METODE MICROSCOPICE

DE DIAGNOSTIC

 Diagnosticul histopatologic;
 Citodiagnosticul.
 DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

 Definiție : Este diagnosticul stabilit pe baza examinării microscopice a secțiunilor

histologice.
Se efectuează pe produse recoltate prin:
1. BIOPSIE (recoltarea unor fragmente de țesuturi / organe în timpul vieții);

a. Microbiopsia:
 Puncția – biopsie (pentru organele profunde: ficat, splină, rinichi, măduvă
osoasă);
 Chiuretajul (pentru mucoase: endometru, col uterin, cavitatea bucală sau leziuni
superficiale: piele);
 Endobiopsia (mucoasa gastrică, rectală, laringiană, bronșică).
b. Biopsia chirurgicală:
 Incizională (în scop diagnostic);
 Excizională (în scop diagnostic și terapeutic).
2. EXEREZĂ CHIRURGICALĂ – piese de exereză chirurgicală.
3. PRELEVARE DE FRAGMENTE DE ȚESUTURI / ORGANE ÎN
TIMPULNECROPSIEI
 prelevate necropsice.

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Endoscop Endobiopsie colonică

 Puncția biopsie hepatică

Produs de chiuretaj uterin

Hiperplazie endometrială Vilozități coriale (placentare)

 BILET DE TRIMITERE CĂTRE
LABORATORUL DE ANATOMIE PATOLOGICĂ

Serviciul medical în care s-a efectuat recoltarea............

Nr. de înregistrare / Data...........

Către
Laboratorul de Anatomie Patologică,

Numele și prenumele bolnavului...............................................................

Vârsta................Profesia.................Domiciliul............................................
Diagnostic clinic..........................................................................................
Antecedente fiziologice și patologice.........Tratamente efectuate.............
Produsul de biopsie.............................Fixator............................................

Semnătura și parafa medicului (care a efectuat recoltarea)

DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC

Timpii de prelucrare a prelevatului tisular:

 Recoltarea (indicații):
 leziuni întinse → biopsii multiple,
 leziuni ulcerate → recoltare din margine
 Fixarea: formol 10% tamponat, lichid Carnoy, Bouin
 Includerea la parafină
 Secționarea blocurilor tisulare la microtom (3 – 5μ)
 Colorarea secțiunilor histologice.

Tehnici de colorare:
 Tehnici uzuale:
• Hematoxilină-Eozină,
• Tricromice (van Gieson, Simionescu, Masson);

 Tehnici histochimice:
• PAS (MPZ neutre, glicogen, membrane bazale, fungi);
• Fontana/Grimelius (granule neurosecretorii);
• Gordon-Sweets, Gomori (fibre de reticulină, membrane bazale);
• Perls (hemosiderina – Fe3+);
• Fontana (melanina);
• von Kossa (calciu);
• Negru Sudan, Sudan 3, Scharlach (lipide neutre);
• Roșu Congo (amiloid);
• Albastru Alcian (mucine acide).
 BULETIN DE ANALIZE
ANATOMO-PATOLOGIC

Unitatea (Laboratorul de anatomie-patologică)...................................

Nr. de înregistrare.................................................................................
Data examinării.....................................................................................

Buletinul de diagnostic anatomo-patologic

Numele și prenumele bolnavului.............................Vârsta...................

CNP ..............................Clinica (în care este internat pacientul)..........
Diagnostic clinic....................................................................................
Descriere detaliată a modificărilor constatate la ex.
microscopic........ .........................................................................................................
Concluzii finale (diagnostic histopatologic)...........................................

Semnătura și parafa medicului anatomo- patolog

CITODIAGNOSTICUL

 Definiție: Este diagnosticul stabilit pe baza examinării microscopice a modificărilor

morfologice ale celulelor (izolate) conținute de diferite produse biologice etalate pe
lame (frotiu).
 Avantaje:
 Oferă un diagnostic rapid;
 Este ieftin;
 Puțin traumatizant;
 Ușor de repetat;
 Util în acțiunile de screening.

