Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
LISTA ABREVIERI:
CA - Circumferina abdominal
cm - Centimetri
CRP - Proteina C reactiv
Col - Colesterol
dl - Decilitru
Eo - Eozinofile
HDL - High density lipoprotein (lipoproteine cu densitate nalt)
IDF - Federaia Internaional de Diabet
IgE - Imunoglobulin
IMC- Indice de mas corporal
Ly - Limfocite
LDL- Low density lipoprotein (lipoproteine cu densitate joas)
mg - Miligram
Mo- Monocite
NCEP-ATP III - Naional Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III
PPAR - Receptorii Activai de Inductorii Proliferarii Peroxizomilor (peroxizome proliferator activated receptor)
PMN - Polimorfonucleare
SM - Sindrom metabolic
TA - Tensiunea arterial
TAS - Tensiune arterial sistolic
TAD - Tensiune arterial diastolic
TG - Trigliceride
Obiectivele studiului:
-
de
Rezultate
Analiza lotului de studiu s-a efectuat n funcie de mediul de provenien, sex, vrsta i
vrsta medie. Caracteristicile clinice i biochimice ale lotului studiat sunt reprezentate n
tabelul VIII:
Tabel VIII: Caracteristicile lotului studiat
Vrsta (ani)
CA (cm)
IMC (kg/m2)
TAD (mmHg)
TAS (mmHg)
Glicemie (mg/dl)
HDL- col(mg/dl)
TG(mg/dl)
Media
47,51
88,30
26,03
75,29
117,30
94,35
44,98
122,69
95% CI
46,61 - 48,41
87,64 - 88,96
25,78 - 26,28
74,883 - 75,71
116,50 - 118,10
93,28 - 95,42
44,27 - 45,70
118,87 - 126,51
SD
17,98
13,16
4,97
8,27
15,90
21,38
14,22
71,57
Minimum
18,00
56,00
19,00
60,00
90,00
72,00
21,00
48,00
Maximum
91,00
134,00
45,00
115,00
190,00
400,00
92,00
879,00
Determinarea scorului SM
Am aplicat criteriile de diagnostic i am calculat scorul de SM pentru fiecare subiect (0absena criteriului, 2- prezena criteriului) (fig.4.4):
Numr pacieni
Numr pacieni
A.
450
400
Scor SM IDF
400
Scor SM Harmonised I
350
B.
450
350
300
300
250
250
200
200
HARMONIZED I
SM5
SM4
SM3
non SM
150
100
IDF
SM5
SM4
SM3
non SM
150
100
50
50
Numr pacieni
02
10
C.
700
600
500
400
300
ATP III
SM5
SM4
SM3
non SM
200
100
0
10
10
241
Ponderea n cadrul
pacienilor cu SM
(95 % CI)
61,95% (54,3870,29)
45
11,54% (8,4415,48)
Prevalena n
populaia studiat
(95 % CI)
15,75% (13,8317,87)
2,94% (2,14-3,93)
38
9,79% (6,9113,40)
2,48% (1,75-3,40)
8,74% (6,0512,21)
2,22% (1,53-3,10)
hipoHDL-colesterolemie
Obezitate central + modificri ale metabolismului
glucidic + hipertensiune arterial
Hipertensiune arterial + hiper-trigliceridemie +
hipoHDL- colesterolemie
Modificri ale metabolismului glucidic +
hipertensiune arterial + hiper-trigliceridemie
Obezitate central + modificri ale metabolismului
glucidic + hipertrigliceridemie
34
31
7,96% (5,4111,31)
2,02% (1,37-2,87)
26
1,69% (1,11-2,49)
21
5,39% (3,34-8,25)
1,37% (0,85-2,09)
15
3,85% (2,15-6,36)
0,98% (0,54-1,16)
Modificri
ale
metabolismului
glucidic
hipertrigliceridemie + hipoHDL-colesterolemie
Modificri ale metabolismului glucidic +
hipertensiune arterial + hipoHDLcolesterolemie
Obezitate central + modificri ale metabolismului
glucidic + hipo-HDL-col
SM cu patru componente (SM4)
Obezitate central + modificri ale metabolismului
glucidic + hipertensiune arterial + hipoHDLcolesterolemie
12
3,08 (1,59-5,38)
0,78% (0,40-1,37)
10
2,57% (1,234,72)
0,65% (0,31-1,20)
2,31% (1,054,39)
0,58% (0,26-1,11)
104
32
26,74% (21,84-2,39)
8,22% (5,62-11,16)
6,79% (5,55-8,23)
2,09% (1,43%2,95)
25
1,63% (1,05-2,41)
12
3,08% (1,59-5,38)
0,78% (0,40-1,37)
0,39% (0,14-0,85)
11,31% (8,22-15,18)
100%
2,87% (2,09-3,86)
25,42%(22,9628,08)
44
389
80
80
S en sib ilita te
Sensibilitate
ScorHarmonised I
100
60
40
60
CA
TAD
TAS
Glicemie
Trigliceride
HDL-C
40
20
20
0
0
0
0
20
40
60
80
20
40
60
80
100
100-Specificitate
100
100-Specificitate
AUC
ES
95% CI
Scor SM Harmonised I
1,000
0,0000
0,997 - 1,000
CA (cm)
0,804
0,0133
0,781 - 0,825
TAD (mmHg)
0,666
0,0169
TAS (mmHg)
0,757
0,0148
Glicemie (mg/dl)
0,742
0,0160
Trigliceride (mg/dl)
0,756
0,0175
HDL- colesterol
0,636
0,0183
Figura 4.31. Analiza AUC: criterii de diagnostic ale SM
0,639 - 0,692
0,732 - 0,780
0,717 - 0,766
0,732 - 0,780
0,609 - 0,662
S e n s ib ilita te
Studiind figura 4.32, se observ c valoarea AUC pentru markerii studiai este cuprins
ntre 0,589 (n cazul variabilei Eo) i 0,690 (n cazul fibrinogenului). n contextul SM,
acurateea acestor markeri ai inflamaiei cronice i disfunciei endoteliale poate fi considerat
redus deoarece AUC < 0,7 pentru toi markerii investigai (figura 4.31). Totui, valorile
ariilor parametrilor reprezentai n figura 4.31 sunt apropiate de valorile AUC ale variabilelor
TAD i HDL-col (figura) i deci, pot fi utilizai pentru completarea diagnosticului de SM.
