ADN

Transcriere

Pre ARNm
Pre ARN m
Pre ARNt
Maturare

ARN r
ARN t

ARNm
Deplasare n citoplasm

ARNm

ARNr ARNt
ribozomi
Translaie / Sinteza proteinelor

Protein
Maturare
mpachetare / localizare

Protein activ
funcional
Degradare

Aminoacizi

Caracterizarea ARN polimerazelor nucleare

Tipul polimerazei

Localizare
celular

Produi finali

ARN polimeraza I

nucleol

ARNr 28S, 18S i 5,8S

ARN polimeraza II

nucleoplasm

ARNm, U1, U2, U4, U5

Clasa1

nucleoplasm

ARNr 5S

Clasa 2

nucleoplasm

ARNt

Clasa 3

nucleoplasm

U3, U6, alte molecule de

ARN de dimensiuni mici

ARN polimeraza III

SINTEZA MOLECULELOR DE ARN

ARN polimeraza I
ARN ribozomal

ARN polimeraza III

ARN transport

Bucla 1 cuprinde situsul pentru fixarea temporar la ribozom, n timpul sintezei proteice
Bucla 4 reprezint situsul de recunoatere pentru enzimele
~ ARN sintetaze, care sunt implicate n formarea complexului aminoacil~ ARNt
Bucla 3 este numit i bucla anticodonului, la nivelul su fiind localizat tripletul care
realizeaz recunoaterea specific a codonului din ARNm, cu care poate forma legturi de
hidrogen n timpul fixrii ARNt pe complexul ARNm ribozom.

ARN polimeraza II
ARN mesager

O molecul tipic de ARNm citosolic matur conine cinci regiuni distincte:

un capt 5 specific - m7Gppp;
regiune netranscriptibil 5 (UTR);
regiunea codificatoare: codonul de iniiere a translaiei AUG, secvena de nucleotide (codoni) pentru
sinteza polipeptidului i o secven stop, reprezentat de unul dintre codonii stop- UAA, UGA sau UAG
regiune netranscriptibil 3 (UTR);
un capt 3 poly A

Modificarea capatului 5 la precursorii ARNm

Acest capt m7GpppAp , are un rol important n legarea ARNm de ribosom i n iniierea sintezei
lanului polipeptidic.

Modificarea capatului 3 la precursorii ARNm

Dup transcrierea complet, la captul 3 al moleculei de ARNm se adaug 100200 de resturi de acid adenilic (poly A).
Complex enzimatic - alctuit dintr-o endonucleaz i o polimeraz poly A
Recunoaste secventa semnal 5 AAUAAA - 3 din apropierea captului 3 al
transcriptului primar, secioneaz pre-ARNm n aval de acest semnal i apoi
adaug 20-250 de resturi adenilate
Captul poly A ajut la exportul ARNm din nucleu, stabilizeaz ARNm mpotriva
degradrilor exonucleolitice i pare s fie implicat n iniierea translaiei.

Eliminarea intronilor ARN splicing

1977

SINTEZA PROTEINELOR
Compui implicai n sinteza proteinelor
ARNm cod genetic
ARNt- molecul adaptor
Ribosomii, situsul de sintez a proteinelor

Reprezentarea grafic a unui ribosom,

cu situsurile specifice de legare

Reacia de activare a aminoacizilor

MATURAREA, MPACHETAREA I REGLAREA PROTEINELOR DUP SINTEZ

1. Maturarea lanurilor polipeptidice

Clivarea lanului polipeptidic sau proteoliza
Glicozilarea - modificarea proteinelor prin adiia oligozaharidelor,
(proces specific celulelor eucariote )
Ataarea lipidelor la proteinele asociate pe faa citosolic a
membranei plasmatice a celulelor eucariote

2. Plierea, mpachetarea lanurilor polipeptidice

Informaia necesar pentru ca o protein s adopte conformaia
tridimensional corect este furnizat de secvena sa de aminoacizi
n plus, exist macromolecule specializate, care faciliteaz plierea corect a
lanurilor polipeptidice. Acestea pot fi chaperone (nsoitori moleculari) sau
enzime.

2.1. Chaperonele, sau nsoitorii moleculari

au rolul de a facilita plierea

corect a altor proteine

chaperonele stabilizeaz lanurile polipeptidice deja formate n timpul transportului
lor spre organite celulare.
stabilizeaz lanurile polipeptidice n formare, a cror translaie se desfoar nc
la nivelul ribosomilor.
Legarea chaperonelor menine poriunea aminoterminal a lanului polipeptidic ntr-o
conformaie nepliat, pn cnd restul lanului polipeptidic este sintetizat, iar
proteina se poate plia corect.
Totodat chaperonele menin proteinele nepliate, pentru a media transportul lor prin
canale transmembranare specifice.

2.2. Enzimele implicate n mpachetarea corect a lanurilor

polipeptidice catalizeaz ruperea i refacerea unor legturi specifice.

Protein disulfid izomeraza catalizeaz ruperea i refacerea legturilor

disulfurice ntre resturile de cistein, permind plierea corect
Legturile disulfurice sunt specifice proteinelor de secreie i pentru unele
proteine membranare. Formarea legturilor disulfurice n citosol nu este posibil
datorit agenilor reductori care menin resturile de cistein n forma lor redus.
Legturile S-S se formeaz n reticulul endoplasmatic deoarece aici se menine
un mediu oxidant.

