Controlul calității produselor radiofarmaceutice

Farmacist rezident: Bianca-Diana CRISTE

Contents
Introducere.............................................................................................................................................................3
Proceduri de control al calității...............................................................................................................................4
Metode de evaluare a parametrilor radioactivi........................................................................................................4
Verificarea activității...........................................................................................................................................4
Identitatea radionuclidică...................................................................................................................................5
Puritatea radionuclidică......................................................................................................................................6
Puritatea radiochimică (PRC)..............................................................................................................................6
Cromatografie pe hârtie și în strat subțire......................................................................................................6
Extracție în fază solidă....................................................................................................................................7
Cromatografie de lichide de înaltă performanță.............................................................................................7
Electroforeza...................................................................................................................................................7
Puritatea chimică................................................................................................................................................7
Metode pentru evaluarea parametrilor farmaceutici.............................................................................................8
pH.......................................................................................................................................................................8
Apirogenitatea....................................................................................................................................................8
Examinarea vizuală.............................................................................................................................................8
Sterilitatea..........................................................................................................................................................9
Concluzii................................................................................................................................................................. 9

2
Introducere

Produsele radiofarmaceutice sunt compuși radioactivi care prezintă caracteristici de diagnostic/sau

terapie pentru diverse afecțiuni umane. Organizația Mondială a Sănătății descrie produsele
radiofarmaceutice drept formulări medicinale unice care conțin radioizotopi utilizați în principalele
zone de diagnostic și/sau terapie. În medicina nucleară majoritatea radiofarmaceuticelor sunt
administrate în scopuri de diagnostic, în timp ce restul au indicații terapeutice(1). Pentru diagnostic,
este esențial ca produsul să aibă parametri de control al calității acceptabili pentru ca studiul de
medicină nucleară să fie eficace și să nu expună pacientul la radiații inutile. În cazul
radioterapeuticelor, îndeplinirea normelor de control al calității este obligatori, deoarece nerespectarea
acestora poate pune viața pacientului în pericol(2). În medicina nucleară, majoritatea produselor
radiofarmaceutice se administrează pacienților ca injecții intravenoase. Deoarece radiofarmaceuticele
sunt destinate administrării la om, acestea trebuie să fie supuse unor măsuri stricte de control al
calității. Practic, controlul calității presupune mai multe teste specific și măsurători care asigură
puritatea, potența, identitatea produsului, siguranța biologică și eficacitatea radiofarmaceuticelor(1).
Conform Farmacopeei Europene și Americane, toate injecțiile trebuie să fie sterile, apirogene, fără
particule străine la pH adecvat, putere ionică și osmolalitate adecvate. În plus, injecțiile radioactive ar
trebui să includă puriatea radiochimică și radionuclidică și au radioactivitate corectă prezentă la
momentul indicat al injectării. În acest scop, controlul calității produselor radiofarmaceutice este
crucial și implică două aspecte diferite, parametrii farmaceutici și parametrii radioactivi. Parametrii
farmaceutici asigură că nicio contaminare microbiologică, pirogenă sau cu particule nu poate dăuna
pacienților, în timp ce parametrul radioactiv este conceput pentru a asigura că expunerea intenționată la
radiații a pacienților este menținută la minimum prin confirmarea că radioactivitatea, puritatea
radiochimică și radionuclidică sunt asigurate(1,3). Acești factori suplimentari au un efect asupra dozei
totale de radiații pentru pacient, deoarece impuritățile radionuclidului și/sau compoziție chimică a
acestuia pot afecta biodistribuția radiofarmaceuticului injectat, și în consecință, doza de radiații către un
anumit organ sau către tot corpul(3). Procedurile de control al calității trebuie efectuate întotdeauna în
urma preparării radiofarmaceutice și înainte de administrarea la pacienți pentru a asigura un produs
radiofarmauceutic optim. Unele dintre aceste test de calitate sunt efectuate de producători, în timp ce
altele trebuie să fie efectuate de personalul preparator.

