Universitatea Politehnica din Bucureti FACULTATEA DE TIINA I INGINERIA MATERIALELOR

Metode avansate ale ingineriei tisulare bazate pe utilizarea biomaterialelor polimerice

Profesor coordonator: Prof. dr. ing. Brndua Ghiban Studeni: Popa Ana-Maria Timofte Loredana Elena

Bucureti 2014

Cuprins
Introducere ...................................................................................................................................... 3 1. Generaliti privind ingineria tisular ........................................................................................ 4 2. Tipuri de polimeri n ingineria tisular ..................................................................................... 11 1.1. Polimeri naturali i polimeri sintetici utilizai pentru schele.............................................. 13 1.2. Fabricarea schelelor polimerice tridimensionale i diferite tipuri de schele ...................... 15 1.2.1. Schele poroase ............................................................................................................. 16 1.2.2. Schele de hidrogeluri ................................................................................................... 17 1.2.3. Schele fibroase ............................................................................................................. 18 3. Materiale polimerice cu aplicaii n ingineria tisular a cartilajului articular ........................... 18 4. Aplicaii noi ale polimerilor n ingineria tisular ...................................................................... 23 4.1. Regenerarea tisular ghidat .............................................................................................. 23 4.2. Tipurile materialelor de blocare ......................................................................................... 25 Concluzii ....................................................................................................................................... 35 Bibliografie ................................................................................................................................... 36

Introducere

n prezent, materialele polimerice ocup un loc foarte important n toate domeniile activitii umane, fiind parte din ce n ce mai mult din viaa de zi cu zi. Dintre acestea, biomaterialele polimerice constituie un subiect foarte actual i cu o dinamic deosebit, dat fiind div ersitatea utilizrii n domeniul medical i farmaceutic. Principala preocupare o reprezint ameliorarea calitii implanturilor i a dispozitivelor de analiz minim -invaziv ale organismului, creterea biocompatibilitii i a rezistenei mecanice a materialelor care urmeaz s intre n contact direct cu esuturile biologice, punerea la punct a unor sisteme de elibeare controlat, care s duc la organul int diferite principii biologic active. Dei se afl la dispozitie un numr mare de materiale, biocompatibilitatea i proprietile mecanice, au restrns sever numrul actual de polimeri care pot fi folosii n domeniul medical. Candidatele la biomateriale trebuie s ndeplineasc cteva cerine, legate de proprietile fizice i mecanice ale polimerilor. Acestea includ: geometria dispozitivului sau implantului, gradul de umflare la echilibru, omogenitatea, proprietile elastice, rspunsul la tensiune, comportarea vscoelastic n timp, i posibilitatea eliberrii controlate de principii active. De asemenea, biomaterialele trebuie s poat fi sterilizate, fr alterarea formei sau proprietilor i fr absorbia permanent a agenilor de sterilizare. Ele nu trebuie s prezinte reacii inflamatoare cnd vin n contact cu esuturile naturale i acestea nu trebuie s fie degradate n prezenta enzimelor naturale din fluidele biologice. Pn n prezent, o varietate de materiale (naturale sau sintetice) au fost studiate ca poteniale produse ale ingineriei tisulare a cartilajului articular. Materialele naturale pot adesea interaciona cu celulele, dar, au, n acelai timp o serie de dezavantaje legate de rspunsul imun i proprietile mecanice necorespunztoare cu cele ale cartilajului articular. Astfel c, materialele sintetice au fost propuse ca i candidate pentru ingineria tisular a cartilajului articular, pentru c structura lor poate fi controlat astfel inct s putem anticipa anumite proprieti chimice i fizice specifice, pentru a putea obine anumite caracteristici mecanice. Aceste biomateriale pot fi sintetizate ntr-o varietate de matrici (burei, reele i hidrogeluri). Reelele i bureii sintetici sunt matrici 2D care au o porozitate foarte mare (>90%), i nu pot asigura funciile mecanice, ns pot servi ca o modalitate de transport ai celulelo r sau diferitelor principii active.
3

n cazul cartilajului articular, cel mai important aspect const n abilitatea de a rezista forelor de forfecare i compresiune de la nivelul articulaiei. Din punct de vedere a proprietilor mecanice, cei mai indicai sunt copolimerii metacrilici care se preteaz la astfel de cerine. Dintre acetia, un loc important ca i component al hidrogelurilor de uz biomedical l ocup p(hidroxietil metacrilatul) (p(HEMA)) datorit proprietilor sale remarcabile: lipsa de toxicitate i biocompatibilitate fiind folosit ca produs comercial (lentile de contact). In plus, sinteza acestor hidrogelurile pe baz de p(HEMA) se face intr-un timp scurt, fr a necesita o aparatur complicat, precum i un cost redus. Hidrofilia lor poate fi uor modificat utiliznd diferii co-monomeri. Hidrogelurile pe baz p(HEMA) au fost folosite pentru protezarea esuturilor moi, datorit caracteristicilor de biocompatibilitate, permeabilitate mare fa de moleculele mici, hidrofilicitate mare i consisten moale, n plus, p(HEMA) are un coninut de ap similar cartilajului articular, prezint rezisten la degradare, nu este absorbit de organism, suport sterilizarea prin inclzire fr afectarea structurii i se poate obine ntr-o varietate mare de forme. n acest proiect sunt prezentate structura i proprietile cartilajului articular, precum i patologia ntlnit la acest nivel de esut. Stadiul actual al metodelor de tratament actuale sunt subliniate mpreun cu limitrii lor, pentru a evidenia problematica de la care s-a plecat n cadrul acestui studiu. Astfel o altenativ este prezentat prin prisma ingineriei tisulare a cartilajului articular.

1. Generaliti privind ingineria tisular

Dezvoltarea materialelor biomedicale i aplicarea lor n medicin reprezint direcii de cercetare prioritare care dateaz de cteva decenii. Aceste cercetri presupun o abordare interdisciplinar ampl, n care tiina materialelor se ntreptrunde cu biologia i medicina. Practic, este implicat fiecare disciplin din domeniul medical, incluznd ntre altele chirurgia, ortopedia, stomatologia, medicina intern, dermatologia. Aceast situaie determin necesitatea ca specialitii din diferite domenii tiinifice s lucreze mpreun pentru a gsi un limbaj comun n vederea accesrii diferitelor descoperiri i a gsi n final soluii pentru problemele medicale existente [Leon B., 2009].

Bioingineria esuturilor sau ingineria tisular se refer la metode de cultivare a celulelor i esuturilor, menite de a se realiza esuturi viabile utile n medicin, indicnd calea de obinere a organelor artificiale de nlocuire: piele, cartilaj, rinichi, ficat, pancreas, os, sistem vascular. Aceste esuturi vii, produse n laborator sau n instalaii bioindustriale, vizeaz substituia esutului bolnav sau/i stimulareadezvoltarea unui nou esut la locul lezat. Ingineria tisular a aprut ca o alternativ promitoare a reconstruciei esuturilor i organelor pierdute i/sau deteriorate, ce poate preveni complicai ile asociate cu transplanturile tradiionale [Langer R., 1993]. n aceste cercetri, se abordeaz repararea sau regenerarea esutului afectat, utiliznd substitueni tisulari, care i menin funcionalitatea n timpul regenerrii i, n final, se integreaz n esutul gazd. Att succesul implantului, ct i creterea esutului nou, depind puternic de biomaterialul selectat. Aceasta ncercnd s elimine complicaiile asociate transplanturilor clasice, utilizeaz

substitueni tisulari care pot susine funcia esutului lezat n timpul regenerrii i care se doresc a se integra n esutul nativ. Substituenii tisulari alctuii din biomateriale i sisteme interactive sau viabile, implanturile multifuncionale ce vor nlocui temporar sau definitiv organe, inclusiv organe vitale, posibilitatea substituirii unor funcii de control motor sau analiza senzorial la nivelul sistemului nervos prin utilizarea unor CIP-uri, reprezint n totalitate modele biomimetice aplicate n medicin. Ingineria tisular se confrunt nc cu multe dificulti dintre care: modularea aderenei, proliferrii i a diferenierii controlate a celulelor pe suport, i n special a celulelor stem; eliberarea controlat susinut a substituentului tisular de factori specifici sau de plasmid ADN (ca de exemplu, factorii de cretere stimulatori ai angiogenezei etc.); dezvoltarea de biomateriale biomimetice inteligente, cu o bun compatibilitate superficial i structural i cu o activitate biologic specific, pentru stimularea predictibil, controlabil i obinerea rspunsului biologic vizat n condiiile date.

Ingineria tisular este o : Aplicaie terapeutic - esutul crete n corpul pacientului sau n afara lui i ulterior este transplantat. Aplicaie diagnostic - esutul este crescut in vitro i este utilizat pentru testarea metabolismului in prezenta unor substane medicamentoase, toxicitatea i patogenitatea lor. Pe lng faptul c este o aplicaie terapeutic, n care esutul este cultivat n pacient sau n afara pacientului i apoi transplantat, ingineria tisular poate avea aplicaii de diagnosticare, unde esutul este realizat in vitro i utilizat pentru testarea metabolizrii medicamentelor, asimilarea, toxicitatea i patogenitatea. Se produce esutul definitivat in vitro prin plasarea celulelor ntr-o matrice i apoi se implanteaz esutul n corpul recipientului. Se implanteaz in vivo biomatricea cu sau fr celule n corpul uman pentru a facilita regenerarea esutului in vivo

Progresele implic cercettorii ntr-o multitudine de discipline, inclusiv biologie celular, tiina biomaterialelor , imagistica i caracterizarea suprafeelor i interaciunii celulare. Cercetarea n ingineria tisular implic urmtoarele domenii:

1) Biomaterialele: inclusiv biomateriale noi, care sunt concepute pentru a direciona

organizarea, creterea i diferenierea celulelor n procesul de formare a esutului funcional prin furnizarea reperelor, att fizice ct i chimice.

2) Celulele: metode, protocoale, care trebuie s asigure numrul necesar de celule, i

diferenierea lor n dependen de esutul lezat (celule autologice, alogene, xenogene, cel ule obinute prin inginerie i prin manipulare imunologic).

3) Biomoleculele: includ factori de cretere sau genele lor, factori de difereniere i proteine
morfogenetice.

4) Aspecte de ingineria proiectrii: includ expansia celulelor pe structuri 2 -D, creterea

esuturilor 3-D, bioreactore, stocarea celulelor i esuturilor i distribuirea lor.