100
80
60
Non-HDL-C
Col T/ HDL-C
Acid uric
Fibrinogen
Eozinofile
40
20
0
0
20
40
60
80
100-Specificitate
100
AUC
ES
95% CI
Non-HDL-colesterol
0,605
0,0171
0,580 - 0,630
Col total/HDL-col
0,607
0,0163
0,642 - 0,691
Acid uric
0,655
0,0161
0,630 - 0,679
Fibrinogen
0,690
0,0206
0,658 - 0,720
Eozinofile
0,589
0,0176
0,564 - 0,615
Figura 4.32. AUC: markeri ai SM, inflamaiei cronice i aterogenezei
Discuii
Status-ul proinflamator din SM asociat cu insulinorezistena i disfuncia endotelial
constituie o verig de legtur dintre inflamaie i procesele metabolice complexe, nsoinduse de deteriorarea funciilor vasculare i creterea riscului de evenimente cardiovasculare
majore (28,58). Studiul efectuat a artat o diferen ntre vrstele subiecilor din cele dou
loturi: vrsta pacienilor cu SM fiind semnificativ mai mare (P<0.001) comparativ cu subiecii
normali, confirmnd faptul menionat c vrsta reprezint unul din stimulii care agraveaz
inflamaia cronic. Am artat c valorile fibrinogenului sunt mai mari n SM comparativ cu
lotul martor, att la brbai ct i la femei, n concordan cu studiile anterioare .Evaluarea
fibrinogenului este important nu numai n SM pentru definirea contextului proinflamator i
protrombotic, ci i n predicia cardiovascular la subiecii normali. Studiind populaiile
leucocitare, am obinut diferene semnificative n cazul Eo, valoarea medie a acestora fiind
semnificativ mai mare n lotul cu SM comparativ cu lotul martor (P < 0,001, figura 4.25.B).
Implicarea Eo n SM s-a conturat n ultimul deceniu, aceste celule fiind implicate n recrutarea
macrofagelor din esutul adipos. Experimental s-a constatat c o cretere a Eo aprut ca
urmare a infectrii cu helmini sau stimulare cu IL-5 este urmat de mbuntirea toleranei la
glucoz (199). Controlul pe care l exercit Eo asupra activrii macrofagelor ar putea fi cheia
interveniei asupra obezitii n viitorul apropiat(165,199). Hiperuricemia, asociata frecvent cu
SM, este cunoscut ca un factor independent de risc cardiovascular (192, 202). In concordanta
cu aceasta afirmaie, in studiul nostru, am constatat ca nivelul seric al acidului uric a fost mai
crescut in lotul cu SM, diferena semnificativa din punct de vedere statistic (P < 0,0001).
Dislipidemia aterogen din sindromul metabolic i diabetul zaharat se caracterizeaz prin
creterea trigliceridelor i a Non-HDL-col, scderea HDL-col, creterea numrului de
particule LDL modificate (185, 190). La pacienii cu SM, am descris un profil aterogenetic ,
Ipoteza de lucru
Studii experimentale efectuate au artat c rolul PPAR n ateroscleroz deriv din
implicarea acestor receptori n limitarea inflamaiei. Plecnd de la acest fundament, ne-am
propus evidenierea receptorilor nucleari activai de inductorii proliferrii peroxizomiloralpha (PPAR) prin citometrie de flux n leucocitele din sngele periferic, alturi de
evaluarea acestei metode n cuantificarea expresiei relative a PPAR ca test diagnostic
precoce al modificrilor metabolice SM. Studiul expresiei relative a receptorilor PPAR a
plecat de la premisa c dac SM se caracterizeaz printr-un status inflamator cronic, nivelul
de expresie a PPAR n leucocitele circulante este mai sczut la pacienii cu SM comparativ
cu subiecii normali. Referitor la studiul receptorului CD36, am plecat de la presupunerea c
nivelul de expresie al acestui receptor n SM este crescut, dat fiind importana acestui receptor
n inflamaia aterosclerotic. Avnd n vedere efectele receptorilor amintii n
insulinorezisten i aterogenez, am considerat necesar evaluarea prezenei receptorului
nuclear PPAR, n paralel cu studiul receptorului scavenger CD-36, prin metoda citometriei
n flux. Astfel n studiul efectuat mi-am propus i investigarea existenei unei legturi ntre
nivelul de expresie al receptorilor PPAR i cel al receptorului CD-36. De asemenea, ne-am
ndreptat atenia spre stabilirea unor asocieri ntre componentele clinice i biochimice ale
sindromului metabolic i nivelul intensitilor de fluorescen ale PPAR i CD-36, ca masur
a expresiei relative a acestor receptori.
