1

Permeabilitatea celular
Proprietile electrice
ale membranelor
2
1.1.4. Permeabilitatea celular - schimbul de
substane dintre celul i mediul extern
Membranele celulare se caracterizeaz printr-o
permeabilitate selectiv fa de ionii mici, ale cror
fluxuri transmembranare stau la baza excitabilitii
celulare.
Dar i unele molecule i chiar particule de substan pot
traversa membranele asigurnd schimburile celulare de
substan cu mediul extracelular. Principalele tipuri de
transport prin membrane sunt: pe de o parte
macrotransportul (transport de particule i
macromolecule) i, pe de alt parte, microtransportul
(molecule mici i ioni).
Macrotransportul poate fi efectuat direct sau prin
intermediul veziculelor (formate din fragmente de
membran care se detaeaz pentru a se reuni incluznd
n interior particule i macromolecule), n acest din urm
caz, distingndu-se endocitoza (n celul intr particule
de substan, virusuri i macromolecule), exocitoza (din
celul ies particule de substan i macromolecule),
transcitoza (n celul intr particule de substan i
macromolecule iar, dup o serie de transformri
metabolice din celul ies att macromolecule ct i
particule).
3
Microtransportul poate fi pasiv (fr consum de energie
metabolic, efectuat prin canalele ionice, constituite din
proteinele-canal) i activ (efectuat prin intermediul
pompelor ionice i care necesit un cuplaj energetic cu
procese exergonice de la care se preia i se consum o
parte din energia stocat n moleculele de tipul ATP (acid
adenozin trifosforic sau adenozintrifosfat), NADH
(nicotinamid adenin dinucleotid) etc.
Transportul pasiv poate fi, la rndul su, de mai multe
feluri, n principal: difuzie simpl (circulaia unor ioni sau
molecule mici cum sunt cele de ap, uree, glucoz etc.
sub aciunea gradientului chimic - de concentraie - sau a
gradientului electrochimic - de concentraie i de
potenial electric) i difuzie facilitat (efectuat prin
intermediul unor proteine transportoare care cupleaz
solvitul la una din feele membranei i, prin modificri
conformaionale care nu necesit n mod direct consum
energetic, l elibereaz la celalt fa membranar). n
continuare se va detalia problema microtransportului.
Transportul activ poate fi, n principal, transport activ
primar, transport activ secundar i translocaie de grup
(transportul unei molecule fiind, n acest caz, nsoit i de
o modificare structural).
4
1.1.4.1. Transportul pasiv
Deplasarea prin membrane a unor substane
aflate sub form ionic sau molecular, datorit
gradientului de concentraie dintre citoplasm i
mediul extracelular, reprezint difuzia simpl i
constituie principala form de transport pasiv. n
cazul ionilor, pe lng gradientul de
concentraie, acioneaz, ntotdeauna, i
gradientul de potenial electric dintre feele
membranei celulare. Cel mai simplu caz de
transport pasiv este, aadar, cel al moleculelor
neutre din punct de vedere electric, care are loc
prin difuzia simpl.
5
Difuzia simpl a moleculelor neutre prin
membran
Se consider un ansamblu de dou
compartimente care comunic ntre ele printr-o
membran cu permeabilitate selectiv
(permeabil pentru specia molecular
considerat) de grosime l, cu suprafaa
transversal S i cu un coeficient de difuzie D
(pentru specia molecular considerat) (fig. 2).
Cantitatea din substana difuzibil aflat la
momentul t n cele dou compartimente se
noteaz m
1
(t) cu i respectiv m
2
(t).
6
Fig. 2. Sistem bicompartimental
cu membran de grosime l i
seciune transversal S
Concentraiile
corespunztoare se
noteaz cu c
1
(t) i
respectiv c
2
(t), astfel
c:
( )
( )
( )
( )
( ) ( ) . const m t m t m
V
t m
t c ,
V
t m
t c
2 1
2
2
2
1
1
1
= = +
= =
Circulaia substanei difuzibile ntre cele dou
compartimente se realizeaz n sensul gradientului chimic
deci,
dac c1(t) > c2(t), atunci membrana va fi strbtut
dinspre primul compartiment nspre al doilea.
7
Conform legilor difuziei (legea I a lui Fick):
( )
( ) ( ) ( ) t c P t c P
l
SD
dt
t dm
2 2 m 1 1 m
1
=
unde P
m1
i P
m2
sunt coeficieni de partiie (rapoartele
de distribuie) ai substanei difuzibile ntre membran i
cte unul din cele dou compartimente.
2
2 m
2
1
1 m
1
V
P
P ,
V
P
P = = Se noteaza
astfel c ecuaia
diferenial ia
forma:
( )
( ) ( ) ( ) t m P t m P
l
SD
dt
t dm
2 2 1 1
=
8
Aceast ecuaie diferenial de ordinul nti are ca
necunoscut pe m
1
(t) , deci:
( )
( )( ) | |
2 2 1 1
1
' PP P P t Pm
dt
t dm
+ =
m P ' P ,
l
SD
P
2 2
= =
cu notatiile:
Dup separarea variabilelor i introducerea noilor constante:
( ) P ' P ' ' P , P P P P
2 2 2 1 12
= + =
( )
( )
dt
" P t m P
t dm
2 1 12
1
=

rezulta:
9
ceea ce, prin integrare (cu condiia iniial )
( )
( ) 0 m P " P
t m P " P
e
1 12 2
1 12 2
t
12
P