Un produs radiofarmaceutic este un compus radioactiv care posedă caracteristici de diagnostic și/sau
terapeutice pentru bolile umane. Datorită cantității mici de radiofarmaceutice în scop de diagnostic
3
administrate oamenilor, acestea sunt inactive din punct de vedere farmacologic; aceasta fiind cea mai
imperativă diferență între radiofarmaceutice și alte produse farmaceutice. Cu toate acestea, unele
radiofarmaceutice sunt active farmacologic. Ca oricare alte substanțe chimice, radiofarmaceuticele pot
fi clasificate pe baza structurii lor chimice, formei fizico-chimice sau a mecanismului de acțiune. Din
punct de vedere fizico-chimic, radiofarmaceuticele se încadrează în categorii precum elemente simple
131
cum ar fi I, substanțe chimice complexe (precum molecule mici radiomarcate, anticorpi și peptide),
99m
elemente celulare din sânge (cum ar fi RBR marcate cu Tc) și particule (agregatul de albumină
99m
marcat cu Tc). Acest tip de categorii pot oferi unele informații despre procesul lor de control al
calității; chiar dacă membrii unei categorii nu pot fi gestionați cu exact același proces de control al
calității. Una dintre cele mai utile clasificări pentru radiofarmaceutice se bazează pe mecanismul lor de
acțiune. Unele radiofarmaceutice pot acționa prin unul sau mai multe mecanisme(1).

Scopul controlului calității în radiofarmacie este de a asigura că radiomedicamentele sunt eficace,

sigure din punct de vedere toxicologic și conțin ingrediente cunoscute de calitate verificată, în proporții
cunoscute și cu puritate predeterminată. Se cer cele mai înalte standarde de producție pentru
radiomedicamente(4).

Asigurarea calității se referă la acuratețea cu care rezultatul unei anumite proceduri se apropie de
așteptări fără erori sau artifacte. Asigurarea calității implică toate eforturile care conduc la acest scop.
Prin distincție, termenul de control al calității se referă la măsurătorile specifice obținute pentru a se
asigura că un anumit aspect al procedurii este satisfăcut(5).

Proceduri de control al calității

Aceste proceduri includ teste de puritate radiochimică, radionuclidică și chimică, precum și verificări
privind aspectele farmaceutice. Unele dintre aceste teste sunt efectuate de producători, în timp ce altele
trebuie realizate de personalul care prepară compozițiile. Procedurile de control al calității trebuie
întotdeauna efectuate după pregătirea radiomedicamentului și înainte de administrarea la pacient pentru
a asigura un produs radiomedicinal optim.

Metode de evaluare a parametrilor radioactivi

Verificarea activității
Există limite foarte stricte privind cantitatea de radioactivitate care poate fi administrată pentru fiecare
tip de investigație care urmează să fie efectuată. Aceste limite sunt stabilite de organele legislative din
4
fiecare țară. Prin urmare, toate preparatele radioactive trebuie verificate pentru activitate înainte de
administrare. Majoritatea calibratorilor de radionuclizi utilizați în radiofarmacie sunt camere de
ionizare. Calibratoarele comerciale au încorporat factori de scalare pentru radionuclizi individuali care
iau în considerare capacitatea de ionizare a izotopilor și returnează rezultatul în unitățile
corespunzătoare (kBq sau MBq sau mCi). Cu toate acestea, acest tip de calibrator nu este ideal pentru
toți radionuclizii. Radiațiile cu energie scăzută, cum ar fi cea produsă de iod [ 125I], pot fi atenuate
înainte de a ajunge la gaz și măsurarea poate fi inexactă. De asemenea, particulele beta de înaltă
energie interacționează cu peretele camerei, iar măsurarea activității se bazează pe radiația
Bremsstrahlung produsă. Activitățile eliberate într-o radiofarmacie trebuie măsurate la o precizie de 2-
5%. Este foarte important ca, calibratorul de radionuclizi utilizat să funcționeze corect și ar trebui
urmat un regim strict de asigurare a calității pentru a asigura acest lucru. Zilnic, calibratorul este
verificat pentru precizie împotriva unei surse sigilate de referință u durată lungă de viață (ex. Cobalt
[57Co] sau americium [241Am]), ar trebui de asemenea o verificare anuală a liniarității. Determinarea cu
precizie a activităților scăzute ale radionuclizilor care emit raze X și gamma poate fi efectuată folosind
un contor de scintilație, în care un cristal de scintilație produce un fulger de lumină atunci când este
lovit de o particulă ionizantă sau foton. Lumina produsă este convertită într-un semnal electric de către
un fotomultiplicator, acesta putând fi apoi amplificat și numărat. Razele gamma și X sunt cel mai bine
detectate cu cristale de iodură de sodiu activate cu taliu (NaI(Tl)). Într-un contor de puțuri sursa este
plasată în interiorul unui puț forat în centrul unui cristal cylindric. Numărarea scintilației lichide este
utilizată în măsurarea emițătorilor beta, cum ar fi hidrogenul [3H] și carbon [14C].