Material i metod
Studiul receptorilor PPAR n contextul sindromului metabolic s-a desfurat n
perioada 1.01.2014 -28.02.2014, pe baza metodologiei studiilor de tip caz-martor. Am urmrit
identificarea unor diferene ntre expresia receptorilor PPAR la pacienii cu SM comparativ
cu subiecii sntoi, diferene care ar putea fi utile n diagnosticul precoce al SM.Recrutarea
pacienilor s-a efectuat din pacienii prezentai pentru consultaie la Cabinetul Individual
CMI Dr. Popa Elena, situat n strada Ion Creanga din Iai. Pentru studiul receptorilor
PPAR n sindromul metabolic au fost selecionai un numr de 57 de subieci, 26 de subieci
cu SM (constituind lotul SM) i 31 subieci fr SM, constituind lotul de control (Lot NonSM). Pentru studiul SM, pacienii au fost recrutai din masa de populaie arondat cabinetului
de MF, fr istoric de SM, diabet zaharat, boal cardio-vascular, afla i la primul diagnostic
de SM, evaluarea complet a acestora fiind urmat de includerea n programul de
management cardiovascular i metabolic, conform Ghidurilor Terapeutice aflate n vigoare.
Lot SM a) criterii de includere:vrsta peste 18 ani,recrutarea pe baza semnrii
Consimmntului liber informat,SM nou-diagnosticat pe baza prezenei a minim trei criterii
de diagnostic pentru SM conform Harmonised I. b) criterii de excludere:vrst sub 18 ani,
refuzul semnrii Consimmntului liber informat, femei n perioada de graviditate sau de
lactaie, SM anterior diagnosticat, istoric de diabet zaharat, boala cardiovasculara
constituita,tratament cu agoniti PPAR (i.e. fibrai, etc).
Lot martor (Non-SM) a) criterii de includere:vrsta peste 18 ani,recrutarea pe baza
semnrii Consimmntului liber informat, absena diagnosticului de SM. b) criterii de
excludere:vrst sub 18 ani, refuzul semnrii Consimmntului liber informat, femei n
perioada de graviditate sau de lactaie.
Studiul receptorilor PPAR a inclus dou subetape:
Diferen
normal patologic
Diferena
mediilor
valorilor
medii
PMN
0
13,00
1/100
6,50
1/500
28,50
1/1500
-10,50
1/4500
22,00
A.Optimizare
Diferena
mediilor
medianelor
PMN
16,00
10,50
27,50
8,00
21,50
Diferena
mediilor
valorilor
medii
Ly
1,00
10,50
38,00
35,00
13,00
Diferena
Diferena
mediilor
mediilor
medianevalorilor
lor
medii
Ly
Mo
1,00
7,00
13,50
4,50
36,00
28,50
33,00
22,50
11,00
29,50
B.Repetabilitate
Diferena
mediilor
medianelor
Mo
7,50
9,00
24,00
18,00
28,50
Rezultate
n cele dou loturi au fost inclui n studiu un numr de 57 de participani, care au fost
investigai din punct clinic i paraclinic. Vrsta subiecilor inclui n studiu a fost cuprins
ntre 18 i 79 ani, iar vrsta medie calculat a avut valoarea de 48,05 15,87 ani. Pentru sexul
masculin, vrsta medie este de 49,2516,17 ani, iar pentru sexul feminin 46,89 1 5ani,
diferena obinut ntre vrstele pacienilor fiind statistic nesemnificativ (P = 0,85).
Analiznd vrstele subiecilor din cele dou loturi, am observat c vrsta medie a pacienilor
cu SM (54,76 11,83 ani) a fost semnificativ mai mare (t-test, P = 0,003) dect n lotul
martor (42,58 16,9 ani). Pentru diagnosticul sindromului metabolic, am calculat scorul de
SM bazndu-ne pe criteriile Harmonised I. Conform criteriilor diagnostice, din cei 57 de
subieci investigai, un numr de 26 participani (46%) au fost inclui n lotul cu SM (Lot
SM), iar 31 de subieci(54%) nu au prezentat acest sindrom, constituind lotul martor (Lot
Non-SM). Din punct de vedere al repartiiei pe sexe, nu au existat diferene statistic
semnificative, raportul brbai/femei fiind de 0,96:1. Din totalul celor 28 de brbai inclui n
studiu, 42,85% (12 brbai) au ntrunit cel puin trei criterii diagnostice pentru SM, fiind
inclui n lotul SM. n acelai timp, 14 femei, reprezentnd 48,27% din subiecii de sex
feminin, au ntrunit condiiile pentru includerea n lotul pacienilor cu SM. Valoarea medie
determinat pentru scorul de SM a artat prezena unor valori semnificativ statistic mai mari
din punct (t-test, P < 0,0001) n lotul SM (7,691,76), comparativ cu lotul martor (1,74
1,84). Am studiat comparativ media valorilor msurate ale criteriilor componentelor SM.
