Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Introducere2
I.
II.
Scurt istoric.6
III.
Generaliti.8
Activitatea catalitic.16
VI.
Mecanismul de aciune.20
INTRODUCERE
nc din antichitate se cunoteau diferite procese de transformare
realizate de ctre organismele vii, n special microorganisme (obinerea
vinului, oetului, pinii etc.). Mult timp ns, mecanismele moleculare ce
stau la baza acestor procese, locul i rolul enzimelor n desfurarea lor au
rmas total necunoscute. Chiar i astzi, multe mecanisme de aciune ale
enzimelor precum i unele procese biochimice rmn nc neelucidate.
Primele noiuni tiinifice de enzimologie apar la nceputul secolului
XIX ns dezvoltarea rapid a acestei ramuri a biochimiei s-a realizat abia n
ultimele decenii. innd cont de multitudinea proceselor biochimice
neelucidate nc, precum i de importana practic imens a enzimelor
(acestea constituind obiectul de studiu al unuia din domeniile prioritare ale
biotehnologiei) se poate afirma cu certitudine c i n secolul XXI
enzimologia va cunoate o dezvoltare spectaculoas.
Primele date tiinifice ce au condus mai trziu la definirea noiunii de
enzim au aprut n 1833 cnd Persoz i Payen obin un principiu activ
din extractele apoase de germeni de orz, capabil s hidrolizeze amidonul.
Prin precipitri repetate cu etanol, autorii reuesc s l purifice sub forma
unei pulberi, numind preparatul obinut diastaz (gr. =
separare).
Dup formularea conceptului de cataliz de ctre Berzelius n 18341837, acesta sugereaz c diferite fenomene biologice cum ar fi digestia i
fermentaia pot fi realizate de unii catalizatori specifici lumii vii. n perioada
imediat urmtoare, aceast teorie a fost confirmat prin descoperirea
pepsinei gastrice, a emulsinei din migdale, lipazei i tripsinei pancreatice,
invertazei din drojdii i a altor enzime. Pentru toate aceste substane, Khun
propune n 1877, denumirea de enzim care, n limba greac nseamn n
drojdii. n perioada respectiv se mai utiliza i termenul de ferment (de la
latinescul ferveo = fierbere), ns primul termen a fost treptat acceptat de
marea majoritate a cercettorilor.
n 1860 ncepe o disput tiinific ntre Pasteur i Liebig, nerezolvat
timp de 37 de ani. n aceast disput, Pasteur susinea noiunea de fermeni
organizai, atribuit celulelor microbiene integre capabile s realizeze
procese fermentative, n timp ce Liebig utilizeaz noiunea de ferment
solubil pe care o atribuie principiului activ sintetizat de celulele vii i nu
celulelor intacte. Teoria lui Liebig a avut ctig de cauz, fiind confirmat n
1897 de ctre fraii Bchner care au demonstrat c extractul acelular obinut
din celule de Saccharomyces cerevisiae pstreaz ntreaga activitate
catalitic a celulelor din care a fost obinut.
La sfritul secolului XIX apare i prima teorie asupra mecanismului
de aciune a enzimelor i anume teoria lactului i a cheii elaborat de
Fischer, conform creia, n procesul catalitic, enzima recunoate substratul
datorit unei similitudini structurale ntre molecula substratului i centrul
activ al enzimei, aceast asemnare fiind comparat cu cea existent ntre un
lact i cheia lui.
Chiar i dup elaborarea acestei teorii, structura chimic a enzimelor a
rmas foarte mult timp neelucidat. Astfel, ediia din 1929 a Enciclopediei
Britanice arat c enzimele par a fi proteine, dar aceasta nu este sigur.
n primii ani ai secolului XX se pun bazele cineticii enzimatice prin
cercetrile lui Henri i Brown, iar n 1913 se realizeaz prima exprimare
matematic a cineticii reaciilor enzimatice cu un singur substrat de ctre
Michaelis i Menten. Studiile de cinetic enzimatic au fost ulterior
3
ENZIMELE
I.
Imagine
de
tip
panglic
gliceraldehida 3 fosfat
II.
Scurt istoric.
III. Generaliti.
Enzimele sunt catalizatori biochimici propriu-zii, aadar sunt
compui care mresc viteza reaciilor chimice ce se desfoar in sistemele
biologice, fr sa se consume in cursul lor.
S-au efectuat lucrri numeroase de-a lungul anilor dovedindu-se prin
acestea ca enzimologia constituie studiul bazelor moleculare ale vieii.
