Hormoni 2 3.03.

2014

Mecanism de aciune H hidrosolubili

proteine G
sisteme generatoare de mesageri secunzi
Hormonii tiroidieni
Homoni pancreatici
 Hormoni mesageri primi

transmit semnale prin intermediul receptorilor

 NH3+
-helix transmembranar
Extracelular

Intracelular

-
OOC
 Complexul HR
transmite semnale n membran
unui sistem efector
prin intermediul unui sistem de cuplare, reprezentat de proteinele G.

Mesager prim

Receptor Protein G Sistem

efector

Mesager secund
(AMPc, GMPc, IP3, DAG, CA2+)

Rspuns biologic
 Sisteme de cuplare

Proteinele G
-se afl pe partea citosolic a membranei, asociate cu complexul HR
-leag nucleotide cu guanin: GDP sau GTP.

-sunt proteine oligomere, formate din trei subuniti proteice , b, g cu structuri

diferite.

leag nucleotidele GTP sau GDP i confer identitatea proteinei G.

b, inhib activitatea subunitii .

 Tipuri de proteine G:

Gs stimuleaz adenilat ciclaza;

Gi inhib adenilat ciclaza;

Gq activeaz fosfolipaza C

Gt sau transducina activeaz GMPcfosfodiesteraza dup

stimularea rodopsinei, ca urmare a absorbiei unui foton de

ctre retinal
 H R

GTP GDP
(mediu) (mediu)
HR

GDP. bg GTP sistemul

efector
(forma inactiv) (forma activ)

bg H2O

GDP toxina holeric

(inactiv)
H3PO4
 Mecanismul de actiune al proteinelor G

nlocuirea GDP cu GTP din mediu

formarea subunitii - GTP activ

inactivarea subunitii -GTP, ca urmare a activitii

enzimatice GTP-hidrolazice proprii

toxina holeric (enzim produs de bacteria Vibrio

cholerae) inactiveaz GTP-aza intrinsec subunitii s
GTP, proteina G rmnnd n forma activ
Sisteme efectoare generatoare de mesageri
secunzi

sistemul adenilat ciclazei;

sistemul fosfolipazei C;
sistemul guanilat ciclazei;
sistemul tirozin kinazei.
 Sistemul adenilat ciclazei

conine:
-receptori hormonali
-proteine Gs, Gi
-adenilat ciclaza
-fosfodiesteraza
 H care activeaz AC sunt, prin proteine Gs:

Glucagonul

Adrenalina prin receptori b-adrenergici b1 i b2

ACTH (adrenocorticotrop)

Parathormonul, Calcitonina

MSH, LH, TSH, somatostatina

H care inhib activitatea AC, prin proteine Gi:

adrenalina prin receptori 2

 Adenilat ciclaza
enzim membranar, activat de Gs i inhibat de Gi

catalizeaz formarea AMPc din ATP

NH2 NH2
N
HR
N N
N
O O O
O
-
P O P O P O H 2C N N N N
O Adenilatciclaza O H 2C
O
-
O
-
O
- O
O
P
HO HO -
O O OH
ATP
AMPc
 Fosfodiesteraza
Se afl n citosol i catalizeaz transformarea AMPc n AMP.

Este activat de: Ca2+, insulin, prostaglandine, i este inhibat de

metilxantine (cofein, teofilin), tiroidieni, steroizi.

NH2
Metilxantine NH2
N
N N
N
O
N N
O
-
P O H 2C N N
O H 2C
O
Fosfodiesteraza O
-
O
O
P
O
- O OH Insulin HO HO

AMPc Ca2+-Calmodulin 5`-AMP

 Mesagerii secunzi

poart informaia transmis de primul mesager

(hormonul):

-modific activitatea unor proteine intracelulare

-intervin n contracie sau n asigurarea permeabilitii membranare.

 AMPc
este un nucleotid ciclic, mesager secund pentru unii hormoni.

concentraia intracelular a AMPc depinde de: AC i

fosfodiesteraz

Activitatea reglatoare a AMPc:

-la procariote, controleaz exprimarea unor gene prin legarea

cu o protein reglatoare;

-la eucariote, activeaz protein-kinaze specifice, ex. protein

kinaza A.
 Protein kinaze AMPc dependente
Protein kinaza-AMPc dependent este un tetramer :
-2 subuniti reglatoare (R);
-2 subuniti catalitice (C).

