Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Biologie Celulara
Biologie Celulara
BIOLOGIE CELULAR
Suport de curs
Unitatea de invatare 1
Permeabilitatea membranar
In general, biomembranelor (si, inclusiv, plasmalemei) li se atribuie trei functii principale:
1. rol de frontiera fizica si de bariera cu permeabilitate selectiva;
2. rol de matrice pentru sistemele enzimatice complexe, care controleaza o serie de functii
celulare de baza (in particular, in cazul membranelor mitocondriale si cele ale reticulului
endoplasmatic);
3. rol in recunoasterea imunitara si adezivitatea celulara (in special prin glicoproteinele
membranare).
Permeabilitatea este expresia functionala a transportului prin membranele celulare. acest
termen, initial vag, a fost inlocuit progresiv cu notiunea de permeabilitate selectiva, care, desi nu
cuprinde totalitatea fenomenelor de transport, este larg utilizata in prezent.
Permeabilitatea selectiva a biomembranelor are semnificatii biologice esentiale:
a. extragerea din mediu a substantelor plastice si energetice si concentrarea lor
intracelulara;
b. eliminarea din celula a produsilor de catabolism, a unor deseuri toxice, dar si a unor
substante utile;
c. reglarea volumului celular, a pH-ului si a compozitiei ionice intracelulare, necesare
mentinerii unei homeostazii moleculare permanente, indispensabile crearii unui mediu favorabil
pentru activitatile enzimatice;
d. crearea gradientilor ionici responsabili de generarea excitabilitatii celulare (in special la
celulele nervoase si musculare).
1.1.
1.2.
Desi o clasificare unitara a tuturor posibilitatilor de transport prin membrana celulara este
dificil de realizat, prezentarea lor globala poate fi facuta tinand cont de mai multe criterii, printre
care :
a. marimea particulelor transportate;
b. categoriile de molecule transportate (ioni anorganici, molecule organice, etc.);
c.mecanismele de transfer (structurile moleculare implicate in transport, consumul
energetic afectat);
d.particularitatile celulare ale transportului.
Reunind toate aceste criterii, tipurile de transport prin biomembrane pot fi sistematizate si
rezumate astfel (fig. 1.1.):
Microtransferul membranar
transportul pasiv
- difuzia simpla (prin bistratul lipidic)
- difuzia facilitata
- difuzia prin proteine - canal
5
transportul activ
- transportul activ primar
- transportul activ secundar
- translocatia de grup
Macrotransferul membranar
transportul direct al macromoleculelor
transport prin vezicule (endocitoza, exocitoza, transcitoza)
Fig. 1.1. Comparatie intre diferitele forme de transport pasiv si transportul activ
Fig. 1.2. Fenomenul de difuzie a unei substante intre doua compartimemte separate de o membrana
relativa a solutiei reprezinta presiunea care trebuie aplicata pentru anularea fenomenului osm
ozei (fig. 1.3.)
Permeabilitatea pentru apa a unei membrane poate fi explicata prin doua mecanisme de
transfer transmembranar:
in absenta unui flux hidric net - prin difuzie, care se supune legii lui Fick;
in conditiile unui flux hidric net, difuzia apei este conditionata de legi hidrodinamice
(filtrare), sau legile osmozei.
Fig. 1.3. Fenomenul de osmoza si presiunea osmotica a solutiilor din doua medii separate de o membrana
semipermeabila
Ambele mecanisme de permeabilitate hidrica trebuie sa tina cont de starile apei (apa
libera, sau apa legata, indeosebi de proteine) si de structurile membranare la nivelul carora se
produce transportul acestei substante. Din acest punct de vedere, se presupune existenta unor
pori aposi, de natura proteica, sau a unor transportori, a caror caracterizare precisa ramane inca
in studiu.
Transportul apei prin dublul strat lipidic, realizat prin modificarile conformationale ale
lanturilor hidrocarbonat, ce se deplaseaza de o parte si de alta a membranei, nu este o ipoteza
acceptabila. Desi acest mecanism poate fi responsabil pentru cel mult 10% din cantitatea de apa
transportata, el ofera un coeficient de permeabilitate de 10 ori mai mic fata de cel constatat
experimental. Cea mai mare parte a apei ( cca. 90%) este transportata prin pori proteici.
Canale proteice apoase se pot constitui fie in interiorul proteinelor membranare, fie in zona
de contact dintre mai multe subunitati proteice, asociate in ansambluri. Unii pori proteici pentru apa
permit trecerea acestor molecule, in exclusivitate, in timp ce altii permit si trecerea moleculelor mai
mic
In timp ce canalele formate de proteinele de transport ale apei sunt permanent deschise,
alte canale permit doar o comunicare tranzitorie. Acestea sunt canalele cu poarta, implicate in
8
transportul unor electroliti si ioni, in functie de gradientul lor de concentratie. Exista doua tipuri de
canale cu poarta (fig. 1.4.):
- canale ligand - dependente - care se deschid ca raspuns al atasarii unui ligand la aceste
proteine, sau de proteine asociate, cu rol de receptor;
- canale voltaj - dependente - care se deschid in conditii de depolarizare a membranei.
In majoritatea cazurilor, canalele cu poarta se inchid rapid, chiar daca stimulul care le - a
deschis initial persista.
La nivelul jonctiunii neuro-musculare, raspunsul muscular (contractia), obtinut prin
stimularea nervului motor, implica inchiderea si deschiderea secventiala a cel putin 4 seturi de
canale diferite, in mai putin de o secunda.
c. Difuzia facilitata
O serie de substante (uree, glucoza, aminoacizi) trec prin membrane cu viteze de
aproximativ 100.000 ori mai mari decat ar fi de asteptat, tinand cont de dimensiunea si solubilitatea
lor in lipide. Acest tip de transport a fost denumit difuzie facilitata si este considerat o forma de
transport pasiv deoarece se realizeaza in virtutea gradientului de concentratie si faciliteaza
atingerea echilibrului electrochimic mult mai rapid decat in cazul difuziei simple. Transportul facilitat
nu necesita consum de energie pentru realizare si nu este blocat de inhibitori ai respiratiei si
glicolizei.
Astazi este acceptat faptul ca substratul molecular al difuziei facilitate este reprezentat de
proteine mobile, care functioneaza ca niste carausi (carrieri), legand specific si transportand
solvitul de pe o parte pe cealalta a membranei celulare. Procesul este asemanator cu o reactie
enzima - substrat, carrierii comportandu-se ca enzime atasate membranei (fig. 1.5.).
