Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
SERICE
Holoproteine:
Scleroproteine (fibrilare): colagen, keratina, elastina.
Sferoproteine (globulare): globuline, albumine.
Heteroproteine:
glicoproteine
lipoproteine
nucleoproteine
I. GENERALITATI
RASPUNSUL DE FAZA ACUTA
Macrofage, neutrofile
Produc
Ficat Proteine
I. GENERALITATI
RASPUNSUL DE FAZA ACUTA
Proteinele pozitive de faza acuta
• 1-antitripsina
• 1-glicoproteina acida
• Componente ale complementului
• Feritina
• 2-macroglobulina
• Haptoglobina
• Hepcidina
• Fibrinogenul
• Proteina C reactiva
• Imunoglobulinele
I. GENERALITATI
RASPUNSUL DE FAZA ACUTA
Proteinele negative de faza acuta
• Albumina
• Prealbumina
• Transferina
• Antitrombina
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
1.DETERMINAREA PROTEINELOR SERICE TOTALE
reala
- aport alimentar crescut (suplimente proteice, diete hiperproteice)
- boli hematologice (boli hematologice cu sinteza anormal crescuta de proteine)
aparenta
– sindroame de hemoconcentrație (în deshidratari).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
1.DETERMINAREA PROTEINELOR SERICE TOTALE
reala
- aport scazut (malnutritie, vegetarieni)
- scăderea absorbției intestinale (boli inflamatorii intestinale)
- scăderea sintezei (insuficienta hepatica)
- pierderi proteice (sd nefrotic, enteropatii, arsuri pe suprafete intinse);
- sechestrare proteică (ocluzia intestinala, ascita);
- hipercatabolism proteic (hipertiroidism sever, tuberculoza, neoplazii).
aparenta
- sindoame de hemodiluție (în hiperhidratare).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Metoda calitativa de separare a proteinelor serice, pe baza mobilităţii în câmp
electric (se efectueaza si pentru proteinele din urina, saliva, LCR).
Viteza de migrare a proteinelor - invers proportionala cu greutatea moleculara,
- direct proportionala cu sarcina electrică.
Ordinea fracţiunilor, de la anod la catod: albumine, alfa1, alfa2, beta, gama globuline.
Mediile de migrare:
Indicatii:
- inflamaţii acute, cronice;
- afectiuni hematologice;
- afectiuni hepatice;
- boli autoimune;
- afectiuni renale/intestinale
cu pierdere proteine.
http://flickrhivemind.net/Tags/electrophoresis/Interesting
Metoda de lucru
Prealbumina
Albumina
Alfa1-antitripsina
Alfa1-glicoproteina
acidă
Alfa-fetoproteina
Protrombina
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA ALBUMINE
Prealbumina
thyroid binding prealbumin (TBPA),
tiretina, transtiretina;
T ½ (1,9 zile) vs albumina (21 zile) – indicator mai bun al afectarii acute a funcţiei de
sinteza hepatica.
Scade:
- deficit de sinteza
- compensator cresterii sintezei proteinelor de faza acuta (inflamaţii) -
proteină negativă de fază acută
- afectiuni hepatice cu insuficienta hepatica
- pierdere de proteine (afectiuni renale/intestinale)
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA ALBUMINE
Albumina
Valori normale serice: 3,5-5 g/dl.
sintetizata hepatic, reprezinta 60% din proteinele serice;
CID (Coagulare Intravasculara Diseminata) = exacerbarea cascadei coagularii la nivel vascular sistemic; apare in
infectiile severe, complicatiile obstetricale, hemoliza intravasculara, traumatisme severe, hipoxii severe etc.
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA ALFA1 GLOBULINE
Alfa 1-glicoproteina acidã
glicoproteinã (proporţie peptidicã =58%)
sinteza hepatica.
Valori crescute:
- inflamatii acute/inflamatii cronice acutizate
(proteina pozitiva de faza acuta)
Valori scazute:
- deficit de aport (malnutritie)
- deficit de sinteza (insuficienta hepatica)
- pierdere proteine (sindrom nefrotic)
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Haptoglobina
Ceruloplasmina
Alfa2 macroglobulina
Colinesteraza
Alfa2 antitrombina
Plasminogen
Transcortina
Eritropoietina
Componentele C1, C4,
C6,C9 ale complementului
Lipoproteine
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA ALFA 2 GLOBULINE
Haptoglobina(Hp)
Glicoproteina sintezata hepatic
Rol: legarea Hb libere
Valori crescute:
- inflamatii acute/inflamatii cronice acutizate
(proteina pozitiva de faza acuta)
Valori scazute:
- deficit genetic (ahaptoglobulinemia congenitala)
- deficit dobandit
- sinteza scazuta (insuficienta hepatica)
- consum crescut (hemoliza intravasculara)
Sinteza hepatica.
Rol:
-transporta 70% din cuprul (Cu) seric
total.
- feroxidaza (oxideaza Fe2+ => Fe3+)
reactie ce precede incorporarea Fe
in apotransferine.
Valori crescute:
- inflamatii acute/inflamatii cronice acutizate - proteina pozitiva de faza acuta.