Tetramerul R2C2 este inactiv.

subunitile R din tetramerul inactiv, leag cte dou molecule de
AMPc

Protein kinaza activ, activeaz prin fosforilare o protein

celular specific.
Cine confera specificitate
raspunsului hormonal ?
 Particularitatea rspunsului celular depinde de:

natura proteinelor substrat pentru protein kinaze i

de modul n care fosforilarea afecteaz funcia proteinei.

 Cum se stinge mesajul hormonal ?
 Fosfoproteinfosfatazele
aduc proteinele fosforilate la starea anterioar

prezint multiple izoforme

activitatea lor este reglat hormonal

intervin n:
procesele de diviziune celular

transcrierea i traducerea genelor

permeabilitatea membranar
 Amplificarea semnalului hormonal
se face n cascad

un singur complex H-R activeaz peste 100 de molecule Gs

Epinefrin 10 -10 M
Amplificare

Adenilat ciclaz
Amplificare
AMPc 10-6 M

kinaz
Amplificare
Enzim activat
Amplificare
Produs
STINGEREA MESAJULUI
HORMONAL N SISTEMUL
ADENILAT CICLAZEI
au loc astfel:

1) PKA fosforileaz R i
i inactiveaz
2) Fosfodiesteraza scade conc.
intracelular de AMPc
3) Fosfoprotein fosfatazele
defosforileaz Ser i Thr din
proteine
 Sistemul fosfolipazei C
receptori hormonali,
proteine Gq,
fosfolipaza C,
protein kinaza C
 Fosfolipaza C
enzim membranar

catalizeaz hidroliza fosfatidil inozitol 4,5-bisfosfatului (PIP2)

Produii reaciei de hidroliz sunt:

inozitol 1,4,5-trisfosfatul (IP3), i

diacilglicerolul (DAG).
H2 C O CO R1 H2 C O CO R1
Fosfolipaza C OP O3 H2
HC O CO
O
R2
OP O3 H 2
HC O CO R2
+ P O3 H2 O
OH
OH
OH

H2 C O P O H2 C OH OP O3 H2
OH
OH OH OH Inozitol 1,4, 5-trisfosfat (IP3)
Diacilglicerol (DAG)
OP O3 H2
Fosfatidilinozitol 4,5-bisfosfat (PIP2)
 IP3

determin eliberarea Ca2+ din reticulul endoplasmic n citosol

Ca2+ este o entitate chimic permanent

concentraia Ca2+ poate fi modulat numai prin deplasri ntre diverse

compartimente

Ca2+ citosolic pentru o celul de mamifer este de 10-7-10-6 M

Ca2+ extracelular este 10-3 M

 Concentraia mic a Ca2+ n citosol este meninut prin:

pompe de Ca2+

permeabilitatea natural foarte mic a membranelor pentru

cationi

mecanisme care depoziteaz Ca2+ n mitocondrii i reticul

endoplasmic (reticul sarcoplasmic n muchi)

 Ca2+ acioneaz ca mesager secund mpreun cu:
AMPc

GMPc

DAG sau

IP3
sau

independent de acetia

Rolurile reglatoare ale Ca2+ sunt mediate de proteine specifice de

legare a cationului
 Calmodulina

protein format din 148 aa

prezent n toate celulele eucariote n

concentraie mare

nu este limitant pentru un proces dat

poate fixa 4 ioni de Ca2+/ molecul

 complexul Ca2+- calmodulin:

-regleaz contracia muchilor netezi

-activeaz pompa de Ca2+ din membrana plasmic

-regleaz activitatea unor protein kinaze modulatori ai altor enzime

-interacioneaz cu celelalte sisteme mesageriale prin reglarea

activitii AC, GC, fosfodiesterazelor.

 DAG

molecul liposolubil, activeaz protein kinaza C.

DAG este inactivat prin hidroliz.

 Hormonii care au ca mesager secund IP3, Ca2+,
sau DAG sunt:
-epinefrina prin receptori 1-adrenergici
-gastrina
-oxitocina
-colecistokinina
-hormonul eliberator al gonadotropinelor.
 Protein kinaza C

enzim membranar cu multe izoforme

unele sunt activate de DAG

altele necesit pe lng DAG i Ca2+

are specificitate pentru resturile de serin i treonin.

