FIZIOLOGIA I BIOCHIMIA PLANTELOR

INFLUENA TEMPERATURII ASUPRA INDICILOR MORFOFIZIOLOGICI LA DIFERITE GENOTIPURI DE FLOAREASOARELUI N SISTEMUL GAZD PARAZIT
Maria Duca, Elena Savca, Victoria Popescu Universitatea de Stat din Moldova Introducere Problema rezistenei plantelor de cultur la aciunea diferitor tipuri de parazii rmne i pn n prezent actual, deoarece reprezint un fenomen biologic complicat, condiionat de un ir ntreg de factori care, n mare msur, servesc drept piedic n calea penetrrii acestora n plant. n literatur exist multe date referitoare la caracteristica particularitilor morfologice i biologice ale lupoaiei (Orobanche cumana Wallr.) [9, 14], factorii care contribuie la inhibarea germinrii seminelor acestei plante parazit [4, 16], ameliorarea condiiilor de cultivare a orii-soarelui i diverse metode de obinere a varietilor rezistente la lupoaie [6, 10, 14]. De asemenea ntlnim numeroase cercetri ce in de reacia de rspuns a plantelor fa de parazit exprimat prin sporirea activitii catalazei i peroxidazei [1, 2], modicarea coninutului acizilor nucleici [8, 12]. E cunoscut faptul c factorii abiotici, i nu n ultimul rnd temperatura, reprezint indicele cheie ce inueneaz interaciunea gazd-parazit [11]. Temperaturile ridicate faciliteaz germinarea seminelor de lupoaie i respectiv duc la creterea nivelului de infecie [5, 7, 16], ns dup alte surse [4] creterea temperaturii determin expresia mecanismelor de rezisten, ntr-o corelaie polinom, cauznd astfel degradarea i moartea parazitului. n acest context prezenta lucrarea are scopul de a studia interrelaiile gazd - parazit - temperatur la diferite genotipuri de oarea-soarelui.

30

Materiale i metode Caracteristica obiectului de studiu. Drept obiect de studiu au servit seminele a doi hibrizi de oarea-soarelui (Valentino i Xenia) i liniile lor parentale, oferite de ctre CC Magroselect SRL Soroca. Pentru testarea genotipurilor respective s-a utilizat lupoaia colectat de la plantele de oarea-soarelui, cultivate n vara anului 2006 n zona de centru a Republicii Moldova. Seminele de lupoaie au fost separate de inorescene, uscate i pstrate la temperatura camerei. Condiiile de cultivarea in vivo. Inocularea articial a plantelor a fost efectuat n vase de vegetaie, n care s-a introdus mixtura de sol (nisip : turb, 1:1, v/v) uniform infectat cu semine de lupoaie (la 200 g amestec s-a adugat 30 mg semine) [9]. Plantele au fost crescute n dou variante cu divers regim de temperatur, fotoperioada de 14-16 ore i umiditatea de 60%. Metodele de cercetare Materialul a fost colectat dup o sptmn din momentul apariiei lupoaiei la suprafaa solului. Parametrii morfoziologici au fost determinai prin metode standard [3]. Numrul total de ataamente de lupoaie s-a determinat la binocularul MBS-9. Prelucrarea datelor. Analiza statistic a datelor experimentale s-a efectuat dup [17] cu utilizarea aplicaiei Microsoft Excel. Rezultate i discuii Procesele morfologice la diferite genotipuri de oarea-soarelui n mare msur depind de reacia de rspuns a acestora la condiiile nefavorabile ale mediului i de capacitatea de ai modica mecanismele de adaptare la factorii de stres. Unul dintre factorii de stres, la etapa iniial de dezvoltare a plantelor, este temperatura care inueneaz creterea i dezvoltarea att a plantelor de cultur, ct i a paraziilor acestora. Studiul inuenei temperaturii asupra gradului de infecie s-a efectuat n dou variante experimentale care substanial se deosebesc dup condiiile de cretere i dezvoltare. Astfel, prima experien (varianta I) a fost realizat la temperatura medie (Tm) a aerului de 15C, variind ntre 10-18C, Tm a solului - 13C, cu o variaie ntre 8-17C; cea de-a doua experien (varianta II) s-a efectuat la Tm a aerului de 28C, variind de la 23-31C, iar Tm a solului - 25C, variind ntre 21-30C (g.1.). Plantele crescute n condiiile variantei I au fost cultivate i au atins fazele preconizate n experiment timp de 11 sptmni (77 zile), pe cnd cele din varianta II - 6 sptmni (42 zile). n ambele cazuri plantele au atins faza de 4 - 5 frunzulie adevrate. Primele genotipuri de oarea-soarelui, care au rsrit la suprafaa solului n varianta I au fost hibridul Xenia i linia a acestuia (la a 2 zi de la plantare), apoi a rsrit hibridul Valentino (la a 3 zi), Valentino (la a 4 zi), Valentino (la a 5 zi) i Xenia (dup 7 zile). n cazul variantei II, cu temperatura medie a aerului de 28 C toate plantele au rsrit n primele trei zile din momentul plantrii, genotipurile hibride (Xenia i Valentino) ca i n cazul variantei I au aprut printre primele. Temperaturile joase, deci, au determinat att ntrzierea germinrii i rsririi genotipurilor de oarea-soarelui studiate, ct i apariia primei perechi de frunze