Analiza statistic a artat valori semnificativ statistic mai mari pentru CA, TG, glicemie, TAS
i TAD (p<0,001) n lotul SM comparativ cu lotul normal Concomitent, calculul statistic a
evideniat o scderea semnificativ a HDL-colesterolului n lotul cu SM comparativ cu
subiecii din lotul martor (Non-SM). Aplicnd testul z, am comparat ponderea pacienilor
diagnosticai cu HTA, dislipidemie i tulburri ale metabolismului glucidic n lotul SM versus
lot Non-SM i am constatat prezena acestor afeciuni ntr-un procent mai mare semnificativ
statistic n lotul SM ((p<0,001).
Utiliznd testul t Student, am calculat diferenele statistice i ntre ali parametri
studiai care sunt factori de risc cardio-vascular dar care nu sunt componente ale SM. n lotul
cu SM, valorile acidului uric, fibrinogenului, Col total, Non-HDL-col i LDL-col au fost
semnificativ mai mari comparativ cu lotul martor (tabel XXVI). Analiznd valorile medii ale
populaiilor de leucocite, am identificat doar pentru populaia de Eo diferene statistice ntre
cele dou loturi, numrul Eo n lotul SM fiind semnificativ mai mare dect n lotul martorTot
pentru caracterizarea celor dou loturi, am analizat prezena antecedentelor
heredocolaterale (AHC) de diabet zaharat, boala cardiovascular i dislipidemie pentru toi
subiecii investigai. Astfel, existena AHC de HTA a fost declarat de 25,80% din subiecii
inclui n lotul martor, respectiv de 53,84% din numrul pacienilor cu SM. Antecedentele
heredocolaterale de dislipidemie au fost prezente la 34,61 % din pacienii cu SM, n timp ce n
lotul martor, anamneza a evideniat aceste antecedente la 35,48% din subieci.
Analiza nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR
n cercetarea desfurat, am utilizat intensitatea medie de fluorescen (MFI) ca
msur a nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR n leucocitele studiate. Pentru
populaiile de leucocite, analiza computerizat a probelor luate n studiu a furnizat valori
pentru MFI a receptorilor PPAR n funcie de cantitatea de anticorpi anti-PPAR marcai cu
fluorocrom care se leag de aceste celule i apoi sunt captai de citometru (figura 5.9).
A. Lot Non - SM
B. Lot SM
Figura 5.9. Analiza flowcitometric pentru receptorii PPAR n leucocite A. lot normal; B. lot SM
F r e c v e n ta re la tiv a (% )
F r e c v e n ta re la tiv a (% )
Pentru pacienii din lotul SM, valoarea medie a MFI n Mo a fost de 228,19 58,80, iar
pentru lotul martor s-a calculat o valoare medie a MFI a Ac anti-PPAR de 235,38 77,17.
Distribuia statistic a frecvenei valorilor MFI obinute pentru nivelul de expresie a PPAR n
Mo subiecilor din cele dou loturi a fost reprezentat n figura 5.11.
35
Lot SM
30
25
20
15
10
5
35
30
Lot martor
25
20
15
10
5
0
50
100
150
200
250
300
MFI anti-PPAR
350
400
450
50
100
150
200
250
300
MFI anti-PPAR
350
400
450
500
M F I a n t i -P P A R
450
LCI
400
404,6
350
345,8
300
Media
250
228,2
200
150
110,6
100
LCI
50
26
Minim
128
Maxim
358
Media
228,19
DS
58,19
25 din 26 valori ale MFI s-au ncadrat
n intervalul Media 2DS.
51,8
LCS
466,9
400
389,7
300
Media
200
100
235,4
81,0
LCI
3,9
36
26
21
16
-100
11
31
M F I a n t i - P P A R
500
31
26
21
16
11
M F I a n tiP P_AMR o
260
250
240
230
220
210
200
190
AHC HTA
AHC HTA
270
P=0,06
Numr
Mediana
Percentila 25
Percentila 75
22
199,50
178,00
227,00
AHC HTA absente
Numr
35
Mediana
248,00
Percentila 25
190,25
DA
NU
Percentila 75
317,00
Figura 5.15. Comparaie ntre expresia PPAR n Mo funcie de AHC de HTA
Lot SM
26
181,781
61,1694
165,000
81,300
314,000
134,00 218,00
N
Media
SD
Mediana
Minimum
Maximum
Percentila 25
Percentila 75
Lot Non-SM
31
179,574
52,2907
168,000
74,800
301,000
145,750
217,00
F re c v e n ta re la tiv a (% )
F re c v e n ta re la tiv a (% )
Lot SM
30
25
20
15
10
5
40
Lot Non-SM
35
30
25
20
15
10
5
0
50
89
128
167
206
244
283
MFI anti-P PAR
322
361
400
50
100
150
200
MFI anti-PP AR
250
300
350
400
365,3
350
Media+2DS
300
304,1
250
200
181,8
150
100
50
Media- 2DS
59,5
-1,7
31
26
21
16
11
-50
Pentru lotul Non-SM, diagrama de control (figura 5.20), a artat toate valorile
determinate pentru lotul Non-SM se ncadreaz ntre LCS i LCI.
