Bacili Gram pozitiv

nesporulaţi, neacidorezistenţi
• Genul Corynebacterium
• Genul Rhodococcus
• Genul Actinomyces

Microbiologie
 Genul Corynebacterium
Taxonomie Diviziune - Actinobacteria
Clasa - Actinobacteria
Ordin - Corynebacteriales
Familie - Corynebacteriaceae
Gen - Corynebacterium
• Genul Corynebacterium include peste 90 de specii
• Corynebacterium diphteriae - specia tip
• Corynebacterium pseudotuberculosis (iniţial Corynebacterium ovis)
• Corynebacterium renale
• Corynebacterium pilosum
• Corynebacterium cystitidis
• Corynebacterium auriscanis
 Morfologie
• germeni polimorfi, predominant bacili
Gram pozitiv (1-8 μm / 0,3-0,8 μm),
imobili
• morfologie tipică (coryne - măciucă)
cu dilataţii terminale la unul sau la
ambele capete datorită prezenţei
unor granulaţii metacromatice
• nesporulaţi, necapsulaţi, neciliaţi,
unele specii prezintă fimbrii
• grupaţi în aglomerări neregulate, tip
palisade sau ca litere chinezeşti
• Coloraţie Ernst-Neisser permite
vizualizarea granulaţiilor metacromatice
Condiţii de cultivare - Caractere culturale
• Genul Corynebacterium se cultivă pe medii îmbogăţite cu ser sanguin sau
gălbenuş de ou
• Tip respirator: aero-anaerob; anumite tulpini preferă atmosfera îmbogăţită
cu CO2 → incubare la 37oC , perioada de incubare 24 - 48 ore
• Pe mediu lichid → turbiditate variabilă, uneori peliculă, depozit granular
• Pe mediu solid → colonii mici (< 0,5 mm) sau mijlocii (> 2 mm), opace /
semiopace, de tip S cu posibilitate de disociere în tip R sau chiar tip M, albe
sau nepigmentate, excepţie Corynebacterium pilosum pigmentate galben
• Agarul din sânge cu telurit de potasiu este un mediu selectiv utilizat
pentru izolarea și cultivarea speciilor de Corynebacterium. Teluritul de potasiu
din agar acționează ca un agent selectiv având activitate inhibitoare împotriva
majorității bacteriilor Gram-pozitiv și Gram-negativ, cu excepția speciilor
Corynebacterium
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Corynebacterium dipheriae reduce teluritul de potasiu în telur şi datorită producerii de

H2S apar colonii mici, de culoare negru-brun, înconjurate de un halou brun (β-hemoliză).
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Colonii de Corynebacterium ssp, cultivate pe TSA cu 5% sânge de oaie timp de 24 de

ore la 37oC și cu 5% CO2. Rețineți coloniile foarte mici
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Corynsbacterium diphteriae, cultivat aerob

pe agar cu sânge de bovine la 37oC timp de
24 de ore.
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Corynebacterium auriscanis, cultivat aerob pe

agar cu sânge de ovine 24 de ore la 37oC
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Corynebacterium pseudotuberculosis
Caractere biochimice  Reacţii constant pozitive:

control pozitiv negativ

Urează (+):
Corynebacterium secretă urează
Catalaza (+): şi transformă ureea în carbontat de
amoniu, schimbând pH-ul mediului
Suspensia de Corynebacterium
depusă peste o picătură de
peroxid de hidrogen determină
formarea bulelor de O2 datorită
catalazei care descompune H2O2
Caractere biochimice  Reacţii constant pozitive:
Hemoliză (+) amplificată prin test CAMP pentru C. pseudotuberculosis

Corynebacterium pseudotuberculosis - hemoliză difuză de tip beta, zonă îngustă

Conduita diagnosticului etiologic
• probele recoltate în funcţie de natura infecţiei :
- infecţii uro-genitale (tripleta Corynebacterium renale, Corynebacterium
pilosum, Corynebacterium cystitidis)
- Corynebacterium pseudotuberculosis produce limfadenita cazeoasă la oi
şi capre şi limfangita ulceroasă la cai
- Corynebacterium auriscanis produce otite la câine