31

adevrate. Astfel la varianta I faza primei perechi de frunze adevrate s-a evideniat dup 15-25 zile, n dependen de genotip, n timp ce la varianta II - la 8-10 zile, iar faza de butonizare s-a atestat doar la hibridul Valentino dup 11 sptmni de cretere i dezvoltare, la varianta II dup 6 sptmni la hibrizii Valentino i Xenia (g.1.). Temperatura inueneaz att creterea i dezvoltarea orii-soarelui, ct i dezvoltarea paraziilor acesteia. Numeroase raporturi au artat c germinarea seminelor de lupoaie este accelerat de temperaturi ridicate, cu creterea ulterioar a nivelului de infecie, n timp ce temperaturile joase rein dezvoltarea parazitului.[5, 7, 11, 15], care s-au constatat i n cazul experienei noastre.

Fig. 1. Condiiile model ale experimentului: A varianta I, B varianta II - rsrirea platulelor, - faza I pereche de frunzulie, - apariia lupoaiei la suprafa, - faza de butonizare

Astfel n varianta I apariia parazitului la suprafaa solului nu s-a observat pe parcursul creterii plantelor timp de 11 sptmni, ind doar depistat numai pe sistemul radicular. n varianta II lupoaia a aprut la suprafaa solului la cea de-a 4 sptmn

32

(dup 31 zile) la hibridul Xenia, mai trziu la linia patern a acestuia i la linia matern a hibridului Valentino. Temperatura optim de germinare a O. cumana este de 20 C [4], iar dup Sauerbon [11] germinarea i ataarea parazitului are loc n intervalul de 20/10 25/15 C(zi/ noapte), pe cnd la linia inbrid HA-89 s-a observat un grad de atac mare la temperatura de 15 C i scade odat cu creterea acesteia [13]. Deci populaiile de O. cumana sunt capabile s infecteze oarea-soarelui ntr-un spectru larg de temperaturi, pn la 27C, variind n dependen de genotipul orii-soarelui, ct i de populaia de lupoaie. Rezultatele cercetrilor nu au scos n eviden o legitate strict ntre temperatur genotip - infecie. Astfel, n varianta I, la dou dintre liniile parentale studiate (Xenia i Valentino) s-a constatat o creterea a gradului de infecie, iar la celelalte dou linii (Xenia i Valentino) o diminuare, pe cnd la varianta II s-a observat o reacie invers a liniilor parentale. La hibrizi, gradul de infecie n variantele studiate, s-a meninut la nivelul limitei semnicative a diferenei, ceea ce denot o labilitate i adaptare a genotipurilor heterozigote la condiiile mediului. Cu toate acestea comparnd ntre ei formele hibride s-a constatat c Valentino F1 este mai sensibil la atacul parazitului (g.2.) ind atestat cel mai mare grad de infecie ceea ce s-a relevat i n studiile anterioare [10].

Fig.2. Inuena temperaturii asupra dezvoltrii ataamentelor de lupoaie la diferite genotipuri de oarea-soarelui.

n ceea ce privete cota procentual de infecie al genotipurilor studiate, s-a constata c la temperaturile nalte aceasta crete cu 8-33% la ambele variante cu excepia liniei materne Valentino la care se atest o scdere cu 40%. Variaia temperaturii i infecia cu lupoaie au determinat modicarea indicilor morfologici. S-a constatat c genotipurile cercetate, supuse stresului biotic stagneaz n dezvoltare, rmn pipernicite, cu tulpini subiri i formeaz capitule mici. Datele din literatur relev c n cazul unui atac timpuriu, plantele nu formeaz calatidii sau, dac formeaz, acestea sunt mici, degenerate cu majoritatea seminelor seci. Cnd atacul se produce n stadiul de dezvoltare mai avansat, simptomele sunt slab vizibile, gravitatea acestora ind dependent de intensitatea atacului [14]. Astfel, la varianta I s-a observat la unele genotipuri o diminuare a nlimii plantelor atacate de parazit, cum ar hibridul Xenia i forma matern a acestuia, ce au