- alterarea excretiei cuprului, ca urmare a colestazei (Cu se elimina 80% pe cale biliara) –
sindroame colestatice.
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA ALFA 2 GLOBULINE
Ceruloplasmina
Valori scazute:
Sinteza hepatica
Valori crescute:
- inflamatii acute/inflamatii cronice acutizate (proteina pozitiva de faza acuta) .
- sindromul nefrotic (greutate moleculara mare si nu se pierde la nivel renal).
Valori scazute:
- insuficienta hepatica
FIBROMAX
Metoda de investigare
noninvaziva a functiei hepatice
Algoritm:
- markeri biochimici serici: alfa-2macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteina A1,
bilirubina totala, GGT, ALT, AST, glicemie bazala, colesterol, trigliceride
- varsta, sexul, greutatea si inaltimea
Cupride 5 teste:
FibroTest - gradul fibrozei (F0-F4).
ActiTest - gradul de activitate necro-inflamatorie (A0-A3).
SteatoTest - steatoza hepatica (S0 -S3).
NashTest - prezenta steatohepatitei non-alcoolice (N0-N2)
AshTest - gradul afectarii hepatice, la pacientii cu un consum excesiv de etanol (H0-H3).
http://www.lab21.eu/healthcare/fibromax.php
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Beta2 microglobulina
Transferina
Lizozim
Beta-lipoproteinele
Complement- C3
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA BETA GLOBULINE
Beta2 microglobulina
Sintetizata de limfocite.
Rol:
- Fixata de membranele celulare;
- Formeaza lantul scurt al HLA tip I-
prezent in membrana tuturor celulelor nucleate.
Valori crescute:
- in toate afectiunile cu proliferare limfocitara:
(ex: boli hematologice, boli autoimune);
Valori scazute:
- in toate afectiunile cu distrugere celulara:
(ex: infectia HIV/SIDA, neoplazii).
2. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA BETA GLOBULINE
Transferina
Glicoproteina (siderofilina, beta1 globulina)
Valori normale=200-400 mg/dl;
Sinteza hepatica
Rol: proteina ce transporta Fe la tesuturi
Valori crescute:
- rata de sinteza e invers proportionala cu depozitele de fier (ex: anemie
feripriva)
Valori scazute:
- sinteza supresata in cursul proceselor de faza acuta (inflamatii acute/cronice),
- deficit de sinteza (afectiuni hepatice cu insuficienta hepatica)
- cresterea saturatiei cu fier a feritinei determina scaderea sintezei
transferinei (hemocromatoza)
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Fibrinogen
Proteina C reactiva
Imunoglobuline
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Rol : in hemostaza
(factorul I al coagularii)
Valori crescute:
- inflamatii acute/cronice acutizate, neoplazii (proteina pozitiva de faza acuta),
- raspuns compensator la pierderea de proteine - pierderea prin urina a albuminei
(sindromul nefrotic ).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA GAMA GLOBULINE
Fibrinogenul
Valori scazute:
deficit dobandit:
- deficit de aport (malnutritie),
- deficit de sinteza (insuficienta hepatica),
- exces de fibrinoliza (CID)
deficit congenital – deficit de sinteza (afibrinogenemia congenitala)
CID (Coagulare Diseminata Intravasculara )=exacerbarea cascadei coagularii la nivel sistemic; apare in infectiile severe,
complicatiile obstetricale, hemoliza intravasculara, colagenoze, traumatisme severe.
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
ZONA GAMA GLOBULINE
Rol
- clearance-ul detritusurilor celulare
- activarea complementului pe calea clasica
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Valori crescute:
-
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
2. ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE
Imunoglobulinele
Sinteza in limfocite.
Structura:
-2 lanturi usoare (L),
-2 lanturi grele (H).
- legate prin punti disulfidice.
Indicatii:
Principiu:
- marcarea diferita a fractiunilor de Ig si a
lanturilor usoare ale Ig obtinute prin
migrare in campul electroforetic
Imunoelectroforeza
- anticoprii sunt produsi de sistemul imun ca raspuns la macromoleculele straine
organismului
- fiecare anticorp se leaga specific la un epitop specific al unui antigen
- aceasta caracteristica ne permite utilizarea anticorpilor pentru detectie si analiza
cantitativa a proteinelor specifice dintr-un complex
- atunci cand un potential electric este aplicat pentru a studia reactia Ac-Ag procesul
poarta denumirea de IMUNOELECTROFOREZA
- Ac-ii sunt separati electroforetic si Ag-ele difuzeaza unele catre altele rezultand
arcuri de precipitare acolo unde se formeaza complexe Ag-Ac => imunoelectroforeza
- metoda este utilizata pentru detectia de Ac
- utilizata preponderent pentru detectia serica a IgG, IgM si IgA
Imunoelectroforeza
Component monoclonal
Component policlonal
- SP = marcarea tuturor claselor de Ig
- Se constata benzi mai largi in
- G, A, M = reprezinta lanturile grele
zonele de migrare a tuturor
ale proteinelor Ig G, Ig A, IgM
claselor de Ig
- κ, λ = lanturile usoare ale Ig
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
3. ELECTROFOREZA PROTEINELOR CU IMUNOFIXARE
Rol:
- imunitatea mucoaselor
(se secreta 3-5 g/zi in intestin).