5) Aspecte biomecanice de proiectare: determin proprietile esuturilor native; identificarea

unor proprieti minime necesare esutului ingineresc, semnalelor mecanice care influeneaz esuturile ingineriei tisulare, eficacitatea i sigurana acestor esuturi.

6) Informatizarea pentru susinerea ingineriei tisulare: analiza secvenelor de gene i proteine,

analiza expresiei genice, expresiei proteinelor. Analiza interac iunilor, analizarea cantitativ a celulelor i esuturilor, modelarea tisular i celular, manufactur digital a esuturilor, sisteme automatizate de asigurare a calitii, interfeelor. Numai viziunea cuprinztoare asupra celulelor, factorilor inducto ri, a genelor, a suporturilor, a biomaterialelor i a relaiilor dintre acestea la nivel molecular, poate conduce la succesul proceselor reparatorii i la obinerea unor substitueni tisulari performani. Ingineria tisular molecular, urma a ingineriei tisulare i a biologiei moleculare, a fcut progrese uimitoare n ultimii ani. Ingineria tisular, n tandem cu medicina regenerativ, sunt atent vegheate de ingineria biomimetic.

Este adesea uor de recunoscut excelena unei soluii biologice, dar poate fi extrem de dificil de neles mecanismele care i stau la baz. Biomimetica a trecut etapele primare, de reproducere a unor structuri macroscopice naturale nedepind barierele microdimensionalului. Cu metodele noi de investigare i analiz, cnd vor fi elucidate cile celulare de biosintez, dar mai ales de construcie, diferenele dintre biomaterialele de sintez i cele naturale se vor estompa. Biomimetica va aciona atunci la nivel molecular i ntreaga gam de activitate se va schimba. J.Vincent arat c: Biomimetica inflorete n prezent datorit faptului c omului i stau la dispoziie noi tehnici performane de investigare i de manipulare a materialelor i a substanelor chimice la nivel molecular. ncepem s nelegem materialele la acest nivel n scopul dezvoltrii capacitii tehnologice de reproducere a metodelor de sintez, dar mai ales de control, ale lumii vii asupra structurilor 3D i a ierarhizrii acestora. Implantologia se afl la o rscruce provocat de evoluia conceptual a implanturilor, trecndu-se de la implantul clasic, spre implatul bioartificial saubiomimetic, care ofer noi avantaje post operatorii prin scurtarea timpului devindecare n cazul, de exemplu, al osului, al cartilajului, al pielii, al vaselor desnge, al valvelor cardiace etc. Dup principii biomimetice, includerea nsistemele implantabile mai mult structur biologic, adic de via, conduce lao asemnare mai pronunat a implantului cu esutul nativ, pn la nivelul lacare implantul biomimetic particip la procesul normal de remodelare tisular. Exist dou metode uzuale de obinere a grefelor similare celor autologe: modele directe pentru refacerea in vivo, a culturilor minimale pe suport biodegradabil, prin prelevarea unor celule normale de la pacient, apoi depunerea lor pe un suport care, implantat imediat, stimuleaz refacerea esutului lezat; implanturi viabile i grefe tisulare, culturi celulare pe termen lung care mimeazesutul nativ prin prelevarea unor celule normale de la pacient insmnarea acestora pe suporturi biodegradabile 3D, care conduce la generarea in vitro a unor matrici native prin activitatea normal a celulelor, ca esuturi perfect funcionale. esuturile native prezint in vivo structuri tridimensionale (3D) bine organizate i extrem de heterogene. Acestea sunt alctuite din straturi multiple suprapuse, membrane, structuri tubulare i canale. Fiecare dintre funciile esutului necesit existena unor componente specifice, celule i

materiale, la scar micro-nanometric. Matricea extracelular constituie suportul natural care menine arhitectura tridimensional a esutului, controleaz proliferarea celular, motilitatea i migrarea celular. Obinerea de suporturi n 3D din biopolimeri cu o arhitectur biomimetic, probnd proprieti cum ar fi: controlul diferenierii celulare, migrarea celular, producerea matricei celulare i organizarea tisular, constituie garania regenerrii, reconstruirii esutului lezat sau bolnav i a refacerii funciei sale native. Suporturile tridimensionale, poroase, pentru culturi celulare concepute biomimetic, sunt alctuite din biopolimeri naturali sau modificai chimic, singuri sau n amestec cu ali biopolimeri (colagen, fibrin, draglin, glicozaminoglicani, celuloz bacterian, chitin, chitosan, elastin etc.) sau polimeri de sintez (acizii polilactic i poliglicolic sau copolimeri ai acestora, poliuretani, policaprolactone, politrimetilencarbonai etc.) Strategiile de obinere a suporturilor artificiale tisulare se bazeaz pe abordarea biomimetic a creterii celulare i a probrii activitilor lor specifice. Se accentueaz importana abordrii biomimetice a sistemelor implantabile (Fig. 1.) innd cont de diversitatea esuturilor i a funciilor pe care acestea le ndeplinesc, n conceperea biomimetic a suporturilor 3D se pornete de la cele dou modele limit: suporturi 3D bogate n celule i suporturi 3D bogate n reeaua matricei, rezultnd tipuri intermediare care in vivo au tendine compensatorii, migrnd, din punct de vedere al constituiei i al proprietilor, de la un tip extrem la cellat. Ingineria tisular se dezvolt extrem de rapid, pe baz de tehnici pentru realizarea unei mari varieti de esuturi att in vitro ct i in vivo, folosind suporturi, matrici de biopolimeri sau/i polimeribiopolimeri, pentru cretere tisular, n scopul nlocuirii esuturilor distruse, afectate sau disprute, cu substitueni biologici compatibili (substitueni sanguini, substitueni osoi, substitueni de piele, substitueni vasculari, substitueni de ligamente i tendoane, substitueni de cartilaj etc.) i de a restabili funcia prin aportul de elemente vii ce devin integrate la nivelul pacientului.

Fig. 1. Schema teoretic a refacerii funciei n timp la implanturi protetice clasice comparativ cu sisteme implantabile ale ingineriei tisulare

Crearea i perfecionarea de noi materiale biomimetice i de tehnici pentru realizarea suporturilor 3D purttoare de celule, constituie o strategie complex care promite mbuntirea adeziunii, diferenierea i creterea celular. Materialele compozite prezint o deosebit importan n aplicaiile medicale, prezentnd versatilitate i mimnd cel mai bine esuturile vizate a fi substituite. Compozitele biomimetice i biocompozitele sunt utilizate frecvent pentru acoperirea implanturilor, n reconstrucia osoas i n aplicaiile dentare, maxilo-faciale, n chirurgia spinal, n protezarea articular etc. Cimenturile osoase sunt larg utilizate n ortopedie pentru ancorarea implanturilor de os, n reconstrucia osoas i pentru eliberarea controlat de principii active. Nanocompozitele sunt amestecuri de constitueni la scar nanometric, care se aseamn cel mai mult cu biocompozitele, probnd adesea caliti superioare microcompozitelor i pot fi sintetizate, n mod surprinztor, prin tehnici i condiii simple i ieftine ca i modificarea sau adaptarea chimic a unor interfee implantmediu biologic. Se remarc n momentul de fa dou tendine, diametral opuse, n conceperea i realizarea biomimetic a suporturilor tisulare 3D: a) pornind de la biologie apare reducerea progresiv a complexitii esuturilor native vii (de exemplu, decelularizare tisular);

10

b) pornind de la artificial, este evident creterea complexitii elementelor constitutive (de exemplu, agregate proteice, cu porozitate controlat, etc. ).

2. Tipuri de polimeri n ingineria tisular

Domeniul ingineriei tisulare a avansat n mod dramatic n ultimii 10 ani, oferind potenial de regenerare aproape fiecrui esut i organ al corpului uman. Ingineria tisular i disciplinele legate de medicin regenerativ rmne o zon de cercetare nfloritoare cu noi poteniale tratamente pentru diferite stadii ale bolilor. Strategiile generale adoptate n ingineria tisular pot fi clasificate pe trei grupe:

mplntarea de celule izolate sau substitueni de celule n organism; livrarea de substane reproductoare de esut plasarea celuleor pe diferite mtrici. Aceasta este frecvent asociat cu conceptul de inginerie tisular, adic utilizarea celulelor vii depuse pe un substrat extracelular, natural su sintetic, pentru a crea pri implantabile ale organismului. Proiectarea structurilor (schelelor) i fabricarea acestora sunt domenii majore de cercetare n

cazul biomaterialelor i sunt de asemenea subiecte importante n ingineria tisular i medicin regenerativ. Aceste schele joac un rol unic n repararea i regenerarea esutului. Pe parcursul ultimelor decenii, au fost efectuate numeroase lucrri n scopul dezvoltrii materialelor cu potenial de aplicabilitate structurilor pentru ingineria tisular. Schelele sunt definite ca biomateriale tridimensionale solide i poroase, proiectate pentru a efectua una sau toate funciile urmtoare:

(i) (ii)

contribuie la interaciunea celule-biomaterial, adeziunea celular si depunerea ECM, permite transportul suficient de gaze, nutrieni i factori ce permit supravieuirea celular, proliferarea i diferenierea,

11

(iii)

sunt biodegradabile cu o vitez controlabil care aproximeaz rata de regenerare a esuturilor,