 Sistemul guanilat ciclazei

guanilat ciclaza

GMPc mesager secund

protein kinaze GMPc dependente.

 GMPc
GMPc antagonizeaz efectele AMPc.

GMPc este mediatorul semnalelor luminoase n celulele retiniene cu

conuri i bastonae.

GMPc
+h Deschide canale
Rodopsina R T-GTP PDE
(opsin + 11-cis retinal) pentru Na+
Transducin
(opsina - protein cu 7 GMP
segmente transmembranare) Inchide canale
pentru Na+

hiperpolarizarea membranei cu perceperea senzaiei de lumin.

 All-trans-retinal 11-cis-retinal

Opsina

impuls nervos

Rodopsina
h
 Guanilat ciclaza

prezint cel puin 2 izoforme:

membranar i una

citoplasmatic.
 Guanilat ciclaza membranar :

-funcia de receptor al semnalului extern

-ct i funcia de sistem efector care

genereaz (GMPc).
Factorul atrial natriuretic (natriopeptin)
- 28 aa la om
-secretat de celulele cardiace atriale
-acioneaz:
renal
zona glomerular a suprarenalelor
prin:
crete volumul urinar,
crete eliminarea de Na,
scade secrea de renin i aldosteron.
 Guanilat ciclaza citoplasmatic
sistem efector pentru oxidul de azot

NO.(endothelium-derived relaxing factor, EDRF)

.
NO

L-Arginin L-Citrulin
NO-sintaz

NOS endotelial - EDRF

NOS inductibil macrofage sau hepatocite
-stimulare imunologic sau reacii inflamatorii
NOS neuronal
Nitric oxid sintaza (NOS) are structur asemntoare cu
citocromul P-450.

NADPH e-

e- e- HEM
FAD FMN Calmodulin
BH4
Reductaz L-Arginin L-Citrulin + NO.
Oxigenaz

Pentru elucidarea rolului acestei enzime n strile normale i

patologice, s-a primit premiul Nobel n 1998.

Au fost identificate 3 izoenzime ale NOS:

NOS-I (de origine neuronal),
NOS-II (din macrofage sau inductibil),
NOS-III (din endoteliul vascular).
NO acioneaz paracrin asupra multor celule:
-regleaz presiunea sanguin,
-mediator n citotoxicitate i n neurotransmisie.
-n celulele int

GTP
. Guanilat
NO
ciclaza Mediaz relaxarea
GMPc muschilor netezi

-Hemoglobina are un rol important n transportul oxidului

de azot.
 O2 O2 (oxigen singlet)
+e-
. + H+ .
NO. O 2
HO2
anion radicalul
superoxid hidroperoxil
ONOO- +e-
anion
peroxinitrit 2 + H+ + H+ H2 O2
O2 HO2
anion peroxid peroxid
de hidrogen
+e-
NO2.... OH
stare de tranzitie
HO- + HO.
anion radical
NO3 .NO2 + HO. hidroxil hidroxil
anion radicalul radicalul + e- + 2H+
nitrat nitro hidroxil
2H2O
 Hormonii tiroidieni

Hormonii tiroidieni sunt derivai iodurai ai compusului

ipotetic, tironin, derivat de la tirozin.

3` 2` 3 2 I I
4` 1` 4 1
HO O CH2 CH COOH HO O CH2 CH COOH
5` 6` 5 6 NH2 NH2
I I
Tironina
3, 5, 3`, 5` - Tetraiodotironin (Tiroxin) T4
I I I I

HO O CH2 CH COOH HO O CH2 CH COOH

NH2 NH2
I I
3, 5, 3` - Triiodotironin (T3) 3, 3`, 5` - Triiodotironina (revers T3) (rT3)
 Biosinteza

Unde are loc sinteza ?

n celulele tiroidiene i
la interfaa dintre celulele tiroidiene i coloid

Ce este coloidul ?
o soluie omogen de tireoglobulin
 Ce ete tireoglobulina ?

Glicoprotein (Proteina + resturi glucidice):

8-10 % glucide i peste

100 resturi tirozil pe molecul.

