NTRODUCERE N MICROBIOLOGIE. METODELE MICROBIOLOGICE DE DIAGNOSTIC. CLASIFICAREA I NOMENCLATURA MICROORGANISMELOR. MORFOLOGIA BACTERIILOR.

Microbiologie (mikros bios logos mic, viu, studiu). Microbiologia studiaz microorganismele i activitile lor. Microorganis e ! icrobi organisme microscopice, cu dimensiuni de ordinul " (10- m) sau -! n (10 m). Mi"o reunesc bac#eriile i alte tipuri de organisme# alge$ ci%&erci icrosco&ice '(%ngi$ ice#e)$ &ro#o*oare$ +ir%s%ri ,i agen#i s%b+irali$ -e e.. &rioni. $ermenul / icrob0 a %ost utilizat &n 1'(' de c)irurgul %rancez *)arles-+mmanuel ,edillot.

LUMEA MICROBIAN1

23rs#a (-,. mlrd ani///) Ab%n-en4a ,i -i+ersi#a#ea 00 din biomas1 ap, aer, sol - scoara terestr la 1. 2m/, surse termale la 100 grade *1 3000 specii descrise mai puin de 10 din apr. 10 specii necultivabile &n laborator In(or a4ia gene#ic5 genomul Pseudomonas aeruginosa - .000 gene, diversitate genetic superioar eucariotelor, sc)imb intens de material genetic Sis#e e e(icien#e -e &erce&ere a l% ii$ co %nicare ,i a-a&#are la con-i4ii +aria#e ale

e-i%l%i

Microbiologia studiaz# %orma mi"o structura nutriia metabolismul creterea i multiplicarea mi"o (pentru a le identi%ica) urmrete relaiile mi"o cu organismele-gazd i cu mediul ambiant DE CE STUDIEM MICROORGANISMELE6 S#%-i%l i!o &a#ogene ,i o&or#%nis#e - 4revenirea i controlul maladiilor in%ecioase S#%-i%l i!o %#ile$ ino(ensi+e 4roducerea antibioticelor 5binerea medicamentelor (strepto2inaza, insulina), vaccinurilor, etc. prin te)nologii de 678 recombinant 4roducerea alimentelor# unt, br9nz, cacaval, c)e%ir, :aurt, oet, alcool, cacao, ca%ea, etc. ;ol de <insecticide= biologice >abricarea plasticului biodegradabil 7escompunerea deeurilor i metanului +?tragerea metalelor din minerale 6sigurarea rolului ma@or &n ciclurile geoc)imice, etc
-

Disci&linile icrobiologice &n raport cu# 4articularitile biologice ale mi"o# Algologia$ 7ro#o*oologia$ Micologia$ Bac#eriologia$ 2irologia 1

Amplicaiile &n activitile umane# Microbiologia Babitatul# Microbiologia sol%l%i$ Microbiologia $a?onomia microbian Cenetica microbian +cologia microbian

e-ical5$ +e#erinar5$ in-%s#rial5$ ali en#ar5$ arin5$ Microbiologia cos ic5$ e#c

e#c

MA*;5DA5E5CA6 M+7A*6EF ,$G7A6HF# ;elaiile dintre microorganisme i gazda lor uman *apacitile patogene ale mi"o *apacitile antiin%ecioase ale gazdei 4rincipiile i metodele diagnosticului etiologic al in%eciilor Dazele terapiei antimicrobiene Dazele pro%ila?iei antimicrobiene METODELE MICROBIOLOGICE DE DIAGNOSTIC