(iv)

determin un grad minim de inflamaie sau toxicitate n vivo. Cele mai dezvoltate structuri cu caracteristici optime, cum ar fi rez istena, viteza de

degradare, porozitatea, microstructura, precum i formele i dimensiunile lor, sunt uor de controlat i reprodus cu ajutorul materialelor polimerice. Structurile care au prezentat activitate biologic au indus regenerarea esuturilor i organelor care nu se regenereaz spontan i au fost menionate c abloane de regenerare. Structurile biologice sunt derivate de la om, esuturi animale i structurile sintetice sunt derivate din polimeri. Prima structur biologic a fost sintetizat n anul 1974. A fost descris un comportament de degradare i antigenitate extrem de sczut n vivo, precum i comportamentul tromborezistent n vitro. Principiile de sintetizare a unei structuri biologic active, inclusiv importana critic a vitezei de degrad are, a fost descris n detaliu n anul 1980. Biomaterialele joac un rol important n aceast tehnologie, actionanad n calitate de cadre sintetice, menionate c schele, mtrici sau construcii. Stadiul actual al tehnicii de proiectare a biomaterialelor a evoluat continuu n ultimele decenii. n ultimii ani, accentul s-a pus pe materialele care ar putea fi utilizate n domeniile biomedicale. Biomaterialele destinate pentru aplicaiile biomedicale au sarcina de a dezvolta materiale artificiale care pot fi ultilizate pentru repararea sau restaurarea funciilor esutului su organului traumatizat din corpul uman. Dup o faz timpurie de selecie a biomaterialelor n funcie de disponibilitate, ncercrile de proiectare s -au bazat n primul rnd pe obinerea performanei structurale/mecanice sau de redare a ineriei, fiind astfel nerecunoscut ca un corp strin de ctre sistemul imunitar. Biomaterialele folosite ca implanturi sunt sub forma de suturi, plci osoase, proteze articulare, ligamente, grefe vasculare , valve cardiace, lentile intraoculare, implanturi dentare i dispozitive medicale, cum ar fi simulatoarele cardiace, biosenzori, etc. Biopolimerii, cum ar fi colagenul, elastin, fibroin, draglin, fibronectina, fibrin, amidonul, celuloz bacterian, dextranii, mananii, alginaii, pectinele, chitin, chitosanul, glicozaminoglicanii etc., i-au gsit o multitudine de aplicaii biomimetice n domeniul medical (inginerie tisular, implantologie, medicin regenerativ, fire de sutur, burei, filme, biomateriale poroase, substitueni plasmatici, purttori de medicament cu eliberare controlat i preparate de uz farmaceutic,

12

oftalmologie etc.) fiind dat similitudinea lor cu mtricile extracelulare i ceilali biopolimeri din organismul uman. n ultimele patru decenii, au fost fcute progrese semnificative n cazul schelelor pentru apliatiile biomedicale.

2.1. Polimeri naturali i polimeri sintetici utilizai pentru schele

Polimerii sunt biomateriale utilizate pe scar larg pentru fabricarea dispozitivelor medicale i schelelor de esut n inginerie. n aplicaiile biomedicale, criteriile de selectare se bazeaz pe compoziia chimic, greutatea molecular, silubilitatea, forma i structura, hidrofil/ hidrofob, energia de suprafa, mecanismul de eroziune. Schelele polimetrice astrag o mare atenie datorit proprietilor unice, cum ar fi raportul de suprafata-volum, porozitate mare, cu pori de dimensiuni foarte sczute, biodegradare i proprieti mecanice. Acestea ofer avantaje distincte de biocompatibilitate, versatilitatea chimic i proprietile biologice, care sunt semnificative n punerea n aplicate a ingineriei tisulare i substituiei organelor. Cercettorii au ncercat s creasc piele i cartilaj, oase i cartilaje, ficat, valve ale inimii i arterelor, vezici urinare, pancreas, nervi, cornee, precum i alte esuturi moi. Scafold este un concept central n ingineria tisular, care furnizeaz structur suport pentru aderarea i creterea celulelor. Schelele Scafold pot avea forme i compoziii diferite (spum, fibre, reele, geluri), pot fi obinute dintr-o gam larg de materiale, sunt uzual biodegradabile i reprezint o aplicaie major a polimerilor n ingineria tisular Polimeri sintetici biodegradabili: poli acid L-lactic (PLLA), poli acidD,L- lactic (PDLLA), poli acid glicolic (PGA), poli acid lactic-co-glicolic(PLGA), poli hidroxi butirati, poli -caprolactona, polidioxanona, polianhidride, polifosfazene, polipeptide, etc Polimeri naturali biodegradabili: celuloz, chitin, chitosan, dextran, colagen, gelatin, fibrin, fibrinogen, cazein, etc.

13

Criterii pentru utilizarea structurilor scaffold n ingineria tisular sunt: Promoveaz adeziunea celular Crete proliferarea celular Retenia funciei celulei difereniate Biodegradabilitatea Biocompatibilitatea nalt porozitate Raport mare suprafa/volum Rezistena mecanic Distribuie uniform i pori interconectat Materialele folosite pentru schele (Scaffold) pot fi sintetice sau biologice, biodegradabile sau nu, n funcie de utilizarea prevzut. Proprietile polimerilor depind de compoziia, strctura i dispunerea moleculelor constitutive. Polimerii de origine natural, polimerii sintetici biodegradabili, polimeri fr grad de degradare sunt principalele tipuri de polimeri utilizate ca biomateriale. Polimerii naturali sunt primele biomateriale utilizate clinic. Ca urmare a proprietilor bioactive, materialelel naturale au interaciuni mai bune cu celulele, lucru care mbuntete performana celulelor n mediul biologic. Polimerii naturali pot fi calasificati n: proteine (colagen, gelatin, fibrogen, elastin, keratina, actina i miozin), polizaharide (celuloz, amiloz, dextran, chitin i glicozaminoglicani) su polinucleotide(ADN, ARN). Orientarea biomaterialelor sintetice poate facilita restaurarea structurii i funciei esutului deteriorat sau bolnav. Polimerii sintetici sunt foarte utili n domeniul biomedical, deoarece proprietile lor (de exemplu porozitatea, timpul de degradare i caracteristicile mecanice) pot fi adaptate pentru specificitatea aplicaiilor. Polimerii sintetici sunt de dou ori
14

mai ieftini dect schelele biologice; pot fi produi n cantiti mari, uniforme i au o perioad ndelungat de valabilitate. Muli polimeri sintetici prezint proprieti fizico-chimice i mecanice comparabile cu cele ale esuturilor biologice. Polimerii sintetici reprezint cel mai mare grup de polimeri biodegradabili, iar acetia pot fi fabricai n condiii controlate. Acetia prezint n general, proprieti mecanice i fizice previzibile i reproductibile, cum ar fi rezistena la traciune, modulul de elasticitate i viteza de degradare. Copolimerii PLA (acid polilactic), PGA(acid poliglicolic), PLGA sunt printre polimerii sintetici cel mai frecvent utilizai n ingineria tisular. PHA (Polihidroxialcanatii) aparin unei clase de poliesteri microbieni i sunt luai n considerare din ce n ce mai mult pentru aplicaiile ingineriei tisulare. Ceramicile bioactive, cum ar fi HA (hidroxiapatita), TCP (fosfatul tricalci c) i anumite compoziii sticle fosfatice, silicatice (sticle bioactive) i sticle ceramice (cum ar fi apatita Wolastonit (CaSiO3)) reacioneaz cu fluidele fiziologice i prin intermediul activitii celulare formeaz legturi benefice n cazul esuturilor dure, uneori chiar i n cazul esuturilor moi. Cu toate acestea, biocompatibilitatea i biodegradabilitatea sunt de multe ori insuficiente, limitnd utilizarea lor potenial n domeniul clinic. Aceste neajunsuri pot fi depite prin amestecul de polimeri naturali i sintetici, sau prin folosirea unor materiale compozite, ce mbuntesc proprietile schelelor, permind o degradare controlat i mbuntirea biocompatibilitatii n aplicaiile ingineriei tisulare.

2.2. Fabricarea schelelor polimerice tridimensionale i diferite tipuri de schele

ntr-o epoc de scdere a disponibilitii de organe pentru transpalant, domeniul ingineriei tisulare este n contitnua dezvoltare i ofer sperane pacienilor care au nevoie de nlocuitori ale esuturilor i organelor. ncepnd cu anul 1980, cercettorii au dezvoltat multe tehnici noi pentru a forma polimeri n arhitecturi complexe, care s prezite proprietile specifice cerute de aplicaiile ingineriei tisulare. Aceste tehnici de fabricare deter min schele reproductibile pentru regenerarea esuturilor specifice. Schelele polimerice pot oferi rezisten mecanic, porozitate i zon de suprafa interconectate, diferite legturi de suprafa, i geometrii unice pentru a putea direciona
15

regenerarea esutului. Construcia schelelor este esenial pentru c un model tridimensional s se poat dezvolta prin imitare. Aceste caracteristici cheie ale scheleleor pot fi adaptate prin apliarea unei selecii atente a polimerilor i a tehnicilor de fabricare. Construciile schelelor includ fibre, burei, spume, etc. Aceste modele sunt alese pentru distribuia uniform a celulelor, difizarea de substane nutritive i creterea comunitilor de celule. Tehnic de fabricare pentru schelele destinate ingineriei tisulare depinde aproape n intregine de proprietile de suprafa ale materialului i funcia prevzut. Cele mai multe tehnici implic aplicarea de cldur i / su presiune asupra polimerului sau dizolvarea lui ntr-un solvent organic pentru a modela materialul n form dorit. n timp ce fiecare metod prezint avantaje i dezavantaje distincte, tehnic adecvat trebuie s fie selectat astfel nct s satisfac cerinele pentru tipul de esut specific.

2.2.1. Schele poroase

Schelele polimerice tridimensionale cu poroziti mari, avnd reele de pori interconectate sunt foarte utile pentru ingineria tisular. Buretele sau spum poroas au fost folosite n special pentru creterea esutului gazd, regenerarea oaselor sau vascularizarea organelor. Reteau lor poroas permite interacionarea eficient a celulelor cu mediul lor. Dei spumele i bureii sunt mai stabile mecanic, comparativ cu structurile tip plas, utilizarea acestora este nc limitatat datorit spaiilor deschise, prezente de-a lungul unei schele. O abordare a unei schele polimerice prezint cteva avantaje pentru proliferarea sau aderarea liniilor celulare, cum ar fi: furmizarea unei suprafee pe care celulele s-i poat forma propria arhitectur, asigurarea transportului de nutrien i la centrul dispozitivului poros al reelei de interconectare, eliminarea grupurilor de celule foarte mari care po t dezvolta un centru necrotic. n funcie de alegerea solventului i condiia de separare solvent faz, spumele pot fi controlate pentru a forma arhitecturi poroase orientate sau aleatorii. mbuntirea strcturii schelelor i creterea interconectivitii porilor este necesar pentru desvoltarea vaselor de snge artificiale sau creterea nervilor periferici. Formele tridimensionale precise sunt necesare la dezvoltarea tehnologiilor sofisticate de extrudare i a metodelor de aderare a membranei poroase fu formele dorite. Dimensiunile ideale ale porilor variaz n funcie de tipul celulelor sau esuturilor. Schelele poroase pot fi fabricate cu o dimensiune specific a porilor, porozitate, raportul suprafata-volum i cristalinitate. Sistemele poroase cu eliberare controlat conin pori care sunt suficient de mari pentru a permite difuzia medicamentului. Polimerii biodegradabili
16

sintetici, cum ar fi PLA (acid polilactic), PGA(acid poliglicolic), PLGA ( acid polilactic-co-glicolic), PCL (policaprolactona), PBT (tereftalat de polibutilen) se folosesc ca materiale pentru schelele poroase. O metod modern pentru crearea construciilor poroase din nanofibre biodegradabile i micarea de electrospinnig este cea mai recent dezvoltare n domeniu.

