Metabolismul amoniacului

1. Ci de formare a amoniacului n celul i n organism

2. Mecanisme de eliminare a NH3 - Rolul acidului glutamic n metabolismul aminoacizilor i al NH3

- Metabolismul glutaminei
- Ciclul ureei - Metabolismul creatinei i creatininei

dezaminarea aminoacizilor
N

NH2 N
HN

O N N Guanina N H

dezaminarea nucleotidelor purinice DEZAMINAREA unor compusi biologic activi dezaminarea nucleotidelor pirimidinice Formarea amoniacului din amide glutamin

N Adenina

N H

H2 N

NH2 N

N H

Citozina (2-oxi-4-amino-pirimidina)

NH3
0,29 mg% n sngele circulant
Produs de bacteriile intestinale

asparagin

din proteine alimentare

din ureea care ajunge n tractul gastro-intestinal

=> NH3 + CO2

Mecanisme de eliminare a NH3

1. NH3 se poate elimina prin intermediul unor produi netoxici, cum este cazul srurilor de amoniu - petii vieuitoare amoniotelice - psrile vieuitoare uricotelice (acid uric) - omul ureotelice (uree)

2. NH3 se poate fixa pe diferii aminoacizi => compui netoxici: - acid glutamic => glutamin - acid aspartic => asparagin - arginin

- alanin

3. NH3 se poate depozita sub forma creatinei i a creatininei

(o alt schem)

Creatina Creatinina
4

ROLUL CENTRAL AL ACIDULUI GLUTAMIC N METABOLISMUL AMINOACIZILOR

Este colector (acceptor) universal al gruprilor AMINO

Poate prelua direct i indirect gruparea amino de la majoritatea

aminoacizilor Poate regenera prin dezaminare oxidativ acidul -ceto-glutaric

care devine apt s accepte gruparea amino

AMINOACID TRANSAMINAZE -CETO-GLUTARIC NADH2

NH3

GLUTAMAT-DEHIDROGENAZA

CETOACID

ACID GLUTAMIC NH3 GLUTAMINA

NAD+ +

H2O

COOH CH2 CH2 O COOH Acid cetoglutaric

COOH CH2 CH2 H2N CH COOH Acid glutamic
O

n esuturi: aminare direct

COOH
(NADH + H+) Glutamat-DH + NADPH + H

NH3

CH2 CH2 HC NH2 COOH Acid glutamic

(NAD +) NADP+ + H2O

FICAT

NH3

ATP

Glutamin- C NH 2 sintetaza CH 2

CH2 H2N CH COOH Glutamina

ADP

Pi

n FICAT:

C NH 2 CH2 CH2 CH COOH Glutamina

COOH

H2O

GLUTAMINAZA H2N

CH2 CH2 CH COOH Acid glutamic

6

NH3

Ciclul ureei

H2N

METABOLISMUL GLUTAMINEI
TESUTURI NH3 Singe ADP + Pi RINICHI Glutamina + H2O Glutamina FICAT Acid glutamic +ATP Glutamin sintetaza Singe

Glutamina

H2O

Acid glutamic

NH3 NH3 urinar

NH3 FICAT

Acid glutamic

Acest circuit NU are loc i n esutul muscular!

UREE

Urina

Ciclul ureei

METABOLISMUL GLUTAMINEI Glutamina se formeaz n: ficat mucoasa intestinal rinichi creier nu se formeaz n muchi !!

Reacia are loc prin fixarea direct a amoniacului sub aciunea glutaminsintetazei din mitocondrie i cu aport de ATP

Glutamina reprezint transportorul esenial de grupri NH2 de la esuturile periferice (cu excepia muchiului) la FICAT;

METABOLISMUL GLUTAMINEI Glutamina ndeplinete roluri diverse, n funcie de esut: acioneaz tampon

La

ficat

glutamina

ca

pentru

meninerea unor concentraii mici NH3 ; are rol de a menine o

concentraie constant a amoniacului, n perioadele dintre

dezaminri i formarea ureei. Deci are rol de detoxifiant i de modulator al concentraiei de amoniac liber. Glutamina

sintetizat n ficat este transportat pe cale venoas la alte

esuturi unde va intra n diferite ci metabolice. amoniacul rezultat prin hidroliza glutaminei este eliminat ca uree la nivel hepatic, i ca sruri de amoniu la nivel renal;
9

METABOLISMUL GLUTAMINEI n mucoasa intestinal glutamina este folosit ca surs de energie deoarece membranele celulare sunt mai permeabile pentru glutamin dect pentru acidul glutamic; La nivel renal glutamina este surs de amoniac, acesta fiind implicat n reglarea echilibrului acido-bazic; ionii de amoniu pot substitui Na+ i K+, ce se elimin renal ca sruri,

economisind astfel fondul ionic al organismului;

