12/5/2010

Metabolismul proteinelor & amino acizilor

Digestia proteinelor Absorbia amino acizilor, di-, tri-peptidelor. Patologie Preluarea amino acizilor din snge Degradarea proteinelor endogene Viteza de rennoire a proteinelor Rezerva de amino acizi Catabolismul amino acizilor
1. Dezaminare
prin transaminare oxidativ neoxidativ

2. 3.

Transportul NH3 Catabolismul -cetoacizilor rezultai prin dezaminare

Amino acizi gluco-, ceto-, gluco&ceto-formatori Exemplificare: amino acizi ramificai (Leu, Ile, Val) si aromatici (Phe, Tyr) Patologie: boala urinei cu miros de sirop de arar, fenilcetonuria, alcaptonuria

Sinteza amino acizilor neesentiali

Digestia proteinelor
Proteine exogene
Pepsina

Stomac
Amino acizi
Flora bacteriana

Peptide mari Lumen intestinal Peptidaze

Tripsina Chimotripsina Elastaza Carboxipeptidaze

NH3

Amino acizi

Oligopeptide
Marginea in perie Oligopeptidaze

Intestin
Amino acizi Dipeptide & Tripeptide
Enterocite Dipeptidaze Tripeptidaze

Amino acizi
Difuzie facilitata (polul latero-bazal al enterocitelor)

Vena porta

12/5/2010

Digestia proteinelor
Etap Digestia gastric Localizare Stomac Ageni H+ Pepsin Tripsin Chimotripsin Elastaz Carboxipeptidaz Oligopeptidaze Sisteme transport Dipeptidaze Tripeptidaze Difuzie facilitat Rezultat Denaturare Peptide mari, Aa Oligopeptide (2-8 aminoacizi) Amino acizi Di & Tripeptide Amino acizi Transport n celulele epiteliale Clivare peptide Aminoacizi Transport Aa n capilare

Digestia intestinal

Lumenul intestinal

Marginea n perie Membrana enterocitului Absorbie Citoplasma enterocitului Membrana contraluminal a enterocitului

Proteaze digestive gastrice & pancreatice

Proteaz
Pepsin (endo) Tripsin (endo) Chimotripsin (endo) Elastaz (endo) Carboxipeptidaz A (exo) Carboxipeptidaz B (exo)

Surs
Stomac

Familia
Aspartat

Proenzim
Pepsinogen

Activare
H+ Autoactivare Enteropeptidaza Tripsina Tripsina

Specificitate
Tyr, Phe, Trp Glu Arg, Lys

Pancreas

Serin Serin

Tripsinogen

Pancreas

Chimotripsinogen

Trp, Phe, Tyr, Met

Pancreas

Serin

Proelastaz

Tripsina

Gly, Ser, Ala

Pancreas

Zinc

Pro-carboxipeptidaz A

Tripsina

Tyr, Phe, Trp Val, Leu, Ile

Pancreas

Zinc

Pro-carboxipeptidaz B

Tripsina

Arg, Lys

12/5/2010

Absobia Aminoacizilor, Di & Tripeptidelor

Amino acizi Na+ Di-, tripeptide

Lumenul intestinal

Epiteliul intestinal
Dipeptide, tripeptide Dipeptidaze Tripeptidaze Amino acizi 3Na+ 2K+ Membrana contraluminal ATP ADP + Pi Marginea n perie

Capilare

3Na+ 2K+ = Na+,K+-ATPaza

= Co-transport Na+-dependent = Difuzie facilitat

Absorbia Aa & peptide n enterocite

Tri & dipeptidele au un transportor specializat comun Absorbia amino acizilor se realizeaz printr-un mecanism activ cuplat cu transportul ionilor Na+ Exist sisteme de transport individualizate pentru: a) Amino acizi neutri (alifatici & aromatici) b) Amino acizi bazici & Cistin c) Amino acizi acizi (Asp, Glu) d) Imino acizi (Pro)