2.2.2. Schele de hidrogeluri

n ultimul deceniu, hidrogelurile au jucat un rol important n domeniul revoluionar al ingineriei tisulare, unde sunt utilizate ca schele pentru ghidarea noilor esuturi. Proiectarea i aplicarea hidrogelurilor biodegradabile a permis dezvoltarea unor tehnici de livrare/administrare a medicamentelor i a aplicaiilor ce aparin ingineriei tisulare. Hidrogelurile compuse din macromolecule naturale au avantaje precum biocompatibilitatea, biodegradabilitatea controlat i interaciunea celular intrinsec. Ele pot prezenta variaii discontinue, n general prezint un interval limitat de proprieti mecanice. att parametri fizici clasici( de exemplu biodegradarea i biomecanic), precum i parametri. n shimb, polimerii sintetici pot fi realizai cu structuri i funcii controlate cu precizie. Hidrogelurile au similaritate structural a componenelor macromoleculare de baz din organism i sunt considerate biocompatibile. n ingineria tisular, hidrogelurile trebuie s ndeplineasc o serie de criterii de proiectare pentru a funciona n mod corespunztor i de a susine formarea de esut nou. Aceste criterii includ biologici de performan (adeziunea celular). Se crede c viteza de degradare a schelelor de esut trebuie s se potriveasc cu viteza diverselor procese celulare, n scopul de a optimiza regenerarea esutului. Prin urmare, profilul de degradare a tuturor gelurilor biodegradabile trebuie s fie bine definit, reproductibil i n acord cu structura chimic a hidrogelului. Hidrogelurile biocompatibile sunt folosite n prezent la vindecarea cartilajelor, regenerarea oaselor i n calitate de transportatori pentru livrarea medicamentelor. Hidrogelulurile cu factor de cretere poat aciona direct pentru a sprijini dezvoltarea i diferenierea celulelor n esuturile noi formate. Aceste pot fi de multe ori favorabile pentru promovarea migraiei celulare, amniogenezei precum i difuzarea rapid de nutrieni. S -au fcut studii intense asupra schelelor din hidrogel, n special n nlocuirea esuturilor conjunctive. Polimerii naturali care formeaz hidrogel pot fi colagenul, gelatin, fibrin, alginat i chitosan iar ca polimeri sintetici amintim PLA (acid polilactic), copolimerii derivai PPF (sulfur de polifenilen), derivai ai PEG (polietilenglicol) i PVA (alcool polivinilic).
17

2..2.3. Schele fibroase

Dezvoltarea de nanofibre a mbuntit domeniul de aplicare a schelelor de esut care pot imita la scar nanometrica arhitectur esutului uman natural. n prezent exist trei tehnici disponibile sintezei de nanofibre: electrospinning, autoasamblarea i separarea fazelor. Dintre acestea, electrospinning (schi) este tehnic cea mai studiat i de asemenea pare s prezinte rezultatele cele mai promitoare pentru ingineria tisular. Raportul crescut suprafata -volum al nanofibrelor cu structur poroas favorizeazaadeziunea celular, proliferarea, migrarea i diferenierea, toate fiind proprieti extrem de importante pentru aplicaiile ingineriei tisulare. Nanofibrele sunt folosite ca schele n ingineria tisular musculo-scheletala, inclusiv oare, cartilaje ligamente, muchi scheletici (somatici), esuturi neuronale dar i ca transportatori pentru administrarea controlat a medicamentelor, proteine si ADN. Polimerii naturali i cei sintetici cum ar fi: colagen, gelatin, chitosan, fibr de mtase, PLA (polilactid), PU (poliuretan), PCL(policaprolactona) , PLGA (Poli (L-lactid-co-glicolid)), PLLA-CL (Poli (L-lactid-co-glicolid)), sunt schelete fibroase n aplicaiile biomedicale. Tehnic de amestecare este o alegere comun pentru functionalizarea nanofibrelor. Cu toate acestea, cele mai multe nanofibre polimerice nu posed nici un grup funcional specific, iar acestea trebuie s fie specific functionalizate pentru aplicaii de succes. Cele mai populare i simple metode de modificare n cazul nanofibrelor sunt amestecrile fizice i acoperirile. Medicamentele, factorii de cretere i genelor pot fi amestecate direct n soluia de polimer i centrifugate pentru pregtirea purttorilor de medicamente cu eliberare controlat.

3. Materiale polimerice cu aplicaii n ingineria tisular a cartilajului articular

De foarte multe ori, degenerarea cartilajului articular se manifest ca urmare a uzurii, aparent fr a fi precedat de vreun proces patologic (osteoartroz primar), dar poate fi i ca urmare a traumatismelor sau a bolilor reumatismale inflamatorii ca re distrug suprafaa articular, genernd osteoartroza secundar. Reacia de reparare i regenerare dup degradarea post traumatic sau degenerarea cartilajului articular matur este minim, esutul cartilaginos neavnd capacitatea de a repara prin restitutio ad integrum alterrile structurale odat aprute. Aceste observaii au condus la
18

considerarea cartilajului articular ca fiind un esut inert cu rezisten la tensiune, simi lar cu polietilena i metalele i c degenerarea cartilajului aprut odat cu vrsta este rezultatul incrcrii mecanice a acestuia cu pierderea ireversibil a integritii structurale i a proprietilor mecanice ale acestuia. n consecin, pentru a preveni degradarea cartilajului nu se poate face aproape nimic n afar de a limita incrcarea mecanic a acestuia, i deci, cel mai adecvat tratament pentru degradarea avansat a cartilajului este artroplastia cu nlocuirea suprafeelor articulare degradate. Un alt punct de vedere fa de cel prezentat mai sus este acela c, esutul c artilaginos nefiind inert, este capabil intr-o oarecare msur de reparare i regenerare, astfel nct ncrcarea articular nu va duce inevitabil la artroza, i deci, exist posibilitatea efecturii unui tratament care s restaureze cel putin parial i n anumite cazuri integritatea cartilajului articular. Numeroase studii au fost efectuate pentru a inelege mai bine procesele care duc la degradarea cartilajului cu alterarea compoziiei i structurii, i prin urmare cu pierderea funciei esutului, i relaia cu osteoartroza, precum i procesele care in de repararea i regenerarea cartilajului cu restabilirea funciei acestuia. Conceptul comun reprezentativ al ingineriei tisulare este de a combina sau a folosi individual, matrici/reele i celule vii i/sau substane biologic active, pentru a forma produse care vor fi implantate n vivo, i care vor contribui la repararea i regenerarea esuturilor .

Schema reprezentativ a ingineriei tisulare

Ingineria tisular a cartilajului articular presupune, pe de o parte, sinteza de matrici cu proprieti asemntoare cu cele ale cartilajului articular, iar pe de alt parte, datorit faptului c terapia medicamentoas oral a condroplastiilor are multe efecte secundare, eliberarea unor principii active din aceste matrici sintetizate.
19

Matricea trebuie s permit colonizarea, migrarea, diferenierea i creterea celulelor, i s induc i ghideze dezvoltarea esutului respectiv, sau s permit eliberarea controlat de medicamente. Scopul ingineriei tisulare este de a realiza o matrice dintr-un material biocompatibil, biodegradabil sau nu, n funcie dac se dorete sau nu realizarea de culturi celulare. n cazul matricilor pentru culturi celulare, ele trebuie sa permit creterea, proliferarea i integrarea celulelor. Pentru astfel de aplicaii, alegerea unui astfel de material s -a realizat astfel nct materialul respectiv s aib aceleai proprieti cu cele ale matricei cartilajului articular. Privite dintr-o viziune biologic, este clar faptul c majoritatea esuturilor au dou tipuri de componente: una structural i una biochimic. Ingineria tisular ia n considerare amndou componentele, pentru realizarea implanturilor pentru regenerare tisular i facilitarea integrrii acestora. Sinteza matricei suport determin, n mare parte, funcionalitatea sa. Dei cerinele finale depind de scopul specific al caracteristicilor matricilor, mai multe cerine generale trebuie s fie luate n considerare pentru toate matricile .Matricile suport ar trebui s fie/aib: biocompatibile; matricea trebuie s determine un rspuns biologic corespunztor aplicaiei i s previn orice rspuns nefavorabil al esutului inconjurtor ; biodegradabile; matricea trebuie s se degradeze n acela tinp cu regenerarea i remodelarea matricei extracelulare, n substane netoxice fr s intervin n funcionarea esutului nconjurtor ; s faciliteze ataarea celular, dispersarea i proliferarea ; proprieti mecanice corespunztoare aplicaiei pentru care sunt destinate - rezistena matricilor trebuie s fie comparabil cu cea a esutului in vivo; proprieti de transport al nutrienilor i de eliminare a produilor de uzur - matricea trebuie s aib o anumit porozitate, dar n acela timp, sa i pstreze proprietile mecanice specifice; s permit vascularizaia dintre substitut la esutul gazd; proprieti de suprafa corespunztoare aplicaiei; n afara proprietilor fizicochimice, cercetrile sugereaz c topografia de suprafa joac un rol important n organizarea tisular, mbuntind funcia substitutului;

20

Matricile suport au un rol foarte important n ingineria tisular a cartilajului articular. Aplicarea lor variaz de la substituirea prii periostale din tratamentul prin implantarea cu condrocite pn la dispozitive cu eliberare controlat, care s mbunteasc regenerarea tisular i s reduc procesele inflamatorii, din osteoartrit. Utilizarea matricelor n ingineria tisular au deschis calea pentru utilizarea materialelor de substituie n tratarea patologiilor cartilajului articular. Astfel de matrici trebuie s respecte principiile de baz: s fie biocompatibile, stabile din punct de vedere structural i mecanic, s permit ncorporarea de substane biologic active, i s permit diferenierea i maturarea celular. Tuli i colab. au mprit aceste materiale n dou tipuri principale: naturale i sintetice. Matricile din hialuronan i colagen au fost printre primel e materiale naturale folosite n substituia cartilajului articular datorit structurii asemntoare cu cele ale cartilajului articular nativ. Studii clinice preliminarii au fost realizate cu matrici bazate pe hialuronan Hyalograft C. S-a observat o reparare a esutului cartilaginos de aproximativ 96,7%. ns, n ceea ce privete celelalte matrici naturale folosite (fibrina, agaroza, alginatul, colagenul) s-au observat efecte adverse i n plus, au avut i alte incoveniente legate de imunogenitate, compatibilitate i nu au fost obinute aceleai caracteristici din pu nct de vedere mecanic .