Analogia difuziei pasive cu un proces enzimatic este totusi limitata, deoarece moleculele
solvite transportate nu sunt de obicei modificate covalent de proteina transportoare. Difuzia
facilitata are cateva trasaturi caracteristice:
- specificitatea - fiecare proteina carrier poseda un situs specific de legare pentru un anumit
solvit transportat;
- saturatia - atunci cand carrierul este saturat (toate siturile de legare sunt ocupate), viteza
de transfer este maxima. Cinetica transportului este similara cineticii enzimatice de tip Michaelis9
Menten. Orice carrier are o constanta de legare caracteristica (K m), egala cu cantitatea de solvit
transportata la 1/2 din viteza maxima de transport;
- competitivitatea - transportul poate fi blocat prin inhibitori competitivi (care concureaza
pentru acelasi situs de legare), sau necompetitivi (care se leaga si altereaza specific structura
carrierului).
Desi detaliile moleculare ale difuziei facilitate sunt incomplet intelese, este improbabil ca
procesul sa implice navigarea propriu-zisa a carrierului prin membrana. Este mult mai plauzibil ca
proteinele transportoare sa sufere o schimbare conformationala reversibila, care sa conduca la
transferul solvitului de pe o fata pe cealalta a membranei.
Fig.1.5. Difuzia facilitata transportul intracelular al glucozei prin intermediul unui carrier specific
de potasiu. In consecinta, compartimentul intra - si extracelular devin neutre din punct de vedere
electric; se creaza astfel un echilibru de membrana - echilibrul Donnan.
Conform postulatelor lui Donnan, la echilibru produsul concentratiei ionilor difuzibili este
egal, pe ambele fete ale membranei plasmatice. Aceasta distributie ionica de o parte si de alta a
plasmalemei da nastere unui gradient electrochimic si unei incarcari electrice a membranei
(negativa la interior si pozitiva la exterior). Fluxurile ionilor, pe directia gradientului lor de
concentratie, sunt contrabalansate de fluxuri inverse, care mentin echilibrul ionic si polaritatea
membranei celulare.
Ulterior s-a dovedit, prin masurarea concentratiei ionilor pe ambele fete ale plasmalemei,
ca valorile prezise de Donnan (in special pentru Na+) nu concorda cu cele determinate
experimental, iar energia libera din cele doua compartimente nu este egala.
Determinarea potentialului de membrana pe axonii giganti de calmar a condus la concluzia
ca acest parametru este determinat, in cea mai mare masura, de gradientul concentratiei de K+ si
ca membrana, in repaus, este mai permeabila pentru K + decat pentru Na+. In generarea si
mentinerea potentialului membranar de repaus au fost identificate doua tipuri de proteine:
canalele de K+ - intervin in efluxul de potasiu, pe directia gradientului sau de
concentratie, avand ca rezultat incarcarea electrica negativa a interiorului si pozitiva
a exteriorului membranei. Pe masura ce diferenta de potential creste, efluxul de
potasiu scade, iar, la 75 Mv, tendinta de iesire a potasiului este contrabalansata
de patrunderea lui in celula, fluxul net al acestui ion devenind zero. Gradientul
electrochimic al K+ se anuleaza.
In mica masura, canalele de potasiu sunt permeabile si pentru Na +, care patrunde lent in
celule, conform gradientului sau de concentratie. Pozitivarea interiorului celulei, prin patrunderea
sodiului, genereaza un nou eflux de potasiu. In felul acesta, prin perpetuarea celor doua tendinte in
timp, se poate ajunge la o egalizare a concentratiei de sodiu si de potasiu si la disparitia
potentialului de membrana. Acest fenomen este insa contrabalansat de existenta pompelor de Na+
si K+ in membrana, care expulzeaza permanent sodiu si reintroduc potasiul;
pompa de Na+ - K+
Notiunea de pompa de Na+ a fost introdusa de Dean, ca mecanism capabil sa
efectueze un lucru metabolic. In 1957, Skou postuleaza, ca baza enzimatica pentru
transportul activ, Na+/K+ ATP - aza. Ulterior, s-a dovedit ca aceasta enzima este o
proteina membranara, care reprezinta insasi pompa de sodiu-potasiu. Functionarea
optima a acestei enzime (hidroliza ATP - ului in ADP si Pi) necesita prezenta obligatorie
ATP ului.
ATP - aza Na+/K+ - dependenta are cateva caracteristici principale:
transportul de sodiu si potasiu este strans cuplat cu hidroliza ATP-ului. Prin
utilizarea inhibitorilor cardiotonici ai fosforilarii oxidative (glicozidelele digitalina si
ouabaina), transportul ionilor este blocat;
pompa prezinta specificitate pentru K+ numai la exteriorul membranei, iar pentru Na +
numai la interior;
ouabaina are efect numai pe fata externa a membranei, deoarece este un inhibitor
competitiv pentru situsurile de fixare ale potasiului;
pentru fiecare molecula de ATP hidrolizata, ATP - aza pompeaza la exterior 3 ioni
Na+ si introduce 2 ioni K+, fiecare molecula enzimatica hidrolizand 100 moli de
ATP/sec.
Ulterior, ATP - aza Na+/K+ - dependenta a fost purificata, gasindu-se ca ea este formata
din doua subunitati: o subunitate catalitica, reprezentata de o proteina transmembranara ( de cca.
100.000 Da), care contine siturile de atasare ale Na + si ATP-ului pe fata citosolica si siturile pentru
K+ si ouabaina pe fata externa a membranei si o glicoproteina ( de circa 45.000 Da), a carei functie
este inca necunoscuta (fig. 1.6.).
Pompa de Na+ si K+ functioneaza ca un antiport, pompand activ Na+ in afara celulei si K+ in
interior, impotriva gradientilor lor electrochimici. Legarea Na + pe fata citosolica a ATP - azei si
hidroliza consecutiva a ATP-ului induc o schimbare conformationala a proteinei, care face ca Na +
sa fie transportat prin membrana si eliberat la exteriorul celulei. Legarea K + pe fata externa si
defosforilarea determina transferul transmembranar al acestui ion si eliberarea lui in celula. Aceste
schimbari conformationale sunt analoge cu tranzitiile de tip ping-pong, caracteristice transportului
11
mediat, dar implica consum de energie metabolica si o secventa stricta a etapelor de transport (fig.
1.7.).
ATP - aza Na+/K+ - dependenta este prezenta virtual in membrana plasmatica a tuturor
celulelor vegetale si animale si este responsabila nu numai de mentinerea potentialului de
membrana, dar si de mentinerea volumului celular si dirijarea transportului activ al unor aminoacizi
si zaharuri. Mai mult de 1/3 din consumul energetic al celulei in repaus este afectat functionarii
pompei de Na+ si K+.