( ) ( ) 0 t m 0 m
1 1
= =
conduce la:
De aici se deduce expresia de variaie n timp a lui m1(t) :
( ) ( )
2 1
2
t
12
P
2 1
2
1 1
P P
' P
e
P P
' P
0 m t m
+
+
(

+
=

Prin mprire V
1
cu se obine expresia de variaie n timp a
concentraiei substanei difuzibile n primul compartiment:
10
( ) ( )
echiv
t
12
K
echiv
1 1
V
m
e
V
m
0 c t c +
(

=

unde s-a notat:
2
2 m
2
1
2 m 1 m
echiv
V
P
V
V
P P
V
+
=
( )
echiv
1
V
m
c =
se observa ca:
Astfel se obine:
( ) ( ) t
V
P
V
P
l
SD
exp
V
m
0 c
V
m
t c
2
2 m
1
1 m
echiv
1
echiv
1
|
|
.
|

\
|
|
|
.
|

\
|
+
|
|
.
|

\
|
=
11
-ceea ce reprezint scderea exponenial n timp a
concentraiei din primul compartiment (sub
aciunea gradientului de concentraie) dependent
de grosimea i suprafaa transversal a membranei,
de cantitatea total de substan difuzibil din cele
dou compartimente i de valoarea concentraiei de
echilibru (dup un timp suficient de ndelungat) din
compartimentul considerat.
Astfel s-ar desfura, de exemplu, procesul de
difuzie al moleculelor de ap prin porii apoi ai
biomembranelor n cadrul modelului prezentat. n
cazul ionilor trebuie luat n considerare i
gradientul electric transmembranar
corespunztor.
12
Difuzia facilitat
Ca i n cazul difuziei simple, difuzia facilitat prin
biomembrane a unor substane se produce sub
aciunea gradientului electrochimic, disprnd o dat
cu anularea acestuia.
Spre deosebire de difuzia simpl, efectuat prin
intermediul canalelor ionice i porilor moleculari,
difuzia facilitat este efectuat prin intermediul
proteinelor transportoare (carrier) i poate avea loc
cu o vitez mult mai mare dect cea corespunztoare
dimensiunilor sau liposolubilitii moleculelor
respective, vitez care atinge o valoare de saturaie
la creterea gradientului de concentraie i poate fi
afectat (inhibat) de prezena unor substane cu
structuri analoage substanei difuzate.
13
Din aceste puncte de vedere acest fenomen de
microtransport prezint asemnri cu procesele
enzimatice, a cror vitez atinge o limit de
saturaie i care sunt, n acelai timp, procese de
competitivitate - competiia dintre dou substane
cu structuri asemntoare fiind de natur s
inhibe participarea la procesul de transport (sau
enzimatic) a substanei urmrite.
Dei, la fel ca i relaia enzim - substrat, relaia
substan difuzat - protein transportoare se
caracterizeaz printr-o anume specificitate.

