ANTICORPII

MONOCLONALI
SISTEMUL IMUNITAR
Immunis = scutit
Sistemul imunitar = totalitatea proceselor
biologice, a organelor, a celulelor, a
produsilor celulari care asigura protectia
impotriva infectiilor
Imunitatea
Nespecifica
Specifica
ANATOMIA SISTEMULUI
IMUNITAR
Amigdale si adenoide
Ganglioni limfatici
Vase limfatice
Timus
Ganglioni limfatici
Splina
Placi Peyer
Apendice
Maduva hematogena
CELULELE SISTEMULUI
IMUNITAR
Celula stem
multipotenta
Celula stem
hematopoetica
Plachete
Macrofag
Eritrocite
PMN eozinofil
PMN neutrofil
Megacariocit
Mastocit
PMN bazofil
Limfocit T
Celula NK
Celula dendritica
Limfocit B
Celula progenitoare limfoida
Celula
progenitoare
mieloida
Monocit
Maduva
Os
ACTIVAREA LB SI
PRODUCEREA DE ANTICORPI
Celula prezentatoare de Ag
Antigen
Anticorp circulant
Procesarea
Ag
HLA clasa II
Antigen
Th activat
HLA clasa II
si Ag
procesat sunt
expuse
Anticorpi
Plasmocit
Celula
prezentatoare de
Ag
Rec. de Ag
specific LB
LB
Limfokine
ANTICORPII
Lanturi grele
Paratop
Regiune constanta
Lanturi usoare
ANTICORPII
IgA, IgD, IgE, IgG
IgA
IgM
PRODUCEREA ANTICORPILOR
MONOCLONALI
Plasmocite
producatoare de Ac
Antigen
Fuzionarea
celulelor
HIBRIDOM
Mielom
Anticorpii monoclonali
sunt purificati
Clonele
dorite se
cultiva sau
se
congeleaza
Testarea clonelor
Hibridoamele se separa
si se cultiva
Cultivarea
hibridoamelor
Mentinerea
hibridoamelor in
soareci
PRODUCEREA ANTICORPILOR
MONOCLONALI
1. Antigenul (celule, componente ale
membranei celulare, microorganisme, etc.)
se injecteaza soarecelui
2. Cand titrul de anticorpi serici a crescut
corespunzator, se realizeaza splenectomia si
se colecteaza LB
3. Se obtine hibridomul prin fuzionarea LB
murine cu celule provenite din mielom
4. Se cultiva hibridoamele si se colecteaza
anticorpii
PROBLEME

HAMA = human anti-mouse antibodies
Dupa 10-14 zile
Eruptie cutanata (urticarie)
Bronhospasm
Hipotensiune
Soc anafilactic

TEHNICI DE INGINERIE
GENETICA
Soareci transgenici (gene pentru Ig umane)
Mab himerici =
Regiuni variabile murine
Regiuni constante umane
Mab umanizati =
Regiuni hipervariabile murine
95% umani
Bacteriofagi/plasmide


APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI
Diagnostic

Terapie

Cercetare
APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Diagnostic

Imunohistochimie
Imunofluorescenta
Radioimunodetectie (RIA)
Medicamente
Hormoni
Proteine
Toxine
Droguri
Imunodetectie enzimatica (ELISA)

IMUNOHISTOCHIMIE DIRECTA
IMUNOHISTOCHIMIE
INDIRECTA
IMUNOHISTOCHIMIE
IMUNOHISTOCHIMIE
IMUNOFLUORESCENTA
IMUNOFLUORESCENTA
APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Terapie

Infliximab TNF
Abciximab GpIIb/IIIa
Omalizumab IgE
Rituximab CD20
Alemtuzumab CD52
Trastuzumab HER2
Bevacizumab VEGF

IMUNOTERAPIE
Anticorp
Celula
tumorala
mamara
Factor de
crestere
Herceptin
blocheaza
receptorul
Cresterea se opreste
Radioizotop
Antigen
Distrugerea celulei
tumorale
Herceptin
APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Cercetare

Imunohistochimie
Identificarea unor molecule
Purificarea unor structuri