LUCRAREA PRACTICA NR.

3
Numrtoarea leucocitelor.Variaii fiziologice i patologice ale numrului
de leucocite. Principiul metodei, descrierea camerei de numrat BurkerTurk, variaii fiziologice i patologice ale numrului de leucocite
importana, buletine de analiz-interpretare
DETERMINAREA NUMARULUI DE LEUCOCITE
Sngele recoltat in pipete speciale, diluat cu un lichid hemolizant ce pstreaz intacte
leucocitele, este introdus intr-un hemocitometru, unde acestea se numr ntr-un volum precis
determinat.
Leucocitele se recunosc dup structura lor celulara (nucleu, citoplasm), deosebindu-se
de artefacte (care apar ca structuri amorfe) i de resturile eritrocitare.
VALORI NORMALE
L/mm3 = 4000-10.000 leucocite/mm3
VARIAII ALE NUMRULUI DE LEUCOCITE
1. Fiziologice
a. La nou-nscut se constat o leucocitoz de 20.000-30.000/mm 3. Dup 4-5 zile, numrul
scade, ns n primul an de via valoarea fiziologic se menine la 10.000-12.000/mm3.
b. n ultimile 2 luni de sarcin, la gravide se observ o cretere a numrului de leucocite,
chiar din ziua naterii i nc o sptmn, numrul leucocitelor mamei ajungnd la
20000-30000/mm3.
c. n timpul menstruaiei, variaiile numrului de leucocite sunt uoare, fie n plus, fie n
minus.
d. Numrul de leucocite crete n emoii, efort fizic, putnd ajunge la 15000-20000/mm 3, dar
la o or dupa efort numrul leucocitelor revine la normal.
e. La 3-4 ore dup ingestia de alimente, exist de asemenea o cretere a numrului de
leucocite, care poate sa ajung la 10.000 20.000/mm 3. La unele persoane sensibilizate
fa de diferite alimente, mai ales pentru lapte i care prezinta o intoleran pentru
alimentul respectiv, se constat o leucopenie, sub 3000/mm3.
f. Unele persoane pot prezenta o leucopenie permanent de 2000 3000 elemente/mm 3, fr
s aib nici o manifestare a patologic. Unele leucopenii sunt congenitale i rmn
neschimabate toat viat, altele sunt trectoare, dureaza cteva luni sau ani, apoi dispar
secundar.
2. Patologice
a. Leucocitoze reprezint creteri ale numrului de leucocite peste 10000/mm 3. Pot fi:
creteri adaptative, reversibile cauzate mai ales de infecii cu coci (pneumococ,
streptococ, meningococ etc.) sau provocate de distrugerea esuturilor proprii

(traumatisme, infarct miocardic) i creteri neadaptative, aprute n leucemii,numrul

leucocitelor putnd depi 100.000/mm3, iar n circulaie sunt aruncate elemente tinere ce
nu-i pot ndeplini rolul fagocitar,denumite blasti.
Creteri ale numrului de leucococite peste 30000/mm 3 sunt cunoscute ca i reacii
leucemoide, deosebindu-se de leucemie prin absena celulelor imature n sngele periferic i
revenirea numrului la normal dup ncetarea aciunii factorului declanator.
b. Leucopenii reprezint scderea numrului de leucocite sub 4000/mm 3. Pot s apar n:
unele infecii microbiene (febra tifoid, febre paratifoide, tularemia, bruceloza), infecii
virale (gripa, rujeola, rubeola, hepatita), parazitoze (malarie), infecii grave de orice
natur (septicemii), dup iradieri masive cu raze X etc.
B. Formula leucocitar
METOD DE DETERMINARE
1. Executarea frotiului
a. Principiul metodei Se ntinde o pictur de snge proaspt recoltat pe o lam, n strat
subire, n aa fel nct elementele s nu fie suprapuse.
b. Materiale necesare:
- lame curate, degresate
- microscop optic, ulei de cedru
- snge capilar.
c. Tehnica executrii frotiului de snge
- Se recolteaz o pictur de snge proaspt pe marginea unei lame lefuite i cu
un col rupt pentru ca latura sa s fie mai mic dect lama pe care se va executa frotiul .
- Se aplic apoi pe o lam de sticl, aezat pe masa de lucru, ntr-un unghi de
aproximativ 30o, astfel nct pictura de snge s se ntind prin capilaritate la marginea de
contact dintre cele dou lame;
- Se imprim lamei lefuite o micare de translaie uoar, ceea ce va permite
sngelui s se ntind ntr-un strat subire;
- Imediat dup ntinderea frotiului, lama se agit pentru uscarea rapid a acestuia.
2. Colorarea panoptic a frotiului de snge
Reactivi i materiale necesare
- Soluia May-Grnwald cu urmtoarea formul: eozinat de albastru de metilen
1g, glicerin neutr 50ml., alcool metilic 100ml.
- Soluie Giemsa coninnd: eozinat de azur de metilen 3g, azur de metilen
0,8g, glicerin neutr 250ml, alcool metilic 200ml.
- Apa distilat neutr sau ap tamponat.
- Lame de sticl.
- Pipete Pasteur, pipete gradate.
- Ceas.
Etapele colorrii
Fixarea frotiul se acoper cu un numr cunoscut de picturi din soluia MayGrnwald i se las 2-3 minute;
Colorarea se face n doi timpi: timpul 1 se adaug peste soluia MayGrnwald un numr egal de picturi de ap distilat neutr sau ap tamponat, se
omogenizeaz i se las astfel 2 minute; timpul 2 se ndeprteaz soluia de pe lam fr s
se spele, se acoper lama cu soluie Giemsa diluat n proporie de 1-2 picturi soluie
Giemsa concentrat la 1ml ap distilat neutr sau ap tamponat, dup care se las n repaus

