Fenomene de transport prin membrana celular

Structura membranei celulare. Membrana (7,5 nm) - ansamblu de structuri supramoleculare aflat la periferia celulei (sau a organitelor celulare) care separ mediul intern de cel extern (celular de interstiial) i care ndeplineste diferite funcii legate n special de procese metabolice fundamentale. Membranele vii au proprietile de semipermeabilitate i selectivitate. Datorit acestor proprieti ele nu reprezint simple bariere care separ 2 medii cu proprieti diferite, ci structuri active care asigur: - transportul unor molecule, ioni, macromolecule, complexe supramoleculare, dintr-o parte n alta a ei; - traducere i transfer de informaie adus de diferii stimuli (mecanici, electrici, electromagnetici, chimici, termici etc.) prin receptorii specifici pe care i conine; - interconversia diferitelor forme de energie, prin enzimele sau complexele enzimatice pe care le conine. Actualmente se accept c, n general, structura membranei celulare este cea descris de modelul mozaicului fluid proteolipidic al lui Nicholson i Singer (1972). Conform acesui model, membrana este format dintr-un bistrat lipidic, n care sunt nserate proteine i glicoproteine (fig.)

Bistratul lipidic este constituit n special din fosfolipide (fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidilinositol etc.) dar sunt prezente i sfingolipide, glicolipide i colesterol.
Lipidele membranare sunt: - Fosfogliceride (fosfolipide)(compuse din acizi grai, glicerol, fosfat, alcool)(au un cap polar i dou cozi hidrofobe) reprezint constituentul major al bistratului lipidic membranar Capetele polare pot fi : acid fosfatidic- PA, fosfatidilglicerol PG, fosfatidiletanolamina PE, fosfatidilcolina - PC, fosfatidilserina PS, fosfatidilinositol PI. Sfingolipide (glicosfingolipide GS-capul polar conine zaharuri, sfingomieline- SM- au capete polare fosforilcolina sau fosfoetanolamine)) (sfingozina nlocuiete glicerolul i un lan hidrofob din cazul fosfogliceridelor) Colesterol

- Glicolipide Insule de colesterol cu sfingilipide formeaz faze separate rafturi lipdice- mai ordonate, conin proteine transmembranare i proteine periferice pe partea extracelular. Se afl pe monostratul extracelular.

Moleculele lipidice sunt amfifile. Ele au un cap polar (extremitate polar) i o extremitate hidrofob (dou lanuri de hidrocarburi - cozi hidrofobe). Moleculele de acest tip se organizeaz spontan, pe baza principiului de minimizare a energiei poteniale, astfel nct cozile lor hidrofobe s evite contactul cu apa. Ele realizeaz: -structuri micelare - bistraturi (vezicule membranare sau membrane plane)(fig.)

n acest fel, ntre cozile hidrofobe iau natere legturi hidrofobe, iar capetele polare sunt expuse mediului apos. Bistratul lipidic este o structur dinamic, prezentnd fluiditate: moleculele lipidice execut micri de translaie i rotaie. De exemplu: -translaie n stratul n care se afl (difuzie lateral) - rotaie n jurul propriei axe - basculare dintr-un monostrat n cellalt - flexie (ndoire) (fig.)

Proteinele membranare, n funcie de modul n care se nsereaz n membrane sunt: a) - proteine intrinseci (integrale) - traverseaz membrana celular o dat (glicoforina) sau de mai multe ori (exemplu - proteinele transportoare, pompe ionice constituite din mai multe -helixuri, enzime, receptori, canale ionice) b)- proteine extrinseci (periferice) - ptrund n membran pe o anumit distan, pe una din cele dou fee, sau sunt ataate la suprafaa membranei (receptorii membranari, proteine cu rol imunologic etc.). Ele pot participa la reacii enzimatice i semnalizare celular, intr n componena scheletului membranar de la suprafaa citoplasmatic a celulei, asigur legtura cu citoscheletul). Membrana celular se sprijin pe un citoschelet alctuit din proteine fibrilare. De exemplu, n cazul hematiei (fig), dou proteine Banda 3 (transportor de anioni) i glicoforina ancoreaz o reea bidimensional de proteine fibrilare, componenta principal fiind spectrina. Ankirina se leag att la spectrin ct i la Banda 3. Filamente scurte de actin cu proteinele asociate formeaz noduri care

interconecteaz reeaua de spectrin. Asigur elasticitatea membranei plasmatice a hematiei.