12
Pompele de Ca2+
In membrana plasmatica a multor celule animale, s-au descris cel putin 5 carrieri pentru
aminoacizi, fiecare carrier fiind specific pentru un grup inrudit de aminoacizi. Acestia opereaza ca
sisteme simport cu sodiul.
La bacterii, cele mai active sisteme transportoare dirijate de gradientele ionice utilizeaza in
special H+ in loc de Na+, ca ion cotransportat. De exemplu, proteina carrier pentru lactoza
(permeaza sau proteina m) este un monomer transmembranar (de circa 30.000 Da), care
functioneaza simport cu H+. Pentru fiecare molecula de lactoza transportata in celula se
cotransporta cate un proton.
c. Translocatia de grup
O alta categorie de transport activ, intalnita la unele celule bacteriene, este translocatia de
grup.
De exemplu, transportul unor zaharuri in celulele bacteriene implica fosforilarea acestor
molecule in timpul transferului lor prin membrana. Deoarece sunt ionizate si nu pot difuza din
celula, ozele fosforilate se acumuleaza in citoplasma. In plus, prin fosforilarea moleculelor
glucidice, concentratia citoplasmatica a glucidelor nefosforilate este mentinuta la valori foarte
scazute, astfel incat noi molecule patrund in celula. Aceste mecanisme de transport utilizeaza ca
sursa energetica principala fosfoenolpiruvatul, in locul ATP-ului (fig. 1.10.).
14
3
Fig. 1.10. Etape ale translocatiei de grup a glucozei prin plasmalema celulelor bacteriene
Endocitoza
16
veziculele formate, variabile ca forma si dimensiuni (intre 50 - 400 nm), se maresc progresiv,
prin fuzionarea lor, fie cu alte vezicule, fie, in majoritatea cazurilor, cu lizozomii primari. Se
formeaza astfel lizozomi secundari.
materialul prezent in lizozomii secundari este digerat sub actiunea hidrolazelor acide prezente
in matricea acestora. Produsii de biodegradare rezultati in urma digestiei (macromolecule)
traverseza membrana lizozomilor secundari si ajung in citosol, unde sunt utilizati de celula.
In unele cazuri, unii constituenti ai sunt sustrasi degradarii hidrolitice, prin desprinderea de
microvezicule din lizozomii secundari, care transporta materialul direct, sau prin intermediul
aparatului Golgi, inapoi la plasmalema.
Exista si vezicule endocitare care nu fuzioneaza cu lizozomii primari, ci trec prin
citoplasma, transportand materialul ingerat de la o suprafata celulara la suprafata celulara opusa.
Procesul este numit transcitoza (citopemfis), transportand, de exemplu, produsii de digestie, prin
endoteliul capilar, din plasma in lichidele interstitiale, in mod direct. Veziculele implicate in
transcitoza (de ~ 70 nm diametru) fuzioneaza intre ele, precum si cu cele doua membrane opuse
ale aceleiasi celule, formand un canal continuu in citoplasma, prin care se face transportul de
lichid.
Teoretic, toate celulele eucariote au capacitati endocitare. Deoarece acest proces decurge
continuu si spontan, este denumit endocitoza constitutiva (endocitoza in faza fluida).
Ritmul endocitozei constitutive este surprinzator de mare. De exemplu, un macrofag isi
poate ingera 25% din propriul volum intr-o ora, adica 100% din suprafata membranara in 1/2 ora.
Unele amoebe poseda o rata de ingestie si mai inalta.
Deoarece suprafata si volumul celular raman neschimbate in timp, este evident ca
membrana celulara este regenerata intr-un ritm egal cu consumul ei, prin exocitoza. Astfel se
recicleaza o buna parte din lipidele si proteinele membranare, avand loc un veritabil flux
membranar intracelular.
Endocitoza multor celule eucariote se realizeaza printr-o clasa speciala de vezicule, numite
vezicule acoperite, care provin din invaginarea unor portiuni membranare imbracate, de pe fata
citoplasmatica a plasmalemei.
Prin studiul biochimic al veziculelor acoperite, izolate, s-a gasit ca principala proteina
constitutiva a invelisului veziculelor este clathrina. Clathrina este o proteina fibrilara (~180.000 Da),
asociata cu o polipeptida mai mica (~35.000 da), formand impreuna o structura moleculara de
baza, ramificata, numita trischelion, alcatuita din 3 molecule de clathrina si 3 molecule polipeptidice
asociate. In arhitectura invelisului de clathrina moleculele individuale sunt aranjate reciproc intr-o
retea tridimensionala de hexagoane si pentagoane, care formeaza un poliedru regulat (fig. 1.12.).
Fig. 1.12. Aspectul invelisului de clathrina al unei vezicule acoperite si structura trischelionului
17
Inglobarea particulelor solide de catre fagocite este un proces mediat, care presupune
atasarea la membrana acestor celule doar a acelor structuri care au fost acoperite in prealabil de
18
un invelis de anticorpi, secretat de catre celula fagocitara. Atasarea particulelor invelite de anticorpi
la receptorii de membrana induce formarea de pseudopode fagocitare, care vor forma, dupa
fuziune, fagozomul. In conditiile in care anticorpii nu sunt uniform distribuiti pe suprafata celulei pe
cale de fagocitare, ci capati (aglomerati) la un pol al acesteia, fagocitoza nu este completa, ci se
finalizeaza doar cu un inceput de invaginare polara a membranei celulare.
Pana in prezent nu se cunoaste precis mecanismul de recunoastere de catre fagocite, a
celulelor moarte sau imbatranite, ca antigeni.
Exocitoza
Numeroase celule eucariote secreta la exterior micro- si macromolecule, prin vezicule care
fuzioneaza cu plasmalema, prin procesul de exocitoza. O serie de molecule raman atasate la
plasmalema sub forma de invelis celular, altele sunt inglobate in matricea extracelulara, iar altele
difuzeaza in plasma sau in lichidele interstitiale, ca nutrienti sau semnale pentru alte celule.
Veziculele exocitare, continand materialul sintetizat la nivelul sistemului vacuolar
citoplasmatic, se deschid permanent la nivelul plasmalemei, eliberandu-si continutul la exteriorul
celulei. Procesul poate fi secventializat in doua faze: de aderenta la monostratul lipidic intern si de
fuzionare cu portiunea respectiva a membranei celulare. Aderenta dintre vezicule si membrana
celulara, de tip bistrat lipidic, confera o imagine pentalamelara caracteristica, intalnita si in
endocitoza.