Identitatea radionuclidică
Un radionuclid poate fi identificat prin măsurarea timpului de înjumătățire al radionuclidului și/sau
determinarea energiilor radiațiilor emise.

Timpul de înjumătățire este măsurat cu un detector adecvat. Trebuie să existe o activitate suficientă în
eșantion, astfel încât să poată fi măsurată pentru mai mulți timpi de înjumătățire, dar limitată pentru a
minimiza defectele ratei de numărare, cum ar fi timpi morți. Se fac măsurători multiple în aceleași
condiții geometrice, pentru un timp cel puțin egal cu trei timpi de înjumătățire prevăzuți. Se trasează un
graphic cu logaritmul răspunsului în timp al insturmentului. Timpul de înjumătățire este calculat din
graphic și nu trebuie să difere cu mai mult de 5% față de timpul de înjumătățire menționat în
Farmacopee. Natura și energia radiației emise pot fi determinate prin mai multe proceduri în funcție de
tipul de radiație emisă. Radionuclizii care emit raze gamma sau raze X detectabile pot fi analizați

5
folosind spectrometrie gamma. Spectrul poate fi utilizat pentru a identifica ce nuclizi sunt prezenți într-
o sursă și în ce cantități.

Puritatea radionuclidică
Aceasta este cantitatea de radioactivitate datorată radionuclidului în cauză în comparație cu activitatea
măsurată a preparatului radiofarmaceutic. De obicei este exprimat ca procent. Monografiile relevante
din Farmacopee dau limite ale impurităților radionuclide în fiecare preparat. Dacă sunt prezente
niveluri semnificative de alți radionuclizi, atunci distribuția biologică poate fi modificată. Impuritățile
de radionuclizi pot apărea ca urmare a procesului de fabricație, de exemplu, pentru nuclizii produși de
cyclotron pot exista contaminanți din cauza impurităților din reacția de energie.

Datorită diferențelor în timpul de înjumătățire al diferiților radionuclizi care pot fi prezenți într-un
preparat, puritatea radionuclidică se modifică în timp. Cerința purității radionuclidic trebuie îndeplinită
pe toată perioada de valabilitate.

Puritatea radiochimică (PRC)

Este important de știut că majoritatea izotopilor radioactivi sunt atașati la ligand și nu sunt liberi sau
atașati la o altă entitate chimică, deoarece aceste forme pot avea o biodistribuție diferită. Aceasta este
numită puritate radiochimică. În scanarea diagnostică, biodistribuția diferită a substanțelor chimice
radioactive contaminate ar putea interfera cu diagnosticul clinic prin ascunderea regiunii de interes și
interferând cu interpretarea scanării. Acest lucru ar putea duce la revenirea pacientului pentru o scanare
repetată cu toate implicațiile de cost pentru department și o doză repetată de radiații pentru pacient sau,
mai grav, la o interpretare greșită a imaginilor. Biodistribuția anormală se poate datora și altor cauze,
cum ar fi medicația pacientului, prin urmare determinarea PRC ar putea ajuta la clarificarea unei
scanări anormale prin excluderea unui produs defect. În produsele radiofarmaceutice utilizate pentru
terapie, un PRC scăzut ar putea însemna o doză inacceptabilă de radiații pentur organele și țesuturile
sănătoase. Pentru majoritatea produselor radiofarmaceutice, limita inferioară a PRC este de 95%, adică
cel puțin 95% din izotopul radioactiv trebuie să fie atașat de ligand. Determinarea PRC poate fi
efectuată printr-o varietate de metode cromatografice:

Cromatografie pe hârtie și în strat subțire

În aceste metode, o picătură mică de radiofarmaceutic este pusă pe fundul unei benzi de mediu support
(ex. Hârtie, foi acoperite cu silicagel). Banda este pusă într-un rezervor care conține o cantitate mică de
solvent. Solventul migrează în sus pe bandă. Componentele radiofarmaceuticului sunt separate în
funcție de solubilitatea în solvent și adsorbția la mediul support.

