei în ţesuturi determină importanţa vaporizării apei ca mecanism de
distrugere termică în ţesuturile iradiate cu laser. Viteza de formare a vaporilor de apă şi
expansiunea lor stabilesc caracteristicile esenţiale ale efectelor în ţesut. În plus, trebuie
avute în vedere modificările în timp ale proprietăţilor mecanice pentru ţesuturile încălzite
atunci când se elaborează modele sau se programează experienţe, pentru înţelegerea şi
controlul mecanismelor dominate de apă la interacţia laser-ţesut.
Interacţii laser – ţesut 133
Fig. 5.5. Interacţia laser-ţesut şi o parte din parametrii ce determină acest proces
(Müller et al. 1989b).
Conţinutul de apă în ţesuturi poate fi împărţit într-o fracţie de apă liberă şi o fracţie de
apă legată. Fracţiile tipice de apă legată din conţinutul total de apă sunt aproximativ 40 %,
depinzând de ţesut (Harpole 1989). Apa liberă are presiunea de vapori şi căldura de vapo-
rizare normale ale apei pure, în timp ce apa legată are o presiune de vapori mai coborâtă şi
o căldură de vaporizare mai mare. Apa se găseşte în interiorul matricii intercelulare şi în
celulele vii ale ţesutului moale.
Având în vedere importanţa apei din ţesuturi în cazul interacţiei acestora cu radiaţia
laser, vom prezenta pe scurt câteva elemente privind spectroscopia apei.
Apa are trei moduri de vibraţie
care sunt active în infraroşu
(figura 5.6): n1 este modul de alun-
gire simetrică (n1 = 3 625 cm-1), n2
este modul de deformare simetrică
(n2 = 1 595 cm-1), iar n3 este modul Întindere Deformare Întindere
de alungire asimetrică (n3 = 3 756 simetrică simetrică asimetrică
cm-1). Atât modurile fun- n1 = 3652 cm n2 = 1595 cm-1 n3 = 3756 cm-1
-1
armonicelor sau combinaţiilor la 1,44 µm (2n2 + n3) şi 1,94 µm (n1 + n2) se deplasează spre
lungimi de undă mai mici şi cresc în intensitate. Banda de alungire fundamentală de la 2,94
µm se deplasează de asemenea spre lungimi de undă mai mici, dar coeficientul de absorbţie
se micşorează rapid odată cu creşterea temperaturii (Walsh şi Cummings 1994).
Cele mai importante vârfuri de absorbţie ale apei sunt create de fundamentala modului
de alungire vibraţională asimetrică la 2,94 µm şi de armonice la 1,94 µm.
În tabelul 5.2 se prezintă proprietăţile fizice ale apei (Sigrist 1986, Valderrama
et al. 1991).
5.1.3.1. Corneea
Corneea este partea transparentă a stratului extern de ţesut al ochiului, care se continuă
cu sclera. Corneea protejează conţinutul intraocular şi refractă lumina. Pentru a îndeplini
aceste funcţiuni, corneea îşi păstrează rezistenţa sa şi transparenţa. Corneea la om are o
grosime de 550 µm în zona centrală şi 700 µm la periferie şi are un diametru de 12 mm pe
orizontală, respectiv 11 mm pe verticală. La animale, corneea poate atinge o grosime de
1,5 mm. Integrarea corneei în globul ocular este prezentată în figura 5.7.
Elementele refractive cheie ale ochiului sunt corneea, cristalinul şi lungimea axei
optice. Dintre aceste elemente, numai corneea este accesibilă clinic pentru măsurători şi
modificări. 80 % din puterea optică a ochiului (48 de dioptrii) este asigurată de cornee, iar
restul de cristalin. Deoarece neadaptarea indicilor de refracţie este mult mai mare la graniţa
dintre aer şi cornee faţă de toate celelalte interfeţe din ochi, cea mai mare parte din refracţia
care proiectează o imagine clară pe retină apare la suprafaţa corneei. Cristalinul îşi poate
Interacţii laser – ţesut 135
modifica forma, pentru a mări puterea de focalizare în cazul vederii de aproape
(acomodare).
5.1.3.2. Pielea
carbonizare) şi fotovaporizarea (> 300 0C, piroliză, vaporizarea matricii solide a ţesutului).
O extindere interesantă a regimului fototermic este termoterapia interstiţială. În ţesutul
patologic se introduce o fibră optică, care este ghidată prin rezonanţă magnetică nucleară
(RMN) sau alte tehnici moderne de imagistică. În acest mod este posibil să se încălzească
un volum relativ mare de ţesut şi să se realizeze o coagulare omogenă. Extensia necrozei
este controlată prin timpul de expunere.
Regimul de fotoablaţie este un proces netermic, care se realizează cu laserii cu excimeri
din ultraviolet, cu impulsuri scurte. Datorită energiei mari a unui foton cu lungimea de undă
în ultraviolet (6,4 eV pentru 193 nm) este posibilă ruperea legăturilor chimice ale
biomoleculelor. Efectul de fotoablaţie se manifestă prin îndepărtarea unui strat subţire de
ţesut, într-o manieră care poate fi comparată cu o explozie la scară mică. Acest regim de
interacţie se aplică cu succes în oftalmologie (keratotomie) şi în cardiologie (angioplastie).
Regimul fotomecanic se realizează prin străpungerea optică în ţesuturi transparente.
Sunt utilizaţi laseri cu impulsuri foarte scurte (ns, ps sau fs) şi cu iradianţe de TW. Iradianţa
mare generează câmpuri electrice puternice (106-107 V/cm), care determină disocierea sau
ionizarea materialului implicat. Producerea plasmei în focar este însoţită de unde de şoc şi
unde de stres, care determină distrugerea ţesutului. Unda de şoc distruge structura ţesutului
(fotodistrugere) sau dezintegrează materialul biologic (fotofragmentare). Astfel, radiaţia
laser este convertită în energie cinetică.