33

dimensiuni mai joase cu 2 6 cm fa de martor, excepie fcnd doar linia patern, la care nlimea plantelor este la nivelul martorului (tabelul1).
Tabelul 1. Variaia nlimii plantelor de oarea - soarelui la interaciunea gazd parazit - temperatur
Varianta I Genotipul F1 F1 nlimea plantelor, cm martor 36,95 1,46 12,82 4,70 37,44 3,25 34,5 4,58 23,64 3,24 39,8 2,41 infectat 34,75 1,46 13,89 2,5 31,35 3,4* 33,35 4,26 25,13 3,13 41,95 2,33 % fa de martor 94,1 108,3 83,7 96,7 106,3 105,4 Varianta II nlimea plantelor, cm martor 38,76 2,57 24,91 3,89 40,83 2,01 26,71 3,38 33,45 2,98 44,94 2,16 infectat 32,71 4,64* 13,88 2,55** 31,0 2,84* 30,58 3,39 29,12 2,48* 37,73 1,51* % fa de martor 84,4 55,7 75,9 114,5 87,1 83,9

* - diferena este statistic autentic cu un prag de semnicaie de 95% ** - diferena este statistic autentic cu un prag de semnicaie de 99%

Aceast legitate se observ i n cazul variantei II, atestndu-se diminuarea creterii plantelor cu 16 54% n comparaie cu martorul, mai evident ind la linia patern (cu 11,03 cm). Hibridul Valentino i formele parentale ale acestuia se caracterizeaz prin valori mai stabile ale nlimii n varianta I, iar n unele cazuri se observ o majorare nesemnicativ cu 1,5 - 2 cm la varianta infectat. Spre deosebire de linia patern i hibrid nlimea plantelor la linia matern rmne la nivelul martorului, n timp ce n cazul variantei II la aceast linie se observ o cretere a plantelor n nlime depind martorul cu 4 cm, dar aceast majorare se ncadreaz n limitele semnicative ale diferenei. Totodat menionm c linia patern i hibridul pe fondal infectat, se caracterizeaz printr-o scdere vdit a creterii plantelor n nlime cu 4,5 - 7 cm n comparaie cu martorul. Aceast diminuare coreleaz cu dezvoltarea intensiv a ataamentelor de lupoaie pe sistemul radicular a acestor genotipuri (g. 2.). Productivitatea plantelor depinde n mare msur de numrul de frunze a plantelor i de suprafaa foliara, deoarece plantele ce nu ating o suprafa optimal sunt mai puin productive. Inuena temperaturii i a parazitului asupra numrului de frunze nu s-a manifestat vdit (tabelul 2). Numrul de frunze la o plant se a n limitele 6 - 9 i variaz mai mult n dependen de genotip i mai puin de factorii studiai. O micorare mai pronunat sub inuena lupoaiei se relev n cazul variantei II, unde la toate genotipurile cu excepia liniei materne (Valentino), se constat o cretere nesemnicativ. La varianta I majoritatea genotipurilor se menin la nivelul martorului, pe cnd la celelalte se observ o micorare. ns nu ntotdeauna numrul de frunze asigur o suprafa foliar optimal, ci suprafaa ecrei frunze n parte poate dezvolta un aparat foliar productiv. Determinnd suprafaa foliara (g. 3.), am constatat c acest parametru se schimb esenial sub inuena temperaturii i a lupoaiei.

34

Tabelul 2. Variaia numrului de frunze la diferite genotipuri de oareasoarelui la interaciunea gazd - parazit - temperatura
Varianta I Genotip Numrul de frunze martor F1 F1 8,1 0,33 6,25 2,02 8,45 0,85 9,0 1,24 7,1 0,67 9,1 0,76 infectat 7,54 0,64 6,88 0,61 8,09 0,29 7,0 0,72 7,16 0,56 9,45 0,53 %faa de martor 93,08 110,04 95,74 77,8 100,1 103,85 Varianta II Numrul de frunze martor 9,33 0,83 8,60 0,78 9,50 1,10 7,4 1,78 8,75 0,61 8,92 0,65 infectat 8,50 1,21 7,80 1,30 8,54 0,88 8,00 1,24 7,69 0,41 7,85 066 % faa de martor 91,1 90,7 100,5 108,1 87,9 88,0

Fig.3. Modicarea suprafeei foliare (cm / plant) la diferite genotipuri de oareasoarelui la interaciunea gazd - parazit temperatur.