6
Unul dintre cele mai mari dezavantaje ale metodelor de cromatografie pe hârtie și în strat subțire de
determinare a RCP este puterea de rezoluție a metodelor. Majoritatea metodelor utilizate în mod
obișnuit vor rezolva doar o singură component și astfel pot fi necesare două sau trei metode pentru a
identifica toți contaminanții majori dintr-un produs. Timpul poate fi, de asemenea, un factor limitative,
unele metode necesită 20-30 de minute pentru a se dezolva, sau chiar mai mult.

Extracție în fază solidă

O varietate de adsorbanți de silice sunt disponibili ambalați în cartușe sau coloane de unică folosință.
Sorbentul va reține în mod selectiv tipuri specific de compuși chimici din proba încărcată pe coloană.
Există mulți sorbenți diferiți disponibili și mulți furnizori și producători de coloane și cartușe.
Componentele pot fi eluate selectiv prin alegerea atentă a solvenților. Eluații sunt colectați și au
activitate suficientă pentur a putea fi numărați într-un calibru de radionuclizi. Procedura durează
aproximativ 5 minute, asigurându-se că determinarea RCP poate fi efectuată înainte de administrarea
dozei pacientului.

Cromatografie de lichide de înaltă performanță

Celelalte metode pot să nu fie suficiente pentru a identifica toți compușii prezenți într-un produs. HPLC
are o sensibilitate și o putere de rezoluție mai mare decât metodele simple de TLC. Separarea HPLC
operează asupra proprietăților hidrofile/lipofile ale componentelor unei probe applicate. Emițătorii
gamma sunt detectați utilizând un contor de scintilație conectat la un contor de viteză. Alte detectoare
pot fi conectate în serie permițând identificarea simultană a compușilor. Este util să existe tehnici
disponibile pentru a elimina o cauză a oricărei scanări anormale a pacientului. Pentru produsele
radiofarmaceutice preparate in-house sau compuși noi în scopuri de cercetare, o metodă HPLC pentru
estimarea purității radiochimice este esențială. Trebuie remarcat faptul că HPLC nu detectează
contaminanți coloidali și că acest lucru ar trebui estimate folosind metodele TLC.

Electroforeza
Electroforeza separă componentele dintr-o probă în funcție de sarcina și dimensiunea moleculelor.
Metoda de electroforeză cel mai des utilizată în radiofarmacie este în determinarea RCP a albuminei
radiomarcate, unde proba este rulată pe un support de hârtie de filtru într-un tampon de barbitonă.

Puritatea chimică
Puritatea chimică reprezintă proporția masei totale prezente în forma chimică declarată. În contextul
radiomedicamentelor, acest lucru se referă la cantitatea de specii chimice nedorite prezente. În procesul
de preparare a radiomedicamentelor cu durată scurtă de viață, impuritățile chimice includ toate
substanțele neradioactive care pot afecta etichetarea radioactivă sau pot produce direct efecte biologice
7
adverse(2). Puritatea chimică presupune identificarea și cuantificarea constituenților chimici individuali
sau a impurităților dintr-un preparat radiofarmaceutic. Un test de rutină pentru puritatea chimică este
efectuat pe Technețiu [99Tcm] soluție de pertechnetat de sodiu eluată dintr-un generator. Soluția poate fi
contaminată cu aluminiu, care provine din patul de alumină al coloanei generatorului. Prezența
aluminiului poate interfera cu prepararea unor preparate coloidale de Technețiu [ 99Tcm] și, de asemenea,
cu marcarea globulelor roșii cu Technețiu [ 99Tcm], provocând aglutinarea acestora. Aluminiul din eluat
poate fi detectat folosind un simplu test de hârtie care este disponibil comercial. Hârtia de filtru este
impregnată cu un agent de complexare a culorilor. O soluție standard de aluminiu (10mg ml -1) este
furnizată. O pată de soluție standard provoacă o schimbare de culoare a hârtiei. Un punct de eluat este
comparat cu punctul standard. Dacă culoarea este mai intensă în zona de eluat, atunci eluatul conține
mai mult de 10mg ml-1 aluminiu și implică o lipsă de stabilitate în coloană, în consecință eluatul trebuie
aruncat. Nu ar trebui să fie necesară efectuarea altor teste chimice pe radiofarmaceutice autorizate.
Produsele radiofarmaceutice fără licență trebuie verificate pentru puritatea chimică pentru a asigura
calitatea produsului. Aceasta ar include cuantificarea constituenților normali ai unui kit de marcare,
adică ligandul și reductorul. Precursorii de sinteză sau catalizatorii utilizați în preparat trebuie testați.
De obicei, acest lucru poate fi realizat folosind HPLC. Metodele de cromatografiere gazoasă sunt
utilizate pentru a testa trasoarele PET pentru solvenți reziduali utilizați în sinteza acestor agenți.