20 de minute , iar ulterior lama se spal sub jet puternic de ap i se las pe stativ pentru
uscare.
3. Calcularea formulei leucocitare
Formula leucocitar reprezint exprimarea procentual a diferitelor categorii de
leucocite i se calculeaz dup numrarea a cel puin 200 de elemente pe frotiul de snge.
Tehnica de lucru Pe frotiu se pune o pictura de ulei de cedru i se fixeaz poziia
microscopului, folosind obiectivul cu imersie, diafragmul deschis i condensatorul sus.
Se parcurge frotiul deplasnd preparatul ntr-un singur sens i n zig-zag pentru a
surprinde att elementele marginale ct i pe cele din mijlocul lamei (limfocitele au tendina
de a se grupa spre centru, iar neutrofilele i monocitele se disperseaz spre margine i n
franjuri). Pe msura ce se ntlnesc leucocitele, ele se noteaz pe categorii ntr-un tabel, n
grupuri de cte 5 elemente, pentru diversele tipuri celulare folosindu-se notaia:
N = neutrofile nesegmentate
S = neutrofile segmentate
E = eozinofile
B = bazofile
L = limfocite
M = monocite
P = plasmocite
1

10

N
S
E
B
L
M
P
Dup numrarea a 200 de elemente se face procentajul fiecrei clase de elemente.
Numrul absolut a diferitelor tipuri de leucocite exprim numrul de tip de leucocit
coninut ntr-un mm3 de snge. Se calculeaz printr-o regul de trei simpl, cunoscnd
distribuia procentual i numrul absolut total de leucocite/mm3.
Exemplu:
numrul de leucocite este de 6600/mm3
limfocite 22%
deci, numrul absolut de limfocite este: (6600 x 22)/100 = 1452 limfocite/mm3
VALORI NORMALE ALE FORMULEI LEUCOCITARE
Neutrofile nesegmentate
Neutrofile segmentate
Eozinofile
Bazofile
Limfocite
Monocite

0 - 4%
50 - 65%
1 - 4%
0 - 1%
20 - 40%
4 - 8%

Variaiile cantitative ale numrului de leucocite se nsoesc de modificri n formula

leucocitar.

1. Leucocitoz cu neutrofilie
infecii localizate sau generalizate;
acutizri ale bolilor cronice;
intoxicaii endogene sau exogene;
LGC (leucemia granulocitar cronic) etc.
2. Leucopenie cu neutropenie
n unele infecii bacteriene (febra tifoid, febre paratifoide);
infecii virale (grip, rujeol, rubeol);
colagenoza;
afeciuni hematopoetice cu hipoplazie medular;
agranulocitoz;
boli autoimune citotoxice-citolitice etc.
3. Leucopenie cu limfopenie
infecii supraacute;
boala Hodgkin;
dup tratament cu cortizon sau citostatice imunosupresive etc.
4. Leucocitoz cu limfocitoz
debutul TBC;
alte boli infecioase;
LLC (leucemie limfatic cronic) etc.
5. Leucocitoz cu eozinofilie
stri imunoalergice;
parazitoze;
sindrom Lfler; boal Hodgkin;
LGC cu eozinofilie etc.
6. Leucocitoz cu bazofilie
Malarie;
intoxicaie cu plumb;
tumori maligne;
LGC etc.
7. Monocitoz
boli infecioase (mononucleoza infecioas, febra tifoid);
parazitoze (malaria, trepanozomiaza);
leucemie mielomonocitar;
boala Hodgkin etc.