Diagnosticul de laborator n difterie Corynebacterium diphtheriae Produsul patologic fals membran, secreie faringian, secreie nazal la purttori secreie

conjunctival, vulvar, din plgi Recoltarea se face cu 3 tampoane 1. Cu primul tampon se efectueaz 3 frotiuri frotiu colorat Gram pentru observarea morfologiei i dispoziiei spaiale C. diphtheriae bacil Gram pozitiv, uor ncurbat, cu capetele mciucate, dispus caracteristic (litere chinezeti, chibrituri aruncate pe mas) frotiu colorat Neisser pentru evidenierea corpusculilor metacomatici Babe-Ernst C. diphtheriae prezint corpusculi metacromatici la capete frotiu colorat Giemsa pentru diagnosticul diferenial cu angina fuso-spiralar pe frotiu se evideniaz fusobacterii i forme spiralate (Treponema vincenti) 2. Tamponul al doilea se nsmneaz pe mediul de mbogire OCST incubare 12-18 ore, dup care se izoleaz pe medii caracteristice 3. Tamponul al treilea se descarc pe medii de cultur folosite pentru izolare identificare mediul Lffler colonii caracteristice circulare uor crenelate alb-glbui geloz snge colonii albe-gri perlate friabile mediul Tinsdale colonii mici cenuii-negre nconjurate de un halou cafeniu mediul Clauberg colonii cu luciu metalic mediul Gundel Tietz se difereniaz cele trei tipuri de bacil difteric tipul gravis colonii negre de tip R plate cu margini crenelate centrul mamelonat cu striaiuni radiare ca o floare de margaret tipul mitis colonii negre de tip S tipul intermedius colonii de tip S-R bulion: tipul gravis formeaz pelicul la suprafarestul mediului rmne clar tipul mitis tulbur uniform mediul tipul intermedius formeaz inel la suprafa depozit i tulbur uniform mediul caractere biochimice producerea de H2S se studiaz pe mediul PISU (cu cistein) fermentarea zaharurilor n funcie de fermentarea glucozei maltozei i zaharozei difterimorfii se pot ncadra n specie n funcie de fermentarea dextrinei amidonului i glicogenului bacilul difteric se ncadreaz n tip (gravis mitis i intermedius) caractere de patogenitate - cercetarea producerii de exotoxin difteric teste n vivo teste in vitro testul Elek reacie de precipitare n gel se toarn geloz peste o hrtie de filtru impregnat n ser antidifteric se insmneaz n striuri tulpinile de cercetat

dac o tulpin produce exotoxin difteric (Ag) aceasta este eliberat n mediu i apare o band de precipitare testul Ramon reacie de floculare prin care se dozeaz putere toxic a toxinei

Diagnosticul indirect IDR Shick IDR de neutralizare Se injecteaz strict intradermic 1 unitate de toxin Dac organismul nu are anticorpi toxina i exercit efectul eritematos i la locul inoculrii apare un eritem organism receptiv. Dac organismul are anticorpi acetia vor neutraliza toxina deci nu apar modificri la locul inoculrii organism imun Reacii de hemaglutinare pasiv - determinare cantitativ a antitoxinelor