Figura 5.20. Lot Non -SM: Variaia
expresiei relative a PPAR n Ly
Numr pacieni
31
Minimum
74,8
Maximum
301,00
Media
179,574
Deviaia Standard
52,29
*96% din valori ncadrate n Media 2DS.
Aplicarea testului t-Student pentru valorile medii ale intensitii de fluorescen ale
PPAR n Ly nu a artat existena unei diferene statistic semnificative ntre lotul cu SM i
lotul martor(t- Test, P= 0,88).
Analiza receptorilor PPAR
n Ly subiecilor cu AHC de HTA i dislipidemie
Studiind populaiile de Ly, la subiecii care au prezentat AHC de hipertensiune
arterial, analiza flowcitometric a relevat existena unor valori mai mici pentru MFI la aceti
subieci comparativ cu cei fr AHC de HTA (fig. 5.22), dei scderea observat nu a
ndeplinit pragul de semnificaie statistic (t- Test, P = 0,09).
350
336,4
Media+2DS
284,1
250
200
Media
179,6
150
100
Media- 2DS
75,0
50
22,7
36
31
26
21
16
11
M F I a n ti- P P A R
300
AHC HTA
Numr
22
210
M F I a n t i - PLP yA R
Mediana
160,00
Percentila 25
127,00
Percentila 75
171,00
AHC HTA absene
Numr
35
Mediana
187,00
Percentila 25
149,00
Percentila 75
231,75
AHC HTA
200
P=0,09
190
180
170
160
150
140
130
DA
NU
35
F re c v e n ta re la tiv a (% )
F re c v e n ta re la tiv a (% )
30
25
20
15
10
5
0
50
100
150
200
250
300
350
MFI anti-P P AR
400
450
500
30
25
Lot Non-SM
20
15
10
5
0
50
100
150
200
250
300
350
MFI anti-P PAR
400
450
500
172,00
395,00
Media
500
470,2
M F I a n t i - P P A R
450
Media + 2DS
400
Deviaia Standard
69,15
*Valorile MFI ncadrate n Media 2DS.
401,0
350
300
Media
250
262,73
262,7
200
150
Media - 2 DS
124,4
100
55,3
50
31
26
21
16
11
Pentru lotul martor, valoarea medie calculat a MFI a anticorpilor anti-PPAR a fost de
264,80 70,88, peste 95% din valorile MFI fiind cuprinse n Media 2DS (figura 5.27).
M F I a n t i- P P A R
500
477,4
450
Media+ 2DS
400
406,6
350
300
Media
250
264,8
200
150
Media - 2DS
123,0
100
52,2
36
31
26
21
16
11
50
F re c v e n ta re la tiv a (% )
Pentru PMN, analiza statistica nu a artat existena unei diferene statistic semnificative ntre
nivelul de expresie relativ a PPAR la pacienii cu SM comparativ cu subiecii din lotul NonSM (t- Test, P= 0,90). Studiind populaiile de PMN la subiecii care au prezentat AHC de
HTA, nu am calculat o diferen statistic semnificativ ntre expresia receptorilor PPAR la
subiecii cu istoric familial de hipertensiune arterial, comparativ cu cei pentru care nu s-au
notat AHC de HTA (t- Test, P= 0,13).De asemenea, am identificat diferene ntre nivelul de
expresie al PPAR n PMN subiecilor care prezentau AHC de dislipidemie comparativ cu cei
fr AHC de dislipidemie (t- Test, P= 0,17).
Analiza nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR n eozinofile
Tabel XXXIV: Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR n Eo
Lot SM
Lot Non-SM
N
26
31
Valoare medie
1410,57 476,04
1722,09375,65
Mediana
1424,50
1713,00
Minimum
350,00
685,00
Maximum
2337,00
2506,00
Percentila 25
1193,00
1532,25
Percentila 75
1697,00
1995,50
50
40
30
Lo t S M
20
F re c e n ta re la tiv a (% )
Lot No n-SM
20
15
10
10
5
0
0
0
500
1000
1500
2000
MFI anti-P PAR
2500
3000
400
800
1200
1600
2000
2400
MFI anti-P PAR
2800
Figura 5.32. Distribuia frecventelor relative ale valorilor MFI anti- PPAR n Eo
Din diagrama Shewhart (figura 5.33) se observ c toate valorile determinate pentru
nivelul de expresie relativ a PPAR n Eo pentru lotul SM s-au ncadrat n [Media 3 DS],
peste 90% din determinri fiind cuprinse n [Media 2 DS], iar n [Media 1 DS] sunt
incluse peste 65% din valorile MFI.
Figura 5.33: Lot SM
Variaia expresiei relative a PPAR n Eo
Numr pacieni
26
Minimum
350,00
M F I a n ti - P P A R
3000
LCS
2811,7
2500
Media + 2DS
2344,7
2000
1500
1410,6
1000
Media- 2DS
500
0
Maximum
2337,00
Media
1410,57
Deviaia Standard
476,04
* 24 valori ncadrat en [Media 2DS].
