Grupa : TPPA 1B

Pnzari Nadejda
Varzari Renata
Dicusar Nadejda
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar
Cluj - Napoca

Oul este alctuit, din
punct de vedere morfologic,
din 3 pri :

- nveliul exterior solid numit
coaj (partea necomestibil care
reprezint 10-12,5% din masa
oului);
- albu (reprezint 55-60% din
masa oului i peste 61% din
greutatea prii comestibile a
oului);
- glbenu (30-33% din
greutatea total i cca. 37% din
partea comestibil).


Compoziia oului este deosebit de complex,
coninnd o serie de compui eseniali pentru om.
Subtanele energetice din acest aliment confer o
valoare energetic de 155 kcal/100g parte
comestibil (cca 75 kcal per 1 ou).
Principalele substane din ou sunt:
ap 74 %
proteine(aminoacizi, albumine, globuline)
12,7%
lipide (acizi grai saturai i nesaturai, lecitine,
glicerin liber i esterificat, colesterol) 11,7%
vitamine (colin, complexul B, liposolubilele
A,D,E) 0,5%
minerale (P,Ca,Mg,K,Fe,Zn,Na,Cl,S,I) - 0,5%.
1. Fluorescena.
2. Identificarea pigmenilor carotenoidici prin
spectrometria UV-VIS.
4. Determinarea dioxinei prin
cromatografie de gaze de nalt rezoluie.
5. Salifierea proteinelor.

3. Obinerea i purificarea prin cromatografie a
lecitinei din glbenuul de ou.

Multe substane prezint fenomenul de emisie de
lumin sub aciunea unei radiaii absorbite, fenomen
cunoscut sub denumirea de fluorescen.
Analiza prin fluorescen se folosete pentru:
determinarea prospeimii oulor :
- oule proaspete, n lumina UV, prezint fluorescen
roie (albuul d fluorescen roie puternic, iar
glbenuul fluorescen oranj);
- oule vechi prezint fluorescen albastru nchis (albuul i galbenuul dau
fluorescen verde-violet).
determinri de vitamine B1 i B2;
determinri de proteine care conin
aminoacizi aromatici (triptofan, tirozina).
Comportamentul cromatografic i spectrul de absorbie n UV-Vis
furnizeaz primele indicii pentru identificarea carotenoizilor. Att
lungimile de und ale absorbiei maxime (max) ct i forma spectrului
(structura spectral fin) sunt caracteristici ale cromoforului.
Absorbia UV-Vis pentru carotenoizii din ou :

Carotenoidul Solventul max (nm)
- caroten aceton,cloroform,e
tanol,hexan,eter de
petrol

(429)
(435)
(425)
(425)
452
461
450
445
478
485
478
477
lutein cloroform,
etanol,
eter de petrol
435
422
421
458
445
445
485
474
474
zeaxantin aceton,
cloroform,
etanol,
eter de petrol
(430)
(433)
(428)
(424)
452
462
450
449
479
493
478
476
Spectrul de absorbie reflect organizarea sistemului de legturi duble conjugate i
constituie amprenta pigmenilor. Spectroscopia de absorbie pare a fi cea mai simpl
metod de identificare a componenilor majori prezeni ntr-un amestec.
Mod de lucru :
glbenuul se amestec cu 25 ml aceton, care l deshidrateaz
i dizolv grsimile cu excepia lecitinei;
dup repaus acetona se decanteaz sau se filtreaz;
se repet operaia de 3 ori;
reziduul obinut se ntinde pe o hrtie de filtru i se usuc;
pudra rezultat se trece ntr-un balon Erlenmeyer;
se agit cu 25 ml amestec cloroform i alcool metilic (2:1) i se filtreaz lichidul;
pudra rmas pe hrtia de filtru este reluat cu aceiai cantitate de amestec cloroform-
alcool, repetndu-se operaia anterioar;
se obine o soluie cloroformic-alcoolic de lecitin, ce se nclzete la 63C;
produsul obinut n urma extraciei cu solveni organici se prezint ca o mas galben
de consisten moale care se evaporeaz n vid.
Purificarea lecitinei se face prin cromatografie pe coloan de celuloz pentru
ndeprtarea impuritilor azotate nelipidice, urmat de cromatografia pe alumin, care
reine cefalinele, i apoi pe coloan de Silicagel, echilibrat cu soluia CHCl
3
-CH3OH
(2:1; v:v), pentru separarea lizofosfatidelor i sfingolipidelor.
Etapele :
1. Pregtirea probei pentru analiz
2. Extracia grsimii din ou, n mai multe etape cu solveni
organici (alcool etilic grade HPLC (99,7%, vol/vol), dietileter
pico grade, nhexan pico grade).
3. Purificarea extractelor, pe coloane multiple, folosind diferite
materiale de adsorbie (silice activat cu acid sulfuric concentrat, oxid
de aluminiu, florisil activat cu ap ultrapur).
4. Concentrarea extractelor purificate, n curent de azot(15-18 min).

5. Separarea, identificarea si cuantificarea diferiilor compui
PCDD/PCDF, care se realizeaz cu un echipament complex
sistem de dou cromatografe de gaze de nalt rezoluie,
cuplat cu spectrometru de mas de nalt rezoluie.

Substane necesare :
- soluie proteic (de albu de ou);
- sulfat de amoniu soluie saturat.
Globulinele precipit cu (NH
4
)
2
SO
4
de 50%,
iar albuminele - cu soluie saturat de (NH
4
)
2
SO
4
.

Proteinele astfel precipitate se pot separa i se
redizolv prin diluare, trecnd n soluie, fr s se
produc denaturarea lor.
Astfel pot fi separate albuminele de globuline.

Mod de lucru :
1) la 1-2 ml soluie proteic se adaug un volum egal din soluia de sulfat de amoniu.
2) se agit uor amestecul.
3) apare o tulbureal sau fulgi, care se depun sub form de precipitat.