Astfel, la hibridul Xenia i linia matern a acestuia din varianta I, suprafaa foliar a plantelor infectate scade cu 29-39%, excepie fcnd linia patern, avnd suprafaa foliara mai sporit cu 36,5% fa de martor. Aceast legitate nsa, nu se depisteaz n condiiile de cultivare la varianta II, observdu-se o diminuare a suprafeei foliare a plantelor infectate cu lupoaie, cu 12,4-35%. Excepie prezint hibridul F1 care rmne la nivelul martorului. Hibridul Valentino i linia lui matern se caracterizeaz printr-o scdere vdit a suprafeei foliare, cu 30 37% faa de martor, ind inuenat att de temperatur, ct i de lupoaie, ceea ce nu se relev la linia patern avnd valori la nivelul martorului. n cazul variantei II la plantele infectate cu lupoaie se relev o diminuare semnicativ a suprafeei foliare la toate genotipurile cercetate, cu circa 38% fa de martor, cu excepia hibridului Xenia, la care acest parametru se menine la nivelul martorului. Deci, din datele obinute rezult c temperatura are un rol primordial n interrelaia planta gazd parazit.

35

Concluzii Temperaturile joase rein dezvoltarea parazitului, astfel nct acesta nu afecteaz planta gazd, n timp ce temperaturile nalte grbesc creterea i dezvoltarea parazitului i respectiv diminuarea indicilor morfo-ziologici precutai. Rezultatele cercetrilor au scos n eviden c gradul de infecie, la hibrizii Xenia i Valentino n variantele studiate, s-a meninut la nivelul limitei semnicative a diferenei, ceea ce denot o labilitate i adaptare a genotipurilor heterozigote la condiiile mediului. Totodat comparnd aceste genotipuri hibride, s-a constatat c Valentino F1 este mai sensibil la atacul parazitului, ind atestate cele mai multe ataamente pe rdcini.
Cercetrile au fost efectuate n cadrul proiectului instituional 06.407.026 nanat de CSDT al AM.

Bibliograa
1. Duca M., Popescu V., Lupacu V. Aspecte ale statutului oxidoreductor la diferite genotipuri de oarea-soarelui atacate de lupoaie.// Studia Universitatis, 2007, Nr. 7, p. 68-73. 2. Duca M., Glijin A., Savca E., Popescu V. .a. Variaia parametrilor morfo-ziologici la interaciunea gazd-parazit ( Helianthus annuus L Orobanche cumana Wallr).// Buletinul AM. tiinele vieii, 2007. Nr. 1. p. 35-42. 3. Duca M., Savca E., Port A. Fiziologia plantelor. Tehnici speciale de laborator, Chiinu, 2001, p. 173. 4. Eizenberg H., Plakhine D., Hershenhorn J., Kleifeld Y., Rubin B. Resistance to broomrape (Orobanche spp.) in sunower (Helianthus annuus L.) is temperature dependent. //Journal of Experimental Botany, 2003a., Vol. 54, No. 385, p. 1305-1311. 5. Foy C., Jacobsohn R., Bohlinger B., Jacobsohn M. Seasonal behavior of broomrape species as determined by host range and environmental factors.// In: Ransom JK, Musselman LJ, Worsham AD, Parker C, eds. Proceedings of the 5th International Symposium on Parasitic Weeds, Nairobi, Kenya, 1992. Nairobi: CIMMYT, p. 454-457. 6. Goldwasser Y., Hershenhorn, Plakhine D. Biochemicals factors involved in vetch resistance to Orobanche aegyptica.// Physiologic and Molecular plant Patthology. 1999, Vol. 54, p. 87-96. 7. Kasasian L. Miscellaneous observations on the biology of O. crenata and O. aegyptica.// Proc. Symposyum on Parasitic weeds. European Weed Res. Council, Wageningen, the Netherlands, 1973, p. 68-75. 8. Michaelson, M.J., Price, H.J., Johnston, J.S., and Ellison, J.R.. Variation of nuclear DNA content in Helianthus annuus (Asteraceae). //Am. J. Bot. 1991, Vol. 78, p. 1238-1243. 9. Panchenko A.Y. Early diagnosis of broomrape resistance in breeding and improving seed production of sunower (in Russia).//Viestnik, Sielkskkojosia Stevennog Nauki. 1975, Vol. 2, p. 107-115. 10. Popescu V. Evaluarea gradului de infecie la unele genotipuri de oarea-soarelui (Helianthus annuus L.) la interaciunea gazd - parazit (Orobanche cumana Wallr.).// Studia Universitatis, 2007, Nr.7, p. 125-128. 11. Sauerborn J. The inuence of temperature on germination and attachment of the parasitic weed Orobanche spp. on lentil and sunower.// Angewandte Botanic. 1989, Vol. 63, p. 543-550. 12. Savca E., Popescu V., Duca M. Inuena Orobanche cumana Wallr. de divers origine asupra coninutului de acizi nucleici la oarea-soarelui. //Studia universitatis, 2007, N.7, p. 147-152. 13. Sukno S., Fernandez-Martinez J.M., Melero-Vara J.M. Temperature effect on the disease reaction