Unele vezicule fagocitare, numite vezicule secretorii, sunt depozitate in citoplasma si
exociteaza numai sub actiunea unui semnal chimic extracelular. Aceste semnale, reprezentate, de
obicei, de hormonii legati la receptori membranari specifici, determina o crestere temporara a
concentratiei Ca+2 in citosol, crestere care initiaza fuzionarea veziculelor cu membrana plasmatica
si , in final, exocitoza (fig.1.14.) .
19
20
21
Unitatea de invatare 2
Matricea extracelulara
Matricea extracelulara reprezinta materialul complex care umple spatiul dintre celule
Matricea este constituita dintr-o diversitate de molecule, imbinate si organizate in maniere
foarte diferite. Ea reprezinta o parte importanta a volumului tisular, cu precadere in tesuturile
conjunctive. Matricea nu constituie doar o combinatie chimica complexa, care confera rezistenta
fizica tesuturilor animale, ci joaca un rol important si in reglarea comportamentului celulelor care
vin in contact prin intermediul ei.
Moleculele constitutive ale matricei extracelulare sunt secretate local de variate tipuri de
celule apartinand diferitelor tesuturi (fibroblaste, condroblaste, osteoblaste, etc.).
Principalele clase de macromolecule secretate, care compun matricea extracelulara, sunt:
polizaharidele glicozaminice (glicozaminoglicanii, GAG) si
proteinele fibroase (cu rol structural sau de aderenta).
In timp ce polizaharidele, frecvent prezente sub forma de proteoglicani (agregate glico proteice), formeaza substanta fundamentala a matricei, cu structura de hidro-gel (ce permite
difuzia nutrientilor si a metabolitilor), proteinele inglobate in aceasta faza asigura rezistenta,
elasticitatea, dar si adezivitatea celulelor la fibrele matricei.
22
Fig. 2.2. Complex glicozaminoglicanic proteoglicanic de dimensiuni gigantice din compozitia matricei
extracelulare (A microfotografie electronica; B reprezentare schematica)
23
Fig. 2.4. Etape ale sintezei, asamblarii, secretiei si asocierii moleculelor de colagen in fibrele de colagen
Elastina este o proteina neglicozilata, continand circa 830 radicali de aminoacizi si fiind
foarte bogata in prolina si glicina. In afara de elastina, fibrele elastice sunt compuse si dintr-o
glicoproteina de forma microfibrilara.
Datorita caracterului hidrofob accentuat, moleculele de elastina formeaza filamente si retele
unite prin legaturi transversale covalente in spatiul extracelular.
Fibrele de elastina se pliaza intr-un mod aleatoriu, iar prin intermediul numeroaselor punti
intercatenare formate, se pot extinde si plia foarte usor, sub actiunea unor forte mecanice.Fibrele
elastice sunt de cel putin 5 ori mai elastice decat un elastic cu aceeasi sectiune (fig.2.5.).
Interactiunea lor cu fibrele inextensibile de colagen limiteaza insa amploarea intinderii, prevenind
ruperea tesutului.
2.2.3. Fibronectina
Reprezinta o glicoproteina de aderenta, bine caracterizata, care contribuie la legatura
celulelor cu alte molecule matriceale.
Fibronectina este un dimer compus din doua subunitati identice (formate din cate 2500
reziduri de aminoacizi), care sunt legate printr-o pereche de punti disulfidice la extremitatile lor
carboxilate. Fiecare subunitate prezinta o serie de domenii globulare, separate prin segmente
fibrilare flexibile. Fiecare domeniu globular are un rol diferit, la randul sau, functionand ca situs de
atasare pentru diverse alte molecule (colagen, heparina, receptorii specifici de la suprafata
diferitelor tipuri de celule, etc.) (fig.2.6.).
Domeniul de legare al fibronectinei la celule prezinta o secventa tripeptidica specifica:
arginina glicina asparagina (R-G-D). Polipeptidele artificiale care prezinta aceasta succesiune
de aminoacizi sunt inhibitori competitivi pentru situsurile celulare de legare a fibronectinei.
Secventa R-G-D nu este specifica doar pentru fibronectina, ci este comuna pentru o larga varietate
de proteine de aderenta extracelulara.
26
27
Fig. 2.9. Schema receptorului pentru fibronectina (receptor din familia integrinelor)
29
30
Unitatea de invatare 3
Recunoasterea si adezivitatea celulara
3.1. Recunoasterea celulara
Exista doua mecanisme fundamentale de recunoastere si asociere a celulelor, in vederea
asocierii lor tesuturi:
mecanismul cel mai simplu consta in asocierea reciproca, sau elementele matricei
extracelulare, a celulelor provenite din diviziunile repetate ale unei celulesusa.
Celulele isi dezvolta sisteme de aderenta, a caror distributie precisa determina
forma ansamblului celular; celulele nu pot parasi tesutul in formare. In general,
acest mecanism de histogeneza caracterizeaza tesuturile epiteliale.
al doilea mecanism este mai complex si implica migrarea celulara: o populatie
celulara invadeaza o alta populatie , iar celulele cu origini diferite interactioneaza,
formand un tesut mixt (un organ).
Un asemenea mecanism necesita orientarea celulelor migratoare spre destinatia lor finala,
fie prin intermediul unor semnale chimice (chimio - tactism), fie cu ajutorul unor fibrile proteice de
orientare (de exemplu fibronectina), cu care celulele interactioneaza (ghidare de contact). La embrionii vertebratelor, de exemplu, celulele crestei neurale se desprind de la nivelul tubului neural si
migreaza, apoi se diferentiaza si se asociaza cu alte celule, formand sistemul nervos periferic.
Fie ca se asambleaza dupa diviziune sau dupa migrare, celulele trebuie sa se recunoasca
specific, pentru a putea sa se asocieze in tesuturi, sau pentru a se putea separa de celulele
diferite.
Intelegerea modalitatilor de recunoastere si asociere celulara s-a realizat pe modele
experimentale diferite. Unul dintre cele mai sugestive il constituie studiul comportamentului social
al unor microorganisme ce pot trece, in anumite conditii, de la un mod de viata unicelular, la
organizarea pluricelulara.
Astfel, amoeba Dictyostelium discoideum este un organism unicelular care traieste pe
solul padurilor, hranindu-se cu bacterii si resturi organice si care, in conditii normale, se inmulteste
prin diviziuni directe, o data la 2-3 ore.