Matrice natural

Avantaje Aspect histologic mbuntit Permite incorporarea de

Dezavantaje Proprtieti mecanice slabe Poate provoca un rspuns imun Nu permite ataarea celular

Fibrina

factori de cretere, cu bune rezultate la testele prelimarii pe oareci Injectabil Disitribuire uniform a

O reacie celular de corp strin (agaroza) Nu se resorb bine Proprieti biochimice

Agaroza, alginatul

celulelor Rezulate histoloigice bune la

21

testele preliminarii pe iepure

inferioare esutului nativ Repararea rapid a defectului

Intr n alctuirea cartilajului Colagenul nativ Rezultate histologice bune

articular poate s cedeze n timp Integrare incomplet n esutul gazd Posibila transmitere a bolilor Prionice

Intr n alctuirea cartilajului Hialuronan nativ O bun integrare n esutul gazd

Poate induce condroliza Cartilajul substituit este mai subire ca cel nativ

Polimeri naturali folosii n ingineria tisular a cartilajului articular Datorit posibilelor complicaii date de reaciile de antigenitate, resurselor insuficiente de polimeri naturali, i faptul c aproape nici un material natural nu ndeplinete aceleai proprieti mecanice ca ale cartilajului articular, cercettorii s-au orientat spre dezvoltarea polimerilor sintetici. n cazul folosirii materialelor sintetice avantajul major este constituit de faptul c se poate asigura un control asupra compoziiei i consistenei, cu un risc sczut de contaminare patogenic. Majoritatea polimerilor sintetici formeaz hidrogeluri, ca poli(alcool vinilic) (PVA), poli(etilen glicol) (PEO), i copolimerii de poli(etilen oxid) (PEO) i poli(propilen oxid) (PPO). Cele mai utilizate matrici suport pentru substituia de cartilaj articular sunt polimerii hidrofili n form de burei, reelele fibroase i hidrogeluri. Acestea includ: poli(hidroxi esteri ) (exemplu: poli(acid lactic), poli(acid glicolic)), poli(caprolactona) (PCL), poli(etilen glicol) (PEG) i copolimerii lor ca: poli(acid lactic-co-acid glicolic), poli(PEG-co-tereftalat) i poli(PEG-co-acid fumaric), poli(alcool vinilic), poli(2-hidroxietil metacrilat). Pn n prezent, o varietate de materiale (naturale sau sintetice) au fost studiate ca poteni ale produse ale ingineriei tisulare a cartilajului articular. Materialele naturale pot adesea interaciona cu celulele, dar, au, n acelai timp o serie de dezavantaje legate de rspunsul imun i proprietile mecanice necorespunztoare cu cele ale cartilajului articular.
22

Astfel c, materialele sintetice au fost propuse ca i candidate pentru ingineria tisular a cartilajului articular, pentru c structura lor poate fi controlat astfel inct s putem anticipa anumite proprieti chimice i fizice specifice, pentru a putea obine anumite caracteristici mecanice. Scopul ingineriei tisulare a cartilajului articular este s se foloseasc celule, matrici, principia biologic active, singure sau n combinaie unele cu altele, pentru a sintetiza in vitro un material care sa fie este echivalent cu cartilajul articular sntos, att din punct de vedere structural ct i funcional.

4. Aplicaii noi ale polimerilor n ingineria tisular

4.1. Regenerarea tisular ghidat

Savanii sunt preocupai de problema captivrii i stimulrii celulelor pentru elaborarea componentelor parodontale dup nlturarea esuturilor afectate de procesul inflamator -distructiv. Metodele moderne n chirurgia parodontal bazate pe principiile de regenerare tisular ghidat a esuturilor, elaborate acum circa 20 de ani, sunt utilizate pn n prezent, fiind permanent perfecionate. RTGh este utilizat pentru sporirea regenerrii esuturilor osos i conjunctiv, pierdute n urma leziunilor inflamatoare ale parodoniului. Cercetrile efectuate de H. Melcher n anul 1976 au artat c, dup efectuarea unui lambou mucoperiostal, suprafaa radicular poate fi colonizat de patru tipuri de celule: epiteliale, ale esutului conjunctiv, celule desmodontale i celule ce provin din osul alveolar. Celulele parodoniului sunt capabile de a regenera, dar numai n condiiile cnd epiteliul este izolat de esutul conjunctiv. n calitate de bariere resorbabile i neresorbabile au fost utilizate diferite materiale ca celuloza, politetrafluor-etilena, polimerul acidului lactic i polimerii glicolizi. Aadar, concepia biologic a regenerrii tisulare ghidate (RTGh) a fost argumentat n premier de ctre H. Melcher n anul 1976. Autorul a stabilit c cicatrizarea esuturilor dup operaie la parodoniu este determinat de accelerarea repopulrii celulare. Celulele epiteliului gingival, esutului conjunctiv, osului alveolar i periodoniului au capacitatea de repopulare pe suprafaa radicular.

23

T. Karring i coaut. (1980), S. Nyman i coaut. (1982) au testat posibilitatea formrii unui esut nou din os, care ar putea reproduce o jonciune, din esutul conjunctiv. Dup producerea unei parodontite n experien pe cini, rdcinile dinilor lezai se reimplantau n alveole create ar tificial. S-a demonstrat histologic c peste 3 luni avea loc regenerarea periodoniului n zona apical, unde s au pstrat rmie ale periodoniului. n sectoarele unde dup chiuretaj nu s -au pstrat celule periodontale, s-a dezvoltat anchiloza i resorbia rdcinii. Resorbia avea loc acolo unde esutul gingival venea n contact direct cu suprafaa rdcinii. Astfel, studiile efectuate de aceti autori au demonstrat c celulele osoase i esutul conjunctiv gingival induc resorbie i anchiloz n cazurile cnd au contact direct cu suprafaa rdcinii. S. Nyman i coaut. (1987) au modificat modelul experimentului, cu scopul de a verifica rolul esutului conjunctiv gingival n formarea jonciunii dento -gingivale. Rdcinile dentare se amplasau n nite recesiuni n os din partea jugal a maxilarelor. Ele se acopereau astfel ca numai jumtate din rdcin s contacteze cu esutul conjunctiv al lamboului. Peste 3 luni rezultatele histologice corespundeau datelor obinute n primele investigaii regenerarea avea loc acolo unde periodoniul s-a pstrat. n sectoarele unde rdcina contacta cu esutul conjunctiv gingival, fibrele aveau un aranjament paralel cu suprafaa radicular, dar nu se ancorau n cement. Autorii au concluzionat c celulele gingivale, de asemenea, mpiedic procesul de regenerare a jonciunii conjunctive; opinia c celulele osoase pot favoriza formarea cementului i a periodoniului n -a fost confirmat. Mai trziu T. Karring i coaut. (1992) au demonstrat c celulele osului inhib capacitatea esutului conjunctiv de a regenera. Regenerarea esuturilor are loc acolo unde sunt pstrate celulele periodontale, n absena lor esutul gingival induce resorbia radicular. S. Nyman i coaut. (1982), demonstrnd capacitatea celulelor periodoniului de a regenera, au utilizat filtrul din celuloz (millipore filter). Dup nlturarea periodoniului, cementului i osului alveolar din partea vestibular la caninii maimuelor, deasupra fiecrui defect se fixa acest filtru. Rezultatele cercetrilor histologice efectuate peste 6 luni au demonstrat formarea neocementului, n care se fixau fibrele periodoniului, i regenerarea osului alveolar. S-a demonstrat c periodoniul este capabil de a regenera, dar numai n condiii cnd epiteliul gingival este blocat de esutul conjunctiv. Aplicarea membranelor dau posibilitate de a crea un spaiu ntre membran i suprafaa rdcinii, iar periodoniul poate invada n acest spaiu, pe cnd epiteliul gingival i esutul conjunctiv sunt excluse din contactul cu suprafaa rdcinii.
24

J. Gottlow i coaut. (1984) au continuat cercetrile: din ambele pri vestibulare ale dinilor la maimue, lng coroan, ei denudau rdcina, declannd astfel un proces inflamator i formarea depozitelor dentare. Peste 6 luni a fost format un lambou i efectuat chiuretajul acestui sector, rdcinile au fost rezecionate de la coroan, apoi pe o hemiarcad se aplicau membrane de politetrafluoretilen i filtre din celuloz, iar pe cealalt hemiarcad nu se plasau me mbrane. Lamboul din ambele pri se sutura. Investigaiile histologice peste 3 luni au demonstrat c acolo unde erau aplicate membrane, avea loc formarea neocementului cu inseria fibrelor colagene, iar n alt parte avea loc proliferarea granulaiilor. Deci, n aceste investigaii, prin intermediul membranelor au fost separate epiteliul i esutul conjunctiv, pentru a da posibilitatea infiltrrii n plag a celulelor periodoniului i a tesutului osos. Graie acestor investigaii, s-a acumulat o experien bazat pe principiile RTGh, care duc la proliferarea diferitelor esuturi parodontale n procesul de cicatrizare dup tratamentul parodontal. Pn la repoziia i suturarea lamboului se formeaz o barier fizic ntre lambou i suprafaa rdcinii. Separarea epiteliului gingival i a esutului conjunctiv permit regenerarea celulelor periodoniului i / sau osului alveolar prin repopularea celulelor n zona defectului.