476,5
9,4
LCI
31
26
21
16
11
-500
M F I a n t i - P P A R
Pentru subiecii inclui n lotul martor, analiza diagramei (figura 5.34) a artat c
toate cele 31 de valori ale MFI pentru PPAR n Eo se ncadreaz n [Media 3DS], iar 30
dintre acestea se ncadreaz n [ Media 2 DS].
LCS
3000
2849,0
Media +2 DS
2500
2473,4
2000
Media
1722,1
1500
Med ia-2DS
1000
970,8
595,1
36
31
26
21
16
11
LCI
500
Lot Non-SM
31
1713,00
1523,25
1995,50
26
1424,50
1193,00
1697,00
AHC HTA
AHC HTA
Numr
Mediana
Percentila 25
Percentila 75
1800
M F I a n ti - P P
A R
1700
P=0,0023
1600
1500
1400
22
1488,00
1164,25
1707,50
AHC HTA absente
1300
1200
1100
1000
DA
NU
Numr:
Mediana
Percentila 25
Percentila 75
35
1708,50
1437,00
1950,00
F re c v e n ta re la tiv a (% )
F re c v e n ta re la tiv a (% )
Media
Deviatia Standard
Mediana
Minimum
Maximum
Percentila 25
Percentila 75
Lot S M
10
35
30
25
20
Lo t Non - S M
15
10
5
5
0
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
MF I anti-C D36
7000
8000
1778
3556
5333
MFI anti-CD36
7111
M F I a n ti- C D 3 6
800 0
756 1,9
700 0
647 1,4
600 0
500 0
Media
429 0,3
400 0
300 0
210 9,3
200 0
LCI
100 0
101 8,8
31
26
21
16
11
M F I a n ti- C D 3 6
Pacienti
8000
7000
7469,2
Media + 2 DS
6214,1
6000
5000
4000
Media
3703,8
3000
2000
Media - 2 DS
1000
1193,5
36
31
26
21
16
11
-61,6
-1000
26
2664
6933
4290,34
1090,51
31
817,00
6168,00
3703,77
1255,14
4800
P = 0,0676
4600
4400
4200
4000
3800
3600
3400
3200
Lot SM
Lot Non-SM
Figura 5.44: Comparaie ntre cel dou loturi privind MFI anti - CD36 n Mo
Referindu-ne la subiecii cu AHC de HTA, am observat o tendin de cretere a
valorilor MFI anti-CD36 comparativ cu cei care nu au avut AHC de HTA (t - Test ;P = 0 ,08).
AHC HTA
M F I a n ti-C D 3 6
5000
AHC HTA
4800
P = 0,08
4600
4400
4200
4000
3800
3600
3400
DA
NU
Numr
22
Mediana
4428,00
Percentila 25
3552,75
Percentila 75
5194,75
AHC HTA absene
Numr
35
Mediana
3774,00
Percentila 25
3169,00
Percentila 75
4434,00
450
400
350
PPAR PMN
500
A.
B.
300
250
200
150
y = 61,384 + 0,882
r = 0,74;
PPAR
MoP < 0,001
50
100
150
200
250
300
350
400
y = -7,503 + 0,829 x
r = 0,79; P < 0,001
400
350
300
PPAR Ly
100
250
200
150
100
50
PPAR Mo
0
100
150
200
250
300
350
400
PPAR PMN
C.
250
500
A.
450
400
350
300
350
350
300
PPAR Ly
y = 95,668
PPAR+Ly0,919 x
r = 0,81; P < 0,001
50
100 150 200
PPAR Mo
500
450
400
350
300
250
200
150
100
50
B.
250
300
200
250
150
200
150
100
100
50
500
450
400
PPAR PMN
y = 2,505 + 0,87950x
r = 0,81; P < 0,0010
150
PPAR PMN 0
200
250
300
y = 36,665
PPAR
Mo+
0,607 x
r = 0,90; P < 0,001
50
100
150
200
250
300
350
400
450
350
400
C.
350
A. Mo vs PMN;
B. Mo vs Ly;
C. PMN vs Ly;
300
250
200
150
100
PPAR Ly
50
50
100
y = 56,641 + 1,159 x
r = 0,86; P200
< 0,001 250
150
300
350
8000
3000
B.
A.
r = 0,50; P = 0,010
7000
PPAR Eo
CD36
Tot pentru lotul SM, cnd am evaluat relaia dintre nivelul de expresie relativ a
receptorilor PPAR n Eo i nivelul de expresie relativa a receptorilor CD 36, am obinut o
corelaie negativ (r = - 0,5, P = 0,01) (fig. 5.49 A.).
2500
6000
2000
5000
1500
4000
1000
3000
500
2000
PPAR Eo
50
500
1000
1500
200
250
300
PPAR Mo
1000
0
r = 0,38; P = 0,033
100
150
2000
2500
Figura 5.49. Corelaii ntre expresia PPAR n Eo i alte tipuri de receptori investigai
A. PPAR Eo i CD 36 (Lot SM); B. PPAR Eo i PPAR Mo( Lot Non-SM)
350
400
110
r = - 0,42; P = 0,017
B.
CA
A.
110
r = - 0,46; P = 0,009
100
100
90
90
80
80
70
70
60
60
PPAR Mo
50
110
100
150
200
CA
50
C.