In conditiile in care rezervele nutritive se epuizeaza, amoebele inceteaza sa se mai divida
si se grupeaza in ansambluri pluricelulare minuscule (1-2 mm ), numite limacsi. Fiecare limax
este compus din circa 1000 de celule si prezinta un comportament multivalent, pe care amoebele
individuale nu-l poseda. Astfel, acest agregat este foarte sensibil la lumina si caldura, deplasanduse activ in directia unui mediu cu conditii mai favorabile. In cursul migrarii, celulele incep sa se
diferentieze si sa se grupeze in regiuni care prefigureaza partile viitorului corp vegetativ.
Cand limacsii ajung in locuri propice se metamorfozeaza, dezvoltandu-si, pe discul fixat
de substrat, un peduncul si un sac sporal. In conditii favorabile, sporii se elibereaza si genereaza
noi amoebe, in timp ce celelalte parti ale corpului vegetativ degenereaza si mor (Fig. 3.1.).
Asamblarea celulelor pentru a forma limaxul se realizeaza prin chimiotaxie, ca urmare a
eliberarii in mediu de catre unii indivizi, a unui semnal chimic, reprezentat de cAMP (AMP ciclic).
Aceste celule devin centre de agregare, spre ele venind, in valuri succesive, amoebele care
au fixat semnalul chimic pe receptorii lor de membrana, semnal ce determina formarea de
pseudopode. Amoebele receptoare elibereaza, la randul lor, cAMP, ca raspus la semnalul
receptionat, functionand ca relee, ce amplifica semnalul initial si antreneaza noi si noi valuri de
migratie celulara, circulara sau spiralata. In felul acesta, intensitatea semnalului de agregare se
mentine constanta, pe arii largi.
Un astfel de semnal se deosebeste de semnalul emis, de exemplu, de amoeba
Dictyostelium minutum, la care intensitatea acestuia slabeste rapid. In acest caz, limacsii
formati au dimensiuni foarte mici, fiind alcatuiti dintr-un numar redus de celule.
Asocierea celulelor amoeboidiene in ansamblul reprezentat de limax presupune existenta
unor molecule de aderenta, sintetizate tot ca raspus la stimularea cu cAMP.
31
Astfel, discoidina - 1, este o proteina din grupul lectinelor, cu functie de ghidare si contact,
care se leaga atat la suprafata celulelor, cat si la substratul de migrare.
S-au identificat si doua glicoproteine transmembranare care contribuie la aderenta si
soliditatea ansamblului celular: situsul A de contact, Ca+2 - dependent, sintetizat in primele 8 ore de
carenta nutritiva si situsul B de contact, produs in perioada imediat urmatoare si care este Ca +2
-independent.
Spre deosebire de exemplul amintit, in care agregarea celulelor este usor observabila in
cultura, la animalele pluricelulare mecanismele de recunoastere si asociere celulara sunt mult mai
greu de studiat.
In acest caz se procedeaza la disocierea celulelor din tesuturi (in special din tesuturile
embrionare) si la studiul reasamblarii acestora in vitro.
Disocierea se realizeaza tratand celulele cu concentratii slabe de enzime proteolitice
(frecvent tripsina), in combinatie cu agenti chelanti ai Ca+2 (EDTA). Celulele separate, cultivate, se
reasambleaza in vitro in structuri similare cu tesutul de origine.
Daca in aceeasi cultura se introduc celule embrionare cu origini diferite (de exemplu, celule
hepatice si retiniene), initial se formeaza agregate mixte, nediferentiate. In timp, celulele sunt triate
dupa originea lor si se reconstituie fragmentele tisulare initiale.
Aceste experiente demonstraza ca asocierea celulelor pentru a forma tesuturi nu este un
simplu proces morfogenetic, ci presupune dezvoltarea unui sistem de afinitati reciproce intre
celule, precum si intre celule si matricea extracelulara.
Constatari interesante asupra sistemelor de recunoastere si aderenta celulare au fost
obtinute prin cultivarea cheratinocitelor disociate (celule se apartin tesutului epitelial). In vivo,
cheratinocitele din stratul bazal al epidermei sunt stratificate: cele din stratul bazal, relativ
nediferentiate, se divid constant, generand cheratinocitele din straturile superioare, lipsite de
activitate mitotica si care prezinta o diferentiere pronuntata.
Daca, in mediul de cultura, concentratia Ca +2 este foarte mica, sistemul de aderente Ca +2 dependente nu functioneaza, iar celulele vor creste intr-un monostrat, format din celule proliferative
si celule in curs de diferentiere. Daca concentratia Ca+2 se normalizeaza, monostratul se
transforma intr-un agregat pluristratificat, cu o dispozitie a celulelor identica celei din pielea
normala.
32
Fig. 3.2. Structura diferitilor receptori de aderenta de tip N-CAM (superfamilia anticorpilor)
O alta familie de molecule de aderenta este cea a caderinelor, care mediaza contactele
celulare Ca+2 - dependente. Se cunosc pana in prezent caderinele de tip E, N si P.
Caderina E este cea mai bine caracterizata. Regiunea sa extracelulara este pliata in trei
domenii, aparent diferite de domeniile imunoglobulinelor. In celulele epiteliale mature, caderina E
se concentreaza in special la nivelul centurilor de aderenta, conectand scheletul de actina al
acestor celule si conferind o anume rezistenta mecanica a tesutului.
Aparitia si disparitia unui tip de caderina este legata de etapele morfogenetice embrionare.
De exemplu, ectodermul care genereaza tubul neural in formare pierde caderina E si exprima doar
caderina N.
Un tip celular unic utilizeaza mai multe mecanisme moleculare de aderenta cu alte celule
sau cu matricea extracelulara.
Spre deosebire de receptorii pentru semnalele chimice, solubile, care se leaga de ligandul
specific cu o mare afinitate, receptorii pentru moleculele de la suprafata celulara sau pentru
matrice au, in general, o afinitate slaba.
Caracteristica pentru acesti receptori este forta de legatura, care rezulta din asocierea
simultana a lor, insumata cu cea a multiplilor liganzi ai celulelor adiacente sau ai matricei
extracelulare. Combinatia specifica a moleculelor intercelulare de aderenta, ca si concentratia si
33
distributia lor la suprafata oricarui cuplu de celule determina masura in care aceste celule se vor
recunoaste si vor reactiona.
Aceste combinatii de receptori constituie un cod morfogenetic, care determina modul de
organizare a celulelor in tesuturi. Pe baza acestui cod, celulele, chiar si cele strans inrudite, sunt
capabile sa detecteze cele mai mici diferente de aderenta si sa trieze celulele cu care vor stabili
contactele cele mai solide, dintre numeroasele variante posibile (fig. 3.3.).