4.2. Tipurile materialelor de blocare

Iniial, materialele de blocare n-au fost destinate pentru aplicare n medicin (celuloza,politetrafluoretilena). Ele au nceput s fie utilizate datorit faptului c dispun de microporozitate, care nu mpiedic penetrarea lichidului i substanelor nutritive, dar n acelai timp exclud migrarea celulelor tisulare. Alt avantaj al acestor materiale const n faptul c ele pot fi uor sterilizate. Criteriile specifice ideale, naintate fa de materialul de baraj, includ: integritatea tisular, nepenetrarea celular, posibilitatea de a crea un spaiu, comoditatea aplicrii n clinic i biocompatibilitatea. Pentru a exclude sau mpiedica invazia epiteliului i a preveni recesia gingival,
25

barajul trebuie s fie confecionat dintr-un material cu capaciti de integrare cu esuturile parodontale, care nu permit formarea pungilor n afara zonelor de blocare, micoreaz posibilitatea infectrii i amelioreaz efectul fizionomic att n timpul tratamentului, ct i dup. Mecanismul de aciune al materialelor, n special al membranelor, const, n afar de cele menionate, n faptul c ele trebuie s conin componente care ar stimula osteogeneza. Conceptul biologic care st la baza acestor tehnici este acela c celulele progenitoare pentru formarea de esut nou conjunctiv de ataament pe suprafaa radicular persist n ligamentul parodontal. Regenerarea parodontal reprezint restaurarea structurilor de susinere ale dinilor ntr -o zon care anterior a fost afectat; ctig de ataament clinic la sondare i umplerea spaiului respectiv cu os, ns adevrata regenerare nu poate fi demonstrat dect printr -o investigaie histologic. Materialele de blocare pot fi de trei tipuri: neresorbabile, biodegradabile i bioresorbabile. Materialele neresorbabile apar n anii 80 ai secolului trecut. n 1982, W. L. Gore i coaut. au nceput cercetrile capacitilor membranelor din politetrafluoretilen de a preveni migrarea epiteliului. n experiene pe cini deja peste 1-3 luni s-a demonstrat histologic c migrarea epit eliului se stopeaz la nivelul acestor membrane. Astfel, n 1986, primul baraj PTFEtilen, destinat RTGh, a fost acceptat de Federaia Dentitilor Americani. Aceast membran contribuie la formarea coagulului i proliferarea epiteliului spre ocluzal, astfel delimitnd esutul conjunctiv i epiteliul, dnd posibilitatea de a regenera periodoniul i osul alveolar. n cercetrile efectuate n 1986 de W. L. Gore a fost apreciat eficacitatea RTGh n tratamentul afeciunilor din regiunea furcaiilor de clasa II pe mandibul, de altfel, foarte complicate n tratament. Cicatrizarea deplin a defectului n 14 cazuri din 21 a avut loc la aplicarea RTGh, pe cnd prin metode chirurgicale de lichidare a defectelor cicatrizarea s-a produs numai n 2 cazuri din 21. RTGh s-a artat eficace n tratamentul defectelor osoase verticale, al defectelor intraosoase cu 1, 2 sau 3 perei. n anul 1988 investigaii asemntoare a ntreprins W. Becker i coaut. Experienele au constatat micorarea profunzimii pungilor la sondare cu 6,4 mm, mrirea zonei aderenei cu 4,5 mm i reducerea profunzimii defectului intraosos cu 3 perei cu 3,7 mm. Rezultatele clinice obinute n urma aplicrii PTFEtilenei se consider standard de aur n comparaie cu alte materiale de blocare .

26

Materialele neresorbabile sunt biocompatibile i nu deregleaz esuturile parodontale, sunt inerte, dar au i dezavantaje. Peste 4-6 sptmni, este necesar reoperarea pentru nlturarea lor, fiind posibil reinfectarea locului unde acestea au fost amplasate. Barajele resorbabile. Utilizarea barajelor resorbabile au dat posibilitatea de a evita reoperarea pacienilor cu scopul de a nltura membranele; astfel a fost prevenit o traumatizare suplimentar. Membranele resorbabile trebuie s corespund acelorai exigene ca i cele neresorbabile, dar totodat ele trebuie s se pstreze un timp ndelungat pn la regenerarea esuturilor noi. Resorbia barajelor in vivo este determinat de civa factori; reacia esuturilor limitrofe, compoziia chimic, masa molecular, caracteristicile fizice i de suprafa, grosimea, porozitatea i locul implantrii materialului n esuturi. Bioresorbia materialului aproape n toate cazurile este corelat cu o reacie inflamatoare din partea esuturilor adiacente, ns aceast reacie trebuie s fie minim, reversibil i s nu influeneze procesul de regenerare. n calitate de baraj se utilizeaz colagenul, polimerii acizilor gliceric sau lactic, sau copolimerii lor. Materialele pot fi sub form de membrane, pulbere, granule. S. Pitaru i coaut. (1988) au studiat barajul din colagen la cini. n primul lot experimental membrana se introducea ntre suprafaa rdcinii i lambou. Peste 10 zile nu s -a depistat migrarea epiteliului n zona apical, iar membrana concretea cu esutul conjunctiv. n al doilea lot experimental s -a observat regenerarea parial a esutului periapical n zona defectului. Utilizarea membranelor de colagen la om este asociat cu apariia conflictului antigen. Implantarea col agenului heterogen duce la dezvoltarea reaciei imune de rspuns. Prima barier resorbabil n RTGh, aprobat de Federaia Dentitilor Americani, a fost matricea pluristratificat combinat, care era constituit din polimerii acidului lactic plastif icat cu un ester al acidului citric (GUIDOR). Matricea blocheaz infiltrarea epiteliului n esuturile subiacente. Inofensivitatea i eficacitatea acestui baraj a fost demonstrat n premier n 1992 de J. Gottlow i coaut. Membranele resorbabile au fost utilizate pentru nchiderea defectelor interproximale la maimue. Dup aplicarea membranelor, uneori se observa o inflamaie uoar, pe cnd histologic nu se determina infiltraia inflamatoare. Formarea de cement nou cu fibrile ale periodoniului atingeau limita coronar deja peste o lun, iar peste 3 luni avea loc proliferarea esutului osos. Membrana de barare se resoarbe totalmente peste 6 luni. Aceste materiale s-au studiat n tratamentul defectelor de
27

furcaie de clasa II i n defectele intraosoase la om. Peste 6 luni n 7 cazuri din 12 defectele de furcaie s-au cicatrizat complet, cu mrirea jonciunii cu 3,2 mm, iar n defectele intraosoase acest indice alctuia 4,9 mm. Membranele bioresorbabile sunt convenabile n utilizare, corespund tuturor exigenelor i au perspectiv de aplicare; ele conin componentul principal al esutului parodontal colagenul de tipul I al bovinelor, care are capaciti hemostatice i faciliteaz migrarea, proliferarea i orientarea celulelor desmodontale. Dintre ele am meniona Avitene, Periogen, Colla-Tec, Collistar, . . Membranele biodegradabile se resorb timp de 4-6 sptmni, iar dispariia definitiv are loc n 2-3 luni. La membranele biodegradabile se atribuie Vycril sau Polyglactin 910, Resolut, Atrisorb s.a. Resorbia membranelor biodegradabile se realizeaz prin hidroliz i provoac o reacie inflamatoare nensemnat. Unul dintre aceste materiale, aprobat de FDA, este confecionat din polimerii acidului lactic i ai acidului glicolic i formeaz o matrice unistratificat RESOLUT. R. G. Caffesse i coaut. (1994) primii au fcut comparaie ntre RESOLUT i PTFEtilen n defectele de furcaie la cini. Ambele materiale au fost la fel de eficiente i nu provocau efecte adverse. Pentru a evalua inofensivitatea i eficacitatea acestor materiale de obstacolare, C. R. Quinones i coaut. (1995) le -au testat pe maimue. n jurul incisivilor mandibulari au fost create defecte. n partea apical a defectului se efectua chiuretajul, care era urmat de umplerea lui cu membrane bioresorbabile. Peste 5 luni studiul histologic a constatat sporirea jonciunii esutului fibros, a cementului i a osului, iar membranele s-au resorbit complet, fr a provoca reacii adverse. n RTGh succesul de ultima or este ATRISORBUL. El este confecionat din polimerul acidului lactic sub form de soluie, care se solidific la contactul cu apa sau cu alte soluii apoase. Acest material semidur capat uor forma i configuraia necesar n afara cavitii bucale, dup aceea se instaleaz n zona defectului i se indureaz definitiv in situ. Barajul nu se fixeaz cu suturi, deoarece el ader la structurile subiacente. Rezultatele aplicrii ATRISORBULUI au demonstrat c n 60-100% cazuri n regiunea defectului furcaiei i denudrii rdcinilor se forma esut osos nou. Cercetrile histologice efectuate peste 9-12 luni au relevat prezena unor noi cantiti de cement, jonciune din esut conjunctiv i esut osos.

28

Sticla bioactiv. Materialul se aplic n medicin din anul 1984. El a dat efecte pozitive n chirurgia ortopedic, ORL. Mai mult de 10 ani sticla bioactiv se utilizeaz n stomatologie pentru umplerea alveolelor dentare. n ultimii ani ea se folosete ca material aloplastic n plastia osoas. n componena sa sunt incluse: dioxid de siliciu 45%, oxid de calciu 24,5%, oxid de natriu 24,5%, pentoxid de fosfor 6%. Mrimea particulelor sticlei bioactive este de 90 -710 nm. Sticla are mai multe caliti pozitive, care lipsesc la alte materiale. De exemplu, capacitatea de a rmne pe loc chiar n timpul lucrului cu aspiratorul de saliv alturi cu materialul; are efect hemostatic, capacitate de a se infiltra n esutul osos fr o incapsulare fibroas, care adesea se observ la alte materiale sintetice. Sticla bioactiv este uor de aplicat i poate fi indicat n tratamentul defectelor periodoniului, dup chistectomie, pentru restabilirea crestei apofizei alveolare, n tratamentul defectelor osoase care nconjoar implantul. Mai frecvent sticla bioactiv se utilizeaz cu alograftul osului demineralizat i leofilizat. T. Popescu-Negreanu a produs un material bioactiv PAW 1, compus din microcristale aciculare de fluorohidroxiapatit (Ca10 (PO4)6 (OH)xF2-x i B-wollastonit (CaO, SiO2), nglobate ntr-o mas vitroas. Pe baza studiilor efectuate, autorul consider c la introducerea biomaterialului ntr-o leziune osoas spaiile dintre granule i pori sunt invadate de esut fibros puternic vascularizat, precursor al neoformrii osoase. Are loc o reacie de schimb ionic la interfaa osgranule: ionii de Ca2+ i P5 difuzeaz din material n plasm, formnd la suprafaa granulelor un strat de gel SiOH. Microcristalele de hidroxiapatit se cupleaz cu fibrele de colagen ale esutului fibros i chiar cu cele din esuturile moi. Biovitroceramica PAW 1 are capacitatea de a reaciona cu esuturile vii, dup o anumit perioad transformndu-se n os. Este foarte bine tolerat de pacieni i uor aplicabil. Se utilizeaz vitroceramicile fosfatice i silicofosfatice. PAW 1 a fost testat in vitro pe baza urmtoarelor determinri: cito-toxicitatea pe culturi de celule diploide umane; testarea efectului asupra materialului genetic pe aceleai celule; testul de hemoliz; potenialul inflamator pe polimorfonucleare; cedarea elementelor toxice n prezena unei soluii similare plasmei sangvine. Testele de biocompatibilitate au demonstrat c biovitroceramica apatit sintetizat nu este toxic. Evoluia postoperatorie a confirmat o tolerabilitate i bioactivitate bun a PAW 1, iar autorii afirm c rezultatele au fost pozitive atunci cnd biovitroceramica a fost acoperit de esuturi bine vascularizate. n biovitroceramic se pot include antibiotice, deoarece ea nu degajeaz cldur.
29