Aciunea protein disulfid-izomerazei (PDI) n procesul de rearanjare a

legturilor disulfurice

TRANSPORTUL I PRELUCRAREA PROTEINELOR DUP

SINTEZ
domeniu de localizare specific: peptide scurte
- localizare: de obicei localizate la captul aminoterminal al proteinei,
alteori pot s fie localizate la captul carboxil, sau chiar n mijlocul
lanului polipeptidic.
Domeniul de localizare este esenial pentru transportul proteinei, dar de
obicei nu face parte din forma activ a proteinei. De aceea, dup atingerea
destinaiei aceste domenii sunt clivate de proteaze specifice dnd natere
proteinei active, mature.
n cazul proteinelor care rmn n citosol (ex. actina, tubulina) nu sunt
prezente domenii de localizare dar exist domenii informaionale care permit
monomerilor s dea natere unei structuri organizate.

Lan polipeptidic stabilizat cu chaperone, n vederea traversrii membranei

Sortarea proteinelor n funcie de destinaie

RIBOZOMI LIBERI
TRANSPORT POST TRANSLATIONAL

RIBOZOMI ATASATI LA RE
TRANSPORT COTRANSLATIONAL

TRANSPORTUL POST-TRANSLAIONAL SAU CALEA URMAT DE

PROTEINELE SINTETIZATE PE RIBOSOMII LIBERI

Ribosomii care nu se ataeaz la membrana RE sunt denumii ribosomi liberi,

dei uneori ei sunt asociai cu citoscheletul. Cu ajutorul acestor ribosomi sunt
sintetizate att proteine solubile ct i proteine membranare.

Proteinele localizate n citoplasm

Proteinele localizate n plastide
Proteinele localizate n mitocondrii
Proteinele localizate n peroxizomi
Proteinele localizate n nucleu

Proteinele
localizate n
plastide
Secventa semnal
peptida de tranzit
localizat la captul
amino al proteinei
alctuit din 40-50 de
aminoacizi,
rol att n orientare ct i
n procesul de
translocare prin nveliul
cloroplastului

Proteinele localizate n mitocondrii

Secventa semnal presecventa

Presecvenele au structuri de helixuri cu caracter

amfipatic, deoarece posed aminoacizi hidrofobi pe una
dintre fee i resturi de aminoacizi ncrcai pozitiv pe
cea de-a doua latur

Proteinele localizate n peroxizomi

Cel puin dou domenii de localizare PTS1 i PTS 2 sunt implicate n importul
proteinelor n matrixul mitocondrial.
Secvena semnal PTS1 este foarte scurt (tripeptid) i spre deosebire de alte
domenii de localizare se gsete la captul carboxiterminal al lanului polipeptidic i
nu este ndeprtat dup translocarea n peroxizomi.
Secvena semnal PTS2 se afl la captul aminoterminal al lanului polipeptidic,
este ndeprtat dup translocarea proteinei n matrixul peroxizomului i
marcheaz proteinele prezente n matrix.

Proteinele localizate n nucleu

Moleculele mici (sub 40 KDa) difuzeaz activ prin cele opt canale deschise, cu diametru
de 9 nm, care sunt delimitate de ansamblul spie-inele din structura porului nuclear.
Macromoleculele (proteine, ADN) trec prin canalul central printr-un proces activ, n care
proteinele specifice i ARN sunt recunoscute i transportate selectiv ntr-o singur
direcie

CALEA TRANSPORTULUI CO-TRANSLAIONAL SAU CALEA URMAT

PROTEINELE SINTETIZATE PE RIBOSOMII ATAAI LA MEMBRANA
RETICULULUI ENDOPLASMATIC
Proteinele care urmeaz aceast cale sunt orientate spre reticulul endoplasmatic nc din timpul
sintezei proteice, proces denumit transport cotranslaional. Dup ce au fost sintetizate, proteinele
sunt modificate, asamblate, sortate i orientate spre diferite destinaii i anume:
perete celular, plasmalem, vacuole i tonoplast, sau sunt eliminate din celul.
Proteinele care urmeaz calea secretorie pot fi mprite la rndul lor n dou categorii:
Proteinele care sunt orientate spre vacuole sau spre exteriorul celulelor (perete celular i
proteine de secreie) traverseaz membrana total;
Proteinele integrale, care vor intra n alctuirea plasmalemei, tonoplastului, complexului
Golgi, n membrana RE i nuclear rmn ncastrate n membrana RE.

Mecanismul care asigur ataarea ribosomilor la reticulul

endoplasmatic n cazul proteinelor orientate spre vacuole sau spre
exteriorul celulelor
Lanul polipeptidic nou sintetizat posed la captul aminoterminal un domeniu de
localizare care poart numele de peptid semnal cu o lungime de 16-30 de
aminoacizi, care orienteaz lanul polipeptidic care se formeaz spre membrana
RE.
Peptida semnal este recunoscuta de o particula de
recunoastere a semnalului - SRP

Procesul de recunoatere ntre peptida semnal i particula de recunoatere a

semnalului are loc atunci cnd polipeptidul nou sintetizat are o lungime de aproximativ
70 aminoacizi cu aproximativ 40 de aminoacizi ieii din ribosom. Legarea particulei
de recunoatere a semnalului (SRP) la lanul polipeptidic n formare blocheaz
sinteza i evit mpachetarea greit a polipeptidului deja sintetizat

Translocarea proteinelor n lumenul

RE implic:
particula de recunoatere a
semnalului (SRP)
receptorul acestei particule i
o protein canal (complex de
translocare) din membrana RE.