100
PPAR Ly
50
250
300
350
50
400
100
150
200
250
300
350
r = - 0,40; P = 0,024
90
80
70
60
PPAR PMN
50
150
200
250
300
350
400
450
400
A.
500
r =- 0, 43; P = 0,027
400
300
300
200
200
TG(mg/dl)
500
TG ( mg/dl)
100
100
0
PPAR Mo
PPAR Ly
-100
-100
50
100
150
200
250
300
350
400
50
100
150
200
250
300
350
Figura 5.51. Lot SM Corelaie ntre expresia PPAR i TG (A. Mo; B. Ly).
CD36
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
r = 0,48; P = 0,013
TAD (mmHg)
1000
70
75
80
85
90
95
100
100
90
80
70
HDL-col-(mg/dl)
Studiind corelaiile dintre receptorii PPAR i HDL-col, la subiecii din lotul martor. am
notat o asociere pozitiv ntre expresia PPAR n Mo i Ly cu HDL-col (fig. 5.53)
B.
60
50
40
30
PPAR Ly
20
r = 0,36; P = 0,046 100
r = 0,35; P = 0,05
150
200
Figura 5.53. Lot martor: Corelaii ntre HDL-col i expresia PPAR n Mo(A), Ly(B)
70
60
80
70
A.
60
50
50
40
40
30
30
20
20
10
100
HDL(mg/dl)
80
HDL( mg/dl)
n lotul normal am evideniat corelaii pozitive moderate, dar semnificative statistic ntre
CA i valorile TAS (r = 0,62; P < 0,001), respectiv TAD (r = 0,50; P=0,004), precum i ntre
CA i glicemia subiecilor normali (r = 0,52; P = 0,003). Aceste date, mpreun cu relaia
invers proporional identificat ntre HDL-col i CA (r = 0,50; P = 0,01) susin validitatea
acestui studiu. n lotul subiecilor cu SM, am observat o corelaie moderat pozitiv ntre
expresia PPAR n populaiiile de Mo i Eo i concentraia a HDL-col (fig. 5.54)
150
200
r = 0,46; P = 0,019
250
300
PPAR Mo
B.
r = 0,44; P = 0,024
10
350
400
500
1000
1500
2000
2500
PPAR Eo
250
Fibrinogen mg/dl
Acid uric(mg/dl)
B.
450
400
A.
r = 0,48; P = 0,014
r =- 0,36; P = 0,08
350
6
300
5
4
250
3
2
200
0
0
500
1000
1500
PPAR Eo_
2000
2500
500
1000
1500
2000
2500
PPAR Eoo
Figura 5.55. Lot SM: corelaia dintre expresia PPAR n Eo i acidul uric (A), respectiv
PPAR i fibrinogen (B)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
. BIBLIOGRAFIE SELECTIVA
Kahn R. Metabolic syndrome- what is the clinical usefulness? Lancet, 2008;371(9628):1892-3.
Reaven GM. The metabolic syndrome: is this diagnosis necessary? Am J Clin Nutr, 2006; 83(6):1237-7.
Grundy SM. Pre-Diabetes, Metabolic Syndrome, and Cardiovascular Risk . J Am Coll Cardiol, 2012;59(7):
635-43.
International Diabetes Federation. IDF Diabetes Atlas, 6th edn. International Diabetes Federation, Belgium,
Brussels, 2013:1-155.
World Health Organization. Global Status Report on Noncommunicable Diseases 2010. World Health
Organization Geneva, Switzerland, 2011:1-176.
Coman AE, Petrovanu R. Sindromul metabolic in practica de ambulator. Editura Pim Iai, 2009: 1-103.
Grundy SM, Becker D, Clark LT et al.Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP)
Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment
Panel III) Final Report. Circulation, 2002;106(25):3143-90.
Alberti KG, Zimmet PZ, Shaw J. Metabolic syndrome- a new worldwide definition. A Consensus Statement
from the International Diabetes Federation. Diabet Med, 2006; 23(5):469-80.
K.G. Alberti KG, Eckel RH, Grundy SM et.al. International Diabetes Federation task force on epidemiology
and prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart
Federation; International Atherosclerosis Society; International Association for the study of obesity.
Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation task
force on epidemiology and prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart
Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis society; and International Association for
the study of obesity. Circulation, 2009;120(16):1640-5.
10. Alberti KG, Zimmet PZ, Shaw J. IDF Epidemiology Task Force . The metabolic syndrome new worldwide
definition. Lancet, 2005; 366: 1059 - 62.
11. Oleszczyk M, Svab I, Seifert B et al. Primary healthcare in the developing part of Europe: changes and
development in the former Eastern Bloc countries that joined the European Union following 2004. Med Sci
Monit, 2009;(15):7884.
12. Jung, U J.; Choi, M S. Obesity and Its Metabolic Complications: The Role of Adipokines and the
Relationship between Obesity, Inflammation, Insulin Resistance, Dyslipidemia and Nonalcoholic Fatty
Liver Disease. Int. J Mol Sci, 2014;15(4): 6184-223.
13. Vanden Heuvel JP, Peters, JM. Peroxisome Proliferators. In Ramos K (ed): Cellular and Molecular
Toxicology (Second Edition), Volume 2 , New York :Elsevier Science Inc, 2010: 145 - 67.