- in secretiile digestive, genito-urinare, lacrimale, saliva, lapte matern.
Valori crescute:
- sinteza crescuta de proteine anormale Ig A-like (mielom IgA);
- afectiuni intestinale cu lezarea mucoasei tubului digestiv;
- lezarea mucoasei cu patrunderea agentilor patogeni prin mucoasa
si cresterea secundara a Ig A (alcoolism).
Valori scazute:
- deficit congenital de Ig A (in cadrul agamaglobulinemiei).
- scaderea numarului de limfocite si sinteza cu defect de Ig A (ataxia
teleangiectazia- afectiune genetica caracterizata prin telangiectazii, ataxie si ale tulburari neurologice).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
IMUNOGLOBULINELE
Imunoglobulina M
Rol:
- primii anticorpi- apar in cursul unei infectii.
- marker inflamatie acuta.
Formeaza polimeri– de aceea nu traverseaza bariera placentara.
Valori crescute:
- infectii acute/cronice acutizate,
- status proinflamator cu eliberare de citokine cu rol de cofactor in sinteza de
imunoglobuline, inclusiv Ig M (boli autoimune).
- afectiuni hematologice cu sinteza crescuta de Ig M-like (macroglobulinemia
Waldenstrom).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
IMUNOGLOBULINELE
Imunoglobulina M
Valori scazute:
Valori crescute:
- infectii acute/cronice acutizate,
- status proinflamator cu eliberare de citokine cu rol de cofactor in
sinteza de imunoglobuline (boli autoimune).
Valori scazute:
- deficit congenital de Ig D (agamaglobulinemie),
- imaturitatea sistemului imun cu deficit de sinteza de
imunoglobuline, inclusiv Ig D (nou nascut).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
IMUNOGLOBULINELE
Imunoglobulina E
Valori crescute:
- boli atopice (astm bronsic alergic, eczema atopica),
- parazitoze (giardioza, echinoccocoza, teniaza, trichineloza, malarie).
Valori scazute:
- deficit congenital de Ig E (agamaglobulinemie).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
IMUNOGLOBULINELE
Imunoglobulina G
Valori crescute:
- infectii acute/cronice acutizate,
- status proinflamator cu eliberare de citokine cu rol de cofactor in
sinteza de imunoglobuline, inclusiv Ig G (boli autoimune).
- afectiuni hematologice cu sinteza crescuta de proteine anormale Ig G- like.
Valori scazute:
- deficit congenital (agamaglobulinemie),
- pierdere urinara de proteine (sindrom nefrotic).
II. METODE DE INVESTIGARE A PROTEINELOR
5. ELECTROFOREZA PROTEINELOR URINARE
combina electroforeza cu imunoprecipitarea, folosind antiseruri monospecifice
fata de lanturile grele si usoare ale Ig;
Identifica prezenta lanturile usoare monoclonale in urina (proteinurie Bence
Jones).
10 ml din urina/24h.
Indicatii:
- peak gama la electroforeza proteinelor serice;
- identificare proteine urinare Bence Jones (mielom multiplu, macroglobulinemia
Waldenstrom).
IV. MODELE PROTEICE
Alte teste:
PT - normale
Fibrinogenul crescut
Proteina C reactiva crescuta
VSH crescut
IV. MODELE PROTEICE
Inflamatia cronica – modificari electroforetice
Inflamatie de lunga durata (saptamani, luni), ce presupune: inflamatie activa, distructie
tisulara si reparare conjunctiva.
Alte teste:
PT N sau ușor crescute.
Fibrinogenul crescut
Proteinei C reactiva creste (necaracteristic)
VSH crescut
IV. MODELE PROTEICE
Sindrom nefrotic – modificari electroforetice
- pierdere proteine > 3,5 g/24 ore
- sindrom nefrotic pur – se pierd albumine
- sindrom nefrotic impur – se pierd albumine si globuline
Alte teste:
PT scăzute
colesterol crescut (scaderea albuminelor determina cresterea sintezei de globuline de
catre hepatocite, inclusiv lipoproteine => lipidele plasmatice si colesterolul, crescute in
sdr. nefrotic pur).
IV. MODELE PROTEICE
PT normale.
beta globulinele –crescute – cresterea IgM (pot migra şi în zona alfa 2 şi în beta, eventual
asociate cu cresterea IgA în hepatitele alcoolice).
gama globuline crescute (policlonal).
PT normale
beta globuline crescute
gama globuline crescute
PT scăzute
albumine scăzute
beta globuline – crescute
gama globuline – crescute (policlonal– IgG, IgA, IgM)
Ficatul nu mai poate cataboliza Ig imbatranite ; in plus, prin prezenta sunturilor porto-cave,
Ig nu mai efectueaza pasajul hepatic => Ig cresc (hipergamaglobulinemie).