12/5/2010

Transportul Aa din snge n celule

Ciclul GT (pentru Aa neutri, Met) Transportori membranari specifici
Cotransport Na+ consum ATP activai de insulin 6 tipuri, specifici pentru:
Phe, Tyr, Trp & Ala, Ser, Gly Ala, Ser, Cys Lys, Arg, Orn, Cistina Glu, Asp Gln, Asn, His (numai n hepatocite) Leu, Ile, Val (independent de pompa de Na+) Cistinuria = Defect al transportului Lys, Arg, Orn, cistinei
Imposibilitatea reabsorbiei renale a cistinei Precipitarea cistinei Calculi renali Diagnostic = excreia urinar excesiv a Lys, Arg,Orn Boala Hartnup = Defect al transportorilor Aa monoamino monocarboxilici neutri Imposibilitatea reabsorbiei renale a aminoacizilor respectivi Semne neurologice, tulburari psihice, erupii cutanate fotosensibile

Patologie

Degradarea proteinelor endogene

Proteoliza citoplasmatic
Activ mai ales n miocite Catalizat de proteazom = complex de proteaze Sunt degradate doar proteinele endogene marcate prin ubiquitinilare (condensare a H2N-Lys-Protein cu HOOC-Ub, cu consum de ATP) Timpul de njumtire (t1/2 ) al proteinei depinde de natura Aa N-terminal
Ser => t1/2 > 20 ore Asp => t1/2 = 3 minute sau de prezena secvenei Pro-Glu-Ser-Thr (PEST) => degradare rapid

Proteoliza lizozomal
Activ mai ales n hepatocite i celulele sistemului reticulo-endotelial Catalizat de proteaze acide (catepsine)

12/5/2010

Proteoliza citoplasmatic

Viteza de rennoire (turnover) a proteinelor

Majoritatea proteinelor sunt constant sintetizate i apoi degradate ceea ce permite ndeprtarea proteinelor anormale sau inutile Concentraia, la un moment dat, a unei proteine poate fi influenat prin
reglarea sintezei, degradarea avnd un rol minor (proteine inductibile) reglarea degradrii, sinteza fiind relativ constant (proteine constitutive)

n cazul unui individ sntos cantitatea total de proteine este constant => viteza de degradare = viteza de sintez Viteza de rennoire (turnover) difer de la o protein la alta, t1/2 poate fi:
Minute ore (proteine reglatoare, proteine mpachetate greit) Zile sptmni (majoritatea proteinelor celulare) Luni ani (proteine structurale, metabolic stabile, de exemplu colagen)

12/5/2010

Reglarea echilibrului Sintez Degradare

Postprandial & Perioada de cretere
=> [Insulin] & [Gln, Glu, Leu (cu rol de semnale)] => Biosinteza & Degradarea proteinelor

Inaniie prelungit
=> [Adrenalin] & [Cortizol] => Degradarea proteinelor (muchi)

Stres (stare hipercatabolic) ex. infecie, traumatisme, arsuri

=> [Adrenalin] & [Cortizol] => Degradarea proteinelor (muchi)

Rezerva de Amino acizi

amino acid pool
Proteoliza proteinelor endogene 400g/zi Digestia proteinelor exogene 100g/zi Sinteza Aa neeseniali variabil

REZERVA DE AMINOACIZI (100g)

Porfirine Creatin Neuromediatori Purine Pirimidine Ali compui cu N

Sinteza de novo a proteinelor endogene 400g/zi

Catabolism variabil

Sinteza compuilor cu rol biologic 30g/zi

Glucoz Glicogen CO2

Corpi cetonici Acizi grai Steroizi

12/5/2010

Catabolismul amino acizilor

Etape
I. Dezaminare prin

Transaminare
Dezaminare oxidativ Dezaminare neoxidativ

II. Catabolizarea catenei hidrocarbonate

Catabolismul aminoacizilor
Etapa I = Dezaminare
1. Transaminare (citoplasm)
Catalizat de aminotransferaze (PALPO dependente) larg distribuite Cele mai importante transaminaze: GOT i GPT Toi aminoacizii, cu excepia Lys & Thr, pot fi dezaminai prin transaminare Majoritatea reaciilor de transaminare au loc n ficat (Tyr transaminaza este exclusiv hepatic) Transaminarea Val, Leu, Ile are loc exclusiv n muschi

2.

