ENZIME

Enzime alosterice
Reglarea activitii enzimelor
Izoenzime
Complexe multienzimatice

ENZIME ALOSTERICE
Sunt enzime oligomere care au cte un
centru catalitic pe fiecare protomer
Curbele v = f[S] sunt sigmoide
Vmax se atinge atunci cnd toate centrele
active sunt ocupate cu substrat
Fixarea lui S pe un centru uureaz legarea
S ntr-un alt centru, situat pe alt protomer;
cele dou centre coopereaz prin
intermediul ntregii molecule proteice

Enzime alosterice
Enzima posed 2 centre: centru catalitic i un
centru alosteric (allos = altul) pe acelai
protomer dar ntr-o regiune diferit, unde se
poate lega un compus distinct de substratul
enzimei, denumit efector alosteric
Ocuparea cu ligand a centrului alosteric
induce o tranziie conformaional resimit i
de centrul de legare a substratului, fie n
sensul creterii afinitii, fie n sensul scderii
afinitii sale pentru substrat

Enzime alosterice
Efectorul alosteric poate fi: activator
(efector pozitiv) sau inhibitor
(efector negativ)
Se pot comporta ca PROTEINE
ALOSTERICE i alte proteine ca:
proteine de transport (ex.
hemoglobina), receptori hormonali
Sunt enzime reglatoare ale
etapelor cheie din cile
metabolice; reaciile catalizate

Vo
+ e fe ctor
pozitiv
F r e fe ctor

+ e fe ctor
ne ga tiv

[S ]

Enzime alosterice
Au structur cuaternar, numrul
protomerilor fiind par (2, 4, 6, etc)
Reglarea alosteric se face cu consum
minim de energie deoarece interaciunile
dintre protomeri nu implic rupere de
legturi covalente iar efectorii se afl
curent n fondul metabolic celular
Exist 2 modele de aciune:
Modelul concertat (simetric)
Modelul secvenial

Modelul simetric
Fiecare dintre subuniti poate exista
ntr-o conformaie relaxat (R) cu
afinitate mare pentru substrat i
o conformaie tensionat (T) cu
afinitate mic pentru substrat
Activatorii stabilizeaz starea R
iar inhibitorii stabilizeaz starea
T.

Modelul secvenial

Reglarea activitii
enzimelor
Viteza reaciilor enzimatice depinde
de doi factori:
Cantitatea de enzim
Eficiena enzimelor n calitate de
catalizatori

Reglarea cantitii de
enzim
Cantitatea oricrei proteine prezent la un
moment dat ntr-o celul depinde de dinamica
proceselor de biosintez i de degradare
Exist 3 categorii de enzime:
1.ENZIME CONSTITUTIVE enzime la care Ks =Kd
(constanta de sintez=constanta de disociere); ele
catalizeaz procese fundamentale pentru
existena celulei. Se gsesc n celule n cantiti
relativ constante. Nu sufer fluctuaii
semnificative n raport cu factorii de mediu.

Reglarea cantitii de
enzim
2. ENZIME INDUCTIBILE sunt enzimele pentru
care Ks>Kd; sunt implicate n general n ci
catabolice. Enzima este sintetizat numai
dac exist substratul asupra cruia s
acioneze. Substratul acioneaz ca inductor,
accelernd sinteza enzimei;
3. ENZIME REPRESIBILE sunt enzimele pentru
care Ks<Kd; pot fi implicate n procese de
sintez a unor constitueni celuari (ci
anabolice). Sinteza lor este ncetinit de
produsul final al reaciei catalizate.

Reglarea cantitii de
enzim
Represia se face de obicei prin
intermediul unor compui cu
molecula mic numii corepresori,
care acioneaz sub forma unor
complexe cu proteine specializate
numite aporepresori.