Enzimele sunt probabil mai importante dect orice alt element activ ca
ajutor al digestiei i sntii. Pana acum s-a artat ca sute de enzime au un
rol vital n construirea sntii, datorita contribuiei lor la procesul de
digestie. Studiile viitoare probabil vor arata ca enzimele au un rol mult mai
important pentru sntate dect se cunoate in prezent.
Nu putem trai mult fr enzime. De fapt, concepia n sine este
dependenta de aceste elemente. Ele funcioneaz ca un catalizator care face
ca celulele corpului sa funcioneze eficient. Din momentul naterii, enzimele
fac viata posibila prin aciunile lor, reparnd i construind corpul si celulele
creierului. Aceti lucrtori acioneaz n corp i n creier in cel mai fantastic
si puternic mod. Ele lucreaz pentru o sntate deplina. Enzimele reprezint
nsi fora intangibila a vieii. Omul nu poate reui sa creeze enzime vii aa
cum natura poate crea. Daca ar fi putut, ar fi reuit sa creeze viata sau sa
readuc la viata materia moarta.
Exista miliarde de enzime in corpul nostru, si sunt sute de tipuri
diferite de enzime gsite n snge, care vor descompune 5 milioane de
molecule de peroxid in apa si oxigen in 60 secunde. Enzimele intestinale pot
descompune moleculele de zahar si grsimi care sunt de 1 milion de ori mai
mari dect greutatea lor.
Corpul nostru produce enzime atunci cnd sntatea noastr este
echilibrata. Ele efectueaz toata munca din corp. Ele sunt responsabile cu
lupta mpotriva infectiilor, cu digestia, cu refacerea corpului funciile lor
sunt infinite. Ele lucreaz non-stop si nu obosesc niciodat sau nu-si
nceteaz lucrul daca sntatea este echilibrata. Cnd sntatea nu este in
echilibru, atunci este o deficienta enzimatica. Enzimele pot fi uor extrase
din alimente nutritive uor de digerat, care sunt alimente crescute intr-un sol
sntos, nefertilizat, si care sunt preparate special prin mixare, germinare,
fermentare si cantiti mici de suc, nu prin gtire. Aceste enzime extind
energia vitala a corpului ctre o stare totala de bine. Consumarea alimentelor
sntoase este cea mai eficienta cale de a suplimenta rezerva de enzime
existenta in corp, pentru a mbunti sistemul digestiv. Cele mai importante
enzime care au fost izolate in hrana sntoasa sunt: cytochrome oxidase, un
8
10
11
4. Structura secundar.
Acest nivel de organizare structural se poate materializa n dou
moduri: structura helicoidal ( -helix) generat de formarea punilor de
hidrogen ntre oxigenul carbonilic al unui rest de aminoacid i hidrogenul
iminic al altui rest de aminoacid din aceeai caten polipeptidic i respectiv
structura -pliat cnd legturile de hidrogen se formeaz ntre aceeai
atomi, dar sunt intercatenare.
n acest din urm caz, straturile -pliate pot avea structur paralel
(cnd o extremitate a moleculei conine capetele N-terminale, iar cealalt
12
5. Structura teriar.
Structura teriar este dat de superspiralizarea catenei (catenelor)
polipeptidice ntr-o structur spaial complex sub form de ghem
(globul). Superspiralizarea este generat de formarea punilor disulfidice
ntre resturi de cistein aflate n locuri total diferite ale catenei polipeptidice.
Majoritatea proteinelor native au o structur spaial compact determinat
14
15
6. Structura cuaternar.
Este cel mai nalt nivel de organizare structural, ntlnit doar la
unele proteine (enzime). Prin structura cuaternar se nelege asocierea a
dou sau mai multe catene polipeptidice (monomeri, protomeri), fiecare cu
structura ei primar, secundar i teriar, ntr-o arhitectur spaial
complex (oligomeri). Subunitile componente ale unei macromolecule
proteice cu structur cuaternar pot fi separate prin metode specifice, relativ
blnde, fr ruperea vreunei legturi covalente.
Stabilizarea structurii cuaternare se realizeaz prin formarea de
interaciuni ntre subuniti, pe seama grupelor funcionale libere ionizate,
gruprilor hidrofobe, grupelor sulfhidrilice etc. Molecula tinde s formeze,
att n interiorul ei ct i cu moleculele solventului, un numr de legturi ct
mai mare posibil, deci tinde spre un nivel minim al energiei libere i o
stabilitate maxim. Pentru majoritatea enzimelor, acest nivel minim de
energie este atins spontan i corespunde conformaiei lor biologic active (fig.
23).