Unii autori consideră numai trei regimuri de interacţie, regimul de fotoablaţie fiind
inclus în cel fotomecanic. De asemenea, denumirea regimurilor de interacţie poate diferi
(de exemplu, regimul fotomecanic mai este denumit electromecanic).
proces fotomedical dat pot fi aranjaţi în patru familii distincte, care împart o singură
mărime fizică: expunerea radiantă. O singură variabilă diferenţiază aceste procese şi anume
timpul de expunere. Impulsurile laser lungi corespund regimurilor fotochimic şi fototermic,
iar impulsurile scurte determină regimurile de fotoablaţie şi fotomecanic.
Boulnois clasifică aceste regimuri de interacţii după scara de timp astfel: a) regimul
fotomecanic (electromecanic) (impulsuri de 10 ps-10 ns), în care emisia termoionică sau
producerea multifotonică a electronilor liberi determină străpungerea dielectrică şi
generarea plasmei; (b) regimul de fotoablaţie (impulsuri în ultraviolet de 10 ns-100 ns),
în care fotodisocierea directă rezultă ca urmare a ruperii legăturilor intramoleculare
datorită absorbţiei fotonilor; c) regimul fototermic (undă cvasi-continuă de 1 ms-10 s),
în care are loc conversia energiei electromagnetice în energie termică; d) regimul
fotochimic (undă continuă, 10-1 000 s), în care fasciculele laser de putere mică sunt
utilizate pentru terapie (low level laser therapy – LLLT) sau pentru activarea unor sub-
stanţe chimice sensibile spectral.
Diagrama Boulnois sintetizează datele publicate privind utilizarea medicală a laserilor.
Căsuţele includ punctele corespunzătoare la mai mult de 50 de variabile optime deter-
minate experimental, ce acoperă majoritatea aplicaţiilor fotomedicale ale laserilor. Sunt
140 BIOFOTONICĂ
incluse datele obţinute cu laserii Nd:YAG, Ar, Kr, CO2, excimeri (KrF, ArF, XeCl),
coloranţi şi He-Ne. Din diagrama Boulnois rezultă două caracteristici importante.
În primul rând, datele nu sunt răspândite uniform, ci sunt aproximativ aliniate pe un
domeniu de 12 ordine de mărime pe o diagonală în care expunerea radiantă variază între
10 şi 1 000 J/cm2. Această corelare reciprocă între iradianţă şi timpul de interacţie într-un
domeniu foarte larg demonstrează că doza de energie specifică necesară pentru obţinerea
unei transformări biologice indusă cu laserul este aproape constantă. Rezultă deci că timpul
de expunere în care este livrată doza de energie reprezintă singurul parametru ce distinge
procesul de transformare în ansamblu.
În al doilea rând, diagrama pune în evidenţă patru grupe de transformări separate, care
sunt situate pe o diagonală a diagramei, în funcţie de timpul de interacţie. Această clasifi-
care în patru familii fotomedicale serveşte ca bază de analiză pentru fiecare proces de
iradiere laser, în funcţie de parametrii caracteristici, dar în primul rând de timpul de in-
teracţie (iradieri în undă cvasi-continuă - regimurile fotochimic şi fototermic şi iradieri în
impulsuri scurte - regimurile de fotoablaţie şi fotomecanic).
Diagrama Boulnois extinde legea de reciprocitate Bunsen-Roscoe din fotochimie, care
afirmă că atât timp cât produsul între iradianţă şi timpul de expunere este acelaşi, efectul
fotochimic va fi acelaşi. În sistemele biologice se observă o anumită abatere de la legea
reciprocităţii, deoarece procesele de vindecare compensează unele distrugeri induse de
Fig. 5.13. Cubul Jacques ce ilustrează Fig. 5.14. Încadrarea schematică în cub a
interacţiile laser-ţesut (Jacques 1992a). terapiei fotodinamice (Jacques 1992a).
Fig. 5.15. Hipertermia ca efect termic Fig. 5.16. Fotocoagularea ca efect termic
(Jacques 1992a). (Jacques 1992a).
Un alt exemplu, ilustrat în figura 5.16, se referă la fotocoagulare. Diferenţierea între
fotocoagulare şi hipertermie nu este strictă, dar în general fotocoagularea necesită numai o
expunere scurtă la temperatură ridicată, iar efectele sunt imediate şi vizibile.
Fotocoagularea este o formă mai evidentă de distrugere termică decât hipertermia. O
aplicaţie tipică de fotocoagulare este sudura dezlipirii de retină cu ajutorul laserului cu
argon. Efectul imediat este coagularea celulelor (x2, y1, z2) şi a colagenului extracelular (x2,
y1, z3). Răspunsul biologic întârziat implică inflamarea la nivel celular (x2, y2, z2) şi la nivel
de ţesut (x2, y2, z3). Răspunsul la vindecare implică activarea fibroblastelor pentru sinteza
colagenului (x2, y3, z2) şi formarea cicatricii la nivel de ţesut (x2, y3, z3). Răspunsul ulterior
la cicatrizare este sudura retinei de ţesutul înconjurător.
Un ultim exemplu de interacţie, ceva mai complicat, se referă la procedura de ablaţie a
pielii cu laserul cu excimer ArF (l = 193 nm, tp = 14 ns). Cubul Jacques permite înţelegerea
diferitelor aspecte ale acestei interacţii laser-ţesut complexe (figura 5.17).