36

of sunower to the infection by Orobanche cumana.//Plant Disease, 2001, Vol. 85, p. 553-556. 14. Vrnceanu A.V., Pirova N., Stoenescu F.M., Pacureanu M. Some aspects of the interaction Helianthus annuus L. / Orobanche cumana Wallr., and its implication in sunower breeding.// In Proceedings of a workshop on biology and control of Orobanche. Edited by S.J. Borg. Landbouwhogeschool, Wageningen, The Netherlands. 1986, p. 181-189. 15. Van Hezewijk M.J. Germination ecology of Orobanche crenata implication for cultural control measures. PhD thesis, Amsterdam University, The Netherlands, 1989, p. 120. 16. Zelev N. The biological role of exogenic factors in broomrape germination.// Plant Science. 1987, Vol 5, p. 36-439. 17. . . , . 1979, c. 416.

PRESIUNEA HIDROSTATIC I SUPEROXIDDISMUTAZA INDUCTORI AI REACIEI NESPECIFICE A PLANTELOR LA ACIUNEA SECETEI.

Anastasia tefr, Lilia Brnz Institutul de Genetic i Fiziologie a Plantelor al AM Introducere Problema evalurii mecanismelor nespecice, ce confer rezisten mezotelor de cultur n condiii de secet moderat, actualmente se a pe prim plan n vizorul cercettorilor [21-23]. Se consider legitim ideea, c rspunsul nespecic al organismului vegetal la aciunea celor mai diferii factori stresogeni, inclusiv a secetei, este activarea oxigenului molecular i apariia stresului oxidativ [21; 27; 30], cu toate c astfel de cercetri sunt puine i destul de fragmentare. Se tie, c seceta, provoac micorarea viabilitii celulelor ca consecin a trecerii lipidelor membranare din faza normal lichid-cristalin n faza de gel, asociat cu pierderea selectiv a acizilor grai i mrirea permeabilitii membranelor pentru ap. n afar de efectul direct asupra membranelor, deshidratarea induce stresul oxidativ i supraproducia n reaciile Gabber-Wais i Fenton a formelor reactive de oxigen (FRO), asociate cu afectrile celulare [16]. Majorarea coninutului FRO este una din primele reacii nespecice a organismului vegetal la aciunea, fr excepie, a tuturor factorilor nefavorabili, inclusiv i a decitului de umiditate, acesta din urm ind cel mai violent [19; 20; 25]. Deplasarea echilibrului oxidativ antioxidativ n direcia activrii proceselor oxidrii peroxidice n membrane cauzeaz declanarea strii de stres la aciunea oricrui factor nefavorabil [17; 18], iar semnal (trigger) pentru inducerea stres-reaciei servete sistemul superoxidsintazic. Eliminarea consecinelor aciunii stresului oxidativ asupra organismului este asigurat de sistemul de protecie antioxidativ [1; 8; 12], un component important al cruia sunt enzimele antioxidative, ce particip la inactivarea superoxid radicalului, peroxidului de hidrogen i hidroxid radicalilor. Graie funcionrii sistemelor de protecie antioxidativ, n celule n condiii normale se pstreaz un echilibru dinamic al proceselor de formare i de lichidare a FRO. Cauza apariiei FRO i activarea proceselor de oxidare peroxidic a lipidelor prezint obiectul celor mai largi discuii din ultimul timp n ziologia stresului i adaptrii. Unii

37