i proteinele prezint micri de difuzie lateral i rotaie, ntr-un mod mai restrictiv (depinznd de interaciunile cu alte proteine). Unele dintre aceste micri sunt orientate dar n acest caz intervin proteine motoare. 2. Transportul pasiv - deplasarea moleculelor i ionilor n sensul gradientului electrochimic sau de presiune - aparent fr consum de energie metabolic. Aparent, deoarece gradientul electrochimic respectiv este rezultatul unor procese anterioare realizate cu consum de energie. Prin transport pasiv sistemul are tendina de a ajunge la echilibru termodinamic. Dac n expresia diferenei de potenial electrochimic notm: c1 = cin c2 = cex V1 = Vin V2 = Vex obinem: W = Win - Wex = RT ln cin/cex + zF (Vin - Vex) W > 0 - ionii au tendina de a prsi celula; W < 0 - ionii au tendina de a ptrunde n celul, dac membrana este permeabil pentru acetia. Transportul unei specii ionice nceteaz la echilibru W = 0: E = Vin - Vex = (RT/zF) ln cex/cin - ecuaia Nernst Modaliti de transport pasiv ; Difuzia simpl Difuzia facilitat Difuzia prin canale i pori

Difuzia simpl se produce prin dizolvarea speciei moleculare transportate n membran i depinde de raportul dintre solubilitatea substanei respective n bistratul lipidic i solubilitatea ei n ap, deci de coeficientul de partiie . Cum s-a artat, conform legii lui Fick, n cazul membranelor coeficientul de permeabilitate P este P = D/ Difuzia facilitat - se face prin utilizarea unor molecule transportoare existente n membran sau introduse artificial n aceasta. Asemenea molecule transportoare au o anumit specificitate, recunoscnd specia molecular sau ionic pe care o transport. Exist transportori pentru glucoz, colin, pentru diferii ioni (n acest caz transportorul se numete ionofor). Transportorii pot distinge speciile levogire de cele dextrogire. Ei acioneaz n sensul gradientului electrochimic. Mecanismul de

transport se bazeaz pe proprietatea transportorului de a se putea gsi n dou stari conformaionale T1 i T2. (fig.)

Molecula transportat (substratul S) se leag pe una din feele membranei. Se produce n urma legrii o modificare conformaional n starea T2 i situsul de legare este expus prii opuse (diagrama) cu scderea afinitii pentru specia respectiv i eliberarea acesteia. Prin eliberare se revine la conformaia iniial i ciclul se repet. Procesul se desfoar conform cineticii Michaelis-Menten pentru reaciile enzimatice. Un exemplu de ionofor este antibioticul valinomicin, molecul hidrofob care poate ncorpora ionii de K+, translocndu-i prin membran (i Rb, mai slab). Valinomicina face ca ionii de K+ s ias din celula bacterian, provocndu-i moartea. Nigericina (K+, H+, schimb neutru). Difuzia prin canale ionice i pori. Canalele ionice sunt proteine specializate care strbat bistratul i permit trecerea unor substane care nu sunt liposolubile. Permit trecerea ionilor n ambele sensuri i sunt selective. Pori - structuri neselective, conteaz doar diametrul particulei. Specia transportat se leag de proteina canal,

formnd un complex enzim- substrat care evolueaz pe baza cineticii MichaelisMenten. Pentru ca ionul s treac dintr-o parte n cealalt este necesar ca un canal s fie deschis. Componentele unui canal ionic sunt (fig.): filtrul de selectivitate F, vestibulul V, senzorul S, poart P, inactivator I. Canalele ionice prezint o mare specificitate, filtrul nu las s treac dect anumite specii.

Deschiderea i nchiderea canalului sunt rezultatul unei modificri conformaionale care este comandat printr-un mecanism specific. Acesta poate fi ; - electric - modificarea potenialului membranar (canalele de Na+, K+ n membrana axonal); - chimic (acetilcolina, canalul de Na+, Ca++ controlat de GMPc n membrana celulelor fotoreceptoare); - alte mecanisme (presiune mecanic, ex. canalul de K+ de la polul apical al stereocililor celulelor ciliate din organul lui Corti). Cnd canalul este deschis are loc trecere pasiv a ionilor. Aceasta se poate face n ambele sensuri, dar este predominant n sensul gradientului electrochimic. Canalele pot fi inhibate cu blocani specifici ex. toxine (tetrodotoxina canalul de Na+). Asemenea experiene de inhibiie permit studierea proprietilor canalelor. Deosebiri ntre cele dou tipuri de difuzie (facilitat, canale): - transportorii - specificitate mai mare (disting ntre L i D)(mii ioni/s); - canalele - viteza mult mai mare (milioane - sute de milioane de ioni/s, sunt mai adecvate pentru modificri brute; - transportorii sunt n numr mult mai mare; - transportorii pot participa la transportul activ secundar. Transportul activ - form de transport care necesit energie metabolic - cuplare energetic imediat. Poate fi transport activ primar i transport activ secundar.

Transportul activ primar. Se realizeaz cu ajutorul pompelor ionice membranare, structuri proteice transportoare din clasa proteinelor integrale. O pomp ionic este caracterizat prin prezena unui centru activ cu acces alternativ spre partea extracelular i spre cea citoplasmatic. Accesul este modificat ca urmare a unei tranziii conformaionale.