Amoniacul produs n celulele tubulare renale prin dezaminarea glutaminei (sau a asparaginei) reprezint

aproximativ 60% din NH3 eliminat la nivel urinar/zi;

Deci originea NH3 urinar nu este sangvin, deoarece sngele conine cantiti foarte mici de NH4+ (maxim 0,3 mg% fr efecte toxice)
10

Ciclul ureei

11

Ciclul ureei (ciclul Krebs Henseleit, 1932) = principala cale de eliminare a azotului aminic (NH3)
Etapa I Formarea carbamoil-fosfatului (activarea acidului carbonic) enzima este carbamoilfosfat sintetaza NAcGlu

COOH CH2 CH2

HC NH

activatori: Mg2+, acidul N-acetil glutamic

se consum 2 ATP are loc n mitocondrii esut hepatic se formeaz din compui anorganici (NH4+ i HCO3-)

C O

CH3

COOH

Reglator allosteric, fr de care carbamoilfosfat-sintetaza nu este activ

Reacia global este:

NH4++ HCO3- + 2 ATP
H2N

O C O

O P OO - + 2ADP + Pi

Carbamoil fosfat

12

Subetapele sunt: - Activarea acidului carbonic

O O

a)

C O-

OH

+ ATP

Activatorii Enzima Mg2+

O-

O C O P OO - + ADP

Fosfocarbonat

-Transferul gruprii NH2

b) NH4+ + Fosfocarbonat
H2N

O C O-

Pi

- Activarea carbamatului
O O

Carbamat

c)
H2N

O C

+
O-

ATP
H2N

C O P OO - + ADP

Carbamoil fosfat
13

Etapa II: Formarea citrulinei

enzima este ornitintranscarbamoilaza (OTC) (transferaz)
Enzimele ciclului ureei sunt strns reglate, activitatea lor crescnd cnd crete aportul de amoniac sau aminoacizi la nivel hepatic (dieta hiperproteic).

are loc n mitocondrie

enzim reglatoare a procesului

NH2 O O C H2N O P OO(CH2)3

+ HC

NH3

OTC

C H2N NH (CH2)3

Pi

COO-

Carbamoil fosfat

Ornitin

Citrulin

HC

NH3

COO-

Citrulina prsete mitocondria iar restul etapelor au loc n citoplasm

14

Etapa III: Formarea acidului arginin succinic reacie de condensare consum de ATP enzima: arginin succinat sintetaza
O C H2N NH (CH2)3 HC NH2 COOH

n CITOSOL

COOH arginin succinat sintetaza + ATP H2N C NH AMP + Pi AMP + PPi H2O Acid L-aspartic (CH2)3 HC NH2 CH2 COOH N CH

H2N

CH CH2 COOH

COOH Citrulin

COOH Acid arginin succinic

15

Etapa IV: Formarea argininei enzima este arginin succinat liaza

Ciclul KREBS

are loc n CITOSOL

COOH N H2N C NH (CH2)3 HC NH2 CH2 COOH CH arginin succinat liaza

COOH CH HC COOH Acid fumaric

H2N

C NH

NH

COOH Acid arginin succinic

(CH2)3 HC NH2

COOH Arginin

16

Reintr n ciclul ureei Etapa V: Formarea ureei enzima este arginaza are loc n CITOSOL
NH2 H2N C NH (CH2)3 HC NH2 + H2O NH2 O C NH2
NH2 NH2 Uree
17

Matrix mitocondrial

NH arginaza

(CH2)3 HC NH2 Ornitin

COOH

COOH Arginin

Uree

NH3 Acid aspartic

n ser: 20 40 mg% n urin: 20-30 g/ 24 ore

Importana procesului de ureogenez COMENTARII

- Procesul de ureogenez este o etap de degradare a proteinelor, ureea fiind considerat produs de catabolism proteic; - Ureogeneza poate fi considerat i proces anabolic, deoarece n urma acestui proces rezult anumite biomoleculearginina, ureea, acidul fumaric

- Este un proces puternic endergonic (consumator de energie), spre

deosebire de celelalte procese catabolice (ale glucidelor i lipidelor) care sunt generatoare de energie curele de slbire sunt bazate pe

diete proteice; - n realitate este un proces amfibolic;

- Este un proces ciclic (ornitina reintr n ciclu);

Reacia global:
H2N

2 NH4+ + HCO3- + 3 ATP + H2O

C H2N

O + 2 ADP + 2 Pi + AMP + PPi

18

Importana procesului de ureogenez COMENTARII -Este legat de ciclul Krebs prin intermediul acidului fumaric;