Observatiile realizate pe celulele embrionare cultivate, care se ataseaza reciproc pentru a
forma tesuturi, sau pe tesuturile adulte, in curs de regenerare, au aratat ca aceste contacte nu
implica formarea de jonctiuni celulare organizate. Contactele intercelulare ce se realizeaza prin
glicoproteinele transmembranare de legatura permit locomotia celulara, dar nu sunt atat de
puternice pentru a imobiliza celulele.
Moleculele de aderenta nonjunctionala initiaza doar asocierea celulelor in tesuturi. Aceasta
asociere este apoi stabilizata prin asamblarea jonctiunilor intercelulare. Multe proteine, cum ar fi de
exemplu caderina E, sunt implicate in initierea aderentei celulare, dar pot deveni ulterior parti
intrinseci ale jonctiunilor intercelulare.
Fig. 3.4. Jonctiuni stranse (sus celule epiteliale intestinale solidarizate prin jonctiuni stranse; jos
ultrastructura jonctiunilor stranse)
35
Fig. 3.5. Jonctiuni ancorare: centuri de aderenta continua (sus celule epiteliale solidarizate prin centuri de
aderenta; jos ultrastructura centurilor de aderenta)
36
Centurile de actina din celulele consolidate prin aceste jonctiuni confera o rezistenta
mecanica deosebita epiteliului, permitand o serie de transformari morfogenetice, cum ar fi, de
exemplu, inrularea ectodermului embrionar in vederea formarii tubului neuronal.
Jonctiunile de ancorare dintre filamentele de actina celulare si matricea extracitoplasmatica
sunt numite puncte de contact focal sau placi de aderenta.
In placile de aderenta glicoproteinele transmembranare de legatura cu matricea sunt
receptori care apartin familiei integrinelor.
Desmozomii si hemidesmozomii
Acest tip de jonctiuni reprezinta puncte de contact intercelular in forma de butoni de
presiune, care asambleaza celulele dintr-o larga varietate de tesuturi.
Ei servesc ca punct de ancorare pentru o larga varietate de filamente intermediare
citoplasmatice, care constituie o sarpanta structurala pentru celulele aderente: filamentele de
cheratina din celulele epiteliale, filamentele de desmina din celulele musculare cardiace,
filamentele de vimentina din celulele conjunctive, etc.
Un desmozom este compus din doua elemente ultrastructurale: o placa citoplasmatica
densa, alcatuita dintr-un complex de proteine intracelulare (in special desmoplachine) pe care se
ataseaza elementele de citoschelet si glicoproteine transmembranare (desmogleine), care se
ataseaza cu o extremitate pe placa si interactioneaza, prin domeniile extracelulare, cu alte proteine
transmembranare, din celulelor vecine (fig. 3.6.).
Fig. 3.6. Jonctiuni de aderenta intrercelulara: desmozomii (sus ultrastructura unui desmozom; jos celule
epiteliale solidarizate prin desmozomi)
37
38
39
Unitatea de invatare 4
Comunicarea (semnalizarea) celulara
Comunicarea dintre celulele unui organism pluricelular este esentiala pentru diferentierea si
organizarea acestora in tesuturi, cat si pentru controlul cresterii, a diviziunii, si a functiilor celulare.
Celulele animale prezinta trei modalitati principale de comunicare:
secretia de substante chimice care sunt transmise la distanta altor celule, sub forma de
semnale chimice;
prin molecule atasate membranei plasmatice, care influenteaza activitatea altor celule
aflate in contacat fizic direct cu celulele producatoare de semnale;
prin intermediul jonctiunilor de tip gap (fig. 4.1.).
Dintre cele trei modalitati, cea mai diversificata este transmiterea de semnale chimice intre
celulele care nu se afla in contact fizic direct. In functie de distanta la care actioneaza aceste
semnale, in primul rand, mecanismele de transmitere (semnalizare) chimica a se clasifica in:
A. transmiterea endocrina: celulele endocrine specializate secreta hormoni, care circula
prin plasma sanguina si actioneaza asupra diferitelor celule - tinta;
B. transmiterea paracrina: celulele paracrine secreta mediatori chimici locali, care
actioneaza asupra celulelor situate in imediata lor vecinatate; acesti mediatori sunt rapid captati,
imobilizati sau degradati enzimatic;
40
In toate aceste cazuri, celulele - tinta raspund la semnalul chimic specific prin intermediul
unor receptori de membrana, care fixeaza molecula informativa si initiaza raspunsul.
Aceeasi molecula informativa are frecvent efecte diferite asupra celulelor - tinta diferite.
Aceste efecte variate pot fi explicate fie prin existenta unor receptori diferiti in plasmalema
celulelor receptoare, fie, in cazul prezentei aceluiasi tip de receptori in diverse celule, a unei
modalitati specifice de transductie intracelulara a semnalelor externe (fig. 4.3.).
Fig. 4.3. Raspunsuri diferite ale unor tipuri de celule la actiunea aceluiasi semnal chimic (neurotransmitatorul
acetilcolina).
Transmiterea endocrina este destul de lenta, un hormon necesitand cateva minute pentru a
ajunge la celula tinta. Fiecare tip de celula endocrina secreta un hormon diferit si fiecare celula 41
tinta prezinta receptori complementari pentru acesti hormoni, raspunsul depinzand in final de tipul
celular.
Transmisia nervoasa, in schimb, este mult mai rapida si mai precisa.
Semnalele chimice eliberate de celulele nervoase la nivelul sinapselor, sub actiunea
potentialului de actiune, actioneaza asupra celulelor postsinaptice atat intr-o maniera paracrina, cat
si una sinaptica. In sistemul paracrin, neurotransmitatorul difuzeaza asupra mai multor celule tinta vecine, pe cand in sistemul sinaptic, actiunea neurotransmitatorului este limitata la o singura
celula - tinta. Spre deosebire de hormoni, care sunt puternic diluati in fluxul sanguin si lichidul
interstitial, neurotransmitatorii sunt mult mai putin diluati, iar receptorii acestora au o afinitate destul
de slaba pentru ligandul lor caracteristic. Neurotransmitatorii initiaza raspunsuri mult mai rapide
decat hormonii
Moleculele informative (mediatori chimici locali, neurotransmitatori, hormoni) sunt foarte
variate ca structura, putand fi reprezentate de peptide, proteine, glicoproteine, acizi aminici, steroli
si acizi grasi etc.