14. Yessoufou A, Wahli W. Multifaceted roles of peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) at the
cellular and whole organism levels, Swiss Med Wkl, 2010;140:w13071. doi:10.4414/smw.2010.13071.
15. Azhar S. Peroxisome proliferator-activated receptors, metabolic syndrome and cardiovascular disease.
Future Cardiology, 2010.6(5):657-91.
16. Andries G, Fruchart JCh. Peroxisome Proliferator-Activated Receptors at the Crossroads of Obesity,
Diabetes and Cardiovascular Disease. J Am Coll Cardiol, 2006;48(Suppl):24-32.
17. Zandbergen F, Plutzky J. PPARalpha in atherosclerosis and inflammation. Biochim Biophys Acta,
2007;1771(8):972-82.
18. Straus DS, Glass CK. Anti-inflammatory actions of PPAR ligands: new insights on cellular and molecular
mechanisms. Trends Immunol, 2007;28(12):551-8.
19. Zlei M, Zugun- Eloae F, Carasevici E. Citometrie n flux - Baz i clinic. n Hinescu ME (ed) Citometrie n
flux - principii i aplicaii clinice. Bucureti, Editura Viaa Medical Romneasc, 2011:1-128
20. Fruchart JCh. Peroxisome Proliferator-Activated Receptors at the Crossroads of Obesity, Diabetes and
Cardiovascular Disease. J Am Coll Cardiol. 2006;48(9):24-32.
21. Woerly G, Honda K, Loyens M et al. Peroxisome proliferator-activated receptors alpha and gamma downregulate allergic inflammation and eosinophil activation. J Exp Med, 2003;198(3):411-21.
22. Salle-Saumont D, Brenuchon C, Kanda A et al. Peroxisome proliferator-activated receptor alpha regulates
skin inflammation and humoral response in atopic dermatitis. J Clin Allergy Immunology, 2008; 21(4):962-8
23. Schote A, Turner J, Schiltz J et al. Nuclear receptors in human immune cells: expression and correlations.
Mol Immunolog, 2007;44(6):1436-45.
24. D'Amore S, Vacca M, Graziano G et al. Nuclear receptors expression chart n peripheral blood mononuclear
cells identifies patients with Metabolic Syndrome. Biochim Biophys Acta, 2013;1832(12):2289-301.
25. Uthurralt J, Gordish-Dressman H, Bradbury M, T et al. PPARalpha L162V underlies variation in serum
triglycerides and subcutaneous fat volume in young males. BMC Med Genet, 2007;8:55.
26. Hiukka A, Leinonen ES, Jauhiainen M. et al. Long-term effects of fenofibrate on VLDL and HDL
subspecies n participants with type 2 diabetes mellitus. Diabetologia , 2007; 50(10):2067-75.
27. Robins SJ, Rubins HB, Faas FH et al.Insulin resistance and cardiovascular events with low HDL cholesterol.
The Veterans Affairs HDL Intervention Trial (VA-HIT). Diabetes Care, 2003; 26(5):1513-7.
28. Devaraj S, Siegel D, Jialal I. Statin Therapy in Metabolic Syndrome and Hypertension Post-JUPITER:
What is the Value of CRP? Curr Atheroscler Rep, 2011; 13(1): 3142.
29. Imperatore G, Riccardi G, Iovino C et al. Plasma Fibrinogen: A New Factor of the Metabolic Syndrome: A
population-based study. Diabetes Care, 1998;2 1(4):649-54.
30. Krysiak R, Gdula-Dymek A, Bachowski R, Okopien B. Pleiotropic effects of atorvastatin and fenofibrate
in metabolic syndrome and different types of pre-diabete. Diabetes Care, 2010;33(10):2266-70.
31. Hermans MP. Impact of Fenofibrate on Type 2 Diabetes Patients with Features of the Metabolic Syndrome:
Subgroup Analysis From FIELD. Curr Cardiol Rev, 2010;6(2):112-8.
32. Silverstein R. Inflammation, atherosclerosis, and arterial thrombosis: Role of the scavenger receptor CD36.
Cleveland Clinic Journal of Medicine, 2009;76(Suppl 2):S27-S30.
33. Hncu N. Obezitatea. In Vereiu IA (ed), Diabetul zaharat, nutritia si bolile metabolice, Volume 2. Editura
Echinox, Cluj- Napoca, 2010: 1-15.
2. Elena Popa, Agnes Bacusca, Alamir Diaa, Maria Maidaniuc, Rodica Petrovanu,
Adorata Elena Coman. The function of insulin receptor (IRF) in evolution of obesity,
correlation with adipocytes diameters. Archives of the Balkan Medical Union,
2014;49(3): 275-9.
3. Elena Popa, Florin Zugun-Eloae, Mihaela Zlei, Daniela Jitaru, Oana Maria Pintilie,
Adorata Elena Coman, Maria Traian, Didona Anca Ungureanu, Eugen Carasevici acceptata pentru numarul 4/2014, Flow cytometry analysis of PPAR-alpha receptors in
metabolic syndrome), Revista Roman de Medicin de Laborator.(RRLM-D-1400034R1- adeverina ataat.