-Dac transformarea NH3 uree, nu este suficient de rapid, acesta va

bloca transformarea acidul -cetoglutaric din ciclul Krebs => blocarea proceselor oxidative (respiraia tisular) => oxigenare cerebral

insuficient se explic toxicitatea amoniacului (encefalopatie hepatic);

- n snge: 20 40 mg/dL uree, iar prin urin se elimin 20 30 g uree/24h; -Cantitatea de uree format depinde de activitatea enzimelor: carbamoilsintetaza, ornitintranscarbamoilaza (OTC), arginaza. INSUFICIENA HEPATIC = incapacitatea ficatului de a produce ureea =>

NH3 se acumuleaz n snge;

INSUFICIENA RENAL = incapacitatea rinichiului de a excreta ureea.
19

METABOLISMUL CREATINEI I CREATININEI

20

Ciclul ureei Etapa I: TRANSAMIDINARE enzima este arginin glicin transamidinaza are loc n RINICHI
COOH HC COOH H2C NH2 Glicocol HN COOH + HC NH2 arginin glicin transamidinaza NH2

(CH2)3 NH

Ornitina

(CH2)3 NH C NH2 H2C HN C HN Acid guanidil acetic COOH NH2

Arginin

21

Etapa II: METILARE enzima este o metiltransferaz dependent de SAM i FH4 are loc n FICAT
H2C HN C NH Acid guanidil acetic COOH + NH2 CH3 (SAM + FH4) H3C metil transferaza H2C N C NH Acid N-metil guanidil acetic CREATIN COOH NH2

snge

MUCHI
22

Etapa III: FOSFORILARE enzima este creatin fosfokinaza (CPK) are loc n MUCHI
ADP + Pi H2C H3C N C NH Acid N-metil guanidil acetic CREATIN COOH NH2 ATP Creatin fosfokinaz (CPK) H3C H2C N C NH FOSFOCREATIN (rezervor de fosfat macroergic) COOH NH O OH

~P
OH

FOSFOCREATIN

ADP

CREATIN

ATP

Activitatea CPK seric crete n infarctul de miocard Izoenzimele CPK (ex: CPK-MB) au rol diagnostic Reacia este reversibil !! CPK mitocondrial e implicat n formarea fosfocreatinei din ATP mitocondrial CPK citosolic regenereaz ATP din ADP, utiliznd fosfocreatina
23

Etapa IV: Formarea creatininei are loc n MUCHI

O H2C H3C N C NH CREATIN H2O COOH deshidratare intramolecular NH2 H3C H2C N C NH CREATININ C NH

(anhidrid)

PLASMA sangvin: Creatin: 0,2 0,4 mg% Creatinin: 0,6 1,5 mg%

URIN: Creatin: 0,06 0,12 g% Creatinin: 1 2 g%

24

Creatina, fosfocreatina i creatinina - COMENTARII Sistemul creatin fosfocreatin joac un rol esenial n metabolismul energetic normal al esutului muscular, funcionnd ca un sistem reglator pentru concentraia de ATP
CPK

ATP

creatin

fosfocreatin

ADP + Pi

Fosfocreatina este singurul compus cu legturi macroergice pe care organismul l depoziteaz numai n esutul muscular Fosfocreatina constituie n muchi o surs indirect de energie necesar pentru contracia muscular; reprezint forma de depozitare a energiei, pe seama creia se reface ATP consumat n cursul efortului muscular
25

Creatina, fosfocreatina i creatinina - COMENTARII n cursul efortului fizic creatinfosfatul regenereaz ATP printr-o

reacie catalizat de creatinfosfokinaz (CPK = regenerator de ATP

in situ) Regenerarea ATP pe seama CPK este mai rapid dect formarea 70% din rezervele energetice disponibile n cursul efortului Creatina este convertit neenzimatic n creatinin; creatinina nu sa n lanul respirator sau din degradarea glucozei

muscular sunt reprezentate de creatinfosfat

mai poate fi reconvertit la creatinin, fiind excreatat la nivel renal

n condiii fiziologice, creatinina se elimin n mod constant prin

26

urin (aproximativ 2 g/zi)

Creatina, fosfocreatina i creatinina - COMENTARII Fiind produs aproape exclusiv n muchi, cantitatea de

creatinin format este proporional cu masa muscular

Creatinina este constant n urin, fiind un parametru la care ne raportm i pentru alte substane eliminate prin urin

Clearence-ul renal reprezint eficiena cu care rinichiul

epureaz plasma Determinarea clearence-ului de creatinin reprezint o metod simpl de evaluare a funciei renale i musculare = msura n care creatininemia este corelat cu debitul de filtrare

glomerular
Adaptarea posologiei la bolnavii cu insuficien renal se
27

realizeaz n funcie de clearence-ul de creatinin.