Majoritatea hormonilor si mediatorilor chimici locali sunt hidrosolubili. Hormonii tiroidieni si
steroizi, in schimb, insolubili in apa (liposolubili) sunt solubilizati in timpul transportului sanguin, prin
fixarea lor la diferiti transportori proteici specifici. Aceasta diferenta de solubilitate este
responsabila de modalitatea fundamental diferita de actiune a celor doua clase de molecule
asupra celulelor - tinta:
moleculele hidrosolubile se fixeaza pe receptorii proteici externi ai suprafetei
celulare;
hormonii liposolubili traverseaza usor membrana plasmatica (bistratul lipidic) si se
fixeaza pe receptorii proteici intracelulari specifici.
Fig. 4.4. Mecanismul de actiune ale hormonilor steroizi (A) si tipuri de receptori pentru hormonii steroizi si alti
liganzi(B)
42
Fixarea hormonului activeaza receptorul (in mod obisnuit inactiv), crescandu-i afinitatea
pentru ADN. Atasarea complexului hormon-receptor pe situsurile specifice ale ADN-ului activeaza
(sau uneori inhiba) transcrierea genelor corespunzatoare
Raspunsul la un hormon steroid are loc in doua etape:
inducerea directa a transcriptiei unor gene specifice - raspunsul primar.
produsii acestor gene pot, la randul lor, sa activeze noi gene si sa produca un
raspuns secundar, intarziat (fig. 4.5.).
receptorii legati de canale - sunt canale ionice a caror deschidere este reglata de
un neurotransmitator (canale ligand dependente). Ei sunt implicati, in principal, in
transmiterea rapida a semnalului sinaptic intre celulele excitabile si modifica
tranzitoriu permeabilitatea membranara pentru ioni (excitabilitatea celulelor post sinaptice).
receptorii catalitici - actioneaza direct ca enzime. Domeniul lor catalitic intracelular
functioneaza ca o protein - kinaza specifica pentru tirozina.
receptorii legati de proteinele G - activeaza sau inactiveaza, indirect, o enzima
specifica, atasata la membrana plasmatica sau un canal ionic. Aceasta actiune se
realizeaza prin intermediul unei proteine numite proteina reglatoare GTP
-dependenta (proteina G) (fig. 4.6.).
Fig. 4.6. Tipuri majore de receptori membranari de suprafata pentru semnalele solubile
Receptorii legati de proteina G modifica concentratia intracelulara a uneia sau mai multor
molecule mici, numite mesageri intracelulari sau mesageri secundari. Mesagerii intracelulari
modifica, la randul lor, comportamentul altor proteine - tinta din celula.
Printre cei mai importanti mesageri intracelulari se numara cAMP-ul si ionii de Ca+2.
Semnalizarea prin intermediul cAMP sau Ca+2 reprezinta cele doua cai prin care se
realizeaza transductia intracelulara a semnalelor in aproape toate celulele animale (Fig.12.13,
Alberts).
Diversitatea sistemelor de transmitere intracelulara a semnalelor prin intermediul
proteinelor G este remarcabila.
De exemplu, proteinele Gs si Gi cupleaza receptorii cu adenilat-ciclaza, in timp ce proteinele
Gp cupleaza receptorii cu fosfolipaza C. In celulele cu bastonase ale vertebratelor, o proteina G,
denumita transducina, cupleaza actiunea unui foton cu activarea unei fosfodiesteraze care
44
ciclazei. cAMP, la randul sau, va activa kinaza A, care fosforileaza fosforil kinaza. Aceasta
fosforileaza apoi glicogen fosforilaza, inducand glicoliza glicogenului (Fig. 4.8.).
Fig. 4.8. Etapele inducerii degradarii glicogenului in fibra musculara scheletica de catre cAMP
In unele celule animale, cresterea concentratiei de cAMP activeaza transcrierea unor gene
specifice. De exemplu, celulele neuroendocrine ale hipotalamusului vor secreta somatostatina, in
conditiile activarii genelor acestui hormon de catre cAMP.
In majoritatea celulelor animale, functioneaza si cGMP (GMP ciclic) ca mediator
intracelular. cGMP-ul activeaza o protein - kinaza specifica (kinaza G), care fosforileaza o serie de
proteine in celula tinta, (in general proteine necunoscute). Guanil-ciclaza, care catalizeaza
formarea GMP din GTP, este o enzima insolubila, care nu este cert cuplata cu receptorii suprafetei
celulare.
4.2.2. Transductia prin intermediul ionilor de Ca+2
Concentratia Ca+2 liber din citosol este foarte mica (~ 10 -7 M) in comparatie cu concentratia
ionlui in lichidul extracelular si in compartimentele intracelulare specializate in stocarea Ca +2
(~
10-3 M).
Atunci cand un semnal deschide in mod tranzitoriu canalele de Ca +2, ionii de Ca se
precipita in citoplasma, crescand concentratia sa locala si activand mecanismele intracelulare
sensibile la acest ion. Deoarece concentratia citosolica de Ca+2 trebuie sa ramana scazuta, patru
mecanisme distincte intervin si concura in acest scop:
ATP- aza Ca+2 - dependenta, care pompeaza ionii de calciu din celula in mediul
extracelular;
un sistem antiport cu Na+, care extruzeaza calciul in mediu (intalnit in celulele
musculare si nervoase);
o pompa de calciu ATP - dependenta din membrana compartimentului intracelular
de stocare a calciului reticulul endoplasmatic ( calcsechestrina );
pompa de calciu mitocondriala care indeparteaza calciul din citosol, atunci cand
celula este lezata.
In sfarsit, calciul se poate lega la diferite molecule intracelulare, realizand astfel o cale de
transductie a semnalelor chimice (fig. 4.9.).
46
Fig. 4.9. Mecanisme de mentinere a unei concentratii citosolice scazute Ca2+ prin pomparea ionului in mediul
extrcelular (A) sau prin introducerea sa activa in unele organite celulare (B)
Calmodulina, una dintre proteinele specifice majore de legare a calciului, a fost identificata
in toate celulele animale si vegetale.
Ea functioneaza ca un receptor intracelular polivalent de calciu, indeplinind un rol in
majoritatea proceselor reglate de acest ion. Calciul produce o activare alosterica a calmodulinei.
Complexul calciu-calmodulina, activat, actioneaza asupra a numeroase proteine - tinta,
dintre cele mai cunoscute fiind protein - kinazele calciu/calmodulin - dependente (Ca 2+ - kinazele).
Aceste proteine functioneaza atat ca enzime, cat si ca proteine de membrana cu rol transportor
(fig. 4.11.).