Creșterea Corynebacterium
diphtheriae pe mediu Loeffler
 Genul Rhodococcus
Taxonomie
Diviziune - Actinobacteria
Clasa - Actinobacteria
Ordin - Actinomycetales
Subordin - Corynebacterineae
Familie - Nocardiaceae
Gen - Rhodococcus
• Genul Rhodococcus include peste 50 de specii
• Rhodococcus equi sau bacilul lui Magnusson - specia tip
 Morfologie
• dimorfism deoarece poate suferi diferite
etape morfologice în timpul culturii de la
bacili (faza exponenţială) la
coc/cocobacil (faza staţionară)
• pe mediu solid grupaţi specific
corynebacteriilor
• Gram pozitiv
• nesporulaţi, capsulaţi, neciliaţi
• formează colonii mari
Condiţii de cultivare - Caractere culturale
• Genul Rhodococcus se cultivă pe medii uzuale
• Tip respirator: aero-anaerob → incubare la 37oC , perioada de incubare 48 -
72 ore
• Pe mediu lichid → turbiditate accentuată, peliculă, depozit abundent
• Pe mediu solid → colonii mari, sclipitoare, opace / semiopace, de tip S cu
posibilitate de disociere în tip M, pigmentate galben-roz sau crem
• coloniile curg împreună pe placa de agar datorită
producţiei de mucus (capsulă)
• pe agar de lactoză purpurie coloniile devin roz
somon datorită producţiei unui pigment (caroten)
• miros tipic (beci subteran sau pară putredă)
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Colonii galbene şi crem de tuplini Rhodococcus equi cultivate aerob pe agar cu sânge bovin
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Detaliul coloniilor de tulpină Rhodococcus equi

cultivate aerob pe agar cu sânge

Colonii de tulpină Rhodococcus equi cultivate

aerob pe agar din sânge bovin la 37oC, 24 de ore
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Detaliul coloniilor subțiri, semi-fluide şi roz

Colonii subțiri, semi-fluide și roz de tulpină

Rhodococcus equi cultivate aerob pe agar de
lactoză purpurie timp de 24 de ore la 37oC.
Caractere biochimice

Catalaza (+)
Hemoliză redusă (CAMP)
Neproteolitic

Test CAMP al Rhodococcus equi (linia

verticală) cu Staphylococcus aureus (linia
orizontală) pe agar de sânge bovin.
Rețineți că Rhodococcus equi nu produce
hemoliză în absența stafilococilor
Conduita diagnosticului etiologic
Bronhopneumonia enzootică a mânjilor - secreţii pulmonare purulente
(morfologic dimorfism)
 Genul Actinomyces
Taxonomie Diviziune - Actinobacteria
Clasa - Actinobacteria
Ordin - Actinomycetales
Familie - Actinomycetaceae
Gen - Actinomyces
• Genul Actinomyces include aproximativ 40 de specii
• Actinomyces israelii - specia tip
• Actinomyces bovis
• Actinomyces canis
• Actinomyces hordeovulneris
 Morfologie
• germen Gram pozitiv polimorf: în material patologic
(puroi) la microscopie directă (între lamă şi lamelă)
prezintă forme filamentoase, ramificate, fine cu
extremităţile dilatate - tufe actinomicotice (o bună
vizualizare implică metoda de colorare Gram-Weigert);
în culturi apare ca bacil fin (3,0 μm / 0,2 μm), rar
forme filamentoase (coloraţie Gram)
• nesporulaţi, necapsulaţi, neciliaţi, prezintă fimbrii
Condiţii de cultivare - Caractere culturale
• Genul Actinomyces se cultivă pe medii suplimentate cu ser su sânge
• Tip respirator: microaerofil sau anaerob → incubare la 37oC , perioada de
incubare 48 - 96 ore
• Pe mediu lichid → jumătatea superioară a mediului prezintă turbiditate cu
sfere mici pufoase (flocoane), jumătatea inferioară fiind limpede
• Pe mediu solid → colonii mici, albicioase, semitransparente, tip S, cu
extensii tip picior de păianjen, nepigmentate, aspre, (mai netede pentru
Actinomyces bovis, care este mai tolerant la oxigen).
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Coloraţie gram Actinomyces israelii Actinomyces sp cultură pe gel agar-agar