Mecanismul de transport cotranslaional al proteinelor membranare integrale

Tipul I de proteine de membran
Proteine care au un singur domeniu transmembranar (domeniul care rmne localizat n
citosol se afl la captul carboxil)
n acest caz peptida semnal
localizat la captul amino, care ptrunde n
lumenul RE, este clivat imediat dup ce
proteina ncepe s traverseze membrana RE.
Translocarea este oprit nainte de
finalizarea translaiei, n momentul apariiei
unei secvene de stopare a transferului
(secven hidrofobic)
Dimensiunile domeniului
polipeptideic care rmne n citosol depinde
de localizarea domeniului transmembranar n
interiorul proteinei.

Tipul II de proteine de membran

Proteine care au un singur domeniu

transmembranar, iar domeniul care rmne
localizat n citosol se afl localizat la captul
amino al lanului polipeptidic.

Nu posed o peptid semnal care s fie eliminat dup ptrunderea n lumenul RE.
Se pare c domeniul transmembranar de natur hidrofobic acioneaz ca o secven semnal
i direcioneaz integrarea proteinei n membrana RE lsnd o mare poriune a regiunii
aminoterminale n citosol.
Segmentul carboxi - terminal al proteinei se gsete n lumenul RE.

EX: proteinele membranare ale Complexului Golgi

Tipul III de proteine de membran

Proteine care posed mai multe domenii transmembranare.
n structura acestor lanuri polipeptidice alterneaz regiuni
hidrofobe, care alctuiesc domeniile transmembranare cu
regiuni hidrofile care alctuiesc buclele de legtur. Acestea
din urm sunt poziionate fie n citosol, fie n lumenul RE.
n cazul acestor proteine primul domeniu transmembranar
acioneaz ca o peptid semnal iar cel de-al doilea
funcioneaz ca o secven de ancorare. Al treilea domeniu
acioneaz din nou ca o peptid semnal, al patrulea ca o
secven de ancorare, etc.
Dei att SRP ct i receptorii pentru SRP sunt necesari
pentru integrarea primului domeniu transmembranar ele nu
sunt necesare pentru urmtoarele domenii
transmembranare.

O dat ce aceste proteine sunt inserate n

membrana RE ele pot s fie reinute acolo
(rezidente RE) sau s fie ndreptate spre
alte destinaii.
Pn n prezent nu exist cunotine despre
domeniile care orienteaz proteinele spre
alte destinaii sau le menin n calea de
transport.

PRELUCRAREA PROTEINELOR N LUMENUL RETICULULUI ENDOPLASMATIC

Modificrile proteinelor care au loc n lumenul reticulului endolasmatic permit
proteinelor s se mpacheteze corect i s fie orientate spre compartimentul celular n
care i vor ndeplinifuncia.
Lumenul reticulului endoplasmatic conine un numr de enzime i chaperone
care asigur mpachetarea corect i care au posibilitatea s degradeze polipeptidele
sintetizate greit. Astfel exist certitudinea c numai proteinele corect mpachetate i
asamblate sunt transportate pe calea secretorie spre destinaia lor final.
Proteinele care se regsesc n lumenul RE (proteinele orientate spre vacuole,
perete celular i proteine de secreie) pot s sufere urmtoarele modificri:

Adoptarea conformaiei spaiale corecte a proteinelor care

are loc cu ajutorul proteinelor nsoitoare (chaperoane), prin
formarea legturilor disulfidice ntre gruprile SH ale resturilor
cisteinice sau oligomerizarea i ataarea unor glicani N-linkai .

Glicozilarea proteinelor

Fiecare protein sufer o parte dintre aceste modificri, dar pot s apar i altele,
dup ce proteina prsete RE. Proteinele care nu sunt corect mpachetate sau
asamblate pot s fie reinute n RE unde ele pot s fie distruse de proteaze.

Adoptarea conformaiei spaiale corecte a proteinelor

mpachetarea proteinelor
Procesul este mediat de o chaperon BiP Binding protein (70 kDa)
BiP se leag la:
proteina n formare
lanul polipeptidic parial mpachetat

Legare la segmente bogate n aminoacizi hidrofobici care nu

sunt expuse n mod normal la suprafaa unei proteine
mpachetate corect.
Este o enzim dependent de ATP (energia este furnizat de
hidroliza ATP-ului).

Rol:
previne interaciunile nespecifice ale acestor segmente, prevenind n
final mpachetarea incorect
Formarea legaturilor disulfurice
protein-disulfid-izomeraza (PDI), o enzim prezent n lumenul reticulului
endoplasmatic.
Formarea oligomerilor
Multe proteine nu sunt alctuite dintr-un singur lan polipeptidic ci sunt oligomeri cu
dou, trei, patru sau mai multe subuniti care iau natere n lumenul RE.
De exemplu proteinele de rezerv (vicilin i faseolin) acumulate n vacuolele de
stocare sunt trimeri cu dimensiuni de 45 kDa, formai n lumenul RE. Dac nu are loc
formarea trimerilor subunitile sunt degradate de ctre proteaze.

Glicozilarea proteinelor n reticulul endoplasmatic

Adiia covalent a zaharidelor la proteine este una dintre funciile majore ale
RE. Majoritatea proteinelor din lumenul RE sunt glicozilate nainte de a fi transportate la
complexul Golgi.
Reaciile de glicozilare sunt importante pentru c produc markeri, care asigur
transportul proteinelor prin diferite compartimente celulare, iar radicalii oligozaharidici
asigur sortarea proteinelor i direcionarea lor corect ctre alte organite celulare.