14
Proteina transportoare, dei nu se cupleaz n mod direct
cu procese biochimice exergonice, este capabil s
efectueze micri complexe prin care substana difuzant
este captat la una din feele membranei, apoi este
transportat la faa opus (proteina transportoare fiind de
tip intrinsec, adic strbtnd membrana de la o fa la
alta) unde este eliberat.
Unii autori includ n acest tip de microtransport i
permeabilitatea de tip ionoforetic prin care ionoforii
(molecule cu structur peptidic sau nu, de exemplu
antibiotice ca nistatina, amfotericina, valimicina etc.)
prezeni n membran efectueaz transportul unor ioni
mici.
Fig. 3. Transportul
pasiv i transportul
activ printr-o
biomembran
15
Relaia matematic ce descrie procesele de difuzie
facilitat este de forma:
( )
c k
cv
c v
M
max
+
=
unde v este viteza de difuzie, c este concentraia, k
M
este o constant egal cu valoarea concentraiei care
reduce la jumtate viteza maxim de difuzie. n form
inversat, relaia este deosebit de uor de verificat n
experimente, deoarece conduce la o dependen
linear ce se stabilete prin metoda celor mai mici
ptrate i permite calcularea parametrilor i din panta
i tietura la ordonat a dreptei celei mai probabile:
( )
max max
M
v
1
c v
k
c v
1
+ =
16
Prin difuzie facilitat se explic transportul prin
membrana eritrocitar, a anionilor moleculari de
uree, glicerol i ali neelectrolii, transportul prin
membrana muscular i epiteliul intestinal al
glucozei i aminoacizilor, transportul glucidelor
prin membranele microorganismelor.
Proprietatea de permeabilitate selectiv a
biomembranelor pentru ioni mici (Na+, K+, Ca+2,
Cl-, Mg+2 etc.) ajut la explicarea a numeroase
fenomene de importan vital pentru activitatea
celular: transportul la nivelul epiteliilor,
bioelectrogeneza din celulele nervoase,
musculare, vizuale etc., comunicarea intercelular
realizat prin intermediul neurotransmitorilor i
hormonilor, transducia senzorial etc.
17
1.1.4.2. Transportul activ
Transportul activ se efectueaz mpotriva gradientului
electrochimic i se realizeaz pe baza energiei eliberate
ntr-o reacie exergonic, cel mai frecvent fiind vorba de
hidroliza legturilor fosfat, purttoare de energie, din
molecula de ATP.
Transportul activ primar implic deplasarea prin membran
a unor ioni mici care beneficiaz n mod direct de energia
eliberat n reacia ATP-ADP, n timp ce transportul activ
secundar implic deplasarea unor ioni mici care beneficiaz
de modificarea de gradient electrochimic cauzat de
transportul activ primar al altor tipuri de ioni mici
(cotransport).
Tot o form de transport activ este i translocaia de grup,
prin care structura unei molecule deplasat prin membran
este modificat la nivelul unui grup de atomi constituient
(de exemplu glucoza fosforilat). Energia utilizat n
transportul activ este eliberat ca urmare a activrii unei
enzime, ATP-aza membranar, care face parte din structura
"pompelor ionice" de Na+, K+, Ca+2 etc., numite i ATP-aze
de Na+, K+, Ca+2 etc.
18
Pompele ionice sunt denumite astfel deoarece
"pompeaz" ionii n sens invers gradientului
electrochimic n mod similar unei pompe care
acioneaz pentru deplasarea unui fluid mpotriva
gradientului de presiune.
Ele sunt agregate proteice, formate din mai multe
subuniti structurale care determin deplasarea
ionilor n sens invers difuziei pasive (fig. 3).
Astfel ATP-aza dependent de Na+ i K+,
prezent n membrana plasmatic (plasmalema)
la majoritatea celulelor animale, asigur un eflux
activ de sodiu i un influx activ de potasiu care
pot contrabalansa influxul pasiv de sodiu i
respectiv efluxul pasiv de potasiu, prin
mobilizarea a circa 30% din ATP-ul destinat
proceselor metabolice dintr-un organism animal
aflat n repaus.
19
Aceasta deoarece concentraia de sodiu
ionic este mai mare n exteriorul celulei
dect n interior n timp ce concentraia de
potasiu este mai mare n interiorul celulei
dect n mediul extracelular.
Raportul dintre numrul de ioni de sodiu i
cel de potasiu, antrenai de pompa de
Na+-K+ (pompa ionic de sodiu i
potasiu) la 1 mol de ATP hidrolizat, este de
3 Na+/2 K+.

20
La celulele renale s-au identificat cele mai multe
astfel de pompe ionice precizndu-li-se i o
structur tetrameric (dat de asocierea unei
subuniti cu proprieti enzimatice, cu situsuri
de legare a ionilor de sodiu la faa intern a
membranei - subunitatea a - i a unei subuniti
glicoproteice, cu situsuri de legare a ionilor de
sodiu la faa extern a membranei - subunitatea
b).
ATP-aza dependent de Ca+2 este bine
reprezentat n membranele reticulului
sarcoplasmic (reticulul endoplasmic din celulele
musculare) - ionii de calciu avnd un rol
important n bioelectrogeneza celulei musculare.
21

ATP-aza dependent de H+ i K+ este prezent
mai ales n plasmalema celulelor din mucoasa
gastric unde asigur un eflux activ de protoni i
un influx activ de ioni de potasiu.

Un caz mai aparte l reprezint pompa de protoni
din membranele citoplasmatice ale procariotelor
i din membrana intern a mitocondriilor de la
eucariote, care asigur realizarea efluxului de
protoni simultan cu catalizarea fosforilrii ADP-
ului, reprezentnd deci o ATP-sintetaz, conform
mecanismului propus de Mitchel (Benga, 1976).

Energia provine din procesele redox localizate n
aceste tipuri de membrane i pe baza ei se
deplaseaz protonii fosforilnd ADP-ul.
22
O alt pomp de protoni, mai puin
rspndit, este cea din membrana
bacteriei Halobacterium halobium
care utilizeaz energia luminoas,
prin intermediul unei proteine de
membran numit bacteriorodopsin.