Metode pentru evaluarea parametrilor farmaceutici

pH
pH-ul preparatului trebuie să fie în intervalul acceptabil din punct de vedere fiziologic (5,5 – 8) sau la
pH-ul optim pentru stabilitatea preparatului. Este deosebit de important să se verifice pH-ul
radiofarmaceuticelor TEP (tomografie cu emisie de pozitroni), deoarece procedurile de operare
pregătitoare pot include condiții de pH extreme care necesită neutralizare. pH-ul poate fi verificat prin
plasarea unei picături de soluție pe hârtia de pH. Citirea se face prin referire la o scală colorimetrică de
pH. Sunt disponibile micro pH-metre care pot citi o picătură de lichid (10 µl) plasată pe electrozi.

Forța ionică, isotonia și osmolalitatea

Pentru a fi adecvat administrării umane, radiomedicamentele trebuie să posede, de asemenea, forța
ionică corectă, isotonia și osmolalitatea adecvate. Atunci când se diluează un radiomedicament, este
crucial să se utilizeze diluantul potrivit, deoarece pH-ul și forța ionică sunt aspecte importante pentru
asigurarea stabilității radiomedicamentului și compatibilității fiziologice. Pe cât posibil, ar trebui
utilizat același solvent ca în prepararea originală. Datorită capacității mari de diluție și tamponare a
sângelui, toleranțele pentru pH și osmolalitatea injecțiilor intravenoase sunt largi. Totuși, toleranțele
8
pentru pH și osmolalitate sunt critice pentru administrările intratecale. Prepararea și selecția
radiomedicamentelor, precum și diluanții folosiți pentru administrare intratecală necesită considerații
speciale(6).

Apirogenitatea
Endoxinele bacteriene sunt polizaharide din membranele bacteriene. Sunt solubile în apă, stabile la
căldură și filtrabile. Dacă sunt prezente într-un preparat și administrate unui pacient, pot provoca febră
și, de asemenea, leucopenie la pacienții imunodeprimați. Pentru a minimiza șansele ca pirogenii să fie
prezenți, este important ca preparatele să fie fabricate și distribuite în condiții aseptice și ca toate
consumabilele și echipamentele utilizate să fi fost tratate termic și să fie cunoscute ca fiind lipsite de
pirogeni. Majoritatea produselor sunt fără pirogeni. Produsele TEP, indiferent dacă sunt fabricate
comercial sau în spitale, trebuie testate pentru pirogeni înainte sau imediat după utilizare. Cea mai
populară metodă este testul lizat de amebocite limulus. Cu toate acestea, există date care confirmă că
unele preparate radiofarmaceutice pot cauza direct precipitarea sau interfera cu gelul care se formează.

Examinarea vizuală
Ca și în cazul tuturor preparatelor farmaceutice, radiofarmaceuticele trebuie supuse unei examinări
vizuale. Examinarea ar trebui să țină cont de problemele de protecție împotriva radiațiilor pentru
operator și să fie efectuată cât mai repede posibil, cu pregătirea în spatele unui ecran adecvat.
Flacoanele trebuie examinate pentru închideri nesigure, fisuri, particule de sticlă în lichid și
contaminare cu particule. De asemenea, seringile trebuie examinate pentru contaminarea cu
particule(5).