Glicozilarea impune parcurgerea in mai multe etape importante i anume:

Sinteza lipidei purttoare dolicol pirofosfat (dolicol -PP)

Asamblarea intermediarului oligozaharid lipid dolicol-PP-oligozaharid

Transferul oligozaharidului de la dolicol la enzima int

Enzima glicozil transferaz transfer

gruparea oligozaharidic ancorat pe dolicol
pirofosfat la un rest de asparagin prezent n
protina int.
Aceast reacie are loc pe faa lumenal a
membranei reticulului endoplasmatic i
necesit prezena secvenei de recunoatere
Asn-X-Ser/Thr. Un rest de asparagin, care
nu este urmat de serin sau treonin, fiind
separate de orice alt aminoacid nu va fi
recunoscut de transferaz.

Deci, oligozaharidul precursor este legat la membrana RE prin intermediul unei

molecule lipidice speciale denumite dolicol pirofosfat. Oligozaharidul este sintetizat
pe acest lipid, treapt cu treapt dup care este transferat in bloc pe asparagina unei
molecule proteice.

TRANSPORTUL I PRELUCRAREA PROTEINELOR N COMPLEXUL GOLGI

Structura complexului Golgi
Complex Golgi - ansamblu de saci membranoi aplatizai - partea esenial i totodat
reeaua Golgi, alctuit din vezicule
Partea esentiala este alcatuita din n saci cis, mediali i trans n
funcie de poziia lor n complex i de proprietile lor funcionale.
Cisternele cis funcioneaz ca staie de primire pentru produii
transportai n vezicule, dinspre reticulul endoplasmatic. Dup
prima etap de procesare produii provenii din RE ca i produii
nou formai n complexul Golgi sunt transferai spre sacii mediani
i cei trans i n final trimii spre reea Golgi trans. Astfel, n
complexul Golgi moleculele se deplaseaz n direcia cis-trans prin
saci.

Fiecare unitate esenial este alctuit dintr-un set de cinci-opt saci aplatizai.
Reeaua trans tinde s aib o structur mai mult turbovezicular i este ntotdeauna
asociat cu partea trans a sacilor.

Complexul Golgi ocup o poziie central n calea secretorie, primind noile proteine i lipide
sintetizate n reticulul endoplasmatic i le direcioneaz fie spre suprafaa celular fie spre
vacuole.
Numrul unitilor per celul variaz foarte mult i depinde de specie, mrimea i etapa de
dezvoltare a celulei i volumul i tipul materialelor de secreie / stocare produse.
De exemplu, celulele din meristemul apical Epilobium conin aproximativ 20 de complexe
Golgi, pe cnd celulele gigant din fibrele de bumbac conin mai mult de 10000. Celulele
meristematice din rdcina de ceap conin aproximativ 400 de uniti Golgi.
Localizarea n celul a complexului Golgi se difereniaz n funcie de tipul de celule.
n celulele animale complexul Golgi ocup o poziie central.
n celulele vegetale complexul Golgi se gsete n mai multe copii, dispersate n citoplasm
sau asociate n grupuri mici. Datorit acestei organizri dispersate i a transportului
complexului Golgi de ctre curenii citoplasmatici, produii de secreie i ating destinaia chiar
i n celulele mari, vacuolate.
Analiza dinamicii complexului Golgi a evideniat c acestea se mic dup o maniera
oprit/pornit. Deci, partea esenial poate s se opreasc n dreptul situsurilor de export ale
reticulului endoplasmatic pentru a prelua moleculele care urmeaz s fie modificate i apoi se
deplaseaz spre peretele celular pentru a elibera produii de secreie.
Complexul Golgi rmne intact structural i activ n timpul mitozei astfel nct poate s
furnizeze moleculele necesare pentru formarea plasmalemei i peretelui celular la celulele fiice.
Noii saci apar prin fisiune de obicei n timpul fazei G2 a ciclului celular.

Funciile ndeplinite de complexul Golgi sunt urmtoarele:

Funcii legate de secreia celular;
Biogeneza lizozomilor i
Dirijarea traficului de membrane
A. Funcii legate de secreia celular
n sacii complexului Golgi are loc concentrarea produilor de secreie sintetizai n reticulul
endoplasmatic i totodat prelucrarea biochimic a acestora, care const n glicozilarea
terminal, scindarea lanurilor polipeptidice precum i alte modificri cum ar fi sulfatarea urmat
de sortare i livrare spre diferite destinaii.
a) Glicozilarea
n reticulul endoplasmatic proteinele sunt glicozilate de ctre un singur tip de oligozaharid, n
special manoz.
n complexul Golgi, proteinele sunt supuse unor modificri mai complexe.
n realizarea glicozilrii sunt implicate glicoziltransferazele i glicozidazele care sunt
proteine integrale cu zona activ orientat spre interiorul sacilor membranoi. Cele mai
importante sunt:
glicoziltransferazele i anume sialtransferaza, galactoziltransferaza;
manozidazele, care ndeprteaz manoza pentru adugarea N-acetilglucozaminei

O categorie special de proteine,

care sunt glicozilate n aparatul
Golgi este reprezentat de
proteogicani, la care lanul glucidic
rezult printr-o polimerizare
extensiv. Dintre proteoglicanii
secretai o parte intr n componena
matrix-ului extracelular, iar restul
rmn ancorate n membrana
plasmatic

b) Clivajul proteolitic specific

Numeroi hormoni peptidici, enzime, sunt sintetizai n form inactiv, sub form de
precursori. Produsul activ apare numai dup proteoliza moleculei precursor, proces care ncepe
n reticulul Golgi trans.
Se pune ntrebarea de ce n unele cazuri sunt sintetizai precursori ai proteinelor.
Uneori, proteinele sunt foarte mici i sinteza lor pe ribosomi nu ar fi eficient, iar mpachetarea n
vezicule de secreie ar eua. Alte proteine, cum ar fi hormonii sunt sintetizate sub aceast form
n reticulul endoplasmatic pentru a nu aciona asupra celulei n care sunt sintetizai. Sunt apoi
modificate n complexul Golgi, dup care, n forma lor activ sunt exportate sb forma unor
vezicule spre celulele int.