48
Spre deosebire de sistemele directe de transmitere ale semnalelor (cum sunt cele la care
participa hormonii steroizi), cascadele catalitice de mediatori intracelulari ofera numeroase posi bilitati de amplificare si reglare a raspunsurilor la semnalele extracelulare.
De exemplu, atunci cand un ligand activeaza indirect adenilil - ciclaza, prin fixarea sa pe un
receptor membranar specific, fiecare molecula de ciclaza poate sa converteasca un numar mare
de molecule de ATP in cAMP. Astfel, o concentratie de 10-9 M a semnalului extracelular induce
concentratii de 10-6 M a mesagerului secundar intracelular (cAMP). In continuare, prin acest efect
de amplificare, o singura molecula informativa extracelulara provoaca modificari a milioane de mo lecule - tinta din celula.
In plus, fiecare proteina reglatoare din aceasta secventa de semnale poate fi o tinta dis
-tincta pentru controlul metabolic (de exemplu, in cadrul cascadei de degradare a glicogenului in
celulele muschiului scheletic).
49
50
Unitatea de invatare 5
Motilitatea celulara
Motilitatea celulara (miscarile celulare) este o proprietate de baza ale celulei, miscarea, in
general, fiind o caracteristica generala a materiei vii. Moartea celulara conduce la disparitia
miscarilor celulare, persistand doar o miscare browniana, care este, de fapt, un fenomen fizic.
Miscarile celulare sunt extrem de variate.
In functie de modificarea sau pastrarea raporturilor celulelor cu mediul (pozitiei celulelor
fata de un punct de referinta), se disting trei categorii de miscari; la nivel molecular, miscarile
celulare se datoresc actiunii a doua sisteme motile: sistemul actina - miozina si sistemul
microtubul - dineina.
Tinand cont de aceste doua criterii, miscarile celulare pot fi clasificate si sintetizate in modul
urmator:
A. miscari din timpul contractiei musculare (acest tip de miscari nu va fi detalliat in capitolul
de fata, el constituind un capitol important al Fiziologiei animale);
B. miscari ce modifica raporturile dintre celule si mediul extern. Se clasifica in:
miscarea de locomotie amoeboidiana;
miscarea ciliara si flagelara.
C. miscari ce nu modifica raporturile celulei cu mediul extern. Se clasifica in:
miscari din cursul diviziunii celulare;
miscarile microvililor celulelor din diverse endoitelii;
miscarea de cicloza.
Fig. 5.1. Micrografie in microscopie electronica cu baleiaj a extremitatii anterioare a unui fibroblast uman aflat
in cultura
51
B
Conversie ectoplasma - endoplasma
Fig. 5.2. Mecanismele locomotiei amoeboidiene (ale formarii pseudopodului) (A imagine de ansamblu; B
extremitate posterioara)
Fig. 5.4. Faze ale miscarii cililor (flagelilor) (A inregistrarea microcinematografica a miscarilor flagelului unui
spermatozoid; B schema: 1,2 faza activa a miscarii; 3,4,5 faza pasiva)
53
In general, cilii au dimensiuni mai mici decat flagelii si sunt prezenti in numar mult mai
mare decat flagelii la nivelul unei celule. Ei sunt grupati in campuri ciliare, mai mult sau mai putin
paralele intre ele (fig. 5.5.).
Fig. 5.5. Microfotografie electronica a cimpurilor ciliare din mucoasa intestinala a unui vierme marin
Fig. 5.6. Ultrastructura corpuscului bazal (cinetocorului) (A electronomicrografie a unei sectiuni transversale
prin cinetocor; B vedere laterala schematica)
54
Fig. 5.7. Ultrastructura citoscheletului cilio flagelar (axonenemei) in sectiune transversala (A imagine
electronomicroscopica; B schema)
Sectiunile longitudinale prin axonema arata natura continua a fibrilelor microtubulare si cea
discontinua a celorlalte elemente proteice. De exemplu, bratele radiare apar ca proiectii ale
subfibrilei A, dispuse in grupe de cate trei, spatiate cu o perioada de 96 nm. Deoarece tubulii
centrali nu sunt prezenti si in corpusculii bazali, este posibil ca ei sa fie generati din materialul
amorf prezent la baza axonemei, care contine tubulina.
Spre deosebire de miscarea flagelara a bacteriilor, forta de locomotie a cililor si flagelilor
pare a fi localizata la nivelul axonemei si nu la baza structurii ciliare. Ca dovada, sectionarea
bazala cililor cu microfascicule laser nu a stopat miscarea lor, iar indepartarea membranei celulare
a cililor si flagelii izolati nu a impiedicat miscarile axonemei, in conditiile prezentei ionilor de
magneziu si a ATP-ului.
Ulterior, s-a descoperit ca proteina ciliara cu activitate ATP - azica este dineina (fig. 5.8.).
Fig. 5.8. Interactiunea complexelor de dineina cu microtubulul A din structura axonemei (A schema; B
electronomicrografie)
55
Mecanismul locomotor al miscarii ciliare, unanim acceptat, este cel glisant, de tip
microtubul - dineina.
Conform acestui mecanism, microtubulii axonemei nu se lungesc si nu se scurteaza in
timpul flectarii cililor, ci lungimea lor ramane constanta. Aparenta diferenta de lungime a
microtubulilor, atunci cand se apleaca intr-o parte sau in cealalta, rezulta din faptul ca microtubulii
situati in vecinatatea curburii mici se aplaca mai putin decat cei situati in dreptul curburii mari.
Aceasta pastrare a lungimii este posibila datorita alunecarilor reciproce, prin intermediul
bratelor de dineina, care pasesc pe subfibrila B. Fiecare pas reprezinta un ciclu energetic in
care se produce hidroliza ATP-ului (fig. 5.9.).
Fig. 5.9. Demonstrarea mecanismului glisant de pliere de tip microtubul dineina, care sta la baza miscarilor
cilio - flagelare
Cilii si flagelii se pliaza de 10-40 ori pe secunda, aceasta miscare fiind precisa si coordo
-nata.
Coordonare activitatilor locomotorii cilio flagelare presupune o reglare intracitoplasmatica,
al carei mecanism este inca insuficient cunoscut. Ionii de Ca+2, desi facultativi pentru miscare, par
a fi implicati in controlul directiei si a frecventei batailor ciliare si flagelare: cand o celula flagelata
sau ciliata este expusa unui stimul adecvat, se produce un influx accentuat de calciu. De exemplu,
cresterea concentratiei intracelulare de Ca+2 la Paramecium produce o indepartare a celulei fata
de un stimul nociv, pe cand la Chlamydomonas determina o orientare catre sursa de lumina.
57
58