DIAGNOSTICUL DIRECT

*onst &n detectarea agentului patogen, a componentelor lui sau a unui produs (e?. to?ina) &n prelevate de la bolnav sau din mediul e?tern 8.E.a en%l icrosco&ic - studierea mi"o &n stare vie"nativ sau &n %rotiuri colorate. +ste o metod de orientare. An%ormeaza despre prezena bacteriilor, %orma lor, structura, numrul. 9.De&is#area an#igenelor icrobiene sol%bile :n lic;i-e biologice (ser sangvin, E*;, urinI) <.E.a en%l bac#eriologic izolarea pe medii nutritive a culturilor pure de bacterii, care vor %i identi%icate i testate la sensibilitate %a de antibiotice 3. E.a en%l biologic ' e#o-a e.&eri en#al5) inocularea directa a produsului patologic la animale de laborator receptive. Mi"o se multiplic provoc9nd maladia tipic. 7in lic)ide biologice sau esuturi a%ectate bacteria poate %i izolat i identi%icat. .. I-en#i(icarea ADN sa% ARN microbian prin te)nici de biologie molecular DIAGNOSTICUL INDIRECT (imunologic) 8.Sero-iagnos#ic%l depistarea i titrarea anticorpilor speci%ici &n serul bolnavului. +i apar peste (-10 zile de la debutul maladiei si persist deseori dup vindecare 9.In#ra-er oreac4iile ' e#o-a alergic5) &ntroducerea pe cale epidermic sau intradermic a alergenului microbian i apariia, peste J-3 zile, a unei reacii celulare locale (eritem, in%iltrat). ;eacia pozitiv semni%ic o stare de )ipersensibilitate speci%ic (&nt9lnire repetat cu acest agent) CLASIFICAREA I NOMENCLATURA MICROORGANISMELOR Eumea microbian este e?trem de divers, ceea ce determin necesitatea aran@rii lor &n grupe con%orm asemnrii lor. ,e disting - noiuni# Ta.ono ie tiina despre clasi%icare Clasi(icare aran@area organismelor &n grupe sau #a.oni &n %uncie de asemnri sau &nrudiri No encla#%ra numirea tiinti%ic a grupelor ta?onomice con%orm unor reguli internaionale Clasi(icarea (eno#i&ic5 (prima tentativ *arl von Einne &n sec. KLAA) - reunirea mi"o &n baza caracterelor %enotipice comune (caractere mor%ologice, de cultur, %iziologice, bioc)imice, antigenice, etc) Clasi(icarea geno#i&ic5

Cradul de omologie al secvenelor nucleotidice ale 678 microbian. $ulpinile cu gradul de omologie de cel putin (0 0 aparin unei specii, de -0 0 - aceluiai gen, etc Cradul de omologie al secvenelor nucleotidice ale 6;8 ribosomal *oninutul relativ de guaninMcitozin (C*0) al 678 puri%icat. Ea bacterii variaz &ntre J. i (. 0. Clasi(icarea (ilogene#ic5 7etermin locul mi"o &ntr-un arbore %ilogenetic i se bazeaz pe studiul %osilelor sau al BE6.
-

7rinci&alele gr%&e #a.ono ice '#a.oni) 7omeniu ;egn $ip *las 5rdin >amilie Cen ,pecie (unitate %undamental) *ulturile microbiene ce aparin unei specii, dar sunt izolate &n laborator din diverse prelevate sau Nn perioade de timp di%erite reprezint #%l&ini bacteriene (sue). $ulpinile corespund &n general caracterelor de specie, dar pot mani%esta variaii nesemni%icative.
-