Dezaminare oxidativ (mitocondrie)

Dezaminarea Glu, catalizat de glutamat dehidrogenaz (NAD+& NADP+ dependent) Dezaminarea Gly, catalizat de complexul de scindare (NAD+, H4F, PLP) => NH3 + CO2 Dezaminarea L-aminoacizilor, catalizat de L-aminoacid oxidaz (FMN) Dezaminarea D-aminoacizilor, catalizat de D-Aminoacid oxidaz (FAD)

3.

Dezaminare neoxidativ (citoplasm)

Dezaminarea Ser & Thr, catalizat de dehidrataz = > NH4+ + piruvat & -cetobutirat Dezaminarea Gln, catalizat de glutaminaz => Glu + NH3

12/5/2010

1.

Dezaminare prin transaminare

Donor

Acceptor

Soarta Glu n muchi

+
Piruvat Glutamat Alanina

Forma de transport a NH3 din muchi ficat

-Cetoglutarat

12/5/2010

Ciclul alanin glucoz

Soarta Glu n majoritatea esuturilor

Forma de transport a NH3 din majoritatea esuturilor ficat

12/5/2010

Glutamin sintetaza Reglare

Allosteric Prin adenilare / deadenilare

Soarta Gln preluat de ficat & rinichi

10

12/5/2010

Soarta Glu rezultat din Gln n ficat (rinichi)

Glutamat dehidrogenaza (mitocondrie)

n dezaminarea oxidativ Glutamat DH este NAD+ dependent ! n aminarea reductiv Glutamat DH este NADPH dependent !

Glutamat dehidrogenaza - Reglare

11

12/5/2010

Transportul NH3 din esuturificat

Forma de transport NH3 de la esuturi ficat

Forma de transport NH3 de la muchi ficat

Catabolismul amino acizilor

Etapa II Degradarea catenei hidrocarbonate
Amino acizii glucoformatori formeaz:
- piruvat (Ala, Ser, Cys, Gly, Thr,Trp) - propionil CoA (Val, Ile, Met, Thr) convertibil in succinil CoA - fumarat (Asp, Phe, Tyr) - oxalacetat (Asp, Asn) - -cetoglutarat (Pro, His, Arg, Gln, Glu)

Amino acizii cetoformatori formeaz:

- acetil-CoA (Ile, Thr) - acetoacetil-CoA (Trp, Lys) - HMG-CoA (Leu) - Acetoacetat (Phe, Tyr)

Amino acizi att glucoformatori ct i cetoformatori

- Ile, Thr, Phe, Tyr, Trp

Exclusiv glucoformatori

Exclusiv cetoformatori

12

12/5/2010

Amino acizi gluco & cetoformatori

Clasificarea amino acizilor

n funcie de: soarta catenei hidrocarbonate: gluco-, ceto-, gluco- & ceto-formatori
capacitatea organismului de a-i sintetiza: neeseniali, eseniali (exclusiv exogeni)

Glucoformatori
Alanina Arginina* Asparagina Aspartat Cisteina Glutamat Glutamina Glicina Histidina* Prolina Serina Metionina Valina

Gluco & Cetoformatori

Tirozina

Cetoformatori

Eseniali

Neeseniali

Fenilalanina Izoleucina Triptofan Treonina

Leucina Lizina

* Semieseniali

13

12/5/2010

Catabolismul Aa ramificai

Catabolismul Phe & Tyr

Oxidaza

14

12/5/2010

Fenilcetonuria
Boala genetic determinat de absena & anormalitatea enzimelor: fenilalanin hidroxilaz dihidrobiopterin reductaz => catabolizarea Phe pe calea alternativ, catalizat de Phe transaminaz

Catabolismul Phe Calea alternativ

Acumulare n ficat snge urin => encefalopatie, retard mental = Idioia fenilpiruvic

Urin

15

12/5/2010

Alcaptonuria
Deficiena oxidazei acidului homogentizic (vezi catabolismul Phe &Tyr)
=> acumularea acidului homogentizic care polimerizeaz => pigmeni care coloreaz esutul conjunctiv (ocronoz), se depun pe discurile intervertebrale (artropatie ocronotic) i coloreaz urina.

Sinteza Aa neeseniali
Din precursori cetoacizi prin transaminare - piruvat alanin - oxalacetat aspartat Din precursori aminoacizi prin amidare - Glu Gln - Asp Asn Din precursori amino acizi prin hidroxilare - Phe Tyr

16