Sterilitatea
Testele de sterilitate sunt efectuate pentru a demonstra că radiofarmaceuticele sunt extrem de lipsite de
microorganisme viabile, inclusiv ciuperci și bacterii. Aceste teste trebuie efectuate aseptic astfel încât
să nu existe contaminări externe care să interfere cu probele de testat în timpul experimentului. Pentru
acest experiment este de preferat o hotă sterilă cu flux laminar și personal bine instruit pentru
efectuarea acestor teste. USP 32 indică ca testele de sterilitate să fie efectuate prin incubarea probei
radiofarmaceutice în două moduri diferite pentru a detecta contaminările cu bacterii și ciuperci:

 Pentru contaminările bacteriene se utilizează probe radiofarmaceutice care trebuie incubate în

fluid tioglicolat la 30-35°C timp de 14 zile.

9
  Pentru contaminările fungice, proba radiofarmaceutică trebuie incubată în mediu de digerare cu
soia-cazeină pentru incubare la 20-25°C timp de 14 zile.

Volumul probei pentru test ar trebui să fie cel puțin la fel de mare ca pentru o doză umană. Dacă
creșterea bacteriană este observată în oricare dintre teste, produsul radiofarmaceutic nu este steril(2,3).

Concluzii
Deoarece radiofarmaceuticele sunt destinate administrării umane, este esențial ca acestea să fie supuse
unor măsuri riguroase de control al calității. În esență, controlul calității cuprinde diverse teste și
măsurători specifice care garantează puritatea, potența, identitatea produsului, siguranța biologică și
eficacitatea acestora. Toate procedurile de control al calității care sunt aplicate medicamentelor non-
radioactive sunt valabile și pentru radiofarmaceutice. De obicei, aceste teste de control al calității sunt
realizate de producători de la începutul producției până la produsul finit. Totuși, introducerea kiturilor,
utilizarea tot mai frecventă a radionuclizilor cu viață scurtă și prepararea multor medicamente direct la
locul de utilizare necesită controale de calitate pe loc. Testele de control al calității se împart în două
categorii: teste fizico-chimice și teste biologice. Testele fizico-chimice arată nivelul impurităților
radionuclidice și radiochimice și determină pH-ul, forța ionică, osmolalitatea și starea fizică a probei.
Toți acești parametri trebuie să fie într-un anumit interval,conform specificațiilor farmacopeilor. De
exemplu, nivelul de puritate radionuclidică, puritatea radiochimică și impuritățile chimice pentru
fiecare radiomedicament sunt stabile. Este important de menționat că testele biologice pentru a
determina sterilitatea, absența pirogenilor și toxicitatea materialului sunt esențiale. Pentru a asgura
sterilitatea unui radiomedicament, produsul trebuie fabricat în condiții aseptice sau aplicând una dintre
metodele cunoscute pentru a atinge sterilitatea. În schimb, dacă un produs nu este liber de pirogeni, nu
există o modalitate de a-l face apirogenic și ar trebui eliminat.

10
Bibliografie

1. Molavipordanjani S, Hosseinimehr SJ. Fundamental concepts of radiopharmaceuticals quality

controls. Pharm Biomed Res. 2019;4(3):1–8.

2. International Atomic Energy Agency. Quality control in the production of radiopharmaceuticals.

Iaea Tecdoc. 2018;150.

3. Maltby P. Radiopharmacy quality control. Eur Assoc Nucl Med. 2009;CTE.

4. Committee AROF. 6 . Nuclear Medicine Procedures Control Medicine Facilities and Quality
Control. 1992;(iii):7–8.

5. Edam AN, Sulieman A, Sam AK, Salih I, Alkhorayef M, Bradley DA. Quality control of
radiopharmaceuticals and diagnostic nuclear medicine equipment. Radiat Phys Chem. 2020 Feb
1;167:108247.

6. Loveless VS. Quality Control of Compounded Radiopharmaceuticals. Qual Control Compd

Radiopharm Univ New Mex Coll Pharm. 2012;15(0039):1–34.

11