Reglarea eficienei catalitice a

enzimelor
1. Reglarea prin concentraia
substratului
A

E1

E2

E3

E1

E2

E3

Feed-forward stimulare

Reglarea eficienei catalitice a

enzimelor
2. Reglarea prin produsul final (feedE
E
E
back inhibiie)
A
B
C
P
D
1

E1

B
-

E2

E3

P1

E4

P2

Reglarea covalent
Presupune:
1. Transformarea unor enzime din forma
activ n forma inactiv i invers prin
ruperea unor legturi covalente
Enzimele se numesc enzime
interconvertibile
Conversia se face prin fosforilare sau
nucleotidilare (adugarea revesibil a
unui nucleotid la un aminoacid specific ;
predominant la bacterii)

Enzime interconvertibile prin

fosforilare-defosforilare
Fosforilarea se face prin transferul
unui singur rest de acid fosforic
de pe ATP pe un rest de Ser, mai
rar Thr sau Tyr, care nu fac parte
din centrul activ al enzimei
Fosforilrile sunt catalizate de
kinaze specifice (care sunt i ele
enzime interconvertibile) supuse
unui control hormonal
Reaciile de fosforilare sunt

ATP

Protein
kinaza

Enz - OP

Enz - OH

Pi

ADP

Protein
fosfataza

H2O

Enzime interconvertibile prin

fosforilare-defosforilare
Defosforilarea este tot
ireversibil; se face prin hidroliz n
prezena unor fosfataze, supuse i
ele unui control hormonal
Unele enzime sunt active n
forma fosforilat, altele n forma
defosfo

Reglarea covalent
2. Trecerea enzimelor inactive n enzime active

prin proteoliz (ruperea unor legturi

covalente); procesul este unidirecional
Proenzimele (zimogenii) sunt forme
inactive produse la locul de sintez,
activarea acestora urmnd s se fac la
locul de aciune
Activarea lor se face sub influena factorilor
de mediu i autocatalitic, printr-un proces
ireversibil de rupere a unor legturi
peptidice specifice

Reglarea covalent prin

proteoliz
Existena zimogenilor este o
modalitate de a obine foarte rapid,
prin transformri minore, cantiti
mari de enzime active
Exemple:
Enzimele proteolitice digestive
Enzimele coagulrii sngelui
Enzimele sistemului complement

Enzimele proteolitice
digestive
Pepsinogenul este transformat iniial n pepsina
activ datorit aciditii sucului gastric i apoi
autocatalitic (transformarea presupune ndeprtarea
unui segment terminal de 44 aminoacizi care masca
centrul activ al enzimei
Tripsinogenul este transformat n tripsin iniial sub
aciunea enteropeptidazei /enterokinaz (n
duoden) i apoi autocatalitic; se ndeprteaz
fragmentul N-terminal de 6 aminoacizi. Tripsina activ
poate activa tripsinogenul, chimotripsinogenul,
proelastaza i procarboxipeptidaza. Zimogenii
pancreatici se activeaz cnd coninutul stomacal a
ajuns n duoden.

Enzimele proteolitice
digestive
Chimotripsinogenul este
transformat n chimotripsin prin
ndeprtarea a 2 dipeptide de ctre
tripsina activ.

Izoenzimele
Sunt proteine oligomere, prezente la
aceeai specie, care catalizeaz
aceeai reacie n toate esuturile, dar
care difer prin una sau mai multe
nsuiri
Ele sunt diferite structural i distribuite
diferit n anumite esuturi
Diferenele structurale determinri la
rndul lor diferene de pI, mobilitate
electroforetic i mas molecular

Izoenzimele
Izoenzimele pot avea afiniti
diferite fa de acelai substrat,
sensibiliti diferite la aciunea
unor efectori alosterici i
specificiti distincte pentru
coenzime.
Exemple:
Izoenzimele lactat dehidrogenazei (LDH)
Izoenzimele creatin kinazei (CK)

Complexe multienzimatice
Sunt asamblri de diferite enzime ntr-un
complex cu scopul de a crete eficiena
global a unui proces care implic
parcurgerea unui numr mare de reacii
Intermediarii de reacie trec pe rnd de
la un centru activ la altul, fr s
difuzeze i s se dilueze n mediu
Reaciile secundare sunt minimalizate
Exemple: acid gras sintaza, complexul
piruvat dehidrogenazei