c) Sortarea produilor de secreie

n compartimentele complexului Golgi are loc separarea proteinelor de secreie de
enzimele lizozomale i de alte tipuri de proteine, dup care sunt ambalate n membrane
compatibile pentru a fuziona cu plasmalema i exportate n exteriorul celulei. Acestea pot s
urmeze dou ci.
- Calea secretorie reglat este o cale urmat de proteinele care necesit un stimul sau un
mecanism de declanare pentru a fi secretat. Unii stimuli regleaz sinteza proteinei i de
asemenea eliminarea ei din celul.
- Calea secretorie constitutiv permite secretarea proteinelor care sunt necesare n afara
celulei, cum ar fi matrix-ul extracelular. Ele nu necesit stimuli, dei procesul poate fi stimulat
de ctre factorii de cretere.

Cile urmate de proteinele de secreie nainte de a fi eliberate din celul

B) Biogeneza lizozomilor
n compartimentele complexului Golgi are loc prima dat segregarea enzimelor
lizozomale de ceilai produi de secreie. Enzimele lizozomale au grupri gluidice terminale
manoza-6-fosfat care funcioneaz ca marker.
Acest marker este recunoscut de un receptor specific din membrana reticulului
endoplasmatic i a complexului Golgi i determin separarea enzimelor lizozomale n zona
trans, de unde se desprind vezicule, care formeaz apoi liozomii primari.

C) Dirijarea traficului de membrane

Complexul Golgi este implicat n biogeneza membranelor celulare. Proteinele
integrale de membran, sintetizate n reticulul endoplasmatic rugos sosesc pe calea
veziculelor la complexul Golgi unde sunt maturate i eliberate sub forma unor vezicule care
furnizeaz membranelor att proteine ct i lipide.
Totodat complexul Golgi este implicat n reciclarea membranelor, ca un proces de
reutilizare a componentelor plasmalemei. Pe parcursul procesului de exocitoz plasmalema
i mrete permanent suprafaa, datorit veziculelor cu care fuzioneaz. Pentru a contracara
acest fenomen, din plasmalem se desprind vezicule care se ntorc la complexul Golgi unde
are loc reciclarea componentelor membranare. Deci, la complexul Golgi sosesc vezicule care
pot s conin i proteine de membran, enzime, receptori ce pot fi modificate, separate i
refolosite.

Transportul intercompartimental al moleculelor

Compartimentul cis primete moleculele de la reticulul endoplasmatic i apoi le transmite
compartimentului median. Acest compartiment are o participare redus n procesul de modificare a
proteinelor. Se ndeprteaz parial manoza i se fosforileaz oligoglucidele coninute de proteinele
lizozomale.
Compartimentul median are ca funcie primar glicozilaea prin adugarea N-acetilglucozaminei
la moleculele proteice i lipidice.
n compartimentul trans i reticulul Golgi trans se adaug acid sialic la oligozaharide. El reprezint
sediul sortrii finale i a exportrii moleculelor cu destinaii bine orientate.
Transportul moleculelor prin complexul Golgi este direcional.

Cisternele complexului sunt asociate cu o mulime de vezicule mici. Aceste vezicule

transport proteinele i lipidele de la reticulul endoplasmatic care intr prin compartimentul cis n
aparatul Golgi i avanseaz n toate compartimentele pn sunt eliminate prin reeaua Golgi
trans. Aceste vezicule sunt acoperite de o protein de nvelire (coating protein) care se
consider c ar juca un rol de semnal n direcionarea transportului. Ele regleaz tipul de
molecule care sunt mpachetate ntr-un anumit tip de vezicule, controleaz procesul de
asamblare a veziculelor indicnd att membrana int ct i sistemul care permite veziculelor s
fuzioneze cu inta.

DEGRADAREA PROTEINELOR
Proteinele anormale apar n celule ca rezultat al:
mutaiilor,
erorilor aprute n sinteza sau mpachetarea proteinelor, denaturrii spontane,
bolilor,
stresului
degradrii oxidative.
Degradarea proteinelor are ca scop :
Reglarea activitii proteice prin eliminarea moleculelor care nu mai sunt utile n
celul
Reciclarea aminoacizilor.

Aproximativ jumtate dintr-un set complet de proteine vegetale sunt nlocuite la

fiecare 4-7 zile. n multe cazuri sunt sintetizate proteine noi, din aminoacizii
recirculai. O exemplificare a rolului proteolizei n furnizarea de aminoacizi este
germinarea seminelor. La germinare majoritatea aminoacizilor necesari creterii
sunt obinui n urma degradrii proteinelor de rezerv.