 Etapele biosintezei:

Captarea iodului n tiroid

-prin difuzie simpl

-prin transport activ, dependent de ATP (pompa de iod),

Iodul din plasm, (I-) poate fi:

-exogen, din apa potabil, alimente, sare iodat;

-endogen, rezultat din catabolismul hormonilor tiroidieni

 Oxidarea I- I+ (agent electrofil)
de ctre H2O2 format intracelular sub aciunea NADPH
oxidazei

(localizat pe suprafaa apical a celulelor tiroidiene)

+
tireoperoxidaz
NADPH + H + O2 NADP+ + H2O2
2 I- + H2O2 + 2 H+ 2 I+ + 2 H2O
 Iodurarea resturilor Tyr din tireoglobulin
glicoprotein cu:
8-10 % glucide i peste
100 resturi tirozil pe molecul.

Tireoglobulina este iodurat (de tireoperoxidaz)

monoiodotirozin (MIT) i
diiodotirozin (DIT).
NH NH I

CH H2C OH CH H2C OH

CO CO (MIT)
+ n I+

NH NH I

CH H2C OH CH H2C OH

CO CO (DIT)
I
Tireoglobulin Tireoglobulin iodurat
 Cuplarea

MIT cu DIT ;

DIT cu DIT
cu formarea de T3 i T4 ca pri componente ale
tireoglobulinei
NH I NH

CH H2C OH CH H3C

CO (MIT) CO

I NH I I
NH
CH H2C OH CH H2C O OH

CO CO
I (DIT) I T3

NH I NH

CH H2C OH CH H3C

CO CO
I (DIT)

I NH I I
NH
CH H2C OH CH H2C O OH

CO CO
I (DIT) I I
T4
 Endocitoza tireoglobulinei din coloid n celule,
eliberarea de T3 i T4 prin hidroliza
tireoglobulinei i secreia acestora n snge.

Eliberare: T3 ,T4 , MIT, DIT i diveri aminoacizi

care intr n fondul metabolic celular.
 Tiroida secret n principal T4 i

mai puin T3.

T3 din snge provine i din deiodurarea

periferic a T4.

T3 este de cteva ori mai activ biologic dect

T4.
 Transportul HT:

TBG (thyroxine binding globulin), cu afinitate mare pentru T4.

Sinteza acestei proteine este stimulat de estrogeni i micorat de androgeni i
glucocorticoizi.

TBPA (thyroxine-binding prealbumin), leag numai T4

Serumalbumina
 Metabolismul hormonilor tiroidieni
T1/2:
6-7 zile pentru T4
1,5 zile pentru T3

Deiodurarea n esuturile periferice: ficat, rinichi, muchi.

Prin monodeiodurare:
- 5`-deioduraza transform 30-40% din T4 T3 biologic activ
- 5 -deioduraza transform 40% din T4 rT3 biologic inactiv
-T3 i rT3 sunt deiodurai la diiodotironine i monoiodotironine
inactive.
 I I

HO O CH2 CH COOH
NH2
I I

3, 5, 3`, 5` - Tetraiodotironin (Tiroxin) T4

I I I I
HO O CH2 CH COOH HO O CH2 CH COOH
NH2 NH2
I I

3, 5, 3` - Triiodotironin (T3) 3, 3`, 5` - Triiodotironina (revers T 3) (rT3)

 Conjugarea cu acidul glucuronic sau sulfuric i
eliminarea prin bil a produilor de conjugare

Transaminare i decarboxilare oxidativ a lui T4

i T3 cu formarea cataboliilor solubili, excretabili
prin urin.
 Roluri fiziologice

La concentraii normale sau mici manifest

efecte anabolizante.
stimuleaz sinteza hormonului de cretere.
controleaz metabolismul oxidativ.
stimuleaz oxigenarea esuturilor.
crete sinteza Na+/K+-ATP azei (pomp
consumatoare de ATP), prin aciune la nivel
nuclear.
Au roluri eseniale n dezvoltarea fetal i
postnatal.
 La concentraii mari manifest efecte
catabolizante.
-crete viteza metabolismului bazal;
-micoreaz rezervele energetice glucidice i
lipidice;
-catabolismul proteic se intensific.
-nivelul colesterolului scade n hipertiroidism.
 Reglarea secreiei

Inhibiia prin feed-back pe axul hipotalamo

hipofizar a eliberrii HT
particip numai T3, prezent ca atare n snge sau
format prin deiodurarea T4.
Stress si alte semnale

Sistemul nervos central

Hipotalamus
Hormon de eliberare

Hipofiza anterioar

Tropine hipofizare

Glanda hormonal tint

Hormoni
 Somatostatina (antihormonul de cretere) inhib
secreia de TSH.
secreia de somatostatin este stimulat de concentraiile mari de
T3.