On cadrul speciilor pot %i delimitai #a.oni in(ras&eci(ici (variante / tipuri), care prezint di%erene minore &n activitatea bioc)imic sau %iziologic (biovar), &n structura antigenic (serovar), &n gradul de patogenitate (patovar), &n sensibilitatea la bacterio%agi (lizovar) sau la antibiotice (antibiovar). 4ot %i utilizai ca markeri epidemiologici pentru desci%rarea unor %ocare epidemice (in%ecii nozocomiale, to?iin%ectii alimentare, etc) *on%orm ultimei clasi%icri internaionale ale microorganismelor (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, J001) se disting# For e acel%lare '+ir%s%ri$ +iroi*i$ &rioni) For e cel%lare, repartizate &n - domenii# 8.Bac#eria procariote (bacterii adevrate, eubacterii). - Dacterii cu perete celular %in, gram-negative1 - Dacterii cu perete celular gros, gram-pozitive1 - Dacterii lipsite de perete celular (micoplasme). 9.Arc;aea procariote, perete celular %r peptidoglican, cu )abitat &n condiii e?tremale <.E%=ar>a eucariote. Anclude regnurile ungi, !nimalia (subregnul Proto"oa) i Plantae No encla#%ra i!o 8umirea mi"o este stabilit de ctre #omitetul $nterna%ional de Bacteriologie Sistematic&. 8omenclatura ta?onilor are la origine un s%bs#an#i+ grec sau latin, care de%inete cel mai evident caracter al mi"o studiate, la care se adaug un anumit s%(i. latin. Or-in%l 6ctinom:cetales$ ,piroc)aetales Fa ilia +nterobacteriaceae$ ,piroc)aetaceae Gen%l ,tap):lococc%s, Eeptospira, *lostridi% , 4seudomonas S&ecia denumire binar (Gen M specie)# 'sc(eric(ia coli, Stap(ylococcus aureus, Mycobacterium tuberculosis, etc. E?EM7LU# ,pecia Escherichia coli Cenul Esc;eric;ia >amilia En#erobac#eriaceae -

5rdinul En#erobac#eriales *lasa Ga a&ro#eobac#eria $ipul 7ro#eobac#eria 7omeniul - Bac#eria BACTERIOLOGIA GENERALA. CELULA BACTERIAN1 Dacteriile sunt organisme unicelulare procariote autonome, cu dimensiuni &ntre 0,J i 10 Pm (,piroc)aeta J.0 Pm) i care di%er esenial de celulele eucariote animale sau vegetale. Cel%le e%cario#e 6paratul nuclear nucleu cu nucleoli, &ncon@urat de membran nuclear *romozomi cu structur comple?, )istone asociate, set diploid Eipsa peretelui celular (&n caz de prezen conine c)itina sau celuloza) 4rezena organitelor celulare Cel%le &rocario#e Molecul de 678 circular, lipsa membranei nucleare ,tructur cromozomic simpl,set )aploid 4rezena peretelui celular ce conine obligator peptidoglican

*elula se divide prin mitoz sau meioz 7iviziune binar

6bsena organitelor celulare, citoplasma omogen, necompartimentat J tipuri de ribosomi &n citoplasm i &n $oi ribosomii sunt identici mitocondrii sau cloroplaste *oe%icientul de sedimentare al ribosomului '0 , (citoplasma) (0 , (mitocondrii) (0 , (.0, , -0 ,)

MORFOLOGIA BACTERIILOR Mor%ologic se disting 3 grupe de bacterii# For e s(erice 'coci) For e al%ngi#e 'bas#ona,e) For e :nc%rba#e!s&irala#e Bac#erii &oli or(e@ !ctinomyces, )ickettsia, #(lamydia, Mycoplasma
-

For ele s(erice 'cocc%s) Micrococi (Micrococcus) celule izolate Di&lococi (7iplococcus) perec)i (neisserii - bob de ca%ea, pneumococi - lanceolati) S#re&#ococi (,treptococcus) - lanuri Te#racoci ($etracoccus) c9te 3 celule Sarcine (,arcina) pac)ete din '-1 --J coci S#a(ilococi (,tap):lococcus) grmezi neregulate de coci

For ele al%ngi#e 'bas#ona,e) 1. Bac#eri% bastonae cu capetele rotun@ite, nu %ormeaz spori (M:cobacterium, *or:nebacterium, enterobacterii, etc) J. Bacill%s bastonae mari cu capetele retezate, %ormeaz spori ce nu depesc diametrul celulei (e?.# Bacillus ant(racis). 4osibil aran@area &n lanuri - streptobacili -. Clos#ri-i% bastonae cu capetele rotun@ite, %ormeaz spori ce depesc diametrul celulei