DEGRADAREA PROTEOLITIC CITOSOLIC

Proteinele care nu mai sunt utile n celul sau cele care au fost sintetizate sau
mpachetate greit, posed sisteme de recunoastere specifica:
Proteinele citosolice destinate a avea o via scurt sunt marcate la captul
aminoterminal prin apariia unor secvene scurte de aminoacizi, care par s
funcioneze ca semnal proteolitic.
n alte cazuri cile proteolitice sunt activate de condiiile de mediu temperatura
ridicat, expunerea la metale grele sau infecia cu patogeni.
n alte cazuri proteinele aberante sau mpachetate incorect implic probabil o
cretere semnificativ a numrului de reziduuri hidrofobice prezente pe suprafaa
proteinei. De obicei, secvenele hidrofobe sunt ngropate n interiorul proteinei,
pentru a preveni interaciunea lor cu mediul apos.
Atunci cnd o protein a fost sintetizat sau mpachetat incorect, lanurile
hidrofobe sunt expuse spre exterior. Aceste zone hidrofobe furnizeaz situsuri de
legare pentru proteinele care regleaz activitatea diverselor enzime proteolitice.

Calea cea mai important a degradrii proteolitice selective n celulele eucariote

utilizeaz ubiquitina ca marker pentru proteinele citozolice, care devin inte pentru o
proteoliz rapid.
Ubiquitina este un polipeptid mic, alctuit din 76 de aminoacizi, nalt conservai n
archebacterii i eucariote. Ea se ataeaz la gruparea amino lateral a unui rest de
lisin i n acest fel marcheaz proteina respectiv.
Apoi ubiquitine adiionale sunt adugate pentru a forma
un lan poliubiquitinic. Asemenea proteine
poliubiquitinice sunt recunoscute i degradate de un
complex proteazic de dimensiuni mari, numit
proteazom (M=1,5 MDa)
Ubiquitina este eliberat n procesul degradrii proteice,
astfel nct ea poate fi utilizat ntr-un alt ciclu.
Se cunoate c procesul de proteoliz n celulele eucariote necesit energie
furnizat prin hidroliza ATP-ului. Deoarece hidroliza legturilor peptidice este
favorizat din punct de vedere energetic, se consider c ATP-ul este necesar
pentru reglarea activitii proteolitice i anume are rol n recunoaterea i marcarea
proteinelor care urmeaz s fie degradate.

Proteasomul este o structur proteic complex (26 S) alctuit din trei subuniti:
un miez (20 S) cu care sunt asociate dou subuniti reglatoare (19S)
Miezul este alctuit din 4 inele
suprapuse, fiecare inel coninnd
apte subuniti.
Inelele formeaz la interior un canal,
care conine situsurile active pentru
proteoliz. Amplasarea centrilor
catalitici n canal protejeaz
proteinele nemarcate mpotriva
degradrii.
Subunitile reglatoare funcioneaz
ca o cale de intrare n proteasom,
dirijnd ptrunderea proteinei
marcate n canal.

Proteinele marcate cu ubiquitin, ptrund

n canalul proteazomului, unde sunt
amplasai centri catalitici, fiind degradate.
Dup finalizarea procesului de degradare,
proteazomul se disociaz, iar aminoacizii
i ubiquitinele sunt eliberate n citoplasm.
Ubiquitinele se ntorc n alte procese de
marcare, iar aminoacizii vor sta la baza
sintezei altor lanuri polipeptidice.

DEGRADAREA PROTEOLITIC N LIZOZOMI

Lizozomii intervin n metabolismul celular prin digestia proteinelor extracelulare
preluate prin endocitoz, precum i datorit nlocuirii permanente a organitelor
citoplasmatice i a proteinelor citosolice.
n interiorul lizozomilor sunt prezente aproximativ 50 de enzime, care sunt
active numai la pH-ul acid din interiorul lizozomilor.

n celulele eucariotelor lizozomii ndeplinesc urmtoarele funcii:

Heterofagia, n care degradeaz moleculele ptrunse n celul din exterior
Autofagia, n care zone mici din citoplasm i chiar organite citoplasmatice sunt
nconjurate de membrane provenite de la reticulul endoplasmatic pentru a forma
vezicule. Aceste vezicule fuzioneaz cu lizozomii, iar enzimele lizozomale diger
coninutul veziculelor.

Heterofagia

Autofagia

A fagocitoza
B- endocitoza mediata de
receptori
C- autofagia
D- digestia extracelulara

n unele situaii speciale, cnd celula este lipsit de hran,

lizozomii preiau i degradeaz n mod selectiv anumite proteine citosolice.
Sunt degradate n special proteine care conin secvena Lys-Glu-Arg-Gln,
care se pare c le orienteaz ctre lizozomi. n procesul de degradare este
implicat i chaperona Hsp 70, care menin lanurile polipeptidice nepliate
n timpul transportului lor prin membrana lizozomal.
Pe aceast cale sunt degradate proteine de care celula se poate
lipsi i astfel se furnizeaz aminoacizi i energie, care permit derularea
proceselor metabolice fundamentale.

Vacuolele sunt bogate n enzime

hidrolitice i ndeplinesc mai multe funcii
n celule. Una dintre funciile de baz
const n degradarea proteinelor, funcie
similar cu cea a lizozomilor din celulele
animale.

Unii cercettori sugereaz c n timpul

lipsei nutrienilor plantele transport o
serie de proteine citosolice n vacuole,
unde sunt degradate pentru a genera
aminoacizii necesari sintezei altor
proteine.

Fosforilarea oxidativ, n cadrul creia energia eliberat de oxidarea produilor

metabolici este transformat n energie chimic (ATP) proces care se desfoar n
mitocondrii

Fotosinteza n cadrul creia energia luminoas este transformat n

energie chimic (ATP) proces care are loc n cloroplaste

Mitocondriile sunt delimitate de un nveli dublu membranar alctuit dintr-o membran

extern i una intern. Cele dou membrane (fiecare de 6 nm grosime) subdivid spaiul
mitocondrial n dou compartimente distincte:
Compartimentul periferic spaiul intermembranar (6-8 nm grosime), este situat ntre
cele dou membrane mitocondriale.
Compartimentul central, nconjurat de membrana intern poart numele de matrice
mitocondrial.

