ANTICORPII

MONOCLONALI

SISTEMUL IMUNITAR

Immunis = scutit Sistemul imunitar = totalitatea proceselor biologice, a organelor, a celulelor, a produsilor celulari care asigura protectia impotriva infectiilor Imunitatea Nespecifica Specifica

ANATOMIA SISTEMULUI IMUNITAR

Amigdale si adenoide Ganglioni limfatici Vase limfatice

Timus
Ganglioni limfatici Splina Placi Peyer Apendice Maduva hematogena

CELULELE SISTEMULUI IMUNITAR

Macrofag PMN eozinofil Maduva Eritrocite PMN bazofil Mastocit

Os Celula stem hematopoetica

Monocit

Megacariocit

Celula stem multipotenta

Celula progenitoare PMN neutrofil mieloida Plachete

Celula progenitoare limfoida Limfocit T Celula dendritica

Celula NK

Limfocit B

ACTIVAREA LB SI PRODUCEREA DE ANTICORPI

Anticorp circulant Antigen

Rec. de Ag specific LB

Antigen

HLA clasa II

Procesarea Ag

HLA clasa II Celula prezentatoare de Ag si Ag procesat sunt expuse

LB Celula prezentatoare de Ag

Limfokine Th activat

Anticorpi Plasmocit

ANTICORPII
Lanturi grele
Lanturi usoare

Paratop

Regiune constanta

ANTICORPII
IgA, IgD, IgE, IgG

IgA

IgM

PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI

Antigen Fuzionarea celulelor HIBRIDOM

Mielom

Plasmocite producatoare de Ac

Testarea clonelor

Cultivarea hibridoamelor

Hibridoamele se separa si se cultiva Mentinerea hibridoamelor in soareci

Clonele dorite se cultiva sau se congeleaza

Anticorpii monoclonali sunt purificati

PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI

1. Antigenul (celule, componente ale membranei celulare, microorganisme, etc.) se injecteaza soarecelui 2. Cand titrul de anticorpi serici a crescut corespunzator, se realizeaza splenectomia si se colecteaza LB 3. Se obtine hibridomul prin fuzionarea LB murine cu celule provenite din mielom 4. Se cultiva hibridoamele si se colecteaza anticorpii

PROBLEME

HAMA = human anti-mouse antibodies

Dupa 10-14 zile Eruptie cutanata (urticarie) Bronhospasm Hipotensiune Soc anafilactic

TEHNICI DE INGINERIE GENETICA

Soareci transgenici (gene pentru Ig umane) Mab himerici =

Regiuni variabile murine Regiuni constante umane Regiuni hipervariabile murine 95% umani

Mab umanizati =

Bacteriofagi/plasmide

APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

Diagnostic
Terapie Cercetare

APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

Diagnostic

Imunohistochimie Imunofluorescenta Radioimunodetectie (RIA)

Medicamente Hormoni Proteine Toxine Droguri

Imunodetectie enzimatica (ELISA)

IMUNOHISTOCHIMIE DIRECTA

IMUNOHISTOCHIMIE INDIRECTA

IMUNOHISTOCHIMIE

IMUNOHISTOCHIMIE

IMUNOFLUORESCENTA

IMUNOFLUORESCENTA

APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

Terapie

Infliximab TNF Abciximab GpIIb/IIIa Omalizumab IgE Rituximab CD20 Alemtuzumab CD52 Trastuzumab HER2 Bevacizumab VEGF

IMUNOTERAPIE
Radioizotop Anticorp Herceptin Factor de crestere Herceptin blocheaza receptorul

Antigen

Celula tumorala mamara Distrugerea celulei tumorale

Cresterea se opreste

APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

Cercetare

Imunohistochimie Identificarea unor molecule Purificarea unor structuri