(e?.# #lostridium tetani, #lostridium botulinum, #* perfringens, etc) For ele :nc%rba#e 's&irala#e) A 2ibrio bastonae &ncurbate (1"J spir, aspect de virgul) (e?.# +ibrio c(olerae) A Ca &>lobac#er$ Belicobac#er J spire, aspect de <pasre &n zbor= (e?.# #ampylobacter ,e,uni) A S&irill% celule spiralate rigide A S&iroc;ae#a celule spiralate, cu .-J. spire, %le?ibile (e?.# $reponema, Eeptospira, Dorrelia)

E?AMENUL MICROSCO7IC ,tudiaz mor%ologia i structura bacteriilor, precum i caracterele lor tinctoriale. +?amenului microscopic pot %i e?puse lic)ide biologice sterile (s9nge, E*;, lic)id pleural), precum i prelevate nesterile din cile respiratorii, tubul digestiv, aparatul uro-genital, tegument, urec)i, oc)i, etc +?amenul microscopic poate %i e%ectuat# On s#are na#i+5 (preparate umede, necolorate# <&ntre lam i lamel=, <pictur suspendat=). ,tudiaz mor%ologia, mobilitatea bacteriilor, unele activiti (e?.# sporogeneza) On (ro#i%ri (preparate %i?ate i colorate) 7re&ararea (ro#i%l%i 1. Etalarea materialului microbian (produs patologic, cultur microbian) &n strat subire pe supra%aa unei lame de sticl degresat J. Uscarea -. Fixarea (termic, c)imic). 5moar microbii i marete a%initatea lor pentru colorani 3. Colorarea. 6sigur contrastul dintre microbi i %ondul preparatului C. Examinarea %rotiului la microscopul optic cu imersie Carac#er #inc#orial capacitatea bacteriilor de a %i?a di%erii colorani *oloranii ba*ici (violetul de genian sau de metil, %ucsina bazic, albastrul de metilen, vezuvina, c)rizoidina, etc) au a%initate pentru structurile acide ale celulei bacteriene Ti&%ri -e colora4ii# simple, comple?e (di%ereniale, speciale) ETA7ELE ISTORICE DE E2OLUDIE A MICROBIOLOGIEI A +M4A;A*F (p9n &n sec. KL) Bippocrate considera c maladiile in%ecioase sunt cauzate de modi%icarea aerului prin miasme Cirolamo >racastoro, de la Gniversitatea din 4adua, a presupus e?istena unei -seminaria contagiosus. , mi"o in%ectante, capabile s se multiplice AA M5;>5E5CA*F (sec. KLA KLAAA) 6ntonie van EeeuQen)oe2, 1 (- prima observare i descriere a mi"o AAA - >AHA5E5CA*F (sec. KAK) $)eodor ,c)Qann i >rantz ,c)ultze discrediteaz teoria generaiei spontane. Eouis 4asteur, ;obert Roc) con%irm teoria germenilor. Lo%is 7as#e%r a demonstrat speci%icitatea proceselor %ermentative (bolile vinului), a identi%icat agenii cauzali ai bolii viermilor de mtase, a preparat vaccinuri e%iciente pentru prevenirea turbrii, antra?ului, )olerei ginilor, a susinut necesitatea sterilizrii instrumentelor, banda@elor, etc. Rober# Eoc; a utilizat %rotiul, a &ntrodus mediile de cultur solide, a izolat agentul antra?ului i al tuberculozei. 6utor al teoriei de con%irmare a rolului etiologic al unui mi"o (postulatele lui Roc)) Ilia Mecinico+ argumenteaz rolul antagonist al %lorei intestinale normale, a descoperit %agocitoza i rolul in%lamaiei &n aprarea antimicrobian. Ale.an-er Fle ing descoper penicilina .

E il Ro%. propune mediul de cultivare a agentului di%teriei, obine i utilizeaz serurile imune antito?ice contra di%teriei, %ondator al imunitii umorale 2ic#or Babe, %ondator al microbiologiei &n ;om9nia, autor al primului manual de microbiologie. ,tudiaz rabia. Ion Can#ac%*ino a studiat patogeneza )olerei, tuberculozei, vaccinul i vaccinarea anti)olerica. >ondatorul colii de microbiologie din ;om9nia