Unele enzime cu structur cuaternar prezint activitate catalitic doar
n forma oligomer, n timp ce la altele, activitatea catalitic este decelat
att la forma nativ ct i la subunitile separate. ntr-o enzim oligomer,
subunitile pot fi identice sau diferite. n general, enzimele sunt compui
macromoleculari, cu mas molecular extrem de variat care oscileaz ntre
10.000 i cteva milioane de daltoni (1 dalton = 1/12 din masa atomic a 12C,
adic 1,66.10-24 g).
Fiind proteine, enzimele prezint toate proprietile fizico-chimice ale
acestor compui printre care i capacitatea de a precipita sub aciunea unor
factori specifici. n funcie de comportarea moleculelor dup ndeprtarea
agentului precipitant, aceasta poate fi de dou tipuri: precipitare reversibil
i ireversibil sau denaturare.
V.
Activitatea catalitic.
16
enzimatice care abia ele pot reaciona cu oxigenul. Sunt mai multe ci
posibile prin care hidrogenul substratului poate ajunge la oxigen. Un astfel
de lan de reacii este redat n urmtoarea schem.
Hidrogenul cedat de substratul AH2, de exemplu codehidrazei I, este
transferat flavin-adenin-dinucleotidei. De aici nainte, atomii de hidrogen se
desfac n protoni i electroni: primii trec n soluie (sub form de ioni de
hidroniu), iar electronii reduc fierul din citocrom, de la starea trivalent la
starea bivalent. Citocromul c redus reduce citocromoxidaza (citocrom a3)
care este singur capabil de a ceda electroni oxigenului. Citocromii sunt
deci transferaze de electroni (oxidaze aerobe). n schema de mai sus sunt
identificate (pe rndul de jos) enzimele ce acioneaz n acest proces
complicat.
Ared + Box
NAD
COOH
H C OH
CH3
D(+)lactat
NADH+H
COOH
C O
L.D.H
CH3
piruvat
Gliceraldehid-3-fosfat
Acetaldehid
Aceste reacii
conjugate prezint o deosebit
importan pentru
AlcoolGliceraldehidfosfat-dehidrogenaza
dehidrogenaza
procesele redox ce au loc n celulele vii deoarece permit refacerea continu a
acceptorilor de hidrogen.
Acid 1-3-difosfogliceric
NADH+H
Etanol
A R + B
transferaz
A +
B R
-Aminoacid I
COOH
COOH
C=O
H C NH 2
COOH
C=O
Aminotransferaz
R2
-Cetoacid I
R2
-Aminoacid II
R1
-Cetoacid II
24
S OH + R H
participarea apei:
Dei reaciile sunt reversibile, in vivo echilibrele sunt deplasate n
sensul hidrolizei, n timp ce procesele inverse au loc, de regul, pe alte ci
metabolice. Reacii hidrolitice se ntlnesc n aproape toate cile metabolice,
hidrolazele participnd att la metabolismul glucidelor, lipidelor i
proteinelor, ct i n metabolismul produilor secundari.
Clasificarea hidrolazelor n subclase i subsubclase se face n funcie
de natura legturii chimice ce urmeaz a fi scindat. Pentru hidrolazele
implicate n scindarea hidrolitic a diferitelor tipuri de esteri este intrat n
uz denumirea generic de esteraze. O esteraz foarte cunoscut este lipaza a
crei denumire sistemic este triacilglicerol-acil-hidrolaza (EC 3.1.1.3) i
care este implicat n scindarea hidrolitic a triacilglicerolilor:
CH 2 O CO R1
lipaza
CH O CO R2 + 3 H 2O
CH 2 O CO R3
triacilglicerol
CH2 OH
CH OH
CH2 OH
glicerol
R1 COOH
R2 COOH
R3 COOH
acizi grasi
,
25
CH OH
fosfataz
CH 2 OH
- Glicerofosfat
H3PO4
CH 2 OH
Glicerol
O CH2 O
CH2 O
D-frutozo1,6-difosfat
CH2 O P
C O
CH2 OH
dihidroxiacetonfosfat
H C O
H C OH
CH2 O
D-gliceraldehidfosfat
H
H
C O
C OH
CH2 O
D-gliceraldehidfosfat
PPi
H2NCHCOOH
E [H2NCHC ~ OAMP]
aminoacil-ARNt -sintetaza
ARN t
Enzim
E [H2NCHC ~ OAMP]
R
AMP
H2NCHC ~ ARN t
aminoacil-ARNt -sintetaza
aminoacil-AMP
(complex ES)
R
aminoacil-ARN t
29
30
31
BIBLIOGRAFIE
Tma V.,Biochimie,
Bucureti, 1975.
32