Din punct de vedere funcional PROTEINELE CE COMPUN MEMBRANA INTERNA

MITOCONDRIALA se clasific n trei grupe:
Proteinele implicate n reaciile de oxidoreducere, ce se desfoar la nivelul catenei respiratorii;
Proteine transportoare, ce asigur intrarea metaboliilor n matricea mitocondrial sau
deplasarea lor n afara spaiului matriceal;
Complexul enzimatic ATP sintetaz, sau complexul F0F1, care este vizibil pe faa membranei
interne, spre interior sub forma unor proeminene sferice cu dimensiuni de aprox. 8 nm.

n COMPARTIMENTUL CENTRAL se gsesc:

genomul mitocondrial (n mai multe copii);
ribosomii mitocondriali;
moleculele de ARN de transport;
granulaii cu densiti electronice diferite (depozite de Ca 2+);
numeroase enzime implicate n: replicarea i funcionarea aparatului genetic mitocondrial,
oxidarea piruvatului i a acizilor grai la acetil coenzima A i ciclul acizilor carboxilici.

Procesele metabolice desfurate n mitocondrii

Procesele metabolice localizate n mitocondrii pot fi ncadrate n dou mari clase:
procesele biosintetice interne pentru mitocondrii i
respiraia celular, n cadrul creia are loc degradarea aerobic a glucidelor i a
acizilor grai, avnd ca produi finali CO2, H2O i o cantitate mare de energie

Reacia global a procesului de respiraie este:

C6H12O6 + 6 O2 + 30 ADP +30 Pi 6 CO2 + 36 H2O+ 30 ATP

Etapele care compun metabolismul mitocondrial pot fi sistematizate n trei grupe

principale:

Oxidarea piruvatului i a acizilor grai la dioxid de carbon, cuplat cu reducerea

nicotin-amid-dinucleotidului (NAD+) i a flavi-adenin-dinucleotidului (FAD).
Transportul electronilor prin catena respiratorie mitocondrial, cuplat cu generarea
unui gradient electrochimic de protoni;
Utilizarea energiei stocate n gradientul electrochimic de protoni pentru sinteza ATP.

Procesele de oxidare a glucidelor

A - n citosol
B n matricea mitocondrial

 O2 + 2 + 2 H+ H2O

CLOROPLASTE

Structura clorofilei a

Procesele metabolice desfurate n cloroplaste

Procesele fotosintetice care au loc n plante pot fi mprite n patru etape,

fiecare localizat ntr-o anumit regiune a cloroplastului:
Captarea energiei luminoase de ctre sistemul pigmentar (1);
Oxidarea (fotoliza) apei, adic descompunerea ei cu formare de O2,
reducerea NADP+ la NADPH i generarea unui gradient de protoni (2);
Fotofosforilarea, adic formarea ATP din ADP i fosfat (3);
Fixarea CO2, reducerea lui i sinteza glucidelor (4).
Toate reaciile din etapele 1-3 sunt catalizate de proteine din membrana tilacoid i
alctuiesc faza luminoas a fotosintezei.
Enzimele care ncorporeaz CO2 n intermediari chimici i conduc apoi la sinteza
amidonului sunt constituieni solubili din stroma tilacoid, iar procesele care au loc
alctuiesc faza ntunecat a fotosintezei. Enzimele care sintetizeaz zaharoz din
intermediarii cu trei atomi de carbon sunt prezente n citosol.

Localizarea pigmenilor clorofilieni i accesorii

Pentru a fi posibil o absorbie eficace a radiaiei luminoase (care s reprezinte cel
puin 90% din radiaia incident) n timpul asimilaiei clorofiliene este absolut
necesar ca n aparatul fotosintetic celular concentraia moleculelor de clorofil s fie
foarte mare.
PS I poate fi iniiat de radiaii cu =700nm i este localizat n lamelele stromatice.
PS II, necesit energie luminoas cu = 680nm i este localiza preferenial n
grana.
Cele dou sisteme sunt separate din punct de vedre spaial, deci o alt particul
multiproteic, i anume complexul citocromic b/f este utilizat pentru a transfera
electronii ntre cele dou sisteme. Acest complex este prezent att n lamelele
stromatice ct i n grana.

Fiecare fotosistem conine cteva sute de molecule de clorofil, dar numai una per
sistem este capabil s iniieze transferul de electroni.
Aceast molecul acioneaz ca un centru de reacie i poart numele de
P700 pentru fotosistemul I (PS I) i P680 pentru potosistemul II (PS II). P semnific
pigment care absoarbe lumina la =700nm , respectiv =680nm).
Fiecare dintre aceste molecule specializate de clorofil este legat de o protein
membranar integral, rezultnd un complex protein-clorofil. Asociat cu fiecare
fotosistem exist o structur denumit complexul antena, sau complexul cu rol n
captarea energiei luminoase LHC light harvesting complex. Funcia primar a
acestuia este de a capta energia luminoas i de a dirija aceast energie spre
moleculele de clorofil care constituie centrul de reacie, att n cadrul PS I ct i PS II.