Aadar, rezultatele obinute au dat posibilitatea de a afirma c biovitroceramica PAW 1 poate fi utilizat cu succes ca substituent de gref osoas. Cercetrile interfeei osimplant din PAW 1 la microscopul electronic n primele 2-4 sptmni de la implantare au remarcat o invadare a spaiului dintre implant i os i a spaiilor intergranulare cu un esut fibros puternic vascularizat. Anterior savanii japonezi au demonstrat c n prima sptmn dup implantarea unei biovitroceramici apatito-wollastonice fibroblastele din periost i din esuturile limitrofe prolifereaz peste suprafaa osoas secionat ca i mugurii vasculari care invadeaz calusul fibros iniial. n a doua sptmn spaiul dintre os i implant este nlocuit de collagen. Eliberarea spontan a Ca i P este relativ abundent n primele 24-72 de ore. Pe suprafaa implantului se formeaz un gel, care este mai activ pentru biovitroceramic dect pentru hidroxiapatit. Emdogainul. La mijlocul anilor 80 ai sec. XX au fost descoperite complexe naturale ale proteinelor matriceale ale adamantinei (amelogenina) i totodat a fost determinat rolul lor n dezvoltarea esuturilor de suport al dinilor. Proteinele asociate cu adamantina con tribuie la formarea cementului celular pe rdcina dintelui n cretere i asigur o baz pentru dezvoltarea esuturilor necesare n jonciunea funcional. A fost elaborat un preparat numit emdogain. Preparatul a fost testat la tratamentul dehiscenelor la maimue, apoi la pacieni cu defecte parodontale. S-a constatat c emdogainul se resoarbe n timpul cicatrizrii plgii, lsnd un strat de proteine matriciale, care duc la formarea celulelor productoare de cement din esuturile limitrofe. Dup cum menioneaz i ali autori, proteinele amelogene sunt mediatori pentru regenerarea esuturilor parodontale, totodat emdogainul favorizeaz colonizarea celulelor formatoare de cement. Dup formarea cementului are loc dezvoltarea periodoniului i a osul ui alveolar. Sulfatul de calciu i alograftul osului leofilizat . Sulfatul de calciu (ghipsul, emplastrul parisian) se utilizeaz deja circa 30 de ani n chirurgia oro -maxilo-facial. n anul 1958 L. Peltier i D. Oru au adugat sulfat de calciu n transplantul osos alogen i cel autogen la cini. Rezultatele au demonstrat c consolidarea i cicatrizarea sectoarelor supuse tratamentului se petreceau foarte rapid. n 1959 L. F. Peltier a utilizat acest material pentru nlturarea unor defecte osoase la om. El a menionat c ghipsul a contribuit la cicatrizarea rapid a defectelor tuturor pacienilor (5 la numr), n acelai timp cantitatea de calciu n snge nu s-a majorat. n experiene pe cini n defectele modelate n apofiza alveolar se imp lanta sulfatul de calciu. Datele radiologice au artat c resorbia materialului se ncepea la a 5 -a zi i se prelungea
30

pn n sptmna a doua. n a 3-a sptmn structura omogen a osului se transforma n structur trabecular, iar zona defectului abia se evidenia pe clieul radiologic. Histologic, sectoarele unde s -a aplicat ghipsul se organizau mai intens. Astfel a fost recomandat utilizarea practic a sulfatului de calciu, deoarece el este stabil, accesibil, uor de sterilizat, iar durata resorbie i lui este aproximativ aceeai ca i la regenerarea osului. Sulfatul de calciu s-a implantat n defectele parodontale la om. S-a constatat c materialul este uor acceptat de esuturi, dar nu duce la osteogenez. n prezent clinicienii consider sulfatul de calciu un material care are potenial regenerator, dar el nu este osteoinductor. Pe baza unei experiene pe cini, J. W. Frame (1987) a concluzionat c ghipsul poate fi util n calitate de material de umplere n defectele osoase i c el previne migrarea particulelor hidroxiapatitei. Proteinele morfogenetice. Primele relatri despre proteinele morfogenetice ale matricei osului au aprut n anii 60. M. R. Urist i coaut. (1965) au naintat ipoteza despre existena unei substane n matricea organic a osului, care transform celulele mezenchimale nedifereniate n osteoblaste, iar la supranclzire prin sterilizare are loc denaturarea acestor substane. M. R. Urist i coaut. (1970) au constatat c de aceste caliti nu dispune osul minerali zat. Efectul osteoinductiv sporete atunci cnd alograftul osos a fost treptat demineralizat cu 0,6 N acid clorhidric la temperaturi joase. Cercetrile ulterioare) au stabilit c substana pe care ei au numit -o protein osteomorfogenetic era intim asociat cu colagenul osului i influena osteoinducia. Autorii au relatat c materialul poate fi extras prin metode speciale de demineralizare. Ulterior clinicienii au raportat c au obinut rezultate excelente la utilizarea proteinei osteomorfogenetice (POM) n nlturarea defectelor parodontale. G. M. Bowers i coaut. (1985) au adus dovezi histologice c rezultatele bune au fost obinute anume n urma aplicrii POM, i nu a chiuretajului parodontal. Utilizarea membranei PTFEtilen n combinaie cu POM a re ca efect o regenerare mai bun dect aplicarea doar a membranelor PTFEtilen. M. L. Urist i coaut. (1987) au putut separa printr -o metod special proteina morfogenetic osoas de colagen. Evident, a fost necesar un ingredient pentru mbuntirea calitilor POM. Sporirea efectului osteoinductor al POM s-a obinut la implantarea ei n combinaie cu ghipsul n muchiul femurului la oareci.

31

n concluzie se poate meniona c interveniile chirurgicale obinuite la parodoniu, efectuate cu scopul de regenerare a esuturilor, nu sunt suficiente; sunt necesare diferite biomateriale care ar stimula acest proces. Hidroxiapatita. n ultimii ani se aplic pe larg n practica stomatologic preparatele cu hidroxiapatit sub diferit form: pulbere, ceramic, granule, forme colloidale. n literatura de domeniu exist opinii conform crora hidroxiapatitele au o mare perspectiv. n acelai timp, ali autori sunt sceptici n ce privete perspectiva acestor materiale. Hidroxiapatita este o substan mineral, acceptat n practic n anul 1970. n prezent n clinic, cu scop de tratament, se folosete hidroxiapatita sintetic. Ceramica hidroxiapatit nu formeaz structuri osoase noi, ns este un umplutor biocompatibil neresorbabil, care susine matricea de esut conjunctiv un timp ndelungat. Dup cum s-a constatat, ceramica hidroxiapatit poroas are capaciti osteoinductoare, stimuleaz creterea i diferenierea celulelor-predecesori ai esutului osos. Materialul stimuleaz activitatea mitotic a fibroblatilor i a celulelor osteogene i totodat creeaz condiii de deponare pentru un termen ndelungat a ionilor de calciu i fosfor, necesari pentru matricea inductiv a osului i compactizarea substanei fundamentale a osului. Hidroxiapatita resorbabil este mai avantajoas, deoarece la efectul osteoconductor se poate aduga aciunea osteoinductoare a POM, care sunt absorbite de particulele hidroxiapatitei i n unele cazuri pot deveni focare punctiforme de osteogenez n defectele osoase. Se presupune c anume datorit capacitii de sorbie, n urma mririi suprafeei particulelor, hidroxiapatita poroas are un efect sporit comparativ cu cea dens, fapt care a fost confirmat clinic. A fost sugerat ideea c hidroxiapatita resorbabil activizeaz osteoblastele, iar ulterior o parte din ea particip din nou la formarea esutului osos. Utilizarea hidroxiapatitei n complex cu biopolimerii (polietilen, polipropilen, polisterol, teflon, colageni, consurid) sporete efectul clinic, probabil, datorit optimizrii suplimentare a procesului de reparaie osteogen la etapa de sintez a fibrelor de colagen. Compozitul polietilen-hidroxiapatit se folosete pentru restituirea osului n chirurgia stomatologic. Se presupune c colagenul provoac o reacie fibrovascular la recipient, contribuind la o fixare mai precoce a hidroxiapatitei dect n cazul utilizrii numai a ceramic ii.
32

O perspectiv favorabil are hidroxiapatita poroas sub form de granule i compoziiile de hidroxiapatit cu colagen. Se consider c n tratamentul chirurgical al parodontitelor e de preferat umplerea pungilor osoase cu hidroxiapatit poroas granulat sau cu un amestec de pulbere liofilizat i consurid. Granulele de hidroxiapatit nu se recomand s fie condensate, deoarece va fi mpedicat ptrunderea n ingredient a celulelor osoase de la periferie, iar granulele nu se vor mbiba cu snge. Pentru o reacie mai eficient, este necesar ca granulele sau alte forme ale hidroxiapatitei s se mbibe bine cu snge. . . (1996) recomand utilizarea n restabilirea pereilor vestibulari i orali ai alveolelor a unui amestec de hidroxiapatit cu colagen aa-numitul , care contribuie la pstrarea osului restant i la regenerarea lui. Rezultatele clinico-experimentale au constatat c cele mai eficiente remedii pentru restabilirea structurilor osoase ale organismului uman sunt ceramicile hidroxiapatite poroase. Materialele ceramice nu posed capaciti osteoinductoare, dar cele cu coninut de hidroxiapatit sunt osteoconductoare. Hidroxiapatita este uor suportat de esuturile limitrofe i se ncapsuleaz n esutul conjunctiv. Ea nu provoac reacii alergice i adverse. Calciul n hidroxiapatit este de afinitatea osului i de aceea implantatele, mai ales cele din ceramic poroas, se integreaz uor cu structura osului nou-format. Numeroase lucrri tiinifice sunt consacrate utilizrii hidroxiapatitei n nlturarea defectelor osoase ale esuturilor parodontale. Pentru umplerea pungilor osoase cercettorii au utilizat hidroxiapatita poroas. Ea stimuleaz osteogeneza i faciliteaz formarea jonciunii dento-gingivale. Profunzimea pungii osoase tratate cu hidroxiapatit se micoreaz cu 0,5 mm i 0,42 mm mai mult dect n aplicarea grefelor osoase, ns radiologic osul format n urma aciunii hidroxiapatitei era mai puin structurat. n acelai timp, n aplic area grefelor osoase osul regenerat era bine structurat. Aplicarea hidroxiapatitei pure este legat de unele dificulti particulele nu au capacitatea de adeziune la esuturile limitrofe i migreaz. n scopul lichidrii acestui neajuns au fost pr opuse mai multe modaliti de fixare a particulelor de hidroxiapatit: cu autogref i ghips, cu ghips, clei din fibrin sau colagen, granule de hidroxiapatit cu o membran din gelatin.