Caractere biochimice

 Reacţii constant pozitive

Fermentarea glucidelor
Proteolitic
 Reacţii constant negative
Indol
Producţie de hidrogen sulfurat H2S
Conduita diagnosticului etiologic

• Principala infecţie produsă este actinomicoza la bovine (Actinomyces bovis)

cu semne clinice evidente
• Germenul are tropism pentru ţesutul osos; probe recoltate din conţinutul
purulent al leziunilor. Trebuie identificate granulele galbene, care pot fi foarte
mici și rare (mai ales atunci când există suprainfecție). Se scurge încet puroiul
de-a lungul peretelui tubului sau al unei cutii Petri în timp ce se vizualizează
sub o lupă. Examinările trebuie să se refere la aceste granule zdrobite între
lamă şi lamelă: examinare microscopică și cultură.
• Examen microscopic direct pentru evidenţierea tufelor actinomicotice
(filamente ramificate, dispuse radiar, asemănătoare unei flori)
 Genul Trueperella
Taxonomie Diviziune - Actinobacteria
Clasa - Actinobacteria
Ordin - Actinomycetales
Familie - Actinomycetaceae
Gen - Trueperella
• Genul Trueperella include aproximativ 5 de specii
• Trueperella abortisuis
• Trueperella bernardiae
• Trueperella bialowiezensis
• Trueperella bonasi
• Trueperella pyogenes - cea mai studiată specie, numită şi Bacilul lui Grips
sau piobacil.
 Morfologie
• cocobacili sau bacili scurţi (0,5 μm/2 μm)
imobili, Gram pozitiv
• aspect de halteră (ambele extremităţi dilatate)
sau de măciucă (dilataţie la o extremitate)
• apar singuri, în perechi sau în lanţuri scurte
• nesporulaţi, necapsulaţi, neciliaţi
Condiţii de cultivare - Caractere culturale
• Genul Trueperella se cultivă pe medii suplimentate cu ser sau sânge
• Tip respirator: facultativ aero-anaerob (unele tulpini preferă atmosferă
îmbogăţită în CO2) → incubare la 37oC , perioada de incubare 24 - 48 ore
• Pe mediu lichid → turbiditate moderată, depozit granular uşor
umbreliform
• Pe mediu solid → colonii mici, transparente, tip S, nepigmentate,
(asemănătoare celor produse de streptococi) cu β-hemoliză clară
Condiţii de cultivare - Caractere culturale

Colonii de Trueperella pyogenes, cultivate aerob 48 de ore pe agar de sânge bovin la 37 oC

în prezența de 5% CO2. Se observă β-hemoliza.
Condiţii de cultivare - Caractere culturale
A B

(A) Coloniile de Trueperella pyogenes cultivate aerobic timp de 24 de ore pe agar de sânge
de cal la 37oC în prezență de 5% CO2. Coloniile unice sunt greu vizibile, dar sunt indicate cu
săgeți. (B) Placa după 48 de ore. Este clar vizibilă β-hemoliza în jurul coloniilor individuale.
Caractere biochimice

 Reacţii constant pozitive

Fermentarea glucidelor
Proteolitic
Hemolitic  Reacţii constant negative
Indol
Producţie de hidrogen sulfurat H2S
Catalază
Conduita diagnosticului etiologic

Produce infecţia numită piobaciloză, specia cea mai sensibilă fiind porcul →
abcese în ţesuturile moi (rar la nivel de os), cu diferite localizări.