Reactia de fixare a complementului

Serul e pus in contact cu antigen viral si complement in cantitate cunoscuta. In cazul

prezentei anticorpilor specifici in serul de cercetat, formarea complexelor antigen-
anticorp va determina activarea si fixarea complementului. Prin adaugarea de eritrocite
marcate cu anticorpi anti-eritrocitari se determina prezenta de complement liber (nefixat).
Rezultat negativ – prezenta de complement liber (nefixat) tradusa prin hemoliza.
Rezultat pozitiv – absenta complementului liber, datorita fixarii sale in complexele
antigen viral-anticorp specific, tradusa prin absenta hemolizei.

Reactia de fixare a complementului se bazeaza pe proprietatea sistemului C de a se fixa

pe complexul imun ag-ac. In prima faza a reactiei se introduce serul de cercetat, iar daca
acest ser contine ac specifici fata de ag cunoscut se va forma un complex ag-ac, urmat de
fixarea C care se va activa pe calea clasica si nu va mai fi disponibil pentru a se fixa pe
sistemul hemolitic indicator (hematii + ac antihematici). In cazul in care serul de cercetat
nu contine ac specifici, atunci nu va mai avea loc formarea unui complex in prima etapa.
Dupa introducerea in reactie a sistemului hematii + ac antihematici, C liber se va fixa pe
acestea si le va liza, hemoliza fiind observabila cu ochiul liber.

Reactia de fixare a complementului (RFC): Ag este incubat o perioada de timp cu serul

de testat in prezenta complementului provenit de la cobai. Daca sunt prezenti anticorpii
specifici, acestia vor reactiona cu Ag si vor forma complexe imune care vor lega
complementul si ii vor bloca functia. In  absenta Ac specifici nu se vor forma complexe
imune, iar complementul liber va induce liza amestecului hemolitic alcatuit din eritrocite
de oaie si hemolizina monoclonala.
In cazul prezentei anticorpilor specifici rezultatele vor fi exprimate semicantitativ sub
forma de titruri.
Inainte de testarea propriu-zisa, serul este decomplementat prin incubare 30 minute la
56ºC si folosit in decurs de 8 ore; in cazul in care testul se va efectua dupa o perioada mai
mare de timp, serul va trebui sa fie din nou decomplementat prin incubare 10 minute la
56ºC.