II.3.

ANALIZA STERIDELOR
Steridele sunt esteri ai sterolilor cu diferii acizi grai superiori.
ntre sterolii existeni n organismul omului i animalelor superioare pe
primul loc se situeaz colesterolul.
Colesterolul este un alcool monoatomic (monohidroxilic) secundar,
nesaturat, derivat de la ciclopentanoperhidrofenantren (steran).

HO

c olest erol

Colesterolul se gsete n toate esuturile i lichidele organismului

animal, att liber ct i sub form esterificat, aceasta din urm intrnd n
alctuirea membranelor celulare. O cantitate mare de colesterol se
descoper n esutul nervos, corticosuprarenale, glandele sexuale, bil,
ficat, muchi, snge etc.
Nivelul concentraiei colesterolului n snge depinde de starea
fiziologic a organismului uman sau animal. O cretere temporar a
coninutului de colesterol n snge poate s survin i prin consumarea de
ctre organismul uman a unor produse alimentare bogate n colesterol
(glbenu de ou, creier, ficat, rinichi, ulei de msline etc.).
Colesterolul liber i esterificat alctuiesc colesterolul total.
Determinarea coninutului de colesterol total i esterificat n snge prezint
un interes deosebit.

153

II.3.1. DOZAREA COLESTEROLULUI LIBER I TOTAL

N SERUL SANGUIN
Principiul metodei. Micrometoda de dozare direct a
colesterolului liber i total se bazeaz pe interaciunea clorurii ferice n
amestec de acid acetic i acid sulfuric cu colesterolul din serul sanguin n
condiii diferite de temperatur.
Reactivi. 1) Soluie de clorur feric ( FeCl3.6H2O) 0,1 % n acid
acetic glacial.
2) Reactiv de culoare. La 3 volume de soluie de clorur feric 0,1 %
n acid acetic glacial se adaug 2 volume de acid sulfuric concentrat.
Amestecul obinut se rcete la temperatura camerei. Se pstreaz n sticl
cu dop rodat. De preferat ca reactivul de culoare s se msoare utiliznd o
biuret cu robinet de 10 ml.
3) Soluie etalon de colesterol 200 mg %. Se dizolv 50 mg de
colesterol n 25 ml acid acetic glacial, la balon cotat.
Modul de lucru. Metoda cuprinde dou etape: n prima etap se
dozeaz colesterolul liber, iar n alta colesterolul total, adic colesterolul
liber i esterificat.
n dou eprubete obinuite curate i uscate se introduc cte 3 ml
reactiv de culoare (reactiv 2). Cu o micropipet se toarn pe peretele uneia
din eprubete 0,02 (0,04) ml ser sau plasm sanguin (fr urme de
hemoliz). n cealalt eprubet se adaug n mod similar 0,02 (0,04) ml
soluie etalon de colesterol. Coninutul eprubetelor se agit cu atenie i se
las n repaus timp de 60 minute la +200C ( ! ). Msurarea extinciei probei
i etalonului se realizeaz la 560 nm, fa de reactivul de culoare.
n paralel cu dozarea colesterolului liber, se efectueaz i dozarea
colesterolului liber i esterificat. n acest scop se utilizeaz alte dou
eprubete n care s-au pipetat cte 3 ml de reactiv de culoare. Apoi, n una
din eprubete se msoar aceeai cantitate de ser ca i pentru determinarea
colesterolului liber. n cealalt eprubet se introduce un volum de soluie
etalon identic cu cel de la colesterolul liber. Cele dou eprubete se introduc
ntr-o baie de ap la fierbere exact pentru 60 secunde ( ! ). Eprubetele se
rcesc la temperatura camerei i se determin extincia amestecului de
reacie la 560 nm.
Calculul rezultatelor. Calculul cantitii de colesterol liber sau
total se efectueaz conform urmtoarei formule :
mg colesterol liber (total) / 100 ml ser = Eser / Eetalon x 200,
unde : Eser extincia probei cu ser pentru colesterolul liber (total) i
Eetalon - extincia probei etalon.
Cantitatea de colesterol esterificat se afl scznd din valoarea
colesterolului total coninutul de colesterol liber.
154

nsemntatea clinico-diagnostic. n sngele omului sntos,

cantitatea de colesterol total (colesterolemia) variaz ntre 150 250 mg%,
iar a colesterolului liber ntre 40 90 mg%. n general, colesterolul liber
reprezint aproximativ 1 / 3 din colesterolul total. O modificare a
coninutului de colesterol se observ n funcie de vrst, sex, ras,
alimentaie, echilibru neuroendocrin, profesie.
Cea mai mare parte a colesterolului seric este de origine endogen,
aportul de colesterol exogen influennd n mic msur colesterolemia.
Creterea
concentraiei
colesterolului
n
snge
(hipercolesterolemia) se ntlnete n tulburri ale metabolismului lipidic,
n ateroscleroz, icter obstructiv, sindrom nefrotic, hipertiroidie,
avitaminoze B, diabet zaharat, intoxicaii acute cu diferite substane,
pancreatite.
Scderea concentraiei colesterolului sanguin (hipocolesterolemie)
se descoper n anemii, tuberculoz, hipertiroidie, inaniie, hepatite acute,
hepatite cronice, ciroze, lezarea sistemului nervos central.
Starea sistemului endocrin al organismului uman sau al animalelor
superioare manifest o influen esenial asupra nivelului colesterolului n
snge. Astfel creterea nivelului insulinei se asociaz cu scderea
colesterolului. n hipotiroidism se observ hipercolesterolemie.
Dozarea diferitelor fraciuni ale colesterolului (total, liber i
esterificat) n serul sanguin lrgete considerabil posibilitile diagnostice
de cercetare a metabolismului lipidic. Se apreciaz c stabilirea
coeficientului de esterificare, adic a raportului ntre colesterolul esterificat
i colesterolul total (raport care normal are valoarea 0,6 0,8) servete ca
o prob funcional nsemnat a ficatului, n care are loc sinteza
colesterolului i colesteridelor. Acest raport se micoreaz odat cu apariia
celor mai vagi simptome de patologie a ficatului.

155