33

Pe scar larg se utilizeaz hidroxiapatita cu colagen. n tratamentul chirurgical al parodontitelor . . (1993) a folosit ca implantant hidroxiapatita cu colagen. Rezultatele obinute au demonstrat c n locul implantrii materialului se producea formarea osului nou cu remodelarea i maturizarea lui ntr-o perioad de la 3 la 8 luni. Aplicarea experimental i clinic de ctre mai muli autori a materialelor cu coninut de hidroxiapatit n combinaie cu diferite ingrediente a demonstrat c are loc formarea activ a osului nou i a jonciunii dento-parodontale. Analiza surselor bibliografice la tema dat denot c n prezent nu exist un material universal pentru reconstrucia esuturilor parodontale afectate n condiii specifice, n care cmpul operator este infectat, n care este dereglat microcirculaia sangvin i sczut activitatea osteogen a lojei osoase. Materialele pentru optimizarea procesului osteogenetic, elaborate pn n prezent, n diferit msur satisfac cerinele medicilor-parodontologi, avnd att avantaje, ct i unele dezavantaje. Materialul alogen este folosit mai restrns din considerene etice, dificulti n prepararea, sterilizarea i pstrarea lui. El are capaciti antigene i totodat eficien sczut n condiiile unei plgi infectate precum este cea parodontal. Elaborate pe cale sintetic, hidroxiapatita, fosfatul tricalcic, biovitroceramicile sunt lipsite de neajunsuri, ns potenialul lor osteogen, de asemenea, este limitat; ele au un mecanism de baz osteoconductiv. De perspectiv sunt biovitroceramicile i biopolimerii, care asigur la diferite etape o aciune complex de stimulare a osteogenezei reparative i regenerarea esuturilor moi ale parodoniului. Apariia i evoluia metodelor de RTGh au fcut posibil stimularea regenerrii periodoniului, cementului i osului alveolar, lezate n urma afeciunilor parodontale, n acest scop fiind utilizate multiple materiale de barier resorbabile i neresorbabile. Astfel, putem concluziona c RTGh are o perspectiv de lung durat n chirugia parodontal cu pronostic benefic.

34

Concluzii
Cercetarea medical continu s exploreze noi frontiere tiinifice pentru diagnosticarea, tratarea, vindecarea i prevenirea bolilor la nivel moleculr/genetic. Au fost nregistrate progrese importante n utilizarea clinic a implanturilor i altor dispozitive medicale. n prezent, accentul este pus pe proiectarea schelelor polimerice datorit faptului c acest material obine rspunsuri specifice dorite n jurul celulelor i esuturilor. Nevoia de soluii alternative pentru a satisface cererea detranspalnt de organe i pri de esut va continua s conduc progresele din ingineria tisular. Schelele polimerice dein tot potenialul pentru a oferi o nou modalitate de a controla mediul chimic al sistemului biologic. n ciuda mbuntirilor recente asupra proprietilor mecanice, porozitii i bioactivitatii schelelor, sunt necesare cercetri viitoare pentru a putea depi multe limitri n procesul de fabricaie. Provocrile globale n proiectarea i fabricarea schelelor de esut ofer posibilitatetea cercetrii pentru ambalarea polimerilor, topografia de suprafa, nano -/macrostructuri, biocompatibilitate, biodegradabilitate, proprieti mecanice, funcia de direcionare a celulelor i inducerea formrii de esut natural.

35

Bibliografie
1. R. Langer and J. P. Vacanti, Tissue engineering, Science, vol. 260, no. 5110, pp. 2. 3.
920926, 1993. R. Langer and D. A. Tirrell, Designing materials for biology and medicine, Nature, vol. 428, no. 6982, pp. 487492, 2004. I. V. Yannas and J. F. Burke, Design of an artificial skin. I. Basic design principles, Journal of Biomedical Materials Research, vol. 14, no. 1, pp. 6581, 1980. I. V. Yannas, J. F. Burke, D. P. Orgill, and E. M. Skrabut, Regeneration of skin following closure of deep wounds with a biodegradable template, Transactions of the Society For Biomaterials, vol. 5, pp. 2429, 1982. I. V. Yannas, D. P. Orgill, J. Silver, T. V. Norregaard, N. T. Zervas, and W. C. Schoene, Polymeric template facilitates regeneration of sciatic nerves across 15-mm gap, Transactions of the Society For Biomaterials, vol. 8, p. 146, 1985. Science Polymer Edition, vol. 6, pp. 775795, 1994.

4.

5.

6. E. Piskin, Biodegradable polymers as biomaterials, Journal of Biomaterials 7. B. D. Boyan, C. H. Lohmann, J. Romero, and Z. Schwartz, Bone and cartilage
tissue engineering, Clinics in Plastic Surgery, vol. 26, no. 4, pp. 629645, 1999. 8. J. Mayer, E. Karamuk, T. Akaike, and E. Wintermantel, Matrices for tissue engineering-scaffold structure for a bioartificial liver support system, Journal of Controlled Release, vol. 64, no. 13, pp. 8190, 2000. 9. L. S. Nair and C. T. Laurencin, Biodegradable polymers as biomaterials, Progress in Polymer Science, vol. 32, no. 8-9, pp. 762798, 2007. 10. P. Gunatillake, R. Mayadunne, and R. Adhikari, Recent developments in biodegradable synthetic polymers, Biotechnology Annual Review, vol. 12, pp. 301 347, 2006.

11. A. G. Mikos, A. J. Thorsen, L. A. Czerwonka et al., Preparation and

characterization of poly(l-lactic acid) foams, Polymer, vol. 35, no. 5, pp. 1068 1077, 1994.

12. J. M. Karp, M. S. Shoichet, and J. E. Davies, Bone formation on two-dimensional

poly(DL-lactide-co-glycolide) (PLGA) films and three-dimensional PLGA tissue engineering scaffolds in vitro, Journal of Biomedical Materials Research A, vol. 64, no. 2, pp. 388396, 2003.

13. C. T. Laurencin, M. A. Attawia, H. E. Elgendy, and K. M. Herbert, Tissue

engineered bone-regeneration using degradable polymers: the formation of mineralized matrices, Bone, vol. 19, no. 1, 1996.
36

14. J. E. Devin, M. A. Attawia, and C. T. Laurencin, Three-dimensional degradable

porous polymer-ceramic matrices for use in bone repair, Journal of Biomaterials Science, vol. 7, no. 8, pp. 661669, 1996.

15. M. Borden, S. F. El-Amin, M. Attawia, and C. T. Laurencin, Structural and human

cellular assessment of a novel microsphere-based tissue engineered scaffold for bone repair, Biomaterials, vol. 24, no. 4, pp. 597609, 2003.

16. P. B. Malafaya, T. C. Santos, M. van Griensven, and R. L. Reis, Morphology,

mechanical characterization and in vivo neo-vascularization of chitosan particle aggregated scaffolds architectures, Biomaterials, vol. 29, no. 29, pp. 39143926, 2008.

17. Y. Ohya, H. Matsunami, E. Yamabe, and T. Ouchi, Cell attachment and growth on
films prepared from poly(depsipeptide-co-lactide) having various functional groups, Journal of Biomedical Materials Research A, vol. 65, no. 1, pp. 7988, 2003.

18. J. Guan, K. L. Fujimoto, M. S. Sacks, and W. R. Wagner, Preparation and

characterization of highly porous, biodegradable polyurethane scaffolds for soft tissue applications, Biomaterials, vol. 26, no. 18, pp. 39613971, 2005.

19. D. J. Beebe, J. S. Moore, J. M. Bauer et al., Functional hydrogel structures for

autonomous flow control inside microfluidic channels, Nature, vol. 404, no. 6778, pp. 588590, 2000.

20. N. A. Peppas and A. R. Khare, Preparation, structure and diffusional behavior of

hydrogels in controlled release, Advanced Drug Delivery Reviews, vol. 11, no. 1-2, pp. 135, 1993.

21. J. Doshi and D. H. Reneker, Electrospinning process and applications of

electrospun fibers,Journal of Electrostatics, vol. 35, no. 2-3, pp. 151160, 1995.

22. B. Saad, T. D. Hirt, M. Welti, G. K. Uhlschmid, P. Neuenschwander, and U. W.

Suter, Development of degradable polyesterurethanes for medical applications: in vitro and in vivo evaluations, Journal of Biomedical Materials Research, vol. 36, no. 1, pp. 6574, 1997.

23. Hutmacher D.W., Scaffolds n tissue engineering bone and cartilage, Biomaterials
(2000) 24. Kretlow J.D., Mikos A.G., From material to tissue: Biomaterial development, scaffold fabrication, and tissue engineering, AIChE Journal (2008), 54(12): 30483067. 25. Moroni L., De Wijn J.R., Van Blitterswijk C.A., Integrating novel technologies to fabricate smart scaffolds,Journal of Biomaterials Science-Polymer Edition (2008), 19(5): 543-572. 26. http://theses.insa-lyon.fr/publication/2011ISAL0017/these.pdf
37

27. http://www.tissue-engineering.net/index.php?seite=whatiste 28. http://www.scribd.com/doc/96841347/Regenerarea-tisulara-ghidata

38