Desfurarea procesului de fotosintez

Energia luminoas este absorbit de complexul antena i apoi este transferat rapid
(10-9 s) la molecula specializat de clorofil, care constituie centrul de reacie al
fotosistemului II (PS II).
Absorbia luminii cu =680 nm, duce la cedarea unui electron de ctre molecula de
clorofil P680, rezultnd forma oxidat a acesteia. Revenirea acestei molecule la
forma iniial, deci reducerea ei, necesit un aport de electroni. Aceti electroni
rezult prin oxidarea unei molecule de ap. Aceast reacie de oxidare are loc n
prezena unei proteine care conine un ion Mn2+ i care este ataat centrului de
reacie:

H2O O2 + 2 H+ + 2

Deci, n cadrul procesului de fotosintez energia luminoas este utilizat pentru

oxidarea apei, n cadrul acestui proces fiind pui n libertate electroni cu o energie
liber foarte ridicat. Acetia strbat apoi un ntreg sistem enzimatic de transport, n
fiecare etap pierznd o parte din energie. n final, acceptorul de electroni este
NADP+, care este redus la NADPH.

Deplasarea electronilor prin sistemul enzimatic de transport este cuplat cu o

acumulare de H+ n lumenul tilacoid, genernd un gradient de protoni prin membrana
tilacoid.
Datorit acestui gradient, protonii vor avea tendina de a se deplasa (n gradient de
concentraie) din lumenul tilacoid n strom. Energia rezultat n urma acestui proces
este utilizat pentru sinteza ATP.
Complexul proteic care catalizeaz sinteza ATP este denumit complexul CF0 -CF1;
acest sistem formeaz protuberane pe membrana tilacoid i are proprietatea de a
nmagazina energia degajat de transportul protonilor n gradient de concentraie i de
a o utiliza pentru sinteza ATP.

ATP i NADH rezultate n urma fazei luminoase a procesului de fotosintez sunt

utilizate n continuare pentru a genera glucoza. Procesul are loc n strom, fiind
catalizat de enzime specifice.

6 CO2 + 18 ATP + 12 NADPH + 12 H2O

C6H12O6 + 18 ADP + 18 Pi + 12 NADP+ + 6H+

Enzima care fixeaz CO2 n carbohidrai este ribuloz 1,5 bifosfat carboxilaza
(denumit rubisco), care este localizat n stroma cloroplastului. Aceast enzim
adaug CO2 la ribuloz 1,5 bifosfat pentru a forma dou molecule de fosfoglicerat.
Doarece CO2 este ncorportat iniial n compui cu trei atomi de carbon, ciclul lui
Calvin mai poart numele de calea metabolic C3 de fixare a carbonului.
3-fosfogliceratul este convertit apoi n amidon sau zaharoz, dar o parte este utilizat
pentru a regenera ribuloz 1,5 bifosfatul.

Reaciile care alctuiesc ciclul Calvin

Reaciile care au loc n citosol,

pentru formarea zaharozei

Procesele metabolice desfurate n peroxizomi

n celulele animale peroxizomii ndeplinesc mai multe funcii i anume:
OXIDAREA ACIZILOR GRAI
Degradarea acizilor grai, cu catene care conin cel putin 20 de grupri CH2,
Acizii grai cu lungime medie 10-20 de grupri CH2 pot fi degradai att n
peroxizomi ct i n mitocondrii.
- Oxidarile produse in peroxizomi nu produc ATP, ci produc caldura
ACIZI GRASI
FADH2

acetil CoA + FADH2

FAD + electroni + H+
+O2

H2O2

Acetil-CoA produs n timpul degradrii acizilor grai nu poate s fie oxidat mai
departe. n schimb este transportat n citosol pentru a fi utilizat n sinteza
colesterolului i a altor metabolii.

DETOXIFIEREA ORGANISMELOR

Peroxizomii au de asemenea un rol important n detoxifiere.

Aproape jumatate din alcoolul prezent n organismul animal este oxidat n
acetaldehid.
Oxidazele din peroxizomi sunt flavoproteine care produc H2O2 prin transferarea
electronilor sub forma atomilor de hidrogen, de la un substrat la oxigen.
RH2 + O2 R + H2O2

n plante, rolul peroxizomilor depinde de organul sau esutul n care se afl:

MOBILIZAREA LIPIDELOR
n procesul de germinare a seminelor enzimele din peroxizomi particip la mobilizarea lipidelor.

OXIDAREA ACIZILOR GRAI

n peroxizomi are loc oxidarea acizilor grai cu caten lung, pn cnd ajung la
catene cu ase atomi de carbon.
Se formeaz astfel ap oxigenat (H2O2) i acetil-CoA, care este transportat n
mitocondrii pentru a intra n ciclul acidului citric.

n peroxizomi au loc - 1/5 din totalul oxidrilor acizilor grai, restul avnd loc n
mitocondrii

TRANSFORMAREA AZOTULUI ANORGANIC

n nodoziti peroxizomii sunt implicai n transformarea azotului fixat n compui
organici bogai n azot, reacii care sunt catalizate de urat-oxidaz.

Peroxizomii din toate tipurile de celule conin o mare cantitate de catalaz, care
oxideaz H2O2 generat de oxidaz prin procesele de oxidare a azilor grai sau a
substanelor toxice.
Deoarece catalazele sunt prezente ntotdeauna n peroxizomi, H2O2 un metabolit
cu o citotoxicitate ridicat, este distrus imediat n peroxizomi neajungnd niciodat
n citoplasm.
Poate fi urmat calea catalitic: 2H2O2 2H2O + O2 sau
Calea peroxidic: H2O2+ RH2 R + 2H2O
Unde R, R sunt radicali alchilici.

REPRODUCEREA CELULAR

Procesele desfurate n cadrul ciclului celular, urmrindu-se

comportarea unui singur cromosom

Ciclul celular