Tehnici de recoltare a produselor patologice

1. Exfoliere (spută, secreție prostatică, mamară, vaginală, cervicală);
2. Puncție-aspirație din revărsate seroase (lichid pleural, peritoneal, articular),
conținut structuri chistice;
3. Grataj/periaj (col uterin, tract respirator);
4. Lavaj organe cavitare (căi respiratorii, vezică urinară);
5. Amprentare (leziuni cutanate, ganglioni limfatici);
6. Puncție aspirație cu ac fin (tiroidă, prostată, glandă mamară, pancreas), tumori
solide profunde, măduvă osoasă.
 BILET DE TRIMITERE CĂTRE LABORATORUL DE
ANATOMIE-PATOLOGICĂ

Serviciul medical în care s-a efectuat recoltarea............

Nr. de înregistrare / Data...........

Către
Laboratorul de Anatomie Patologică/Citodiagnostic,

Numele și prenumele bolnavului...................................................................

Vârsta............CNP..................Profesia.................Domiciliul...........................
Diagnostic clinic..............................................................................................
Antecedente fiziologice și patologice.........Tratamente efectuate................
Felul produsului din care s-a efectuat frotiul..................Nr. de frotiuri.........

Semnătura și parafa medicului

(care a efectuat recoltarea)

Timpii de execuție a frotiurilor

1. Etalarea
 Directă: secreții naturale, puroi, produse obținute prin puncție-aspirație din organe
solide, amprentare;
 După centrifugare 5-10 minute, apoi etalarea sedimentului: lichide din revărsatele
seroase, structuri chistice, lavaje și urină.
2. Fixarea
 Agitare în aer câteva secunde și uscare (pentru colorația May-Grunwald-
Giemsa);
 Alcool 96% (pentru colorația Papanicolau);
3. Colorarea
 MGG - foarte simplă
 Papanicolau - pentru citologia cervico-vaginală, bronșică
 Speciale pentru a evidenția lipidele, glicogenul, mucinele
 Imunocitochimie

Frotiu de sânge
 Frotiu lavaj bronșic

Frotiu inflamator Frotiu tumoral

Frotiu cervical

Amprentă tumorală ganglionară

 Laboratorul care a efectuat citodiagnosticul..............
Nr. de înregistrare.......................................................
Data examinării...........................................................

Buletin de citodiagnostic

Numele și prenumele pacientului ............................................. Vârsta............

CNP......................Clinica ...................... Medicul care a trimis .........................
Diagnostic clinic................................................................................................
Descrierea modificărilor constatate la examenul microscopic ........................
Concluzii (diagnostic sintetic) ..........................................................................
Recomandări .....................................................................................................

Semnătura și parafa medicului citolog

Tehnici speciale de diagnostic

Imunohistochimia
 Imunofluorescența pentru detectarea (prin marcare cu coloranți
fluorescenți) autoanticorpilor, antigenelor, complexelor antigen-anticorp sau
fracțiunilor complementului.
 Imunoperoxidaza (prin metoda peroxidază-antiperoxidază sau/și complex
Avidin-Biotin) utilizează anticorpi monoclonali/policlonali pentru detectarea:
 Originii celulelor neoplazice (diagnosticul diferențial între carcinom-
sarcom-limfom):
o Citokeratină - carcinom;
o Antigen comun leucocitar - limfom;
o Mioglobină - rabdiomiosarcom;
o Vimentin - tumori conjunctive;
o Antigenul factor VIII-tumori vasculare.
 Antigenelor oncofetale în tumori (α-feto-proteina, antigenul
carcinoembrionar);
 Hormonilor /receptorilor hormonali;
 Oncogenelor, genelor supresoare tumorale (p53);
 Tiparea imunofenotipică a limfoamelor maligne.

Histoenzimologia
detectarea enzimelor;
Microscopia electronică pentru diferențierea între:
Carcinom-melanom-sarcom;
Adenocarcinom-mezoteliom;
Timom-limfom-seminom;
Tumori cu celule mici, tumori cu celule fusiforme;
Tumori endocrine și non-endocrine;
Nefropatii glomerulare cu mecanism imun.
Tehnici de biologie moleculară:
PCR (Polymerase Chain Reaction);
Citometria în flux pentru analiza ADN (ploidia);
Hibridizarea in situ pentru identificarea fragmentelor de ADN;
Analiza rearanjării genelor.