SPORUL (endosporul) BACTERIAN -Reprezintă o diferenţiere celulară care asigură supravieţuirea bacteriei
în condiţii nefavorabile ale mediului extern.
Procesul de formare a sporului este numit sporogeneză, sporulare. Este declanşat în special de carenţe nutritive sau condiţii nefavorabile ale mediului extern. Proprietăţile sporului -Inactiv metabolic -Număr redus de enzime -Conținut mare de aminoacizi cu sulf - Conţinut scăzut de apă liberă -Conţinut mare (până la 10%) de dipicolinat de calciu -Rezistent la temperaturi (100 - 180 grade C) şi pH extreme, desicare, radiaţii, agenţi chimici şi fizici SPORUL BACTERIAN - forma de rezistentă si de conservare a speciei - nu se colorează cu coloratii obisnuite; - evidentiat prin metode speciale - o bacterie formează un singur spor - un spor dă nastere unei singure bacterii - diferă ca formă, dimensiune, pozitie EVIDENŢIEREA SPORILOR: INCOLORI PE FROTIURI COLORATE PRIN COLORAȚIA SIMPLĂ SAU GRAM. COLORAREA SPECIALĂ DUPĂ AUJESZKY (SPORUL SE COLOREAZĂ ÎN ROŞU, IAR CITOPLASMA ÎN ALBASTRU) GRANULAŢIILE DE VOLUTINĂ Reprezintă polimeri anorganici de polimetafosfati. Servesc în calitate de rezervă de fosfaţi şi pot interveni în metabolismul energetic. Interesul medical: la agentul difteriei, Corynebacterium diphtheriae, granulele de volutină se localizează la extremităţile celulei, iar la corynebacterii nepatogene sunt repartizate neuniform în citoplasmă. La tratarea cu unii coloranţi bazici granulele de volutină se colorează în altă culoare, de ex. în roşuviolet la colorarea cu albastru de metilen – fenomenul metacromaziei. EVIDENŢIEREA GRANULAȚIILOR DE VOLUTINĂ Colorația Loeffler (cu albastru de metilen) Colorația Albert 1. Frotiul fixat se coloreaza cu soluția Albert A (toluidin albastru, verde de malahit, acid acetic, alcool etilic) – 5 min 2. Se înlătura colorantul și fără a spăla se aplică sol Albert B (sol apoasă de I2+KI) – 2 min 3. Se înătura reactivul, se spală, se usucă și se examinează Rezultat: Citoplasma – verde, granulațiile – albastruînchis/negru CAPSULA - învelişul extern neobligator al unor bacterii. Reprezintă polimeri organici sintetizaţi în mediul natural de viaţă al bacteriilor (exemplu: în țesuturile ma/org.). Se disting: -Capsula adevărată (peste 0,2µm), vizibilă la microscopul optic -Microcapsula, detectată la microscopul electronic -Capsula flexibilă (slime, glicocalix), o reţea laxă de fibre polizaharidice, care difuzează în mediu. Compoziţia chimică a capsulei: apă şi substanţe organice (polizaharide, mucopolizaharide, peptide) Funcţiile capsulei: -Barieră selectivă pentru substanţe toxice (antibiotice, ioni metalici) -Barieră protectoare faţă de factori antiinfecţioşi (complement, fagocite), bacteriofagi, protozoare -Rezervă nutritivă -Asigură aderarea bacteriei la substrate – ţesuturi sau suporturi inerte (placa dentară, biofilm pe catetere, proteze, instrumente, etc) -Specificitate antigenică de specie sau tip (Ag K) Evidenţierea capsulei Metodă negativă (coloraţia Burri-Gin) -Pe lamă se amestecă suspensia bacteriană cu tuş de China/India, se etalează, se usucă - Frotiul se fixează cu alcool -Se colorează frotiul cu fucsină apoasă Rezultatul: capsula apare ca un halou incolor pe fondul negru. Citoplasma bacteriilor se colorează în roşu. Coloraţia Giemsa (capsula se colorează în roz) – coloraţie pozitivă a capsulei FLAGELII Lat. flagellum= bici – structuri filamentoase proteice, întâlnite la unele bacterii, bacili, spirili şi spirochete. Funcţii: intervin în mobilitatea bacteriană, reprezintă Ag H al bacteriilor. Tipurile de bacterii după numărul şi poziţia flagelilor: Bacterii monotriche ,Bacterii lofotriche (un mănunchi de flageli la o extremitate) Bacterii amfitriche (câte un flagel sau un mănunchi de flageli la fiecare extremitate) Bacterii peritriche (flageli pe toată suprafaţa celulei) Prezența flagelilor, numărul și aranjarea lor sunt caracteristici de specie, utile în identificare și taxonomie. Evidenţierea flagelilor I - metode directe -Microscopia electronică -Coloraţia specială Loeffler: mordansarea cu tanină, săruri de aluminiu, Fe (pentru a mări volumul flagelilor), apoi colorarea cu fucsină sau albastru de metilen).... II – metode indirecte (studierea mobilităţii bacteriilor) -Studierea preparatelor native “picătură suspendată” sau “între lamă şi lamelă” (microscopia cu contrast de fază sau pe fond negru) microscopul cu fond întunecat - la care se examinează preparatele native, între lamă şi lamelă, efectuate direct dintr-un produs în care se caută bacterii a căror lăţime nu depăşeşte 0,1-0,2 µm (ca, de exemplu, evidenţierea treponemelor din şancrul sifilitic) microscopul cu contrast de fază - se foloseşte la examinarea preparatelor native în care microorganismele şi celulele au aspect tridimensional, FIMBRIILE / PILII Fimbriile (pilii comuni)– elemente proteice fine, rigide, scurte repartizate pe suprafaţa celulei bacteriene G - în special. Sunt formate din subunităţi proteice identice (pilina), implantate în ME. Numărul fimbriilor per celulă: zeci – sute Funcţii: asigură adeziunea bacteriilor la suprafeţe inerte, la celule sau alte bacterii, reprezintă antigenul F Pilii conjugativi – structuri capiliforme de natură proteică, prezenţi în număr de 1-10 per celulă (numai la bacteriile ce găzduiesc plasmide conjugative F). Funcţii: -transferul de ADN prin conjugare -receptori pentru unii bacteriofagi Evidenţierea pililor: microscopia electronică