Reglarea prin transformarea T4 n T3 activ biologic i

rT3 inactiv biologic.
conversia T4 > rT3 este favorizat n inaniie pentru a diminua
arderile i consumul de materiale energogene.
Cu privire la sinteza hormonilor tiroidieni, sunt
corecte urmtoarele afirmaii:
A.Iodurarea se realizeaz le nivelul tirozinei libere
B.Triiodotironina este precursor al tiroxinei
C.Se afl sub controlul unui sistem de feed-back
pozitiv la care particip TSH
D.Revers T3 se obtine din T4 sub aciunea unei 5
-deioduraze
E.Apa oxigenat necesar oxidrii I- la I+ este
furnizat de NADPH oxidaz
Care dintre compuii de mai jos sunt eliberai n
timpul producerii normale de hormoni tiroidieni?
Tiroxina
Tireoglobulina
Triiodotironina
Ioni de iod
Diiodotironina
 Hormonii pancreatici

Pancreasul format din esuturi:

-endocrine
-exocrine.
Funcia endocrin
insulele Langerhans (1-2 % din masa total)
conin:
-celule A (28% din numrul total de celule), care produc i secret
glucagon;
-celule B (70%) -insulin;
-celule D (5%) - somatostatin;
-celule F, polipeptidul pancreatic care regleaz
diverse funcii ale tractului intestinal.
 Insulina

domin faza anabolic a metabolismului

exercit aciuni mitogene specifice factorilor

de cretere
 Structura i biosinteza

2 lanuri peptidice, unite prin puni de sulf:

lanul A - 21 aa i

lanul B - 30 aa.

reticul aparat
pre - pro - insulin pro - insulin insulin
endoplasmic Golgi
 Reglarea secreiei
Factorii care activeaz secreia de insulin:

-creterea glicemiei
glicemia normal este: 80-100 mg/dl ser

aa (Leu, Lyz, Arg), acizii grai, corpii cetonici;

Hormoni candidai:
enteroglucagon,
GIP (gastric inhibitory peptid),
VIP (vasoactive intestinal peptide)
 Factori care inhib secreia de insulin

adrenalina i noradrenalina

prin receptori de tip 2

somatostatina produs de celulele D din pancreas,

prin aciune paracrin.

 Metabolizare

T1/2 este de 3-5 minute.

Insulina este inactivat n ficat prin:

-desfacerea legturilor disulfurice dintre lanuri, cu

participarea G-SH;

-cu ajutorul proteazelor specifice.

 Mecanisme de aciune
Nr. Receptori 10 2
10 5

La nivel membranar
-stimuleaz transportul glucozei n esuturile insulino

dependente (muscular i adipos) prin translocarea

transportorului pentru glucoz GLUT 4 din veziculele

intracelulare la nivelul membranei (secunde)

 Insulin
Fosfatidil-inozitoli

b b Fosfatidil-inozitol 3-fosfat
P P Glucoza
SOS
P
Ras
P P
IRS-1 Glut-4
Grb-2 PI-3 kinaza
PDK-1

Raf
Protein PKB
MEK P fosfataza-1
(MAPKK)

MAPK P GSK-3
(ERK) Glut-4

Vezicule intracelulare
Factori de transcriere Glicogen sintaza
(inactivi -defosfo)
(activ)
Nucleu

Factori de transcriere
(activi-fosfo)
ADN

Promotor Transcriere
gene
 modific activitatea enzimelor din multe tipuri de celule

(minute pn la ore) prin modificarea strii de fosforilare a

enzimelor existente:

-proteinfosfataze
-fosfodiesteraze
-lipoprotein lipaza
-glicogen sintaz kinaza 3 (GSK 3), etc).
 iniiaz procesul de cretere a concentraiei multor enzime (ore

pn la zile):

