Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
* EXAMINAREA CULTURILOR:
- in scopul identificarii (prezumptive, a agentului etiologic)
1
-opacitate: opace, semitransparente, translucide, transparente (ca picatura de roua/
Vibrio cholerae),
- consistenta: cremoasa, mucoasa, vascoasa, friabila,
- aderenta la mediu: aderenta, inclavata in mediu sau se desprinde usor,
- miros caracteristic: flori de tei (Pseudomonas aeruginosa),
-pigment caracteristic- pigment alb, citrin, portocaliu/ auriu (Staphylococcus spp),
pioverdina, picianina, piorubrina (Pseudomonas aeruginosa) etc.,
- gradul de suspensionare in ser fiziologic: in tehnica de aglutinare pe lama- formeaza
suspensie omogena sau suspensie granulara (grunji in ser fiziologic),
● prezenta hemolizei:
- tipul hemolizei: completa (beta/ β), incompleta (alfa/ ά),
- raportul intre marimea coloniei si aria zonei de hemoliza:
- Streptococcus pyogenes: colonie punctiforma sau 0,5 – 1 mm, rugoasa sau mucoasa
(forma virulenta, capsulata), cu zona larga de hemoliza completa in jur,
- Staphylococcus aureus: colonie 1- 2 mm, cremoasa, suprafata lucioasa, margini
regulate, bombata, pigmentata, cu zona f subtire, imperceptibila de hemoliza in jur,
● fenomenul de invazie:
- caracteristic pentru genul Proteus (Proteus mirabilis si Proteus vulgaris): crestere a
culturii in cercuri concentrice, invazia poate ocupa toata suprafata placii. Invazia poate fi
oprita, inhibata, prin adaugarea in mediu de saruri biliare (MacConkey, ADCL),
thiosulfat de sodiu (AABTL), ceea ce permite obtinerea de colonii izolate. Daca se
insamanteaza doua tulpini diferite de Proteus, la intalnirerea zonelor de invazie, se
formeaza o linie de demarcatie (Fenomen Dienes).
* gradul de turbiditate:
- turbiditate absenta,
2
- turbiditate prezenta:
- turbiditate moderata sau intensa,
- sub aspect granular sau sub forma de flocoane,
* formare de depozit:
- depozit absent,
- depozit prezent:
- cantitativ: putin, abundent,
- depozit floconos, aderent de fundul tubului, cu mediu clar deasupra (Bacillus
anthracis),
- granular, dezintegrabil sau nu prin agitare, cu pastrarea mediului clar deasupra lui,
(Streptococcus spp)
* formare de val:
- val absent,
- val prezent: in ●meningita tuberculoasa, mentinerea la frigider (+4ºC) a 2-3 mL LCR,
permite formarea unui val membranos, a unei membrane groase, plisate, la suprafata
lichidului, format din fibrina, celule inflamatorii si bacili BAAR. Etalarea valului pe lama
de microscop si colorarea lui Ziehl – Neelsen, permite vizualizarea BAAR.
●val subtire la suprafata mediului: Vibrio cholerae,
* crestere in suprafata:
- absenta,
- prezenta:
- crestere uniforma, cu inel aderent de pereti, la suprafata mediului (Escherichia coli),
- pelicula aderenta, uscata, la suprafata (bacilli aerobi sporulati/ Bacillus subtilis),
* miros:
- absent,
-prezent: aromat (Ps. aeruginosa), de indol (Enterobacteriaceae), de “corn ars”
(anaerobi, Clostridium tetani), fecaloid (E. coli)
* culoare:
- verde: pigment eliberat de Ps. aeruginosa,
- rosu: Serratia marcescens etc
3
Interpretare:
* Test (+): orice zona de inhibitie a cresterii in jurul discului de bacitracina (tulpina
sensibila la bacitracina, este inhibata cresterea ei, nu mai elibereaza hemolizine,
hematiile raman integre in jurul discului, rezulta zona circulara, rosie, in jurul
comprimatului de bac),
* Test (-): tulpina de streptococ beta hemolitic este rezistenta la bacitracina, cultura
creste pana in marginea discului impregnat cu bacitracina, elaboreaza hemolizine,
lizeaza hematiile din mediu, rezulta zona clara de hemoliza beta in jurul
comprimatului).
4
* MIU (mobilitate, indol, uree):
- mediu utilizat pentru triajul bacteriilor din familia Enterobacteriaceae, in ceea ce
privesc: producerea de ureaza, indol si a mobilitatii,
- mediul contine: uree, peptone, triptofan, rosu fenol drept indicator de pH,
- este solidificat in coloana, ca geloza moale, care permite vizualizarea mobilitatii
microorganismului insamantat, prin opacizarea mediului ,
- hidroliza ureei (producerea de ureaza/ la Proteus, Providencia, Morganella)
alcalinizeaza mediul (din roz, culoarea vireaza in rosu portocaliu intens),
- producerea de indol este evidentiata prin inrosirea benzii impregnate cu reactiv Kovacs.
(indol+ la E. coli, Proteus vulgaris)
Citire, interpretare:
- opacifiere numai in lungul traiectului de insamantare: bacterie imobila,
- coloana de mediu opacifiata: bacterie mobile,
- coloana alcalinizata (rosie): ureaza pozitiva,
- culoarea coloanei nemodificata: ureaza negative,
- inel rosu limitat la suprafata mediului: alcalinizare nespecifica,
- hartia indicator rosie: indol pozitiv,
- hartia galbena, nemodificata: indol negativ.
Caracterul cultural (in special al coloniilor izolate, cu morfologie caracteristica pe
medii corespunzatoare, nutritive sau diferentiale) poate oferi elemente suficiente pentru
un diagnostic prezumptiv, foarte important pentru orientarea in instituirea
tratamentului empiric.
In continuare, se face:
a) selectionarea coloniilor si repicarea lor in functie de:
- aspectul coloniei,
- natura prelevatului,
- diagnosticul clinic,
- rezultatul examenului bacterioscopic al produsului patologic,
b) identificarea speciei bacteriene (corelarea caracterelor morfologice, culturale,
metabolice, antigenice si de patogenitate).