-glucokinaza

-fosfofructokinaza

-piruvat kinaza

prin intensificarea transcrierii genelor, sinteza ARNm i n final

sinteza enzimelor.
 Implicatiile metabolice ale insulinei

Hormon

-anabolizant

-hipoglicemiant
In absena insulinei ce esuturi utilizeaz

glucoza pentru a produce energie ?

numai creierul i eritrocitul

 Dar n prezena insulinei ?

toate celulele din organism comut pe

utilizarea glucozei
Insulina efecte metabolice:

-intensific transportul glucozei n celule

-intensific glicoliza n scop anabolic
-stimuleaz sinteza de glicogen n ficat i
muchi
-inhib gluconeogeneza
-stimuleaz lipogeneza n adipos.
 n ficat
stimuleaz glicoliza n scop anabolic.
favorizeaz indirect influxul de glucoz n
hepatocite
activeaz glucokinaza
favorizeaz glicogeneza=glicogenogeneza
stimuleaz biosinteza proteic prin
accelerarea transportului aa prin membrane
 n muchii scheletici

stimuleaz sinteza de glicogen

stimuleaz sinteza proteic
ncetinete degradarea proteinelor.
 n esutul adipos

faciliteaz transformarea glucozei n

glicerolfosfat.
activeaz lipoprotein-lipaza
stimuleaz lipogeneza i inhib lipaza
hormon sensibil
scade producia de corpi cetonici (acid aceto
acetic i acid b-hidroxibutiric).
 inhib lipoliza n adipocite la concentraii mici ale

insulinei (5mU/ml);

activeaz lipogeneza (sinteza de lipide), n aceleai

celule, la concentraii ale insulinei de 10 ori mai mari.

 Insulina acioneaz ca factor de cretere

stimuleaz proliferarea unor tipuri de celule.

Insulina i receptorul insulinic, prezint analogie

structural cu IGF-I i IGF-II (insuline-like
growth factors).
 Diabetul

Diabetul insipid
-sete i urinare frecvent (urina este insipid
- nu conine glucoz)

-lipsa H antidiuretic = vasopresin sau

-defect al receptorilor renali ai acestui
hormon.
 Diabetul insulino dependent IDDM
distrugerea celulelor secretorii din insulele
Langerhans, auto imun.

n IDDM netratat domin starea catabolic

-degradarea proteinelor tisulare i
-mobilizarea rezervelor energetice.
 Lipsa de insulin

secreia de glucagon este crescut

Stare general de stress

Se activeaz medulosuprarenalele
 Acizi grai neesterificai pot ajunge la 3-4 mmol/l
(normal 0,2-1,0 mmol/l)

corpi cetonici 0,2 mmol/l cresc la 10-20 mmoli/l

pH-ul sanguin poate s scad de la valoarea

normal 7,4 la aprox. 7,0, situaie cunoscut sub
numele de ceto-acidoz diabetic.
 Diabetul insulino independent

se caracterizeaz prin rezisten la insulin

caracteristic a obezitii.

n NIDDM nu se dezvolt cetoacidoza.

NIDDM apare la persoane adulte.

 Glucagonul

secretat de celulele A din insulele

Langerhans

hormon hiperglicemiant.
 Structur, biosintez

reticul aparat
pre - pro - glucagon pro - glucagon glucagon
endoplasmic Golgi

Metabolizare n ficat
-T1/2 -5 minute.
 Reglarea secreiei.
Factorul reglator este glucoza

Factori care stimuleaz secreia:

-aminoacizi;
-agoniti b-adrenergici

Factori care inhib secreia:

-glucoza;
-somatostatina, produs de celulele D din pancreas.
 Mecanism de aciune

receptor membranar

proteine Gs

mesageri secunzi (AMPc)

 NH3+
-helix transmembranar
Extracelular

Intracelular

-
OOC
 Rol fiziologic
Aciune metabolic opus insulinei.
n ficat:
-stimuleaz gluconeogeneza
-inhib glicoliza
-activeaz glicogenoliza

-stimuleaz b-oxidarea acizilor grai i cetogeneza.

-conversia glucozei n acizi grai i sinteza de

trigliceride este diminuat.
 n muchi, metabolismul glucidic nu este influenat
de glucagon.

n esutul adipos
-activeaz lipoliza, AG eliberai n snge fiind
preluai de ficat i supui b-oxidrii mitocondriale.
-inhib lipogeneza